Scientia Agraria ISSN 1519-1125 (printed) and 1983-2443 (on-line) ARIOLI, C. J. et al. Biologia da mariposa oriental em dieta...

BIOLOGIA DA MARIPOSA-ORIENTAL EM DIETA ARTIFICIAL BASE DE MILHO BIOLOGY OF THE ORIENTAL FRUIT MOTH IN ARTIFICIAL CORN-BASED DIET
Cristiano Joo ARIOLI1 Mauro Silveira GARCIA2 Marcelo ZARTE3 Marcos BOTTON4 RESUMO
A biologia de Grapholita molesta (Busck) foi estudada numa dieta artificial a base de milho comparada com a de Ivaldi-Sender, referncia para a criao do inseto em laboratrio. O experimento foi conduzido em laboratrio sob temperatura de 242 C, 7010 % UR e fotofase de 16 horas, comparando-se as dietas atravs do emprego da tabela de vida de fertilidade. Na dieta a base de milho foi registrada maior durao no perodo de lagarta-adulto e menor fecundidade total. A dieta base de milho proporcionou maior tempo de desenvolvimento de uma gerao (T), menor taxa lquida de reproduo (Ro), menor capacidade inata de aumentar em nmero (rm) e menor razo finita de aumento (). Contudo, a dieta base de milho tambm pode ser empregada na criao do inseto, pois alm de ser de fcil obteno e preparo, proporcionou uma viabilidade total do perodo lagarta-adulto de 87,2%. Palavras-chave: Grapholita molesta; dieta artificial; tabela de vida de fertilidade, criao massal.

ABSTRACT
Grapholita molesta (Busck) biology was studied in a corn-based diet compared with Ivaldi-Sender (1976), standard substrate for insect rearing in laboratory. The experiment was conducted in laboratory (242 C, 7010% RU and photophase of 16 h) comparing diets through fertility life table. The corn-based diet showed a longer duration of the larvae to adult stage and a lower fecundity. The corn-based diet provided a shorter generation time (T), a minor net reproductive rate (Ro), a minor innate capacity for increase in numbers (rm) and a minor finite rate of increase (l).However, the corn-based diet can also be used for rearing G. molesta, because beyond being of easy attainment and preparation, provided a total viability for the larvae to adult of 87.2%. Key-words: Grapholita molesta; artificial diet; fertility life table; mass rearing.

Dr. Pesquisador. EPAGRI Estao Experimental de Videira. Rua Joo Zardo, 1660, Bairro Campo Experimental. CEP. 89.560-000, Videira, SC, Brasil. E-mail: cristianoarioli@epagri.sc.gov.br. Autor para correspondncia. 2 Dr. Professor, Universidade Federal de Pelotas, Departamento de Fitossanidade, Campus Universitrio, s/n - CP 354 CEP 96.010-900, Pelotas, RS, Brasil. 3 Doutorando em Fitotecnia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Avenida Bento Gonalves, 7712,CEP. 91540-000. Porto Alegre, RS, Brasil. E-mail: marcelo_zart@yahoo.com.br. 4 Dr. Pesquisador. Embrapa Uva e Vinho. Rua Livramento, 515, CAP. 130. CEP. 97.500-000, Bento Gonalves, RS, Brasil. E-mail: marcos@cnpuv.embrapa.br

