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Profa Eloisa
Introduo
destes organismos possui uma espessa parede celular, impossibilitando a realizao de fagocitose.
Protenas
Lipdios Lipopolissacardeos Peptideoglicano Glicognio DNA
15
2 1 0,7 1 1
2.000
4 1 1 1 1
RNA Metablitos
ons inorgnicos
5 3
0,3
500 350
20
Fontes de energia:
Organismos
Fontes de carbono:
autotrficos (fontes inorgnicas CO2 ou on bicarbonato) Organismos heterotrficos (fontes orgnicas carboidratos (D-glicose), aminocidos, cidos monocarboxlicos, lipdios, lcoois, amido, celulose).
Organismos
Fonte de Carbono
Autotrficos - CO 2 a fonte de C
Quimioautotrfico ou Quimiolitotrfico (energia de compostos inorgnicos) Fotoautotrfico ou Fotolitotrfico (energia da luz e fonte de C inorgnica)
Fonte de Nitrognio
Nitrognio atmosfrico
Convertido
em nitrognio orgnico. Ex: Azotobacter e Rhizobium (fixao do nitrognio) de amnio e nitratos (raramente nitritos)
ou hidrolisados de protenas
Em quantidades apreciveis
Macronutrientes:
fsforo (fosfatos), enxofre, potssio, magnsio, ferro cobre, cobalto, zinco, mangans, molibidnio, sdio
Traos
Micronutrientes:
Fatores de Crescimento
Compostos orgnicos indispensveis a um determinado microrganismo, mas que ele no consegue sintetizar.
Estas bactrias caracterizam-se por sintetizar uma srie de exoenzimas, as quais so liberadas no meio, clivando os nutrientes, que so captados por protenas transportadoras.
Os
fungos (clulas eucariticas), possuem um sistema de nutrio semelhante ao das bactrias Gram positivas, nutrindo-se pela absoro, aps a clivagem extracelular de compostos complexos
Porinas: correspondem s protenas, formadas por trs subunidades idnticas, que originam um canal de cerca de 1 nm de dimetro, cujo mecanismo de abertura e fechamento permanece ainda desconhecido. As porinas permitem a passagem de molculas hidroflicas, de baixa massa molecular.
Devido presena de uma membrana externa de carter hidrofbico (LPS), as bactrias Gram negativas apresentam um grande nmero de porinas associadas camada lipopolissacardica.
gua
universal Auxilia a passagem de sibstncias pela membrana citoplasmtica Regulao da presso osmtica Regulao trmica
Enzimas
Enzimas extracelulares ou exoenzimas realizam a quebra destes compostos para posterior absoro.
Crescimento bacteriano
Em microbiologia, o termo crescimento referese a um aumento do nmero de clulas e no ao aumento das dimenses celulares. Crescimento Populacional: definido como o aumento do nmero, ou da massa microbiana.
Reproduo Bacteriana
As bactrias dividem-se em duas, por fisso binria, e aumentam o seu nmero de forma geomtrica
Fisso Binria
Crescimento bacteriano
A taxa de crescimento a variao no nmero ou massa por unidade de tempo. O tempo de gerao o intervalo de tempo necessrio para que uma clula se duplique.
O
tempo de gerao varivel para os diferentes organismos, podendo ser de 10 a 20 minutos at dias, sendo que em muitos dos organismos conhecidos, este varia de 1 a 3 horas.
Crescimento bacteriano
O tempo de gerao pode ser calculado quando uma cultura encontra-se em fase exponencial, pela frmula abaixo:
N= No x 2 n onde:
Aplicando logaritmo (log): log N= log No + n log 2 n = log N - logNo / log 2 n = log N - log No / 0,301 n = 3,3 (log N-log No)
Crescimento Bacteriano
A partir da equao n = 3,3 (log N-log No) possvel calcular o nmero de geraes (n) que ocorreram em uma cultura se o n inicial de clulas for conhecido.
g = t/n Calcular o tempo de gerao de uma cultura cuja populao celular passa de 10 3 para 10 8 aps 5 horas de cultivo
Exemplo:
Tempo de Gerao
Quando uma cultura microbiana desenvolvese em um sistema fechado, pode-se confeccionar uma curva de crescimento.
Esta
Fase lag : Fase de adaptao estado de latncia Intensa atividade metablica (sntese de DNA e enzimas) Fase log (crescimento exponencial) : Reproduo celular ativa com tempo de gerao constante Maior atividade metablica da clula Fase estacionria : Nmero de morte igual ao nmero de novas clulas - EQUILBRIO Atividade metablica diminui Fase de declnio ou morte celular: Nmero de clulas mortas excede o de clulas novas
Crescimento bacteriano
A partir do conhecimento dos requerimentos nutricionais, podem ser confeccionados meios que permitam o crescimento microbiano in vitro. Cultura pura: corresponde a uma cultura contendo um nico tipo de organismo.
