Outros testes refletem a leso hepatocelular na hepatite viral aguda: Aminotransferases (alanina aminotransferase /ALT e a aspartato aminotransferase /AST),

, previamente denominadas transaminases (respectivamente, TGP e TGO) geralmente encontram-se acima de 500 U.I./L. Bilirrubina Total se eleva, podendo alcanar nveis entre 5 e 20 mg%. Fosfatase Alcalina geralmente est aumentada. Leucograma geralmente revela neutropenia com linfocitose relativa. Na hepatite crnica, a bipsia heptica definir o diagnstico histolgico e permitir avaliao da atividade da doena. CARACTERSTICAS DE DESEMPENHO Sensibilidade e Especificidade O teste foi realizado com um total de 250 amostras, sendo 150 amostras sabidamente positivas e 100 negativas. Foi realizado o teste comparativo com um kit comercial de Eletroquimioluminescncia. Durante os estudos realizados observou-se uma sensibilidade de 100% e Especificidade de 99% para o mtodo. Repetitividade Foram realizados ensaios de 10 replicas para cada uma das 04 amostras estudadas. As amostras eram divididas em negativa, positiva baixo nvel, positiva mdio nvel e positiva alto nvel. Houve correta identificao em mais de 99% das vezes. Reprodutibilidade Foram realizados 10 ensaios independentes para cada uma das 04 amostras estudadas. As amostras eram divididas em negativa, positiva baixo nvel, positiva mdio nvel e positiva alto nvel. Houve correta identificao em mais de 99% das vezes. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA Bonino, F.; Hoyer, B.: nelson, J. et al.: Hepatitis B virus DNA in the sera of HBsAg carries: a maker of active hepatites B virus replication in the liver. Hepatology, 1: 386-91,1981. Clement, F.; Dewint, P.; Leroux-Roels, G. Evaluation of a new rapid test for the combined detection of hepatitis B virus surface antigen and hepatitis B virus e antigen. Journal of

Clinical Microbiology 40(12): 4603-4606. 2002. Kryger, P.; Aldershvile, J.; Mathiesen, L.R.; Nielsen, J.O.: Acute type B hepatitis among HbsAg negative patients detected by anti-HBc IgM. Hepatology, 2(1): 50-3,1982. Sjogren, M.H.: Serologic diagnostics of viral epatitis. Gastroenterol Clin North Am, 23(3): 457-77, 1994. Strauss, E.; Saez-Alquezar, A.; Takeda, A. et al.: Acute hepatitis B in a patient previously positive for antibody to surface antigen (antiHbs) determined by radioimmunoassay. Case report and review of the literature. Rev. Med. Trop. So Paulo, 27(5):258-63, 1985. Tsang, T.K.; Blei, AT.; OReilly, D.J.; Decker, R.: Clinical significance of concurrent hepatitis B surface and antibody positivity. Dig Dis Sci, 31(6): 620-4,1986. http://www.aids.gov.br/assistencia/manual_ dst/hepatite.htm. Acesso em 03/02/2010. Doles: dados de arquivo. TERMOS E CONDIES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO As garantias do fabricante ao consumidor seguem estritamente as relacionadas na Lei no 8.078, de 11 de setembro de 1.990 - Cdigo de Defesa do Consumidor. Os reagentes que compem este sistema para diagnstico so garantidos na sua performance, reprodutibilidade e qualidade at a data de vencimento. Os produtos que apresentarem problemas tcnicos comprovados sero substitudos, sem nus para o consumidor. Doles Reag. Equip. para Laboratrios Ltda. CNPJ: 01.085.513/0001-05 Rodovia BR 153, Km 493, Lt.07 Chcara Retiro, Conjunto Palmares. CEP: 74775-027 Goinia - GO Brasil e-mail: doles@doles.com.br M.S.: n0 10231810107 Reviso: 03 (04/2011)

HBsAg
FINALIDADE Kit para determinao qualitativa do antgeno de superfcie do vrus da hepatite B (HBsAg), por mtodo imunocromatogrfico, usando anticorpos mono e policlonais imobilizados na membrana para identificao seletiva de HBsAg em amostras de soro. Somente para uso diagnstico in vitro. PRINCPIO Os antgenos de superfcie HBsAg presentes na amostra ligam-se ao conjugado gamaglobulinacorante formando um complexo antgenoanticorpo. Este flui pela rea adsorvente da placa-teste indo se ligar aos anticorpos antiHBsAg na rea de positividade da reao (T), determinando o surgimento de uma banda colorida rosa-clara. Na ausncia dos antgenos de superfcie HBsAg no haver o aparecimento da banda colorida na rea T. A mistura da reao continua a fluir atingindo a rea controle (C). O conjugado no ligado ao antgeno une-se aos reagentes desta rea produzindo uma banda colorida rosa, d e m o n s t ra n d o q u e o s r e a g e n t e s e s t o funcionando corretamente. METODOLOGIA Imunocromatogrfico REAGENTE E APRESENTAO PLACA-TESTE: Composta por uma base plstica onde acondicionado o filtro de amostra (fibra de vidro), uma base conjugada (fibra de vidro) contendo uma combinao de anticorpos monoclonais e policlonais de fase slida em forma de sanduche e duas reas, uma seletiva para deteco de nveis elevados do antgeno de superfcie da hepatite B, e a segunda onde existe um conjunto de reagentes que representam o controle de qualidade da placa teste. Todo material montado nesta base plstica acondicionado em um cassete plstico embalado em envelope contendo dissecante. Ref.A Placa-teste: 10 unidades Ref.B Placa-teste: 20 unidades Ref.C Placa-teste: 40 unidades

