Biotecnologia

Cerrados
BIOTECNOLOGIA, TRANSGNICOS E
BIOSSEGURANA
Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria

Embrapa Cerrados
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento
BIOTECNOLOGIA, TRANSGNICOS E
BIOSSEGURANA
Editores Tcnicos
Fbio Gelape Faleiro
Solange Rocha Monteiro de Andrade
Embrapa Cerrados
Planaltina, DF
2009
Exemplares desta publicao podem ser adquiridos na:

Embrapa Cerrados
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Coordenao editorial
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Editorao eletrnica
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Reviso de texto
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Francisca Elijani do Nascimento
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Capa
Renato Berlim Fonseca
Normalizao bibliogrfica
Rosngela Lacerda de Castro
Projeto grfico
Fotos
Embrapa Cerrados
1 edio
1 impresso (2009): 1.000 exemplares
Todos os direitos reservados.

A reproduo no autorizada desta publicao, no
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(Lei n 9.610).
Dados Internacionais de Catalogao na Publicao - CIP
Embrapa Cerrados
B616
Biotecnologia, transgnicos e biossegurana /

editores tcnicos: Fbio Gelape Faleiro, Solange Rocha Monteiro
de Andrade. Planaltina, DF : Embrapa Cerrados, 2009.
183 p. : il.
ISBN 978-85-7075-050-1
1. Engenharia gentica. 2. Planta transgnica. 3. Organismo
geneticamente modificado. 4. Melhoramento gentico. I. Faleiro, Fbio
Gelape. II. Andrade, Solange Rocha Monteiro de.
631.5233 - CDD 21
Embrapa 2009
AUTORES
ANDR NEPOMUCENO DUSI
Engenheiro Agrnomo, Ph.D.

Pesquisador da Embrapa Hortalias
dusi@cnph embrapa.br
AUSTECLINIO LOPES DE FARIAS NETO

Engenheiro Agrnomo, D.Sc.
Pesquisador da Embrapa Cerrados
auster@cpac.embrapa.br
CLAUDETE TEIXEIRA MOREIRA
Engenheira Agrnoma, M.Sc.

Pesquisadora da Embrapa Cerrados
claudete@cpac.embrapa.br
DEISE MARIA FONTANA CAPALBO
Engenheira de Alimentos, D.Sc.

Pesquisadora da Embrapa Meio Ambiente
deise@cnpma embrapa.br
FBIO BUENO DOS REIS JUNIOR

fabio@cpac.embrapa.br
FBIO GELAPE FALEIRO

ffaleiro@cpac.embrapa.br
FRANCISCO JOS LIMA ARAGO

Pesquisador da Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia
aragao@cenargen.embrapa.br
IDA DE CARVALHO MENDES
Engenheira Agrnoma, Ph.D.

mendesi@cpac.embrapa.br
JOS FRANCISCO DE FERRAZ TOLEDO

Embrapa Soja
toledo@cnpso.embrapa.br
MARIA JOS AMSTALDEN MORAES SAMPAIO

Pesquisadora da Embrapa-Sede
zeze.sampaio@embrapa.br
MARIANGELA HUNGRIA

Pesquisadora da Embrapa Soja
hungria@cnpso.embrapa.br
MNICA CIBELE AMNCIO
Advogada e Biloga, M.Sc.

Analista da Embrapa Transferncia de Tecnologia
monica.amancio@embrapa.br
NELSON DOS SANTOS E SILVA
Qumico
Assistente da Embrapa Cerrados
nelson.chemie@gmail.com
NEYLSON EUSTQUIO ARANTES

Pesquisador da Embrapa Soja
neylson@epamiguberaba.com.br
PLNIO ITAMAR DE MELLO DE SOUZA

plinio@cpac.embrapa.br
SRGIO ABUD DA SILVA
Bilogo
Tcnico Agrcola da Embrapa Cerrados
abud@cpac.embrapa.br
SOLANGE ROCHA MONTEIRO DE ANDRADE

Biloga, D.Sc.
solange@cpac.embrapa.br
Dedicamos este livro aos pesquisadores, professores e estudantes que

trabalham com biotecnologia, transgnicos e biossegurana,
levando o Brasil ao mais elevado nvel de
competncia cientfica e tecnolgica.
APRESENTAO
Este livro um dos produtos cientficos do I Seminrio sobre

Biotecnologia e Engenharia Gentica e II Seminrio sobre Transgnicos
e Biossegurana realizados na Embrapa Cerrados, na ocasio
da comemorao dos seus 30 anos. Nesses seminrios foram
debatidos temas atuais relacionados biotecnologia moderna e aos
transgnicos, os avanos e as perspectivas das pesquisas envolvendo
o desenvolvimento de transgnicos, os diferentes aspectos tcnicos
e legais relacionados biossegurana e , por ltimo, os trabalhos
realizados na Embrapa e mais especificamente na Embrapa Cerrados.
Atualmente, a mdia est sendo bombardeada por inmeras
reportagens sobre a biotecnologia e os produtos transgnicos, muitas
vezes sem o devido embasamento tcnico-cientfico. As informaes
repassadas para a sociedade, muitas vezes, so deturpadas por
ideologias, medo, sensacionalismo e pela prpria desinformao. Nesse
sentido, os seminrios realizados na Embrapa Cerrados e a edio
deste livro tiveram como principais objetivos aprofundar a discusso
sobre o tema e apresentar os trabalhos realizados na Embrapa e as
potencialidades da tecnologia em benefcio da sociedade.
Jos Robson Bezerra Sereno

Chefe-Geral da Embrapa Cerrados
SUMRIO
Captulo 1
Biotecnologia e Transgnicos ............................................................... 15
Captulo 2
Engenharia Gentica - Estado da Arte .................................................. 31
Captulo 3
Breve Histrico da Biossegurana dos Transgnicos .......................... 49
Captulo 4
A Biossegurana Ambiental .................................................................. 61
Captulo 5
Biossegurana Alimentar ....................................................................... 77
Captulo 6
Aspectos Legais da Pesquisa com Transgnicos no Brasil ................. 89
Captulo 7
A Rede de Biossegurana da Embrapa .............................................. 109
Captulo 8
As Plantas Transgnicas e a Microbiota do Solo ................................ 119
Captulo 9
A Importncia da Avaliao da Fixao Biolgica do Nitrognio em Soja
Transgnica com Resistncia ao Glifosato ......................................... 147
Captulo 10
O Programa de Melhoramento de Soja Transgnica para o
Cerrado ................................................................................................ 169
CAPTULO 1
BIOTECNOLOGIA E TRANSGNICOS
FBIO GELAPE FALEIRO
A Biotecnologia, conceitualmente,
a unio da biologia com a
tecnologia. um conjunto de
tcnicas que utiliza os seres vivos
no desenvolvimento de processos
e produtos que tenham uma
funo econmica e (ou) social.
A biotecnologia envolve vrias
reas do conhecimento e, em
conseqncia, vrios profissionais,
sendo uma cincia de natureza

multidisciplinar.
Apesar de o termo biotecnologia ser
novo, o princpio muito antigo. Por
exemplo, a utilizao da levedura
na fermentao da uva e do trigo
para produo de vinho e do po
(Fig. 1) vem de muitos anos antes
de Cristo.
Fig. 1. Levedura, uva, trigo, po e vinho.
BIOTECNOLOGIA, TRANSGNICOS E BIOSSEGURANA
17
Com a evoluo da cincia em

seus diversos setores, inmeras
metodologias biotecnolgicas tm
sido sistematizadas, aumentando
seus benefcios econmicos,
sociais e ambientais. Vrios
cientistas tiveram, com suas
descobertas, grande importncia
para a evoluo e sistematizao
da biotecnologia. Por exemplo,
Louis Pasteur com a descoberta dos
microrganismos em 1861 (Fig. 2). Tal
descoberta revolucionou a medicina
com a produo das vacinas e
trouxe aplicaes para a melhoria
de processos e tcnicas industriais
e agropecurias que utilizam os
microrganismos. No Brasil, Oswaldo
Cruz foi um importante seguidor
de Louis Pasteur (Fig. 2). Quase
90 anos depois de sua morte,
lembrado em cada canto do
territrio nacional, embora tenha
tido, na poca, a incompreenso
de seus contemporneos por causa
de suas campanhas sanitrias,
que tornaram a vacinao uma
prtica corriqueira e de extrema
importncia no Brasil.
Outros cientistas que merecem
destaque dentro da biotecnologia so
Gregor Mendel (Fig. 3), considerado
o pai da gentica, com a descoberta
18
da hereditariedade (como as
caractersticas passam de gerao
para gerao) em 1865, James
Watson e Francis Crick (Fig. 3) com
a descoberta da estrutura do DNA
(cido desoxirribonuclico, molcula
responsvel pela informao gentica
de cada ser vivo) em 1953.
A partir da descoberta da estrutura
do DNA, houve uma revoluo
na rea da gentica e biologia
molecular, surgindo, ento, a
biotecnologia moderna, que
consiste na manipulao controlada
e intencional do DNA por meio
das tcnicas de engenharia
gentica. Utilizando tais tcnicas,
foram possveis a produo de
insulina humana em bactrias e
o desenvolvimento de inmeras
plantas transgnicas a partir da
dcada de 1980.
As vrias tcnicas relacionadas
biotecnologia tm trazido, via de
regra, benefcios para a sociedade
(Fig. 4 e 5). As fermentaes
industriais na produo de
vinhos, cervejas, pes, queijos e
vinagres; a produo de frmacos,
vacinas, antibiticos e vitaminas; a
utilizao de biocidas no controle
biolgico de pragas e doenas; o
das plantas; o desenvolvimento de

plantas e animais melhorados por
meio de tcnicas convencionais de
melhoramento gentico e tambm a
transformao gentica.
uso de microrganismos visando

biodegradao de lixo e do esgoto;
o uso de bactrias fixadoras de
nitrognio e fungos micorrzicos
para a melhoria de produtividade
Fig. 2. Louis Pasteur (a); microrganismos (b); Oswaldo Cruz (c);

vacinao (d).
Fig. 3. Mendel e seus experimentos (a); Watson e

Crick e a estrutura do DNA (b).
19
Fermentaes
industriais
Cultura de
tecidos e clulas
Produo de
frmacos
Melhoramento
gentico
Clonagem
Biotecnologia
Anlises do
DNA
Produo
das vacinas
Controle
biolgico
Uso de
microrganismos
na agricultura
Transformao
gentica
Fig. 4. Principais tcnicas relacionadas

biotecnologia.
Vinhos, cerveja, pes,

queijos, vinagres
Antibiticos
e vitaminas
Biodegradao
Plantas e animais
melhorados
geneticamente
Multiplicao de
recursos genticos
Biotecnologia
Testes de
paternidade
Vacinas para o
homem e animais
domticos
Plantas e animais
transgnicos
Biocidas
Bactrias fixadoras
de nitrognio e fungos
micorrzicos
Fig. 5. Principais
P i i i produtos
d t da
d biotecnologia.
bi t
l i
20
A transformao gentica, como

uma das tcnicas da biotecnologia
moderna, definida como sendo
a introduo controlada de cidos
nuclicos (genes) em um genoma
receptor por meio da tecnologia
do DNA recombinante. O DNA o
constituinte celular que contm a
informao gentica responsvel por
todas as caractersticas (fentipo)
de determinado organismo, sendo a
base do dogma central da biologia
molecular (Fig. 6).
A informao gentica do
DNA herdada dos parentais
depois do cruzamento entre
eles. Os melhoristas de plantas
e de animais utilizam-se dessa
capacidade de cruzamento para
gerar novos organismos com
caractersticas fenotpicas de
interesse. Aproximadamente 50 %
do aumento da produtividade das
culturas de soja, milho, arroz e trigo
atribudo a combinaes gnicas
no DNA originadas de cruzamentos
realizados em programas de
melhoramento gentico. Esses
cruzamentos somente podem ser
feitos entre organismos da mesma
espcie ou de espcies muito
relacionadas geneticamente, em
virtude da barreira estabelecida pela
compatibilidade sexual. Essa barreira
rompida pela transformao gentica,

abrindo novas possibilidades para o
melhoramento gentico. Mediante a
transformao, possvel transferir,
para as plantas, genes isolados de
plantas de outras espcies ou mesmo
de microrganismos e de animais, o
que pode trazer vantagens para a
agricultura, meio ambiente, medicina
e tambm para a pesquisa bsica
no estudo da informao gentica.
A transformao gentica amplia
consideravelmente a disponibilidade
de genes desejveis e diminui o
tempo gasto para obteno das
plantas melhoradas. A importncia
e os avanos das pesquisas com os
transgnicos e a engenharia gentica
o tema central do Captulo 2.
Diferentes tcnicas de
transformao gentica foram
estabelecidas, recentemente, com
o desenvolvimento da cultura
de tecidos e da engenharia
gentica. Essas tcnicas podem
ser divididas em duas categorias:
indireta e direta e so baseadas no
procedimento para a transferncia
de genes.
Na transferncia indireta, para realizar
a transformao, utiliza-se um vetor,
como Agrobacterium tumefaciens e
Agrobacterium rhizogenes (Fig. 7).
Esses vetores so bactrias que
21
engenharia gentica, retirando os

genes nocivos planta para colocar
no lugar os genes de interesse,
mantendo-se a capacidade de
transferncia do DNA da bactria
para a planta.
possuem a capacidade de transferir

naturalmente para as plantas parte
de seu DNA, induzindo-as a sintetizar
substncias para seu crescimento.
Depois dessa descoberta, cientistas
alteraram o DNA da bactria por
Ambiente
RNA
DNA
Protenas
Fentipo
Fig. 6. DNA como base do dogma central da biologia molecular.
Agrobacterium
T-DNA
Regio
vir
Plasmdeo
Ti
Clula transformada
Fig. 7. Transferncia indireta.
22
Na transferncia direta, so usados

mtodos fsicos ou qumicos que
objetivam romper a barreira da
parede celular e(ou) da membrana
plasmtica para a livre penetrao
do DNA na clula. Numerosos
sistemas de transformao
direta j foram descritos, entre
eles, a acelerao de partculas,
polietilenoglicol, eletroporao,
lipossomos, micro e macroinjeo
(Fig. 8).
O mtodo de acelerao de
partculas consiste em dar um
tiro de DNA nas clulas-alvo de
transformao. Para isso, foram
desenvolvidos aparelhos de alta
presso a gs que empurram
micropartculas de ouro ou
tungstnio cobertas com o DNA
de interesse para as clulas-alvo.
Essas partculas penetram nas
clulas e liberam o DNA, que
integrado ao genoma da clula.
Os mtodos de transformao por
polietilenoglicol e eletroporao
utilizam principalmente protoplastos
(clulas vegetais sem a parede
celular), que ficam em contato com
o DNA de interesse. O uso de um
detergente (polietilenoglicol) ou
de pulsos eltricos (eletroporao)
induz a formao de poros na
membrana celular, permitindo a

entrada do DNA e sua integrao
ao genoma. A microinjeo permite
a introduo do DNA diretamente
dentro do ncleo. Entretanto, uma
tcnica que exige muito treinamento
para a manipulao do aparelho,
sendo utilizada, sobretudo, para
a transformao de clulas de
animais.
Alm do mtodo de transformao
propriamente dito, outras etapas
esto envolvidas na obteno de
um organismo transgnico, como
o isolamento e a caracterizao do
gene de interesse, a construo do
cassete de expresso, a introduo
e a incorporao do gene, a
regenerao e a seleo das clulas
transformadas, a aclimatao e
os diferentes testes genotpicos e
fenotpicos com os transgnicos.
Essas etapas envolvem tecnologias
de engenharia gentica e
tambm a cultura de tecidos.
Para realizar a transformao
gentica de determinada espcie,
essencial que todo o processo
de regenerao e de seleo das
clulas transformadas mediante a
cultura de tecidos esteja otimizado
(Fig. 9). Diferentes estratgias
podem ser utilizadas em cada etapa
23
da transformao gentica, sendo

que a escolha da mais adequada
depende da espcie, do tipo de
explante usado e do objetivo da
transformao.
Logicamente, a tecnologia de
transformao gentica no
se encerra com a obteno do
transgnico que expresse a
caracterstica-alvo. Para que o
transgnico seja efetivamente
incorporado ao sistema produtivo,
necessrio que ele no
apresente riscos sade e ao
ambiente. Portanto, rigorosos
testes devem ser realizados em

laboratrio, casa de vegetao e
no campo (Fig. 10), bem como
as vrias normas de segurana
devem ser respeitadas. Embora
a base do trabalho de avaliao
de riscos seja a mesma, no se
pode fazer generalizaes, pois
cada transgnico e sua utilizao
apresentam especificidades
que devem ser conhecidas,
caracterizadas e sempre
levadas em considerao.
Portanto, para a liberao, cada
transgnico deve ser avaliado
individualmente.
Eletroporao
Biobalstica
Microinjeo
Clula transformada
Fig. 8. Mtodos de transformao direta.
24
Calo
Organogenese
Clulas-alvo
Alongamento
Transgnico
Aclimatao
Enraizamento
Seleo
Fig. 9. Regenerao e seleo de clulas transformadas mediante tcnica de cultura de

tecidos.
Fig. 10. Testes de plantas transgnicas no

laboratrio, casa de vegetao e campo.
25
Todas as etapas para obteno de

transgnicos so regulamentadas
pela lei. Existe um arcabouo
legal (Fig. 11) e uma nova Lei de
Biossegurana, sancionada no
dia 24 de maro de 2005, os quais
sero detalhados no Captulo 6.
De modo geral, os riscos vo desde
a fase laboratorial at o destinatrio
final do produto, passando por
danos ao ecossistema. Entre os
principais cuidados, podem-se
citar o fluxo gnico, a segurana
Lei de
Biossegurana
n8.974/1995
alimentar, a criao de novas

pragas e plantas daninhas, a
produo de substncias txicas
a organismos no-alvo, as
perturbaes de comunidades
biticas, os efeitos adversos a
processos dos ecossistemas. Todos
os riscos devem ser considerados
na anlise caso a caso de cada
transgnico. Nos captulos 3, 4 e
5, so relatadas mais informaes
sobre a biossegurana dos
transgnicos.
MP
n 2.191/2001
Legislaes
Estaduais
Decreto
n 1.752/1995
Lei n
10.688/2003
RET
IN 2002
Nova Lei de
Biossegurana
Decreto
Rotulagem
n 4.074/2003
Lei 10.8.14
/2003
Lei de
Lei
Agrotxicos Ambiental
n7.802/1989 n 6.938
/1981
Lei n
10.165/2000
Resoluo
305 Conama
2002
Fig. 11. Arcabouo legal para obteno de transgnicos.
26
IN Ibama
/2003
Na Embrapa, existe uma rede

de pesquisa para estudar
a biossegurana de quatro
transgnicos. O propsito da
Embrapa gerar conhecimentos
na rea de biossegurana
considerando todos os riscos
potenciais dos transgnicos
relacionados sade humana e ao
meio ambiente. Tais conhecimentos
vo municiar os tomadores de
opinio, desenvolvendo protocolos
e mtodos para uma avaliao
eficiente dos riscos. A rede de
biossegurana da Embrapa,
alm de trabalhar diretamente na
questo de biossegurana, tem
como funo capacitar o Estado
para atuar efetivamente nessa
nova rea do conhecimento.
Nos captulos 7, 8, 9 e 10, so
relatadas mais informaes sobre
o trabalho realizado na Embrapa
e, particularmente, na Embrapa
Cerrados.
Considerando todos os cuidados
com a biossegurana de
transgnicos, at o momento,
os produtos desenvolvidos com
base nessas tcnicas na rea
de frmacos e agricultura foram
produzidos e comercializados
sem evidncia de danos ao
homem ou ao meio ambiente e

trouxeram, via de regra, benefcios
sociedade. Entre os benefcios
dos transgnicos, podem-se
citar aqueles relacionados
agricultura (plantas tolerantes a
pragas, doenas e herbicidas,
com maior tempo de prateleira,
mais produtivas, tolerantes a
reas pouco adaptadas ao cultivo
e com maior valor nutricional);
medicina (produo de vacinas
e frmacos em planta, aumento
da produo de compostos
teraputicos) e pesquisa bsica
(entendimento dos processos
de armazenamento, expresso e
regulao da informao gentica)
o que traria benefcios a produtores,
consumidores e tambm ao meio
ambiente. Na Fig. 12, esto alguns
exemplos de plantas transgnicas.
Existem diferentes explicaes para
a presso contra os transgnicos
como questes comerciais,
interesses de mercados ligados
a indstrias de agroqumicos e a
desinformao.
As informaes repassadas para
a sociedade sobre a biotecnologia
moderna, muitas vezes, so
deturpadas por ideologias, medo,
27
sensacionalismo e pela prpria

desinformao. Atualmente, a
mdia est sendo bombardeada
com inmeras reportagens sobre
a biotecnologia e os produtos
transgnicos. Esse assunto
, s vezes, vulgarizado, visto
que polticos, advogados,
jornalistas e at sindicalistas esto
falando sobre um tema que
essencialmente tcnico. Nesse
sentido, necessrio leitura muito
crtica sobre todas as reportagens
que envolvem a biotecnologia
e os produtos transgnicos.
Certas perguntas devem ser
feitas: Quem escreveu o artigo?,
Qual o sistema estudado?, Qual
metodologia foi utilizada?, Quais
os interesses envolvidos?, Quais
os pontos negativos e positivos?, A
reportagem baseada em critrios
tcnicos e cientficos?
inquestionvel que a
biotecnologia, incluindo as
tecnologias de transformao
gentica, hoje uma das
ferramentas de grande importncia
para o desenvolvimento de uma
28
agricultura mais produtiva, saudvel

e sustentvel, menos dependente
do uso de agroqumicos, alm de
propiciar benefcios a diferentes
setores da sociedade. A evoluo
da cincia biotecnolgica
est caminhando a passos
largos e pode-se dizer que a
biotecnologia moderna ainda
uma criana, considerando
todas as potencialidades e o que
ainda vai ser descoberto. Nesse
sentido, estratgico para o
Brasil aumentar o investimento em
cincia e tecnologia e desobstruir
tudo o que tem dificultado as
pesquisas. Tais pesquisas tm
assumido uma importncia
cada vez maior nas tomadas de
deciso sobre todos os assuntos
relativos a transgnicos. Assim,
necessrio que a sociedade no
seja contra a biotecnologia e os
transgnicos, mas sim contra tudo
o que dificulta as pesquisas como
o baixo investimento em cincia e
tecnologia e processos altamente
burocrticos que impedem o seu
andamento.
Fig. 12. Alguns exemplos de plantas transgnicas: soja tolerante a herbicidas;

milho e algodo resistentes a insetos; feijo, mamo e batata resistentes a
vrus; tomate e alface resistentes a fungos; arroz, brcolis, milho e tomate
com melhores qualidades nutricionais; tomate com maior tempo de prateleira;
plantas ornamentais com caractersticas diferenciadas.
29
CAPTULO 2
ENGENHARIA GENTICA
ESTADO DA ARTE
FRANCISCO JOS LIMA ARAGO
ENGENHARIA GENTICA - ESTADO DA ARTE

O melhoramento de plantas
iniciou-se por volta de 8 mil
a 10 mil anos atrs quando o
homem pr-histrico comeou a
ter as primeiras tentativas bemsucedidas de cultivo. Desde ento,
o homem vem domesticando as
plantas, escolhendo aquelas mais
adequadas ao cultivo, melhores,
maiores e mais bonitas para sua
alimentao e para a produo de
fibras. Essa seleo, associada
s necessidades de plantio,
cultivo, colheita e armazenamento,
exerceu uma presso seletiva nas
espcies cultivadas, diferenciando
as linhagens cultivadas de seus
parentes silvestres.
No incio do sculo XX, com
a redescoberta das leis da
hereditariedade, anteriormente
formuladas por Gregor Mendel em
1865, o melhoramento de plantas
teve grande impulso e, durante o
ltimo sculo, transformou-se em
uma disciplina bastante complexa.
Novas tcnicas foram incorporadas
ao melhoramento gentico e
contriburam bastante para diminuir
o tempo necessrio para obter

novas variedades, bem como para
gerar novas fontes de variabilidade
gentica. Entre essas tecnologias,
pode-se mencionar a induo de
mutao por tratamentos qumicos
ou fsicos.
Com o avano do conhecimento
em genmica, novas ferramentas
advindas da biologia celular e
molecular tm sido adicionadas
para direcionar os cruzamentos
controlados, com o uso de
marcadores moleculares e,
finalmente, transferir genes
entre espcies sexualmente
incompatveis, com o uso da
engenharia gentica, o que tem
permitido ampliar as possibilidades
de estratgias que podem ser
utilizadas pelos programas de
melhoramento.
Os principais objetivos do
melhoramento gentico so:
resistncia a doenas e a
insetos; adaptao aos estresses
ambientais; e melhoria da
qualidade nutricional. No entanto,
o objetivo mais importante o
33
aumento da segurana no cultivo

de plantas, ou seja, o incremento
da probabilidade de uma colheita
com sucesso. Nesse sentido,
plantas mais resistentes a pragas,
mais produtivas e nutricionalmente
melhoradas e tolerantes a
estresses ambientais, como seca,
frio e solos salinos, contribuem
significativamente para a segurana
alimentar da sociedade, direta
ou indiretamente dependente da
produo agrcola.
A engenharia gentica, que
permite a manipulao do material
gentico dos organismos, surgiu
em 1972, quando cientistas da
Universidade de Stanford, nos
Estados Unidos, conseguiram ligar
seqncias de DNA de Escherichia
coli a do Simian papiloma virus.
Em virtude desse resultado, o lder
do projeto, Dr. Paul Berg, ganhou
o Prmio Nobel em 1980. Como
conseqncia dessas pesquisas,
o primeiro organismo transgnico
E. coli, contendo seqncias
de DNA de Xenopus laevis, foi
produzido em 1973. Com isso,
abriram-se as portas para transferir
certas caractersticas prprias
de um organismo para outro. A
primeira utilizao comercial dessa
34
nova tecnologia foi a produo

de insulina humana em bactria.
Hoje, mais de 400 genes de
protenas com potencial para
o uso teraputico na medicina
humana e veterinria j foram
obtidos. Mais de 30 desses
genes foram introduzidos em
organismos transgnicos que
geraram medicamentos aprovados
e utilizados em vrias partes do
mundo.
Os genes que controlam ou esto
envolvidos na determinao de
certas caractersticas importantes
para a agricultura podem ser
isolados de qualquer organismo e
introduzidos em qualquer espcie
vegetal. Depois de sua clonagem
e caracterizao, o gene de
interesse dever ser introduzido no
genoma da planta hospedeira. A
transformao gentica de vegetais
superiores tem tido avanos
considerveis nas ltimas duas
dcadas. Foram desenvolvidos
sistemas de transformao para
praticamente todas as espcies
agrcolas importantes. Atualmente,
os mtodos mais empregados so
a introduo de genes mediada
por Agrobacterium e o processo
biobalstico.
A obteno de plantas transgnicas

pela introduo de genes,
mediada por Agrobacterium,
baseia-se na capacidade de essas
bactrias transferirem seqncias
especficas do seu DNA para o
genoma vegetal. Esse sistema
relativamente simples e, em
muitos casos, eficiente e de baixo
custo. Usualmente, os tecidos
transformados devem passar
por uma etapa de cultura in vitro,
visando regenerao de uma
planta transgnica completa.
Outras espcies de bactrias dos
gneros Rhizobium, Sinorhizobium
e Mesorhizobium tambm podem
ser utilizadas para transferncia
de genes exgenos para clulas
vegetais. Alm disso, vrus tm
sido, igualmente, utilizados para
introduo e expresso de genes
em plantas (CHUNG et al., 2006).
O sistema biobalstico consiste
na utilizao de micropartculas,
aceleradas a altas velocidades
para carrear e introduzir genes em
clulas e tecidos. A partir dessas
clulas e tecidos, podem-se obter
plantas transgnicas frteis.
A maior contribuio da engenharia
gentica para a gerao de plantas
resistentes a doenas tem sido,
at o momento, o desenvolvimento
de estratgias contra doenas
virais. Sanford e Johnson (1985)
foram os primeiros a trabalhar
com a possibilidade de obteno
de resistncia a patgenos em
plantas geneticamente modificadas
contendo seqncias genmicas
dos prprios patgenos. Na
verdade, esse conceito j vem
sendo empregado h pelo menos
duas dcadas, num processo
chamado de premunizao, no qual
uma planta propositadamente
infectada por uma estirpe fraca
de um vrus para obteno de
tolerncia contra estirpes fortes
(MULLER; COSTA,1977; COSTA;
MULLER, 1980).
Desde o primeiro exemplo, em
1986, de resistncia a vrus em
uma planta transgnica (fumo)
transformada com a capa protica
do vrus-do-mosaico-do-tabaco
(Tobacco mosaic virus - TMV)
(POWELL et al., 1986), mais de
uma centena de publicaes tm
sido apresentadas, relatando a
obteno de plantas geneticamente
modificadas resistentes a vrus dos
mais variados grupos. Diferentes
estratgias tm sido empregadas.
Brevemente, pode-se listar: (1)
35
expresso da capa protica; (2)

uso de satlites; (3) RNA sense
e antisense; (4) RNAs defectivos;
(5) expresso da replicase;
(6) expresso de protenas do
movimento; (7) expresso de
anticorpos (plantbodies) (WILSON,
1993; TAVLADORAKI et al., 1993;
GRUMET, 1995). As estratgias
mais utilizadas foram expresso/
co-supresso da capa protica,
RNA antisense. Entretanto,
mais recentemente, o uso de
RNA interferentes (RNAi) tem-se
mostrado mais eficiente que todas
as outras estratgias, prometendo
ser a mais empregada nos
prximos anos. Recentemente,
obtiveram-se feijoeiros
transgnicos altamente resistentes
ao vrus BGMV (Bean golden
mosaic geminivirus) expressando
um fragmento de RNA de dupla
fita do gene viral AL1. Todas essas
estratgias tm sido empregadas
com maior ou menor grau de
sucesso para determinados
grupos de vrus. As primeiras
plantas disponibilizadas para o
setor produtivo foram: o fumo,
resistente ao TMV, na China, e o
mamoeiro resistente ao vrus-damancha-anelar (Papaya ring spot
36
virus - PRSV), nos Estados Unidos.