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INTRODUO
A mariposa-oriental Grapholita molesta (Busck, 1916) (Lepidoptera: Tortricidae) uma das principais pragas das fruteiras de clima temperado no Brasil, com destaque para a ameixeira, macieira, pereira e pessegueiro (Nora & Sugiura, 2001; Salles, 2001; Kovaleski & Ribeiro, 2002; Nora & Hickel, 2002; Arioli et al., 2003 e 2004; Monteiro & Hickel, 2004;). Como forma de desenvolver estratgias eficazes para o manejo integrado da mariposaoriental, a espcie tem sido criada mundialmente utilizando dieta natural ou artificial e em escala experimental e massiva (Ivaldi-Sender, 1974; Szocs & Tth, 1982; Yokoyama et al., 1987; Rosenthal et al., 1994; Ribbert & Marn, 2005; Marn et al., 2006). No Brasil, mesmo com a importncia de G. molesta como praga das rosceas, at 2007 no houve preocupao em implementar uma criao em laboratrio de forma a produzir insetos em grandes populaes para trabalhos de comportamento e controle. Nos estudos conduzidos at ento, os insetos foram criados em pequena escala (Grellmann et al., 1991; Rosenthal et al., 1994) ou coletados diretamente dos pomares comerciais (Arioli et al., 2004). Dessa forma, a partir do estabelecimento de uma metodologia de criao do inseto em laboratrio (Arioli et al., 2007) considera-se importante prospectar outros substratos alimentares para emprego em dieta artificial com o objetivo de facilitar a criao do inseto. A dieta considerada referncia para a criao da G molesta a proposta por Ivaldi-Sender (1974), a qual utiliza alimento natural (ma seca) como um dos ingredientes bsicos. Por envolver uma maior manipulao deste ingrediente (o qual deve ser secado e triturado no laboratrio) a confeco da dieta acaba exigindo maior tempo e trabalho, alm de laboratrio com maior infraestrutura. Levando em conta a facilidade na obteno dos ingredientes bem como a praticidade de elaborao, uma dieta a base de milho (que

exclui a componente ma seca), proposta por Arioli et al. (2007), tem sido amplamente utilizado na maioria dos laboratrios do Brasil que passaram a manter criaes de G. molesta. No entanto, no existem informaes sobre o efeito deste alimento na biologia da espcie. Este trabalho teve por objetivo avaliar o desenvolvimento biolgico de G. molesta em uma dieta base de milho em comparao a dieta mundialmente recomendada para a criao da espcie em laboratrio.

MATERIAL E MTODOS
O trabalho foi conduzido no Laboratrio de Entomologia da Embrapa Uva e Vinho, localizado em Bento Gonalves, RS, sob temperatura de 242 C, UR de 70 10% e fotofase de 16 h. Obteno dos insetos Mas do cultivar Fuji infestadas com G. molesta foram obtidas em fevereiro de 2005, em pomares comercias de Vacaria, RS (latitude 2826S e longitude 5048O). Aps a coleta, as mas foram levadas ao laboratrio e colocadas em bandejas plsticas (59 x 38 x 8,5 cm) e mantidas em sala climatizada. Sobre estas foram dispostas sete camadas de tecido de gaze (25 x 25 cm) que foram distribudas uma sobre a outra formando uma cobertura uniforme sobre os frutos, permitindo assim a formao e obteno das pupas. Posteriormente, os insetos foram criados em condies controladas seguindo a metodologia descrita por Arioli et al. (2007). O desenvolvimento e a reproduo de G. molesta nas duas dietas artificiais (Tabela 1) foram comparados atravs das seguintes variveis biolgicas: durao e viabilidade das fases de ovo, lagarta, pupa e do perodo de lagarta emergncia do adulto (lagarta-adulto); razo sexual; massa de pupas; perodo de proviposio, oviposio; fecundidade diria e total e longevidade dos adultos.

TABELA 1 - Composio da dieta padro (Ivaldi-Sender) e da dieta avaliada ( base de milho) para criao de G. molesta em laboratrio e componentes da soluo nutritiva utilizada para alimentao de adultos. Componentes da dieta para a fase de lagarta1 Farinha de milho Ma seca (moda) Germe de trigo Levedura de cerveja cido ascrbico cido Benzico Metil parahidroxibenzoato (Nipagin) Formaldedo gar Componentes da dieta para a fase adulta2 Mel Metil parahidroxibenzoato (Nipagin)
12-

Dieta Ivaldi-Sender 50,0 g 50,0 g 50,0 g 50,0 g 4,5 g 1,5 g 1,5 g 18,0 g 130,3 g 1,3 g base de milho 174,0 g 43,5 g 46,6 g 6,2 g 2,8 g 2,2 g 0,8 cm3 24,8 g -

Com adio de gua destilada para completar 1 kg de dieta/ Com adio de gua destilada para completar 1 dm3 de soluo.

