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Introduo

Bacteriologia
Morfologia
e
Estrutura celular
Bactrias:

Extraordinria variedade de formas;

Diversidade de regimes de vida;

Diferentes formas de metabolizao;

Motilidade;

Produo de enzimas;

Resistncia a diferentes compostos;
Morfologia bacteriana

Herana gentica forma;
So monomrficas;
Pleomrficas condies ambientais e cultivo;
So transparentes in natura, com o mtodo de
colorao:
Gram ou de Ziel-Neelsen
Gram Christian Gram (1884) mtodo que
permitiu classificar as bactrias em dois grupos:
Gram (+) e Gram (-)
Quanto a forma:
Esfricas - cocos

Cilndricas - bacilos

Espiral vrgula;
espirilos ou espiralados


Esfricas - cocos
Quando se dividem podem ficar unidas:

COCOS aos PARES DIPLOCOCOS
CADEIA ESTREPTOCOCOS
CHACHOS ESTAFILOCOCOS
GRUPOS CBICOS - SARCINAS
Cilndricas - bacilos

Diplobacilos: aos pares e Estreptobacilos: Cadeia
Espiral vrgula; espirilos ou espiralados:

Vrgula vibries;
Espirilos saca-rolhas;
Espiralados (forma flexvel) - espiroquetas
Quanto Estrutura Celular
Parede Celular - peptidioglicano
Funes:
- impedir que elas
estourem;
- Manter rigidez celular;
- Na diviso celular, atua
como primer para sua
prpria biossntese septo
que separa as novas clulas;

Estrutura qumica:
Diferena entre Gram (+) e Gram (-):

Gram (-): parede celular
composta por vrias
camadas;
Peptidioglicano < 5 %.
Gram (+): parede celular
composta por vrias
camadas;
Peptidioglicano - 90%.
Outras macromolculas.
Mtodo consiste em:
1. Esfregao bacteriano
2. Aquecimento;
3. Fixao com cristal violeta;
lugol; lcool e fucsina;
4. Ambas absorvem o
cristal violeta + lugol =
cor ROXA;
5. Adiciona lcool =
Gram (+) continuam
coradas e as Gram (-) se
descoram;
6. Cora com Fucsina = Gram (-)
se coram de vermelho
Estruturas externas
parede celular
* CPSULA:

Camada gelatinosa formada por polissacardeos;
Papel de virulncia;
Identificao do microrganismo;
Antgenos para vacinas;
Adeso superfcie corporal
* FLAGELOS:
Movimenta a clula;
> a clula;
Antignicos;
Papel na
patognese;

Formado por uma estrutura
basal, um gancho e um longo
filamento externo membrana;
Composto pela protena
Flagelina.
* FMBRIAS, PLOS ou PLI:
Muitas bactrias tem apndices filamentosos
proticos que no so flagelos = Fmbrias
So menores, mais curtos e mais numerosos que
os flagelos;
No movem a clula;
Outras funes:
*Condutores de material gentico durante a
conjugao;
*Stios de receptores de bacterifagos;
*Estrutura de aderncia s clulas de mamferos ou a
superfcies, etc....
*GLICOCLICE:
Camada limosa;
Secreo de polissacardeos REVESTIMENTO;
FIRME ADERNCIA;
PELE, DENTES, VLVULAS CARDACAS e
CATTERES.
Estruturas internas
parede celular
* Membrana citoplasmtica ou plasmtica:
Separa os meios
externos e internos;
Estrutura bicamada
lipdica;
Composio:
protenas e lipdios.

Funes:

transporte;
seletividade;
Biossntese produo de enzimas;
Duplicao do DNA bacteriano algumas
protenas que fazem parte deste processo
esto localizadas na membrana plasmtica;
Secreo enzimas hidrolticas;
macromolculas; toxinas, etc...;


*Mesossomos:
Mltiplas invaginaes da membrana
Atuam: diviso celular; concentrao de enzimas
transportadoras de eltrons.
Componentes
citoplasmticos
Soluo aquosa limitada pela membrana
plasmtica;
Imersos esto:
Ribossomos (sntese proteica) e nucleide (DNA);
Vacolos gasosos (flutuao);
Grnulos (reserva de material).
Nucleide
Ou DNA bacteriano;