Vrias outras plantas tm sido
liberadas para comercializao nos
Estados Unidos, como abboras
resistentes aos vrus WMV
(Watermelon mosaic virus), ZYMV
(Zucchini yellow mosaic virus) e
CMV (Cucumber mosaic virus)
e batatas resistentes aos vrus
PLRV (Potato leafroll virus) e PVY
(Potato virus Y). (TEPFER, 2002).
A Embrapa Recursos Genticos
e Biotecnologia, a Embrapa Arroz
e Feijo, a Embrapa Hortalias, a
Embrapa Mandioca e Fruticultura
e a Embrapa Milho e Sorgo tm
gerado plantas transgnicas
para resistncia a viroses. Essas
plantas esto sendo avaliadas
pelos programas de melhoramento
(ARAGO et al., 1998, 2001;
ROMANO et al., 2001; EHRENFELD
et al., 2004; SOUZA JNIOR
et al., 2005; BONFIM et al., 2007).
As avaliaes de segurana dessas
plantas para o meio ambiente
e sade humana e animal tm
sido alvo de estudos na Rede de
Biossegurana da Embrapa.
No entanto, as primeiras plantas
transgnicas a ocupar grandes reas
so aquelas tolerantes a herbicidas.
Essas plantas tm sido utilizadas
no manejo de ervas daninhas

que podem ser combatidas mais
facilmente com a aplicao de
herbicidas no seletivos. Distintos
genes tm sido introduzidos para
obteno de resistncia a vrios
herbicidas: atrazina (gene mutado
psbA), bromoxinil (gene bnx),
glifoninato de amnio (gene pat ou
bar), sulfunilureas e imidazolinonas
(genes als ou ahas mutados),
glifosato (genes epsps e aroA) e
2,4-D (gene tfdA). Cerca de 71 %
das plantas transgnicas cultivadas
atualmente contm genes para
resistncia a herbicidas (JAMES,
2005).
Grande nmero de estratgias
tem sido gerado para resistncia
a fungos. Embora ainda no
existam plantas em processo
de comercializao com essas
caractersticas, j existem
variedades em pr-melhoramento.
As principais estratgias utilizadas
buscam expressar: (1) protenas
hidrolticas (glucanases,
quitinases); (2) protenas dos
patgenos (defensinas, osmotinas);
(3) protenas heterlogas
antimicrobianas (tioninas,
defensinas, peroxidases, lisozimas);
(4) fitoalexinas (restaverol); (5) alm
de inibir a virulncia do patgeno; e
(6) alterar componentes estruturais

(PUNJA, 2001). Recentemente,
nosso grupo gerou plantas de
alface tolerantes a Sclerotinia por
meio da expresso do gene do
oxalato descarboxilase isolado
de Flamulina velutipes. A enzima
oxalato descarboxilase, presente
nas plantas transgnicas, degrada
o cido oxlico, o fator mais
importante de virulncia do fungo
(DIAS et al., 2006).
Vrias estratgias tm sido
propostas para obteno de
resistncia a insetos que so
pragas nos sistemas agrcolas.
Em geral, essas estratgias esto
relacionadas expresso de
genes de protenas que alteram o
ciclo de vida ou so letais para os
insetos: inibidores de proteinases,
inibidores de amilases, lectinas.
At o momento, a utilizao do
gene Bt (Cry) tem sido a estratgia
mais eficiente e amplamente
utilizada comercialmente. O gene
Bt codifica uma toxina da bactria
Gram-positiva do solo Bacillus
thuringiensis. Muitos genes isolados
dessa bactria produzem incluses
cristalinas de um potente inseticida
(-endotoxinas) chamado de toxina
cristal (Cry) ou toxina citoltica
(Cyt). Trs espcies de plantas
37
geneticamente modificadas tm
sido comercialmente cultivadas
contendo genes Bt, milho, algodo
e batata. No entanto, genes Bt
tm sido introduzidos e avaliados
em grande nmero de espcies,
tais como: soja, ma, arroz,
lamo, alfafa, cana-de-acar,
uva e tomate. Cerca de 15 % dos
cultivos comerciais com plantas
geneticamente modificadas so
feitos com plantas que contm
o gene Bt, sendo cultivados nos
Estados Unidos, China, frica do
Sul, Indonsia e Austrlia.
A reduo na aplicao de
inseticidas e de aumento de
produtividade tem sido observada
em vrios pases em culturas
com os genes Bt (PRAY et al.,
2002; QAIM; ZILBERMAN, 2003).
Alm disso, tem-se observado
que, devido ao menor ataque de
pragas em plantas de milho-Bt,
ocorreu diminuio de fungos
e conseqente reduo da
contaminao com micotoxinas
(Fig. 1), que so substncias
cancergenas (CHRISPEEL;
SADAVA, 2003).
Na Embrapa, genes Bt tm sido
isolados e caracterizados. Outros
genes e estratgias so avaliados
para obteno de plantas, como
38
feijo resistente a carunchos e caf

resistente a brocas.
A engenharia gentica tem
sido utilizada, tambm, como
ferramenta para tornar as plantas
melhoradas nutricionalmente.
Os fatores nutricionais tm tido
sua concentrao aumentada,
sobretudo, as vitaminas e
aminocidos essenciais. Por sua
vez, fatores antinutricionais so
reduzidos ou removidos, como o
fitato (myo-inositol hexa-kisfosfato)
das sementes. Tal projeto tem sido
feito/executado pela Embrapa,
que tem buscado obter plantas
de soja com menor teor de fitato.
Recentemente, foi obtida uma
linhagem de soja na qual o gene
da mio-inositol 1-fosfato sintase foi
silenciado, apresentando reduo
de 95 % na quantidade de fitato
presente nos gros (NUNES et al.,
2006). H, igualmente, estudos
para caracterizar genes de enzimas
das rotas metablicas da sntese
de vitaminas (C, A e E) e de
leos essenciais. O projeto mais
avanado para o desenvolvimento
de plantas com maior teor de
vitaminas do arroz-dourado ou
Golden Rice (Fig. 2). As sementes
desse arroz possuem a capacidade
de acumular cerca de 1,6 mg/g de

-caroteno (pr-vitamina A). Isso
ocorre porque, nessas plantas,
foram introduzidos dois genes
adicionais, da enzima fitoene
sintase (PSY) e caroteno desaturase
(CRTI) (PAINE et al., 2005; ALBABILI; BEYER, 2005; GOLDEN
RICE PROJECT, 2007). O consumo

desse arroz poder minimizar
problemas de deficincia de
vitamina A e, conseqentemente,
os problemas de deficincia
visual e cegueira em pases em
desenvolvimento cuja alimentao
deficiente nessa vitamina.
Fig. 1. Milho resistente a insetos devido expresso do gene Bt de Bacillus thuringiensis.

esquerda, pode-se ver uma espiga de milho transgnico e, direita, uma espiga de um
milho no-transgnico. As espigas do milho transgnico so menos atacadas pelos insetos
que, alm de causar danos diretos aos gros, abrem portas para a entrada de fungos. No
milho transgnico, observa-se menor ataque de insetos e menor incidncia de fungos e,
conseqentemente, reduo da contaminao com micotoxinas.
Foto: Francisco J. L. Arago
39
Fig. 2. Gros de arroz dourado (Golden Rice) com alto teor de pr-vitamina A (a) e gros de
arroz no transformados geneticamente (b). O arroz dourado tem colorao amarelada em
virtude da presena de pr-vitamina A.
Cortesia: The Golden Rice Humanitarian Board.
Os estresses pelo dficit

hdrico, baixa temperatura e alta
concentrao salina nos solos
tm sido amplamente estudados.
Vrios genes tm sido isolados,
caracterizados e introduzidos
em plantas geneticamente
modificadas. Um desses genes,
que um elemento de resposta
desidratao (DRE), demonstrou ter
papel importante na regulao da
expresso de genes em resposta
40
ao estresse hdrico e baixa

temperatura. O gene DREB1A foi
introduzido em algumas espcies,
mostrando que pode conferir alta
tolerncia ao estresse hdrico. A
introduo desse gene em trigo
pelo CIMMYT (Mxico) demonstrou
que as plantas foram capazes de
tolerar um perodo de 15 dias sem
irrigao, em condies de campo,
apresentando apenas reduo no
turgor das folhas. Genes DREB
tm sido introduzidos em plantas

de soja e de trigo com a finalidade
de obter plantas mais tolerantes
ao dficit hdrico. Experimentos
realizados na Universidade de
Viosa demonstraram que a
expresso do gene BiP (chaperone
binding protein) isolado de soja em
plantas transgnicas de fumo com
acumulao da protena foi capaz
de conferir grande tolerncia
condio de falta de irrigao por
um perodo de 4 semanas (ALVIM
et al., 2001). Esse gene est agora
sendo manipulado e introduzido
em vrias leguminosas, como
soja, feijo e feijo-de-corda, na
Embrapa Recursos Genticos e
Biotecnologia.
Um dos produtos mais
interessantes gerados pela
moderna biotecnologia que
chegaram ao mercado so as flores
com novos padres de colorao.
Isso um dos fatores crticos
no melhoramento de espcies
floriculturais. Cravos transgnicos
com flores nas cores prpura,
lavanda e violeta (Fig. 3) foram
desenvolvidos e esto atualmente
sendo comercializados na Amrica
do Norte, Austrlia e Japo pela
empresa International Flower
Developments, uma joinventure

das empresas Florigene da
Austrlia e a japonesa Suntory
(CHANDLER, 2003; FLORIGENE
FLOWERS, 2007).
As tecnologias para a produo
de protenas heterlogas
recombinantes, atualmente
comercializadas, tm-se
baseado na cultura de clulas de
mamferos in vitro ou produo
em microrganismos. Atualmente,
a utilizao de plantas e animais
transgnicos tem demonstrado
ser bastante eficiente para a
produo de diferentes protenas
recombinantes em larga escala
e a custo reduzido, alm de
ter recebido aceitao pelas
agncias de regulamentao.
O uso de plantas transgnicas
para a produo de protenas
recombinantes dever prover
uma fonte segura, renovvel e
custo reduzido para a produo
de protenas biologicamente
ativas e em larga escala. Alm
disso, a utilizao de plantas
permite expressar protenas
bioquimicamente complexas
que no podem ser produzidas
de forma economicamente
vivel em cultura de clulas ou
41
microrganismos, podendo tornarse uma opo para o agronegcio.

O significativo baixo custo em
capital e custos operacionais
para a produo de compostos
no processados faz com que as

plantas e animais transgnicos
tenham um custo mais efetivo do
que outros sistemas de produo
de protenas recombinantes.
Fig. 3. Cartaz do dia das mes anunciando a venda de flores de cravos

transgnicos modificados para terem novos padres de colorao.
Cortesia de Steve Chandler, Florigene, Austrlia.
42
O desenvolvimento de plantas
transgnicas com novas
caractersticas considerado
atualmente uma das mais
importantes aplicaes da
tecnologia do DNA recombinante.
Por meio dessa tcnica, as
plantas podem ser geneticamente
modificadas, basicamente com
duas finalidades: (a) melhoramento
de suas caractersticas
agronmicas e qualidades
nutricionais; (b) uso das plantas
como reatores biolgicos para a
produo de biomolculas (LEITE
et al., 1999, 2000).
As plantas apresentam vantagens
em potencial em relao aos
sistemas baseados em fermentao
microbiana, clulas animais e
animais transgnicos. Protenas
heterlogas expressas em
bactrias, geralmente, retm o
resduo de metionina, derivado
do sistema de traduo, na sua
extremidade amino-terminal. Nas
protenas expressas em eucariotos,
entretanto, essa metionina em
geral faz parte de sinais de
endereamento especficos,
que so retirados quando essas
protenas so introduzidas no
compartimento celular para o
qual foram endereadas. Alm

disso, a fermentao bacteriana
freqentemente resulta na produo
de agregados insolveis e so
necessrios gastos significativos
para solubilizar esses agregados
e recuperar a estrutura da protena
nativa. Por sua vez, o processo de
fermentao em si requer grandes
investimentos de capital. Ao
contrrio dos sistemas bacterianos
de expresso de protenas, os
sistemas eucariticos permitem o
processamento e a modificao dos
produtos. O sistema de expresso
eucaritico mais antigo baseia-se
na utilizao de leveduras, sendo
as espcies Saccharomyces
cerevisae e Pichia pastoris as mais
utilizadas. Esses sistemas so to
econmicos quanto os bacterianos,
mas as protenas sintetizadas so
freqentemente hiperglicosiladas e,
quando produzidas em altos nveis,
so instveis e insolveis.
As plantas transgnicas esto
sendo testadas, tambm, para a
produo de antgenos vacinais.
Enquanto os sistemas baseados
na amplificao de vrus em
plantas apresentam capacidade
de expressar apenas pequenos
domnios antignicos fusionados
43
s protenas da capa viral, plantas

transgnicas podem expressar
antgenos de maior complexidade
estrutural, sem perda de suas
propriedades imunognicas
originais. Diversas abordagens
tm sido usadas para obteno
de vacinas a partir de plantas,
sendo as vacinas comestveis
as mais promissoras, pela
reduo nos custos e facilidade
de administrao, uma vez que
dispensariam todos os recursos
necessrios para a produo
e distribuio das vacinas
(LANGRIDGE, 2000). Cerca de
200 produtos (em particular
MAbs) esto em fase de avaliao
clnica e muitos outros em fase de
desenvolvimento pr-clnico (fases
I e II; veja exemplos em http://www.
lsbc.com; http://www.meristem.
com; http://www.cobento.com;
http://www.sigmaaldrich.com/;
http://www.chlorogen.com/; http://
www.planetbiotechnology.com/;
http://www.mpt.monsanto.com/;
http://www.neorx.com/).
Muitas outras caractersticas vm
sendo manipuladas para agregar
valor aos cultivos e melhorar seu
manejo nos ambientes agrcolas,
tais como: obteno de frutos e
44
flores com longa vida de prateleira;

plantas mais precoces e com
arquitetura modificada; aumento
da eficincia fotossinttica e do
uso de nutrientes; flores e frutos
com modificao de aroma e
sabor; plantas produtoras de
biopolmeros; plantas machoestreis; modificaes metablicas
para produo de substncias de
alto valor agregado (engenharia
metablica); eliminao de
componentes alergnicos e
antinutricionais.
Embora haja 90 milhes de
hectares atualmente plantados
com plantas transgnicas, apenas
algumas poucas espcies so
cultivadas, como soja, algodo,
canola e milho. Praticamente,
todas as variedades cultivadas
so derivadas de linhagens
desenvolvidas por grandes
empresas multinacionais. As
excees so o mamo resistente
ao vrus-da-mancha-anelar,
desenvolvido pela Cornell University
e cultivado no Hava desde 1998,
e o algodo-Bt resistente lagarta,
desenvolvido pela Academia de
Cincias Agrcolas da China e
cultivado em vrias partes daquele
pas. Na realidade, o algodo
chins foi o primeiro exemplo

de um produto da moderna
biotecnologia totalmente produzido
em um pas em desenvolvimento.
O exemplo chins mostra que
possvel haver desenvolvimento de
novas biotecnologias nos sistemas
pblicos de pesquisa, desde que
haja as condies necessrias,
tais como pessoal bem formado
e treinado, investimento e
legislao compatvel com a
pesquisa agropecuria de ponta.
Entretanto, nos ltimos 9 anos,
estabeleceu-se, em nosso pas, um
emaranhado de leis e dispositivos
infralegais que criaram um quadro
extremamente burocrtico e
complexo, impossibilitando a
pesquisa, no campo, com plantas
geneticamente modificadas.
Apesar de o Brasil contar com
um quadro altamente qualificado
de cientistas, no tem tido seu
potencial plenamente aproveitado
em virtude da falta de investimento
no sistema pblico, baixa interao
com o setor privado e uma
legislao confusa e incompatvel
com o desenvolvimento cientfico
nessa rea. Isso levou o Pas a um
grande atraso em relao a outras
naes.
Por causa dessa situao,

alguns projetos chegaram a ficar
paralisados por aproximadamente 4
anos, o que levou muitas empresas
a transferir seus experimentos para
pases vizinhos, como a Argentina.
H mais de uma dcada, o plantio
de sementes transgnicas j
uma realidade em pases de todos
os continentes onde se realiza
agricultura, sem que qualquer
problema para a sade humana
tenha sido observado (WORLD
HEALTH ORGANIZATION, 2005).
Espera-se que a nova Lei de
Biossegurana (Lei 11.105, de 24
de maro de 2005, regulamentada
apenas cerca de 8 meses depois
pelo decreto 5.591, de 22 de
novembro de 2005) solucione
alguns dos conflitos anteriores
e que o Pas possa, finalmente,
retomar seu lugar de destaque na
pesquisa biotecnolgica agrcola.
fundamental que o Brasil tenha
domnio de uma tecnologia que j
uma realidade em vrios pases
e que tem grandes impactos
sociais e econmicos para aqueles
pases que a dominam ou que
estaro totalmente dependentes de
tecnologia estrangeiras. Espera-se
45
que o forte atraso enfrentado pela

pesquisa brasileira seja de alguma
forma mitigado pela agilidade dos
rgos regulatrios. preciso que
haja equilbrio na legislao a fim
de permitir presteza e celeridade
nas avaliaes dos processos, para
dar competitividade aos cientistas
brasileiros, ao mesmo tempo em
que oferea a segurana que a
sociedade demanda.
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CAPTULO 3
BREVE HISTRICO DA BIOSSEGURANA
DOS TRANSGNICOS
FBIO GELAPE FALEIRO
BREVE HISTRICO DA BIOSSEGURANA

DOS TRANSGNICOS
Durante a evoluo, a espcie
humana deixou seu comportamento
nmade, fixando-se em locais
mais protegidos e com maior
facilidade de coleta de alimentos.
Com o tempo e a necessidade,
o homem comeou a coletar e a
plantar espcies vegetais a partir
da identificao e da seleo
de indivduos mais saborosos,
saudveis, produtivos, resistentes,
teis e que apresentassem
uniformidade de dormncia e de
tempo de maturao de semente,
procedendo-se domesticao
dessas espcies. Durante esse
processo, grande parte das
espcies teis com caractersticas
agronmicas reproduzveis, maior
uniformidade e produtividade
foram domesticadas de forma
emprica (ORGANIZATION FOR
ECONOMIC CO-OPERATION AND
DEVELOPMENT, 1993). Entretanto,
no incio do sculo XX, aps a
redescoberta das leis de Mendel,
do desenvolvimento dos estudos
bsicos da hereditariedade e do
uso da estatstica para seleo e
cruzamento de indivduos, esses

estudos passaram a ser realizados
com base cientfica, originando a
cincia e a arte do melhoramento
gentico. Utilizando tcnicas de
melhoramento, foram obtidas
todas as cultivares de milho, soja,
algodo, canola, batata e demais
espcies de importncia econmica
encontradas hoje.
O melhoramento gentico vegetal
visa obteno de plantas mais
produtivas, adaptadas a diferentes
agroecossistemas, resistentes a
doenas e a pragas e com maior
qualidade nutricional. O grande
desafio atual produzir alimentos
em quantidade e qualidade e,
ao mesmo tempo, minimizar o
impacto ambiental, reduzindo
o uso de defensivos agrcolas.
Grandes avanos foram obtidos
pelo melhoramento gentico
com a finalidade de aumentar
a produtividade das culturas e,
conseqentemente, diminuir o
preo dos alimentos (BARROS et
al., 2001).
51
Esses resultados de produtividade

foram possveis graas
pesquisa agrcola nas reas de
melhoramento gentico vegetal
e ambiental, assim como o
desenvolvimento de tcnicas de
manejo das culturas. No entanto,
apesar desses grandes avanos,
o melhoramento convencional
continua apresentando algumas
dificuldades decorrentes da ligao
gnica e da incompatibilidade
interespecfica. Para eliminar
tais limitaes, a transformao
gentica surgiu como uma
ferramenta extremamente til,
visto que permite a introduo
de um nico gene de interesse
diretamente em cultivares-elite. O
gene a ser introduzido pode ser
oriundo da mesma espcie ou de
outras espcies, permitindo, dessa
forma, a quebra das barreiras
impostas pela incompatibilidade
sexual entre as diferentes espcies,
alm de eliminar o efeito das
ligaes gnicas indesejadas
(ANDRADE, 2003).
A preocupao com a segurana
de OGMs surgiu logo no incio de
sua utilizao, quando, na dcada
de 1970, Cohen e colaboradores
52
(COHEN et al., 1972) transferiram

o gene de resistncia mltipla
a antibiticos para a bactria
Escherichia coli. Na mesma
poca, Jackson e colaboradores
(JACKSON et al., 1972) criaram
uma molcula hbrida de DNA
contendo o genoma completo do
Vrus Simia 40 e um segmento de
DNA responsvel pelo metabolismo
da galactose em Escherichia coli.
A comunidade cientfica mundial
ficou alerta s possibilidades
ilimitadas que as novas ferramentas
estavam trazendo e seus
imprevisveis impactos na sade
humana e ambiental. Assim,
de maneira espontnea, houve
praticamente uma moratria no
uso de ferramentas da engenharia
gentica at que houvesse
mecanismos adequados para
aferir a segurana dessas tcnicas
para a sade humana e ambiental.
Em 1974, como conseqncia
dessas preocupaes, foi
realizada a Conferncia de
Asilomar sobre as Molculas de
DNA Recombinante, ocasio em
que foram discutidos os critrios
de segurana, principalmente,
barreiras biolgicas e fsicas, para
os experimentos com OGMs,
BREVE HISTRICO DA BIOSSEGURANA DOS TRANSGNICOS
bem como os critrios ticos

para regular esses experimentos,
alm de recomendaes para o
controle de descartes de material
e padronizao da metodologia
(BERG et al., 1975; BERG, 2004).
A partir dessa conferncia,
diversos organismos internacionais
discutiram e desenvolveram
regras de biossegurana, cujos
fundamentos bsicos objetivam
assegurar o avano dos processos
tecnolgicos e proteger a sade
humana, animal e ambiental.
Um dos momentos relevantes
dessas discusses ocorreu em
1992, quando, por iniciativa da
Organizao das Naes Unidas
ONU, houve a Conveno de
Diversidade Biolgica CB, que
ficou conhecida como ECO-92.
Nesse evento, convencionou-se
que todos os pases signatrios
tomassem medidas para preservar
a diversidade das espcies nativas
e cultivadas, considerando o valor
intrnseco dessas espcies como
material para desenvolver novo
produto de interesse econmico.
Assim, nessa conveno, foi
reconhecida a soberania de cada
pas sobre seus recursos genticos
(BRAUN; AMMAN, 2002).
Nos artigos 16 e 19, dedicados

biotecnologia, requerida uma
diviso justa e eqitativa dos
benefcios gerados pelo uso dos
recursos genticos. Isso inclui
meios de prover facilidades e
financiamento para a transferncia
de tecnologias e acesso aberto s
informaes e tcnicas cientficas.
A soberania sobre os recursos
genticos significa que ningum
pode remover espcies vegetais,
animais ou microrganismos de um
pas sem o prvio consentimento
desse pas (BORM, 2005).
J o artigo 15 refere-se ao Princpio
da Precauo, colocando o
seguinte:
com o fim de proteger o meio
ambiente, o princpio da precauo
dever ser amplamente observado
pelos Estados, de acordo com
suas capacidades. Quando houver
ameaa de danos graves ou
irreversveis, a ausncia de certeza
cientfica absoluta no ser utilizada
como razo para o adiamento de
medidas economicamente viveis
para prevenir a degradao ambiental
(MYHR; TRAAVICK, 2002).
Assim, a preocupao com o risco,

principalmente em mant-lo dentro
de um grau de segurana aceitvel,
levou a comunidade internacional a
adotar gradativamente o Princpio
da Precauo como princpio tico
53
orientador e jurdico motivador

da ao humana. Com isso, a
determinao do nvel de risco
aceitvel uma responsabilidade
cientfica e poltica, sendo avaliado
caso a caso e por cada pas
(MINAR, 2005).
Em 2000, um novo encontro na
Venezuela estabeleceu as bases
para a normatizao internacional
do desenvolvimento dos OGMs,
em especial, no que tange ao
movimento desses organismos
vivos entre pases. O Protocolo de
Cartagena, como ficou conhecido,
regulamenta a transferncia, a
manipulao e o uso de OGMs que
podem ter efeito na biodiversidade
e sade humana e, fazendo
referncia explcita ao Princpio da
Precauo, considerando-o como
princpio-guia para transferncia de
OGMs em situaes consideradas
de potencial risco de reduo
ou de perda da biodiversidade.
Basicamente, o Princpio da
Precauo deve ser aplicado
quando houver incerteza cientfica
de danos sobre o meio ambiente,
e os pases devem adotar, nesse
caso, procedimentos para prevenir
e evitar esses danos (BORM,
54
2005; MYHR; TRAAVICK, 2002;

BRAUN; AMMAN, 2002).
Esse protocolo foi ratificado por
50 pases em 2002 e, desde essa
poca, tem sido o alicerce para o
desenvolvimento das bases legais
e administrativas de biossegurana
em diversos pases (UNITED
NATIONS ENVIRONMENTS
PROGRAMME, 2003). Assim,
resumidamente, a biossegurana
de OGMs estuda os impactos
dessas tecnologias por meio de
leis, procedimentos e diretivas
discutidas mundialmente, porm
aplicadas de modo especfico em
cada pas.
Com referncia aos impactos
sobre a sade humana e animal,
vrias instituies ligadas
pesquisa, sade humana e ao
ambiente buscaram mtodos para
avaliao de riscos de organismos
geneticamente modificados
e publicaram documentos
orientadores (INTERNATIONAL
LIFE SCIENCES INSTITUTE,
2001; INSTITUTE OF FOOD
TECHNOLOGISTS, 2005; FAO,
1996, 2001; WORLD HEALTH
ORGANIZATION, 2000). Com isso,
desenvolveram-se os princpios
de equivalncia substancial e
de precauo e a anlise de
risco, utilizados como base para
os estudos de biossegurana
(LAJOLO; NUTTI, 2003).
O termo segurana alimentar surgiu
na Europa, a partir da Primeira
Guerra Mundial, com a conotao
de Segurana Nacional, em virtude
da necessidade de formao de
estoques estratgicos de alimentos,
uma vez que a soberania de um
pas dependia, entre outros fatores,
da sua capacidade de autosuprimento (PONTES et al., 2003).
Posteriormente, na Segunda Guerra
Mundial, foi agregada a noo do
direito humano alimentao. Na
dcada de 1970, houve um foco na
qualidade, principalmente, no que
se referia segurana dos aditivos
alimentares. Nos anos 1980, a
preocupao era com os resduos
de agrotxicos e irradiao de
alimentos.
Atualmente, a preocupao
com os alimentos transgnicos.
Entretanto, apesar de todos
esses enfoques, no h registro
de um processo de avaliao
de segurana alimentar
formalmente reconhecido por
algum rgo federal de qualquer
pas (ORGANIZATION FOR

ECONOMIC CO-OPERATION
AND DEVELOPMENT, 1993). No
entanto, com a possibilidade de
introduo de novas caractersticas
em uma planta, o fator segurana
alimentar passou a receber mais
ateno (ORGANIZATION FOR
DEVELOPMENT, 1993).
A utilizao de estudos
toxicolgicos convencionais
para avaliao de segurana
alimentar tornou-se particularmente
complicada quando se deparou
com a dificuldade de estudar os
efeitos dos alimentos irradiados na
alimentao animal. Anlises com
animais eram um dos principais
pontos de suporte aos estudos
de compostos como pesticidas,
frmacos, produtos qumicos
e aditivos alimentares. Esses
elementos so bem caracterizados,
de pureza conhecida, no possuem
valor nutritivo e apresentam baixa
exposio humana. Os estudos
eram realizados com doses
superiores s esperadas para
os nveis de exposio humana,
visando a identificar qualquer
efeito adverso de importncia para
a sade (ORGANIZATION FOR
55

DEVELOPMENT, 1993).
No entanto, a utilizao desses
estudos para avaliao de alimentos
limitada. Os alimentos so
misturas complexas de compostos
e caracterizados por uma grande
variao na composio qumica e no
valor nutricional. Assim, nos estudos
toxicolgicos, deve-se levar em
conta a necessidade da manuteno
do balano nutricional, bem como
evitar os efeitos no relacionados ao
material analisado (WORLD HEALTH
ORGANIZATION, 2000).
protena codificada pelo gene

introduzido.
3. As conseqncias indiretas dos
efeitos de qualquer (quaisquer)
novo(s) produto(s) ou nveis
alterados de produto(s) j
existente(s) no metabolismo do
organismo, levando presena
de novos compostos ou nveis
alterados de compostos j
existentes.
Segundo a Organizao das

Naes Unidas para Agricultura
e Alimentao FAO (1996),
as consideraes em relao
segurana alimentar de OGMs
incluem:
4. As conseqncias das mutaes

causadas no processo de
introduo gentica no
organismo, tais como a
interrupo de seqncias
codantes ou controle ou
ativao de genes latentes,
levando presena de novos
componentes ou nveis alterados
de componentes existentes.
1. As conseqncias diretas
de alterao nos nveis de
expresso de genes existentes
pela introduo do novo gene
ou modificaes genticas
causadas por ele.
5. As conseqncias da
transferncia do gene para a flora
gastrointestinal pela ingesto
do alimento geneticamente
modificado (AGM) e (ou)
alimentos derivados deles.
2. As conseqncias diretas (por

exemplo, efeitos antinutricionais,
txicos ou alergnicos) da
presena, nos alimentos, da
6. Potencial efeito adverso

na sade associado ao
microrganismo geneticamente
modificado pelo alimento.
56
Consideraes finais
Pode-se dizer que o cultivo
comercial de plantas geneticamente
modificadas gerou preocupaes
referentes ao impacto ambiental
que elas poderiam causar. No
entanto, essas preocupaes foram
exaustivamente discutidas em
fruns internacionais, quando se
avaliaram os verdadeiros riscos que
uma nova tecnologia pode trazer,
confrontando-os com os benefcios e
com as tecnologias existentes. Com
isso, vrios rgos internacionais
instituram normas a ser seguidas,
principalmente, no que se refere
ao impacto sobre a biodiversidade,
embora cada pas tenha sua prpria
legislao a esse respeito.
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59
CAPTULO 4
A BIOSSEGURANA AMBIENTAL
FBIO GELAPE FALEIRO
Introduo
As grandes preocupaes
com as plantas transgnicas
no ambiente se referem
principalmente aos impactos
das tecnologias Bt (resistncia
a insetos) e HT (tolerncia a
herbicidas). Segundo Carpenter
et al. (2002), que realizaram um
estudo comparativo baseado em
referncias bibliogrficas, so
nove as principais consideraes a
respeito do impacto ambiental das
lavouras de soja, milho e algodo
transgnicos, as quais podem ser
resumidas da seguinte maneira:
(a) risco da variedade cultivada ou
silvestre transformada tornar-se
uma espcie daninha invasora; (b)
desenvolvimento de resistncia
pelo uso macio da tecnologia; (c)
possibilidade de escape gnico
(transferncia vertical e horizontal);
(d) efeito adverso sobre espcies
no-alvo e benficas; (e) impactos
nos sistemas de produo
vegetal (CARPENTER et al., 2002;
MARGARIDO, 2003).
Risco de desenvolvimento
de superplantas
daninhas
O aparecimento de plantas
daninhas resistentes a herbicidas
comeou a ser documentado no
incio dos anos 1970, principalmente
para os herbicidas atrazina e
paraquat, bem como outros de
larga escala (SANDERMANN,
2006). Nessa poca, o glifosato
foi classificado dentro do grupo
com baixa probabilidade de induzir
resistncia, quando comparado
a outros herbicidas contendo
sulfonilurias e imidazolinonas, que
foram classificados de alto risco.
J foram descritas 90 espcies
de plantas daninhas para o
desenvolvimento de resistncia a
herbicidas que induzem a inibio
de acetolactato sintase (ALS) e 65
para resistncia a atrazina. Nesses
30 anos de uso de glifosato, a
resistncia natural j foi descrita,
no entanto apenas para 16
espcies (Tabela 1) (SANVIDO et
al., 2006). Essa questo ser mais
63
bem discutida no prximo tpico.