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ARIOLI, C. J. et al. Biologia da mariposa oriental em dieta... Biologia de G. molesta Lagartas recm-eclodidas da gerao F4 (150 por tratamento) obtidas da criao estoque mantida segundo a metodologia de Arioli et al. (2007) foram transferidas, com o auxlio de um pincel fino, em cmara assptica, para tubos de vidro (2,5 x 8,5 cm), previamente esterilizados, contendo 4 g de uma das dietas em teste (Tabela 1). Cada tubo recebeu uma lagarta, os quais foram tamponados com algodo hidrfobo para evitar a fuga do inseto e tambm para servir de local para a formao das pupas. Estas, com at 24 h de idade, foram pesadas e separadas por sexo, conforme sexagem proposta por Beeke & Jong (1991). Posteriormente, foram transferidas para tubos de vidro contendo papel-filtro umedecido at a emergncia dos adultos. Para o estudo da fecundidade e longevidade, 20 casais foram individualizados em gaiolas confeccionadas com copos de PVC transparente semiflexvel, com capacidade de 200 cm3, nas paredes do qual os adultos da mariposaoriental realizavam a postura. A abertura do copo foi fechada com tecido de voile, preso com o auxlio de um elstico para a circulao e troca de ar com o ambiente externo. A extremidade inferior do copo foi perfurada no centro para a insero de algodo embebido em soluo alimentar para adultos (Tabela1), sendo este substitudo diariamente. O nmero de ovos e a mortalidade dos adultos foram registrados diariamente. Os ovos com 24 a 48 h foram incubados separadamente em gaiolas de copo de PVC, para avaliao do perodo de incubao e a viabilidade dos mesmos. A partir dos dados de biologia, foi calculada a tabela de vida de fertilidade para G. molesta com as duas dietas (Silveira Neto et al., 1976), estimando, para as futuras geraes, a capacidade inata de aumentar em nmero (rm), o nmero de vezes que cada espcie pode aumentar (Ro), o intervalo de tempo entre cada gerao (T) e o nmero de indivduos adicionados populao, por fmea, por dia e que daro origem a fmeas (). O delineamento experimental foi inteiramente casualisado, considerando-se repetio cada lagarta ou cada casal para a avaliao da fecundidade e longevidade. Os dados obtidos foram analisados quanto normalidade pelo teste de Liliefors e quanto homogeneidade das varincias dos erros pelos testes de Cochrane e Bartlett para os experimentos com nmero igual e diferente de repeties, respectivamente (Ribeiro Jnior, 2001). Assim, os dados (durao dos estgios, massa de pupa, longevidade e fecundidade) que no apresentaram distribuio normal ou homogeneidade da varincia foram transformados em (x + 0,5)0,5 e os dados expressos em porcentagem (viabilidade), transformados em arcseno (x/100)0,5. As mdias dos tratamentos foram comparadas pelo teste T a probabilidade de erro de 0,05.

RESULTADOS E DISCUSSO
O tempo de desenvolvimento da mariposaoriental foi alterado na dieta base de milho (Tabelas 2 e 3) em comparao com a dieta padro. Com exceo da durao na fase de pupa, a qual foi menor nesta dieta (8,5 a 8,7 dias), as duraes do estgio de lagarta e de lagarta-adulto foram significativamente menores na dieta proposta por Ivaldi-Sender (1974). Os perodos de oviposio, longevidade (machos e fmeas) e fecundidade total tambm foram maiores para a dieta de Ivaldi-Sender, indicando ter havido um melhor efeito nutricional da dieta padro, j que o desempenho foi melhor quando as lagartas se desenvolveram neste meio (Tabelas 3 e 4).

