CARACTERSTICAS GERAIS DAS BACTRIAS E DA MICROBIOTA

Microbiologia Clnica / Departamento de Farmcia/ Faculdade Assis Gurgacz Farmacutico formado pela Universidade Estadual de Maring/Mestre em Biologia Molecular pela Universidade Federal de So Paulo/Escola Paulista de Medicina

Professor Claudinei Mesquita da Silva

claudinei@fag.edu.br

ASSUNTOS ABORDADOS

Consideraes Gerais; Morfologia bacteriana. Presena e distribuio das bactrias no organismo humano; Aspctos da infeco;

CONSIDERAES GERAIS
BACTRIAS
 Estrutura
- Organismos CELULAR + simples

- Menor tamanho
- 0,2 a 5,0 m

- Popularmente conhecidos como Micrbios

CONSIDERAES GERAIS
Unicelulares
Apresenta apenas uma nica clula

Procariontes
Ausncia de carioteca Presena de Nucleide

CONSIDERAES GERAIS
Abundantes
Solo gua Ar

Maioria Inofensiva - Homem

- Algumas Patognicas

REPRODUO
Reproduo Assexuada
Diviso celular / Fisso Binria

- Duplicao do DNA

- Separao da clula Me em duas cls-filhas

Septo de diviso

REPRODUO
Reproduo Sexuada
Conjugao
Transferncia de plasmdios por pontes citoplasmticas. Os Plasmdeos so molculas circulares duplas de DNA capazes de se reproduzir independentemente do DNA cromossmico.

Transduo

Introduo de fragmentos de DNA transferido de uma bactria para outra por um vrus, os chamados Bacterifagos

Transformao

Absoro de fragmentos de DNA de bactrias lisadas no meio

NUTRIO
Heterotrficas - Maioria
Saprfitos
Matria orgnica em decomposio Reciclagem Papel Ecolgico

Parasitas
Nutrem-se custa do hospedeiro Patognicas Plantas e animais

Autotrficas - Minoria
Fotossntese Quimiossntese

AERBIAS / ANAERBIAS
Aerbias
Normalmente pele / sistema respiratrio

Anaerbias
Camadas mais profundas dos tecidos / feridas

INFECO
Pulmes
Inalao de partculas expulsas Indivduo infectado

Trato Digestivo
Ingesto de alimentos contaminados

Pele
Infeco de uma ferida As bactrias podem produzir toxinas, que so nocivas p clulas humana. Se estas estiverem presentes em nmero suficiente e a pessoa no dispuser de uma imunizao, o resultado a doena.

MORFOLOGIA BACTERIANA

ESTRUTURA GERAL DAS BACTRIAS

CLASSIFICAO DAS BACTRIAS

TAXONMICA gnero e espcie

Estrutura, Morfologia, Colorao e Atividades Metablicas

sorotipos ou subespcies

Antgenos de superfcie, capacidade ou no de serem afetadas por bacterifagos especficos, Caractersticas Metablicas e Biossintticas

CLASSIFICAO DAS BACTRIAS

FORMA
bacilos (bastonetes) cocos

espiroquetas

vbrios

ARRANJOS COLONIAIS
Diplococos
- Dois cocos Meningite

Estreptococos
- Vrios cocos em fileira Crie

Estafilococos
- Vrios cocos cachos de uvas Furunculose

Sarcina
- Vrios cocos arranjos cbicos Septicemia

ARRANJO

CLASSIFICAO DAS BACTRIAS

CARACTERSTICAS DE COLORAO MTODO DE GRAM

Christian Gram patologista dinamarqus Mtodo desenvolvido em 1880

O peptidoglicano um heteropolmero rgido e insolvel na gua, constitudo por cadeias lineares de dois acares aminados NAG (cido n-acetilglucosamina) e NAM (cido n-acetilmurmico) ligados entre si por ligaes glicosdicas. As cadeias lineares ligam-se entre si.

TCNICA DA COLORAO DE GRAM

        

Esfregao de Bactrias tratadas com Cristal Violeta; Escorrer o Corante, cobrir 1 minuto com lugol; Lavar em gua corrente de baixa presso; Descorar com lcool-cetona (5-10 segundos) Lavar com gua corrente de baixa presso; Corar com fucsina de Ziehl 1:10 durante 30 segundos; Lavar com gua corrente de baixa presso; Deixar secar espontaneamente ao ar; Leitura ao microscpio com objetiva de imerso.