Acredita-se que essa baixa induo
de resistncia em virtude das
propriedades qumicas do herbicida
e do seu modo de ao (SANVIDO
et al., 2006).
Segundo Sandermann (2006), a
evoluo de bitipos de plantas
daninhas resistentes pode
ocorrer por trs processos: (1)
mutantes dentro da populao;
(2) transferncia de genes entre
as populaes ou espcies
(introgresso); (3) mecanismos
de resistncia de genes nicos
ou mltiplos. Entretanto, as
experincias com o cultivo de
organismos geneticamente
modificados OGMs tolerantes a
herbicidas esto demonstrando
que o aparecimento de plantas
daninhas resistentes a herbicidas
ocorre no por modificao
gentica, mas pelo manejo da
cultura e do herbicida utilizado
pelo produtor (SANVIDO et al.,
2006). Segundo Heap (1997),
para evitar o desenvolvimento de
plantas daninhas resistentes, o
produtor deve cultivar as plantas
HT em rotao com cultivares
convencionais ou resistentes a
diferentes tipos de herbicidas.
64
Desenvolvimento de
resistncia pelo uso
intensivo da tecnologia
A alta adeso mundial dos
produtores ao plantio de soja
resistente ao glifosato representou a
maior adoo de uma tecnologia na
histria da agricultura (SANKULA;
BLUMENTHAL, 2004). Embora
isso demonstre que a tecnologia
apresenta grandes vantagens
para o agricultor, sucinta tambm
preocupaes a respeito da
possibilidade de induo de plantas
daninhas resistentes ao glifosato
pelo uso inadequado da tecnologia.
conhecido que as populaes
de plantas daninhas so, em
geral, heterogneas. Assim, dentro
da populao podem ocorrer
indivduos sensveis ao herbicida
e indivduos mutantes resistentes
para essa caracterstica. No entanto,
sob uma presso de seleo pelo
uso excessivo de herbicida, essa
resistncia natural pode dominar
a populao ao selecionar os
indivduos resistentes e, com
o tempo, o banco de sementes
do solo, sugerindo a ocorrncia
da induo de resistncia na
populao (SANDERMANN, 2006).
Tabela 1. Espcies de plantas daninhas resistentes ao glifosato.

Ano de
divulgao
Espcie de planta
daninha
Local de
ocorrncia
Referncia
1984
1996
1998
2001
1997
Convolvulus arvensis
Lolium rigidum
Ducan e Weller, 1987

Heap et al., 2005; Owen e
Zelaya, 2005
Eleusina indica (L) Gaertn.
EUA
Austrlia
EUA
frica do Sul
Malsia
2000
2001
Amaranthus tuberculatus
Abtilon theophrasti
EUA
EUA
2000
Conyza canadensis (L.) Cronq
EUA
2001
2003
2004
2002
2003
2003
2004
2004
2004
2004
2004
2005
Lolium multiflorum
Chile
Brasil
EUA
Leste da sia
frica do Sul
frica do Sul
Espanha
EUA
EUA
EUA
EUA
EUA
Dipiclitera chinensis
Plantago Lanceolata
Conyzia bonaneriensis L.
Commelina communis
Ipomea ssp.
Chenopodium album
Ambrosia artemisifolia L.
Amaranthus palmeri S, Wats

Zelaya, 2005
Owen e Zelaya, 2005
Duke, 2005; VanGessel,
2001
Zelaya, 2005
Zelaya, 2005
Owen e Zelaya, 2005
Heap et al., 2005
Heap et al., 2005
Owen e Zelaya, 2005
Owen e Zelaya, 2005
Owen e Zelaya, 2005
Heap et al., 2005
Heap et al., 2005
Fonte: Adaptado de Cerdeira e Duke (2006) e Sandermann (2006).
O glifosato um herbicida de
largo espectro e baixo impacto
ambiental e praticamente no causa
danos s espcies cultivadas,
por isso sempre apresentou boa
aceitao entre os produtores.
Entretanto, nos Estados Unidos,
sua utilizao cresceu seis vezes
de 1992 a 2002, principalmente
em virtude da adoo dos OGMs
(CERDEIRA; DUKE, 2006). Embora
tenha sido classificado como um

herbicida com baixo risco de induzir
o desenvolvimento de resistncia
em plantas daninhas, essa
resistncia tem sido demonstrada
para algumas espcies (Tabela
1). Porm, somente trs casos
foram associados ao uso de
OGMs (CERDEIRA; DUKE, 2006;
SANDERMANN, 2006). No Brasil,
no h descrio de espcies
65
resistentes ao glifosato, mas

algumas so de difcil controle
pelo herbicida: Chamaesyce
hirta, Commelina Benghalensis,
Spermacoce latifolia Aubl,
Euphorbia heterophylla, Richardia
brasiliensis Gomes e Ipomea ssp.
(CERDEIRA; DUKE, 2006).
Assim como a resistncia a
herbicidas, a principal ameaa
referente s plantas Bt, ou seja,
resistentes a insetos, a potencial
induo da resistncia na
populao de insetos selvagens em
decorrncia da presso de seleo
pelo uso intensivo dessas plantas.
Essa seleo poderia ocorrer por
mutaes naturais ou sintticas,
perda de proteases que ativam a
toxina no trato intestinal do inseto,
alta atividade proteoltica de enzimas
degradadoras das toxinas e outros
(CHRISTOU et al., 2006). Entretanto,
aps nove anos de liberao
comercial do algodo e cinco
anos do milho, no foi observado
desenvolvimento de resistncia
nos insetos-alvo (CHRISTOU et al.,
2006; OMOTO; MARTINELLI, 2004).
Segundo Christou et al. (2006), o
plantio de cultivares convencionais
com cultivares Bt (refgios) um
manejo altamente recomendado e
66
utilizado, sendo a provvel hiptese

da ausncia de resistncia verificada
at o momento.
A manuteno de refgios
permite que insetos susceptveis
sobrevivam e cruzem com os
insetos resistentes, diluindo
a quantidade dos alelos de
resistncia e evitando o crescimento
da quantidade de indivduos
homozigotos para esse alelo
(CHRISTOU et al., 2006; OMOTO;
MARTINELLI, 2004). Outras
possibilidades para no deteco
da resistncia so: (1) possibilidade
do inseto possuir mais de um
alvo interno para a toxina; (2)
baixa adaptao ao ambiente do
inseto resistente; (3) a resistncia
verificada em condies de
laboratrio no reflete a realidade
dos campos experimentais dos
OGMs (CHRISTOU et al., 2006;
OMOTO; MARTINELLI, 2004).
Resistncia por fluxo

gnico
A introgresso o movimento
de um gene ou de genes de
uma planta doadora para outra
sexualmente compatvel de um
gentipo diferente (espcies,
variedades ou bitipos diferentes)

por polinizao seguida de
cruzamentos entre o hbrido dentro
da populao at a estabilidade do
gene na populao (CERDEIRA;
DUKE, 2006). Esse fluxo gnico
ocorre se as plantas doadoras
e receptoras crescerem perto o
suficiente para a troca de plen,
pois, embora o plen possa viajar
longas distncias, seja por meio do
vento, insetos ou outros animais
polinizadores, sua viabilidade
decresce com o tempo e as
condies ambientais. Ademais,
para ocorrer o fluxo gnico,
necessrio que ambas as espcies/
variedades estejam na poca de
florao e receptivas para o plen
(CERDEIRA; DUKE, 2006).
Segundo Sanvido et al. (2006),
existe um consenso dentro
da comunidade cientfica que
pode haver fluxo gnico entre
as variedades transgnicas e as
espcies selvagens compatveis
sexualmente. Estudos com canola
no Canad demonstraram essa
possibilidade. No entanto, esse
fluxo ocorre na mesma proporo
apresentada pelas espcies notransgnicas. A questo se esse
transgene causaria um impacto
relevante na populao selvagem.

No caso da canola resistente a
herbicida, cultivada h anos no
Canad, no foram encontradas
evidncias de que esse cultivo
tenha espalhado resistncia
na populao selvagem de
canola. Embora estudos tenham
demonstrado o aparecimento
de resistncia dupla e tripla e
herbicidas dentro da populao
selvagem de canola, isso no
conduziu ao aparecimento de
voluntrias multirresistentes,
sugerindo que o controle qumico e
(ou) o manejo das plantas daninhas
tem sido eficiente para evitar esse
problema (SANVIDO et al., 2006).
A preocupao principal da
induo de resistncia ao glifosato
era a possibilidade de haver
transferncia mediada por plen,
ou seja, a ocorrncia de fluxo
gnico ou introgresso. No entanto,
o aparecimento de espcies
resistentes est ocorrendo como
conseqncia da presso de
seleo pelo uso exagerado de
glifosato (CERDEIRA; DUKE, 2006;
SANDERMANN, 2006). Entretanto,
especialistas no consideram esse
efeito catastrfico, pois pode ser
evitado pelo manejo correto do
67
herbicida e pela utilizao de outros

herbicidas ou tratos culturais,
conforme verificado no caso da
canola (SANVIDO et al., 2006;
CERDEIRA; DUKE, 2006).
Em ambientes naturais, em 10
anos de plantio de OGMs, no
foi observada nenhuma extino
de espcies selvagens pela
introgresso de resistncia de
transgenes dentro da populao. No
caso de resistncia a herbicidas, no
esperado que a introgresso dessa
caracterstica confira algum benefcio
de seleo, pois dificilmente esses
genes teriam caractersticas seletivas
dentro do ambiente natural. No
entanto, a resistncia a insetos
poderia aumentar a adaptao
s pragas naturais da populao
selvagem (SANVIDO et al., 2006).
Avaliaes do impacto de OGMs
na populao selvagem so difceis
de ser realizadas, pois envolvem
mltiplos aspectos e necessitam de
vrios anos de estudo.
Efeito em espcies noalvo e benficas

O efeito de plantas transgnicas
sobre as espcies no-alvo
tem sido bastante discutido,
principalmente para as plantas
68
Bt. Espcies no-alvo so

definidas como as espcies que
no so propsito direto do uso
de um pesticida particular (VAN
LEEWEN; HERMENS, 1999). A
resistncia a insetos, caracterstica
introduzida nas plantas Bt,
expressa pelas protenas Cry do
Bacillus thuringiensis (Bt) e tem
como alvo lagartas da ordem
lepidptera, principalmente as
espcies Ostrinia nubilis (lagartaeuropia) e Diabrotica spp. (larvade-diabrtica), para o milho Bt; e
Pectinophora gossypiella, Alabama
argillacea, Helliothis virescens
(lagarta das mas) e Hillicoverpa
zea no algodo Bt (BOBROWISKI
et al., 2003). Contudo, existe a
preocupao sobre seu efeito sobre
outras espcies de lepidpteros noalvo, como a borboleta monarca.
No caso especfico de toxidez
direta, os organismos no-alvo
precisam ingerir a protena expressa
pelas plantas Bt, por meio de uma
das seguintes exposies (Fig. 1):
(1) ingesto direta de amostras da
planta (folhas, plen); (2) ingesto
de insetos alimentados com as
plantas Bt; (3) exposio ambiental
(resduos vegetais da plantas Bt no
solo) (SANVIDO et al., 2006).
Ingesto direta
(folha, plen)
Herbvoros alvo
Inimigos
naturais
Planta
Herbvoros
no-alvo
Ambiente
(resduos vegetais)
Fig. 1. Rotas de exposio a inimigos naturais de diferentes nveis trficos a plantas produtoras de protenas inseticidas.
Fonte: Adaptado de Sanvido et al., 2006.
Resultados de vrios estudos

realizados nos ltimos anos no
demonstraram evidncias de efeitos
provenientes da toxidez direta da
protena Cry, expressa em plantas
Bt sobre os inimigos naturais noalvo em campos experimentais
(SANVIDO et al., 2006). Segundo
os autores, existem mais evidncias
de que as plantas Bt so mais alvo
especficas e apresentam menor
efeito colateral sobre espcies noalvo que os inseticidas utilizados
atualmente (SANVIDO et al., 2006).
Efeitos indiretos sobre os inimigos
naturais (predadores) nos plantios de
milho Bt ocorreram pela diminuio
da disponibilidade dos herbvoros

alvos da tecnologia. No entanto, a
maioria dos predadores naturais se
alimenta de vrias espcies e, no
campo, buscam outras espcies
para se alimentar quando h
uma diminuio de uma espcie
particular. Assim, a ocorrncia de
efeito indireto no est somente
relacionada ao plantio do OGM, mas
a qualquer manejo para controle
da praga, pois todos reduzem a
disponibilidade dos insetos alvo
e, conseqentemente, afetam a
populao de inimigos naturais.
As plantas tolerantes a herbicida
so consideradas sem efeito
69
direto em espcies no-alvo,

pois a tolerncia a herbicida
uma caracterstica normalmente
expressa em plantas. So tambm
conhecidas por no terem
propriedades txicas. Entretanto,
apresentam impactos ambientais
indiretos em razo das alteraes
nas prticas culturais (SANVIDO
et al., 2006).
Um estudo da Farm Scale
Evaluations FSE realizado na
Inglaterra demonstrou que houve
uma queda da biomassa de plantas
daninhas nos campos de beterraba
e canola resistentes a herbicidas
e, conseqentemente, diminuiu
a densidade de insetos, que, por
sua vez, afetaram negativamente a
populao de pssaros da regio.
As concluses desse estudo
consideram que o uso de plantas
resistentes a herbicida afetam a
biodiversidade das regies rurais
(SQUIRE et al., 2003; CHAMPION
et al., 2003). No entanto, embora
o manejo de plantas resistentes
a herbicidas permita um maior
controle das plantas daninhas,
qualquer sistema de manejo
dessas pragas, quando bem
aplicado, tambm ter a mesma
conseqncia. Assim, os resultados
70
so decorrentes de um efetivo
sistema de controle das plantas
daninhas, podendo ocorrer com
outros tipos eficientes de manejo
(SANVIDO et al., 2006).
Caso da borboleta monarca

Estudos em laboratrio alimentando
larvas de borboleta monarca
com grandes quantidades de
plen da variedade de milho Bt
demonstraram um efeito devastador
no crescimento delas e morte aps
quatro dias de exposio (LOSEY
et al., 1999; JESS; OBRYCKI,
2000). No entanto, estudos
posteriores levando em
considerao a possibilidade
de exposio das larvas dessa
borboleta ao plen do milho em
condies de campo demonstraram
que existe uma diferena temporal
entre a poca de polinizao
(disponibilidade de plen) e a
presena da larva em campo
(SEARS et al., 2001; OBERHAUSER
et al., 2001), bem como uma menor
densidade de plen que a utilizada
em laboratrio (PLEASANTS et al.,
2001; HELMICH et al., 2001). Os
diversos autores concluram que o
risco do milho Bt para a borboleta
monarca negligvel, pois os

resultados obtidos em laboratrio
com altas doses de CRY1AB no
refletem a disponibilidade de
protena para as borboletas em
campo (SANVIDO et al., 2006).
Impactos nos sistemas

de produo vegetal
Uma das grandes questes
no mbito ambiental se refere
ao impacto dessas culturas na
utilizao de pesticidas, ou seja, o
plantio das culturas OGMs atuais
aumenta ou diminui o uso de
pesticidas?
Segundo James (2005), houve uma
reduo cumulativa no ingrediente
ativo de pesticidas de 172.500 t
entre 1996 a 2004, equivalente a
um decrscimo de 14% no impacto
ambiental associado ao uso de
pesticidas nas lavouras (Tabela
2). Entretanto, esses nmeros
precisam ser avaliados conforme o
tipo de OGM e do local onde ele
introduzido.
O uso de pesticida medido pelo
Quociente de Impacto Ambiental
EIQ, desenvolvido por Kovach
et al. (1992), e integra os vrios
impactos ambientais de cada

ingrediente ativo do pesticida.
Para ser obtido, multiplica-se a
quantidade de ingrediente ativo
utilizado por hectare de cultivo
do OGM. A metodologia calcula
e compara o EIQ para plantios
convencionais e transgnicos
e agrega o valor para nveis
nacionais. A quantidade de
pesticida utilizada nas reas
convencionais e transgnicas,
em cada ano, foi comparada
quantidade que seria utilizada
caso todo o cultivo tivesse sido
convencional em cada ano,
durante o perodo de 1996 a 2004.
Segundo Brookes e Barfoot (2005),
as lavouras OGM contriburam
para uma significativa reduo
no impacto ambiental global da
produo agrcola (Tabela 2). O
uso de herbicida para a soja HT
caiu 4 % (Tabela 2). No entanto, em
alguns pases, houve um aumento
relativo do uso de glifosato
referente aos nveis histricos de
uso. O maior ganho ambiental
foi referente ao algodo Bt, que
apresentou uma queda de 15 %
no uso de inseticidas desde 1996
(BROOKES; BARFOOT, 2005).
71
Tabela 2. Impacto global das alteraes no uso de herbicidas e inseticidas

de culturas transgnicas, 1996-2004.
Trato
Soja HT
Alterao no
uso do pesticida
(milhes Kg)
Alteraes no
EIQ campo
% alterao de
uso ingrediente
ativo de pesticida
% alterao no
EIQ footprint
-41,4
-4,11
-3,8
-19,4
Milho HT
-18,0
-503
-2,5
-3,4
Algodo HT
-24,7
-1.002
-14,5
-21,7
Canola HT
-4,8
-252
-9,7
-20,7
Milho Bt
-6,3
-377
-3,7
-4,4
Algodo Bt
-77,3
-3.463
-14,7
-17,8
Total
-172,5
-9.708
-6,3
-13,8
HT: resistente a herbicida (glifosato); Bt: resistente a insetos (gene do Bacillus

Thurigiensis).
Fonte: Adaptado de Brookes e Barfoot, 2005.
Sankula et al. (2005) avaliaram os

impactos de plantas transgnicas
no uso de herbicidas nos Estados
Unidos e calcularam que houve
uma queda de 23 mil toneladas
no uso de pesticidas durante o
ano de 2004, representando uma
diminuio de 34 % comparado
com 2003. Cerca de 11 % da
reduo referente ao uso de
plantas resistentes a insetos, e o
restante conseqncia do uso de
plantas resistentes a herbicidas.
Entretanto, Benbrook (2004),
utilizando outra metodologia e
avaliando os impactos somente
72
nos Estados Unidos, encontrou

resultados um pouco diferentes.
A metodologia utilizada dividiuse em trs etapas: (1) coleta dos
dados da rea plantada com
culturas HT e Bt na base do USDA;
(2) coleta dos dados das reas
de plantio no convencional das
culturas estudadas; (3) clculo da
diferena, baseado na premissa
de que um acre no cultivado
com OGM receberia o mesmo
volume de aplicaes de pesticidas
que um acre plantado com uma
cultivar no-transgnica. Por fim,
a diferena na quantidade de
pesticida aplicado por acre para
cada cultura transgnica durante

um ano multiplicado pela
quantidade de acres plantados
durante aquele ano.
Baseado nesse clculo, Benbrook
(2004) concluiu que o uso das trs
culturas (soja, algodo e milho)
resistentes a herbicidas aumentou
o uso do produto em 5%, enquanto
o uso de cultivares Bt diminuiu
em 5 % o uso de inseticidas. O
mesmo autor se refere que nos
trs primeiros anos de cultivo
(1996 a 1998) houve uma queda
no uso do glifosato, mas a partir de
1999 houve uma inverso no uso,
provavelmente porque as plantas
daninhas desenvolveram resistncia
ao glifosato.
Consideraes finais
Pode-se dizer que existem
diversos estudos que geraram
dados substanciais a respeito
do impacto ambiental de OGMs.
Embora existam alguns dados
controversos, os resultados
obtidos at o momento no
demonstram evidncia cientfica
de efeito no ambiente. Os estudos
desenvolvidos no Brasil ainda so
incipientes, uma vez que a Lei
de Biossegurana foi aprovada

somente em 2005, e a CTNBio,
que responsvel pelas avaliaes
tcnicas para liberao de plantios
para pesquisa e comerciais, foi
regulamentada somente no final
desse ano. A Embrapa desenvolve
um projeto de biossegurana
alimentar e ambiental de alguns
OGMs produzidos pela Empresa.
So eles: soja RR, algodo Bt,
batata, mamo e feijo resistentes
a vrus. Esse projeto finalizou em
2008, e os resultados sero em
breve divulgados.
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CAPTULO 5
BIOSSEGURANA ALIMENTAR
FBIO GELAPE FALEIRO
Introduo
Quais so os verdadeiros riscos
dos alimentos transgnicos para
a sade humana? Logicamente,
no se pode generalizar uma
resposta. Entretanto, possvel
dizer que o risco menor do que o
de outro tipo de alimento liberado
para consumo humano que no
passou por testes to rigorosos
quanto os transgnicos. Em 2002,
a Organizao Mundial da Sade
(OMS) divulgou documento no
qual afirmava que alimentos
transgnicos liberados no mercado
internacional passaram por
diversos testes e no apresentavam
riscos para a sade humana.
Nenhum efeito foi detectado na
sade da populao dos pases
nos quais foram liberados.
importante salientar que alimentos
transgnicos, antes da liberao
para a alimentao humana, so
submetidos a uma bateria de
testes, como os de caracterizao
da protena expressada, de
digestibilidade in vitro e de
avaliao de toxicidade aguda oral

em camundongos, de homologia
estrutural da protena com toxinas
proticas conhecidas e do
potencial alergnico e equivalncia
nutricional. Essa bateria de testes
extremamente rigorosa e somente
os organismos transgnicos esto
sujeitos a ela.
Equivalncia Substancial
(ES)
O Princpio da Equivalncia
Substancial, cunhado em 1993
pela Organization for Economic
Cooperation and Development
(OECD), Comunidade Europia,
considera que os organismos
existentes e seus produtos
derivados podem ser utilizados
como parmetro comparativo
na avaliao de segurana
de alimentos geneticamente
modificados (AGMs), uma
vez que esses alimentos
possuem um histrico de uso
seguro (ORGANIZATION FOR
79
AND DEVELOPMENT, 1993).

Isso , todo alimento utilizado
presumivelmente seguro a no ser
que um perigo significativo tenha
sido identificado. Com base nesse
conceito, avaliam-se similaridades
e diferenas entre os AGMs em
comparao a seus anlogos
considerados saudveis (WORLD
HEALTH ORGANIZATION, 2000). O
objetivo garantir que os alimentos
transgnicos sejam to seguros
quanto os anlogos convencionais.
Cenrios possveis:
1) AGM ou derivado
substancialmente equivalente
ao anlogo convencional
quanto composio, aspectos
agronmicos e toxicolgicos.
2) AGM ou derivado equivalente
ao anlogo convencional, exceto
por algumas poucas diferenas
claramente definidas.
3) AGM ou derivado no
equivalente ao anlogo
convencional.
No primeiro cenrio, no so
necessrios estudos adicionais. No
segundo, a caracterstica estaria
relacionada ao gene inserido.
Nesse caso, estudos adicionais
80
acerca da protena expressa so

requeridos (p.e., alergenicidade,
digestibilidade). No ltimo cenrio,
sero necessrias avaliaes
complementares, utilizando
tcnicas mais sofisticadas, como
proteoma e metaboloma (LAJOLO;
NUTTI, 2003; WATANABE; NUTTI,
2002).
Entretanto, a equivalncia
substancial apenas uma anlise
preliminar que no garante
a segurana, mas auxilia na
identificao de similaridades
e diferenas entre o alimento
convencional e o alimento
geneticamente modificado, que,
posteriormente, submetido a
anlises toxicolgicas adicionais
(WORLD HEALTH ORGANIZATION,
2000; WATANABE; NUTTI, 2002).
Tais anlises so importantes
porque podem ocorrer efeitos
no intencionais que alteram a
composio e o valor nuticional
do alimento, podem ocorrer,
tambm, efeitos antinutricionais ou
txicos (LAJOLO; NUTTI, 2003).
Assim, todo alimento transgnico
submetido a um processo de
anlise de risco antes de ser
liberado para o consumo humano
ou animal.
A liberao de um alimento
geneticamente modificado ocorre
caso a caso e para isso o AGM
em questo precisa ser analisado
por avaliao preliminar de perigo,
em que se analisa, alm da
Equivalncia Substancial, o aspecto
nutricional e toxicolgico.
Conceitos de risco e
perigo
Antes de se discutir cada etapa
da anlise de risco, necessria
a compreenso dos conceitos de
risco e de perigo. A Organizao
Mundial de Sade (WHO-World
Health Organization) juntamente
com a Food and Agriculture
Organization (FAO) definiram
perigo como a presena do
agente causador de danos, isso
, o agente nocivo capaz de
causar algum efeito prejudicial;
e risco como a probabilidade de
ocorrncia do agente (WATANABE;
NUTTI, 2002; LAJOLO; NUTTI,
2003). Como exemplo, pode-se
considerar perigo a presena de
uma casca de banana jogada na
calada; e risco, a probabilidade de
algum pisar na casca e sofrer um
tombo. Em relao a OGMs, pode-
se considerar que a introduo

de uma seqncia estranha
pode causar efeitos intencionais
e no-intencionais, previsveis
ou no, pois a incorporao do
DNA no genoma pode interferir
na expresso de outros genes,
podendo alterar o metabolismo
da planta. Alm disso, o produto
da expresso do DNA uma
protena que pode ter efeito txico,
alergnico, antinutricional ou
mesmo alterar o valor nutricional do
alimento.
Efeito do DNA
recombinante (DNArec)
Dentro desse contexto,
possvel identificar qual o
perigo e o risco de um alimento
transgnico. Um dos primeiros
pontos a ser discutido a hiptese
de haver perigo na ingesto do
DNArec introduzido no alimento,
e a possibilidade de haver uma
transferncia horizontal desses
genes para bactrias intestinais ou
mesmo para as clulas do intestino.
O DNA constitudo de seqncias
de nucleotdeos e cada nucleotdeo
apresenta uma base nitrogenada
(adenina, guanina, citosina e
timina), um acar (pentose) e um
81
radical fosfato. Considerando que

o DNA recombinante inserido nos
alimentos no difere quimicamente
do DNA constituinte dos alimentos
que ingerimos diariamente,
conclui-se que a degradao do
DNA recombinante no difere da
degradao do DNA normalmente
ingerido por meio dos alimentos
no-transgnicos. Alm disso, a
quantidade de DNArec ingerida 20
mil vezes menor que a quantidade
de DNA normalmente ingerido
uma dieta diria. Tambm deve-se
lembrar que o processamento dos
alimentos seja industrial, seja
domstico costuma reduzir o
DNA em fragmentos menores que
200 pares de base, os quais so
facilmente fagocitados e digeridos
pelas clulas do intestino (LAJOLO;
NUTTI, 2003). Assim, a FAO e
OMS consideram que a simples
ingesto do DNA recombinante no
perigosa, pois ingerimos DNA
diariamente em nossa dieta (FAO,
1996).
Transferncia horizontal
Em 1993, a OMS organizou
um workshop sobre Aspectos
relacionados sade dos
82
genes marcadores de plantas

geneticamente modificadas.
Nesse encontro, com base
nas consideraes sobre a
complexidade das etapas
necessrias para a transferncia
horizontal, concluiu-se que
no existiam evidncias de
transferncia de genes de plantas
para microrganismos no trato
gastrointestinal. Para suceder tal
transferncia, seria necessria a
ocorrncia das seguintes etapas:
1) O DNA vegetal teria de ser
liberado da clula/tecido vegetal
e no ser degradado (sobreviver)
no ambiente gastrointestinal,
exposto ao cido gstrico e s
nucleases.
2) O microrganismo receptor teria
de estar competente para a
transformao.
3) O microrganismo receptor
teria de se ligar ao DNA a ser
transferido.
4) O DNA teria de penetrar a
parede celular e translocar-se
atravs da membrana celular do
microrganismo.
5) O DNA teria de continuar
ntegro ao sistema de restrio/
modificao desenvolvido pelo

microrganismo para degradar o
DNA estranho.
6) O DNA teria de ser integrado
ao genoma ou plasmdios do
hospedeiro, o que requer a
homologia de pelo menos 20
pares de base em ambas as
extremidades do DNA a ser
transferido, possibilitando a
recombinao gentica.
O Conselho da FAO (1996)
concordou com deciso do
workshop de 1993, ponderando
que, embora a transferncia do
DNA para as bactrias do trato
intestinal seja remota, em caso
de genes que poderiam afetar a
sade humana ou animal, como
o caso da resistncia a antibiticos,
esses no deveriam ser utilizados
em alimentos geneticamente
modificados. O conselho tambm
considerou que o princpio da
Equivalncia Substancial (ES)
deveria ser uma etapa-chave
no processo de avaliao da
segurana alimentar (FAO, 1996).
Alergenicidade
A alergia a um alimento
uma reao adversa a algum
componente dele e envolve uma

resposta anormal do sistema
imunolgico do corpo. O tipo mais
comum de alergia a alimentos
o mediado pela produo
de anticorpos especficos, as
imunoglobulinas E especficas
(IgE). Em uma resposta alrgica
mediada por IgE, os primeiros
sintomas ocorrem alguns minutos
ou horas aps a ingesto do
alimento e exposio do corpo
ao agente alergnico. Algumas
alergias comuns mediadas por
IgE so as induzidas por plen,
esporos, plos de animais,
picadas de insetos e alguns tipos
de alimentos. Existem tambm
respostas alergnicas mediadas por
reaes celulares, que, em geral,
ocorrem cerca de 8 horas aps a
ingesto do alimento, por exemplo,
a alergia ao glten (FAO, 2001).
Respostas alergnicas mediadas
por IgE afetam de 10 % a 25 %
da populao de pases em
desenvolvimento, embora as
alergias causadas por alimentos
afetem menos de 2,5% da
populao. As crianas so
mais atingidas que os adultos
e, segundo dados da FAO/
WHO, crianas abaixo de 3 anos
83
respondem por cerca de 5 % a 8 %

das reaes alrgicas a alimentos
(WORLD HEALTH ORGANIZATION,
2000).
Um ponto importante que quase
todos os alergnicos alimentares
so protenas, as quais podem estar
distribudas em diferentes partes
da planta e serem influenciadas
por fatores ambientais. No entanto,
no existe uma propriedade nica
que caracterize um alergnico
potencial, embora a maioria dos
alergnicos possua uma srie
de caractersticas comuns. So
elas: (1) resistncia digesto;
(2) resistncia ao processamento;
(3) peso molecular de 10 kDa a
70 kDa; (4) presena no alimento
em concentraes acima de 1 %;
(5) seqncia de aminocidos com
homologia a outros alergnicos
conhecidos (ORGANIZATION FOR
DEVELOPMENT, 2002).
Segundo o Codex Committee on
Food Labelling, uma unidade do
Codex Alimentarius, existe uma
srie de alimentos que pode causar
alergias, sendo que amendoim, soja,
leite, ovos, peixes, crustceos, trigo
e castanhas so responsveis por
90 % das reaes alrgicas.
84
Algumas espcies de vegetais e

frutas frescas tambm apresentam
reaes alrgicas tipicamente na
regio da boca e da faringe; no
entanto, as protenas alergnicas
desses alimentos so instveis
quando aquecidas ou digeridas
(FAO, 2001).
A resposta alrgica mediada por
IgE ocorre aps a ingesto do
alimento, de modo que a protena
alergnica induz a produo de
um anticorpo especfico IgE, que
tornar o indivduo sensvel
ingesto daquele alimento. Assim,
o indivduo passa por uma primeira
exposio ao alimento antes de
demonstrar uma reao alrgica
a ele. A resposta alrgica varia
de moderada a severa, pois cada
indivduo responde de maneira
diferente ao indutor da alergia.
No entanto, indivduos altamente
sensveis podem responder a
quantidades pequenas, como
microgramas, e a resposta pode
ocorrer em minutos. O tratamento
para indivduos alrgicos via
dietas especficas com restrio ao
alimento alergnico (FAO, 2001).
Baseado no exposto, a
preocupao com o potencial
alergnico dos organismos

geneticamente modificados
bastante alta. Por conta disso,
diversas discusses internacionais
tm sido realizadas. Em 1996,
o Conselho Internacional de
Biotecnologia de Alimentos e o
Instituto de Alergia e Imunologia do
International Life Science Institute
(ILSI) desenvolveu uma rvore
de decises sobre o potencial
alergnico (Fig. 1), revisada
posteriormente, em 2001, por um
conselho da FAO e da Organizao
Mundial de Sade. Essa rvore de

decises, largamente adotada pela
indstria de alimentos derivados
da biotecnologia, considera a
origem do gene, a homologia
de seqncia com alergnicos
conhecidos, a ligao imunoqumica
da protena produzida com IgE
de soro sanguneo de indivduos
conhecidamente alrgicos ao
organismo doador do gene
introduzido e as caractersticas
fisioqumicas dessa protena
(METCALFE et al., 1996; FAO, 2001).
Fonte do gene
(alergnica)
SIM NO
Homologia de seqncia
Homologia de seqncia
SIM
NO
NO
Ensaio com soro geral
Ensaio com soro

especfico
SIM
SIM
Resistncia pepsina e
modelos animais
SIM
Possivelmente
alergnico
+/+
alta
+/-
NO
-/baixa
Probabilidade de alegenicidade
Fig. 1. rvore de deciso sobre o potencial alergnico

