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CONTROLE DO CRESCIMENTO MICROBIANO POR AGENTES FSICOS E QUMICOS

Rosana F. S. Santos

POR QUE CONTROLAR O CRESCIMENTO MICROBIANO?

* Prevenir a transmisso de doenas. * Evitar a decomposio de alimentos. * Evitar a contaminao da gua e do ambiente.

O que so agentes antimicrobianos?


Substancias que matam os microrganismos ou previne o seu crescimento. Antibacterianos, antivirais, antifngicos e antiprotozorios

Os agentes antimicrobianos que matam os microrganismos so agentes microbicidas


Bactericida, viricida e fungicida SUFIXO CIDA: Nome dos tratamentos que causam a morte direta dos micrbios (MORTE). SUFIXO STTICO/STASE: Inibem o crescimento e multiplicao SEPSE: Termo grego= estragado/podre (indica contaminao) Assptico = sem contaminao

FUNGICIDA/BACTERICIDA: Quando um determinado produto exerce uma ao especfica sobre determinado grupo de microrganismos.

FUNGISTTICO/BACTERIOSTTICO: devem ser usados apenas quando eles inibem as atividades vitais daquele determinado microrganismo sem mat-lo.

Condies que influenciam a Atividade Antimicrobiana


Tamanho da populao microbiana: Quanto maior a populao, maior o tempo necessrio sua eliminao. Intensidade ou concentrao do agente microbicida: Geralmente, quanto mais concentrado, melhor (exceto lcool)

Tempo de exposio ao agente microbicida: De acordo com normas da OMS, o tempo mnimo de exposio deve ser de 30 minutos. Temperatura em que os microrganismos so expostos ao agente microbicida

Mecanismos de destruio das Clulas Microbianas


Citoplasma: DNA, ribossomos e centenas de enzimas Membrana citoplasmtica: mantm a integridade do contedo celular, controla a passagem de substncias para dentro e fora da clula Parede celular: promove uma proteo que previne o rompimento das clulas aps absoro de gua

1. MTODO FSICO:
- CALOR (SECO OU MIDO) - PASTEURIZAO - FILTRAO - BAIXAS TEMPERATURAS - RESSECAMENTO - PRESSO OSMTICA - RADIAO

CALOR:
MATA OS MICRORGANISMO DESNATURANDO SUAS ENZIMAS

a) CALOR SECO:

Incinerao: processo drstico de eliminao dos microrganismos e que destroem o produto. Flambagem: processo onde o material levado diretamente ao fogo, seja seco ou embebido em lcool (utilizado na desinfeco de alas de vidro). Estufa esterilizante: amplamente utilizada para as vidrarias e outros materiais (160 C/2 h ou 180 C/1 h).

b) CALOR MIDO:

-mata os microrganismos pela coagulao das protenas (ruptura das pontes de h estrutura tridimensional)

-ESTERILIZAO POR CALOR MIDO: - Fervura (100 C) - Vapor de fluxo livre - Autoclave

FERVURA: Mata as formas vegetativas dos patgenos bacterianos, quase todos os vrus e os fungos e seus esporos

VAPOR DE FLUXO LIVRE (NO PRESSURIZADO) Equivalente a gua fervente No mata os endsporos bacterianos e alguns vrus

AUTOCLAVE:

Esterilizao mais confivel: temperatura acima da gua fervente (atravs do vapor sob presso)

121C suficiente para matar todos os organismos e seus endsporos por 15 a 30 min.

PASTEURIZAO: Tratamento Clssico: 63 C por 30 min Pasteurizao de Alta Temperatura e Curto Tempo (HTST high temperature short-time): 72C por 15s

Esterilizao submetido a altas temperaturas (UHT ultra-high temperature) para que possa ser armazenado sem refrigerao (a temperatura vai de 74 C para 140 C e depois retorna para a temperatura inicial) 140 C < 1s (UHT)

FILTRAO: Passagem de um lquido ou gs atravs de um material semelhante a uma tela, com poros pequenos o suficiente para reter os microrganismos.

BAIXAS TEMPERATURAS:

-Depende do tipo de microrganismo intensidade de aplicao.

da

-Diminuio/interrupo do metabolismo celular.