IDENTIFICAO DO AGENTE ETIOLGICO EXAME DIRETO COLORAO DE GRAM

EXEMPLOS
Gram + Clostridium, Streptococcus A e B, Staphylococcus, Bacillus, Pneumococcus

Gram Clamydia, Riquetsia, Brucela, Salmonella, Leptospira, Bordetella, Legionella, Neisseria

PRESENA E DISTRIBUIO DAS BACTRIAS NO ORGANISMO HUMANO

INTRODUO MICROBIOTA
Microorganismo vivendo em equilbrio com o hospedeiro, que em condies normais e em um indivduo sadio, so inofensivos e podem at ser benficos.
Hospedeiro recebe alguns benefcios nutricionais e proteo contra outros microorganismos que poderiam causar doenas. Microbiota: Recebe nutrientes, meio estvel, temperatura constante, proteo e etc.

H cerca de 1014 clulas microbianas normalmente o organismo humano.

habitando

rgos e sistemas internos so estreis, incluindo o bao, o pncreas, o fgado, a bexiga, o SNC e o sangue.

MICROBIOTA NORMAL

AUSENTE: Sangue SNC, LCR, Parnquima VARIAES: Inter/intra indivduos, Sexo, Idade, Dieta, Higiene

RELAO ENTRE A FLORA NORMAL E O HOSPEDEIRO

Comensalismo: Bactria se beneficia, mas no causa dano ao hospedeiro. Ex. S. aureus das fossas Nasais. Simbiose ou Mutualismo: Cada organismo contribui com algo que beneficia a sobrevivncia do outro, sem causar dano ao hospedeiro. Ex. Bacilos de Doderlein. Oportunistas: Indivduos Debilitados Patgenos facultativos: E. coli Patgenos estritos: Mycobacterium tuberculosis

CONCEITOS
Flora Normal: Microrganismos que colonizam regies anatmicas de um hospedeiro saudvel sem produzir doenas.
Flora Normal Residente: Grupo de microrganismos encontrados com regularidade em determinada idade e rea da superfcie, sendo perturbada, recompe-se com facilidade (bacilos de Doderlein).

Flora Normal Transitria: Grupo de microrganismos que permanecem na pele ou mucosa por horas, dias ou semanas, provenientes do meio externo, no provocando doena e no se estabelecendo em definitivo (E. coli das mos).

ORIGEM DA FLORA NORMAL

Parto- contato com a pele, boca, nariz e conjuntiva da criana. Trato alimentar- Poucas Horas aps nascimento j h contato com o trato alimentar e com o tempo com Alimentao. No decorrer de 1 ano, com contato, inalao e deglutio, j possui flora normal O Analista Clnico precisa saber quais os locais onde h microbiota normal e quais so elas, para saber o que valorizar no exame/Diagnstico.

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO (PELE) A pele apresenta uma microbiota residente bem definida e constante, diferenciada na regio anatmica por secrees, ou proximidade de mucosas (boca, nariz e reas perineais). O pH baixo, os cidos graxos nas secrees sebceas e a lisozima podem ser fatores importantes para eliminao da flora no residente da pele.
Cocos Gram-positivos: Staphylococcus aureus (comum) Staphylococcus epidermidis (proeminente) Streptococcus spp. (irregular) S.pyogenes Bacilos Gram-positivos: Corynebacterium spp. (++) Propionibacterium acnes

PATOGENICIDADE (PELE) Staphylococcus aureus * Abscessos * infeces de feridas operatrias * furnculo

Streptococcus pyogenes * Escarlatina

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO (CONJUNTIVA) A conjuntiva possui grande variedade de bactrias, porm a quantidade pequena. A microbiota da conjuntiva controlada pelo fluxo de lgrimas (contm lisozima).
Cocos Gram-positivos: Staphylococcus aureus (irregular ) Staphylococcus epidermidis (comum) Streptococcus spp.(irregular) Bacilos Gram-positivos: Corynebacterium spp. (comum) Cocos Gram-negativos: Moraxella e Neisseiria spp. (comum) Haemophillus spp. (irregular) Bastonetes Gram-negativos: Escherichia coli (irregular)

PATOGENICIDADE (OCULAR) Staphylococcus aureus * Conjuntivite

Neisseria gonorrhoeae * Conjuntivite

MICROBIOTA DO CORPO HUMANO (BOCA e FARINGE)

Na boca tenho um habitat ideal para microorganismos.
Cocos Gram-positivos: Staphylococcus aureus (comum) Staphylococcus epidermidis (comum) Streptococcus spp.(proeminente) Enterococcus spp.(irregular) Bacilos Gram-positivos: Corynebacterium spp. (comum) Cocos Gram-negativos: Neisseria ssp. (comum) Haemophillus spp. (irregular) Bastonetes Gram-negativos: Pseudomonas aeruginosa (irregular), Escherichia coli (irregular) e Proteus mirabilis (irregular)

