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Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro - UNIRIO

RESUMO DE IMUNOLOGIA
(Prova 1)

Carolina Oshiro Yeh


Ceclia Isicke Carneiro Bastos
Viviane Ribeiro Paiva

Segundo semestre de 2012

Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Aula 2 Professora Vera INFLAMAO 27/11/2012

Seja o tipo de resposta que for acontecer no organismo, tudo comea pela resposta inflamatria,
que faz parte da resposta INATA. Existe a INATA e a ADAPTATIVA. A inata invarivel. Seja qual for o tipo
de patgeno e a agresso, sempre vai haver uma resposta com essas caractersticas. Pode haver pequenas
diferenas referentes aos tecidos que esto sendo invadidos, pois o tecido pode variar nas substncias que
produz, e o patgeno pode induzir a produo de substncias que nem todos os tecidos produzem. Mas
sempre a inflamao como resposta inicial.
Sinais caractersticos de uma resposta inflamatria: Rubor, dor, tumor, calor, podendo haver pus.
Por qu? Quando aparece o pus? Nem toda inflamao externa, pode ser, por exemplo, por excesso de
esforo fsico. Febre, cansao, dor no corpo, sono, falta de apetite so sinais de inflamao.

Para comear a entender como a inflamao acontece, deve-se entender o inicio do processo. Para
uma resposta imunolgica acontecer, ela passa por vrias fases. A primeira COGNITIVA. O SI tem uma
capacidade extraordinria para percepo de quando o organismo sai da homeostase. Percepo
interao molecular entre os componentes do SI, que sinalizem que h algo errado. Vai modular e
modificar o funcionamento do SI a partir do momento dessa interao.
O SI capaz de identificar qualquer tipo de modificao do organismo. Papel de defesa contra
infeco primordial, mas a gente entende que quando o organismo invadido por um patgeno h uma
agresso. Mas nem toda a agresso causada por patgeno. Pode ser devido a trauma, infarto, AVC que
levam a leses teciduais que tambm so percebidos pelo SI.
Molculas presentes nos microorganismos que no existem em molculas saudveis, antgenos,
chamados PAMPS, so reconhecidos pelo SI. So componentes moleculares presentes em diversos grupos
de microorganismos. Ex: LPS comum a qualquer bactria Gram -, peptideoglicanas em gram +, o sistema
imune inato tambm interage.
E foi a que o sistema imunolgico se garantiu para conseguir saber que um sinal de perigo. Assim
como o grande grupo de bactrias gram negativas que apresentam o LPS em sua estrutura, as gram
positivas apresentam mais externamente a peptidoglicana (padro molecular). Bactrias que possuem
flagelo (motilidade) possuem a protena flagelina que est presente em todas as bactrias flageladas,
constituindo tambm um padro molecular. Fungos apresentam estruturas chamadas de betaglucanas, ou
seja, so polissacardeos compostos por unidades de glucose. Qualquer fungo apresenta essa estrutura em
sua parede celular. Ento, essa foi uma maneira fcil e rpida do sistema imunolgico saber que algo
estranho que deve ser combatido.
Mas e as alteraes teciduais que no so causadas por patgenos? Toda vez que o tecido sofre
leso, h um grau de necrose. As clulas necrosadas extravasam contedo citoplasmtico, normalmente
no acessvel ao SI, isso tambm um alarme para a ao do SI. Protenas de choque trmico, ATP
extracelular, so exemplos. So chamados DAMPS (D de danger) ou alarminas.

Como ocorre essa identificao de DAMPS e PAMPS? Como o SI se comporta aps essa
identificao? Qual o objetivo dessas alteraes?
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Quem reconhece os padres moleculares so os receptores de padres moleculares PRRs, que se


agrupam em famlias, em decorrncia de caractersticas estruturais. Esto associados a molculas
citoplasmticas. Quando os PRRs interagem fisicamente com PAMPS e DAMPS, h cascatas citoplasmticas
de sinalizao. H complexidade nas diferentes vias de sinalizao, muitas convergem para vias iguais, e
podem interferir umas nas outras. Quando um patgeno invade o organismo, ele no possui um nico
PAMP, ento seu SI vai interagir com os que estiverem acessveis, disponveis, mostra. A partir disso, h
uma srie de reaes nas clulas do SI, que culminam na alterao do comportamento dessas clulas. Qual
vai ser esse comportamento? Em vias gerais, diz-se que h ATIVAO, ela vai comear a modificar seu
padro, mas o resultado final vai depender do saldo final dessas vias de sinalizao que ocorrerem. Embora
sempre haja uma inflamao, vai haver pequenas diferenas, devido aos PAMPS que forem mostrados
clula. Se o patgeno cobrir alguns PAMPs, por exemplo.

Uma das famlias mais importantes a do tipo TOLL. O tipo 4 foi o primeiro a ser descrito e esta
associado a resposta inflamatria s bactrias Gram -, reconhece LPS. importante por reconhecer
diversos DAMPS. Esto presentes na membrana celular. Alguns membros (3,7,8,9) esto em membranas
endossmicas, membranas de vesculas dentro da clula. Quando esses receptores reagem com seus
ligantes (precisa mobilizar mais de um toll prximos, para desencadear todo o processo de reao celular),
invariavelmente, vai ocorrer o seguinte: h recrutamento de protenas adaptadoras, e uma sequncia de
reaes com protenas citoplasmticas, recrutando e ativando enzimas quinases, com o grupamento
fosfato as protenas adquirem uma conformao ativada. Ativando uma determinada protena, que
atravessa a membrana, se associa ao DNA, abrindo a dupla fita e comeando a transcrio gnica.
O evento que ocorre no citoplasma altera a expresso gnica da clula. Ex: genes que codificam
citocinas. Passa a produzir e expressar determinadas molculas na membrana em maior quantidade e
ento essa clula modificada sofre um processo de ativao.

Outras famlias: RLR (citoplasmticos) reconhecem RNA viral; lectinas do tipo C (depende de clcio)
de membrana (lectina qualquer protena capaz de interagir com carboidrato), exemplos receptor de
manose, DC-sign, Dectina 2 (todos reconhecem estruturas glicosiladas) e Dectina 1 (glucanas presentes em
fungos) expressos principalmente em clulas de linhagem monoctica; receptores NOD, expressos em
clulas monocticas, nas clulas de Panet (NOD 2), reconhecem segmentos de peptideoglicanas e so
citoplasmticos, h alguns componentes nessa famlia j foram identificados como capazes de fazer a
estrutura INFLAMOSSOMA.
A IL-1 a nica citocina que, quando a clula ativada por Toll, j no vem na sua conformao
pronta. sintetizada a partir da sinalizao do Toll, mas precisa ser ativada, quem faz isso o
inflamassoma. O inflamassoma uma plataforma molecular, composta por receptores da famlia NOD
sempre que forem ativados, que reconhecerem um PAMP ou DAMP. Quando esse receptor ativado, se
oligomeriza num arranjo molecular, se juntam a esse arranjo protenas adaptadoras e a elas enzimas
CASPASES, no caso especifico a caspase 1. Essa enzima capaz de converter a pr-IL-1 em IL-1
(biologicamente ativa e ento secretada).

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De novo: NODp3 interagiu, foi ativado, por um PAMP ou DAMP. Vai formar arranjo com vrios NOD
idnticos, oligomerizando-se. Protenas adaptadoras se associam a uma determinada regio. As protenas
CARD se associam a enzimas caspases. As caspases ficam ativas e degradam a pr-IL-1 em IL-1.
Ou seja, alguns receptores de NOD so essenciais para produzir a forma ativa da interleucina 1.

Quando a clula ativada, muda de comportamento, produzindo citocinas, e tambm lipdeos


(prostaglandinas e leucotrienos) e PAF. Mas tambm secreta componentes que j estavam prontos:
histamina, serotonina e proteases. Essas substncias so prontamente liberadas, causando os efeitos
iniciais.

Citocinas e Quimiocinas produzidas: TNF-, IL-1, IL-6, IL-12 (citocinas) e IL8 (quimiocina)
Mediadores lipdicos: leucotrienos e prostaglandinas
Produo de NO, PAF e histamina.

Todo produto que leva a inflamao chamado de MEDIADOR CELULAR DE INFLAMAO, que por
sua vez, capaz de promover ativao de clulas. No existem apenas os mediadores celulares. H
protenas circulantes no plasma que tambm participam no processo inflamatrio: molculas do sistema
fibrinoltico, sistema de coagulao, das cininas e sistema complemento. Este ltimo possui papel exclusivo
no SI. PAMPS e DAMPS podem desencadear a cascata de ativao desses sistemas. Isso gera produtos
biolgicos, peptdeos, tambm podem promover ativao celular.

Situao hipottica: penetrao de agente estranho no tecido. dedo no prego -> a barreira
mecnica foi rompida, gerando inoculao traumtica de um microorganismo.
Microorganismos tambm podem ser capazes de atravessar a barreira mecnica ativamente. Alm
disso, podem evitar os mecanismos de defesa do organismo. Essas caractersticas so fatores de virulncia.
No parnquima, o patgeno vai encontrar o macrfago ou DC ou mastcito (clulas do SI inato
residentes). Na interao com o patgeno, h produo de mediadores celulares da inflamao.
Reconheceram os PAMPS atravs de seus PRRs (certamente h TOLL envolvido, geralmente h mais de
uma famlia envolvida) e iniciaram a produo de mediadores, entre eles as citocinas. Citocinas tem aes
semelhantes a hormnios, tem efeitos nas clulas vizinhas, na prpria clula ou em uma clula de tecido
distante (efeitos autcrinos, parcrinos e endcrinos).
As citocinas encontram receptores na membrana de N outras clulas, promovendo sua ativao,
gerando cascata de eventos. Paralelamente produo de citocinas, produo de mediadores, quando o
microorganismo invade o tecido, prontamente eliminado por fagocitose (tende a ser eliminado...).
Macrfagos e DC podem realizar fagocitose, mastcito no.

A fagocitose :
Muitos PRRs, mais precisamente da famlia de lectinas e scavenger, quando reconhecem antgeno,
uma das modificaes que causam o rearranjo de citoesqueleto. A clula sofre a induo de invaginao
de membrana, projetando extremidades. Essas extremidades tendem a se fundir. O resultado a
internalizao do patgeno em uma vescula interna, o fagossoma. Na clula ativada, existem na
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membrana (inclusive nas internas) vrias subunidades que formam a enzima NADPH-oxidase (ou fagcitooxidase), que converte o oxignio em ons superxido, que so ROI instveis com alto poder oxidante. Isso
causa danos e destri a membrana da bactria.
Repetindo: interao de PAMPS e PRRs induz ativao de macrfago e DC (fagcitos). A clula sofre
alterao de citoesqueleto, invaginao de membrana, se fundindo nas extremidades e o microorganismo
vai passar para o citoplasma numa vescula, o fagossoma. Alm disso, o fagcito ativado ativa enzima de
membrana do fagossoma, o fagcito-oxidase, que converte O molecular em ROI que instvel e para
adquirir estabilidade ele rouba eltron e oxida lipdio, protena, cido nucleico, atacando a clula
microbiana presente no fagossoma. Esse on superxido pode ser convertido por outras enzimas, em
outros componentes igualmente txicos, superxido desmutase (peroxido de hidrognio), por exemplo.
A enzima xido ntrico sintase no induzida constitutiva das clulas, quando ocorre agresso
celular, ativa-se a xido ntrico sintase induzida que aumenta no mnimo em 2x a produo celular de NO.
Ele citotxico e tambm pode se combinar com os diferentes ROI para produzir outros radicais livres
tambm txicos. Mas no s isso, a NADPH oxidase funciona como bomba de prton, jogando H+ para
dentro do fagossoma, que acidificado. Esse fagossoma se funde com lisossomo. O lisossomo tem enzimas
digestivas normalmente inativas e ao se fundir a esse fagossoma com pH cido, as enzimas so ativadas.
Essa vescula passa a se chamar fagolisossoma, e as enzimas agem degradando protenas da clula do
patgeno.
Toda resposta inflamatria esta associada a um dano tecidual.
Defensinas + lisozima + enzimas hidrolticas = componentes microbicidas presentes especialmente
nos neutrfilos (grnulos com essas substncias). O neutrfilo tambm um fagcito, presente no sangue.