Fonte: Adaptado de FAO, 2001.
85
Essas caractersticas facilitam

a identificao do potencial
alergnico do produto transgnico,
embora nenhum critrio,
separadamente, seja suficiente para
confirmar a alergenicidade de uma
protena. Os critrios relevantes na
utilizao da rvore de deciso so:
1) Fonte do gene transferido:
ateno particular no caso de a
fonte do gene conter alergnicos
conhecidos.
2) Homologia da seqncia: a
seqncia de aminocidos de
muitas protenas alergnicas
facilmente acessada.
3) Imunorreatividade da nova
protena: caso a protena seja
derivada de uma fonte alergnica
conhecida ou tenha homologia
de seqncia com algum
alergnico, ento a reatividade
ao IgE do soro sanguneo de
indivduos alrgicos ao alimento
determinada.
4) Efeito do pH e(ou) digesto:
a maioria dos alergnicos so
resistentes ao suco gstrico e a
proteases digestivas.
5) Estabilidade ao processamento
ou aquecimento: alergnicos
de alimentos susceptveis
86
ao calor ou processamento
so considerados menos
preocupantes (WORLD HEALTH
ORGANIZATION, 2000).
Anlise de risco
A anlise de risco de OGMs
um procedimento com diferentes
etapas: (i) a avaliao do risco; (ii)
o gerenciamento do risco; e (iii) a
comunicao do risco (LAJOLO;
NUTTI, 2003). Essa anlise
baseada em metodologias cientficas
que buscam a sistematizao das
informaes de determinado perigo
e auxiliam no processo de avaliao
de risco e na adoo de medidas
para minimiz-lo ou elimin-lo
(LAJOLO; NUTTI, 2003).
Interessante notar que vrias
plantas utilizadas na alimentao
humana so txicas quando
digeridas cruas, por exemplo, a
mandioca, a batata, a soja e outras
leguminosas. No entanto, aps o
processamento, o efeito txico
eliminado, assim, a mera presena
de um componente txico numa
variedade vegetal no elimina sua
utilizao (ORGANIZATION FOR
DEVELOPMENT, 1993).
Consideraes finais
Assim, do ponto de vista alimentar,
o nvel de segurana dos alimentos
geneticamente modificados (AGMs)
muito alto, uma vez que esses
alimentos so submetidos a uma
bateria de testes extremamente
rigorosa. Com isso, possvel
dizer que o risco que um alimento
transgnico oferece pode ser
considerado menor que o de outro
tipo de alimento liberado para
consumo humano que no passa por
uma bateria de testes to rigorosa.
Referncias
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Rome, 1996. 27 p. (FAO. Food and
Nutrition Paper, 61). Disponvel em: <ftp://
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genetically modified foods. Rome,
2001. 27 p. (Report of a joint FAO/WHO
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LAJOLO, F. M.; NUTTI, M. R.
Transgnicos: bases cientficas da sua
segurana. So Paulo: SBAN, 2003.
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METCALFE, D. D.; ASTWOOD, T.

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of foods derived from genetically
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Disponvel em: <http://www.oecd.org/
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ORGANIZATION FOR ECONOMIC
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87

Safety aspects of genetically
modified foods of plant origin. Rome,
2000. 36 p. (Report of a joint FAO/
88
WHO Expert Consultation on Foods

Derived from Biotechnology). Disponvel
em: <http://www.fao.org/es/ESN/food/pdf/
gmreport.pdf>. Acesso em: 30 maio 2005.
CAPTULO 6
ASPECTOS LEGAIS DA PESQUISA COM
TRANSGNICOS NO BRASIL
MNICA CIBELE AMNCIO
ASPECTOS LEGAIS DA PESQUISA COM

TRANSGNICOS NO BRASIL
Histrico
As atividades envolvendo
organismos geneticamente
modificados (OGM) e seus
derivados so reguladas pelas
normas estabelecidas na legislao
brasileira de biossegurana.
No Brasil, a primeira norma a tratar
desse assunto foi a Lei 8.974, de
5 de janeiro de 1995. Essa norma
tinha por objetivo regulamentar, da
maneira mais completa possvel,
os aspectos de biossegurana
relacionados ao desenvolvimento de
produtos geneticamente modificados
e seus derivados no Pas.
surgiram a partir de 1998, quando

a Comisso Tcnica Nacional de
Biossegurana (CTNBio), mediante
o Comunicado 54, de 1 de outubro
de 1998 e a Instruo Normativa
18/1998, publicou parecer tcnico
prvio conclusivo, no qual aprovava
o pedido de liberao comercial
da soja geneticamente modificada
tolerante ao herbicida base
de glifosato (a chamada soja
RR), apresentado pela empresa
Monsanto do Brasil Ltda. A
aprovao da CTNBio no trazia
como exigncia a realizao do
Relatrio de Impacto Ambiental
(EIA/Rima).
Todavia, a evoluo das discusses

acerca da adoo dos transgnicos
no Brasil, principalmente aps
os conflitos entre a legislao
de biossegurana e a legislao
ambiental, levou necessidade
de uma reestruturao em nossa
legislao sobre a matria.
A competncia da CTNBio para

retirar a exigncia da elaborao
do EIA/Rima foi imediatamente
questionada na Justia, mediante
ao civil pblica impetrada pelo
Os problemas em relao
aplicao da Lei 8.974/1995
de discusso a respeito da adoo
Instituto de Defesa do Consumidor

(Idec), o que resultou na abertura
de um amplo e polmico processo
ou no dessa tecnologia no Pas.
91
A questo era extremamente
Todo esse processo acabou
polmica e teve desdobramentos
por gerar um verdadeiro caos
tanto no mbito do Poder Judicirio,
regulatrio, que praticamente
como no do Executivo e Legislativo,
paralisou a pesquisa e o
em uma discusso que envolveu
desenvolvimento dessa tecnologia
toda a sociedade brasileira.
no Brasil. Na tentativa de solucionar
Fruto de toda essa polmica, foi

editado no Pas um conjunto de
leis e dispositivos infralegais que
acabou por gerar um quadro
regulatrio extremamente
burocrtico e complexo.
enviou ao Congresso Nacional

um projeto de lei, fruto da
discusso com os diversos atores
envolvidos, propondo uma nova
regulamentao para o assunto no
Brasil.
No Brasil, at maro de 2005, desde

a concepo de um projeto de pesquisa para gerar determinado produto geneticamente modificado at
que ele conseguisse ser efetivamente comercializado, fazia-se necessrio percorrer um longo caminho,
com um nmero elevado de licenas
e autorizaes que deviam ser solicitadas a diferentes rgos do governo
ao longo do processo (Fig. 1).
92
o problema, o governo federal
Aps um ano e meio de intensas

e acaloradas discusses, esse
projeto foi finalmente aprovado
no Congresso Federal. Em 24 de
maro de 2005, o Presidente da
Repblica sancionou a Lei 11.105,
a nova Lei de Biossegurana
no Brasil, posteriormente
regulamentada pelo Decreto 5.591,
de 22 de novembro de 2005.
ASPECTOS LEGAIS DA PESQUISA COM TRANSGNICOS...
(RET) CTNBio CQB
Lei Biossegurana
e Lei Ambiental
e Lei Agrotxicos
Licenciamento
Exp. Campo (Loap)
Ibama / MMA
EIA
EIA / Rima
I, II - (LALC)
DDIV
Mapa
Licenciamento labs., cveg.,

exp. campo pequenos (2 ha),
exp. campo maiores (5 ha),
campos de multipl. sementes
3 fases mais licenas acima
Rotulagem
P. Cult.
Registro Sem.
Mapa??
Registro
Produto
Anvisa??
Ibama??
Produto
Protocolo de Cartagena
Ibama
MMA
Macrozoneamento
Conama
Biotecnologia / Biossegurana
Regulamentao no Brasil
Anvisa
MS
Biopesticidas
(PIP)
Parecer p. tcn. conclusivo

(com impacto ambiental)
Autorizao lab.
Mapa
Registro lab.
Ibama / MMA
Autorizao campo
Mapa (Atec)
Lei Biossegurana
e Lei Ambiental
CTNBio
CQB
Parecer P. Tcn. Conclusivo
(sem impacto ambiental)
no-biopesticidas
P&D - Plantas (I)
CTNBio
TR
Macrozoneamento
Mult. Sementes
Fig. 1. Arcabouo legal vigente no Brasil at 2005, mostrando a complexidade de autorizaes

e licenas necessrias para aprovao de atividades envolvendo OGM e seus derivados.
Fonte: Sampaio, 2004.
Principais aspectos
da nova legislao de
biossegurana brasileira1
A Lei n 11.105/2005 estabelece
normas de segurana e
mecanismos de fiscalizao
1
sobre a construo, cultivo,

produo, manipulao, transporte,
transferncia, importao,
exportao, armazenamento,
pesquisa, comercializao,
consumo e liberao no meio
ambiente, e descarte de OGM e
seus derivados no Pas. (Art. 1).
As implicaes da Lei 11.105/2005 para o desenvolvimento de pesquisas com clulas-tronco no

sero tratadas nesta obra, em virtude da especificidade e caractersticas prprias da matria.
93
Como desdobramento dessa lei,

editou-se posteriormente o Decreto
Regulamentador 5.591/2005, novas
instrues normativas da CTNBio,
bem como a Medida Provisria
327/2006 e o Decreto 5.950/2006
(as duas ltimas normas referentes
pesquisa em reas prximas
s unidades de conservao
brasileiras).
importante ressaltar que, por
se tratar de legislao nova e
ainda em fase de aplicao,
novas alteraes no texto da Lei
11.105/2005 j so discutidas no
Congresso Nacional.
Todas essas normas regulamentam
as atividades envolvendo
transgnicos no Brasil, sejam
elas para pesquisa ou para
comercializao. Seguindo
os princpios bsicos de
biossegurana, a avaliao
da segurana, tanto alimentar
como ambiental de um produto
geneticamente modificado, deve ser
feita desde o momento em que ele
trabalhado dentro de um laboratrio
at a sua efetiva colocao no
mercado consumidor. A nossa
legislao sobre o tema estabelece
as regras para que isso seja feito.
94
Modelo institucional
brasileiro para o
desenvolvimento de
atividades envolvendo
transgnicos
Comisses Internas de
Biossegurana (CIBio)
A primeira imposio da legislao
de biossegurana sobre o desenvolvimento de atividades envolvendo OGM ou seus derivados que
essas atividades no podem ser
feitas por pessoas fsicas, de maneira autnoma. necessrio ser uma
pessoa jurdica, seja ela pblica ou
privada, para obter as autorizaes
necessrias para o desenvolvimento
desse tipo de atividade.
Uma vez que a instituio decide
trabalhar com esse tipo de
tecnologia, a primeira atitude a
ser tomada, de acordo com a
lei, a criao, em seu mbito
interno, de uma Comisso Interna
de Biossegurana (CIBio), alm
da indicao de um tcnico
principal responsvel para cada
projeto especfico (art. 17 da Lei
11.105/2005) e cap. II da Resoluo
Normativa 1/2006 da CTNBio).
Essa comisso ir exercer a

importante funo de cuidar
dos aspectos relacionados
biossegurana dos projetos dentro
daquela instituio e tem suas
competncias definidas no art. 18
da Lei 11.105/2005.
Compete a ela, entre outras,
capacitar recursos humanos
sobre questes de biossegurana,
fiscalizar o funcionamento
das instalaes sob sua
responsabilidade em termos de
biossegurana, manter o registro
e acompanhamento de todas as
atividades envolvendo OGM e
seus derivados na sua instituio
e notificar os rgos responsveis
em caso de acidentes, bem como
tomar as primeiras providncias
cabveis para evitar efeitos
adversos. Alm, claro, de
relacionar-se diretamente com a
CTNBio para obter as autorizaes
necessrias ao desenvolvimento de
projetos e atividades que envolvam
OGM e seus derivados.
Instituda a CIBio, o primeiro passo

para a realizao de qualquer
atividade envolvendo OGM e seus
derivados por uma determinada
instituio conseguir a autorizao
para tanto junto Comisso
Tcnica Nacional de Biossegurana
(CTNBio) (3 do art. 2 da lei)2.
Comisso Tcnica Nacional de

Biossegurana (CTNBio)
A CTNBio uma instncia
colegiada multidisciplinar de
carter consultivo e deliberativo,
vinculada ao Ministrio da Cincia e
Tecnologia.
Sua composio antiga de 18
membros, prevista pela Lei n
8.974/1995, foi alterada para 27.
Destes, 12 so cientistas de notrio
saber cientfico e tcnico, em efetivo
exerccio profissional (3 da rea de
sade humana, 3 da rea animal,
3 da rea vegetal e 3 da rea de
meio ambiente), 9 representantes
dos Ministrios envolvidos com a
questo3, 1 especialista em defesa
2
Essa autorizao o chamado Certificado de Qualidade em Biossegurana CBQ. As regras para
sua emisso foram determinadas pela CTNBio na Resoluo Normativa 1, de 20 de junho de 2006.
3
So eles: Ministrio da Cincia e Tecnologia, Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento,
Ministrio da Sade, Ministrio do Meio Ambiente, Ministrio do Desenvolvimento Agrrio, Ministrio
do Desenvolvimento, Indstria e Comrcio, Ministrio da Defesa, Secretaria Especial de Aqicultura, e
Pesca e Ministrio das Relaes Exteriores.
95
do consumidor, 1 em sade, 1 em
meio ambiente , 1 em biotecnologia,
1 em agricultura familiar e 1 em
sade do trabalhador.
animal, vegetal e meio ambiente).

O qurum para tomada de decises
Todos os membros da CTNBio

devem ter o grau de doutor e
destacada atividade profissional
nas reas de biossegurana,
biotecnologia, biologia, sade
humana e animal ou meio
ambiente. Tais exigncias reforam
o carter tcnico da comisso
e conferem maior segurana s
decises por ela tomadas, levandose em conta a complexidade
e tecnicidade das questes
relacionadas anlise de risco de
OGM e derivados.
Cada membro da CTNBio tem
um suplente, que participa dos
trabalhos na ausncia do titular
e pode votar nesse caso. Os
membros da CTNBio tm mandatos
de 2 anos, renovveis por at mais
dois perodos consecutivos.
O presidente da CTNBio
designado, entre seus membros,
pelo Ministro da Cincia e Tecnologia,
e as reunies dessa comisso so
instaladas com 14 membros, includo
pelo menos um representante
96
cientista de cada uma das reas

mencionadas na lei (sade humana,
pela CTNBio foi estabelecido no

Decreto 5.591/2005, cujo pargrafo
nico do art. 19 estabelece que
as decises da CTNBio sero
tomadas com votos favorveis da
maioria absoluta de seus membros,
exceto nos processos de liberao
comercial de OGM e derivados,
para os quais se exigir que a
deciso seja tomada com votos
favorveis de pelo menos dois
teros dos membros.
Assim, para que a CTNBio tome
uma deciso em qualquer processo
relativo ao uso de OGM e seus
derivados para a pesquisa, sero
necessrios 14 votos favorveis
a essa deciso. J quanto s
decises em processos relativos
ao uso comercial de OGM e seus
derivados, sero necessrios 18
votos favorveis para que a deciso
seja tomada.
Destacam-se entre as competncias
da CTNBio (artigo 14 da Lei
11.105/2005):
Estabelecer normas para

as pesquisas com OGM e
derivados de OGM.
Proceder anlise da avaliao

de risco, caso a caso,
relativamente a atividades e
projetos que envolvam OGM e
derivados.
Autorizar, cadastrar e
acompanhar as atividades de
pesquisa com OGM ou derivado
de OGM, nos termos da
legislao em vigor.
Autorizar a importao de OGM

e seus derivados para atividade
de pesquisas.
Prestar apoio tcnico consultivo

e de assessoramento ao CNBS
na formulao da Poltica
Nacional de Biossegurana de
OGM e seus derivados.
Emitir os Certificados de
Qualidade em Biossegurana
(CQB) para o desenvolvimento
de atividades envolvendo OGM
e seus derivados.
Emitir deciso tcnica, caso a

caso, sobre a biossegurana
de OGM e seus derivados
no mbito das atividades de
pesquisa e de uso comercial de

OGM e seus derivados, a qual
tem carter vinculativo para os
demais rgos e entidades da
administrao.
Entre essas competncias, o ponto
crucial est no inciso XX do art.
14, que diz textualmente ser da
competncia da CTNBio identificar
atividades e produtos decorrentes
do uso de OGM e seus derivados
potencialmente causadores de
degradao do meio ambiente ou
que possam causar riscos sade
humana.
Isso no significa que os OGMs
ou seus derivados no esto
mais sujeitos ao licenciamento
ambiental. O que o legislador fez foi
apenas colocar um ponto final nas
discusses acerca da competncia
para tomar esse tipo de deciso.
A CTNBio continuar efetuando
a anlise de risco dos processos
a ela submetidos em relao ao
uso de OGM e derivados, caso a
caso. Haver situaes em que ela
identificar as atividades e produtos
decorrentes do uso desses OGMs
ou derivados como no sendo
potencialmente causadoras de
97
degradao do meio ambiente

ou que possam causar riscos
sade humana e outras em que a
comisso identificar esse perigo.
Nesses casos, caber aos rgos
ambientais fazer o licenciamento
ambiental.
O disposto no inciso XX do art. 14
reforado pelos 2 e 3 do art. 16,
e pelo art. 37 da Lei 11.105/2005.
A Lei 11.105/2005 tambm
fortaleceu o trabalho da CTNBio ao
estabelecer que seu parecer vincula
os demais rgos da Administrao
Pblica.
rgos e Entidades de Registro e

Fiscalizao
Os rgos e entidades de registro
e fiscalizao a que se refere
a Lei 11.105/2005 so aqueles
vinculados ao Ministrio da Sade
(no caso, a Agncia Nacional
de Vigilncia Sanitria Anvisa),
Ministrio da Agricultura, Pecuria
e Abastecimento (no caso, a
Coordenao de Biossegurana
do Mapa), Ministrio do Meio
Ambiente (no caso, o Instituto
Brasileiro do Meio Ambiente e
Recursos Renovveis Ibama) e da
98
Secretaria Especial de Aqicultura e

Pesca da Presidncia da Repblica.
Destacam-se entre suas
competncias:
Fiscalizar as atividades de
pesquisa de OGM e seus
derivados.
Registro e fiscalizar a liberao

comercial de OGM e seus
derivados (nesses casos, esses
rgos podero estabelecer
normas prprias para efetuar
o registro, autorizao,
fiscalizao e licenciamento
ambiental desses produtos,
com exigncias adicionais
alm das apresentadas
CTNBio. Entretanto, tais
exigncias somente podero
ser efetuadas no sentido de
adequar as decises da CTNBio
aos procedimentos, meios
e aes em vigor aplicveis
aos produtos convencionais,
conforme estabelece o 1 do
art. 53 do Decreto 5.591/2005.
No se pode olvidar que as
decises da CTNBio so
sempre vinculantes para esses
rgos do ponto de vista
tcnico da biossegurana).
Emitir autorizao para a

importao de OGM e seus
derivados para uso comercial
(essa competncia passa a ser
exclusiva desses rgos, tendo
em vista que a lei concedeu
CTNBio apenas a competncia
para autorizar a importao para
realizao de pesquisas).
Subsidiar a CTNBio na definio
de quesitos de avaliao de
biossegurana de OGM e seus
derivados.
Conselho Nacional de
Biossegurana (CNBS)
Uma das inovaes da Lei
11.105/2005 em relao
antiga Lei de Biossegurana
a criao do Conselho Nacional
de Biossegurana (CNBS). Esse
Conselho formado por 11
Ministros de Estado4 e vinculado
Presidncia da Repblica, sendo
um rgo de assessoramento
superior do Presidente da
Repblica para a formulao e
4
implementao da Poltica Nacional

de Biossegurana no Brasil (art. 8
da lei).
Ao CNBS compete a fixao
de princpios e diretrizes para a
ao administrativa dos rgos
e entidades federais com
competncias sobre as questes
de biossegurana no Pas, bem
como a tomada de deciso, em
determinados casos, em relao
a pedidos de liberao para
uso comercial de OGM e seus
derivados.
Deve-se relembrar que, no caso
de decises tcnicas quanto ao
uso de OGM e seus derivados
para a realizao de pesquisas, as
decises da CTNBio so sempre
soberanas, no cabendo ao CNBS
se manifestar.
Em relao ao uso comercial de
OGM ou seus derivados, o CNBS
se manifestar em trs ocasies:
(i) quando a CTNBio assim
solicitar, quanto aos aspectos
Os membros do CNBS so os seguintes: Ministro de Estado Chefe da Casa Civil da Presidncia da

Repblica (Presidente do CNBS), Ministro de Estado da Cincia e Tecnologia, Ministro de Estado
do Desenvolvimento Agrrio, Ministro de Estado da Agricultura, Pecuria e Abastecimento, Ministro
de Estado da Justia, Ministro de Estado da Sade, Ministro de Estado do Meio Ambiente, Ministro
de Estado do Desenvolvimento, Indstria e Comrcio Exterior, Ministro de Estado das Relaes
Exteriores, Ministro de Estado da Defesa e Secretrio Especial de Aqicultura e Pesca da Presidncia
da Repblica.
99
da convenincia e oportunidade
socioeconmicas e do interesse
nacional (inciso II, 1 do art. 8);
(ii) quando ele prprio avocar o
processo para decidir em ltima e
definitiva instncia sobre a questo
(inciso III, 1 do art. 8); ou (iii)
quando algum dos rgos de
fiscalizao e registro citados na
lei entrarem com recurso sobre a
deciso da CTNBio de liberao
comercial de OGM e derivados (7
do art. 16).
O CNBS se reunir sempre que
convocado pelo Ministro de Estado
Chefe da Casa Civil da Presidncia
da Repblica, que o preside, ou
mediante provocao da maioria
dos seus membros, ou seja, seis
ministros de Estado.
Da pesquisa
comercializao dos
transgnicos no Brasil: o que
dispe a lei
Da pesquisa em regime de
conteno
Conforme dito anteriormente, a
primeira providncia da instituio
que deseje realizar pesquisa com
transgnicos no Brasil a criao
de sua Comisso Interna de
Biossegurana (CIBio).
As reunies so instaladas com a

presena de seis de seus membros
e as decises s so tomadas
com votos favorveis da maioria
absoluta.
Uma vez feito isso, essa comisso

deve solicitar autorizao CTNBio
para o desenvolvimento das
atividades envolvendo OGM e seus
derivados, que a concede mediante
a emisso do chamado Certificado
de Qualidade em Biossegurana
(CQB). As regras para obteno
desse certificado so estabelecidas
pela prpria CTNBio, por meio da
Resoluo Normativa 1, de 20 de
junho de 2006.
Os ministros de Estado membros

do CNBS podem ser substitudos
por seus respectivos SecretriosExecutivos nas reunies do
Conselho, de acordo com o
Decreto 5.591/2005.
O Certificado de Qualidade em
Biossegurana concedido para
a instituio, que deve indicar e
detalhar as estruturas fsicas de
sua responsabilidade para as quais
o CQB ser concedido. Ao longo
100
do desenvolvimento da pesquisa,
esse certificado pode ser extendido
a outras instalaes, mediante um
novo pedido da CIBio CTNBIO,
cujas regras esto estabelecidas na
Resoluo Normativa 1/2006.
nas subcomisses setoriais ou

extraordinrias para as quais o
processo foi distribudo, ser
encaminhado ao plenrio da
CTNBio para deliberao (arts. 28 a
31 do Decreto 5.591/2005).
Para obteno do Certificado de

Qualidade em Biossegurana, a
CIBio da instituio interessada
encaminha o pedido CTNBio.
Deve-se ressaltar que, em qualquer

hiptese, se requerida por um
de seus membros e aprovada
por maioria absoluta, a CTNBio
poder realizar audincias pblicas,
garantida a participao da
sociedade civil (art. 43, I do Decreto
5.591/2005).
O requerimento deve ser

protocolado na Secretaria-Executiva
da CTNBio e, depois de autuado
e devidamente instrudo, dever
ter seu extrato prvio publicado no
Dirio Oficial da Unio e divulgado
no Sistema de Informaes de
Biossegurana SIB, que foi
criado pela Lei 11.105/2005. O
processo ser ento distribudo a
um dos membros da CTNBio para
relatoria e elaborao de parecer.
O parecer ser submetido a uma
ou mais subcomisses setoriais
permanentes ou extraordinrias
da CTNBio5, para formao e
aprovao do parecer final. O
parecer final, aps sua aprovao
5
A CTNBio sempre realiza uma

anlise caso a caso dos pedidos
a ela submetidos, quaisquer que
sejam eles. Ela poder, a seu
critrio, solicitar informaes
complementares ao processo, que
devero ser fornecidas pela CIBio
da instituio.
Aps a anlise do processo, a
CTNBio poder conceder ou no o
certificado. Caso no o conceda, a
requerente poder interpor recurso
administrativo.
De acordo com o art. 17 do Decreto 5.591/2005, a CTNBio constituir subcomisses setoriais

permanentes na rea de sade humana, na rea animal, na rea vegetal e na rea ambiental, e
poder constituir subcomisses extraordinrias, para anlise prvia dos temas a serem submetidos ao
plenrio.
101
Em caso de aprovao do CQB, a

instituio estar autorizada a iniciar
as suas pesquisas, que sempre se
iniciam em regime de conteno,
ou seja, aquelas realizadas em
laboratrios ou em casas de
vegetao, onde h um maior
controle sobre as condies de
biossegurana dos experimentos.
Da pesquisa a campo
Com o desenvolvimento dos
experimentos, se os resultados
forem positivos, ser necessrio
testar o comportamento do produto
geneticamente modificado a campo,
principalmente do ponto de vista da
sua segurana ambiental e para a
realizao de seu comportamento
agronmico. Tambm ser
necessrio o plantio do transgnico
a campo para a gerao do
material necessrio avaliao da
segurana alimentar dele.
Para tanto, novamente a CIBio
da instituio interessada dever
apresentar o pedido de liberao
planejada no meio ambiente de
OGM junto CTNBio, seguindo os
procedimentos estabelecidos na
Resoluo Normativa 6, de 6 de
novembro de 2008.
102
Caso o pedido submetido pela

CTNBio no seja aprovado,
caber recurso administrativo.
Caso seja aprovado, os testes a
campo podero ser realizados pela
instituio requerente.
O 3 do art. 14 da Lei 11.105/2005
estabelece que, no caso de deciso
tcnica favorvel sobre a biossegurana no mbito da atividade
de pesquisa, a CTNBio remeter o
processo respectivo aos rgos e
entidades de registro e fiscalizao
do Ministrio do Meio Ambiente,
Sade e Agricultura e Secretaria Especial de Aqicultura e Pesca, para
o exerccio de suas atribuies.
No caso de decises a respeito de
atividades de pesquisa com OGM
e derivados, isso significa dizer que
o processo ser encaminhado para
esses rgos apenas para cumprir
as funes fiscalizatrias, uma vez
que apenas essa competncia
atribuda a esses rgos, conforme
previsto no inciso I do art. 16 da lei.
J em relao s decises no
mbito do uso comercial de OGM
e seus derivados, a competncia
dos rgos e entidades de registro
e fiscalizao ampliada, conforme
ser visto a seguir.
Da liberao comercial do OGM

Uma vez concludos os testes
a campo do OGM em relao
segurana ambiental e avaliao
agronmica, assim como concluda
a avaliao alimentar do OGM, o
prximo passo ser o pedido de
liberao pr-comercial ou a prpria
liberao comercial do transgnico.
Deve-se ressaltar que os testes a
campo no so realizados apenas
uma nica vez. So necessrios
pelo menos dois anos de testes e
avaliaes em diferentes regies
edafoclimticas do Pas, para
realmente se garantir a segurana
dos dados a serem apresentados
CTNBio.
Os pedidos de liberao prcomercial ou liberao comercial
do OGM so feitos novamente pela
CIBio junto CTNBio e seguem
os procedimentos previstos na
Rosluo Normativa 5, de 12 de
maro de 2008, com algumas
especificidades da legislao.
Uma delas que o processo deve,
obrigatoriamente, ser analisado
por todas as subcomisses
permanentes da CTNBio (vegetal,
animal e de sade humana) no
caso de liberao comercial de