Sem membrana
nuclear;

1 nica molcula de
DNA
Plasmdios
Molculas de
DNA circular <
cromossomos;

Podem
autoduplicar-se.
Esporos bacterianos
Forma de resistncia bacteriana - ocorre quando estas bactrias
esto em ambiente que ameaam a sua sobrevivncia;
O esporo uma camada que protege a bactria e responsvel
pela resistncia e ao ataque dos agentes fsicos e qumicos;
Resistentes a altas temperaturas;
Na fase esporulada, as bactrias no realizam atividade
biossinttica e reduzem sua atividade respiratria. No ocorre a
multiplicao e crescimento bacteriano;
As bactrias podem permanecer vivas na forma de esporos
durante anos, se mantidos a temperaturas usuais e em estado
seco;
Entretanto, assim que o ambiente se torna favorvel, estes
esporos podem voltar a se reproduzir e multiplicar.

Crescimento
Bacteriano
Crescimento
Em microbiologia, o termo crescimento
refere-se a um aumento do nmero de
clulas e no ao aumento das dimenses
celulares.

Crescimento
Influncia dos fatores fsicos
Temperatura
pH
Presso osmtica

Influncia dos fatores qumicos
Carbono
Nitrognio, enxofre, fsforo
Oxignio
Influncia dos fatores fsicos
Temperatura:
Temperatura de crescimento:
Mnima (menor temperatura onde capaz de crescer)
tima (onde apresenta melhor crescimento)
Mxima (mais alta temperatura para crescer)

Classificao primria:
Psicrfilos crescem em temperaturas baixas (-10 20C )
Psicotrficos - temperatura de refrigerao (0 30C)
Mesfilos crescem em temperaturas moderadas (10
50C)
Termfilos crescem em temperaturas altas (40 70C)
Termfilos extremos ou hipertermfilos (tima em > 80C)
Influncia dos fatores fsicos
pH
Ideal para bactrias:
faixa da neutralidade (6,5 7,5) - Neutrfilas

Exceo:
Acidfilas pH 0,5 a 6,0 (com timo entre 2
e 3,5)

Alcalfilos pH acima de 7,0


Influncia dos fatores fsicos
Presso osmtica
Osmose Plasmlise
Conservao dos alimentos com sal ou
acar
Classificao:
Haloflicas extremas
Haloflicas obrigatrias
Haloflicas facultativas
Influncia dos fatores qumicos
Oxignio
Aerbios estritos ou obrigatrios
Anaerbios facultativos
Anaerbios obrigatrios
Enzimas: superxido desmutase, catalase, peroxidase
Anaerbios aerotolerantes
Microaerfilas

Classificao
Aerbios estritos ou obrigatrios
necessitam da presena de O
2
livre para
crescer
Ex. Mycobacterium tuberculosis

Classificao
Anaerbias facultativas crescimento
aerbio e anaerbio.
Ex. Staphylococcus, Escherichia
Classificao
Anaerbias obrigatrias s crescem
na ausncia de O
2
.
Ex. Treponema pallidum

Classificao
Anaerbias aerotolerantes crescem na
ausncia de O
2
, mas toleram sua
presena.
Ex. Streptococcus

Classificao
Microaerfilas crescimento aerbio,
porm, em baixas concentraes de O
2
.
Ex. Neisseria

Classificao
1)Aerbicos estritos
2)Anaerbicos estritos
3)Anaerbico facultativo
4)Microaerfilo
5)Anaerbicos aerotolerantes

Meios de cultura
Meio quimicamente definido
sintticos : toda a composio qumica
conhecida
Ex: meio para cultivo de clulas
Meio complexo
sintticos: composio qumica no
conhecida (composto por nutrientes como extrato de
levedura, de carne ou de plantas)
Meios de cultura
Meio enriquecido:

favorece o desenvolvimento de uma populao
bacteriana que est em desvantagem entre outras
populaes.

gar sangue
Meios de cultura
Meio seletivo:

favorece o crescimento de uma determinada bactria de
interesse, impedindo o crescimento de outras bactrias.