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O neutrfilo, alm de fagocitar, quando sofre ativao capaz de formar NET, uma estrutura de
Armadilha extracelular de neutrfilo (Neutrophils extracellular traps). O neutrfilo ativado comea a abrir a
membrana do ncleo, que perde a definio do contorno dos lobos, e o material gentico se descondensa
e dispersa. A cromatina se descondensa e forma fibras compostas de DNA e histonas, a que se associam s
protenas que esto nos grnulos (tambm rompidos). Formam estruturas fibrilares, como se fossem
cordas. O neutrfilo expele esse contedo, a membrana celular tambm se rompe, formando uma grande
rede que aprisiona os microorganismo ao redor daquela clula. Pode ser ativado por uma nica bactria ou
uma nica citocina e comea a matar as bactrias na proximidade, sem necessidade de contato direto com
cada uma delas. Chamava-se esse processo, com morte celular, de netose.

TRIADE INFLAMATRIA: sempre produzidas na resposta inflamatria. TNF-, IL-1 e IL-6


Efeitos: podem ativar outras clulas o macrfago prximo, o mastcito prximo, as clulas
endoteliais. As clulas endoteliais, quando ativadas, sofrem alteraes no citoesqueleto. Ela se contrai e a
clula, que era achatada e intimamente ligada clula vizinha, sofre uma retrao criando-se pequenos
espaos entre uma clula e outra. Alm disso, elas passam a expressar molculas em sua membrana e
aumentam a expresso de outras molculas, as molculas de adeso. O aumento da permeabilidade
vascular tambm ocorre, j que se criam pequenos espaos entre as clulas endoteliais, assim, o que esta
dentro pode facilmente sair do vaso.
A histamina est presente nos grnulos dos mastcitos, pr-formada. Ele ativado pelo TNF- e
prontamente libera a histamina, que tem efeito em receptores H1, H2 e H3. Na musculatura lisa
periarteriolar, tem H1, a histamina provoca relaxamento dessas fibras em volta das arterolas, dilatando o
vaso, causando, tambm, um aumento de permeabilidade nos capilares venosos. Os tecidos
gastrointestinal e respiratrio (brnquico) sofrem contrao.
A histamina causa os primeiros efeitos de dilatao arteriolar e de permeabilidade venosa
aumentada junto com as citocinas. O mastcito estimulado pela trade, neuropeptdeos e protenas
(derivadas da ativao do sistema complemento). Tudo isso capaz de induzir o mastcito a liberar
histamina, que tambm causa prurido (irrita a terminao nervosa).

A ida dos leuccitos do sangue para o tecido (transmigrao/diapedese): O endotlio com maior
espaamento e o calibre aumentado, o fluxo de sangue tem sua velocidade diminuda. Quando se aumenta
o calibre do vaso, retarda-se o fluxo e as clulas que passavam em fluxo turbilhonar comeam a encostarse parede do vaso sanguneo, o qual expressa muitas molculas de adeso naquele momento, por
estimulo da trade inflamatria. Assim, os leuccitos (neutrfilo e moncito) combinam suas integrinas de
membrana com as molculas de adeso da parede do endotlio. Comea, ento, o rolamento do leuccito
na parede do vaso. O macrfago no tecido est produzindo quimiocina (citocina que atrai leuccitos na sua
direo) que atrai os leuccitos circulantes para o local da inflamao. As quimiocinas se combinam com as
molculas de adeso na superfcie do endotlio. Quando a integrina do leuccito interage com a
quimiocina, muda sua conformao, ficando ativa. Na conformao ativa, liga-se a uma molcula de
adeso com maior avidez, afinidade. Sem a quimiocina, o leuccito rola, pois no h uma ligao forte;
com a quimiocina, ocorre uma ligao muito forte da integrina com a molcula de adeso, que no mais
desfeita. Ou seja, a quimiocina capaz de ativar o neutrfilo. O neutrfilo ativado rearranja o
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citoesqueleto e consegue, ento, passar entre uma clula endotelial e outra. Ele, no tecido, vai rolando,
sendo orientado pelas quimiocinas, que esto ligadas s protenas da MEC, chegando at o foco de
inflamao.
Os neutrfilos esto presentes em maior quantidade e so os primeiros a serem atrados, chegando
ao foco de inflamao primeiro tambm. A IL-8 uma importante quimiocina que atrai o neutrfilo.

MEDIADORES LIPDICOS: PROSTAGLANDINAS E LEUCOTRIENOS


A prostaglandina causa vasodilatao e, tambm, diminui o limiar da dor, sensibilizando os
receptores de dor. Leucotrienos so quimiotticos; aumentam permeabilidade vascular em outros tecidos,
como a rvore brnquica (contrao muscular dos brnquios tambm).
Fosfolipase A uma enzima ativada quando a clula reconhece PAMPs e DAMPs. Ela degrada os
fosfolipdeos de membrana celular (que so provenientes dos cidos graxos e megas ingeridos na dieta),
formando o intermedirio chamado cido araquidnico, que substrato comum para duas enzimas
diferentes: cicloxigenase (que produz prostaglandinas e tromboxanas) e lipoxigenase (que produz
leucotrienos).

NO potente vasodilatador e citotxico


PAF aumento de vasodilatao e permeabilidade vascular; ativao do burst oxidativo de
macrfago; quimiotaxia de leuccitos; ativao de neutrfilos; estimulo da fosfolipase A2; estimulo a
agregao plaquetria (evita que a infeco se dissemine para outros tecidos, o que poderia acontecer
devido permeabilidade aumentada); estimula a degranulao dos neutrfilos.
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Para conter o foco de inflamao, aumentam-se as propriedades trombognicas do vaso, para


dificultar a disseminao de patgeno na corrente sangunea, j que o vaso esta permevel tanto para a
sada de leuccitos, como para possvel escape de patgenos do tecido para o vaso.

Neuropeptdeos: estresse uma perturbao da homeostase. O equilbrio dinmico entre SI,


Nervoso e Endcrino muito regulado e a mudana de qualquer um, influi nos demais. Ento, o estresse
causado pela inflamao vai levar ao desequilbrio e o SN a produzir mediadores, neurotransmissores,
neuropeptdeos, que vo influenciar o SI. o caso dos neuropeptdeos que esto associados dor, a
regulao do calibre dos vasos, permeabilidade vascular. Entre os neuropeptdeos um est especialmente
ligado ao SI, que a substncia P, um potente vasodilatador agindo no msculo liso arteriolar; no Sistema
endcrino, secreo nas glndulas salivares, diurese. Causa, tambm, a degranulao de histamina dos
mastcitos (a pessoa fica com placas vermelhas, coceira em ocasies de estresse).

SISTEMA COMPLEMENTO
um grupo de protenas que formam um sistema bioqumico enzimtico, j que conforme se
combinam, as protenas adquirem propriedades enzimticas, que agem sobre outras protenas, gerando
produtos peptdicos, com atividade biolgica importante para a defesa do organismo.
Essas protenas esto na forma inativa circulando. As reaes em cascata so disparadas atravs de
3 formas distintas:
- Via Clssica, primeira descoberta. Depende de anticorpo para ser ativada. Comea com a protena
C1.
- Via Alternativa, comea com uma protena C3. Essa protena sofre uma hidrlise espontnea em
nveis baixssimos. Geram-se dois fragmentos, o peptdeo maior o b (que sempre ficam presos no
microorganismo) e o menor o a (que sempre so liberados). C3 quebrado em C3b e C3a. O C3a
liberado. O C3b se associa a hidroxilas de aminocidos e carboidratos, tendo propenso a ficar preso em
superfcies celulares. Se houver uma bactria ou um fungo, sua superfcie vai receber ligaes de C3b.
Se, por acaso, penetra uma bactria no tecido, comea a resposta inflamatria e alteraes
vasculares, aumenta a permeabilidade e permite extravasamento do que h no vaso para o tecido. Passa
neutrfilo e tardiamente moncito, mas tambm as protenas do sistema complemento dispersas no
sangue.
Ao C3b aderido a membrana do patgeno se liga o fator B. O fator D quebra o fator B, em
fragmento Bb, que fica, e fragmento Ba, que sai. Ento, o C3b ligado ao Bb fica preso membrana,
formando a enzima C3 convertase, que age quebrando a protena C3. Antes, havia uma gerao basal de
C3b e C3a, mas agora, com essa enzima, a formao aumenta em quantidade. A protena C3 sofre ao da
C3 convertase, formando os fragmentos C3a e C3b. C3b fica ligado ao complexo que j se encontra na
membrana.
Obs: As membranas das nossas clulas possuem mecanismos para evitar que esse arranjo
enzimtico se forme nelas, impedindo a ao sobre nossas prprias clulas.

Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

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Ao final desse processo se tem C3b+Bb+C3b ligado membrana do microorganismo formando um


complexo, o qual tem ao enzimtica: a enzima C5 convertase. Nesse ponto, comea a etapa comum a
todas as vias, com a quebra C5 em C5b, que permanece ligado, e C5a, que liberado.
- Via das Lectinas: lectina uma protena que se liga a carboidratos (como a protena ligadora
manose), ento, ela vai se ligar superfcie do patgeno. Essa lectina j est associada protease, que
quebra C4, gerando C4b, que fica, e C4a, que sai. Esta mesma protease que quebra C4, quebra C2 em C2b,
que fica, e C2a, que sai. Agora, na superfcie fica C4b e C2b, que uma C3 convertase, quebrando C3 em
C3b, que fica, e C3a, que sai. A partir da C3b, desenvolve-se a mesma sequncia anterior. C4b+C2b+C3b
uma C5 convertase, quebrando C5 em C5b, que fica, e C5a, que sai.

- Etapa Comum: quando C5b entra no complexo, a via torna-se igual tanto para a via alternativa,
quanto para a via das lectinas.
C5b preso sitio de adeso para C6, que sitio para C7, que tem cauda hidrofbica e,
naturalmente, se insere na membrana. Ao C7 se liga o C8, e em seguida vem C9 polimerizando-se. Ou seja,
vrias unidades de C9 se agrupam, formando um poro, um canal, que atravessa a membrana. Isso
acontece simultaneamente em vrios pontos da membrana do patgeno, levando ao extravasamento de
lquido e lise osmtica. O complexo de C5 a C9 chama do complexo de ataque da membrana (MAC).
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A maioria dos patgenos resiste a isso, s bactrias do gnero Neisseria so realmente suscetveis
ao MAC.