PATOGENICIDADE (BOCA)
Staphylococcus aureus * Abscesso (mandbula)

PATOGENICIDADE (FARINGE)

Streptococcus pyogenes * Faringite

MICROBIOTA NORMAL (INTESTINOS)

DO

CORPO

HUMANO

No intestino Grosso tem a maior populao bacteriana do corpo humano. Quando o recm-nato nasce, o intestino estrill, e logo nas primeiras refeies comea a adquirir a flora normal.
Bacilos Gram-negativos (principalmente Enterobactrias) Escherichia coli (proeminente) Proteus mirabilis (comum) Pseudomonas aeruginosa (comum) Bacilos Gram-positivos: Corynebacterium spp. (comum) Clostridium tetani (irregular) Cocos Gram-positivos: Staphylococcus aureus (proeminente) Staphylococcus epidermidis (comum)

PATOGENICIDADE (INTESTINO) Staphylococcus aureus * Enterotoxinas produzidas em alimentos (Intoxicao alimentar)

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO (VAGINA)

A microbiota da mulher adulta complexa. Logo aps o nascimento a mulher colonizada por lactobacilos. Na puberdade os lactobacilos torna-se a grande maioria e contribuem para manuteno do pH cido. Quando os lactobacilos so suprimidos por algum agente antimicrobiano, as leveduras ou bactrias aumentam em nmero, causando inflamao e irritao. Aps a menopausa, os lactobacilos diminuem em nmero, e reaparece uma flora mista.
Cocos Gram-positivos: Staphylococcus spp. (comum) Streptococcus spp. (comum) Bacilos Gram-positivos: Lactobacilos (proeminente) Bacilos Gram-negativos: Escherichia coli, Klebsiella spp. , Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa (comum)

MICROBIOTA NORMAL DO CORPO HUMANO (URETRA)

A uretra anterior de ambos os sexos contm pequeno nmero de microrganismos provenientes da pele e perneo. Os microrganismos aparecem regularmente na urina normal eliminada.
Cocos Gram-positivos: Staphylococcus aureus (irregular) Staphylococcus epidermidis (proeminente) Streptococcus spp. (comum) Bacilos Gram-positivos: Corynebacterium spp. (comum) Bacilos Gram-negativos: Escherichia coli (comum) Proteus mirabilis (comum)

BENEFCIOS DA MICROBIOTA NORMAL



Grande quantidade de bactrias do intestino e da boca dificulta a instalao de um patgeno Bactrias do intestino produzem substncias antibiticas s quais elas prprias so imunes Colonizao do recm-nascido desenvolvimento do sistema imune um estmulo para o

Bactrias intestinais so produtoras de vitamina K, e auxiliam na digesto e absoro de nutrientes

MALEFCIOS DA MICROBIOTA NORMAL



Podem causar infeco quando deslocados do seu stio normal no corpo humano (Ex: S. epidermidis em cateter) Quando patgenos potenciais ganham vantagem competitiva devido a populao diminuda de competidores inofensivos (Clostridium difficile) Quando algumas substncias alimentares inofensivas comumente ingeridas so convertidas em derivados carcinognicos pelas bactrias no colo (Ex: ciclamato cicloeximida) Pacientes imunocomprometidos microbiota normal pode multiplicar em excesso e causar infeces.

PROCESSO INFECCIOSO aderncia da bactria multiplicao local

SISTEMA LINFTICO

disseminao corrente sangunea

BACTEREMIA

RGOS ALVOS

Invaso do epitlio do hospedeiro interior da clula

Quiescentes em vacolos Dispersos no citoplasma

Multiplicao

Disseminao

ESTABELECIMENTO DE DOENAS INFECCIOSAS

EVENTOS: o Contato fontes exgenas versus endgenas o Entrada - ingresso versus penetrao o Disseminao propagao direta por contiguidade ou propagao para lugares distantes o Multiplicao o Leso o Resultado

RESULTADO DAS INFECES BACTERIANAS

IDENTIFICAO DAS BACTRIAS

Caractersticas:  Metablicas  Morfologia  Patognicas  Antignicas  Genticas

APNDICES DA CLULA BACTERIANA

comuns (adesinas) e sexuais (conjugao)

INVASO E COLONIZAO


Fmbrias Flagelo

- so estruturas antifagocitrias. - possui protenas denominadas adesinas - motilidade e quimiotaxia

Escherichia coli

Fmbria tipo I Fmbria P

INVASO E COLONIZAO
Adesinas - cido lipoteicico, (ex. S. aureus) - muco (ex. espcies de stafilococus) - lectina de superfcie celular (ex. espcies de chlamydia) - protena P1 (ex. Mycoplasma pneumoniae) - proteina F (ex. Streptococcus pyogenes) Invasinas - protenas que provocam ingesto fagoctica da bactria por clulas do hospedeiro. (ex. Shigella spp. e Listeria spp.)