TABELA 2 - Durao (mdia EP) (dias) dos estgios de lagarta, pupa e do perodo de lagarta emergncia do adulto de Grapholita molesta em duas dietas artificiais. Dieta Ivaldi-Sender Lagarta Fmeas Machos 16,30,21** 15,20,14** (76) (64) 19,50,24 (60) 18,90,23 (83) Pupa Fmeas 9,60,17** (69) 8,50,15 (54) Machos 9,30,18** (60) 8,70,12 (75) Perodo (lagarta-adulto) Fmeas Machos 29,20,27** 27,90,22** (69) (60) 31,70,24 (54) 31,00,25 (75)

base de milho

Valores mdios diferem (**) entre dietas (na coluna) pelo teste T com P<0.05. Valores entre parnteses expressam o nmero de observaes.

Estes resultados coincidem com aqueles observados por Rosenthal et al. (1994) quando testaram, para a mariposa-oriental, a dieta de Guennelon, proposta por Guennelon et al. (1981) para a criao de Cydia pomonela (Linnaeus)

(Lepidoptera: Tortricidae). Rosenthal et al. (1994) verificaram que a presena de 5% de ma seca triturada na dieta de Guennelon tambm reduziu o tempo de desenvolvimento das lagartas de G. molesta.

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ARIOLI, C. J. et al. Biologia da mariposa oriental em dieta... TABELA 3 Durao dos perodos de pr-oviposio, oviposio e embrionrio (mdia EP) (dias) e viabilidade embrionria (%) de Grapholita molesta em duas dietas artificiais. Perodo embrionrio Dieta Pr-oviposio 2,70,32 n.s (20) 2,60,18 (20) Oviposio Durao (dias) Ivaldi-Sender base de milho 24,90,94 ** (20) 19,11,67 (20) 4,380,07 n.s (822) 4,220,14 (1023) Viabilidade (%) 97,81,30 n.s (822) 99,00,31 (1023)

Valores mdios diferem (**) e no diferem (n.s) entre dietas (na coluna) pelo teste T com P<0.05. Valores entre parnteses expressam o nmero de observaes.

TABELA 4 - Longevidade de adultos (dias) e fecundidade diria (ovos/fmea/dia) e total (ovos/fmea) (mdiaEP) de Grapholita molesta em duas dietas artificiais. Dieta Ivaldi-Sender base de milho Longevidade (20) Fmeas 28,71,04** 23,21,62 Machos 26,62,34** 20,90,95 Fecundidade (20) Diria 13,72,97
ns

Total 333,811,47** 234,818,95

13,51,45

Valores mdios diferem (**) e no diferem (n.s) entre dietas (na coluna) pelo teste T com P<0.05

De forma geral, os valores obtidos para a durao dos estgios imaturos, com insetos alimentados com dieta base de milho, comparamse aos obtidos quando indivduos da mesma espcie so criados em dietas artificiais e naturais, respectivamente (Rosenthal et al., 1994). Embora a dieta a base de milho tenha originado insetos com menor massa de pupa para ambos os sexos (Tabela 5), os valores so superiores aos obtidos por outros autores que criaram G. molesta em dietas artificiais. Tzanakakis & Phillips (1969) usando dietas artificiais base de folhas de alfafa e cenoura, obtiveram valores no

superiores a 10,2 mg para machos e a 11,9 mg para fmeas, respectivamente. Para Szocs & Tth (1982) e Yokoyama et al.(1987), que utilizaram na mistura da dieta germe de trigo e feijo-de-lima respectivamente, a mdia de massa das pupas de machos no ultrapassou 11,4 mg. Tambm para as fmeas, as dietas no originaram pupas com massa acima de 15,3 mg. Alm disso, o massa de pupa observado na dieta base de milho foi maior que os observados por Rosenthal et al. (1994), quando criaram a mariposa-oriental nas dietas artificiais de Ivaldi-Sender, de Guennelon e com frutos de ma e marmelo.

TABELA 5 Viabilidade (%) dos estgios de lagarta, pupa e do perodo de lagarta emergncia do adulto (lagarta-adulto) e massa de pupas (mg) (mdia EP) de Grapholita molesta em duas dietas artificiais. Dieta Ivaldi-Sender Lagarta Viabilidade dos estgios (%) Pupa Lagarta-adulto 89,12,58 n.s (147) 90,92,41 (143) 87,32,72 n.s (150) 87,22,74 (150) Massa de pupas (mg) Fmeas Machos 18,30,32** (76) 15,70,43 (60) 13,80,25** (64) 13,10,23 (82)

98,01,15n.s (150) 95,31,73 (150)

base de milho

Valores mdios diferem (**) e no diferem (n.s) entre dietas (na coluna) pelo teste T com P<0.05. Valores entre parnteses expressam o nmero de observaes.