ATIVIDADE DE ELEMENTOS DO SISTEMA COMPLEMENTO


Anafilatoxinas: C3a, C4a e C5a. Fragmentos de peptdeos que ativam o endotlio e os mastcitos
(liberao de histamina, mediadores lipdicos e citocinas pr-inflamatrias - TNF-); so quimiotticos de
neutrfilos e induzem o burst oxidativo. OBS: C5a tem maior ao do que as demais.
Opsoninas: C3b, C4b e C3bi. Os fagcitos (macrfagos e neutrfilos) tm receptores de membrana,
que so capazes de interagir com estes peptdeos, podendo interagir via reconhecimento desses
componentes, sinalizando a fagocitose da clula recoberta por opsoninas.
Quando a fagocitose ocorre dessa forma, com intermdio de molcula (no caso do sistema
complemento), sempre vai ser chamado de opsonizao. Por conseguinte, esses fragmentos que medeiam
o processo so chamados de opsoninas.

Logo, a ativao de sistema complemento gera opsoninas que potencializam a fagocitose; e


anafilotoxinas, que potencializam o processo inflamatrio (atravs da ativao de mastcitos, endotlio e
neutrfilo), gerando o MAC.

INFLAMAO: RUBOR, DOR, TUMOR, CALOR, PERDA DE FUNO.


- Prostaglandinas, leucotrienos, PAF, histamina e NO: relaxamento da musculatura perivascular
vasodilatao e retardamento do fluxo sanguneo => hiperemia.
- Aumento do metabolismo das clulas no local da inflamao => calor.
- TNF- / prostaglandina, leucotrienos, PAF, histamina: recrutamento celular / aumento da
permeabilidade vascular, vasodilatao => extravasamento de clulas, protenas e lquidos, causando
edema.
- Nociceptor sensibilizado pelo PGE2 + ao de bradicinina ou de histamina, alterao trmica ou
mecnica (devido ao aumento de presso causado pelo edema) =>DOR

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Durante a inflamao, h: morte de clulas do parnquima; degradao de protenas da matriz


celular; muita morte por apoptose dos neutrfilos; debris celulares e restos do patgeno; coleo de
liquido que extravasou. Sendo o macrfago importante para a resoluo da inflamao: fagocita os restos
celulares e clulas apoptticas, internaliza o lquido presente no tecido.
Na inflamao aguda, h maior presena de neutrfilos. J o moncito caracterstico de processos
inflamatrios crnicos: quando ele chega ao tecido, diferencia-se em macrfago; quando ele sofre
ativao, produz, tambm, TGF- que ativa os fibroblastos, induz o fibroblasto a proliferar e a produzir
colgeno para a MEC ser restaurada. O macrfago estimula a limpeza e a restaurao do tecido.

INFLAMAO: alteraes vasculares que permitem a sada de leuccitos e protenas do sangue para
tecidos extravasculares lesionados ou infectados, a fim de promover a eliminao de microorganismos e
reparo tecidual.

O PROCESSO INFLAMATRIO pode ser AGUDO ou CRNICO


Agudo: quando o estimulo removido rapidamente, tudo que foi falado na aula.
Crnico: continuando o estimulo, ocorre destruio tecidual por clulas inflamatrias, reparao
com fibrose e angiognese. Muda caractersticas da aguda por liberao constante de substncias txicas e
leso tecidual, alm de muita ativao de fibroblastos, que produzem muita protena de matriz. H
alterao das caractersticas do tecido, com a substituio gradual do parnquima original por tecido
fibroso, perdendo a funo do tecido.
Exemplos: leses persistentes (lceras ou escaras); infeces (TB ou outras micobactrias);
exposio prolongada a agentes txicos (slica, amianto); doenas autoimunes (AR, LES).

O PROCESSO INFLAMATRIO pode ser LOCAL ou SISTMICO


Eventos Sistmicos: ocorrem quando a quantidade de mediadores for grande o suficiente para
extravasar daquele foco, cair no sangue e causar efeitos em outros tecidos. Quando essas citocinas
chegam ao crebro (IL-1, TNF- que so pirognicos), alteram o comportamento da pessoa, tpico
sickness behaviour (prostrao, moleza, anorexia). O isolamento social um comportamento desejado
evolutivamente, evitando o contgio da doena. Essas citocinas chegam ao endotlio do hipotlamo e
estimulam as clulas a produzirem prostaglandinas, que provocam essas alteraes no humor (tipo libido,
fome, prazer) e na temperatura corporal, gerando febre.
As citocinas chegam ao fgado. A IL-6 a principal indutora da produo da protena ligadora de
manose, e as citocinas agem sobre as outras protenas de fase aguda: protenas ligadora de manose,
amilide srica, protena C reativa, fibrinognio.
Chegam medula ssea e, junto com fatores de crescimento, incentivam a maior produo de
clulas, especialmente neutrfilos, j que esto sendo muito utilizados e tendo grande taxa de morte na
inflamao.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

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A protena C aumenta muito sua concentrao durante a inflamao. Exames laboratoriais de nveis
de Protena C-reativa servem para acompanhar, por exemplo, casos de aterosclerose e prognstico de
doena coronariana. Encontrar inflamaes de forma geral.
A protena amilide do soro e protena C reativa se combinam protena C1 da via clssica. So
opsoninas, facilitando e amplificando o processo de fagocitose. A amilide srica liga-se s clulas
apoptticas, expressando, nesse caso, fosfolipdeos na membrana, realizando o papel de opsoninas
tambm.
TRATAMENTO
- Anti-inflamatrios no Esteroidais (AINES)
Quando se toma anti-inflamatrio, busca-se o alvio da dor, ou seja, o frmaco age na cicloxigenase,
que forma as prostaglandinas a partir do cido araquidnico. A COX1 sempre expressa no endotlio, nos
rins, macrfagos e moncitos; as prostaglandinas que essa enzima gera, regulam a homeostase. A COX2
induzida pelo estimulo inflamatrio, produzindo PGE2 que altamente inflamatria.
A Aspirina inibe as duas enzimas. A COX1 induz o epitlio gstrico a produzir substncias protetoras
da mucosa gstrica, e essa ao inibida por essa droga, causando desconfortos gstricos. Os demais antiinflamatrios tm ao mais seletiva para inibir s COX2, evitando efeitos gstricos. Certos antiinflamatrios seletivos de COX2 esto sendo associados a eventos cardiovasculares e cerebrovasculares,
porque o uso contnuo aumenta a disponibilidade de cido araquidnico, que metabolizado pela COX1,
produzindo prostaglandina e, tambm, tromboxano, que um agregador plaquetrio. Assim, propiciam-se
eventos trombticos.
- Anti-inflamatrios Esteroidais: Corticides
Tem ampla ao anti-inflamatria e imunossupressora. So capazes de entrar na clula e se
combinar a receptores citoplasmticos, que adentram o ncleo e modulam negativamente a expresso de
genes, que produzem citocinas pr-inflamatrias. Inibe a ao da fosfolipase A2, no chegando a gerar
cido araquidnico. Inibe a produo das enzimas oxido ntrico sintase, elastase, colagenase, etc.

EFEITOS SISTMICOS
Se a quantidade de citocinas pr-inflamatrias for muito grande, o que acontece quando h muitas
clulas reconhecendo PAMPs e DAMPs, quanto mais clulas estiverem sendo estimuladas, mais
mediadores inflamatrios elas vo produzir. Isso ocorre, por exemplo, na infeco sistmica. Os PRRs esto
presentes em clulas endoteliais, epiteliais, e so essas clulas que comeam a produzir citocinas e iniciam
o processo inflamatrio.
As citocinas produzidas em grande quantidade numa bacteremia vo: diminuir o dbito cardaco;
aumentar a coagulao intravascular (causando CID - coagulao intravascular disseminada); aumentar a
resistncia insulina e o catabolismo de protenas na musculatura esqueltica; gerar caquexia e
desnutrio; aumentar a produo de NO e mediadores lipdicos; gerar vasodilatao disseminada e
aumento de permeabilidade vascular; em ltima estncia, ocorre o CHOQUE.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

SEPSE: grandes queimaduras (eliminao grande de barreiras fsicas), politraumatismos,


pancreatite, infeco generalizada.

IL-12 uma citocina pr-inflamatria importante que age em clulas NK, estimulando a produo
de IFN-. O INF- ativa macrfago, que passa a ter muito mais poder microbicida. IL-12 estimula, tambm,
a diferenciao de linfcito T e ativao de TCD8+ em CTL.

DCs faz o link da Imunidade Inata com a Imunidade Adaptativa


Maturao das DCs teciduais via ativao dos receptores do tipo TOLL leva a sua ativao, que gera:
prolongamento de membranas, entrada no vaso linftico mais prximo. Essa DC chega at o linfonodo
mais prximo e encontra linfcito T, apresentando o antgeno para ativ-lo.

A inflamao gera o aumento da drenagem de fluido intersticial para linfa, fazendo com que o
antgeno chegue ao linfonodo, onde ativa Linfcito B.

Aula 3 Professora Clo ONTOGENIA DE LINFCITO B 03/12/2012

Quando o patgeno entra no organismo de forma passiva (expondo a contiguidade da derme) ou


ativa (os microorganismos aderem e entram no corpo atravs da mucosa), o SI, abaixo da mucosa, deve
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

estar muito bem preparado, j que a chance de haver entrada de microorganismos, atravs dele, muito
maior do que pela pele.
Algumas clulas da imunidade humoral (residentes, como o macrfago, ou no, como moncitos e
NK) vo iniciar a primeira frente de combate ao patgeno. Vo tentar destruir, aniquilar o invasor e, caso
no conseguirem, vo tentar conter o patgeno at que as clulas da imunidade especfica cheguem, o
que leva de 10 a 15 dias. Normalmente, a primeira clula a ser atrada para o local um leuccito, o
neutrfilo. Podendo haver, tambm, a chegada de clula NK.
Uma clula dendrtica captura o patgeno ou seus produtos (antgenos), sai do local de invaso e
vai se encontrar com clulas T (presentes no sangue, na linfa e em rgos linfides secundrios), para
iniciar a RI especfica. A sinapse imunolgica acontece nos rgos linfides secundrios e sinusides
hepticos (onde tem as clulas de Kupffer, que vo aderir aos antgenos). Se o microorganismo estiver no
sangue, a resposta se inicia no bao (rgo linfoide secundrio que recebe todo o sangue e seus
antgenos). Se ele estiver no tecido ou na linfa, a resposta se inicia nos gnglios (rgos linfides
secundrios presentes no trajeto dos vasos linfticos).
O linfcito T depende da DC diretamente, j que precisa dela para ser ativada. O linfcito B
depende da DC indiretamente, pois depende de T para uma melhor ativao, e T depende de DC.
Os gnglios linfticos so um conjunto de clulas do SI bem organizadas. Eles tm trs reas, da
parte interna para a mais externa: medular (cordes medulares por onde as clulas saem ou entram e por
onde chegam todos os vasos linfticos), paracortical (concentra linfcito T) e folicular (concentra linfcito
B). A clula dendrtica chega, vinda da rea de inflamao e junto com o patgeno, alm de debris
celulares e at patgenos inteiros.
Os rgos linfides primrios so a medula ssea e o timo; durante a vida fetal, o fgado tambm
considerado rgo linfide primrio. So nesses locais que so formadas as clulas do sistema imune.
Quando se tem uma resposta imune contra patgeno todas as clulas do SI tem que j estar formadas. Ao
nascer, o indivduo j tem todas as clulas esto formadas e nos locais que deveriam. A maior cadeia
ganglionar est na rea do trato gastrointestinal, genito-urinrio.
DCs precisam de receptores que reconheam PAMPS, h maior importncia na famlia TLR (Toll Like
Receptor). So 5 famlias, quando os TLR reconhecem PAMPs, a DC desadere, sai, ganha os vasos linfticos,
chega aos gnglios linfticos e ativa T.
O que a DC apresenta? Antgenos. Para quem? T.
Antgeno toda e qualquer molcula reconhecida por receptores de clulas do SI especfico, ou
seja, por linfcitos T e B. Isto , antgeno qualquer molcula reconhecida atravs de TCR ou BCR.
Antgeno no somente uma molcula que no pertence ao nosso corpo, o que seria o ideal, mas h,
tambm, molculas prprias que so reconhecidas, gerando auto-imunidade.
Quando o receptor de T, o antgeno derivado de protenas processadas. Quando a clula B, o
antgeno pode ser protena ou qualquer molcula formada por diversas unidades de acares, lipdeos,
cidos nuclicos, ou molculas complexadas, como o LPS.
A resposta imune contra antgenos no proticos no depende da ativao de T, eles so chamados
de antgenos timo-independentes. A resposta imunolgica contra antgenos proticos depende da ativao
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