INVASO E COLONIZAO

Protena M - Protena que se liga ao fibrinognio fibrina e seus produtos de degradao. (ex. S. pyogenes) Protenas Txicas - Eliminao de fagcitos

Cpsula - preveno da fagocitose

INTERAO BACTRIA-HOSPEDEIRO

Fatores de Virulncia
Aderncia, Invaso e Colonizao Danos ao hospedeiro

Morte

Mecanismo de defesa Sobrevivncia

FATORES BACTERIANOS QUE CAUSAM DANOS AO HOSPEDEIRO

o Exotoxinas Produtos bacterianos no estruturais liberados no ambiente (protenas bacterianas txicas) produzidas tanto por bactrias Gram-positivas quanto Gram-negativas o Endotoxinas - Lipopolissacardeo embebido na membrana externa de bactrias Gram-negativas

Liberadas como vesculas de membrana externa impregnadas com LPS

CRESCIMENTO E METABOLISMO BACTERIANO

MULTIPLICAO BACTERIANA
Fisso Binria Transversa

Cultura Bacteriana duplica a cada 20 minutos Ex: Escherichia coli massa = 1x10 -12 g 48 horas 2144 bactrias - massa = 2,2 x1031 g (Massa equivalente a 4.000 o planeta Terra)

Crescimento Bacteriano Autolimitante

CRESCIMENTO BACTERIANO

Nutrientes Fonte de Energia

Fonte de Carbono Fonte de Eltrons

Precurssores Metablicos

Macromolculas

Diviso Celular

FASES DO CRESCIMENTO BACTERIANO

Falta de nutrientes Acmulo de subprodutos txicos Equilbrio multiplicao e morte

Nmero de Bactrias (log)

multiplicao

Ativao de enzimas que lisam parede celular

3
adaptao

Fase Estacionria Fase Log (Exponencial)

4
Fase de Morte

1
Fase Lag

Tempo

FATORES FSICOS QUE AFETAM O CRESCIMENTO BACTERIANO

Psicrfilas (12 a 17 graus C) TEMPERATURA Mesfilas (28 a 37 graus C) Termfilas (57 a 90 graus C) Termfilas extremas (>100 graus C) pH Acidfilas (ph<5) Alcalfilas (pH>10) Aerbicas (patgenos respiratrios e de mucosa), Anaerbicas (trato gastrointestinal e ambiente esporos), Microaerfilas ( PO2), Facultativas, Aerotolerntes (Anaerbio) Bactrias Halfitas

Oxigenao

Salinidade

VARIAES NOS REQUERIMENTOS NUTRICIONAIS

Algumas bactrias so capazes de crescer em meio simples organismos entricos Algumas bactrias so extremamente fastidiosas (complexo requerimento nutricional) organismos que crescem nas mucosas ou no interior da clula do hospedeiro Algumas bactrias crescem em meio indefinido (sangue, soro, extrato de levedura, etc)

METABOLISMO BACTERIANO

Conjunto de reaes bioqumicas necessrias vida, compreende o catabolismo e anabolismo catabolismo reaes qumicas que liberam energia a partir da degradao de substncia orgnicas anabolismo reaes qumicas que consomem energia e permitem a sntese de precursores metablicos, macromolculas e estruturas celulares

Metabolismo
Energia

Catabolismo

Anabolismo

Crescimento E Multiplicao

FONTE DE ENERGIA

Energia Luminosa Fotossintetizantes Energia de Compostos Inorgnicos (Fe2+, NO2-, H2) Litotrficos

Energia de Compostos Orgnicos (Glicose) Heterotrficos ou Organotrficos

ATP
Biossntes de Macromolculas Montagem de Estruturas Diviso Celular

GENTICA BACTERIANA

ELEMENTOS CELULARES ENVOLVIDOS NA GENTICA BACTERIANA

SNTESE PROTICA

FLUXO DA INFORMAO GENTICA

DNA RNA protenas

Aquisio de genes de uma fonte externa

MUTAO X RESISTNCIA ADQUIRIDA AOS ANTIBITICOS

Recada clnica durante antibioticoterapia SENSVEL RESISTENTE