OGM e seus derivados (art. 33 do
Decreto 5.591/2005).
Outra que as audincias pblicas
para ouvir a sociedade civil podero
ser realizadas tanto a pedido de
um dos membros da CTNBio
como por parte comprovadamente
interessada na matria objeto
da deciso (art. 43, II do Decreto
5.591/2005).
Essa comisso proceder a
anlise do ponto de vista tcnico
do processo, devendo realizar
audincias pblicas para ouvir
a sociedade sobre a questo.
Em relao aos aspectos da
convenincia e oportunidade
socioeconmicas e do interesse
nacional do processo, a CTNBio
poder solicitar ao Conselho
Nacional de Ministros (CNBS)
que se manifeste especificamente
sobre essa questo (inciso II,
1 do art. 8).
Da mesma forma que nos outros
casos, em caso de parecer
favorvel da CTNBio para a
liberao comercial, essa deve
encaminhar o processo para os
rgos de fiscalizao e registro.
103
S que, ao contrrio do que

acontece nas decises relacionadas
pesquisa, havendo divergncia
desses rgos quanto deciso
da CTNBio sobre a liberao
comercial do OGM ou seus
derivados, eles podem apresentar
recurso ao Conselho Nacional de
Biossegurana (CNBS) no prazo de
at 30 dias aps a publicao da
deciso tcnica da CTNBio (7 do
art. 16 da Lei 11.105/2005). Nesses
casos, caber ao CNBS decidir em
ltima e definitiva instncia sobre a
questo.
Outras disposies
Dada a importncia da matria e
os riscos potenciais envolvidos, o
legislador cuidou de estabelecer, na
prpria Lei 11.105/2005, situaes
em que podero ser atribudas
responsabilidades tanto no mbito
civil e administrativo, como tambm
na esfera criminal.
Em relao responsabilidade civil,
essa lei estabelece a obrigao de
o responsvel por danos ao meio
ambiente e a terceiros que possam
ser causados pelo desenvolvimento
de atividades envolvendo OGM
e seus derivados indenizar ou
104
reparar integralmente tais danos,

independentemente de culpa. A
responsabilidade civil aqui atribuda
a responsabilidade objetiva,
seguindo o exemplo de nossa
legislao ambiental.
Em relao responsabilidade
administrativa, a lei estabeleceu
diferentes tipos de sanes para
possveis infraes s normas
previstas na legislao de biossegurana, entre elas a imposio de
multas. Essas multas tero seus critrios, valores e aplicao definidos
pelos rgos e entidades de registro e fiscalizao referidos na lei,
mas podero variar de R$ 2.000,00
a R$ 1.500.000,00. Em relao
responsabilidade criminal, a Lei
11.105/2005 tipificou determinadas
aes como sendo crime e estabeleceu suas respectivas penas.
Destaca-se, entre essas, o fato de
ser crime a liberao ou o descarte
de OGM no meio ambiente, bem
como a produo, armazenamento,
transporte, comercializao, importao ou exportao de OGM ou
seus derivados em desacordo com
as normas estabelecidas pela CTNBio e pelos rgos de fiscalizao e
registro.
Outra questo importante que ficou

definitivamente regulada pela Lei
11.105/2005, em suas disposies
finais e transitrias, foi a questo
da liberao comercial da soja
geneticamente modificada tolerante
ao herbicida glifosato, ocorrida no
Brasil em 1998.
O art. 30 dessa lei estabeleceu
que os OGMs que tivessem
obtido deciso tcnica da
CTNBio favorvel a sua liberao
comercial at a entrada em vigor
da Lei 11.105/2005 poderiam ser
registrados e comercializados,
salvo manifestao contrria do
CNBS, que teria um prazo de 60
dias para isso.
A soja geneticamente modificada
tolerante ao herbicida glifosato
enquadra-se exatamente nessa
categoria e, como no houve
manifestao contrria do CNBS
em relao sua liberao
comercial, no prazo que lhe foi
concedido, a partir da entrada em
vigor da Lei 11.105/2005, essa
questo foi definitivamente resolvida
no Brasil, regularizando uma
situao que j vinha ocorrendo de
maneira ilegal no Pas desde muitas
safras anteriores edio dessa lei.
Reforando essa posio, o

art. 35 da referida lei autorizou
definitivamente a produo e
comercializao de sementes de
cultivares de soja geneticamente
modificada tolerantes a glifosato
registradas junto ao Registro
Nacional de Cultivares do Ministrio
da Agricultura, Pecuria e
Abastecimento.
Alm da soja, outro OGM que teve
seu registro e comercializao
liberados a partir da entrada em
vigor da Lei 11.105/2005 foi o
algodo geneticamente modificado
resistente a insetos, tambm
conhecido como algodo Bt1, de
propriedade da empresa Monsanto
do Brasil Ltda. Isso porque ele foi
liberado pela CTNBio sob a gide
da Lei 8.974/95, mediante o Parecer
Tcnico Prvio Conclusivo 513/2005
e cuja deciso no foi contestada
pelo CNBS.
Tambm cuidou o legislador
de garantir a continuidade das
atividades que vinham sendo
realizadas no Brasil envolvendo
OGM e derivados nos ltimos anos.
Essa garantia foi estabelecida
quando a Lei 11.105/2005 disps
que todos os certificados de
105
qualidade em biossegurana,
comunicados, decises tcnicas
e atos normativos da CTNBio
tomados durante a vigncia da Lei
8.974/95 permanecem em vigor,
desde que no contrariem as
disposies na nova legislao de
biossegurana (art. 32 da lei).
Outro grande avano conseguido
em relao a essa matria foi o fim
da aplicao da Lei 7.802/1989 (Lei
de Agrotxicos) aos OGMs e seus
derivados, exceto para os casos
em que eles sejam desenvolvidos
para servir de matria-prima para a
produo de agrotxicos (art. 39 da
Lei 11.105/2005).
Essa deciso foi muito importante,
especialmente do ponto de vista
do avano da pesquisa de alguns
OGMs no Brasil. Antes dela,
havia o entendimento por parte
do Judicirio brasileiro de que
determinados tipos de OGMs que
estavam sendo desenvolvidos
no Brasil (especificamente os
resistente a vrus causadores de
doenas) enquadravam-se na
definio de afins de agrotxicos
dada pelo art. 2, I, (a) da Lei
7.802/89, que regula a pesquisa e o
registro de agrotxicos no Pas.
106
Enquadrando-se, portanto,
na definio de produto afim
de agrotxicos, as plantas
geneticamente modificadas com
caractersticas biocidas passaram,
a partir de 2001, tambm a ser
reguladas pelos dispositivos
contidos na legislao de
agrotxicos.
Uma dessas exigncias era a
obteno do chamado Registro
Especial Temporrio (RET) para
OGM, cuja concesso foi regulada
pela Instruo Normativa Conjunta
02/2002 do Mapa, a Instruo
Normativa 24/2002 do IBAMA e a
Resoluo RDC 57/2002 da Anvisa.
A experincia mostrou que esse
processo era extremamente
burocrtico, ocasionando
considerveis atrasos no
desenvolvimento de pesquisas
no Brasil. Cite-se o exemplo do
experimento da Empresa Brasileira
de Pesquisa Agropecuria
(Embrapa) com o mamo
geneticamente modificado
resistente ao vrus-da-manchaanelar, que ficou paralisado entre os
anos de 2001 a 2003.
Com o fim da exigncia da aplicao da Legislao de Agrotxicos
para aqueles OGMs e seus derivados que no sejam desenvolvidos

especificamente para servir de
matria-prima para a produo de
agrotxicos, houve uma desburocratizao considervel no processo de
obteno das necessrias licenas
para pesquisa de OGM no Brasil,
sem, ressalte-se, em momento
algum, comprometer a segurana
necessria para o desenvolvimento
desse tipo de atividade. Isso porque
todos os projetos envolvendo esses
produtos continuam a ser rigorosamente analisados pela CTNBio em
relao sua segurana, tanto para
o meio ambiente como para a sade
humana.
para o desenvolvimento de
pesquisas envolvendo OGM e
seus derivados no Brasil, uma
vez que desburocratizou, em
muito, o processo em relao s
necessrias autorizaes para tais
pesquisas, dando mais agilidade
ao sistema e evitando os entraves
que at ento vinham sendo
enfrentados pelos pesquisadores
brasileiros.
Consideraes finais
No entanto, essas promessas

s se tornaro realidade com a
efetiva atuao do Poder Executivo
nesse sentido. A experincia
tem mostrado que os atores
envolvidos na correta aplicao
da legislao de biossegurana
vm demonstrando levar em conta
muito mais aspectos polticos
ou ideolgicos do que os reais
interesses da sociedade brasileira.
A Lei 11.105/2005 e seu

regulamento surgiram na tentativa
de colocar fim ao verdadeiro caos
regulatrio em torno da questo
de biossegurana que imperava
no Pas aps os desdobramentos
da deciso da CTNBio de
liberar comercialmente a soja
geneticamente modificada tolerante
ao herbicida glifosato.
A aprovao dessa lei
representou uma grande vitria
A edio desse novo marco legal

surgiu tambm para dar maior
transparncia e confiabilidade em
torno das decises de liberao
comercial de OGM e seus
derivados.
Questes polticas ou ideolgicas

devem ser deixadas de lado,
entendendo-se que o papel
107
da CTNBio ou o dos rgos

e entidades de fiscalizao e
registro no excludente, mas sim
complementar.
Ambos so rgos do poder
pblico e devem buscar atuar de
forma conjunta, tendo como nico
objetivo o de garantir a correta
avaliao da segurana ambiental
de um determinado OGM ou
derivado antes que ele venha a ser
utilizado no Brasil.
Referncias
BRASIL. Lei n 11.105, de 24 de
maro de 2005. Regulamenta os
incisos II, IV e V do 1o do art. 225
da Constituio Federal, estabelece
normas de segurana e mecanismos
de fiscalizao de atividades que
envolvam organismos geneticamente
modificados OGM e seus derivados,
cria o Conselho Nacional de
Biossegurana CNBS, reestrutura
a Comisso Tcnica Nacional de
Biossegurana CTNBio, dispe sobre
a Poltica Nacional de Biossegurana
PNB, revoga a Lei no 8.974, de 5 de
108
janeiro de 1995, e a Medida Provisria

no 2.191-9, de 23 de agosto de 2001, e
os arts. 5o, 6o, 7o, 8o, 9o, 10 e 16 da Lei
no 10.814, de 15 de dezembro de 2003,
e d outras providncias. Dirio Oficial
[da] Repblica Federativa do Brasil,
Braslia, DF, 25 mar. 2005.
BRASIL. Decreto n 5.591, de 22 de
novembro de 2005. Regulamenta
dispositivos da Lei no 11.105, de 24 de
maro de 2005, que regulamenta os
incisos II, IV e V do 1o do art. 225 da
Constituio, e d outras providncias.
Dirio Oficial [da] Repblica
Federativa do Brasil, Braslia, DF, 23
nov. 2005.
CTNBio. Pesquisa de relao de
certificados de qualidade em
biossegurana concedidos pela
CTNBio. 2006. Disponvel em: <http://
www.ctnbio.gov.br/index.php/content/
view/2267.html>. Acesso em: 30 nov.
2006.
SAMPAIO, M. J. A. Legislao de
biossegurana no Brasil: cenrio
atual. 2004. Palestra proferida na oficina
de trabalho Trajetrias e implicaes
da regulamentao de biossegurana
no Brasil. (CGEE, 16.12.2004)
CAPTULO 7
A REDE DE BIOSSEGURANA DA
EMBRAPA
ANDR NEPOMUCENO DUSI
DEISE MARIA FONTANA CAPALBO
MARIA JOS AMSTALDEN MORAES SAMPAIO
A REDE DE BIOSSEGURANA DA EMBRAPA

Desde os anos 1990, o Brasil
pela pesquisa e que oferecessem
vem discutindo sobre os riscos e
padres de estudo altamente
benefcios potenciais oferecidos
confiveis para uso pelos
pelos organismos geneticamente
tomadores de deciso e para o
modificados OGMs. Segurana,
pblico em geral.
competitividade, desenvolvimento,
propriedade intelectual esto entre
os tpicos principais discutidos por
cientistas, indstrias proponentes,
organizaes no-governamentais
ONGs, representantes do governo
e rgos regulamentadores, para
Assim, em 2002, a Embrapa

aprovou o projeto Rede de
Biossegurana: Organismos
Geneticamente Modificados
BioSeg para gerar protocolos e
informao cientfica, utilizando
mencionar alguns.
como modelo as plantas
Nesse cenrio, a Empresa Brasileira
estudadas pela Empresa.
de Pesquisa Agropecuria
Embrapa reconheceu a
necessidade de contribuir mais
intensamente no processo de
geneticamente modificadas PGMs
As PGMs da Embrapa e o
Projeto BioSeg
desenvolvimento de OGMs.
O conjunto de PGMs desenvolvidas
A Embrapa d maior nfase
pela Embrapa, com vrios
avaliao de riscos ambientais
parceiros, incorpora caractersticas
e segurana alimentar desses
especficas determinadas pelos
organismos, especialmente pela
diferentes genes inseridos em
carncia de resultados gerados
cultivares brasileiras. Essas PGMs
no Pas e pela importncia de se
devem atender aos requisitos de
dispor de protocolos de avaliao
biossegurana estabelecidos por lei
cuidadosamente desenhados
e assegurar que apresentaro nveis
111
pelo Bean golden mosaic virus

(BGMV).
adequados de segurana alimentar

e ambiental, contribuindo com a
sustentabilidade agrcola.
So muitos os OGMs sendo
desenvolvidos pela Embrapa nos
seus 37 centros de pesquisa, mas
apenas as PGMs cujos eventos
elite estavam identificados at 2001
participam da BioSeg. Ademais,
as PGMs selecionadas atendem
a, pelo menos, um dos seguintes
critrios: apresentam possibilidade
de ser produzidas em vrios
sistemas de produo em mbito
nacional ou regional; necessitam de
ateno especial pela presena de
parentes silvestres ou plantas para
as quais h especial cuidado com
relao a fluxo gnico; utilizam uma
diversidade de processos na cadeia
produtiva como alimento.
Assim, fazem parte da BioSeg:
Algodo (Gossypium hirsutum L.

var. latifolium Hutch) resistente a
insetos.
Batata (Solanum tuberosum L.)

resistente ao mosaico causado
pelo Potato virus Y (PVY).
Feijo (Phaseolus sp.) resistente

ao mosaico-dourado causado
112
Mamo (Carica papaya L.)

resistente mancha-anelar
causada pelo Papaya ringspot
virus (PRSV).
Soja (Glycine max L.) tolerante a

herbicida (glifosato).
Os elementos-chave da BioSeg
so:
1. Desenvolver e implementar
protocolos de biossegurana
por meio de uma rede dinmica,
envolvendo capacidades
j instaladas nos pases
pertencentes ao quadro da
Embrapa e de instituies
parceiras.
2. Promover a comunicao
cientifica entre reas de
conhecimento complementares.
3. Favorecer uma reviso rpida
e freqente das metodologias
e anlises propostas pela Rede
para as PGMs; incorporar novos
aspectos de segurana para o
ser humano e para o ambiente,
to logo eles sejam detectados
por qualquer grupo nacional ou
internacional.
Estrutura do Projeto
BioSeg
O projeto foi desenhado de
forma a promover a cooperao.
A gerncia, administrativa e de
pesquisa baseada em:
1. Um Comit Externo
coordenado pela
Superintendncia de P&D da
Embrapa que acompanha o
desenvolvimento tcnico e os
resultados obtidos.
2. Um Comit Gestor CG
composto por um coordenador
e dois coordenadores adjuntos,
cada um dos lderes de Projetos
Componentes PC da Rede e
seu co-lder, e dois secretrios
executivos, em um total de 15
membros. O CG acompanha
o desembolso de recursos,
participa e promove reunies
interativas das reas de
pesquisa, apresenta relatrios
de desempenho, orienta e
garante a implementao de
normas e regulamentaes
pelos laboratrios envolvidos
na Rede, prepara dossis e
formulrios para autoridades
de governo e contato com a
mdia, entre outras atribuies.

Atualmente, os membros do
CG so: Deise Maria Fontana
Capalbo (coordenadora da
Bioseg), Maria Jos Amstalden
Sampaio (coordenadora-adjunta
da Bioseg), Marilia Regini Nutti
(coordenadora-adjunta da
Bioseg), Eliana Maria Gouveia
Fontes (lder do PC Algodo),
Andr Nepomuceno Dusi (lder
do PC Batata), Josias Corra de
Faria (lder do PC Feijo), Paulo
Ernesto Meissner filho (lder do
PC Mamo), Maringela Hungria
(lder do PC Soja), Edison Sujii
(co-lder do PC Algodo), Paulo
Eduardo de Melo (co-lder do
PC Batata), Murillo Lobo Jnior
(co-lder do PC Feijo), Jorge
Luiz Loyola Dantas (co-lder do
PC Mamo), Ida de Carvalho
Mendes (co-lder do PC Soja),
Edson Watanabe (secretrioexecutivo do CG) e Mnica
Cibele Amncio (secretriaexecutiva do CG).
3. Lderes de Projeto Componente
PC (um para cada PGM
em estudo na Rede) que
so responsveis pelo grupo
de trabalho daquele PGM
especifico, que realiza e relata
113
os experimentos definidos e
coordena todas as atividades
gerenciais no mbito de cada
PC.
Inicialmente baseados na
necessidade de gerar os dados
requeridos pela Comisso Tcnica
Nacional de Biossegurana
CTNBio para a liberao comercial
de cada um dos produtos, o grupo
tambm identifica necessidades
de treinamento e capacitao dos
membros da equipe, buscando
suprir as demandas por melhor
esclarecimento da populao. A
BioSeg se apia, at o momento,
na capacidade j instalada de 12
centros de pesquisa da Embrapa
estabelecidos em vrias regies
do Brasil. Ademais, reconhecidos
cientistas de universidades e
instituies de pesquisa nacionais
e internacionais tm apresentado
valiosa colaborao. Todos
juntos, eles constituem um grupo
multidisciplinar que se dedica
ao estudo dos cinco produtos
indicados anteriormente algodo,
batata, feijo, mamo e soja.
O grupo que estuda a segurana
ambiental avalia o impacto de
cada PGM a organismos alvo e
114
no-alvo, alm da biodiversidade

associada cultura. Os estudos
so realizados dentro da rea
cultivada de cada uma das
plantas em estudo, analisandose os efeitos no ambiente acima
e abaixo do solo, considerando
o sistema de produo em uso
e o agroecossistema especfico
da cultura. O grupo que estuda a
segurana alimentar analisa fatores
como: composio do produto
a ser utilizado como alimento
(gro, fruto ou tubrculo), efeitos
do processamento e cozimento,
expresso de protenas em
funo do novo DNA (efeitos na
funcionalidade, potencial txico e
alergenicidade) e outros aspectos.
Ensaios de laboratrio e campo
so propostos segundo o sistema
regulatrio brasileiro para cada
caso. Os estudos de segurana
ambiental e alimentar podero ser
ampliados em funo da natureza
das diferenas ou impactos
observados.
Atividades j realizadas
Em face do embate legal originado
em 2001 com a determinao
judicial da necessidade de
licenciamento ambiental para
conduo de ensaios em campo,

as atividades da Bioseg que
dependiam de autorizao
especfica, como a liberao
planejada no meio ambiente,
sofreram um atraso. Os estudos
s foram retomados ao fim de
2003, com as autorizaes para os
ensaios de mamo, feijo e batata
(Fig. 1).
No mbito da Bioseg, dando
continuidade ao propsito de
qualificao de pessoal da
Embrapa e de instituies de
licenciamento e fiscalizao
em biossegurana de PGM,
como o Instituto Brasileiro do
Meio Ambiente e dos Recursos
Naturais Renovveis Ibama e a
Comisso Tcnica Nacional de
Biossegurana CTNBio, foi
realizado em Braslia, em junho de
2005, o Primeiro Curso de Anlise
de Risco de Plantas Geneticamente
Modificadas (Fig. 2). Um segundo
curso ocorreu em agosto de 2005
em Campinas, SP.
Fig 1. Ensaios de campo de batata

(Embrapa Hortalias, DF), feijo (Embrapa
Arroz e Feijo, GO) e mamo (Embrapa
Mandioca e Fruticultura, BA).
115
Ainda em junho de 2005, foi

promovido em Campinas o primeiro
encontro de toda a equipe do
projeto que atua em atividades
ligadas segurana ambiental
de PGM (Fig. 3). O encontro,
denominado Workshop Ambiental,
reuniu mais de 40 participantes
de todos os PCs da Bioseg e teve

como objetivo uma discusso e
reviso de todos os protocolos que
esto utilizados nos diferentes PCs.
Um encontro da rea alimentar foi
realizado em setembro de 2005,
no Rio de Janeiro, com o mesmo
objetivo.
Fig. 2. Encerramento do Primeiro Curso de Anlise de

Risco de Plantas Geneticamente Modificadas, Braslia,
junho de 2005.
Fig. 3. Equipe da Bioseg presente no Workshop Ambiental realizado em junho de 2005, em Campinas, SP.
116
Resultados esperados
Com o desenvolvimento da BioSeg,
alguns resultados e impactos
podem ser esperados. Como
impactos diretos, a Embrapa
contar com dados suficientes
para submeter s autoridades
nacionais para considerao
sobre a segurana (alimentar e
ambiental) de algumas das PGMs
em estudo, permitindo, inicialmente,
a experimentao em campo, e,
posteriormente, que seja pleiteada
a liberao comercial em fase
posterior. Como impactos indiretos,
uma vez estabelecida, a Rede, com
a experincia adquirida, ser um
grupo de referncia para futuras
consultas nacionais, capaz de
rapidamente organizar discusses
e preparar um cenrio de impactos
previsveis para outros OGMs que
vierem a ser desenvolvidos.
Ao longo do desenvolvimento
do projeto, a Bioseg vem
recebendo uma demanda da
Superintendncia de Pesquisa
e Desenvolvimento SPD para
suporte na avaliao da carteira
de projetos da Embrapa. Todas as
propostas de projeto que envolvem
OGMs que so submetidas aos
macroprogramas da Embrapa tm
sido encaminhadas ao CG para
uma anlise preliminar. A SPD tem
tambm sugerido que a Bioseg
seja mais abrangente que o projeto
atual e envolva todo o trabalho
com OGM na Embrapa. Entretanto,
esse tpico ainda carece de uma
maior discusso entre CG da
Bioseg e a SPD para que se tenha
o melhor encaminhamento da
questo.
Consideraes finais
O rpido avano da biotecnologia
moderna moldar as prximas
dcadas em seu desenvolvimento
econmico. Com a autorizao de
testes em campo de vrios OGMs
(gros, produtos e derivados),
os cientistas aprendero mais
sobre como manejar os riscos e
as implicaes socioeconmicas
do uso de OGM. Os pases
em desenvolvimento esto se
capacitando para avaliar as
aplicaes dessa tecnologia em
seu territrio, o que levar cada
um desses pases a desenvolver
um formato mais adequado para
a discusso dos aspectos de
biossegurana com a sociedade.
117
Nos ltimos 15 anos, no Brasil,

muitos outros itens foram
associados ao uso da modificao
gentica em plantas, de tal forma
que, ultimamente, as discusses
politizadas dominam o cenrio
e os princpios e resultados da
cincia raramente prevalecem nas
consideraes finais. Ao mesmo
tempo em que os diferentes setores
da sociedade esto discutindo
esses tpicos, acontece a expanso
da rea plantada com PGM,
indicando que a anlise de risco
ambiental se tornar uma cincia
proativa em vez de ser reativa.
Os prximos anos, em particular
para o caso do Brasil, sero
um perodo de desafios para
se atender s necessidades
de melhor capacitao de
pesquisadores (incluindo em
reas de conhecimento como
anlise de risco e monitoramento
de experimentos em campo),
e tambm aos investimentos,
118
visando a permitir um salto no

desenvolvimento dos trabalhos com
OGMs.
Uma rede de biossegurana,
como a BioSeg, que vem sendo
desenvolvida pela Embrapa, pode
fortalecer a busca por solues a
problemas crticos, endereando-os
com maior segurana para predizer
os impactos potenciais, positivos
e negativos, para o ambiente e a
alimentao.
Agradecimentos
O projeto em Rede BioSeg
financiado pela Embrapa (vinculada
ao Ministrio da Agricultura,
Pecuria e Abastecimento) e pela
Finep/Fundo de Biotecnologia
(agncia financiadora vinculada ao
Ministrio de Cincia e Tecnologia).
Os autores agradecem aos
membros do projeto por sua
colaborao em diferentes etapas
de desenvolvimento da Bioseg.
CAPTULO 8
AS PLANTAS TRANSGNICAS E A
MICROBIOTA DO SOLO
AS PLANTAS TRANSGNICAS
SOLO
Introduo
Em apenas um grama de solo
podem ser encontradas cerca
de 10 mil espcies de bactrias
(TORSVIK; OVREAS, 2002).
Sem dvida, o maior celeiro de
genes no planeta reside na frao
microbiana da biodiversidade.
Os microrganismos presentes no
solo representam papel-chave
na ciclagem de nutrientes e na
manuteno de sua fertilidade,
alm de desempenhar funes
como agente de controle biolgico
de doenas e pragas da agricultura,
biorremediadores de poluentes,
promotores de crescimento
de plantas. Esses organismos
podem apresentar, tambm, alto
valor biotecnolgico, sendo um
manancial de frmacos, corantes,
enzimas e cidos orgnicos, entre
muitos outros produtos ainda
inexplorados.
As primeiras plantas transgnicas
foram desenvolvidas ainda nos
anos 1980. Desde ento, diferentes
E A
MICROBIOTA
DO
genes tm sido inseridos em

grande nmero de culturas a fim de
que expressem novas e desejveis
caractersticas. Esses genes e seus
produtos, eventualmente, sero
liberados nos solos, possibilitando
oportunidades de ocorrer interao
com a comunidade microbiana
(Fig. 1). Donegan et al. (1995)
sugerem que alteraes no
esperadas nas caractersticas
das plantas, resultantes de
modificaes genticas possam,
igualmente, causar impacto
sobre a microbiota do solo.
Sendo assim, as comunidades
microbianas, associadas a plantas
geneticamente modificadas, podem
ser diferentes das plantas que no
sofreram modificaes.
O desenvolvimento e o uso
de plantas transgnicas tm
promovido acalorado debate
pblico nos ltimos anos. As
plantas transgnicas representam
uma promessa para incrementar o
desenvolvimento do setor agrcola.
No entanto, seu potencial para
121
apresentar riscos indesejveis

no completamente conhecido.
Infelizmente, os organismos do
solo nem sempre so lembrados
nos debates e nos estudos
que envolvem o uso de plantas
transgnicas e seus riscos
potenciais. O potencial impacto,
direto ou indireto, do uso dessas
plantas sobre a comunidade

microbiana do solo uma das
reas mais carentes de informaes
quando o assunto biossegurana.
Na maioria dos casos, isso
acontece em razo das dificuldades
inerentes aos estudos que
envolvem esses organismos.
Planta transgnica
com gene RH expresso
em todos os tecidos
Transgene
Ex: gene RH
Resduos
Plantio direto
Transgene na superficie
Cultivo convencional
Transgene misturado
ao solo
Exsudados radiculares
Transgene na rizosfera
Fig. 1. Possveis locais de interao entre transgenes e a comunidade microbiana do solo.

