PROTENAS

Protena
+

Abundante polmero biolgico

do peso seco das clulas

>50%

Aminocidos

Blocos de construo das protenas Possuem o grupo amina e carboxlico na mesma molcula, ligado ao mesmo carbono, mais um H e a cadeia lateral.

ONS

Polaridade e carga determinam a forma da molcula de protena Em soluo aquosa e slida, grupo amina e carboxlico so eletricamente carregados ons dipolares ou zwitterions (hbrido ou duplo)

Carter anftero

Forma aninica = Soluo alcalina (O-) e forma catinica = soluo cida (NH3+) juntas

A natureza do aminocido e pH da soluo determinam a forma

Ponto isoeltrico

pH ideal de cada aminocido onde as [ ] das formas catinicas e aninicas so iguais

pH 3,0 11,0 aminocidos comuns

Principais aminocidos: (essenciais)

Principais aminocidos: (essenciais)

Principais aminocidos: (essenciais)

ESTRUTURA PRIMRIA DAS PROTENAS

Aminocidos sofrem condensao (desidratao) entre grupo amina e carboxlico formando amida (ligao peptdica)

Dipeptdeo Tripeptdeo Oligopeptdeo

Tamanho

At 50 unidades = polipeptdeos ou poliamida > 50 unidades (100 a 10000) ou peso molecular >5000g (10000 a +1milho) = PROTENA

Estrutura primria
Sequncia

de seus aminocidos
a funo da protena no nosso corpo

Determina

ESTRUTURA SECUNDRIA DAS PROTENAS

Pontes de hidrognio

Ligaes fracas, porm muitas juntas podem gerar fora de atrao significativa

ESTRUTURA SECUNDRIA DAS PROTENAS

Alfa-hlice

Folha pregueada beta enrolamento, cadeia em duas cadeias que correm espiral. Flexvel e paralelamente. Flexvel, elstica. Cada volta mas no elstica. contm 3,6 aminocidos

ESTRUTURA TERCIRIA DAS PROTENAS

Pontes dissulfeto (cistenas - cistina) ligaes covalentes (fortes) Ligaes hidrofbicas empacotamento de cadeias laterais no polares ligaes fracas Pontes de hidrognio diferentes Pontes salinas atraes inicas entre grupos carregados + e dentro da molcula

ESTRUTURA TERCIRIA DAS PROTENAS

ESTRUTURA QUATERNRIA DAS PROTENAS

Quando possui +de 1 cadeia polipeptdica

RESUMO

Propriedades das Protenas

Sofre desnaturao

Quebra das ligaes no covalentes (fracas) Perda da estrutura terciria e secundria

Geralmente as estruturas resultantes coagulam e precipitam Pode ocorrer renaturao em alguns casos

Fatores que provocam desnaturao

Calor movimento dos tomos

lcoois e outros solventes orgnicos mudana no meio aquoso normal cidos e bases alteram cargas +e-

Fatores que provocam desnaturao

ons metlicos Hg, Ag, Pb ligaes fortes Agentes oxidantes e redutores afetam grupo sulfidrila da cistena
Agitao violenta

Reaes fundamentais em protenas

Condensao = ligao peptdica Hidrlise = inverso da ligao peptdica

Onde? intestino delgado Gera energia semelhante aos carboidratos (4kcal/g) Fonte de nitrognio AA so utilizados para sintetizar as protenas necessrias

Classificao de Protenas Quanto composio

Protenas simples por hidrlise liberam apenas aminocidos Protenas conjugadas por hidrlise liberam aminocidos + radical no peptdico (Grupo Prosttico)

ex: metaloprotenas, hemoprotenas, lipoprotenas, glicoprotenas

Classificao de Protenas
Quanto ao n de cadeias polipeptdicas

Protenas monomricas = apenas 1 cadeia Protenas oligomricas = +1 cadeia (estrutura e funo +complexa)

Classificao de Protenas Quanto forma

Protenas Protenas

Fibrosas Globulares

Classificao de Protenas Quanto forma

Protenas Fibrosas Estrutura espacial +simples Molculas compridas e filamentosas Insolveis em gua Ex: colgeno (30% do corpo pele, parte orgnica de ossos e dentes) e Queratina (pelos, unhas, penas, l...)

Classificao de Protenas Quanto forma

Protenas

Globulares Estrutura espacial +complexa Solveis em gua Ex: enzimas, albuminas, globulinas, histonas e protaminas

Classificao de Protenas Quanto funo biolgica

Enzimas altamente especializadas, tem habilidade cataltica Protenas Transportadoras hemoglobina Protenas de Reserva albumina, ferritina Protenas Contrteis actina e miosina

Classificao de Protenas Quanto funo biolgica

Protenas Estruturais queratina, colgeno, elastina Protenas de Defesa Anticorpos Y (antgenos) Resposta imune diferente para cada antgeno. ex: imunoglobulinas
Protenas Reguladoras hormnios

Funo das protenas

Dinmicas transporte, defesa, catlise de reaes, controle do metabolismo e contrao.
Estruturais sustentao estrutural das clulas e tecidos.