de T, so chamados timo-dependentes. A dendrtica apresenta peptdeos. O que uma T precisa apresentar


para ser apta a reconhecer esse peptdeo? O receptor chamado TCR.
Subtipos de T: TCD4+ e TCD8+. O TCR sempre vai reconhecer peptdeo, mas as molculas que
carregam o peptdeo na APC, os MHCs (complexo de histocompatibilidade maior ou principal, que
chamado, tambm, de HLA nos humanos), que diferem em MHCII (se liga a molcula CD4 presente no
linfcito TCD4+) e MHCI (se liga a molcula CD8 do linfcito TCD8+).
OBS: Numericamente, uma APC no ativada, tem em mdia 300 mil ilhas, cada uma com 200
molculas, 100 de MHCI e 100 de MHCII. Quando ativada, a quantidade de molcula por ilha sobre para
1000. APCs podem ter 38 tipos de MHCII e 6 tipos de MHCI, que diferem entre os indivduos.
OBS2: Na resposta imune primria, a nica APC capaz de ativar T virgem a DC.
Apresentao de peptdeos para o TCD8+ clssico feito pelo MHCI, que expresso em todas as
clulas do corpo humano. Plaquetas e hemcias no tm nenhum tipo de MHC (no so clulas),
neurnios expressam pouco. Qualquer APC pode ativar TCD8+, mas a ativao primria s tem estimulo
suficiente para acontecer com a DC.
O MHCII uma molcula de APC que se expressa constitutivamente em macrfagos, DCs, linfcitos
B e clulas epiteliais tmicas e apresentam antgenos para TCD4+. Em inflamao e leso tecidual, na
presena de citocinas, h a expresso induzida: clulas endoteliais vasculares e outras clulas, inclusive
neurnios. Ex: em inflamaes como neurite e mielite transversa, os neurnios, que no apresentam
MHCII, passam a expressar os MHCII (os MHCs esto presentes no corpo celular).

ATIVAO PRIMRIA DE LINFOCITOS T


A DC APC para T. Depois que T ativada outras clulas podem ser APC, por exemplo, linfcito B.
A clula B (subdividida em B1 e B2) uma clula da imunidade especfica, que reconhece antgenos
atravs de receptores (cada um identifica um antgeno especfico). O seu receptor de antgeno se chama
BCR, reconhecendo antgenos, fagocitando-os e destruindo-os por proteases, podendo apresentar
peptdeos para clula TCD4+ ativada (no mais virgem) previamente, a qual libera diversas citocinas. Essas
citocinas estimulam B a produzir diferentes anticorpos.
H 5 classes grandes de anticorpos. IgG, IgA (sangue e mucosa), IgM, IgE, IgD. Dentro de cada classe
pode haver subclasses: IgG 1 a 4 e IgA 1e 2 (os dois esto presentes tanto no sangue quanto na mucosa).
Quando B secreta anticorpo IgG, secreta na forma de monmero. Quando secreta IgA no sangue,
na forma de monmero. Quando T estimula B para secretar IgA de mucosa, na forma de dmero ou
trmero. A IgM, secretada por B (mesmo sem auxlio de T), secretada na forma de pentmero ou
hexmero.
A IgD a nica classe de anticorpo que s funciona como BCR, no sendo secretada como anticorpo
solvel. A clula B ativada se diferencia em plasmcitos, liberando os BCRs como anticorpos, ficando com a
superfcie lisa.
Todo o BCR monmero. Quando a clula T ajuda B, induzindo a secreo de anticorpos, os BCRs
so liberados, em monmeros, dmeros, pentmeros, ligados pela Joining Chain (ligao bissulfeto).
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

A IgM a nica classe, das que so secretadas, que, para ser produzido, no precisa do auxilio de T,
sendo mais rapidamente liberada e, assim, sendo Ig de fase aguda, com a nica funo de ativar Sistema
Complemento. Ou seja, a IgM denota que a resposta primria, pois produzida nos primeiros 7 dias de
infeco. A IgM produzida pela simples identificao do antgeno pelo BCR. Toda B virgem expressa IgM e
IgD, aps isso, B se divide e passa a expressar outras Igs, dependendo do estmulo de T.

ONTOGENIA DOS LINFCITOS B (aula de hoje!)


A funo de B, de forma geral, produzir anticorpos. originada de steam cells, de progenitores
linfides, que formam, tambm, T e NK. Objetivo: formar uma clula competente que expresse BCR na
superfcie de sua membrana. O BCR tem estrutura de Y. Os anticorpos so proticos, algumas partes so
glicosiladas, mas , essencialmente, formado por aminocidos. formado por 4 cadeias polipeptdicas,
duas cadeias pesadas e duas leves (cadeia H -heavy- e cadeia L -light-). De forma geral, o BCR formado
por 2 cadeias peptdicas diferentes unidas, duplicadas. As cadeias pesadas fazem ligaes covalentes
atravs da sntese em reas especficas de aminocidos que fazem pontes de sulfeto (aminocido cistena),
interaes intracadeias, e cada brao interage com uma cadeia leve, atravs de uma ponte de sulfeto. A
regio carboxi-terminal est na base do Y. A regio N-terminal (o Fab) interage com os antgenos, so
variveis. Cada ponte de sulfeto forma domnios. Em uma cadeia pesada o primeiro domnio varivel, os
domnios abaixo no participam de reconhecimento, so constantes. Na cadeia leve, sempre com 2
domnios, o de cima varivel e o de baixo constante.

Onde h cistena, formam-se loopings e cada looping um domnio. E a base do Y serve para qu?
Quando o BCR secretado, cabe a essa poro Fc.
O BCR possui trs partes: o Fab (liga a antgeno e tem domnio varivel), a regio de dobradia
(permite que o Fab abram at 180, dando mobilidade regio Fab) e a poro Fc (uma vez o antgeno
tenha se ligado ao Fab, a poro Fc o encaminha morte, pois ativa o sistema Complemento, fagocitose).
O domnio varivel da cadeia pesada codificado por trs genes: V, D e J. O BCR, na membrana,
carrega consigo 2 cadeias que flanqueiam a regio carboxi-terminal da cadeia pesada: {Ig- e Ig-/ Fc/ Ig-
e Ig-}, no participando no reconhecimento do antgeno e sim na sinalizao da clula B (Fc se liga ao
antgeno e ativa as cadeias, que ativam a clula B). Ou seja, Ig- e Ig- so heterodmeros que no
participam do reconhecimento do antgeno, mas, uma vez que o antgeno seja reconhecido por Fab,
permite que o BCR ative B. BCR ativa o heterodmero, que inicia uma cascata de sinalizao. O BCR sempre
expresso junto com as cadeias Ig- e Ig-.
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Tipos de clulas B:
1) clulas B1 formada no fgado fetal e reside no peritnio dos adultos. S expressa IgM como BCR e
reconhecem somente PAMPs.
2) B2 formada majoritariamente na medula ssea e possui dois tipos: o folicular (IgM e IgD
reconhecem antgenos proticos) e o da Zona Marginal (IgM que reconhece antgenos polissacardicos e
lipdicos).
1 ETAPA DE DESENVOLVIMENTO DE LINFCITOS B2: ocorre, principalmente, na medula ssea e
termina no bao. A primeira clula, a clula tronco, se diferencia em pr-B, que recebe sinais e diferencia
em pr-B, que recebe sinais e diferencia em B imatura, a qual cai no sangue e vai para o bao, onde se
torna clula madura. O que determina cada etapa?
O primeiro evento gentico a formao do BCR, que ocupa desde o estagio pr at o estgio
imaturo. Depois que o BCR expresso, essa clula B no considerada madura, pois muitas so
autorreativas, as quais devem ser sujeitas a um processo de seleo, selecionando positivamente apenas
as que no forem autorreativas. E somente as que sobrevivem se tornam maduras.

ESTGIO PR-B: Para que uma clula pr passe a ser pr, deixe de ser pr e passe a ser imatura
precisa ter contato com clulas estromais. Fibroblastos diferenciados fornecem esses sinais para a
diferenciao. Se a clula no reagir aos sinais propulsivos, ela entra em apoptose. As interaes cognitivas
para que o progenitor linfide seja chamado de pr-B, pr-B e B imatura, mais importantes, so indicadas a
seguir. A primeira clula progenitora (early pr-B) tem os marcadores CD19 (o marcador mais importante,
indicado que uma clula B), IL7R e CD10. O CD10 indica que uma B inicial e vai ser perdida. O primeiro
fenmeno na formao de uma early pr-B para late a proliferao. A citocina candidata a induzir esse
estgio de proliferao a IL7 (produzidas por clulas estromais tipo fibroblasto). Logo em seguida, feita
a primeira cadeia, a cadeia pesada - IgM, permitindo maior variabilidade. Da se segue mais proliferao,
depois cada clula produz sua cadeia leve.
Recombinao gnica: o domnio varivel formado por trs genes de trs famlias: V, D e J. A
famlia V possui aproximadamente 100 genes. A famlia D possui 23 e J, 6. Existem enzimas que fazem
recombinaes, as recombinases: RAG1 e RAG2. Aps escolhidos, so aproximados, formando um nico
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

