Centro de Formao Profissional Amrico Renn Giannetti

CURSO TCNICO ! "IOT!CNO#OGIA

Microbiologia Mdica Bacteriologia Infeces
Intestinais
!la$orao%
#arissa Torres& #orena ias
'illena (ardim)
T"**+T
"elo ,ori-onte& ./*0
#ARISSA TORR!S& #OR!NA RICARO ! 'I##!NA (ARI')
'icro$iolo1ia 'dica 2 "acteriolo1ia 2 Infec3es Intestinais
Tra$al4o relati5o a a6la 7r8tica 9& 58lido e a7licado
nas a6las de micro$iolo1ia& na formao do c6rso
de $iotecnolo1ia)
Orientador: Izabel Paixo.
"elo ,ori-onte
./*0
1. Su!rio
o Introd6o)))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))0
o O$:eti5o)))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))));
o 'ateriais e Rea1entes))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))9
o Procedimento))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))<
o Res6ltados e isc6ss3es))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))*.
o Concl6so)))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))*;
o Referncias "i$lio1r8ficas))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))))*9
2. Introduo
$astante com6m as 7essoas desen5ol5erem infeco intestinal) !sta 7ode ser
ca6sada 7or 6ma 5ariedade de a1entes con4ecidos e tanto adultos "uanto
crianas esto #ulner!#eis)
Infeco intestinal 6m mal m6ito com6m de acontecer tanto em crianas =6anto
em ad6ltos) Normalmente& no al1o =6e a7resente m6itos riscos 7ara a sa>de e
de f8cil tratamento) !ntretanto& m6itas 5e-es a infeco intestinal est8 li1ada a
al16ma doena mais 7eri1osa& manifestando+se como 6m sintoma desta) Nestes
casos de5e+se tomar mais ateno)
A infeco intestinal 7ode ser ca6sada 7or 6ma srie de a1entes diferentes como
$actrias& f6n1os& 7arasitas e 5?r6s)
Uma infeco intestinal ainda mais com6m de acontecer no 5ero) Isto 7or=6e& o
cons6mo de alimentos estra1ados e@o6 contaminados mais fre=6ente)
i5ersos icrorganisos encontram no 5ero mais facilmente a tem7erat6ra
ideal 7ara se m6lti7licar) Assim& uitos alientos& =6ando deiAados
em tem7erat6ra am$iente no 5ero aca$am contaminados de5ido B m6lti7licao
destes micror1anismos) As $actrias so os a1entes mais encontrados
em alimentos contaminados) Casos de infeco intestinal ca6sadas 7or $actrias
do g$nero Salmonella ou E. Coli so os mais fre=6entes)
%. Ob&eti#o
!sta$elecer 7rocedimento 7ara identificao de micror1anismo em fe-es
diarreicas e em conte>dos intestinais)
'. Materiais e (eagentes
%.). *idrarias:
"=6er + ;/ m# + P,OCD
!rlenmeEer 2 .;/m# 2 FIRO#A"ORD
Pi7eta 1rad6ada 2 */m# 2 'CD
Pro5eta 2 ;/m# 2 'CD
Placa de 7etriD
T6$os de ensaio com roscaD
#Gmina)
%.+. ,cess-rios:
Pra H7i7etadorID
Ala de 7latinaD
Teso6raD
"ico de "6nsenD
Pi7eta de Paste6rD
Pina)
%.%. ."ui/aentos:
"alana anal?tica 2 Marte AY-22;
'icro+ondas 2 Electrolux;
7,metro 2 MPA 210;
A6tocla5e 2 Phoenix Luferco Linha SD;
"an4o+maria Nova tica;
!st6fa inc6$adora 2 DeLeoD
'icroscJ7io J7tico)
%.'. (eagentes:
A1ar ",I 2 ,I'!IA 2 Falidade% /*@/K@./*KD
A1ar 'acConLeE 2 ,I'!IA 2 Falidade% M/@/;@./*9D
A1ar !'" 2 ,I'!IA 2 Falidade% .<@/.@./*9D
A1ar TSI 2 NASFI 2 Falidade% /M@**@./*KD
A1ar Ra7id 2 ,I'!IA 2 Falidade% /M@./*;D
A1ar SI' 2 ,I'!IA 2 Falidade% M/@/M@./*9D
O16a destilada)
%.0. 1tens2lios:
Caneta de retro7ro:etorD
Al1odo 4idrJfo$oD
!s78t6laD
Fita trmicaD
Fita cre7eD
"ar$anteD
Ga-aD
Pa7el toal4a)
'. Procediento
'.). Pre/aro dos Materiais e Meios de 3ultura Para a Pr!tica:
). Fe-+se os c8lc6los e identifico6+se a =6antidade de cada meio de c6lt6ra =6e
ir?amos 6tili-arD
+. Peso6+se em 6m erlenmeEer& a =6antidade do A1ar ",I =6e ir?amos 6tili-ar e
dil6i6 em ./ m# de 816a destiladaD
%. Peso6+se em 6m erlenmeEer& a =6antidade do A1ar 'acConLeE =6e ir?amos
6tili-ar e dil6i6 em 0/ m# de 816a destiladaD
'. Peso6+se em 6m erlenmeEer& a =6antidade do A1ar !'" =6e ir?amos 6tili-ar e
dil6i6 em ./ m# de 816a destiladaD
0. Peso6+se em 6m erlenmeEer& a =6antidade do A1ar Ra7id =6e ir?amos 6tili-ar e
dil6i6 em ./ m# de 816a destiladaD
4. Peso6+se em 6m $=6er& a =6antidade do A1ar TSI =6e ir?amos 6tili-ar e dil6i6
em ./ m# de 816a destiladaD
5. 'edi6+se o 7, de todos os meios dissol5idos em 816aD
6. Coloco6+se a $oneca tam7ando a P$ocaQ dos erlenmeEers com os meios =6e
seriam a6tocla5adosD
7. Pe1o6+se . t6$os e transferi6+se& 6tili-ando 6ma 7i7eta& */ m# de A1ar TSI 7ara
cada 6m delesD
)8. !m$r6l4o6+se com 7a7el Lraft 0 7lacas de 7etriD
)). !m$r6l4o6+se& com 7a7el Lraft& os erlenmeEers e t6$osD
)+. Coloco6+se todos os materiais na a6tocla5e 7ara a esterili-aoD
)%. A7Js a esterili-ao& coloco6+se os t6$os de TSI 7ara =6e solidificassem
inclinados)
'.+. Inoculao da ,ostra e Placas:
). #i=6efe-+se os meios de c6lt6ras no micro+ondasD
+. 'ante5e os meios de c6lt6ra no $an4o maria& 7ara =6e no solidificassem
no5amenteD
%. #i1o6+se o $ico de $6nsen e 7la=6eo6+se os meios e es7ero6+se =6e os
mesmos se solidificassem nas 7lacasD
'. Com o $ico de $6nsen ainda li1ado e 6tili-ando a ala de 7latina& coleto6+se a
amostra do 7ote e 6tili-ando a ala de 7latina fe-+se o re7icamento da amostra 7or
meio de es1otamentoD
0. !m$r6l4o6+se 6tili-ando fita cre7e as 7lacas e inc6$o6+se as mesmas in5ertidas
a MKRC 7or at 0< 4oras)
'.%. 3olorao de 9ra da ,ostra:
). Coloco6+se 7a7el toal4a na $ancada e encima deles coloco6+se d6as lGminas
de 5idro =6e :8 esta5am imersas no 8lcoolD
+. #i1o6+se o $ico de $6nsen e com a ala de 7latina fe-+se o esfre1ao da
amostra na lGminaD