Protena e Mineral: Ossos e Dentes

Matriz = colgeno (resistncia e elasticidade) Cristais = hidroxiapatita Ca5(PO4)3OH (dureza e rigidez)

Formados por mineralizao (deposio de minerais no tecido). No caso, a calcificao (Ca e PO4, mas tbm vitaminas A, C e D)

Dentes
Calcificao

Matriz colgena

Ossos
Matriz colgena Matriz colgena Calcificao

SEQUENCIAMENTO DE PROTENAS
Passos: 1. Determinao das propores relativas de amino-cido 2. Identificao dos terminais amino (NH2) e carboxila (COOH) 3. Fragmentao da protena com enzimas 4. Anlise do quebra-cabea

Como executar cada passo?

Passo 1 Determinar propores

Atravs de hidrlise cida (purificao/cromatografia)

Como executar cada passo?

Passo 2 Identificao dos terminais Usar marcadores - Obs: at 10-20 a.a. porque contamina a soluo

Terminal amina (N):

DNP (amarelo) Cloreto de dansil (fluorescente) Degradao de Edman 1) Fenilisocinato 2) Hidrlise

Terminal carboxila (COOH):

Carboxipepidase enzima

Como executar cada passo?

Passo 3 Fragmentao (Clivagem) Uso de enzimas digestivas ou alterao de pH

Tripsina cliva sempre aps

lisina (Lys) - K arginina (Arg) - R

Quimiotripsina quebra sempre aps

Fenilalanina (Phe) F Triptofano (Trp) W Tirosina (Tyr) - Y

Como executar cada passo?

Passo 3 Fragmentao (Clivagem) Uso de enzimas digestivas ou alterao de pH

Brometo de cianognio (CNBr) quebra sempre aps

Metionina (Met) M

pH 2,5 cliva sempre

cido asprtico (Asp) - D Prolina (Pro) - P

Como executar cada passo?

Passo 4 Anlise Inicio: sempre inicia no radical amino

Fim:

sempre termina com o radical carboxila

Exerccios
Sobre sequenciamento de protenas

1) Determine a sequencia de a.a. de uma protena a partir das seguintes informaes: Terminal amino: H Terminal carboxila: S

1 Fragmentao Q V S P S E Q V E R L A H Q W T

2 Fragmentao S E Q W T Q V V E R L A P S H Q

Resultado 1
HQWTQVSE QVERLAPS

2) Um octapeptdeo da hemoglobina foi isolado e tratado com tripsina resultando 1 peptdeo: T1 ( Thr, Glu, Val, Leu, Val, Pro, Trp, Tyr). Quando tratado com quimiotripsina resultou 3 peptdeos: QT1 (Val, Tyr, Leu, Val), QT2 (Trp, Pro) e QT3 (Glu, Thr).
Em pH 2,5 resultou outros 2 peptdeos PH1 (Trp, Glu, Thr) e PH2 (Val, Pro, Val, Tyr, Leu). A reao com DNP deu Leu. E a reao com carboxipepidase deu Glu. Qual a sequncia correta deste peptdeo?

Resultado 2
Leu Val Val Tyr Pro Trp Thr Glu

3) Um pentapeptdeo da hemoglobina foi isolado e tratado com com tripsina resultando 2 peptdeos: T1 (Lys, Ala, His) e T2 (His, Tyr). Quando tratado com quimiotripsina resultou outros 2 peptdeos: QT1 (His) e QT2 (Lys, Tyr, Ala, His). A reao com DNP deu Ala. Qual a sequncia correta deste peptdeo?

Resultado 3
Ala His Lys Tyr His

4) Um octapeptdeo da hemoglobina S foi tratado com DNP Val e com carboxipepidase Lis. Aps 2 fragmentaes as sequncias obtidas foram:

1 fragmentao Tre Pro Val Val His Leu Glu Lys

2 fragmentao Val Val Glu Lys Tre Pro His Leu

Determine a sequncia correta dos aminocidos

Resultado 4
Val His Leu Tre Pro Val Glu Lys

Bibliografia

KAMOUN, P.; LAVOINNE A.; VERNEUIL H. Bioqumica e Biologia Molecular. Rio de janeiro: Guanabara Koogan, 2006. 420p. il. MARZZOCO, A.; TORRES, B. B. Bioqumica bsica. 3ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2007. 386p. il. UCKO, D. A. Qumica para cincias da sade: uma introduo a qumica geral, orgnica e biolgica. Barueri, SP: Manole, 1992. 659p. il.