Ex: gar Sabouraud dextrose, pH 5,6, utilizado no crescimento de fungos que
so favorecidos, em relao as bactrias, pelo baixo pH.

Meios de cultura
Meio de manuteno:

Estocagem ou manuteno - utilizados para
conservao de microrganismos no laboratrio, ou seja,
garantem a viabilidade de microrganismos

Ex: gar Conservao, Meios com leite, gar suco de tomate, gar Simples,
meio semi-slido, etc.
gar Nutriente
Culturas
Obteno de culturas puras
Isolamento:
tcnica de semeadura por esgotamento

Preservando culturas bacterianas
Congelamento em baixas temperaturas
(meio liquido + glicerol e congelamento rpido de -50 a -95C)
Liofilizao
(rapidamente congelado, em meio lquido, sob temperaturas de -54 a -72C
e imediatamente submetido remoo de gua por vcuo)
Crescimento das culturas bacterianas
Diviso bacteriana Fisso binria ou
bipartio
A alongamento da clula
B duplicao do material
gentico
C invaginao da parede
D separao das
paredes
E separao das duas
clulas-filhas
Crescimento das culturas bacterianas
Diviso bacteriana - Brotamento
Crescimento das culturas bacterianas
Tempo de gerao

Tempo necessrio para uma clula se dividir
formando duas clulas-filhas idnticas
Ex.: Escherichia coli tempo de gerao de 20min.

Crescimento das culturas bacterianas
Curva de crescimento bacteriano

a Fase lag
b Fase log
c Fase estcionria
d Fase de morte
celular

Crescimento das culturas bacterianas
Fases da curva de crescimento
Fase lag: processo de diviso pouco ou ausente; adaptao
das clulas ao meio.
Fase log: alto processo de diviso; crescimento
exponencial; absoro de nutrientes do meio; produo de
metablitos (toxinas).
Fase estacionria: diminuio da velocidade de diviso
bacteriana; diminuio da atividade metablica; tiram
nutrientes das clulas mortas; acmulo de substncias
txicas; esporulao.
Fase de morte celular: nmero de clulas mortas excede
o nmero de clulas vivas.

Gentica Bacteriana
As informaes genticas esto
contidas:

-Cromossomo contm quase a totalidade
das informaes genticas das bactrias.

-Plasmdeos, DNA Frgil e Transposons
contm poucas informaes e a maioria
no so essenciais para a vida
bacteriana.

Cromossomo organela celular presente no
citoplasma, nica, circular, composta de DNA de
cadeia dupla, forma enovelada e compacta.

Replicao semiconservativa, isto , as duas cadeias
da molcula separam-se e cada uma serve de
molde para sntese de uma nova cadeia.

Cada clula filha na diviso binria recebe uma
nova molcula de DNA
Plasmdeo molculas de DNA extra
cromossmica, circulares covalentes, fechadas,
fita dupla, altamente compacta; replicam-se
automaticamente; menores que o DNA
cromossmico; nmero varivel nas clulas.
DNA Frgil so vrus bacterianos basicamente
constitudos de DNA envoltos por uma capa
proteica.





Transposons so pequenas molculas de DNA
capazes de trocar de posio, isto , de
cromossomo para plasmdeo e de um plasmdeo
para outro, ou de um plasmdeo para um
cromossomo.
Tipos de variaes genticas
Mutao:

Qualquer alterao na sequncia de
nucleotdeos da molcula do DNA
cromossmico, que pode decorrer da:
insero, substituio ou deleo.


Compostos qumicos, radiao, vrus...
Transferncia de material gentico:
Os genes transferidos podem se integrar ao
cromossomo da bactria ou persistir como um
elemento citoplasmtico autnomo.


Os processos de transferncia podem ser por:
I. Dentro da prpria bactria
Transposons:

No prprio DNA
Ou
DNA ----Plasmdeo.
II. Entre bactrias
Ocorre por:
a) CONJUGAO
b) TRANSDUO
c) TRANSFORMAO

a) Conjugao - Processo de transferncia de DNA
de uma bactria para outra, envolvendo o contato
entre as duas clulas
A conjugao est associada presena de
plasmdeos de natureza F - genes que permitem a
transferncia do DNA plasmidial de uma clula para
outra ou, em outras palavras, a capacidade
conjugativa.
Quando a clula porta um plasmdeo de
natureza F denominada F+, doadora, ou macho,
enquanto clulas desprovidas de tais plasmdeos
so denominadas F-, receptoras, ou fmeas.