%. Passo6+se trs 5e-es a lGmina 7ela c4ama 7ara =6e secasseD
'. e7ois de com7letamente seca& fe-+se a colorao de 1ramD
0. #i1o6+se no microscJ7io e identifico6+se as caracter?sticas dos micror1anismos
7resentes)
'.'. Obser#ao das Placas e ,notao dos (esultados:
). Pe1o6+se as 7lacas de 7etri e tiro6+se a fita cre7e das mesmasD
+. O$ser5o6+se as caracter?sticas das colSnias =6e 4a5iam crescido e anoto6+se
os res6ltados)
'.0. 3olorao de 9ra de 1a 3ol:nia:
). Coloco6+se 7a7el toal4a na $ancada e encima deles lGminas de 5idro =6e :8
esta5am imersas no 8lcoolD
+. #i1o6+se o $ico de $6nsen& 7in1o6+se 6ma 1ota de 816a destilada na lGmina& no
es7ao =6e iria reali-ar o esfre1ao e com a ala de 7latina fe-+se o esfre1ao da
colSnia na lGminaD
%. Passo6+se trs 5e-es a lGmina 7ela c4ama 7ara =6e secasseD
'. e7ois de com7letamente seca& fe-+se a colorao de 1ramD
0. #i1o6+se no microscJ7io e identifico6+se as caracter?sticas dos micror1anismos
7resentes)
'.4. ;este de Oxidase:
). #i1o6+se o $ico de $6nsen 7ara =6e o teste todo fosse reali-ado 7rJAimo a eleD
+. Coloco6+se 6ma 1ota de 816a em 6m 7a7el es7ec?fico 7ara reali-ar o testeD
%. Com 6m 7alito& 7esco6+se 6ma colSnia da 7laca e esfre1o6+se no 7a7el& a cor
res6ltante indicaria o res6ltado como 7ositi5o o6 ne1ati5o)
!S" Se fica##e $reto #eria $o#itivo e #e n%o fica##e o re#ulta&o #eria ne'ativo(
'.4. ;este de 3atalase:
). #i1o6+se o $ico de $6nsen 7ara =6e o teste todo fosse reali-ado 7rJAimo a eleD
+. Fe-+se o esfre1ao de 6ma colSnia de cada 7laca na lGmina& 6tili-ando ala de
7latinaD
%. Com 6ma 7i7eta de 7aste6r& 7in1o6+se 6ma 1ota de ,./. em cada lGminaD
'. O$ser5o6+se a efer5escncia e o res6ltado H7ositi5o o6 ne1ati5oI de7endia dela)
'.5. (e/icaento e ;ubos:
). #i1o6+se o $ico de $6nsen 7ara =6e 7rocedimento todo fosse reali-ado 7rJAimo
a eleD
+. Re7ico6+se a amostra HcolSniaI em A1ar TSI Hanteriormente inclinadoI e no SI'&
6tili-ando a tcnica da P7icada centralQD
%. Inc6$o6+se os t6$os a MKRC 7or at 0< 4oras)
'.6. <eitura dos ;ubos
). Pe1o6+se os t6$os e o$ser5o6+se 7ro7riedades como esc6recimento& motilidade
e coloraoD
+. Reali-o6+se o teste de No5acL e o$ser5o6+se se o conte>do do t6$o o$te5e
6ma colorao 5ermel4a na s67erf?cieD
%. Anoto6+se os res6ltados e o$ser5a3es e $aseado neles com7aro6+se com
ta$elas =6e indicariam a 7resena de determinados micror1anismos)
0. (esultados e =iscusso
0.). 3!lculos Para o Pre/aro do ,gar B>I:
;.1 ++++++ *///m#
A +++++++++++ ./m#
A T *&/01 de A1ar ",I)
0.+. 3!lculos Para o Pre/aro do ,gar Mac3on?e@:
;*&;1 +++ *///m#
A ++++++++++ ./m#
CT *&/M1 de A1ar 'C)
0.%. 3!lculos Para o Pre/aro do ,gar .MB:
M9&U91 +++ *///m#
A +++++++++++ ./m#
CT /&K01 de A1ar !'")