RH, gene que confere tolerncia a hebicida.
Fonte: Adaptado de Dunfield e Germida (2004).
122
AS PLANTAS TRANSGNICAS E A MICROBIOTA DO SOLO
Alm de o sistema solo ser

extremamente complexo e
heterogneo, impossvel para os
pesquisadores, com a utilizao
de mtodos microbiolgicos
clssicos, cultivar ou identificar a
grande maioria dos microrganismos
presentes. No entanto, com o
auxlio de avanos metodolgicos,
especialmente a introduo de
tcnicas de biologia molecular,
novas estratgias para o estudo
das comunidades microbianas e o
possvel efeito do cultivo de plantas
transgnicas sobre elas tm sido
desenvolvidas e utilizadas.
Com o auxlio dessas tcnicas,
nos ltimos anos, tem-se visto um
incremento no nmero de estudos
dedicados a observar os possveis
efeitos de plantas transgnicas
sobre os microrganismos do solo
(DUNFIELD; GERMIDA, 2004;
MOTAVALLI et al., 2004; BRUINSMA
et al., 2003). Todavia, preciso
ressaltar que nenhuma tcnica
infalvel, e a aplicao de estudos
polifsicos dar uma viso mais
apropriada dos efeitos das plantas
geneticamente modificadas
quando comparada ao uso de uma
metodologia isolada. Aliados a isso,
o uso de controles apropriados
nos procedimentos de avaliao

de impacto e a determinao de
variaes que possam ocorrer
naturalmente so fatores-chave
para uma boa interpretao dos
resultados.
importante salientar que as
plantas transgnicas e os sistemas
agrcolas em que elas sero
introduzidas demandam avaliaes
caso a caso. A complexidade
dos solos e a multiplicidade de
papis desempenhados pelos
microrganismos foram os
pesquisadores a fazer escolhas
como quais as espcies ou grupos
e quais as funes ou propriedades
devero ser mais bem examinados.
Alm do efeito direto decorrente da
expresso da protena introduzida
durante a transformao, existe a
probabilidade de aparecimento de
efeitos no esperados que resultam
da insero do transgene no
genoma. Se essa insero ocorrer
no meio de uma regio codificadora
de protena, sua expresso pode
ser inviabilizada. Se o transgene for
inserido entre uma regio promotora
e uma regio codificadora, essa
regio poder ficar sob a regulao
do promotor que acompanha o
123
transgene, modificando dessa

maneira o padro de expresso
daquele gene (RUMJANEK et
al., 2005). Caso uma protena
vital no seja mais produzida, a
sobrevivncia do organismo estar
em risco. Todavia, alm dessa
situao extrema, possvel que
haja alterao na sntese de outras
protenas que podem se refletir
nas vias metablicas, produzindo
modificaes imprevisveis
(RUMJANEK et al., 2005). Nesse
cenrio, cada transgnico deve ser
estudado no s quanto eficincia
da caracterstica introduzida, como
tambm quanto possibilidade de
impacto ambiental e de segurana
alimentar decorrentes das
alteraes inesperadas (CELLINI et
al., 2004).
Para estudos de impacto do uso
de plantas transgnicas sobre
os microrganismos do solo,
Bruinsma et al. (2003) apresentam
as seguintes questes a serem
consideradas:
Quais so as condies
ambientais em que as plantas
transgnicas sero introduzidas
(tipo de solo, pH, vegetao
nativa)?
124
O que j conhecido sobre

a comunidade microbiana
presente e suas funes-chave
no solo? Existe algum grupo
ou processo particularmente
importante, dominante ou
vulnervel?
Qual a natureza e qual

a origem do(s) gene(s)
introduzido(s) na planta?
Quando e em qual(is) rgo(s)
esse gene ser expresso?
O modo de ao do material
gentico inserido age sobre
um organismo especfico ou
confere-lhe uma propriedade
mais geral que pode afetar uma
gama maior de organismos?
Como se d a exposio dos

microrganismos do solo ao
produto da transformao
gentica? Quo longa essa
exposio?
As respostas a essas perguntas

devem ajudar a determinar quais
microrganismos do solo ou
processos podem ser afetados
pela introduo de uma planta
transgnica especfica. Porm,
nosso conhecimento sobre os
efeitos potenciais ainda ser
incompleto e efeitos inesperados

no podem ser descartados.
Portanto, alguns parmetros podem
ser verificados em todos os casos,
a fim de englobar mudanas no
solo no ligadas diretamente
previso obtida com as repostas
quelas cinco perguntas anteriores.
Deve-se identificar e buscar
grupos de microrganismos
especficos e processos que
aparentemente possam ser
susceptveis introduo de
uma planta transgnica, levando
em considerao a origem e
a funo do gene inserido e o
conhecimento do ambiente em que
essas plantas sero introduzidas.
Seria interessante utilizar, tambm,
anlises mais gerais que pudessem
detectar efeitos fora do escopo dos
grupos e processos previamente
escolhidos. Tais anlises deveriam
avaliar a comunidade microbiana
em sua totalidade, de preferncia
com uma combinao de
metodologias. Se essas anlises
revelassem efeitos inesperados,
esses poderiam ser examinados
mais detalhadamente.
Bruinsma et al. (2003) citam alguns
grupos como potenciais indicadores
por serem acessveis experimentalmente e apresentarem caractersticas importantes e reconhecidas no

sistema solo. So eles:
Fungos micorrzicos: as
associaes micorrrzicas
podem ser bastante sensveis
a diversos fatores, incluindo
perturbaes fsicas, uso
de fertilizantes e alteraes
nas espcies de plantas em
determinada rea.
Bactrias diazotrficas
(fixadoras de N2): tambm so
sensveis a alteraes que
ocorrem no sistema solo. Tm
papel de destaque no ciclo
do N e vrios mtodos esto
disponveis para que possam
ser estudadas.
Bactrias nitrificadoras: o
processo de nitrificao,
importante na ciclagem do N
do solo, parece ser limitado a
um nmero restrito de bactrias
autotrficas (HOOPER, 1990)
e estresses ambientais podem
afetar severamente sua atividade
(ATLAS; BARTHA, 1998).
Fungos decompositores: a
baixa redundncia desse
125
grupo de organismos, sua

sensibilidade e a importncia
do processo de degradao
da lignina so caractersticas
de um bom indicador (BODDY;
WATKINSON, 1995).
Antagonistas (Pseudomonas
spp.; Trichoderma): alteraes
nas populaes desses
organismos podem ter
implicaes importantes para
a dinmica de populaes nos
solos (GYAMFI et al., 2002).
No Brasil, alguns trabalhos

envolvendo questes de
biossegurana e plantas
transgnicas esto sendo
conduzidos no campo. Esses
trabalhos so muito recentes, j
que as normas que regem esses
estudos foram definidas h pouco
tempo. Por essa razo, ainda no
existem resultados disponveis
de estudos conduzidos no Pas.
Portanto, neste captulo, sero
apresentados os resultados de
trabalhos conduzidos por diversos
pesquisadores estrangeiros,
focando os parmetros avaliados e
as tcnicas utilizadas para analisar
as comunidades microbianas.
126
Entre os potenciais efeitos do uso

de plantas transgnicas sobre
a microbiota do solo, esto:
alteraes na atividade e na
diversidade de microrganismos
em resposta a mudanas na
quantidade e na composio de
exsudados radiculares; alteraes
provocadas por mudanas no
manejo como aplicaes de
pesticidas e preparo do solo;
mudanas genticas e funcionais
resultantes da transferncia
horizontal de genes das plantas
transgnicas para microrganismos
do solo (DUNFIELD; GERMIDA,
2004; MOTAVALLI et al., 2004).
Plantas transformadas
para exsudao de novos
compostos
Oger et al. (2000) estudaram
plantas modificadas (Lotus
corniculatos cv. Rodo) para a
produo de opinas. As opinas
so geralmente compostos de
baixo peso molecular, derivados
de aminocidos ou acares,
e podem ser utilizadas como
fonte de nutrientes por algumas
bactrias. O estudo de Oger et
al. (2000) baseado na seguinte
possibilidade: a exsudao de
opinas pelas plantas transgnicas
favorece o crescimento de
microrganismos que utilizam
esses compostos, garantindo
a eles uma vantagem seletiva
sobre a poro da comunidade
microbiana incapaz de utiliz-los.
Esses autores trabalharam com
plantas transformadas (produtoras
de opinas) e no-transformadas
de Lotus corniculatus cv. Rodo,
em um experimento de casa de
vegetao. Depois de 20 semanas,
a contagem de bactrias totais
em meio de cultura foi similar
para todos os tratamentos. No
entanto, o nmero de utilizadores
de opinas foi maior (at 475 vezes)
ao redor do sistema radicular
das plantas transgnicas. A
remoo das plantas no levou
ao desaparecimento do padro
observado aps a introduo das
linhagens modificadas, pelo menos,
durante o perodo do experimento
(22 semanas). No entanto,
quando as plantas transgnicas
foram substitudas pelas plantascontrole, o nmero de utilizadores
de opinas tendeu a decrescer
ao longo do tempo, mostrando
que o efeito produzido por essas
plantas pode ser reversvel. Os

resultados apresentados nesse
trabalho mostram que, mesmo
pequenas alteraes, como a
produo de um simples composto
adicional pela planta, podem levar a
mudanas na microflora bacteriana
associada. No caso desse tipo de
transformao em que existe uma
populao microbiana que pode
ser claramente definida como alvo,
foi possvel demonstrar o efeito
do cultivo de transgnicos apenas
avaliando essas populaes, o
que, no entanto, no elimina a
possibilidade de efeitos sobre
outros grupos microbianos,
especialmente, quando se
considera a cadeia trfica
presente na comunidade do solo
(RUMJANEK et al., 2005).
Plantas transgnicas
resistentes a doenas
As primeiras plantas transgnicas,
modificadas com a inteno de
melhorar a resistncia contra
bactrias fitopatognicas nativas
do solo, foram as batatas
transformadas para produzir
a Lisozima-T4, uma enzima
bactereoltica detectada em
diversas espcies de plantas,
127
buscando resistncia contra Erwinia

carotovora subsp. atroseptica
(DRING et al., 1993). A princpio
descobriu-se que vrias outras
bactrias ou fungos tambm so
sensveis a lisozima T4 in vitro
(DE VRIES et al., 1999). Dessa
maneira, a expresso da lisozima
T4 apresenta potencial para
promover alteraes na estrutura
das comunidades microbianas do
solo.
Lottman et al. (1999) avaliaram
populaes de bactrias do solo
num experimento no qual foram
utilizadas duas linhagens (DL4 e
DL5) de plantas produtoras da
T4 / lisozima; uma outra linhagem
(DC1) carregando a mesma
construo gnica, mas sem o
gene responsvel pela produo
da lisozima e a variedade parental
no transgnica DES como controle
no transformado. Os resultados
obtidos mostraram que o nmero
de bactrias aerbias, associadas
rizosfera de plantas transgnicas
produtoras de lisozima, no
foi significativamente diferente
daquele obtido das plantascontrole. O mesmo foi observado
para populaes de bactrias
com propriedades antifngicas e
128
produtoras de AIA (cido-indol-3actico). Sete espcies de bactrias

benficas antagonistas a E.
carotovora e a Verticillium dahliae,
que representavam 9,7 % de todas
as 124 antagonistas identificadas,
foram isoladas apenas das plantascontrole.
Em outro trabalho, Lottman et al.
(2000) avaliaram o comportamento
de duas estirpes de bactrias
antagonistas e produtoras de AIA,
Serratia grimesii L16-3-3
(isolada apenas de plantas controle
e sensvel a lisozima-T4 in vitro
LOTTMAN et al., 1999) e Pseudomonas
putida QC14-3-8 (isolada de
plantas de batata transgnicas e
tolerantes a lisozima T4 in vitro
LOTTMAN et al., 1999). Essas
bactrias com marcadores de
resistncia rifampicina foram
inoculadas em plantas de batata
transgnicas produtoras de
lisozima-T4 (linhagem DL5), em
controle transgnico sem o gene
da lisozima (linhagem DC1) e na
linhagem-controle no transformada
(DES). Avaliando a presena das
estirpes inoculadas na rizosfera das
plantas pela contagem em placas
e a diversidade total de bactrias,
utilizando a tcnica de eletroforese
em gel com gradiente desnaturante

(DGGE), os autores concluram
que no houve efeito negativo da
lisozima-T4 sobre as bactrias da
riozosfera, incluindo aquelas que
foram inoculadas. Na verdade,
durante o perodo de florescimento,
foram encontradas mais colnias
de Pseudomonas putida, tolerantes
lisozima, associadas linhagem
transgnica DL5. Nesse caso,
os autores constataram que
a produo de lisozima pode
incrementar o estabelecimento de
bactrias tolerantes e, se essas
bactrias tiverem propriedades
antagonistas, podem promover
efeitos sinergsticos.
diferentes, com o intuito de buscar

complementaridade entre elas. Na
primeira abordagem, a abundncia
relativa das espcies bacterianas
na rizosfera foi determinada com
base no cultivo e na caracterizao
de isolados por anlises do perfil
de cidos graxos; na segunda,
permitiu analisar o perfil catablico
das comunidades utilizando
microplacas Biolog GN (GARLAND;
MILLS, 1991); e, na terceira,
fragmentos amplificados do gene
da regio 16S rRNA, provenientes
do DNA total extrado da rizosfera
das plantas, foi analisado pela
tcnica de DGGE ou por clonagem
e seqenciamento.
Heuer et al. (2002) conduziram

outro estudo de campo, em
duas reas distantes, por trs
anos, mostrando que a estrutura
da comunidade microbiana da
rizosfera de plantas transgnicas
de batata T4-lisozima, linhagem
DL4, diferenciava-se de uma
segunda linhagem transgnica
(DL5), do controle transgnico
sem o gene da lisozima (DC1) e da
linhagem controle no transformada
(DES). Nesse trabalho, as
comunidades bacterianas foram
analisadas sob trs abordagens
A mdia do tamanho das

populaes bacterianas na rizosfera
das plantas, ao longo de dez
coletas, no foi estatisticamente
diferente entre as linhagens
produtoras de lisozima e as
plantas controle. O perfil catablico
potencial da comunidade
microbiana associada rizosfera da
linhagem DL4 foi significativamente
diferente das demais linhagens.
Bandas de DGGE, especficas
para linhagens produtoras de
lisozima ou para plantas controle,
no foram observadas, indicando
129
que linhagens diferentes ou

a produo de lisozima no
afetaram a abundncia de
espcies bacterianas na rizosfera.
Diferenas na composio de
espcies ou gneros, acessados
com o seqenciamento, no foram
consistentes. Porm, comparadas
a outras linhagens, notou-se
grande abundncia do gnero
Pseudomonas na rizosfera de DL4
(HEUER et al., 2002). Os autores
desse trabalho destacaram que
fatores ambientais tiveram maior
influncia sobre a estrutura da
comunidade microbiana do que a
natureza transgnica das plantas.
As diferenas apresentadas pela
linhagem DL4 parecem estar mais
ligadas a outras caractersticas
dessas plantas que apresentaram
significativamente uma biomassa
radicular reduzida, colmos mais
curtos e folhas menores em plantas
jovens, alm de um progresso mais
rpido de senescncia em plantas
mais velhas.
Nessa srie de estudos, nos
quais foram aplicados mtodos
dependentes do cultivo dos
microrganismos e mtodos
independentes de cultivo (mtodos
de biologia molecular), foram
130
detectadas diferenas no nmero

e na diversidade das bactrias;
no entanto, esses efeitos no
pareceram ser resultado direto da
produo da lisozima (LOTTMANN;
BERG, 2001; HEUER et al., 2002).
Os autores concluram que o
efeito da lisozima foi apenas
um fator menor comparado s
mudanas naturais que ocorreram
nas comunidades microbianas
dos solos (HEUER et al., 2002).
Essa concluso foi baseada em
resultados de vrios projetos
relacionados, oferecendo uma
quantidade robusta de dados,
em virtude da natureza polifsica
das metodologias aplicadas,
da utilizao de controles
(testemunhas) necessrios e de
anlises ao longo de vrias pocas
e anos.
Cowgill et al. (2002) estudaram
o efeito, sobre microrganismos
do solo, do cultivo de plantas de
batata transgnica com expresso
de cistatinas (inibidores cistena
proteinase) que conferem
resistncia parcial a nematide de
cisto. No primeiro ano de estudo,
foram avaliadas duas linhagens
transgnicas (D6/7 e D5/13)
que continham seqncias que
codificavam para uma cistatina

presente em ovos de galinha
(CEWc) (URWIN et al., 2001).
J no segundo ano, a linhagem
transgnica (D9/31) continha uma
verso modificada da cistatina
encontrada em arroz (Oc-ID86)
(URWIN et al., 2001). Tambm
no segundo ano, foram feitas
comparaes entre o cultivo
da linhagem transgnica e a
utilizao de nematicidas base de
carbamato. Durante os dois anos, a
cultivar Desire, no transformada,
foi utilizada como controle. As
plantas foram cultivadas em solo
infestado com nematides-de-cisto
das espcies Globodera pallida e G.
rostochiensis. A atividade (medida
por meio da respirao basal) e a
estrutura da comunidade microbiana
(anlise do perfil de cidos graxos)
foram avaliadas em trs diferentes
coletas durante o crescimento da
cultura.
Os resultados do trabalho descrito
acima revelaram que, no primeiro
ano de estudo, no houve
diferenas quanto ao total de cidos
graxos ou atividade microbiana
entre solos coletados sob cultivo de
plantas transgnicas ou o controle
no transformado. No entanto,
foi observada uma alterao

na estrutura da comunidade
microbiana em algumas situaes.
Na ltima coleta, a quantidade de
cidos graxos relativos a fungos
foi incrementada na rizosfera
da linhagem D6/7. Porm, no
foram encontrados cidos graxos
de fungos em solo de rizosfera
da linhagem D5/13, sugerindo
que o crescimento de fungos foi
significativamente inibido pelo
cultivo dessa linhagem (COWGILL
et al., 2002). No segundo ano
de estudo, a quantidade total de
cidos graxos foi reduzida nos
tratamentos contendo plantas
transgnicas ou onde o carbamato
foi aplicado. Os cidos graxos
relacionados aos fungos foram
reduzidos apenas nos tratamentos
com plantas transgnicas, enquanto
aqueles relacionados a bactrias
foram reduzidos em ambos os
tratamentos: plantas transgnicas
ou carbamato. No entanto, a maior
parte das variaes foi atribuda
aos perodos de coleta. Os autores
no souberam explicar como as
cistatinas produzidas pelas plantas
transgnicas apresentaram efeitos
adversos sobre os microrganismos.
Eles sugerem, no entanto,
131
que as alteraes observadas,

provavelmente, so resultado
de alteraes na composio de
exsudados radiculares das plantas
transgnicas e no da inibio
da atividade de proteinases
microbianas.
de razes R. solani, mas foram

normalmente colonizadas pelo
fungo micorrzico. Esses efeitos
distintos, provavelmente, derivam
das diferenas de susceptibilidade
da quitina das paredes celulares
desses fungos.
Vierheilig et al. (1993) estudaram

os efeitos de plantas transgnicas
da espcie Nicotiana sylvestris
sobre organismos especficos,
importantes para a cultura. Essas
plantas foram transformadas
para a expresso de quitinase,
visando melhorar suas defesas
contra fungos fitopatognicos
que contenham quitina. Todavia,
fungos benficos, como os
micorrzicos, tambm poderiam
ser afetados. Para testar essa
hiptese, plantas transgnicas
de Nicotiana sylvestris foram
inoculadas com fungos micorrzicos
(Glomus mosseae), fungos
fitopatognicos (Rhizoctonia solani)
ou com ambos os microrganismos.
Os nveis de infeco foram
estimados com a utilizao de um
estereomicroscpio de acordo
com o mtodo das intersees.
As plantas modificadas tiveram
reduo na susceptibilidade
colonizao pelo patgeno
Turrini et al. (2004) avaliaram os

efeitos de plantas de berinjela
(Solanun melongena) transformadas
para a expresso de uma
protena antifngica (Dm-AMP1),
conhecida como defensina.
As plantas transformadas
mostraram resistncia ao fungo
patognico Botrytis cinerea, cujo
desenvolvimento nas folhas foi
reduzido de 36 % a 100 %, em
comparao com as plantas
controle no transformadas.
Em bioensaios feitos no
laboratrio, mostrou-se que a
defensina foi liberada por meio
de exsudados radiculares das
plantas transgnicas, o que no
interferiu no estabelecimento da
simbiose com o fungo micorrzico
arbuscular Glomus mosseae. Por
sua vez, o crescimento do fungo
patognico Verticillium albo-atrum
foi reduzido (49 % a 71 %). Os
autores afirmam que as razes de
o fungo micorrzico no ter sido
132
afetado pela defensina ainda devem

ser estudadas. No entanto, como
as defensinas esto entre vrios
compostos de defesa produzidos
por diferentes plantas, h hipteses
de que os fungos micorrzicos
arbusculares tenham desenvolvido
tolerncia a esse tipo de protena.
Plantas transgnicas
resistentes a pragas
Muitas espcies de plantas
importantes para a agricultura tm
sido transformadas para produo
de endotoxinas originrias de
diferentes subespcies da bactria
Bacillus thuringiensis (Bt). Apesar
de a maioria dessas toxinas
apresentar especificidade, seus
efeitos em organismos no-alvo
ainda no foram completamente
avaliados. A toxina do milho Bt,
por exemplo, introduzida no solo
por meio da exsudao radicular
e incorporao dos resduos da
cultura aps a colheita. Uma vez
no solo, a toxina pode apresentar
efeitos diretos sobre a comunidade
microbiana, o que ainda no foi
comprovado, ou efeitos indiretos,
uma vez que a ao inseticida
da toxina pode interferir em
populaes especficas da fauna
do solo que esto associadas a

populaes de microrganismos
(RUMJANEK et al., 2005).
Alguns estudos foram conduzidos
visando a observar os possveis
efeitos do cultivo de plantas de
milho transgnico contendo o
gene Cry1Ab de B. thuringiensis,
que codifica para a produo de
uma protena inseticida que mata
pragas da ordem lepdoptera.
Um dos resultados apresentados
nesses estudos destaca que a
toxina inseticida originria dos
exsudados de razes, assim como
do plen e resduos das culturas,
pode ligar-se rapidamente a
minerais de argila, cidos hmicos
e complexos organominerais que
protegem a toxina da degradao
microbiana (SAXENA et al., 2002).
A toxina ligada retm sua atividade
inseticida e sua persistncia no
solo e pode ser observada at
234 dias (SAXENA et al., 1999).
Como resultado de sua ligao a
superfcies de partculas do solo,
as toxinas podem ser acumuladas
no ambiente em concentraes
que poderiam constituir malefcios
para organismos no-alvo, entre
eles os microrganismos. Todavia,
a presena da toxina inseticida
133
de culturas Bt, geralmente,

no tem apresentado efeitos
significativos sobre as populaes
de organismos do solo. Saxena e
Stotzky (2001a) no observaram
nenhum efeito aparente da
toxina de milho Bt aderida aos
solos em minhocas, nematides,
protozorios, bactrias (incluindo
actinomicetos) e fungos.
Flores et al. (2005) conduziram um
estudo sobre a decomposio,
no solo, da biomassa de plantas
trangnicas Bt visando a compar-la
das plantas no-transgnicas. Os
resultados obtidos apontam para
uma menor decomposio das
plantas Bt. Os autores destacam
que aparentemente isso no foi
resultado de inibio da atividade
dos microrganismos do solo, j
que as populaes de bactrias
e fungos, assim como a atividade
de enzimas representativas
daquelas que esto envolvidas
no processo de decomposio,
no foram consistentes ou
significativamente diferentes
entre as plantas transgnicas e
no-transgnicas. As razes para
essa menor biodegradao da
biomassa de plantas Bt ainda
no conhecida. No entanto, no
134
caso do milho, Saxena e Stotzky

(2001b) mostraram que plantas Bt
apresentaram maiores teores de
lignina quando comparadas com
suas isolneas no-transgnicas
e, logicamente, isso pode ter
influncia sobre as taxas de
decomposio da biomassa
dessas plantas. Essas diferenas
podem ser resultado de um efeito
inesperado da transgenia, uma
vez que a introduo do DNA que
codifica a toxina Bt no deveria
estar interferindo com a sntese de
lignina (RUMJANEK; FONSECA,
2003). A relevncia ambiental e
ecolgica dessas observaes
tambm no clara. A menor
decomposio da biomassa de
plantas Bt poderia trazer benefcios,
j que a matria orgnica derivada
dessas plantas poderia persistir por
mais tempo e acumular em altos
nveis no solo, podendo melhorar
sua estrutura e reduzir a eroso.
Em contraste, a persistncia da
biomassa dessas plantas poderia
estender o tempo em que as
toxinas estariam presentes no
solo, aumentando a possibilidade
de prejuzos a organismos noalvo e a seleo de insetos-praga
resistentes toxina (FLORES et al.,
2005; FERR et al., 1995).
Plantas transgnicas
tolerantes a herbicidas
Um efeito em potencial da
aplicao de herbicidas
o estmulo ou a inibio da
comunidade microbiana e dos
processos por ela mediados. De
modo geral, herbicidas aplicados
nos solos afetam potencialmente a
microbiota do solo, como acontece
com qualquer composto qumico
introduzido em um ambiente
natural.
Herbicidas cujo ingrediente ativo
o glifosato inibem a sntese
dos aminocidos aromticos,
portanto, seu efeito txico sobre
as comunidades microbianas do
solo pode ocorrer em virtude da
paralisao da sntese desses
aminocidos nos microrganismos
que possuem a mesma enzima
sensvel (EPSPS) das plantas.
No entanto, vrias espcies de
bactrias do solo so capazes
de metabolizar o glifosato, por
exemplo, Pseudomonas sp.
(JACOB et al., 1988) e Arthrobacter
sp. (PIPKE et al., 1987). Essas
bactrias possuem uma carbono-
fosfato liase que hidroliza o glifosato

formando sarcosina e fosfato
inorgnico, permitindo que elas
utilizem esse fosfato como fonte de
fsforo.
A inibio do crescimento de
fungos micorrzicos pela aplicao
de glifosato foi demonstrada por
Chakravarty e Chatarpaul (1990),
quando esses microrganismos
foram expostos a concentraes
maiores que 50 L de ingrediente
ativo (ia) L-1 em meio de cultura.
No entanto, como o glifosato tem
vida relativamente curta no solo,
esperado que, em estudos
de campo, a toxidez observada
seja menor que em estudos
de laboratrio. Sendo assim,
experimentos de campo so
necessrios para validar os dados
obtidos com a utilizao de testes
em meio de cultura.
Ao contrrio dos resultados obtidos
em laboratrio, a aplicao de
glifosato, na maioria dos estudos
de campo, ou no mostra efeitos
ou apresenta pequeno estmulo
sobre os microrganismos do
solo (BUSSE et al., 2001). Essa
discrepncia entre esses estudos
pode ser explicada parcialmente
135
pelas altas concentraes de

herbicidas utilizadas em grande
parte dos trabalhos em laboratrio.
As diferenas na toxicidade do
glifosato entre os meios de cultura
artificiais e o solo aparentemente
refletem sua natureza qumica,
sua toxicidade e caracterstica
de um composto polar que pode
ser rapidamente inativado nos
solos pela adsoro fsico-qumica
(BUSSE et al., 2001).
Busse et al. (2001) usaram
diferentes estratgias para avaliar
os possveis efeitos txicos do
glifosato sob a comunidade
microbiana do solo, utilizando
reas de plantio de pinheiros que
incluam tratamentos com histrico
de 13 anos com aplicaes anuais
de glifosato. Os efeitos diretos
do glifosato sobre a comunidade
microbiana dos solos estudados
foram avaliados com a utilizao
de meios de cultura com diferentes
concentraes de glifosato (0 mM,
25 mM, 50 mM e 500 mM). Essa
adio do glifosato ao meio de
cultura resultou na reduo do
nmero de bactrias cultivveis e
fungos obtidos das amostras de
solo dos plantios de pinheiros.
Nesse mesmo trabalho, a
136
respirao dos solos foi medida em

bioensaios no laboratrio 10 dias
aps a aplicao de glifosato como
ingrediente ativo (0 mg kg-1,
5 mg kg-1, 50 mg kg-1,
500 mg kg-1) ou formulao
comercial (0 mg ia kg-1, 5 mg ia kg-1,
50 mg ia kg-1, 500 mg ia kg-1,
5.000 mg ia kg-1). Diferentemente
do que ocorreu nos estudos
com meio de cultura, o glifosato,
quando aplicado em concentraes
equivalentes quelas recomendadas
no campo, no apresentou
efeitos sobre a respirao dos
solos, que foi estimulada quando
concentraes mais elevadas foram
empregadas. Esse estmulo pode
ter sido a expresso de populaes
de organismos capazes de
degradar o glifosato sob condies
de saturao.
Nos trabalhos de campo, as
caractersticas microbiolgicas do
solo na profundidade de 0 cm a
10 cm geralmente foram inalteradas
aps 9 ou 13 anos de uso contnuo
do glifosato (BUSSE et al., 2001).
Os efeitos do glifosato foram
mnimos quando comparados
aos efeitos das reas (diferenas
entre solos) e datas de coletas que
mostraram maior influncia sobre
o tamanho das populaes e sua

atividade. Esses experimentos de
campo incluram comparaes
entre solos com diferentes
quantidades de argila, xidos e
matria orgnica, em plantaes
de pinheiros que variavam de
pouco a muito produtivas, no norte
do Estado da Califrnia (Estados
Unidos). Os resultados foram
geralmente consistentes para
todos os ndices, solos e datas de
coleta e mostraram que aplicaes
simples ou repetidas de glifosato,
nas concentraes recomendadas,
tiveram pouco efeito sobre as
comunidades microbianas.
Para avaliar se a introduo
do gene EPSPS resistente da
Agrobacterium promoveria
alteraes nas plantas que
poderiam influenciar a microbiota
do solo rizosfrico, Dunfield e
Germida (2001) compararam quatro
variedades de canola transgnica
resistente a herbicida com quatro
variedades convencionais que
foram cultivadas em quatro
diferentes localidades no Canad.
A comunidade microbiana da
rizosfera dessas plantas foi
caracterizada por trs anos com
a utilizao das metodologias de
contagem em placas com meio

de cultura, anlise do perfil de
cidos graxos (FAME) e padres
catablicos das comunidades
microbianas (Biolog PCCM).
Nenhuma das variedades de canola
afetou significativamente o nmero
total de unidades formadoras de
colnia da rizosfera e do interior
das razes. Todavia, os resultados
apresentados demonstraram
que a variedade transgnica
Quest mostrou uma comunidade
microbiana, associada a sua
rizosfera, diferente das demais
variedades estudadas (transgnicas
e no-transgnicas). importante
ressaltar que a variedade Quest
a nica resistente a glifosato,
sendo as outras trs variedades
transgnicas resistentes ao
glufosinato de amnio.
Em 2003, Dunfield e Germida
publicaram outro trabalho
semelhante, avaliando a
comunidade microbiana do solo
sob uma variedade geneticamente
modificada (Quest), uma variedade
convencional (Excel) e o solo no
cultivado. Em dois anos de estudo,
em duas reas diferentes, foram
feitas, a cada ano, seis coletas
ao longo do desenvolvimento
137
da cultura. Dessa vez, alm do

PCCM e do FAME, foi includa a
tcnica de anlise de restrio
dos fragmentos terminais do
DNA ribossomal (T-ARDRA), que
permite acessar informaes
sobre a poro no-cultivvel
da comunidade microbiana. Os
resultados apresentados sugerem
que as diferentes variedades
tiveram influncia significativa sobre
as anlises de PCCM, FAME e
T-ARDRA. Entretanto, as alteraes
na estrutura das comunidades
microbianas em solos sob plantas
de canola transgnicas no foram
permanentes. As diferenas
observadas foram dependentes
da poca de amostragem, por
isso, as comunidades no foram
diferentes ao longo de todo o
desenvolvimento da planta.
Nesses estudos, a variedade
(Quest) no foi comparada com sua
parental no-transgnica; portanto,
no fica claro se essas diferenas
foram causadas pela modificao
gentica (LYNCH et al., 2004).
Essas diferenas, provavelmente,
podem ser decorrentes de
alteraes no esperadas e indicam
que, nesse caso, no existe apenas
o efeito do gene inserido, mas de
138
outras alteraes no genoma da

planta que precisam ser objeto de
investigao. A caracterizao de
exsudados radiculares e estudos
adicionais com mais variedades
glifosato-tolerantes poderiam ser
interessantes para confirmao do
que foi observado nesses trabalhos.
Transferncia horizontal
de genes
Dependendo da natureza do
transgene a ser introduzido no
ambiente, pode ser importante o
monitoramento da transferncia
horizontal de genes, especialmente,
em populaes microbianas com
estreita relao com as plantas.
Alguns estudos, em condies
de laboratrio, j demonstraram
a possibilidade da transferncia
horizontal de genes de organismos
geneticamente modificados (OGMs)
para microrganismos nativos do
solo (NIELSEN et al., 2000). No
entanto, esse fenmeno ainda no
foi relatado em experimentos de
campo (DUNFIELD; GERMIDA,
2004).
Para que ocorra transferncia
horizontal de genes de plantas
transgnicas para as bactrias do
solo, o DNA liberado dos tecidos

e clulas da planta deve estar
disponvel no solo e bastante
prximo a bactrias competentes.
Isso se traduz em um fator bastante
limitante para a ocorrncia dessa
transferncia de genes. Somandose ao fato da rpida degradao
inicial que o DNA das plantas
sofre no ambiente, a freqncia
da possvel transferncia de
algum de seus genes para os
microrganismos provavelmente
bastante baixa, sendo restrita a
microhabitats que contm resduos
de tecidos dessas plantas e DNA
complexado em partculas do
solo (GEBHARD; SMALLA, 1999;
DUNFIELD; GERMIDA, 2004). A
persistncia do DNA da planta
no solo est relacionada a vrios
fatores abiticos e biticos, como
contedo e tipos de minerais
de argila e presena de DNAse
(GEBHARD; SMALLA, 1999).
Os mtodos para monitorar a
transferncia horizontal de genes
em amostras ambientais so
considerados pouco sensveis.
Segundo estimativas, para ser
relevante, a anlise de risco
dessa transferncia de genes
nos solos deveria permitir a
deteco de transformaes
freqncias menores que 10-17.
Obviamente, nenhum trabalho
publicado at hoje mostrou esse
poder (HEINEMANN; TRAAVIK,
2004). Heinemann e Traavik (2004)
acreditam que a possibilidade da
e suas conseqncias tm sido
minimizadas em discusses sobre
anlises de risco do uso de plantas
transgnicas. Ao contrrio de
outros pesquisadores, eles afirmam
que novas metodologias para o
monitoramento da transferncia
horizontal de genes no ambiente,
mais sensveis e representativas,
devem ser desenvolvidas
urgentemente.
Quando a transferncia horizontal
de genes considerada em
anlises de risco, deve-se levar em
conta no apenas a possibilidade
da transferncia em si, como
tambm uma anlise crtica de
suas conseqncias para a sade
e o ambiente. Em se tratando de
segurana ambiental, deve ser
considerado o tipo de impacto
em um contexto ecolgico e
geogrfico. No caso de plantas
transgnicas que expressam as
toxinas Bt, por exemplo, a presena
139
natural de Bacillus thuringiensis

nos solos foi considerada pela
Agncia de Proteo Ambiental
dos Estados Unidos da Amrica
(EPA) como fator que reduz o
impacto da utilizao dessas
plantas, mesmo se ocorresse
para os microrganismos do solo
(MENDELSOHN et al., 2003).
Consideraes Finais
Bruinsma et al. (2003) destacam
que, para que possamos melhorar
nosso entendimento acerca
desses resultados, necessitamos
avanar no conhecimento das
comunidades microbianas do
solo, pois ainda no conhecemos
completamente todos os aspectos
funcionais dessas comunidades e
temos um conhecimento limitado
das variaes naturais que
ocorrem em repostas a fatores
como clima, rotao de culturas,
uso de fertilizantes, aplicao
de agroqumicos. Motavalli et al.
(2004) afirmam que at o momento
nenhuma evidncia conclusiva
foi apresentada mostrando que
o cultivo de plantas transgnicas
esteja causando efeitos
significativos sobre os processos
140
que ocorrem nos solos.