TESTE RPIDO

EQUIPAMENTOS E MATERIAIS NECESSRIOS NO FORNECIDOS Recipientes para descarte do material Pipeta semi automtica ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE DOS REAGENTES PLACA-TESTE: Conservar entre 2 e 30C. No congelar. As placas so sensveis a umidade, no abrir o envelope at que se tenha alcanado a temperatura ambiente para evitar condensao. Estvel at a data de vencimento indicada no rtulo do produto, obedecidas as condies de armazenamento. CUIDADOS E PRECAUES COM O USO DOS REAGENTES Todos os reagentes so somente para uso diagnstico in vitro. Seu manuseio deve ser cuidadoso, evitando-se o contato com pele e mucosas. Em caso de contaminao acidental, lavar a rea afetada em gua corrente. O descarte do material utilizado dever ser feito obedecendo-se aos critrios de biossegurana estabelecidos pelo laboratrio, de acordo com as normas locais, estaduais ou federais. AMOSTRA Soro lmpido. Amostra utilizada deve estar isenta de hemlise. Utilizar preferencialmente amostras recm colhidas. Se as amostras no forem testadas imediatamente, devem ser refrigeradas temperatura de 2 a 8 C. Para perodos de armazenamento superior a trs dias, o congelamento (-20C) recomendado. Amostras congeladas devem ser descongeladas gradualmente e homogeneizadas ao atingir a temperatura ambiente. Evitar repetidos congelamentos e descongelamentos. Na ocorrncia desta situao h possibilidade de falsos resultados. No utilizar amostras de plasma e sangue total. A presena de anticoagulantes na amostra poder interferir na ao do conjugado, o que causar interferncia no ensaio. No utilizar amostras diludas devido a possibilidade de falsos negativos.

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SAC: (62) 3269 0000 (Grande Goinia) SAC: 0800 644 6433 (Demais localidades)

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PROCEDIMENTO TCNICO As placas e amostras devem estar equilibradas com a temperatura ambiente antes do incio do teste. 1. Retirar a placa teste do envelope e coloc-la sobre uma superfcie plana. 2. Com o auxlio de uma pipeta semiautomtica m L de soro na cavidade da amostra dispensar 100m da placa teste ( )

Invlido O teste ser considerado invlido se no ocorrer a formao de banda na rea controle.

3. A leitura dever ser feita entre 10 e 20 minutos, aps a adio do soro. 4. Qualquer banda de colorao que surja aps 30minutos no tem valor diagnstico. INTERPRETAO DOS RESULTADOS O mtodo detecta o antgeno de superfcie HbsAg em amostras com concentrao do vrus da hepatite B a partir de 10UI/mL. Negativo Haver a formao de uma banda rosa na rea do controle (C).

LIMITAES DO SISTEMA Para se obter timo desempenho do sistema, necessrio que o procedimento tcnico seja rigorosamente seguido conforme instrues de uso. Qualquer alterao poder levar a resultados errneos. Antes do incio do testes, a placa teste e a amostra devem estar equilibradas com a temperatura ambiente. A leitura no deve ser feita aps 20 minutos. O produto indicado para determinar a fase aguda da Hepatite B. um teste de triagem utilizado com a finalidade de detectar a presena do antgeno da Hepatite B. A ocorrncia repetida de resultados positivos para este teste presumvel da presena do vrus na amostra. Em se tratando de um mtodo de triagem os resultados devero ser confirmados por testes mais especficos vide item Diagnstico Laboratorial. CONTROLE DA QUALIDADE DO SISTEMA Ler cuidadosamente as instrues de uso antes de realizar o teste. A data de validade corresponde ao ltimo dia do ms assinalado na etiqueta do envelope da placa-teste e da caixa do kit. Deve-se evitar expor o kit a temperaturas elevadas, bem como diretamente ao sol. No congelar a placa-teste, pois isto causar deteriorao irreversvel. Deixar os reagentes adquirirem a temperatura ambiente antes de iniciar os testes. No usar componentes do kit aps a data de validade. Utilizar as Boas Prticas de Laboratrio (BPLs) na conservao, manuseio e descarte dos materiais. No substituir componentes deste kit com o