0.'. 3!lculos Para o Pre/aro do ,gar ;SI:
90&;1 +++ *///m#
A +++++++++++ ./m#
CT *&.U1 de A1ar TSI)
0.0. 3!lculos Para o Pre/aro do ,gar SIM:
M9&.M1 +++ *///m#
A +++++++++++ */m#
CT /&M91 de A1ar SI')
0.4. 3!lculos Para o Pre/aro do ,gar (a/id:
M9&U91 +++ *///m#
A +++++++++++ ./m#
CT /&K01 de A1ar Ra7id)
0.5. ;abela ): /> .ncontrado e 3ada Meio =issol#ido e Agua
Meio de 3ultura /> (ecoendado /> .ncontrado
,gar (a/id 9&< V@+ /&. 9&<
,gar SIM K&M V@+ /&. K&0
,gar ;SI K&M V@+ /&. K&M
,gar .MB K&. V@+ /&. K&/
,gar Mac3on?e@ K&* V@+ /&. K&.
0.6. 3olorao de 9ra da ,ostra e Obser#ao no Microsc-/io
Fe-+se d6as lGminas com o esfre1ao da amostra de fe-es) Ao o$ser5a+las no
microscJ7io o$ti5eram+se os se16intes res6ltados%
o #Gmina com esfre1ao de fe-es *% "acilos 1ram ne1ati5os e le5ed6ras)
o #Gmina com esfre1ao de fe-es .% Sta$h)lococcu# 1ram 7ositi5o)
0.7. <eitura das Placas ,/-s Incubao
o Placa com o A1ar Ra7id% ColSnias com as7ecto 5iscoso na cor a-6l)
o Placa com o A1ar ",I% ColSnias com as7ecto 5iscoso na cor $ranca)
o Placa com o A1ar 'acConLeE% ColSnias rosas com descoramento no meio)
o Placa com o A1ar !'"% ColSnias 5erde met8licas& com teAt6ra)
0.)8. 3olorao de 9ra da 3ol:nia e Obser#ao no Microsc-/io
o Placa com o A1ar Ra7id% "acilos 1ram ne1ati5o)
o Placa com o A1ar ",I% "acilos 1ram ne1ati5o)
o Placa com o A1ar 'acConLeE% "acilos 1ram ne1ati5o)
o Placa com o A1ar !'"% "acilos 1ram ne1ati5o)
0.)). ;abela +: (esultado do ;este de Oxidase e 3atalase
;este (esultado
Oxidase Todos ne1ati5o& 7ois ao fa-er o esfre1ao no 7a7el no res6lto6 a cor
7reta)
3atalase Todos 7ositi5os& eAceto o !'" H7or=6e ele no efer5esce6I& ao contr8rio
dos o6tros =6e fer5esce6 e 7ortanto o res6ltado 7ositi5o)
0.)+. (esultado dos ,Bcares Cerentados
o ;ubo de ;SI): Sacarose e lactose de5ido ao $isel 5ermel4o& motilidade e
7rod6o de 18s)
'icror1anismos 7ro585eis% Sal*onella t)$hi*uriu*+ Proteu# *ira,ili#+ Proteu#
vul'ari#+ Proteu# *ira,ili#)
o ;ubo de ;SI+: Glicose de5ido ao f6ndo 5ermel4o& 7rod6o de 1ases e
motilidade)
'icror1anismo 7ro585el% -itro,acter freun&u)
o ;ubo de SIM: MotilidadeD escureciento no bisel e /roduo de gases.
'icror1anismos 7ro585eis% Proteu# vul'ari#+ Entero,acter cloacal
4. 3oncluso
!sta$elece6+se 7rocedimento 7ara identificao de micror1anismo em fe-es
diarreicas e em conte>dos intestinais)
5. (efer$ncias Bibliogr!ficas
'c Faddin& ()F) "ioc4emical tests for identification of medical $acteria) !d) Wiliiam
X WilinLs Co)& "altimore& *U</D
'in4a 5ida% infeco intestinal 2 'AYI#I& Pa6lo) Acesso em *K de a1osto& ./*0D
"oo7& C)A) 'an6al of clinical micro$iolo1E)Kt4 !d)& !d) '6rraE& American SocietE
for 'icro$iolo1E& Was4in1ton& C& *UUU)