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, Araraquara
v.18, n.3, p. 267-275, jul./set. 2007
ISSN 0103-4235
Compostos qumicos que possuem atividade antioxidante geralmente so aromticos e contm pelo menos uma
hidroxila podendo ser sintticos como o butil hidroxianisol
(BHA) e o butil hidroxitolueno (BHT), largamente utilizados pela indstria de alimentos. Os naturais, denominados
substncias bioativas, incluem organosulfurados, os fenlicos (tocoferis, flavonides e cidos fenlicos), os terpenos, carotenides e o cido ascrbico que fazem parte da
constituio de diversos alimentos.19,30
Diversos autores vm mencionando que os vegetais
da dieta so fonte de antioxidantes fenlicos.12,16,30,31,35,36 As
frutas, hortalias, gros e especiarias, alm de plantas medicinais so as principais fontes de compostos antioxidantes mostradas pela literatura.1,2,20,24,31,32 As pesquisas buscam
substncias com atividade antioxidante, provenientes de
fontes naturais, que possam atuar sozinhas ou sinergicamente com outros aditivos; que funcionem como alternativa para prevenir a deteriorao oxidativa de alimentos e
limitem o uso dos antioxidantes sintticos e agentes conservadores.19
Alm disso, vem sendo demonstrado que estes compostos podem atuar como antifngicos e inibidores da produo de micotoxinas, tais como a aflatoxina, por atuarem
na regulao da peroxidao lipdica, inibindo a formao
de perxidos e conseqente estresse oxidativo que est relacionado a biosntese de aflatoxinas.10,11,23,28,29
Evidncias cientficas permitem afirmar que a propriedade antioxidante de vegetais se deve, principalmente, a
seus compostos fenlicos.3,12 Kaur & Kapoor14 encontraram
uma correlao significativa e positiva (r2 = 0,66, p < 0,05)
entre a atividade antioxidante e contedo de fenis totais
em vegetais da dieta asitica.
Diferentes propostas vm sendo realizadas para avaliar a atividade antioxidante de compostos fenlicos, mas
pouco tem sido feito para determinar o efeito inibidor de
compostos fenlicos dos mesmos em sistemas enzimticos,
particularmente com respeito peroxidase. Esta uma enzima que aparece em clulas de diferentes seres vivos e
267
268
Fenis totais
(g fenis.g (bs)-1)
270057
450052
10002,6
3108,5
3905,8
41014
401,1
2909,5
Cascas
c. limo
c. laranja
c. ma
c. banana
c.berinjela
c. batata
Fenis totais
(g fenis.g (bs)-1)
5500160
420037
4700140
101025
220096
99038
O arroz foi o material que apresentou menor contedo de compostos fenlicos (40 gfenis.g(bs)-1). Os extratos
das pores externas dos vegetais apresentam valores entre
2 e 5 vezes superiores aos de suas respectivas polpas, com
exceo do extrato de laranja. Tal perfil era esperado tendo
em vista que a funo protetora atribuda a estes compostos
seria mais abundante nas pores mais externas.23, 29 Os descartes ricos em fenis podem ser interessantes como matrias prima para a obteno de antioxidantes naturais, dada a
sua abundncia nos resduos domsticos e industriais.
Considerando-se a abundncia dos compostos fenlicos nas pores estudadas foi avaliada a atividade antioxidante dos extratos em um sistema enzimtico aquoso
sobre a ao da peroxidase, que permitiria inferir sobre o
mecanismo de inibio de oxidao uma vez que o potencial antioxidante de uma substncia depende de sua estrutura qumica.
A Tabela 2 apresenta a concentrao de compostos
fenlicos contida nos extratos utilizados em cada experimento, a atividade enzimtica especfica e a inibio em
porcentagem, causada pela presena dos extratos vegetais
no meio de reao. Cabe salientar que no foi observada relao linear crescente entre os teores de fenis e a inibio
do escurecimento avaliada pela inibio da atividade enzimtica especfica relativa ao controle (ausncia de extrato).
Este efeito indica que os tipos e as estruturas dos compostos fenlicos presentes influenciam mais na atividade antioxidante que a concentrao dos fenlicos totais, conforme o
que vem sendo preconizado em literatura.
Kahkonen et al.12 estudaram 96 extratos fenlicos de
pores comestveis e no comestveis de frutas, vegetais,
ervas, cereais, brotos e sementes e encontraram alto contedo de compostos fenlicos e alta atividade antioxidante,
porm, tambm, no encontraram uma correlao significativa entre o teor de fenis totais e a atividade antioxidante determinados nos vegetais. Velioglu et al.30 encontraram uma correlao significativa de 0,4253 (R2 = 0,4253
p<0,001) entre o contedo de fenis e a atividade antioxidante de 28 produtos vegetais analisados.
Tabela 2 Contedo de fenis, atividade enzimtica especfica e a inibio exercida pelos extratos vegetais em 10
minutos de reao.