Exemplo de um plasmdeo do tipo F
Esquema dos eventos associados conjugao entre clulas F+ e F-.
b) Transduo transferncia do material
gentico do cromossomo ou do plasmdeo de uma
bactria pra outra mediada pelos bacterifagos.
pode ser:

generalizada (qualquer fragmento de DNA) ou
especializada (determinados genes, passados
por fagos temperados).


Converso lisognica:

Transferncia de genes de fagos para
bactrias. A prpria lisogenizao torna a bactria
imune a outras infeces por este fago, mas alm
disso, outros fentipos podem ser adquiridos.


c) Transformao - incorporao do material
gentico (DNA) liberado por uma clula doadora no
meio ambiente espontaneamente, por morte e lise.

III. Recombinao
Integrao do DNA na clula
receptora.
Nutrio Bacteriana
O processo de nutrio:

Ocorre atravs da absoro dos nutrientes, a partir
do ambiente externo.
Entretanto, devido s caractersticas diferenciais na
composio e estrutura da parede celular dos organismos
Gram positivos e Gram negativos, este processo
apresenta algumas diferenas nestes dois grupos de
organismos.


Nutrio em Gram positivos:

Estas bactrias caracterizam-se por sintetizar
uma srie de exoenzimas, as quais so liberadas
no meio, clivando os nutrientes, que so
captados por protenas transportadoras.
Nutrio em Gram negativos

Devido presena de uma membrana externa de
carter hidrofbico, as bactrias Gram negativas apresentam
um grande nmero de porinas (protenas) associadas
camada lipopolissacardica.
As porinas formam um canal que permitem a
passagem de molculas hidroflicas. Estas protenas podem
atuar de forma inespecfica, formando canais aquosos, ou
especfica, exibindo stios de ligao para substratos de at 5
kDa, ou ainda, acopladas a protenas transportadoras.
Papel das protenas periplasmticas em bactrias
Gram negativas


De forma geral, so encontrados trs tipos de
protenas no periplasma de clulas Gram negativas:
hidrolases, que atuam na degradao inicial dos nutrientes;
protenas de ligao, que iniciam os processos de
transporte e os quimioreceptores, envolvidos em processos
de quimiotaxia.
O interior de uma clula procaritica - soluo aquosa
hipertnica em relao maioria dos hbitats onde os procariotos
so geralmente encontrados.
Assim, a gua tem a capacidade de passar livremente para o
citoplasma, pelo processo de osmose.
Outros compostos, tais como pequenas substncias apolares
e lipossolveis (cidos graxos, lcoois, benzeno) so capazes de
solubilizar-se na membrana e entrar na clula.
Molculas carregadas como ons, aminocidos, compostos
polares, devem ser transportados especificamente uma vez que,
devido sua natureza, no so capazes de atravessar a membrana.

Papel da membrana citoplasmtica na nutrio de Gram
positivos e negativos


gua:

No nutriente, porm,
indispensvel ao
crescimento bacteriano.
???
As bactrias se nutrem passagem de
substncias em soluo, atravs da
membrana. Exercer funo primordial
na regulao das presso osmtica e
trmica.
Oxignio
Tambm no nutriente;
Atua como receptor de H na respirao
aerbica;
Tem comportamentos diferentes na presena
de oxignio livre:
AERBIAS presena de O2 livre;
ANAERBIAS ausncia de O2 livre;
FACULTATIVAS tanto faz...
Outros fatores envolvidos na nutrio:
Temperatura:
Cada bactria tem uma temperatura
ideal para absoro de nutrientes:
PSICRFILAS entre 0 a 18 C;
MESFILAS entre 25 a 40 C;
TERMFILAS entre 50 a 80 C;
pH:
7,0. Embora,
Algumas vivam em ambientes
cidos ou bsicos.

Enzimas:
Extracelulares ou exoenzimas.