A viabilidade das fases de lagarta, de pupa e de lagarta-adulto no foi alterada pelas dietas (Tabela 5). No entanto, os valores obtidos para o estgio de lagarta foram superiores aos verificados Grellmann et al. (1991) usando dietas artificiais e aos de Rosenthal et al. (1994) com dietas naturais. 484

A viabilidade pupal tambm foi maior ou semelhante s observadas por autores que criaram G. molesta com dieta artificial (Ivaldi-Sender, 1974; Szocs & Tth, 1982; Yokoyama et al,1987; Rosenthal et al.,1994).

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ARIOLI, C. J. et al. Biologia da mariposa oriental em dieta... De acordo com Tzanakakis & Phillips (1969) e Yokoyama et al. (1987), a condio fsica da dieta constitui-se em fator crtico para o estabelecimento e sobrevivncia de lagartas da mariposa-oriental recm-eclodidas. Dessa maneira, tal condio foi adequadamente mantida na dieta a base de milho, fato observado pela alta viabilidade (> 95%) da fase de lagarta (Tabela 5). Observou-se um desvio na proporo de sexos, sendo o nmero de fmeas menor na dieta base de milho (rs = 0,42), ao contrrio do observado na dieta de Ivaldi-Sender, onde mais fmeas foram encontradas (rs = 0,54). A razo sexual na dieta base de milho assemelha-se quela obtida por Rosenthal et al. (1994), que encontraram uma razo sexual entre 0,45 e 0,49 ao criarem G. molesta em dieta natural (marmelo) e artificial (Guennelon + ma), respectivamente. Rosenthal et al. (1994) tambm verificaram que a dieta de Ivaldi-Sender d origem a um maior nmero de fmeas, corroborando o resultado anteriormente apresentado. No houve diferena no perodo de proviposio entre as dietas testadas (Tabela 3). J o perodo de oviposio foi significativamente maior, com 24,9 dias na dieta de Ivaldi-Sender contra 19,1 dias na dieta base de milho. Com relao longevidade, tanto machos quanto fmeas alimentados na fase de lagarta com a dieta de Ivaldi-Sender viveram mais que os machos e fmeas alimentados na dieta base de milho (Tabela 4). Mesmo assim, a eliminao do componente ma seca e o acrscimo de milho dieta base de milho revelou que tanto os machos quanto as fmeas viveram mais que aqueles criados em dieta natural (mas verdes armazenadas) (Marin et al., 2006). Em hiptese, alguns autores sugerem que G. molesta criada com mas verdes armazenadas fica desnutrida, fato atribudo perda nutricional que ocorre nos frutos quando armazenados por longo perodo de tempo (Tzanakakis & Phillips, 1969; Szocs & Tth, 1982). De maneira geral, h concordncia com as pesquisas de Panizzi & Parra (1991), que alegam que as diferenas encontradas na longevidade dos adultos tm relao direta com a qualidade do alimento ingerido pelas lagartas. No houve diferena significativa na fecundidade diria entre as duas dietas testadas (Tabela 4). J a fecundidade total de G. molesta foi significativamente superior para a dieta de IvaldiSender (Tabela 4). Para as duas dietas, os resultados so superiores aos observados na literatura. Tzanakakis e Phillips (1969) obtiveram apenas 126 ovos/fmea quando as lagartas foram criadas com ma verde e 124 ovos/fmea na dieta base de alfafa e cenoura. Yokoyama et al. (1987) observaram 100 ovos/fmea na dieta formulada com feijo-de-lima e Alfonso & Marin (2004) obtiveram 143 e 131 ovos/fmea quando as lagartas foram mantidas em laboratrio em mas verdes e em dieta artificial respectivamente, enquanto que, em outro trabalho, Marn et al. (2006) obtiveram 160 ovos/fmea com dieta de mas verdes. No foi observada diferena significativa no perodo embrionrio e na viabilidade dos ovos de G. molesta criada nas duas dietas (Tabela 3). Para a viabilidade dos ovos, os valores assemelham-se aos encontrados por Alfonso & Marn (2004) criando lagartas de G. molesta em dieta natural e artificial. No entanto, divergem daqueles alcanados por Rosenthal et al. (1994), os quais, estudando diferentes dietas artificiais e naturais, verificaram uma viabilidade mxima de 53,5%, apenas quando acrescentaram 1% de sais de Wesson dieta proposta por Ivaldi-Sender. Estas diferenas podem estar relacionadas ao tipo de gaiola utilizada para os estudos da fecundidade da mariposa-oriental, j que Peters & Barbosa (1977) argumentam que sempre existe um espao fsico timo para cada fase de desenvolvimento dos insetos. A durao mdia de uma gerao da mariposa-oriental, calculada atravs da tabela de vida de fertilidade, variou entre 37,78 dias na dieta de Ivaldi-Sender e 39,22 dias na dieta base de milho (Tabela 6). O nmero de vezes que a populao aumenta a cada gerao (taxa lquida de reproduo = Ro) foi menor em 1,87 vez quando o inseto foi criado na dieta base de milho (Tabela 6). Os valores de capacidade inata de aumentar em nmero (razo infinitesimal de aumento = rm) e a razo finita de aumento (), que representa o nmero de fmeas adicionadas populao por fmea numa unidade de tempo, foram maiores na dieta de Ivaldi-Sender (Tabela 6).