RESSECAMENTO ou DESSECAO: Na ausncia de gua, os microrganismos no podem crescer ou se reproduzir mas podem permanecer viveis por anos atravs das formas de resistncia (endsporos/esporos). Cocos gram negativos como N. gonorrhoeae e N. meningitidis so mais sensiveis dessecao, morrendo em questo de minutos

Streptococcus e outros cocos Gram positivos so mais


resistentes e podem sobreviver por horas

M. tuberculosis, seco em escarro, permanece vivel por


um longo perodo de tempo

RADIAO:

Radiao tem vrios efeitos sobre as clulas, dependendo do seu comprimento de onda, intensidade e durao. Raios gama, X e UV. Essas radiaes podem matar clulas, inclusive microrganismos Destroem composto celulares como DNA e protenas

Definies
(1) (2) (3) (4)

ESTERILIZAO DESINFECO ANTI-SEPSIA SANITIZAO

1. ESTERILIZAO:

Destruio de todas as formas de vida microbiana, incluindo os endosporos (formas mais resistentes) - Mtodo mais comum: Aquecimento Esterilizao comercial: tratamento de calor suficiente para matar os endosporos do Clostridium botulinum nos alimentos enlatados.

2. DESINFECO: - Processo que promove a inibio, morte ou remoo de vrios microrganismos patognicos e saprfitas, sem eliminar todas as formas de vida. (somente a destruio dos patgenos vegetativos e no dos endosporos) - Mtodos: - substncias qumicas - radiao ultravioleta - gua fervente - vapor

3. ANTI-SEPSIA: quando este tratamento para um tecido vivo. Produto qumico = anti-sptico

***Anti-Spticos: menos txicos que os desinfetantes

4. SANITIZAO: Processo que leva reduo dos microrganismos, a nveis seguros, de acordo com os padres de sade pblica (elimina 99,9% das formas vegetativas). Ex. lavagem de copos, talheres e louas com alta temperatura ou aplicando desinfetante qumico.

Agentes qumicos
Os agentes qumicos so usados para controlar o crescimento de microrganismos em ambos os tecidos: vivos e os objetos inanimados.

Dificilmente se obtm a esterilidade (a maioria no reduz a populao microbiana e nem removem as formas vegetativas dos patgenos).

FENOL (cido carblico) E COMPOSTOS FENLICOS-

O fenol por ser txico e apresentar odor desagradvel, no muito utilizado como desinfetante ou anti-spticos

Ao: lesam as clulas microbianas pela alterao da permeabilidade seletiva da membrana citoplasmtica, inativa as enzimas e desnaturam as protenas.

Compostos Fenlicos
So solues contendo dois ou mais agentes fenlicos. So tuberculicidas e fazem a desinfeco em 10 minutos. Podem penetrar na pele intacta causando dano tecidual local, devendo ser utilizado com luvas.

Pastilhas de Garganta: apresenta fenol que tem um efeito analgsico mas baixo efeito antimicrobiano. Em conc. >1% (spray para garganta), >efeito antibacteriano.

Lysol um desinfetante produzido a partir de uma soluo de sabo contendo substancia derivadas de fenol, utilizado para desinfetar objetos inanimados Hexaclorofeno atua como bacteriosttico em bactrias Gram positivas, particularmente em estafilococos. Aplicaes prolongadas do hexaclorofeno so txicas e portanto, a sua utilizao prtica restrita

BIGUANIDAS

-Clorexidina (freqentemente utilizada no controle microbiano da pele e mucosas). -Efetiva para a maioria das bactrias vegetativas e fungos, mas no esporicida

Efeito bactericida: est relacionado leso que este reagente causa a membrana plasmtica.

HALOGNIOS Particularmente Iodo antimicrobianos efetivos) e Cloro (agentes

-I2 efetivo contra todos os tipos de bactrias, muitos endsporos, vrios fungos, alguns vrus e amebicida. -Usado tambm alimentao. sanificar utenslios de

-Os vapores de iodo podem ser utilizados tambm para desinfetar o ar

Mecanismo do I2: inibi a funo protica.