Tipo de Extrato
c. limo
p. limo
c. laranja
p. laranja
c. ma
p. ma
c. banana
p. banana
c. berin.
p. berin.
c. batata
p. batata
arroz
trigo
Fenis totais
AES
(g fenis.mL-1)
(abs.mg.min-1)
Inibio
(%)
108,3
40,0
73,3
41,7
50,0
18,3
13,3
8,3
13,3
8,3
10,0
10,0
1,3
2,0
0,013
0,004
0,014
0,001
0,01
0,021
0,035
0,014
0,041
0,05
0,035
0,043
0,022
0,027
76
93
74,5
98
82
62
36
74,5
25,5
10
36
22
60
50
269
0,50
0,45
0,40
0,35
0,30
0,25
0,20
CONTROLE
C_LIM
0,15
C_LAR
0,10
C_MA
0,05
C_BAN
0,00
C_BAT
0
10
15
20
25
C_BER
Tempo (min)
FIGURA 1 Inibio da reao de escurecimento enzimtico pelos extratos das cascas vegetais. CONTROLE = reao sem
adio de extrato vegetal; C_LIM = cascas de limo; C_LAR = cascas de laranja; C_MA = cascas de ma; C_BAN =
cascas de banana; C_BAT = cascas de batata; C_BER = cascas de berinjela.
0,50
0,45
0,40
0,35
0,30
0,25
CONTROLE
0,20
P_LIM
0,15
P_LAR
0,10
P_MA
P_BAN
0,05
P_BAT
0,00
ARROZ
0
10
15
20
25
TRIGO
Tempo (min)
FIGURA 2 Inibio da reao de escurecimento enzimtico pelos extratos das pores comestveis vegetais. CONTROLE =
reao sem adio de extrato vegetal; P_LIM = polpas de limo; P_LAR = polpas de laranja; P_MA = polpas de ma;
P_BAN = polpas de banana; P_BAT = polpas de batata; ARROZ = extrato de arroz; TRIGO = extrato de trigo.
270
Km
controle
Km
extrato
Vmx.
controle
Vmx.
extrato
c. limo
p. limo
c. laranja
p. laranja
c. ma
p. ma
0,60
0,90
0,60
0,90
0,60
1,20
0,20
0,40
0,25
0,002
0,065
1,30
0,06
0,14
0,06
0,14
0,06
0,073
0,011
0,004
0,006
0,0005
0,004
0,036
c. banana
p. banana
c. berin.
p. berin.
c. batata
p. batata
arroz
trigo
0,60
0,90
1,00
1,20
0,60
0,90
0,90
0,90
1,00
0,80
1,10
0,60
0,40
0,53
0,70
0,25
0,06
0,14
0,044
0,073
0,06
0,14
0,14
0,14
0,01
0,06
0,018
0,057
0,023
0,075
0,03
0,015
p = polpas; c = cascas.
271
800
700
600
1/v (10min/abs)
500
400
300
Controle
c.lim
200
c.lar
c.ma
100
c.ban
c.bat
0
0
c.ber
1/[S] (mL/uL)
240
210
1/v (10min/abs)
180
150
120
Controle
90
p. ma
60
p. ban
p. bat
30
0
p. ber
arroz
0
trigo
1/[S] (mL/uL)
272
Ativ. antioxidante
100
Ativ. antifngica
80
60
40
20
p. lim
p. lar
p. ma p. ban p. ber
p. bat
arroz
trigo
c. lim
c. lar
c. ma c. ban c. ber
c. bat
FIGURA 5 Atividade antioxidante e atividade antifngica de extratos vegetais contendo compostos fenlicos. lim = limo;
lar = laranja; ma = ma; ban = banana; ber = berinjela; bat = batata; p. = polpa; c. = casca.
Apenas os extratos das polpas de limo, laranja, banana e de cascas de ma apresentaram atividades antioxidantes maiores que a atividade antifngica, sugerindo que
a inibio do desenvolvimento fngico foi ocasionada por
outro mecanismo ou que esta relao no foi linear.
A determinao de aflatoxinas no meio onde foi
inoculado o fungo Aspergillus flavus revelou que as mesmas concentraes de extratos fenlicos adicionados ao
meio de crescimento que proporcionaram as atividades
fngicas apresentadas na Figura 5, provocaram a inibio
total da produo de aflatoxina. A produo de aflatoxina
B1 ocorreu apenas quando foi empregado extrato de polpa de batata que inibiu em 57% a produo da micotoxina em relao ao controle. Jayashree & Subramanyam10,11
constataram que o estresse oxidativo foi um pr-requisito
para a produo da aflatoxina por A. parasiticus conduzindo ao aumento da peroxidao lipdica e a gerao de
radicais livres. Os mesmos autores observaram10 que um
antioxidante fenlico como o eugenol inibe a produo de
aflatoxina pela inibio da peroxidao lipdica e passos da
biossntese das aflatoxinas sem alterar muito o crescimento do A. parasiticus. Os resultados deste trabalho sugerem
que a propriedade antioxidante pode ser responsvel pela
atividade antimicotoxignica demonstrada pelos extratos
fenlicos estudados. Esta ao inibitria sobre a atividade
da peroxidase demonstrada pelos extratos fenlicos pode
ocorrer, tambm, sobre outros sistemas enzimticos de
oxido-reduo que estejam envolvidos nas etapas de sntese das micotoxinas por fungos micotoxignicos. No caso
deste trabalho o extrato de batata com menor potencial antioxidante foi o que no impediu a produo de aflatoxina
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