TABELA 6 - Durao mdia de uma gerao (T), taxa lquida de reproduo (Ro), capacidade inata de aumentar em nmero (rm) e razo finita de aumento () de Grapholita molesta em duas dietas artificiais. Dieta Ivaldi-Sender base de milho T (dias) 37,78 39,22 Ro 3092,06 1639,15 Rm 0,212715 0,188729 (l) 1,23703 1,20800

Considerando-se a tabela de vida de fertilidade como um critrio de avaliao da eficcia de uma dieta para a criao de G. molesta, observou-se que a dieta padro de Ivaldi-Sender foi a que apresentou melhor desempenho pois proporcionou a menor durao de desenvolvimento

e maior razo finita de aumento (Tabela 6). Mesmo assim, a dieta proposta base de milho, mostrou-se adequada criao de G. molesta, pois proporcionou uma viabilidade total do perodo lagarta-adulto da ordem de 87,2% (Tabela 4), valor superior aos 75% preconizados por Singh (1983) 485

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ARIOLI, C. J. et al. Biologia da mariposa oriental em dieta... como referencial para que uma dieta seja considerada adequada para a criao contnua de inseto em laboratrio. Os resultados ora apresentados aliados ao pequeno percentual de pupas (4,9%) e adultos (0%) deformados indicam que a dieta base de milho tambm adequada criao de G. molesta. Dessa forma, mesmo com componentes diferentes dos constituintes da dieta natural (frutos de ma, pssego e marmelo, por exemplo), a dieta base de milho, que tem sido utilizada atualmente em muitos laboratrios do Brasil, pode ser utilizada para a criao de G. molesta.

CONCLUSES
Os resultados do estudo indicam que: a) Lagartas de G. molesta criadas na dieta base de milho apresentam maior durao do perodo lagarta-adulto; b) G. molesta criada na dieta base de milho apresenta menores massas de pupa, perodo de oviposio, longevidade de adultos (machos e fmeas) e fecundidade total; c) Lagartas de G. molesta criadas na dieta base de milho apresentam uma viabilidade total do perodo lagarta-adulto da ordem de 87,2%; d) A dieta base de milho adequada criao de G. molesta em laboratrio.

REFERNCIAS
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Scientia Agraria, Curitiba, v.11, n.6, p.481-486, Nov./Dec. 2010