Permite
Crescimento bacteriano
Meios de cultura
Meios aquosos, adicionados de nutrientes e, eventualmente, gar (polissacardeo = ster sulfato de galactana, retirado de algas - Gelidium), caso se deseje a consistncia slida. Quimicamente definidos (sintticos) composio qumica exata
Classes de meios:
Componente protico - principal fornecedor de carbono, nitrognio, enxofre e energia (peptonas e triptonas) Extrato de carne e extrato de levedura - vitaminas e outros fatores orgnicos de crescimento
Meios de Cultura
Lquido
Slido Semi-Slido
Oxignio atmosfrico
No nutriente, funciona como aceptor final de hidrognio nos processos de respirao aerbica. Classificao das bactrias quanto ao crescimento e utilizao de oxignio:
Aerbias exigem a presena de oxignio livre Microaerfilas exigem oxignio em pequena quantidade, no tolerando as presses normais de O2 atmosfrico Anaerbias estritas no toleram a presena de oxignio livre, morrendo rapidamente nessas condies Anaerbias no-estritas no utilizam oxignio atmosfrico, mas este no txico Facultativas podem crescer na presena ou ausncia de oxignio livre
Cultivo de anaerbios
Utilizao de meios redutores (tioglicolato de sdio) Utilizao de ambientes fechados, sem oxignio Garrafas de anaerobiose
Cultivo de aerbios
Temperatura
Cada
bactria tem um timo de temperatura para absoro de nutrientes que est intimamente relacionado ao crescimento e ao desenvolvimento da culturas
Classificao:
crescem e absorvem melhor entre as temperaturas de 0 e 18C Mesfilas entre 25 e 40C Termfilas entre 50 e 80 C
Psicrfilas
Thiobacillus (cresce em pH 1,5) Lactobacillus A maioria das bactrias Podem tolerar pH na faixa de 5,4 a 8,5 Vibrio cholearae (pH 9,0) Agrobacterium (pH 12,0)
Metabolismo bacteriano
Suprimento de energia Estruturas celulares ou molculas acessrias sua sntese e funcionamento Multiplicao bacteriana
Metabolismo bacteriano
protenas,
a formao de ATP para transporte de nutrientes, movimentao dos flagelos, biossntese em geral
Metabolismo bacteriano
Vias metablicas
Respirao aerbia:
Gliclise (converso da glicose a piruvato) Converso de piruvato a acetil-CoA Oxidao de acetil-CoA pelo ciclo de Krebs
Oxidao de protenas, peptdios e aminocidos remoo do grupo amino, esqueleto de carbono oxidado produto entra no ciclo de Krebs e na gliclise Oxidao de lipdios degradao por lipases gerando cidos graxos oxidados acetil-CoA
Metabolismo bacteriano
Oxidao anaerbia:
Fermentao de carboidratos:
via glicoltica com produo de piruvato, NADH e ATP Produtos lactato, etanol, formiato usados para identificao bacteriana
Fermentao de aminocidos:
Respirao anaerbia:
Metabolismo de Carboidratos
Gliclise
Oxidao da glicose a cido pirvico com produo de ATP e energia contida em NADH.
Oxidao de um derivado do cido pirvico (acetil coenzima A) a dixido de carbono, com produo de ATP, energia contida em NADH e FADH 2 . NADH e FADH 2 so oxidados. Cascata de reaes de oxirreduo envolvendo uma srie de transportadores de eltrons. A energia dessas reaes utilizada para gerar grande quantidade de ATP.
Ciclo de Krebs
Ciclo de Krebs
Respirao anaerbia
O aceptor final de eltrons uma substncia inorgnica diferente do oxignio (O2 ) Aceptor de eltrons pode ser: NO3- , SO4- , CO32-
Fermentao
Libera energia de acares ou molculas orgnicas, tais como aminocidos, cidos orgnicos, purinas e pirimidinas; No requer oxignio, mas algumas vezes pode ocorrer na presena deste; No requer o uso do ciclo de Krebs ou de uma cadeia de transporte de eltrons; Utiliza uma molcula orgnica como aceptor final de eltrons; Produz somente pequenas quantidades de ATP (grande parte da energia original dos compostos catabolizados permanece ainda nas ligaes qumicas dos compostos orgnicos formados).