Dunfield e Germida (2004)
concluram, aps reviso de vrios
trabalhos, que os resultados
encontrados parecem indicar que
a diversidade microbiana pode
ser alterada quando associada
com plantas transgnicas. No
entanto, esses efeitos so menores
em comparao com aqueles
proporcionados por fatores como
o solo e o clima. Trabalhos futuros,
relativos a efeitos do cultivo de
plantas transgnicas sobre os
microrganismos do solo, devem
envolver experimentos de longa
durao e comparaes no
apenas com o cultivo de plantas
no-transgnicas, mas tambm
com outras alteraes aceitveis
nos agroecossistemas, como o
cultivo de uma nova cultura notransgnica ou a utilizao de uma
prtica de manejo diferente.
Todos concordam que existem
perigos em potencial e que h
necessidade de regulamentao
para que tais perigos sejam
medidos de forma comparativa
e adequada, visando a decidir
sobre o seu risco. Entretanto,
no se pode esquecer que as
decises sobre biossegurana

tero de ser tomadas na ausncia
de um conhecimento completo
sobre todos os efeitos benficos
e adversos que envolvem os
OGMs. E se houver algum risco,
as medidas regulatrias devem
permitir a deciso de como manejlos ou cont-los (CAPALBO, 2005).
Com o intuito de atender a
demanda por conhecimentos
relacionados biossegurana de
plantas transgnicas, a Embrapa
iniciou em 2002 uma rede de
pesquisa dedicada a avaliar tanto
a segurana alimentar quanto
o impacto ambiental advindos
do uso dessa tecnologia. Essa
rede multidisciplinar de pesquisa
(Rede de Biossegurana de
OGM da Embrapa - BioSeg) tem
entre seus objetivos: desenvolver
e implementar protocolos de
biossegurana, envolvendo
capacidades j instaladas no Pas;
promover a comunicao cientfica
entre reas de conhecimento
complementares; favorecer uma
reviso rpida e freqente das
metodologias e anlises propostas
para avaliao de OGMs. Os
trabalhos que tm englobado
aspectos de segurana ambiental
avaliam a possibilidade de impacto

de cada OGM sobre organismosalvo e no-alvo, alm da
biodiversidade associada cultura.
So considerados os efeitos no
ambiente, acima e abaixo do solo,
levando-se em considerao
aspectos como os sistemas de
produo e o agroecossistema
especfico de cada cultura.
A prtica da agricultura representa
impacto inevitvel sobre o ambiente,
portanto necessrio buscar o
melhor balano entre a produo
agrcola, a biodiversidade e as
preocupaes da sociedade. Nesse
contexto, no se pode ignorar
os avanos da biotecnologia,
procurando utiliz-los de maneira
eficiente, responsvel e segura.
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145
CAPTULO 9
A IMPORTNCIA DA AVALIAO DA
FIXAO BIOLGICA DO NITROGNIO EM
SOJA TRANSGNICA COM RESISTNCIA
AO GLIFOSATO
MARIANGELA HUNGRIA
A IMPORTNCIA DA AVALIAO DA FIXAO

BIOLGICA DO NITROGNIO EM SOJA
TRANSGNICA COM RESISTNCIA AO GLIFOSATO
Fixao biolgica do
nitrognio: o processo e
sua importncia
pelas plantas; entretanto, seu custo
O nitrognio est includo entre

os nutrientes exigidos em maior
quantidade pelas plantas, e sua
deficincia um dos fatores
que mais limitam a agricultura,
especialmente, em solos de baixa
fertilidade, como os da regio do
Cerrado. Esse nutriente, apesar
de presente no solo, na forma
orgnica ou mineralizada, tem seu
suprimento limitado, podendo ser
esgotado rapidamente por alguns
cultivos. Alm disso, as condies
de temperatura e de umidade
predominantes nas regies
tropicais aceleram o processo de
decomposio da matria orgnica
e de perdas de N, resultando
em solos com teores baixos
desse nutriente. Os fertilizantes
nitrogenados representam a forma
de N assimilada com maior rapidez
transforma o nitrognio atmosfrico
bastante elevado.
O processo industrial que
(N2) em amnia (NH3) requer altas
temperaturas (300 C a 600 C)
e altas presses (200 atm a 800
atm). Desse modo, o gasto de
fontes energticas no-renovveis
estimado em seis barris de petrleo
por tonelada de NH3 sintetizada.
Outra desvantagem no uso dos
fertilizantes nitrogenados a baixa
eficincia de sua utilizao pelas
plantas, raramente ultrapassando
50 %. Isso significa que, se forem
adicionados ao solo 100 kg de
adubo nitrogenado, 50 kg sero
perdidos pelo processo de
lixiviao (lavagem no perfil do solo
por percolao ou escorrimento
superficial) e transformao
em formas gasosas, tanto pela
desnitrificao (reduo, pela
ao dos microrganismos, para
149
formas gasosas, N2 e xido nitroso,

N2O) como pela volatilizao
(perdas gasosas na forma de
NH3) (VARGAS; HUNGRIA, 1997;
HUNGRIA et al., 2001).
O uso indiscriminado de fertilizantes
nitrogenados pode causar poluio
ambiental, pois a lixiviao
do N e o escorrimento desse
nutriente pela superfcie do solo
resultam no acmulo de formas
nitrogenadas nas guas dos rios,
lagos e lenis subterrneos,
podendo atingir nveis txicos no
s para os peixes como tambm
para o homem. A emisso de
xido nitroso para a atmosfera,
fenmeno resultante do processo
de desnitrificao, pode contribuir,
tambm, para a reduo da
camada de oznio que protege
contra os danos causados pela
radiao ultravioleta do sol. Dessa
forma, um melhor aproveitamento
do processo de fixao biolgica
Embora o N2 constitua 78 % dos

gases atmosfricos que tambm
se difundem para o espao
poroso do solo, nenhum animal
ou planta consegue utiliz-lo
como nutriente, em virtude da
tripla ligao existente entre os
dois tomos de N, considerada
uma das mais fortes de que se
tem conhecimento na natureza.
A fixao biolgica do N2 ,
seguramente, aps a fotossntese,
o mais importante processo
biolgico do planeta e baseia-se
no fato de alguns microrganismos
especficos, conhecidos como
microrganismos fixadores de N2
ou diazotrficos, serem capazes
de transformar o N2 em NH3, que
ser, posteriormente, utilizado
para a nutrio das plantas. Essa
reao catalisada pela enzima
nitrogenase, encontrada em todos
os microrganismos fixadores de
N2 (VARGAS; HUNGRIA, 1997;
HUNGRIA et al., 2001).
provocada pelos fertilizantes
Se a associao entre esses

microrganismos e as plantas for
eficiente, o N2 fixado pode suprir
todas as necessidades da planta
hospedeira, dispensando o uso
de fertilizantes nitrogenados e
nitrogenados.
oferecendo, assim, vantagens
do N2 constitui uma das melhores

opes para se reduzir tanto o
custo de produo para o agricultor,
quanto a poluio ambiental
150
A IMPORTNCIA DA AVALIAO DA FIXAO BIOLGICA...
econmicas e ecolgicas. O
exemplo mais conhecido o da
simbiose de bactrias da ordem
transportadora de oxignio,
Rhizobiales, denominadas, em
ndulos uma colorao interna
geral, de rizbios, com plantas
rsea. Depois da converso do
da famlia Leguminosae. Nas
N2 atmosfrico em NH3, essa
leguminosas, a reao da fixao
hemoprotena incorporada
biolgica do N2 ocorre no interior
em compostos de carbono,
dos ndulos, onde a nitrogenase
transformada em diversos
protegida contra o excesso de
compostos nitrogenados e
oxignio (Fig.1). Essa proteo

efetuada por uma hemoprotena
transportada dos ndulos para as
denominada leghemoglobina,
que, quando ativa, confere aos
demais partes da planta.
Fig. 1. Nodulao nas razes de soja, resultante da inoculao

com clulas de Bradyrhizobium.
151
Inoculao da soja
na regio do cerrado
brasileiro: uma histria de
sucesso
No Brasil, deve-se dar destaque
simbiose da soja (Glycine max (L.)
Merrill) com bactrias diazotrficas
pertencentes s espcies
Bradyrhizobium japonicum e B.
elkanii, coletivamente denominadas
de bradirrizbios. Juntamente com
os programas de melhoramento e
lanamento de cultivares, a seleo
de estirpes de bradirrizbios para
a soja adaptadas s condies
brasileiras, especialmente s
condies do Cerrado, foi, sem
dvida, um dos fatores que mais
contribuiram para a expanso
dessa cultura no Brasil. Outro
ponto que merece destaque
que, em vrios pases do mundo,
a inoculao da soja em reas que
j foram inoculadas anteriormente,
em geral, no apresenta resultados
satisfatrios em termos de
incremento no rendimento de
gros. Esse, porm, no o caso
do Brasil, onde a existncia de
um programa bem-sucedido de
seleo de estirpes de bradirrizbio
para a soja permitiu o lanamento
152
de novas estirpes, capazes de

aumentar o rendimento dessa
cultura mesmo em reas com
populaes estabelecidas dessa
bactria (VARGAS et al., 1994;
HUNGRIA et al., 2006b).
Atualmente, estima-se que, nos 22
milhes de hectares cultivados com
soja, no Brasil, o uso da inoculao
com bactrias fixadoras de N2
promove economia anual estimada
em, aproximadamente, 5 bilhes de
dlares, em virtude da no utilizao
de fertilizantes nitrogenados, isso
sem mencionar os benefcios ao
meio ambiente. Entretanto, quando
da introduo dessa cultura na
regio do Cerrado, na dcada de
1970, vrios problemas contriburam
para que o processo de inoculao
da soja no fosse bem-sucedido, ao
contrrio do que ocorria na Regio
Sul do Pas. Os solos sob Cerrado
no apresentam populaes de
rizbios nativos capazes de nodular
a soja (VARGAS; SUHET, 1980a,b)
e, em virtude da utilizao de
inoculantes com baixo nmero de
clulas viveis e com bactrias no
adaptadas regio, era comum o
uso de fertilizantes nitrogenados na
cultura.
Entre os principais fatores que

contriburam para o insucesso da
inoculao da soja na dcada de
1970, destaca-se o uso de estirpes
que apresentavam problemas de
especificidade hospedeira com
a cultivar de soja mais plantada
naquela poca, a IAC-2 (PERES;
VIDOR, 1980; VARGAS; SUHET,
1980a). Com base em uma
srie de trabalhos realizados
pela Embrapa Cerrados e pela
Universidade Federal do Rio
Grande do Sul, em 1980, foram
selecionadas e lanadas as estirpes
de Bradyrhizobium elkanii 29W
(=SEMIA 5019) e a SEMIA 587
(PERES, 1979; PERES; VIDOR,
1980). Alm da alta eficincia no
processo de fixao do N2 e da
elevada capacidade competitiva, a
29W e a SEMIA 587 apresentavam
baixa especificidade hospedeira,
sendo capazes de formar ndulos
com a maioria das cultivares de
soja recomendadas para o Cerrado.
O lanamento dessas estirpes para
o uso em inoculantes comerciais
permitiu o cultivo da soja na regio
do Cerrado, sem a necessidade do
uso de fertilizantes nitrogenados.
alta capacidade produtiva, um dos

principais objetivos dos programas
de pesquisa em fixao biolgica
do N2 nessa regio o da seleo
de estirpes eficientes, capazes de
aumentar a produtividade da cultura
pela fixao de quantidades mais
elevadas de N2. Como resultado
desses estudos, em 1992, foram
lanadas duas novas estirpes
de B. japonicum, denominadas
CPAC 7 (=SEMIA 5080) e CPAC
15 (=SEMIA 5079) (PERES et al.,
1993). Desde ento, juntamente
com as estirpes 29W e SEMIA 587,
essas estirpes so recomendadas
para a fabricao de inoculantes
comerciais para a cultura da soja
sendo que, cerca de 60 % da rea
cultivada atualmente com soja
no Pas inoculada a cada ano,
atingindo 80 % a 90 % na Regio
Central do Brasil.
Em virtude do lanamento contnuo

de novas variedades de soja com
de cultivo e de inoculao das
Conforme j comentado, solos de

Cerrado que nunca foram cultivados
com soja no tm populaes
nativas de rizbios capazes
de nodular a soja (VARGAS;
SUHET, 1980a, b), requerendo,
obrigatoriamente, a inoculao.
Todavia, depois de vrios anos
sementes, instalam-se, no solo,
153
populaes de bradirrizbios. Em
produtividade de 227 kg gros ha-1
geral, nas reas com populaes
a 636 kg gros ha-1 em funo da
estabelecidas de bradirrizbios,
reinoculao em trs experimentos.
a resposta reinoculao (termo
Em dois dos experimentos, com
usado para descrever a inoculao
mdias de produtividade de
de reas que j foram inoculadas
4.162 kg ha-1, no houve respostas
anteriormente) no to acentuada
significativas estatisticamente
como nas reas de primeiro cultivo.
reinoculao e nem adubao
O principal fator responsvel por
com 200 kg N ha-1 (parcelados em
isso a competio pelos stios de
duas aplicaes de 100 kg N ha-1 na
infeco nodular nas razes entre as
semeadura e no pr-florescimento)
estirpes do solo e aquelas utilizadas

no inoculante. Esse um fenmeno
mundial e constitui o grande desafio
para a pesquisa em rizobiologia
(DOWLING; BROUGHTON, 1986;
BROCKWELL; BOTTOMLEY, 1995).
No Brasil, porm, tanto na regio
do Cerrado, quanto na Regio Sul,
vrios trabalhos tm evidenciado
aumentos na produtividade da soja
com a reinoculao. Embora esses
ganhos sejam modestos (o que
e, em um experimento, houve
resposta significativa adubao
parcelada com 200 kg N ha-1,
indicando a existncia de fatores
limitantes fixao biolgica do
N2 (MENDES et al., 2002). Em 20
experimentos conduzidos durante
trs safras em Londrina e Ponta
Grossa, no Paran (HUNGRIA et
al., 2006b), os incrementos mdios
no rendimento de gros pela
reinoculao foram de 4,7 %.
muitas vezes dificulta a obteno
Ainda em relao reinoculao,
de diferenas estatisticamente
em uma anlise inicial conjunta
significativas), eles tm sido
dos resultados obtidos em 13
observados consistentemente. Em
experimentos conduzidos na
experimentos conduzidos pela
maioria dos estados produtores
Embrapa Cerrados, durante seis
de soja, com diversas cultivares e
safras, para avaliar a reinoculao
sob diferentes sistemas de cultivo,
da soja, ocorreram aumentos de
foram constatados incrementos
154
mdios no rendimento de 7,8 %

na Regio Central e de 3,8 % na
Regio Sul. Em mdia, o ganho
no rendimento de gros foi de
4,5 %, diferindo estatisticamente
em relao ao tratamento no
inoculado (HUNGRIA et al., 2001).
Considerando esse incremento de
4,5 %, o custo atual da inoculao
em torno de R$ 7,80 (500 g de
inoculante turfoso), o preo mdio
de um saco de soja (60 kg) de
R$ 22,00 e a produtividade mdia
da soja na safra 2005/2006 de
2.627 kg ha-1, estima-se um lucro
lquido com a reinoculao de
R$ 35,50 ha-1. Posteriormente,
com a incluso de novos dados,
totalizando 29 experimentos, foi
constatado incremento ainda maior
no rendimento mdio de gros,
de 8 %, pela reinoculao da soja
(HUNGRIA et al., 2006a), o que
pode ser explicado tanto pela maior
demanda das novas cultivares
quanto pelos baixos teores de N
nos solos sob cultivo contnuo.
pesquisas realizadas em 1982 na
Desde o lanamento das estirpes

29W e SEMIA 587, em 1979, a
prtica de adubao nitrogenada
da cultura da soja deixou de
ser recomendada. Inicialmente,
sistema de manejo (plantio
Embrapa Cerrados (VARGAS et al.,

1982) demonstraram a inutilidade
da prtica da adubao nitrogenada
na semeadura da soja, pois mesmo
em solos com grande quantidade
de resduos vegetais (26 t ha-1) no
foi observada resposta aplicao
de fertilizantes nitrogenados,
em nveis de at 30 kg N ha-1.
Entretanto, com a expanso do
plantio direto, principalmente, na
regio do Cerrado, novamente
surgiram dvidas, por parte
de alguns agricultores, sobre
a eficincia do processo de
inoculao e sobre a necessidade
ou no da aplicao de doses
de arranque de nitrognio na
semeadura, visando superar
possveis problemas relacionados
imobilizao do N e competio
inicial com ervas daninhas. Novos
experimentos foram conduzidos
no Cerrado (MENDES et al., 2003)
e, mais uma vez, foi comprovado
que, independentemente do
direto ou convencional), a adio
de pequenas doses de N na
semeadura no promoveu nenhum
incremento no rendimento de gros
155
da soja, o mesmo ocorrendo na

Regio Sul (HUNGRIA et al., 2006b).
grande dependncia do modelo

energtico, baseado no uso
de combustveis fsseis no-
Todos esses resultados indicam

que a inoculao da soja com
bactrias diazotrficas , de fato,
uma tecnologia importante gerada
pela pesquisa agropecuria
brasileira (Fig. 2). Assim, no atual
contexto mundial, em que os
de fertilizantes nitrogenados,
preos do petrleo apresentam
substituindo-os por um processo
trajetria ascendente, e a
biolgico deve ser incentivado.
renovveis, vem dando sinais

visveis de esgotamento. Mais do
que nunca, o uso de tecnologias
como a fixao biolgica de
N2 que minimizam o uso
Fig. 2. Efeito da inoculao de plantas de soja com

Bradyrhizobium.
156
A fixao biolgica
do nitrognio na soja
transgnica
O cultivo comercial da soja tolerante
ao herbicida glifosato (tambm
denominada Round up Ready ou
soja RR) teve incio em 1996 nos
Estados Unidos, abrindo novas
oportunidades para o controle de
plantas invasoras e possibilitando a
substituio e(ou) a reduo no uso
de herbicidas de ps-emergncia
nessa cultura. Em 2003, o cultivo
da soja RR ocupou 81 % da rea
cultivada com essa cultura nos
EUA e, na safra 2004/2005, cerca
de 9,4 milhes de hectares foram
semeados com soja transgnica
resistente ao herbicida glifosato no
Brasil (JAMES, 2005).
O glifosato um herbicida
ps-emergente, pertencente
ao grupo qumico das glicinas
substitudas, classificado como
no-seletivo e de ao sistmica.
Controla uma ampla variedade
de plantas invasoras e apresenta
rpida inativao. Atua como um
potente inibidor da atividade da
5-enolpiruvilchiquimato-3-fosfato
sintase (EPSPS), que catalisadora
de uma das reaes de sntese dos

aminocidos aromticos essenciais
fenilalanina, tirosina e triptofano
e est presente em plantas e
microrganismos; porm, ausente
em animais (explicando sua
baixa toxicidade em mamferos).
O glifosato influencia, tambm,
outros processos, como a inibio
da sntese de clorofila, estimula a
produo de etileno, reduz a sntese
de protenas e eleva a concentrao
do cido indolactico. Em plantas
no-tolerantes, o glifosato inibe
a sntese dos aminocidos pelo
bloqueio da enzima EPSPS,
que cataliza a condensao do
chiquimato-3-fosfato (ou S3P,
shikimate-3-phosphate) e do
PEP (fosfoenolpiruvato), dando
condies produo de EPSP
(5- enolpiruvilchiquimato-3-fosfato)
e de fosfato orgnico, que so as
substncias responsveis pela
sntese de aminocidos aromticos
(STEINRUCKEN; AMRHEIN, 1980).
Portanto, a inibio da enzima
EPSPS resulta no acmulo de cido
chiqumico e outros compostos
intermedirios. Os efeitos txicos
do glifosato nas plantas sensveis
esto relacionados inabilidade
de essas plantas sintetizarem os
157
aminocidos aromticos, ao dreno

de energia em razo do consumo
de ATP e PEP e aos efeitos txicos
relacionados ao acmulo de
compostos intermedirios da via
do cido chiqumico (FISHER et al.,
1986).
A base de resistncia das plantas
de soja transgnica ao glifosato
a insero de um gene EPSPS,
oriundo da bactria Agrobacterium
estirpe CP4, que insensvel a
esse herbicida e que permite a
expresso funcional da via do
cido chiqumico na sua presena
(PADGETTE et al., 1995).
O uso de herbicidas pode afetar a
fixao biolgica do N2 diretamente,
por intermdio de efeitos sobre
a bactria, ou indiretamente, por
meio de efeitos na leguminosa
hospedeira. Desse modo, muito
importante que os avanos da
biotecnologia, que possibilitaram
a gerao de cultivares de soja
transgnicas, sejam acompanhados
de estudos rigorosos de segurana
ambiental (biossegurana), visando
garantir no s a segurana
alimentar e a ocorrncia de
impactos mnimos ao meio
ambiente, mas tambm assegurar
158
que os ganhos obtidos com a

pesquisa, a exemplo do processo
de fixao biolgica do N2, no
sejam comprometidos. Em 2003, a
Embrapa implementou um projeto
visando avaliar a fixao biolgica
do N2 em cultivares transgnicas
de soja. O projeto ainda est
em andamento e a seguir sero
apresentados os resultados de
vrios estudos, a maioria realizada
nos Estados Unidos, onde foram
avaliados os efeitos do glifosato e
da transgenia na fixao biolgica
do N2 na soja.
Quanto aos efeitos diretos,
sabe-se que uma das espcies
de microssimbiontes da soja,
Bradyrizobium japonicum,
sensvel aplicao do glifosato,
resultando em acmulo dos cidos
chiqumico e protocatecuico
nas clulas, com conseqente
inibio do crescimento e
resultando na morte da bactria
em concentraes elevadas do
herbicida (ZABLOTOWICZ; REDDY,
2004b). Em estudos realizados em
meio de cultura (in vitro), Jaworski
(1972) verificou que o crescimento
de B. japonicum era inibido na
presena de baixas concentraes
de glifosato (da ordem de 0,01mM
e 1,0 mM). Moorman et al.

(1992) verificaram, tambm, em
estudos in vitro, que a inibio
do crescimento por glifosato era
diferenciada entre trs estirpes de
B. japonicum (USDA 110, USDA
123 e USDA 138). Na concentrao
de 0,5 mM, o crescimento das
estirpes USDA 123 e USDA 138 foi
moderadamente inibido pelo glifosato
(12 % e 19 % respectivamente),
enquanto a estirpe USDA 110 teve
seu crescimento inibido em 47 %. A
concentrao de 5 mM de glifosato
resultou na morte das estirpes.
Jacques et al. (2003) avaliaram,
em um estudo conduzido no
Brasil, o efeito do princpio ativo
e de sete formulaes comerciais
de glifosato no crescimento das
estirpes de B. elkanii SEMIA 587 e
29W e da estirpe de B. japonicum
CPAC 15. O crescimento das trs
estirpes in vitro foi reduzido tanto
na presena do princpio ativo
quanto na das formulaes de
glifosato, sendo que a magnitude
dessa reduo variou conforme a
estirpe e a formulao. Na verdade,
todas as formulaes comerciais
aumentaram a toxicidade do
herbicida. Foi sugerido que os
efeitos inibitrios das formulaes
comerciais de glifosato no
crescimento das estirpes foram
potencializados em razo da
presena de diferentes substncias
qumicas nessas formulaes,
tais como solventes, surfactantes
e agentes molhantes que podem
modificar o efeito do ingrediente
ativo sobre os microrganismos.
Contudo, estudos in vitro podem
apresentar pouca relao com a
resposta daqueles conduzidos no
campo. Vrios microrganismos
do solo, inclusive membros da
ordem Rhizobiales, so capazes
de metabolizar o glifosato, por
exemplo, Rhizobium meliloti (agora
reclassificado como Sinorhizobium
meliloti), R. trifolii (agora R.
leguminosarum bv. trifolii), R.
leguminosarum (estirpe 300 de R.
leguminosarum bv. viciae), R. galega
(agora R. galegae), Agrobacterium
rhizogenes e A. tumefaciens
(LIU et al., 1991). Alm disso,
herbicidas base de glifosato
so, em geral, considerados de
vida relativamente curta no solo,
onde dificilmente apresentaro
a mesma toxidez observada em
estudos de laboratrio. Sendo
assim, experimentos de campo
so necessrios para validar os
159
resultados obtidos em laboratrio,

razo pela qual o projeto da
Embrapa est avaliando a
toxicidade dos herbicidas nos
principais ecossistemas brasileiros
nos quais a soja produzida.
Ao atingir as folhas e ser absorvido
pela soja transgnica, o glifosato
praticamente no sofre nenhuma
ao de transformao, sendo
rapidamente translocado para
as razes, podendo tambm ser
acumulado nos ndulos (REDDY;
ZABLOTOWICZ, 2003), o que pode
facilitar o contato do herbicida com
as clulas das bactrias fixadoras
de N2.
(28 %) e a massa (47 %) de ndulos

e o contedo de leghemoglobina
(13 %). No entanto, curiosamente,
a aplicao de 1,68 kg ia ha-1 no
provocou efeitos negativos sobre
a nodulao. No segundo estudo,
semelhante ao primeiro, a aplicao
de glifosato logo aps o plantio (14
dias) no apresentou efeitos sobre
a nodulao, independentemente
da dose utilizada. No terceiro
estudo, a aplicao tardia de uma
dose de 1,68 kg ia ha-1, 3 semanas
aps o plantio, promoveu reduo
no nmero (30 %) e na massa
(39 %) de ndulos, no contedo de
leghemoglobina e no contedo total
de N na parte area (14 %).
Os estudos que verificam os efeitos

do glifosato na nodulao da soja
RR podem ser divididos em dois
grupos: aqueles conduzidos em
condies controladas de casa de
vegetao e aqueles conduzidos
no campo. Reddy et al. (2000)
apresentaram resultados de trs
estudos conduzidos em condies
de casa de vegetao. Em um
desses estudos, a aplicao, aos 14
dias aps o plantio, de uma dose
de glifosato equivalente a
0,84 kg ia ha-1 reduziu,
significativamente, o nmero
King et al. (2001) conduziram

estudos em casa de vegetao e
em cmara de crescimento. Em
casa de vegetao, a aplicao
de glifosato (1,26 kg ia ha-1),
aos 5 e aos 12 dias aps a
emergncia (DAE) das plantas,
reduziu, significativamente, a
massa de ndulos (34 %) das
plantas de soja transgnica
TV5866RR coletadas aos 19 DAE.
Contudo, quando o experimento
foi repetido, a massa de ndulos
no foi afetada. O contedo de N
total das razes e da parte area
160
foi reduzido (35 %) em ambos os

estudos. Quando as plantas foram
coletadas aos 40 DAE, os efeitos
das aplicaes de glifosato no
foram mais observados, indicando
que as plantas conseguiram se
recuperar do efeito inicial. Nos
quatro estudos conduzidos em
cmaras de crescimento, foram
avaliados os efeitos de mltiplas
aplicaes foliares de glifosato
sobre a atividade da nitrogenase,
a enzima responsvel pela fixao
do N2, avaliada pelo mtodo de
atividade da reduo do acetileno
(ARA). Foram feitas trs aplicaes
de glifosato, aos 5, 12 e 19 DAE, e
a ARA foi determinada aos 14, 21
e 28 DAE. Redues significativas
na ARA (12 % a 20 %) foram
observadas em trs dos quatro
estudos aos 21 DAE, mas somente
em um dos estudos nas avaliaes
aos 14 e aos 28 DAE. Os efeitos
da deficincia hdrica na ARA em
plantas em que o glifosato foi
aplicado tambm foram avaliados.
Plantas com aplicao de glifosato,
quando comparadas ao controle
sem aplicao, mostraram maior
sensibilidade da ARA ao estresse
hdrico.
Em condies de campo, King et al.