de outros fabricantes, nem usar componentes de lotes e cdigos diferentes. Quando realizado o teste, a formao da banda controle na placa teste indica o perfeito desempenho do produto e do procedimento tcnico. aconselhvel associar um sistema de controle de qualidade usando amostras conhecidas, sendo uma negativa e outra com concentrao do vrus da hepatite B a partir de 10UI/mL. SIGNIFICADO CLNICO A hepatite B definida como inflamao do fgado causada por uma infeco pelo Vrus da Hepatite B (HBV), um vrus DNA, da famlia Hepadnaviridae. Os vrus da famlia Hepadnaviridae so hepatotrficos. A sua multiplicao acontece no ncleo da clula infectada, utilizando as enzimas de replicao de DNA da prpria clula humana. A partcula viral ou virion do HBV denominada partcula de Dane podendo ser filamentosa ou esfrica. Possui um envelope bilipdico, onde existe a protena da membrana viral HBs (s de surface: superfcie). O capsdeo interno ao envelope que protege o genoma e algumas cpias de enzima transcriptase, reversa (necessria j que as clulas humanas no a produzem), formado pela protena HBc (c de core: capsdeo). A infeco pelo HBV ocorre atravs de contato sexual, oral, parenteral e uso comum de seringas e agulhas. No Brasil, estudos de prevalncia do HBV detectaram ndice de infeco mdia de 8,0% na regio Amaznia legal, de 2,5% na regio Sudeste e de 1,0% na regio Sul. O perodo de incubao da Hepatite B aguda situa-se entre 45 e 180 dias. Nos pacientes sintomticos, a hepatite B, usualmente, evolui nas seguintes fases: Fase Prodrmica: sintomas inespecficos de anorexia, nuseas e vmitos, alteraes do olfato e paladar, cansao, mal-estar, artralgia, mialgias, cefalia e febre baixa. Fase Ictrica: inicia-se aps 5 a 10 dias da fase prodrmica, caracterizando-se pela reduo de intensidade destes sintomas e

ocorrncia de ictercia. Colria precede esta fase por 2 ou 3 dias. Fase de Convalescena: a sintomatologia desaparece gradativamente, geralmente em 2 a 12 semanas. Na Hepatite B, durante o quadro de infeco aguda, 60 - 70% dos pacientes exibem apenas sintomas da fase prodrmica, se houver 100% de recuperao, torna-se um portador. O quadro clssico de hepatite B se manifesta em 20 a 25% dos infectados. Destes h uma recuperao completa em cerca de 99%. O restante (1%) evolui com quadro de hepatite fulminante e bito. Outros 5 -10% so assintomticos e caracterizados como portadores sadios. Aproximadamente 4 - 5% dos infectados podem apresentar quadro de infeco persistente, havendo a mdio prazo recuperao total. Uma frao destes pacientes (+/-15%) evolui para hepatite crnica. Frao destes infectados pode exibir um quadro terminal de cirrose. Aproximadamente 10% destes cirrticos evoluem para um quadro de carcinoma hepatocelular. DIAGNSTICO LABORATORIAL Realiza-se por meio dos marcadores sorolgicos do vrus da Hepatite B: Antgeno de Superfcie da Hepatite B (HBsAg) o primeiro marcador a aparecer, geralmente precede a hepatite clinicamente evidente, e tambm est presente no portador crnico; Antgeno HBe (HBeAg) detectado logo aps o aparecimento do HBsAg, sua presena indica replicao viral ativa. Sua positividade por 8 a 12 semanas indica o desenvolvimento de hepatite crnica B; Anticorpo contra o antgeno central da Hepatite B tipo IgM (anti-HBc IgM) um marcador da replicao virtica, aparece no incio da hepatite clnica e pode ser o nico marcador sorolgico do tipo agudo presente em alguns pacientes. O paciente com Hepatite B crnica pode apresentar o anti-HBc IgM em baixa concentrao no soro, no sendo detectado nestas circunstncias, de modo que o resultado pode ser positivo na Hepatite B aguda, e negativo, na Hepatite B crnica; Anticorpo superficial da Hepatite B (antiHBs) pode aparecer tardiamente na fase convalescente, e sua presena indica imunidade.

Positivo Haver a formao de duas bandas, ambas rosa. Sendo uma na rea de teste (T) e a outra na rea do controle (C).

Nota: a formao de bandas teste e controle, com diferenas de intensidade de colorao, no afeta o desempenho do teste.

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