gene verdadeiro. escolhido, ao acaso, somente um gene de cada famlia: um gene da famlia V, um de D
e outro de J.
As RAGs precisam de sequncias consensuais, cujos nucleotdeos so preservados, para se ligarem.
So as chamadas sequncias sinais de recombinao (RSS), localizadas na poro 3 em V, nas posies 5 e
3 do D e 5 do J, de forma que eles se liguem.
Clo faz uma demonstrao pra explicar
Porm, essa variabilidade proporcionada pelas RAGs e VDJ ainda no suficiente para gerar 10 13
possibilidades caractersticas do organismo.
As RAGs escolhem um dos Vs para juntar com um dos Ds, aproximam formando um loop que
cortado. A DNApol faz a fita complementar, mas no caso corta-se as duas fitas do DNA. A extremidade
fosfato 5 muito reativa e ataca a hidroxila da extremidade 3, formando um grampo. Assim, o grampo
deve ser aberto. A enzima capaz de abrir o grampo chama-se Artemis, usando um complexo protico e
enzimtico. Quando a Artemis abre o grampo, ela no tem stio especfico. Ela abre em qualquer lugar
prximo formao do grampo. Isso pode ocorrer a 2 nucleotdeos do grampo, a 6... o ideal que seja a 3,
para que seja um cdon inteiro.
Na hora que a Artemis abre o grampo, gera o molde, usa-se nucleotdeos palndromos (P), o que
gera variabilidade. Esse molde vai sofrer ao da DNApol, complementando a fita gerada.
Existe uma enzima que adiciona nucleotdeos, TdT, que transfere at 20 nucleotdeos sem precisar
de molde. Essa TdT tem como estmulo o mesmo estimulo que induz a maquinaria para fechar, finalmente,
a fita. O molde gerado pela TdT complementado pela DNApol. O ltimo nucleotdeo ligado pela DNA
Ligase IV. Ela demora a ser sintetizada, por isso s atua no final. Evolutivamente, essa caracterstica se
provou vantajosa.
Forma grampo > Artemis abre o grampo (ela no tem stio especfico de clivagem) > DNA
polimerase que complementa > TdT adiciona mais nucleotdeos (criando um molde) > DNA polimerase
(complementa o molde da TdT) > DNA ligase IV.
*TdT estimula ligase IV
A regio varivel formada na ontogenia. J a regio constante formada sob influncia de
citocinas secretadas por T que mandam no splicing alternativo de ntrons e xons, determinando quais
regies vo ser pareadas e, desse modo, a classe da Ig a ser formada (posteriormente, pois a regio
constante default feita pela IgM). Ou seja, durante a formao da B, o domnio varivel, se une a uma
cadeia constante pesada IgM. o BCR primrio.
Chaperon (cadeia leve substituta) uma cadeia polipeptdica que tem funo de ajudar a manter a
estrutura de uma molcula, at que ela se torne estvel. O que torna a cadeia pesada estvel a sntese
das cadeias leves. Como a leve ainda no foi sintetizada, colocada um chaperon para manter a
estabilidade da cadeia pesada.
Depois disso h a proliferao e a pr-B comea a fazer cadeia leve. Ou ela vai ser (kappa) ou
(lambda). No ser humano, a mais utilizada . A cadeia leve formada por V e J, ou seja, menos
diversificada. Mecanismo gentico igual ao da cadeia pesada.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

A especificidade formada pelo conjunto de cadeias leve e pesada, pelos dois domnios conjuntos
(pois a molcula um monmero bivalente). Estando em estgio de clulas B imaturas (clula B com o BCR
completo - com cadeia pesada e leve), precisam passar por processo de seleo.
Quando o BCR vai ser formado, usado um dos alelos recebidos dos pais (usa um, se no der certo,
usa o outro). Os genes escolhidos primeiro so o D e o J, depois que escolhido o V.

Seleo de B:
Excluso allica no rearranjo - ! estudar pra prova (V, D, J)
Quando a clula B imatura atravs de IgM reconhece com grande afinidade clulas self, pode ter
seu BCR reeditado. Isso significa: reativar as RAGs, Artemis, TdT, para fazer de novo outra cadeia LEVE (a
pesada no), para evitar a apoptose. A reedio faz com que no haja a perda de tantos linfcitos B,
tornando-os teis para qualquer outra coisa. Enquanto houver V e J sobrando, ele pode tentar reeditar.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Alguns clones reativos escapam: quando o antgeno no est presente na medula (o antgeno pode
ser de outros rgos como, por exemplo, do fgado) ou B encontrou um antgeno self com baixssima
afinidade, ele acaba migrando para a periferia, tornando-se anrgica. As clulas anrgicas acabam
entrando em apoptose, no sendo passveis de autoimunidade. Resumindo: s sofre reedio o linfcito
autorreativo que reconhece self com alta afinidade. A autorreativa que reconhece com baixa afinidade no
apresenta perigo, pois estar anrgica.
Para amadurecer, ganha IgD na superfcie. Ganhando IgD, vai para o folculo. Se no expressar IgD,
vai para a ZM.

Aula 4 Professora Clo ONTOGENIA DE LINFCITO T 04/12/2012

Durante uma resposta imune, existe hierarquia entre as clulas que compem o SI. As clulas mais
importantes so os linfcitos, especialmente TCD4+.
Th (TCD4+) so clulas que coordenam e regulam outras clulas do SI. A TCD8+ geralmente, quando
ativada, citotxica. Independente de ser TCD4+ ou TCD8+, a clula precisa ser ativada por uma APC, que
apresenta antgenos, qualquer molcula que possa ser reconhecida por TCR. Bioquimicamente, o que o
TCR reconhece so os antgenos especficos (peptdeos). APCs clivam o antgeno em pequenos fragmentos,
por enzimas diversas (dependendo do material do patgeno) e apresentam PEPTDEOS. Ele encaixado
numa molcula self da APC, chamada de HLA ou MHC.
Se o peptdeo encaixa num MHCII, a clula que reconhecer ser uma TCD4+, se o peptdeo
encaixar num MHCI, a clula ser TCD8+. Existe uma rea do MHC que complementar a uma molcula
chamada CD4 ou CD8.
Ento o TCR um clice, cujo objetivo reconhecer o peptdeo. Existindo dois tipos de MHC, pois
existem dois tipos de T: o MHCI e o MHCII. Todas as clulas do corpo humano expressam MHCI, mas MHCII
s so expressas em populaes mais restritas. A partir do momento que iniciamos uma resposta imune, a
primeira APC capaz de ativar o SI especifico, usa, tambm, MHC para apresentar peptdeo, e a clula T

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

especfica tem que ter o receptor para reconhecer. A clula B tambm tem receptor, o BCR, para
reconhecer e processar e apresentar, tambm, ao T o peptdeo (isso em uma resposta secundria).
Observando o TCR: ele formado de duas cadeias, e (uma minoria pode ser gama e delta, os
pares no podem mudar entre si: alfa deve estar sempre com beta, assim como gama sempre deve estar
com delta). O TCR um heterodmero. A cadeia alfa tem dois domnios, beta tem dois domnios, tambm.
O primeiro domnio da alfa e o primeiro domnio da beta (que so os domnios variveis) so gerados pela
mesma maquinaria que gera o BCR. As cadeias laterais no participam diretamente do reconhecimento do
antgeno, mas so importantes para sinalizao, uma ativao alostrica dessas cadeias associadas,
quando o TCR se liga a um peptdeo. As cadeias associadas, ento, so o complexo CD3 (/ e /) e duas
cadeias que so, praticamente, intracitoplasmticas (integrais de membrana) que se chama cadeia (zeta homodmero). Ou seja, o grande complexo de sinalizao formado pelo complexo CD3 mais a cadeia .
Para que haja o reconhecimento do antgeno, s preciso do TCR, mas para que T seja ativada, preciso do
COMPLEXO TCR.

Ativador policlonal: ativa tudo.


Nos estgios de formao de T, esse complexo formado em totalidade, e a vai ser transportado
at a membrana.
Estgios de maturao de T: na vida fetal comea (a partir do segundo ms de gestao pode-se
observar alguns indcios da formao de T), mas a grande parte da formao se d no final da gestao,
seguindo at para a vida adulta. Somente o primeiro estgio ocorre na medula ssea, as fases
subsequentes, de formao e seleo, ocorrem no timo. As fases so, praticamente, semelhantes
ontogenia de B: early-prT, late-prT, early-prT, late-prT, T imaturo, seleo e T maduro, sempre tendo
eventos que denotam o comeo, meio e fim de cada fase; porm no se pode estabelecer onde comea
uma e termina outra (por exemplo, sabemos que no final e o comeo de cada uma h algo de diferente
acontecendo, mas no d pra falar quando cada processo terminou e o outro foi iniciado).

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Incio da ontogenia: progenitor linfide para prT, ocorrendo na medula ssea. O nico evento a
ao da IL-7, fundamental para a proliferao em todos os estgios de T.O maior objetivo da ontogenia
formar o TCR e depois selecionar essas clulas T. O TCR um heterodmero alfa e beta, e a proliferao
deve sempre anteceder a formao de cadeias. A IL7 produzida na medula. Para T, o principal marcador
o CD2. Assim que o progenitor linfide comea a expressar CD2, ele se compromete a ser T, respondendo
IL7, causando a proliferao, caracterizando o estgio early pr-T e indo para o late pr-T (late depois da
proliferao). No estgio late pr-T, deixa a medula. A clula s sai porque algum chama. Ou seja, a pr-T
precisa de um receptor CCR9+ que a direciona ao timo.
O timo possui dois lobos, cada lobo dividido em lbulos, que tem crtex (com muita quantidade
de clulas, por isso, mais corada) e medula (pouco corada, pois possui poucas clulas, entre elas, o
Corpculo de Hassal, onde as clulas destinadas a morrer, so eliminadas). A trabcula tem invaginaes
por onde passam os vasos sanguneos. O timo, sob influncia de hormnios que ele mesmo produz
(timosina, timopoetina e timolina), e quimiocina (citocina que atrai outras clulas para uma determinada
regio), atrai pr-T. Assim, a pr-T tem o CCR9+, que o receptor para CCL25, produzida no crtex tmico.
Ao chegar pelos capilares tmicos (na juno crtico medular do timo), migram para o pice do lbulo,
onde encontram as clulas nurse (ou clulas enfermeiras). A clula nurse uma clula cortical, estrelada;
quanto mais apical, mais imaturo o linfcito, quanto mais medular, mais maduro. As clulas nurses so as
que produzem CCL25 e so as mais apicais do crtex. As clulas enfermeiras so as que "abraam" os
linfcitos em formao.
REVISO: A pr-T sai da medula ssea com o receptor CCR9. Quem produz, dentro do timo, o
ligante do CCR9? Clulas enfermeiras. Qual o nome do ligante? CCL25.
Quando a clula enfermeira abraa, ela libera IL-7 e HT (hormnios tmicos). A primeira cadeia do
TCR formada a BETA (junto com uma alfa substituta, sendo uma chaperonina). A isso, se segue a
proliferao e indo para o estgio pr-T, quando se forma a cadeia alfa. Mais uma proliferao. Da j so
linfcitos T imaturos (CD4+, CD8+, CD2+, TCR+). Na seleo, caso esse linfcito imaturo se encontre com
um MHCII, perde o CD8+ e mantm o CD4+, tornando-se uma TCD4+. Se, na seleo, se ligar a um MHCI,
perde CD4+ e mantm CD8+, tornando-se uma TCD8+.
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

RECOMBINAO SOMTICA DO TCR-2:


TCR s tem dois domnios, um varivel e um constante. Para se formar o domnio varivel na cadeia
beta (que a primeira a ser montada), as RAGs escolhem, ao acaso, um dos V, um dos D e um dos J. As
sequncias 5 do D e 3 do V se chamam sequncias sinais de recombinao, assim como em B.
O terminal 5 e 3 formam um grampo aps a ao das endonucleases. A enzima artemis abre o
grampo, quando ela abre, a enzima DNA polimerase adiciona nucleotdeos, usando um molde criado pela
Artemis. A TdT no usa molde, ela cria o molde (adicionando aleatoriamente at 20 nucleotdeos, os
nucleotdeos N) e a DNApol complementa a fita. Da a DNA ligase IV finaliza com a adio de mais um par
de nucleotdeos, para fechar.
OBS de ontem: a reedio nunca ocorre na cadeia pesada, s na cadeia leve.
A cadeia formada primeiro, no pode sofrer reedio, provavelmente porque o nvel de
condensao dificulta, j que esta em cromossomo diferente. A cadeia alfa pode ser reeditada.
TRECS: material gentico que sobrou do corte da fita, depois da seleo de V e D pelas RAGs, que se
ligam pelas pontas, formando um crculo de material gentico. Em imunoterapia, se quero saber se T est
sendo produzida novamente, existe um marcador, o TREC, oriundo das RAGs. Podendo ser identificados
em laboratrio. Se h T perifrica positiva para os TRECS significa que acabaram de ser formados linfcitos
T e que a imunoterapia est sendo eficaz.
A chaperonina substituta da cadeia alfa d um formato razovel ao complexo TCR at que seja
produzida a cadeia alfa definitiva. Antes da formao de alfa, h proliferao, sob ao de IL-7 e HT.
Para fazer , precisa-se de dois segmentos, V e J. A formao pelas RAGs, DNApol... a mesma.
Terminado, chega-se ao estgio de T imaturo duplo positiva (CD4+CD8+CD2+TCR+). Em B, temos
CD19+CD20+IgM+.
Agora, para passar de duplo positiva (CD4+CD8+) para simples positiva (CD4+CD8- ou CD4-CD8+), a
T imatura passa pelo processo de seleo.
OBS: glicocorticides. Doses elevadas podem reduzir o tecido tmico. Cuidados com gestantes.
Domnio varivel contem as regies hipervariveis (pela ao da DNApol, TdT). Receptor delta
gama mais comum em clulas primitivas.