(2001) tambm avaliaram os efeitos
da aplicao de herbicidas sobre o
acmulo de biomassa e a produo
de gros em duas variedades de
soja transgnica cultivadas em duas
reas distintas. Embora tolerantes
ao glifosato, as variedades
utilizadas no experimento, A5901RR
e DK5961RR, apresentavam nveis
diferenciados de sensibilidade
ao herbicida, sendo a A5901RR
menos sensvel e a DK5961RR mais
sensvel aplicao do herbicida.
Na rea que recebeu maiores
quantidades de chuva e irrigao,
nenhum efeito da aplicao de
glifosato foi observado. Na rea
onde ocorreu estresse hdrico,
porm, redues significativas
na biomassa da parte area (92
DAE) da cultivar AR5901RR foram
observadas nos trs tratamentos
com glifosato, bem como no
tratamento com os herbicidas
convencionais (acifluorfen e
benzaton). Reduo significativa
na produtividade (24,6 %) foi
observada apenas nos tratamentos
que receberam glifosato aos 7
e 21 DAE. Nessa mesma rea,
a variedade DK5961RR tambm
sofreu reduo significativa no
161
rendimento de gros (23,6 %)

quando o glifosato foi aplicado
aos 7 e aos 49 DAE; contudo, no
foram observados efeitos sobre a
biomassa da parte area.
Os dados obtidos por esses
autores em condies de
casa de vegetao, cmara
de crescimento e no campo
evidenciaram que aplicaes
precoces de glifosato retardam
a fixao de N2 e aumentam a
sensibilidade do processo a
estresses hdricos. Entretanto,
decrscimos na produo de
biomassa de razes e da parte
area da soja pela aplicao do
glifosato tambm foram observados
nas plantas suplementadas com
fertilizante nitrogenado. Os autores
levantaram a hiptese de que,
nos estdios iniciais de formao
dos ndulos, a membrana do
ndulo (simbiossomo) pode
no restringir seletivamente a
penetrao do glifosato no seu
interior, permitindo que ele interfira
nas divises bacterianas, conforme
verificado nos estudos in vitro.
J nas condies nas quais no
ocorre estresse hdrico, parece
que o atraso na fixao do N2 no
resulta em impactos a longo prazo
162
na biomassa da parte area e no

acmulo de N na soja.
Reddy e Zablotowicz (2003)
avaliaram, por 2 anos, os
efeitos de uma (no estdio V2
das plantas) ou duas (V2 e V4)
aplicaes de quatro diferentes
formulaes de sais de glifosato
sobre a nodulao de plantas de
soja transgnicas resistentes ao
glifosato, utilizando como controle
um tratamento sem herbicida e sem
capina. Os autores observaram
que as diferentes formulaes
de glifosato no afetaram o teor
de clorofila, biomassa de razes
e da parte area, bem como o
nmero de ndulos. Entretanto,
a massa de ndulos foi reduzida
significativamente (21 % a 28 %) em
todos os tratamentos onde houve
aplicao de glifosato.
Alm disso, nos tratamentos com
duas aplicaes, o contedo de
leghemoglobina nos ndulos
foi igualmente reduzido (8 % a
10 %). Os autores observaram
que a reduo na massa dos
ndulos e nos contedos de
leghemoglobina sem a reduo no
nmero de ndulos sugere que o
glifosato poderia estar inibindo o
funcionamento dos ndulos, mas
no a sua formao. No entanto,

a reduo no funcionamento dos
ndulos em virtude da aplicao do
glifosato no refletiu no rendimento
de gros, sendo que as variedades
de soja avaliadas tiveram potencial
para superar os curtos perodos de
estresse que ocorreram depois da
aplicao do herbicida.
Em um trabalho mais recente,
Zablotowicz e Reddy (2004a)
estudaram, durante 2 anos (2002
e 2003), os efeitos do glifosato na
fixao do N2, na assimilao de N
e na produtividade da soja transgnica. Cinco doses de glifosato
(0,84 kg ia ha-1; 1,68 kg ia ha-1;
2,52 kg ia ha-1; 0,84 kg ia ha-1 +
0,84 kg ia ha-1; 2,52 kg ia ha-1 +
2,52 kg ia ha-1), aplicadas quatro e
seis semanas aps o plantio, foram
comparadas com um controle livre
de ervas daninhas. As plantas de
soja foram coletadas na quarta e
na oitava semana aps o plantio,
quando as razes noduladas foram
utilizadas para avaliao da ARA
e respirao e, na parte area, foi
determinado o teor de N. Nenhum
efeito consistente da aplicao de
glifosato foi observado nas anlises
de ARA ou na respirao. No entanto, nas anlises feitas em 2002, nas
quais os autores relataram a existncia de estresse hdrico, todos os

tratamentos com glifosato tiveram o
contedo de N foliar reduzido entre
26 % e 42 %. Em 2003, trs dos
tratamentos com glifosato tambm
diminuram o contedo de N nas folhas (9 % a 14 %) e, como em 2002,
as maiores redues ocorreram
quando foram aplicadas as maiores
doses de glifosato. A produtividade
de soja, comparada com o controle no tratado com glifosato, foi
reduzida em 11 % pela aplicao
de duas doses de 2,52 kg ia ha-1
no ano de 2002; mas, em 2003, a
produtividade no foi afetada. O N
total dos gros de soja tratada com
2,52 kg ia ha-1 tambm foi reduzido
em 32 % e 17 % nos anos de 2002
e 2003 respectivamente. Os autores
concluram que a fixao de N2 ou
a assimilao do N pela soja transgnica foi reduzida, principalmente
sob as doses mais elevadas de glifosato. Essas redues foram ainda
mais elevadas sob estresse hdrico.
Apesar de os trabalhos mostrarem
indcios de que as aplicaes
de glifosato podem interferir
na fixao do N2 em plantas de
soja transgnica, a verdadeira
magnitude dessa interferncia
163
ainda no conhecida. Os prprios

autores desses trabalhos afirmam
que tais efeitos so inconsistentes
em estudos de campo
(ZABLOTOWICZ; REDDY, 2004b).
Dada a importncia da soja
no agronegcio brasileiro e da
fixao biolgica N2 para a cultura,
estudos criteriosos e a longo prazo
devem ser conduzidos no Pas,
incluindo diferentes situaes
edafoclimticas, gentipos do
macro e microssimbiontes e
tomando-se cuidado na escolha
dos controles e dos delineamentos
experimentais. A quantificao da
fixao do N2 por tcnicas como a
anlise de N sob a forma de uredos
ou abundncia natural de 15N em
estudos de campo tambm pode
trazer informaes para verificar,
com maior preciso, a ocorrncia
de possveis efeitos de aplicaes
de glifosato sobre a fixao do N2
em plantas de soja geneticamente
modificadas.
Conforme mencionado
anteriormente, a maioria dos
resultados dos experimentos
apresentados neste captulo
oriunda de estudos conduzidos
nos Estados Unidos e, portanto,
no devem ser extrapolados para
164
as condies brasileiras. O projeto

que est sendo conduzido dentro
da Rede de Biossegurana da
Embrapa verificar, por meio de um
estudo detalhado, possveis efeitos
da transgenia e do manejo com a
soja transgnica, na fixao do N2,
englobando as principais regies
produtoras de soja. A expectativa
de que, com os resultados obtidos
no projeto, os pesquisadores
tenham subsdios para garantir a
segurana ambiental e o sucesso
da fixao biolgica de N2 na
cultura da soja no Brasil.
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167
CAPTULO 10
O PROGRAMA DE MELHORAMENTO DE
SOJA TRANSGNICA PARA O CERRADO
PLNIO ITAMAR DE MELLO DE SOUZA
SRGIO ABUD DA SILVA
CLAUDETE TEIXEIRA MOREIRA
AUSTECLINIO LOPES DE FARIAS NETO
NELSON DOS SANTOS E SILVA
JOS FRANCISCO DE FERRAZ TOLEDO
NEYLSON EUSTQUIO ARANTES
O PROGRAMA DE MELHORAMENTO DE SOJA

TRANSGNICA PARA O CERRADO
Incio da pesquisa com
organismos transgnicos
A primeira planta transgnica foi
aprovada em escala comercial em
1994, nos Estados Unidos, aps
mais de 12 anos de pesquisas e
estudos que comprovassem sua
eficcia e segurana. O primeiro
transgnico em soja que causou
alto impacto na agricultura foi a
soja transgnica RR (MONSANTO,
2005). Essa novidade chegou
ao campo pela primeira vez nos
Estados Unidos, na safra de 1996.
No ano seguinte, os agricultores
argentinos tambm aderiram
novidade (MONSANTO, 2005).
A soja transgnica RR (Roundup
Ready) assim conhecida por ter
recebido um gene derivado da
Agrobacterium sp. CP4, patenteado
por uma empresa privada com
o nome CP4-EPSPS. O gene
expressa o elemento de resistncia
ao herbicida glifosato, princpio
ativo do Roundup Ready (RR), que
mata praticamente todas as ervas
daninhas, menos as plantas de soja

RR (MONSANTO, 2005).
Na lavoura, a soja RR flexibiliza o
controle de ervas daninhas, facilita
a rotao de cultura, economiza
tempo, combustvel, custos
operacionais, facilita a colheita e
reduz o teor de impureza e umidade
nos gros colhidos, otimizando
assim a produo. Para o meio
ambiente, proporciona reduo
da poluio pelo menor uso de
outros herbicidas, combustvel e
pelo incentivo ao uso do plantio
direto, em razo da maior facilidade
no manejo da lavoura. Para a
sociedade, alm de melhorar as
condies ambientais, espera-se
reduo no custo de produo
e, conseqentemente, no custo
dos produtos e subprodutos no
mercado.
Os herbicidas base de glifosato
so altamente eficientes no controle
das plantas daninhas anuais e
perenes, tanto as de folhas largas
quanto as de folhas estreitas.
Seletivo soja RR, o glifosato
171
permite seu desenvolvimento

normal, no deixando resduos
nos gros de soja nem no solo
em cultivo. Na classificao
toxicolgica, encontra-se no grupo
IV, ou seja, produto pouco txico
(faixa verde) (MONSANTO, 2005).
Incio do plantio e da
pesquisa com soja
transgnica RR no Brasil
No Brasil, apesar da expanso das
lavouras de soja na regio central,
a soja transgnica comeou a
ser cultivada no final dos anos
1990, na Regio Sul. O plantio
era feito utilizando sementes de
soja originadas da Argentina,
conhecidas como soja Maradona.
O cultivo dessas variedades,
desenvolvidas para latitudes
altas, limitou-se s regies do Sul
do Brasil. Mesmo assim, a soja
transgnica RR (Maradona), por ter
seu cultivo considerado de baixo
custo e apresentar muita facilidade
no manejo, foi levada para a regio
central do Pas. Porm, como
era esperado, no se adaptou s
nossas condies ambientais.
As cultivares no tinham perodo
juvenil longo, apresentavam pouca
resistncia a doenas, elevada
172
interao com ambiente, baixa

estabilidade e baixa adaptabilidade.
Conseqentemente, apresentavam
baixas produtividades, alm de
causarem srios problemas para o
mercado sementeiro.
A Embrapa Cerrados est
localizada numa regio privilegiada,
praticamente no centro do
Bioma Cerrado, o que permite a
seleo de cultivares de soja com
adaptao para as regies Central
e Norte/Nordeste do Brasil. As
pesquisas com soja so realizadas
com o apoio das equipes de
pesquisa em solos (adubao e
correo, microbiologia e manejo),
fitopatologia, estatstica, agricultura
de preciso, biologia molecular
e integrao lavoura-pecuria.
O Centro de Pesquisa dispe de
ampla infra-estrutura, permitindo
a instalao de experimentos de
competio nas safras de vero e
avanos de gerao e multiplicao
de sementes no inverno (poca
seca), o que aumenta a eficincia
dos trabalhos de pesquisa.
A Embrapa iniciou suas pesquisas
com a soja transgnica RR no final
dos anos 1990, porm os testes
s podiam ser feitos em reas
restritas das unidades de pesquisa,
O PROGRAMA DE MELHORAMENTO DE SOJA...
o que atrasou a introduo dessa

tecnologia para os produtores. A
Embrapa Cerrados, em parceria
com a Embrapa Soja, desenvolve
seu programa de pesquisa com
melhoramento gentico de
soja desde 1975. O objetivo
desenvolver cultivares de soja
com alta adaptao, estabilidade e
potencial produtivo, boa qualidade
de sementes e resistncia s
pragas e doenas.
A Embrapa Soja comeou os
cruzamentos com a soja RR a
partir da cultivar BR 16, contendo
o gene CP4 EPSPS da Monsanto.
Esse evento foi realizado nos
Estados Unidos pela Monsanto, em
acordo com a Embrapa (contrato
de parceira tcnica 10.200/055-5,
firmado em 23 de abril de 1997).
Essa linhagem foi utilizada para os
cruzamentos seguintes gerando
populaes segregantes (bulks),
que foram distribudas para as
outras unidades chegando
Embrapa Cerrados (Contrato
Embrapa/Monsanto 1997).
A Embrapa Cerrados comeou
suas pesquisas com OGMs a
partir de 1998, com a liberao
do Certificado de Qualidade em
Biossegurana (QGB). O primeiro

OGM pesquisado na Embrapa
Cerrados foi a soja com o gene
CP4 EPSPS, que confere tolerncia
ao glifosato (soja RR), cujo plantio
foi feito em novembro de 1998,
aps a publicao do processo de
liberao da CTNBio no DOU n
99, de 27 de maro 1998, sob o
n 01200.00136/98-68. O segundo
foi a soja com o gene ahas, que
confere tolerncia aos herbicidas
do grupo das imidazolinonas
(soja IMI), cujo plantio ocorreu em
maio 2001, aps a publicao do
processo de liberao da Comisso
Tcnica Nacional de Biossegurana
(CTNBio) no DOU n 221-E, de 17
de novembro de 2001, sob o n
01200.001780/2000-20 (FALEIRO
et al., 2004).
A partir dos bulks e linhagens
encaminhadas pela Embrapa
Soja, foram selecionadas milhares
de outros gentipos, dando
seguimento nas outras etapas do
programa de melhoramento P1,
P2, P3 e VCUs (Fig. 1). O fruto
inicial desse trabalho resultou na
participao da Embrapa Cerrados
na criao de quatro cultivares de
soja RR, lanadas para a regio
central do Brasil: BRS Valiosa RR,
173
BRS Baliza RR e BRS Silvnia

RR, BRS Favorita RR (Tabela 1).
Essas cultivares foram aprovadas
em trabalhos de pesquisa, em
rede, executados pela Embrapa
e parceiros e coordenados pela
Embrapa Cerrados e Embrapa
Soja. Seguindo os objetivos dos
trabalhos da Embrapa na criao
de variedades de soja, todas

essas cultivares apresentam alta
adaptao, estabilidade e potencial
produtivo, com boa qualidade de
sementes e resistncia s pragas e
doenas. A cultivar BRS Valiosa RR
at o momento a cultivar de soja
RR mais plantadas na regio central
do Brasil.
Cruzamentos e bulks
Prognies e linhagens
Preliminar I
PRECOCE
TARDIO
MDIO
Preliminar II
P
Fitossanidade
Nematide-de-cisto
P
Preliminar III
Semente gentica
poca de plantio
1 ano
Dias-de-campo
Populao de plantas
2 ano
DHE
VCU's
Locais: SP, MG, MS, MT,
GO, BA, TO, MA, PI
Semente bsica
Lanamento
Fig. 1. Estratgia de pesquisa do programa de melhoramento de soja transgnica da Embrapa Cerrados.
174
175
Resistente*
Resistente*
Sem informao
Resistente
Suscetvel
Sem informao
Moderadamente
Resistente*
Mancha olho-de-r
Crestamento bacteriano
Meloidogyne incgnita
Meloidogyne javanica
Nematide de cisto
Mosaico comum
Sem informao
Resistente*
Fusariose
Pstula bacteriana
Odio
Resistente
Cancro da haste
Reao a doena
68
Determinado
Boa
Altura
Hbito de crescimento
Resistncia ao acamamento
Resistente
Moderadamente
tolerante
Resistente
Resistente
Resistente
Sem informao
Resistente
Suscetvel
Suscetvel
Resistente
71
Determinado
Boa
Amarela
Amarela
Planta (cm)
Determinado
Boa
Cor
124
Roxa
Roxa
Preta
Marrom clara
Marrom
118
Roxa
Roxa
Preta
Marrom clara
Marrom
58
BRS Valiosa RR
GO, DF e MG
Mdio
Maturao mdia
50
BRS Favorita RR
GO, DF e MG
Semiprecoce
Florao
Denominao
Indicadores
Hipoclito
Flor
Hilo
Vagem
Pubescncia
Tegumento da semente
Ciclo (dia)
rea de indicao
Caractersticas
Resistente
Moderadamente
suscetvel
Suscetvel
Resistente
Sem informao
Suscetvel
Moderadamente tolerante
Suscetvel
Sem informao
Resistente
76
Determinado
Boa
Amarela
Verde
Branca
Marrom
Marrom
Marrom
128
GO, DF e MG
Semitardio
67
BRS Silvania RR
Cultivares
Resistente
Continua...
Resistente
Sem informao
Suscetvel
Tolerante
Suscetvel
Sem informao
Moderadamente
resistente
Moderadamente
suscetvel
Resistente
82
Determinado
Boa
Amarela
Verde
Branca
Preta
Marrom
Marrom
136
64
GO, DF, MG e BA
Tardio
BRS Baliza RR
Tabela 1. Principais caractersticas descritoras das primeiras cultivares de soja lanadas conjuntamente
pela Embrapa Soja e Embrapa Cerrados: BRS Favorita RR, BRS Valiosa RR, BRS Silvnia e BRS Baliza RR.
176
* Condies de campo.
1/11 a 5/12
13-18
Espaamento 50 cm
poca recomendada de plantio
12-16
Corrigida
11-14
Fertilidade do solo
Densidade
Espaamento 45 cm
Corrigida
01/11 a 10/12
01/11 a 5/12
12-15
11-13
10-12
250.000 300.000
Negativa
GO, DF e MG
13
BRS Silvania RR
Cultivares
Corrigida
13-18
12-16
11-14
260.000 360.000
260.000 - 360.000
Populao de plantas
Espaamento 40 cm
Negativa
Negativa
Reao a peroxidase
rea de indicao
Peso de 100 sementes (g)
BRS Valiosa RR
GO, DF e MG
15
Indicadores
BRS Favorita RR
GO, DF e MG
15,7
Caractersticas
Tabela 1. Continuao.
01/11 a 10/12
Corrigida
14-16
11-14
10-12
260.000 320.000
Negativa
GO, DF, MG e BA
13
BRS Baliza RR
Biossegurana
De acordo com a Monsanto, foram
realizados mais de 1.400 avaliaes
independentes da composio
e nutrio da soja, concluindo
que a soja transgnica RR to
segura quanto no-transgnica,
em relao segurana alimentar.
Esses estudos serviram como base
para a aprovao comercial da soja
RR em diversos pases.
Sob o ponto de vista ambiental, a
soja transgnica RR no apresenta
possibilidade de cruzamento
natural com espcies nativas
ou outras culturas, por ser uma
espcie extica no Brasil. Portanto,
no poder contaminar o meio
ambiente, uma vez que no h
espcies selvagens ou outras
cultivadas com compatibilidade
sexual com a soja no Brasil.
Uma das preocupaes em
relao biossegurana era o fluxo
gnico entre a soja transgnica e a
convencional, nas reas de cultivo
para semente. Com o objetivo de
verificar o fluxo gnico, ensaios
de pesquisa foram desenvolvidos
pela Embrapa Cerrados, em
parceria com a Embrapa Recursos
Genticos e a Basf. Utilizou-se uma
linhagem contendo o gene ahas

(soja IMI), que confere tolerncia
aos herbicidas do grupo das
Imidazolinonas e, como bordadura
da soja no-transgnica que a
originou. Os resultados, apesar
de preliminares, mostraram que
o gene pode ser transferido
por cruzamento natural. Com
isso, sugere-se que a largura
da bordadura com soja notransgnica semeada em volta dos
ensaios e lavouras com soja IMI
seja superior a 6,5 m, distncia
a partir da qual no se observou
eventos de fluxo gnico, naquele
experimento (ABUD et al., 2003).
Outro trabalho, dentro dessa
mesma linha de pesquisa com
fluxo gnico, foi desenvolvido
pela Embrapa Cerrados em
parceria com a Embrapa Recursos
Genticos e Biotecnologia para
verificar a que distncia ocorreria
o cruzamento natural, com a
transferncia do gene RR. Nesse
ensaio, utilizou-se a linhagem
BR00-69515, que continha o
gene RR, e a BRSMG Conquista,
cultivar que deu origem a essa
linhagem. Os resultados, apesar
de preliminares, mostraram que
o gene pode ser transferido at a
uma distncia de 10 m (ABUD
177
et al., 2007). Esses resultados foram

apresentados em reunies com
produtores e pesquisadores e so
utilizados at hoje como referncia.
A fixao biolgica em soja
transgnica tambm vem sendo
estudada. A Embrapa Cerrados vem
desenvolvendo pesquisa nessa linha
desde 2003. O objetivo avaliar
a fixao biolgica do nitrognio
e o estado nutricional em soja
geneticamente modificada, tolerante
ao herbicida glifosato, e monitorar o
impacto ambiental da transgenia e o
manejo sobre a microbiota do solo
(ANDRADE et al., 2004).
Todos esses trabalhos foram acompanhados e analisados pela CTNBio.
Manejo de plantas
invasoras em reas
de cultivo com soja
transgnica
O controle de plantas invasoras
em reas de cultivo com soja de
fundamental importncia para a
obteno de altas produtividades.
As plantas invasoras representam
um grande problema para qualquer
explorao agrcola, porque elas
competem pela luz solar, pelos
nutrientes e pela gua, podendo
dificultar a operao de colheita e
comprometer a qualidade do gro,
dependendo da espcie e do nvel
de infestao (Fig. 2).
Fig. 2. Lavoura de soja

sem controle adequado de
plantas invasoras.
178
O controle dessas plantas

invasoras feito utilizando-se
herbicidas. Suas vantagens so
a economia de mo-de-obra e a
rapidez na aplicao dos produtos.
Porm, com a ocorrncia de
ervas daninhas de difcil controle,
necessita-se cada vez mais de
herbicidas diferentes e um maior
nmero de aplicaes, o que
dificulta o manejo da lavoura de
soja, aumenta o custo de produo

e tambm o impacto ambiental.
O cultivo da soja transgnica RR,
resistente ao glifosato, diminui
o impacto ambiental causado
pelos herbicidas e reduz o custo
de produo, em razo do uso
de apenas glifosato para o
controle das plantas daninhas,
proporcionando grande facilidade
no manejo da lavoura (Fig. 3).
Fig. 3. Lavoura de soja RR com um bom controle de ervas

daninhas.
179
Em lavouras que utilizam o

plantio direto, no cultivo da soja
transgnica RR, necessria
a utilizao de herbicidas para
a dessecao da palhada e,
aps a semeadura, a utilizao
de glifosato para o controle das
plantas daninhas. Nas reas com
alta presso de infestao, sugerese que a dessecao seja feita
com antecipao de 20 a 25 dias
da semeadura, para o controle
das plantas daninhas. As espcies
daninhas que, possivelmente,
emergirem nesse intervalo podem
ser controladas por meio de uma
segunda aplicao, realizada
prxima semeadura, utilizando
doses reduzidas de dessecante.
Durante o ciclo da soja, quer
seja no cultivo convencional ou
no plantio direto, o controle das
plantas daninhas poder ser
feito utilizando-apenas uma dose
de glifosato, entre 25 e 35 dias,
dependendo do nvel de infestao
das ervas e do estgio de
desenvolvimento da soja. Nas reas
com alta presso de infestao de
plantas daninhas e(ou) presena
de ervas de difcil controle, sugerese o controle seqencial. Nesse
caso, faz-se uma aplicao de
180
glifosato, entre 12 e 15 dias, aps a

emergncia da soja e uma segunda
aplicao, entre 25 e 35 dias, para o
controle das ervas que ressurgirem.
Sementes-pirata
A utilizao de sementes-pirata ou
sem origem e integridade gentica
garantida tem preocupado muito as
instituies ligadas ao agronegcio
da soja. O uso dessa prtica ocorre
em decorrncia de uma fiscalizao
ainda deficiente, a curiosidade
por uma nova tecnologia e,
principalmente, o desconhecimento
dos produtores de soja sobre os
prejuzos que ela pode causar ao
setor sementeiro e produtivo.
A utilizao de semente de alta
qualidade uma das principais
garantias do sucesso na produo
da cultura da soja. As empresas
de pesquisas podem levar 10 anos
para desenvolver uma cultivar
que atenda s necessidades dos
sojicultores, agregando elevado
potencial de rendimento, melhor
estabilidade e adaptabilidade, maior
resistncia a doenas, alm da
qualidade fisiolgica e sanitria da
semente de soja.
No mercado de sementes, as
caractersticas de qualidade
diferenciam as sementes
melhoradas geneticamente do
gro comum, vendido muitas vezes
como semente-pirata. A sementepirata aquela comercializada
sem a permisso do obtentor da
cultivar, sem origem oficial, sem
garantia de qualidade e integridade
gentica. Com isso, todos perdem,
principalmente o agricultor, que
potencialmente est utilizando uma
mercadoria de baixa qualidade.
Essa semente produzida e
comercializada fora do sistema
nacional de sementes e, portanto,
sem nenhum tipo de fiscalizao e
controle, no oferecendo nenhuma
garantia ou padro de qualidade ao
agricultor. Existe tambm a semente
oriunda de contrabando, que

agrava mais ainda a situao, pois
pode introduzir pragas e doenas j
erradicadas ou ainda inexistentes,
prejudicando toda uma regio
ou o pas. A semente-pirata pode
conter, ainda, misturas de sementes
no-transgnicas, em razo da
baixa qualidade na colheita e no
beneficiamento, dificultando o
estabelecimento da populao
de plantas, aps a utilizao do
glifosato no controle das plantas
daninhas (Fig. 4). Tudo isso resulta
na degenerao das variedades,
reduzindo significativamente as
produtividades, trazendo grandes
prejuzos para todo o agronegcio
da soja no Pas.
Fig. 4. Plantas de soja

convencional, mortas pelo
glifosato, misturadas
soja RR.
181
As conseqncias dos danos

causados pela utilizao de
sementes pirata sojicultura
brasileira so incalculveis. Alm
dos prejuzos diretos, fatalmente
causa a cada agricultor os
prejuzos indiretos, que so ainda
mais danosos e com efeitos
mais profundos e abrangentes.
O seguimento mais afetado o
do setor sementeiro, em seguida
o da pesquisa e, finalmente, o
agricultor, que ver seus problemas
aumentarem, sua produtividade
reduzir e no ter a pesquisa para
mant-lo em ascenso tcnica ou
socorr-lo quando precisar.
Integrao lavourapecuria
A abertura de novas reas
para o cultivo de soja,
principalmente quando se fala em
desmatamento, sempre motivo
de grandes polmicas. No Brasil,
aproximadamente 50 milhes de
hectares de pastagem encontramse degradados ou em degradao.
O cultivo da soja, no sistema de
integrao lavoura-pecuria permite
a recuperao dessas reas, alm
de aumentar a produo de gros
e de carne sem a necessidade de
desmatar novas reas.
182
Normalmente, as reas utilizadas

com pastos, por no haver uma
boa adubao de manuteno, tm
sua fertilidade reduzida, baixando
a capacidade de suporte de
animais e, conseqentemente, sua
produtividade.
A soja RR pode ser um importante
componente nas tecnologias que
esto sendo desenvolvidas para a
recuperao das reas de pasto, na
integrao lavoura-pecuria.
A soja uma cultura que vem
sendo utilizada com sucesso para
a recuperao dessas reas. Seu
cultivo melhora a fertilidade do solo,
pois deixa resduos de nitrognio,
fixados pela simbiose com bactrias
fixadoras de nitrognio, e tambm
de outros nutrientes utilizados na
adubao da soja. Um dos manejos
para a recuperao dessas reas
feito plantando-se uma cultivar de
soja RR de ciclo curto juntamente
com semente de capim. Essa
prtica reduz o custo de uma
operao (semeio do capim). Aps
a colheita da soja, no final do ms
de fevereiro, o capim passa a se
desenvolver utilizando os resduos
da lavoura de soja. A principal
dificuldade dessa prtica manter
o pasto com desenvolvimento
reduzido durante o ciclo da soja.

Para isso, com o cultivo de soja
RR, pode-se fazer a aplicao de
doses de glifosato, que controla
as ervas daninhas e reduz o
desenvolvimento do capim.
O cultivo da soja RR, no sistema de
integrao lavoura-pecuria, reduz
o custo de produo e permite a
recuperao dessas reas, alm
de aumentar a produo de gros
e de carne sem a necessidade de
desmatar novas reas.
Referncias
ABUD, S.; SOUZA, P. I. M.; VIANNA, G.
R.; LEONARDECZ, E.; MOREIRA, C.
T.; FALEIRO, F. G.; NUNES JNIOR,
J.; MONTEIRO, P. M. F. O.; RECH, E.
L.; ARAGO, F. J. L. Gene flow from
transgenic to nontransgenic soybean
plants in the Cerrado region of Brazil.
Genetics and Molecular Research,
Ribeiro Preto, v. 6, n. 2, p. 345-352,
2007.
ABUD, S.; SOUZA, P. I. M.; MOREIRA,
C. T.; ANDRADE, S. R. M.; ULBRICH,
A. V.; VIANNA, G. R.; RECH, E. L.;
ARAGO, F. J. L. Disperso de plen

em soja transgnica na regio do
Cerrado. Pesquisa Agropecuria
Brasileira, Braslia, v. 38, n. 10,
p. 1229-1235, 2003.
ANDRADE, S. R. M.; SOUZA, P. I. M.;
MOREIRA, C. T.; ABUD, S.; MENDES,
I. C.; REIS JNIOR, F. B.; FALEIRO, F.
G. Pesquisas com OGMs realizadas
na Embrapa Cerrados. In: ENCONTRO
NACIONAL DAS COMISSES
INTERNAS DE BIOSSEGURANA, 2.,
2004, Rio de Janeiro. Resumos... Rio
de Janeiro: CNTBio, 2004. p. 20.
FALEIRO, F. G.; ANDRADE, S. R. M.;

SOUZA, P. I. M.; MOREIRA, C. T.;
MENDES, I. C.; REIS JNIOR, F. B.
Comisso interna de biossegurana
da Embrapa Cerrados: um breve
histrico. In: ENCONTRO NACIONAL
DAS COMISSES INTERNAS DE
BIOSSEGURANA, 2., 2004, Rio de
Janeiro. Resumos... Rio de Janeiro:
CNTBio, 2004. p. 23.
MONSANTO. Soja transgnica.
Disponvel em <http://www. Monsanto.
com.br/mapa_do_site>. Acesso em: 20
abr. 2005.
183
ISBN 978-85-7075-050-1
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Dedicamos este livro aos pesquisadores, professores e estudantes que

Este livro um dos produtos cientficos do I Seminrio sobre

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sendo uma cincia de natureza

Fig. 1. Levedura, uva, trigo, po e vinho.

BIOTECNOLOGIA, TRANSGNICOS E BIOSSEGURANA

Com a evoluo da cincia em

das plantas; o desenvolvimento de

uso de microrganismos visando

Fig. 2. Louis Pasteur (a); microrganismos (b); Oswaldo Cruz (c);

Fig. 3. Mendel e seus experimentos (a); Watson e

BIOTECNOLOGIA, TRANSGNICOS E BIOSSEGURANA

Fig. 4. Principais tcnicas relacionadas

Vinhos, cerveja, pes,

A transformao gentica, como

rompida pela transformao gentica,

BIOTECNOLOGIA, TRANSGNICOS E BIOSSEGURANA

engenharia gentica, retirando os

possuem a capacidade de transferir

Fig. 6. DNA como base do dogma central da biologia molecular.

Na transferncia direta, so usados

membrana celular, permitindo a

BIOTECNOLOGIA, TRANSGNICOS E BIOSSEGURANA

da transformao gentica, sendo

testes devem ser realizados em

Fig. 9. Regenerao e seleo de clulas transformadas mediante tcnica de cultura de

Fig. 10. Testes de plantas transgnicas no

BIOTECNOLOGIA, TRANSGNICOS E BIOSSEGURANA

Todas as etapas para obteno de

alimentar, a criao de novas

Fig. 11. Arcabouo legal para obteno de transgnicos.

Na Embrapa, existe uma rede

homem ou ao meio ambiente e