HALOGNIOS
Cl2 Um dos desinfetantes mais utilizados
.Hipoclorito

de clcio: muito usado na sanificao de utenslios em restaurantes e equipamentos de laticnios Hipoclorito de sdio: muito usado como alvejantes domsticos e a uma soluo 1% usado para higiene pessoal e como desinfetante domstico O cloro pode combinar com as protenas celulares e destruir as suas atividades biolgicas

Compostos Clorados
Hipoclorito de sdio de 0,05% a 0,5%. bactericida, viruscida e tuberculicida. Por ser instvel deve ser preparado diariamente. corrosivo para metais, irrita a pele e destri tecidos. Faz desinfeco em 10 minutos.

LCOOIS
Matam efetivamente as bactrias e fungos, mas no os endsporos e os vrus no-envelopados. Os mais utilizados: Etanol (70 %) e Isopropanol (90%) como anti-spticos de pele e como desinfetantes de termmetros clnicos de uso oral e de certos instrumentos cirrgicos.

VANTAGENS: agem e depois evaporam sem deixar resduo.

Mecanismos de ao: desnaturao das protenas, rompimento da membrana e dissoluo de muitos lipdios.

O lcool metilico ou metanol no utilizado como agente antimicrobiano, altamente txico, o seu vapor pode causar seqelas permanente nos olhos

METAIS PESADOS E SEUS COMPOSTOS

- Bastante utilizados como germicidas ou antispticos. - Prata, Mercrio, Cobre e Zinco. - Nitrato de Prata 1%, Cloreto de Mercrio, Sulfato de Cobre, Cloreto de Zinco.

Mecanismos de ao: quando os ons de metal se combinam com os grupos sulfidrilas (-SH) nas protenas celulares ocorre a desnaturao.

Merbronim (mercurocromo), timerosal (mertiolate) e nitromersol (metafen) que so utilizados para tratamento de pequenos cortes, feridas e infeces da pele

Antigamente usava-se soluo 1% de nitrato de prata para prevenir infeces oculares por gonococos em recm-nascidos

AGENTES DE SUPERFCIE So compostos utilizados para limpar superfcies


sabo: pouco valor anti-sptico (mais importante na remoo mecnica atravs da esfregao).

detergentes: reage com a membrana plasmtica (no so txicos)

Quaternrios de amnio: so bactericidas para bactria Gram positivas e negativas Desnaturam as protenas das clulas e lesam a membrana citoplasmtica

Glutaraldedo a 2%
Faz desinfeco em 30 minutos com atividade bactericida, viruscida e tuberculicida. Pode causar irritao tecidual grave, devendo ser manipulado com luvas.

Formaldedo Faz desinfeco em 30 minutos com atividade bactericida, viruscida e tuberculicida. Em concentraes inferiores a 4%, independente do tempo de contato, no faz esterilizao.

Agentes antimicrobianos

Agente Antimicrobiano: qualquer composto


utilizado para tratar doenas produzidas por patgenos. Pode eliminar ou inibir o crescimento de microrganismos, podendo ser de origem natural ou sinttica.

Antibiticos: Alexander Fleming foi o primeiro a


utilizar o termo antibitico para designar molculas produzidas por um determinado organismo capazes de inibir o crescimento de outros.

Caractersticas gerais das drogas antimicrobianas


Toxicidade Seletiva: caracterstica que todo antimicrobiano deve apresentar, pois reflete-se na capacidade de atuar seletivamente sobre o microrganismo, sem provocar danos ao hospedeiro.

Espectro de ao: Refere-se diversidade de organismos afetados pelo agente. Geralmente os antimicrobianos so de pequeno ou de amplo espectro.

Mecanismos de ao dos antimicrobianos

Inibio

da

sntese

da

Parede

Celular:

Penicilinas, ampicilina e cefalosporinas Bacitracina e Vancomicina

Ligao Membrana Citoplasmtica


polimixinas: Ligam-se membrana, entre os fosfolipdios, alterando sua permeabilidade (detergentes). So extremamente eficientes contra Gram negativos, pois afetam tanto a membrana citoplasmtica como a membrana externa.

Inibio da sntese de cidos nuclicos:


Novobiocina: se liga a DNA girase, afetando o desenovelamento do DNA, impedindo sua replicao. Rifampicina: Ligao RNA polimerase DNA-dependente, bloqueando a transcrio.