FASES DA MATURAO DE T: SELEO POSITIVA E SELEO NEGATIVA


A verificao do TCR concomitante com o reconhecimento de pores do MHC. Durante as fases
de maturao so: triplo negativo (TCR/CD3- CD8- CD4-) -> duplo negativo (TCR/CD3+ CD8- CD4-) -> duplo
positivo (TCR/CD3+ CD8+ CD4+).
Os domnios variveis do TCR no s reconhecem o peptdeo, mas, tambm, as prprias molculas
do MHC (parte apical). A molcula de MHC tem uma depresso onde o peptdeo se encaixa. Assim, a
verificao pela afinidade ao peptdeo e, tambm, ao MHC. Duas foras contribuem, ento, para o
destino desta clula T: a de interao com o MHC e a da interao com o peptdeo.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

A clula T imatura comea a interagir com as APCs do timo: o epitlio cortical, medular e APCs da
medula ssea. Todas as clulas do corpo humano expressam constitutivamente MHCI, ento, todas podem
ser APC para formar TCD8. Macrfagos, dendrticas, linfcito B e clulas epiteliais tmicas possuem MHCII
constitutivamente (assim como MHCI). No h vasos linfticos aferentes no timo. Todas as clulas tmicas
podem ser APCs. O que est ali considerado self. Por isso considerado o local privilegiado de seleo.
A fenda do MHC sempre vai ter um peptdeo ligado. A fenda nunca vai estar vazia (pois o peptdeo
d a estrutura conformacional madura), se estiver vazia, a molcula de MHC degradada. A ontogenia de
T ocorre na vida fetal. Em uma gestao saudvel, a termo, no tem infeco no organismo fetal e a
criana no exposta a patgenos. Ento, os peptdeos apresentados pelo MHC, no timo, sero self. Por
exemplo, o peptdeo pode ser um receptor de insulina. O epitlio tmico apresenta o mximo de peptdeos
self possvel.
Se o TCR reconhecer o peptdeo fortemente, a clula T reage fortemente, considerada
autorreativa, podendo morrer por apoptose ou tentar escapar dessa morte, reeditando sua cadeia alfa, se
ainda houver essa possibilidade.
Se o TCR se ligar com muita fora s laterais do MHC, tambm selecionado negativamente, sendo
encaminhado a apoptose ou reedio da cadeia alfa, caso tenha essa possibilidade.
Se a fora de interao final for muito grande, a clula T s vai sobreviver se puder reeditar.
Lembrando que essa seleo feita apenas pela interao do TCR. A reedio s pode ocorrer se sobrar
tanto opes do V quanto do J. Tudo isso vale somente para a cadeia alfa, no possvel mexer na cadeia
beta.
Se o TCR no ligar com grande fora, ou seja, tiver baixa afinidade, a vai determinar se vai ser CD4+
ou CD8+.
Como escapam clones autoreativos? Se a fora de ligao entre o MHC no for forte, mas no
houver interao ao peptdeo, a clula sobrevive. Pode ser que seja autorreativa a um peptdeo do fgado,
pncreas, pois o timo apresenta peptdeo LOCAIS.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

TOLERNCIA CENTRAL
GENE AIRE: existe o gene AIRE, que expressa por clulas medulares tmicas, que tem funo de
transativador (induzindo a transcrio de genes, se ligando a regies promotoras, abrindo a cromatina para
que a RNApol aja). A protena AIRE ativada, volta ao ncleo, liga-se genes que codificam protenas fora do
timo. Assim, o timo vai ter protenas que so extra-tmicas e que iro ser apresentadas durante a seleo
de T. O AIRE no tem como fazer com que TODAS sejam expressas, mas sim uma frao significativa.
Crianas sem AIRE sucumbem s doenas que atingem glndulas e intestino, por exemplo, no
sobrevivendo nem ao primeiro ano de vida.

A importncia do gene AIRE de aumentar a oferta de protenas selfs, que no pertencem ao timo,
para que aumente a eficcia da seleo, evitando que linfcitos perigosos no ganhem a periferia.
Protenas associadas ao estresse no so processadas no timo, da sua ligao s doenas
autoimunes.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Primeira regra: afinidade pelo complexo no pode ser grande (tanto faz se for pelo peptdeo ou
pelo MHC).
Segunda regra: se for altssima afinidade=> apoptose ou reedio bem sucedida
Terceira regra: baixa afinidade=> sobrevive
Quarta regra: nenhum reconhecimento=> apoptose. No tem sinalizao que ative reedio.
OBS: alta afinidade=> Treg.

A gestante: a criana pode receber antgenos, via cordo umbilical, de uma me HIV+. Isso significa
no produzir T especfica para HIV. O HIV tem PAMPs da famlia dos retrovirais. Assim, a criana pode se
tornar extremamente suscetvel a infeces, complicaes na administrao de vacinas, etc.
A gestante, infectada por um patgeno, produz citocinas inflamatrias. Essas citocinas podem
chegar a placenta. A placenta em resposta pode produzir citocinas inflamatrias que podem chegar ao
cordo umbilical. Consequncia: as clulas T, que poderiam sobreviver por se ligarem por baixa afinidade,
vo ser ativadas e essa ativao desencadeia a ao de caspases, e, portanto, apoptose de clulas que, a
priori, seriam viveis.
Quem faz imunoterapia com IL-7? Sndrome Di George, AIDS, radioterapia, transplantados e idosos.
Marcadores CD31+ e TRECs. Mais fcil achar CD31+ por citometria de fluxo.

Aula 5 Professora Vera RGOS LINFIDES SECUNDRIOS, RECIRCULAO E


TIPOS DE ANTGENOS 10/12/2012

RGOS LINFIDES SECUNDRIOS


O tecido linfide o local onde so gerados e se concentram as clulas do SI. Pode ser de 2 tipos:
locais de onde vem os linfcitos (primrios), ou seja, medula ssea e timo; e os linfcitos que evadem os
tecidos linfides primrios vo para os tecidos linfides secundrios.
Organizao e funo: uma vez que os linfcitos prontos se distribuem pelo organismo, no ficam
estticos, seguem um padro contnuo de recirculao. Inclui bao, linfonodos, tonsilas, fgado
(desenvolvimento fetal), SI cutneo, SI de mucosa.
Nesses locais, os linfcitos vo ter a chance de encontrar um antgeno especfico para seu receptor
e, da, acontece resposta adaptativa. Os tecidos linfides secundrios tem uma estrutura, arranjo
histolgico, caracterstico. Essa arquitetura mantida por quimiocinas.
Quando os linfcitos virgens saem dos tecidos gerativos, caem na corrente sangunea e se
distribuem de forma organizada nos tecidos linfides secundrios. Linfcito B fica em folculo, linfcito T
fica ao redor do folculo (extrafolicular). T e B no se misturam em um tecido linfide secundrio, as
populaes ficam segregadas, devido ao das quimiocinas.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

A entrada via sangue ocorre nos tecidos linfides (linfonodos) por meio de um vaso sanguneo
especializado, que drena os tecidos (HEVs). Esse endotlio especializado produz CCL19, e as prprias
clulas que compem o estroma do tecido (macrfagos, DC...), produzem CCL21. Todos os linfcitos
virgens (T e B) expressam receptores para essas quimiocinas, CCR7. Isso permite que estejam sempre
entrando nesses tecidos linfides.
Dentro da regio folicular, tenho uma populao de DC diferenciada. Existe uma DC folicular que
produz CXCL13, e o linfcito B virgem expressa o receptor para ela, que e o CXCR5. T no expressa esse
receptor, ento apenas B atrado para esta regio folicular.

Bao: suprido pela artria esplnica, e o sangue sai por uma veia esplnica. A artria penetra pelo
hilo, e medida que vai adentrando o rgo, se ramifica at chegar a sinusides. um rgo capsulado. A
polpa branca onde se concentram os linfcitos, e na polpa vermelha se concentram hemcias. Entre elas,
h uma zona marginal, intermediria. Ali h uma subpopulao especial de B, o linfcito B da ZM. Essa
populao tem propriedades de ativao ligeiramente diferentes. A quantidade de estmulo necessria
para ativao menor. O grau de variabilidade dos receptores tambm menor do que os foliculares. Essa
populao da ZM no recircula, fixa.
O linfcito T fica em uma regio periarteriolar, no bao, que ser a polpa branca. A polpa vermelha
um concentrado de sangue, que extravasa do vaso para o interior do rgo. Em volta dessas arterolas h
muitos macrfagos, prontos para remover antgenos, hemcias senescentes (hemocaterese). As hemcias
no removidas retornam circulao. Esse endotlio diferenciado ( mais permevel), no bao, pois
fenestrado, com clulas mais arredondadas, com membrana basal descontnua, facilitando a passagem de
clulas de forma passiva.
A ausncia do bao no incompatvel com a vida, mas o indivduo torna-se mais suscetvel as
infeces por um grupo de patgenos, bactrias capsuladas, pois estas possuem polissacardeos que so
opsonizados, circulam pelo sangue e precisam ser fagocitados (macrfagos no bao).

Sistema Linftico: antgeno gera inflamao, que gera edema, que aumenta o volume de lquido na
MEC, que precisa ser drenado para vasos linfticos. O sistema linftico tambm percorre todo o corpo,
mas, diferentemente da circulao sangunea, no h bomba propulsora. H ndulos, gnglios, agregados
linfides, chamados de linfonodos, que cortam toda circulao linftica. Os linfonodos tambm so
capsulados. O que chega ao linfonodo o lquido que circula neste vaso linftico, advindo do interstcio.
Diferente da circulao sangunea, os vasos linfticos tm pontos cegos. As clulas que formam
esses vasos linfticos funcionam como vlvulas. O lquido do interstcio consegue empurrar a clula do
vaso, fazendo presso nessas "vlvulas" e penetra o vaso. Assim, o edema da inflamao facilita que o
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

antgeno entre no vaso linftico. Essa propulso ocorre por presso da musculatura esqueltica e de uma
musculatura perivascular que vai bombear o lquido atravs da circulao linftica.
A linfa entra no vaso linftico e chega ao linfonodo. Num processo inflamatrio, alm do edema,
tem DCs, que, ativadas, tem a capacidade de sair desse tecido e entrar no vaso linftico, chegando a um
linfonodo.
Esse lquido dos vasos linfticos desemboca no ducto torcico, o qual desemboca na veia cava,
chegando circulao sangunea.

Linfonodos: o gnglio que entremeia a circulao linftica. Regies foliculares subcapsular, onde
h linfcitos B. Linfcitos T permanecem na regio parafolicular. Capsulado, h trabculas, e vasos
penetrando na capsula. So penetraes dos vasos linfticos, ela fura a capsula do linfonodo, em vasos
aferentes, por onde chegam a linfa. O linfonodo tambm tem um hilo e pelo hilo sai um nico vaso
linftico, alm de uma artria e de uma veia, o vaso eferente por onde sai linfa.
Um vaso que saia de um linfonodo continua e penetra o prximo linfonodo da cadeia. Um vaso que
eferente para um gnglio, ser aferente para o prximo.
No linfonodo, essa artria penetra e se ramifica, formando o HEV. Ele tem clulas diferenciadas e
produz CCL19. As clulas do tecido linfide tambm produzem CCL19 e CCL21 para atrair linfcitos B e T.
Sendo que B continua sendo atrado pela CXCL13 at o folculo. Assim como no bao, h filtragem dos
antgenos que esto no sangue. Os linfonodos ao receber a linfa so capazes de testar todos os antgenos
presentes nos tecidos.
Esse endotlio da ramificao das artrias no tem as clulas achatadas, so mais globulosas, e tem
espaamento entre uma clula e outra maior. Ao serem capazes de produzir quimiocina, vo facilitar o
processo de rolamento, parada, diapedese dos linfcitos.

MALT (tecido linfide associado mucosa): o maior que temos. Tem propriedades distintas e
especiais por estar em porta de entrada e em contato quase que direto com o meio externo e com
antgenos a que no devemos responder (alimentares, da flora, incuos ambientais) e que devem ser
tolerados. Essa habilidade intrnseca e especifica da MALT. Ele pode ser dividido em um tecido presente
no tecido epitelial (linfcitos intraepitelias) e um tecido presente no tecido conjuntivo abaixo do epitelio,
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

onde encontramos um tecido linfide organizado e tambm um tecido linfide difuso (dispersas
aleatoriamente sem nenhuma organizao bsica).

GALT (tecido linfide associado mucosa gastrointestinal): o maior tecido de mucosa que temos.
Linfcitos intraepiteliais j ativados, de memria, principalmente TCD8+, que, depois de uma resposta
imunolgica, uma parte dos linfcitos se diferencia em fentipo de memria e uma parte volta para onde o
estmulo foi gerado. Ou seja, a resposta desses linfcitos se iniciou na mucosa gastrointestinal.
Abaixo, temos tecido conjuntivo frouxo, a lmina prpria, onde h linfcito de memria que so
predominantemente linfcitos TCD4+. H, tambm, clulas residentes: macrfago, mastcito, DC.
Especificamente a h uma populao especial de DCs tolerognicas, que suprimem a resposta de T. E h,
tambm, DCs efetoras.
Na lmina prpria encontra-se, tambm, tecido linfide organizado, linfcitos B agregados em
folculos, distribudos no apndice e no colo. E tambm uma estrutura linfide no leo, a Placa de Peyer,
que um arranjo tpico de folculo com linfcito B e linfcitos T ao redor, que drenado por vasos
linfticos que saem da placa, e entram para os linfonodos mesentricos. Acima da Placa de Peyer h a
clula M, entre as clulas epiteliais.
As clulas M tem grande capacidade de realizar macropinocitose. Pinocitose a capacidade da
clula de recolher um pouco de lquido presente no meio extracelular, macropinocitose quando a clula
faz isso com grandes quantidades de lquido, aleatoriamente e constantemente. Emite prolongamentos de
membrana diretamente em contato com a luz do intestino, assim se forma uma vescula que coletou uma
amostragem do que havia na luz do intestino. Na membrana basal h reentrncias, uma espcie de bolso,
onde h macrfagos e DCs em contato ntimo com a clula M. Esse lquido coletado e vesiculado trafega
pelo citoplasma da clula M, at se fundir com a membrana basal, liberando o contedo para o meio
extracelular, tudo isso voltado para a lmina prpria.
A clula M ento serve para coletar amostras e disponibiliz-las a clulas apresentadoras de
antgenos, capazes de fazer fagocitose.
A DC consegue passar por clulas unidas por ocluses, graas a seus prolongamentos, e conseguem
chegar luz do intestino. Por estmulo especfico podem realizar fagocitose.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

BALT (tecido linfide associado mucosa respiratrio): tonsilas, sublingual, farngeas, palatinas...
clulas M, HEVs
Existem tambm os tecidos linfides brnquicos, considerados, por alguns, tercirios, pois so
induzidos.

Tecido Linfide Cutneo: no h segregao. No h riqueza de linfcitos virgens, mas sim linfcitos
de memria ativados distribudos na camada cutnea. Na pele, h DCs, que formam uma espcie de rede,
que se estendem muito, com intuito de aumentar sua superfcie de contato. So chamadas Clulas de
Langerhans. Expressam CD207, tendo a mesma funo de APC.
Na derme h mastcitos, macrfagos, linfcitos TCD4 e TCD8, ativados e de memria.

RECIRCULAO - HOMING
Enquanto um linfcito virgem, sai do tecido linfide primrio, circula permanentemente entre
tecido linfide secundrio e sangue. Como isso acontece?
Isso ocorre mediado por protenas e molculas de adeso. O que faz um linfcito virgem se aderir a
um endotlio, transmigrar e atingir um rgo so as integrinas (L-selectina) presentes na membrana do
linfcito e molculas de adeso presentes na membrana do endotlio. A L-selectina encontra uma
molcula de adeso capaz de interagir com ela no endotlio. Essa molcula de adeso est presente no
endotlio especializado das HEVs, as quais produzem CCL19. As clulas do estroma produzem CCL21. Essas
quimiocinas favorecem a atrao, quando liberadas, ficam na superfcie do endotlio, se combinam com a
integrina. L-selectina sofre alterao conformacional, aumentando sua afinidade pelas molculas de
adeso, se ligando mais fortemente a elas. O linfcito deixa de rolar, para, passa entre uma clula
endotelial e outra e vai para o tecido.
Esse linfcito permanece um tempo no linfonodo, migra no interior do gnglio e vai sair por um
vaso linftico eferente. Em determinado momento chega a um vaso aferente e entra no prximo
linfonodo. Permanece assim at percorrer todo o percurso linftico e cair no ducto torcico.
Para maximizar a chance de o linfcito encontrar o antgeno para o qual ele especifico, ele circula
de vaso eferente para o prximo linfonodo. uma vigilncia que otimiza o tempo de encontro entre
linfcito e o antgeno especifico para ele. Enquanto ele no o encontrar, virgem, e permanece no padro
linftico-sangue-linftico.
Quando o linfcito encontra o antgeno, se for T (antgeno apresentado pela DC) ou B (antgeno
solvel via linfa), sofre o processo de ativao, perdendo a L-selectina (integrina), que o que permite que
ele se adira s HEVs. Ele perde ento sua tendncia a, quando estiver no sangue, sair dele e entrar
novamente no tecido linfide. Ele no transmigra. Se for ativado, h infeco e pressupe-se que haja
inflamao no foco da infeco. Quando o linfcito ativado, ele no volta ao tecido linfide secundrio,
mas agora existe outra regio com endotlio diferenciado, o prprio foco de infeco. Ali h quimiocinas e
outras molculas de adeso que permitam que ele saia no tecido inflamado.
O linfcito de memria que retorna para a mucosa onde foi ativado o faz porque a DC que a
apresentou o antgeno o induz a produzir integrinas para as quais s h molculas de adeso na mucosa.
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Um linfcito de memria de proveniente da ativao num linfonodo cervical, por exemplo, continuar a
circular pelo sistema linftico.
Como o linfcito virgem sabe quando tem que sair do tecido linfide secundrio? Quanto tempo
ele permanece no tecido? Isso tambm determinado por uma quimiocina, que um lipdio presente em
grande concentrao na linfa e no sangue, chamado de esfingosina 1-fosfato. O linfcito virgem tem
receptor para esfingosina 1-fosfato. Existe um gradiente de concentrao esfingosina 1-fosfato, que se
encontra em maior concentrao na circulao do que no tecido linfide secundrio. Ao entrar no
linfonodo, a tendncia sempre sair, porque ele vai em direo maior concentrao desta citocina.
Quando o linfcito virgem chega ao sangue ou a linfa a quimiocina se liga ao receptor dele, e o complexo
receptor-ligante internalizado.
O linfcito virgem atrado para o interior do tecido linfide secundrio devido a atrao pelas
quimiocinas CCL19 e CCL21 que so produzidas por ele. Essas quimiocinas vo promover uma alterao
conformacional na L-selectina, fazendo com que ela se ligue com maior afinidade as molculas de adeso
da HEV e realize diapedese para o tecido. Esse linfcito que entrou no tecido linfide secundrio
internalizou o receptor para esfingosina 1-fosfato enquanto estava na circulao. No linfonodo, h uma
densidade de receptor muito menor na membrana linfcito, j que ele foi internalizado quando se ligou a
quimiocina. Cada vez que o linfcito virgem entra no tecido linfide secundrio a disponibilidade de
receptor para esfingosina 1-fosfato est muito reduzida.
O linfcito ir expressar o receptor novamente, mas leva um tempo para repor a quantidade de
receptores. Durante esse intervalo de reposio do receptor o linfcito virgem permanece no linfonodo,
porque enquanto ele tem pouco receptor a tendncia dele de retornar a circulao pequena. Esse tempo
importante para esse linfcito posso encontrar a DC que tenha o antgeno especfico para ele. O linfcito
ir entrar em contato com diversas DC durante esse perodo, ou seja, com diversos antgenos, aumentando
as chances de ele ser ativado. Conforme aumenta o nmero dos receptores na membrana, a tendncia a
sair do tecido aumenta, e ele retorna para a circulao, onde h uma maior concentrao de esfingosina 1fosfato.
Obs: Trinta vezes a mesma explicao, melhor decorar para a prova.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

TIPOS DE ANTGENOS
Antgeno qualquer molcula capaz de se ligar aos receptores de linfcitos B (Ig membrana - BCR)
ou T (TCR). No so necessariamente estranhos, no self, ou no existiria autoimunidade.
Imungenos: so substncias capazes de induzir uma resposta imune especifica. Pois nem tudo que
se liga ao receptor de B e T o bastante para haver uma ativao adequada e, da, uma resposta.
Todo imungeno um antgeno, mas nem todo o antgeno um imungeno.
O carter imunognico tambm depende da quantidade de antgeno e do local onde est
localizado.
Hapteno a menor frao do antgeno capaz de reagir com molculas de BCR e de TCR. Sozinhos
no so capazes de induzir resposta imune eficiente. No so bons imungenos.
Eptopo (ou determinante imunognico) a regio do antgeno que interage fisicamente com o
anticorpo, na regio Fab. Um antgeno pode ter vrios eptopos.

Linfcito B: reconhece antgenos solveis. Reconhece eptopos em zona externa e acessvel, que
podem ser de qualquer natureza qumica (protena, carboidrato, lipdio, cido nucleico). Se o eptopo do
antgeno estiver internalizado, no vai se ligar ao receptor. O eptopo reconhecvel por BCRs pode ser
linear ou conformacional. Por exemplo, uma protena tem um arranjo tercirio. Pode ter BCR capaz de
reconhecer uma sequncia linear de aminocidos expostos por essa protena. Na mesma protena existem
alas, formando um arranjo tridimensional, onde os aminocidos esto aproximados entre si. Esse eptopo
aparece pela estrutura terciria, j que os aminocidos no esto ligados em estrutura primaria, ele um
eptopo conformacional. Se desnaturar um eptopo conformacional, perde-se o eptopo. Eptopos lineares
no so perdidos por desnaturao.
B2 folicular tem maior condio de responder a antgeno proteico.
B1 e B2 da zona marginal do bao tem maior condio de responder a outros antgenos
(carboidratos, lipdios, cidos nucleicos).

Linfcito T: o reconhecimento requer uma clula que apresente o antgeno associado ao a MHC,
essa molcula apresenta preferencialmente antgeno proteico, mas ela no apresenta protenas nativas,
apenas protenas que tenham sido internalizadas e processadas at peptdeos lineares. O linfcito T
reconhece pequenas sequncias lineares de aminocidos.
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

MHC: molculas que tem como funo fisiolgica a apresentao de peptdeos antignicos aos
linfcitos T. Uma molcula de MHC pode se ligar a vrios eptopos diferentes.

Antgenos podem ser: timo-dependentes e timo-independentes (nmero de eptopos idnticos na


estrutura). Essa classificao leva em considerao a estrutura qumica dos antgenos, que leva a respostas
com caractersticas diferentes.
Padres repetitivos de sequncias monomricas so, frequentemente, encontrados em
carboidratos, lipdios e cidos nuclicos. Esses antgenos so polivalentes. Eptopos repetitivos se ligam
simultaneamente a vrios receptores, aproximando-os na membrana fluida. Essa aproximao e mltipla
ligao simultnea resultam na ATIVAO DOS LINFCITOS B. essas so os antgenos timo-independentes.
Em protenas dificilmente so encontrados eptopos repetitivos na estrutura. O antgeno se liga ao
receptor e o complexo internalizado. H a fragmentao do antgeno, e os fragmentos se ligam a MHC,
para serem apresentados para T. O linfcito B apresenta o antgeno para T, que capaz de ativar o B, via
interao membrana-membrana e via citocinas. Esse antgeno no consegue ativar diretamente o linfcito
B, necessrio o auxlio de T, por isso so antgenos timo-dependentes.

Propriedades da ligao antgeno-receptor: so ligaes no covalentes e reversveis. Podem ser


interaes hidrofbicas, foras eletroestticas, pontes de hidrognio e foras de van der Waals.
Complementariedade entre antgeno e receptor garante a especificidade da ligao. Uma maior
especificidade de ligao significa uma maior complementariedade com o antgeno, ou seja, o receptor
reconhece grande poro do eptopo. Uma menor especificidade significa uma menor
complementariedade, ou seja, o receptor reconhece uma pequena poro do eptopo. Esse receptor
especfico para o eptopo que com que tem grande complementariedade, mas pode reconhecer outras
molculas de estruturas semelhantes com que tem menor complementariedade (menor afinidade). Por
isso possvel a REAO CRUZADA, o receptor especfico para um antgeno pode reconhecer outro com
menor afinidade. Portanto possvel gerar um anticorpo para o agente X e esse anticorpo se ligar ao
agente Y com menor afinidade.
No confundir com a ativao de linfcito B atravs da aproximao dos BCRs, que ocorre com os
antgenos timo-independentes. Isso chamado de cross linking (ligao cruzada).

Aula 6 Professora Vera MHC 11/12/2012

O linfcito T precisa que o antgeno seja processado e esteja associado a molculas de MHC.
Linfcitos TCD8 reconhecem antgenos apresentados por MHC de classe I e os linfcitos TCD4, por MHC de
classe II. O TCR estabelece um contato com o antgeno e o MHC. As molculas CD8 e CD4 participam dessa
interao com o MHC apenas, CD8 s interage com MHCI e CD4 com MHCII.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Funo do MHC (chamado de HLA nos humanos): apresentar antgenos para linfcito T e servir de
marcadores celulares (esto relacionados rejeio de transplante, agem como antgenos entre indivduos
diferentes).
Os genes para codificar MHC esto em trs regies diferentes do cromossomo 6. Na verdade, so
codificados trs tipos de MHC: MHCI, MHCII e MHCIII (sendo que o tipo III no est relacionado aos outros,
so molculas solveis que tem funo diferente). Molculas de MHCI so expressas na superfcie de todas
as clulas nucleadas, portanto todas as clulas nucleadas podem apresentar antgeno para TCD8.
Molculas de MHCII so expressas somente nas APCs (dendrticas, macrfagos e linfcitos B), ou seja,
somente essas clulas apresentam antgenos para TCD4. Eventualmente outras clulas podem sofrer
estimulo e apresentar MHCII.
No locus para MHCI existem trs genes: HLA-A, HLA-B e HLA-C. J no locus para MHCII, existem
tambm trs genes: HLA-DQ, HLA-DP e HLA-DR. Todos os trs genes de cada MHC so sempre expressos
em todos os indivduos ao mesmo tempo. Portanto, o MHC codificado por um processo polignico (mais
de um gene que codifica a mesma molcula). O MHC tem formas allicas distintas na populao (existe a
mudana de alguns aminocidos entre os genes de diferentes indivduos), portanto uma molcula
polimrfica. A molcula de MHCI muito mais polimrfica que a de MHCII. Alm disso, esse gene
expresso em co-dominncia, ou seja, os genes de ambos os cromossomos sero expressos.
Resumindo: todas as pessoas tem os 6 genes ativos para cada classe de MHC (trs maternos e trs
paternos), que so transcritos ao mesmo tempo, mas existe diferena entre esses genes de indivduo para
indivduo.

Variao: 3 genes que codificam MHC, vindos tanto da me quanto do pai, portanto, esto sendo
expressos 6 genes para o MHC (considerando que os pais no tenham haplides iguais, o que comum em
caso de co-sanguinidade). O MHCII tem duas cadeias polipeptdicas associadas, uma alfa e uma beta,
quando vai ser expresso eventualmente pode ser expresso uma cadeia a mais de HLA-DR, fazendo com que
se possa ter de 6 a 8 molculas de MHCII diferentes sendo expressas no indivduo. MHCI tem uma cadeia
polipetptidica que sai da membrana com 3 domnios 1, 2 e 3 e est associada outra protena, a -2microglobulina, que no est no mesmo locus de transcrio, no varivel, e no tem contato com o
peptdeo. Portanto, 6 molculas sero expressas.

A estrutura tridimensional do MHC forma um sulco, uma fenda, onde ser acomodado o peptdeo.
A molcula CD8 interage com a cadeia alfa do MHCI em uma regio que no envolve o peptdeo. A CD4
interage com a cadeia beta do MHCII tambm no domnio que no faz parte da fenda. A regio com que as
molculas de CD4 e CD8 interagem conservada na populao. As diferenas polimrficas da estrutura da
molcula de MHC esto na regio da fenda.
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Os peptdeos capazes de se ancorar no MHCI tm algumas caractersticas tpicas e diferentes dos


MHCII. Peptdeos apresentados por MHCI so menores (a abertura da fenda de MHCI bem menor que a
de MHCII). Existem caractersticas qumicas que tambm interferem na interao MHC-peptdeo.

Essas caractersticas de polignia e co-dominncia faz que se tenha mais de um tipo de MHCI e
MHCII, podendo apresentar maior nmero de antgenos diferentes, aumentando a capacidade de
reconhecimento de antgenos por esse indivduo. O polimorfismo aumenta a possibilidade de algum
indivduo em uma populao ser capaz de apresentar um novo antgeno, ajudando a garantir a
sobrevivncia da espcie.
POLIMORFISMO DE MHC: VANTAGEM POPULACIONAL!
POLIGNIA E CO-DOMINNCIA DO MHC: VANTAGEM INDIVIDUAL!
Essa caracterstica tambm exerce funo em doenas auto-imunes, j que as molculas de MHC
no diferenciam molculas prprias de no prprias, apresentando-os indiscriminadamente. MHC
expresso constitutivamente e sempre com peptdeo, portanto, se no h infeco vo ser apresentados
antgenos prprios.
Numa infeco, todos os antgenos do patgeno so processados, e tudo que for protico pode ser
apresentado via MHC (se tiver o tamanho adequado, os aminocidos hidrofbicos na regio certa). Nem
todos os peptdeos vo ser capazes de gerar resposta, apenas aqueles que forem apresentados por MHC.
O MHC DETERMINA A IMUNOGENICIDADE DO ANTGENO, OS PEPTDEOS QUE SE ACENTAM NO MHC VO
SER EPTOPOS IMUNODOMINANTES.
As APCs possuem MHCII constitutivamente e fagocitam, processam e apresentam antgenos. Elas
lidam com antgeno que esto no meio extracelular, apresentando via MHCII para linfcitos TCD4, que ir
produzir citocinas que agem em macrfagos (aumentando o poder de fagocitose), linfcitos B (contribui
para a formao de anticorpos que vo neutralizar esses antgenos). As clulas que tem MHCI apresentam
antgenos intracelulares citosslicos (com antgenos virais) para linfcitos TCD8, que ir matar a clula que
apresentou o antgeno, j que elas podero estar infectadas.
A expresso das molculas de MHC pode ser regulada positivamente: quando a clula estimulada
por citocinas (TNF, INF-) ou por um PAMP atravs de receptor Toll (aumenta a expresso de MHCII). INF-
produzido por clula NK ativada, que vai agir aumentando a expresso de MHCII. INF-, INF- e INF-
aumentam a expresso de MHCI (INF- e INF- so produzidos por clulas durante a infeco por vrus).

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

AUTO-IMUNIDADE
Para ter doena auto-imune, o indivduo precisa apresentar peptdeo prprio, ou seja, tem MHC
capaz de apresentar antgenos prprios. Mas isso no suficiente para o desenvolvimento da doena, so
necessrios diversos outros fatores. Existe forte associao entre alguns alelos e o risco da doena. TER O
ALELO NO GARANTE TER A DOENA; MAS NO TER O ALELO, GARANTE QUE NO TER A DOENA.

HISTOCOMPATIBILIDADE
A compatibilidade entre dois indivduos est relacionada aos MHCs que eles expressam. Estuda-se o
quanto h de semelhana entre as molculas de MHC do doador com o receptor. A chance de se ter um
irmo com o mesmo hapltipo (compatvel) de 25%. Para o transplante de medula ssea tem que ter
100% de compatibilidade.
O processo de rejeio pode se dar por vrios motivos, como, por exemplo, os MHCs recebidos
serem capazes de apresentar antgenos prprios que no foram apresentados durante a ontogenia. Esse
poder, ento, ser reconhecido por um linfcito, gerando auto-imunidade. Alm disso, o SI do indivduo
que recebeu o transplante pode ter linfcitos que reconheam molculas de MHC do material
transplantado.
Outras compatibilidades: em vrias espcies animais a escolha do parceiro se d pelo odor. Os
genes que codificam os receptores dos neurnios olfativos esto muito relacionados com a expresso do
MHC. Existem grupos de estudo que viram que as mulheres, intuitivamente, pelo cheiro, escolhiam
homens que tinham o hapltipo mais diferente do delas. Isso acontece para que a prole do casal seja
heterozigtica. Se o pai compartilhar alelos da me, a prole ter menos variabilidade. Est se chegando ao
consenso de que no pode ser totalmente diferente, porque necessrio manter o que foi selecionado
pela evoluo.

VACINAS
A variao de MHC tambm importante para a imunizao atravs das vacinas, com produo de
clula de memria (clulas T). Para haver uma resposta efetiva vacina, deve-se ter o MHC que consegue
apresentar o antgeno presente nela para T. Exemplo disso a HiB: algumas pessoas no desenvolvem a
resposta imune contra o antgeno usado na fabricao da vacina, porque no so capazes de apresent-lo
no MHC. A vacina deve imunizar o maior nmero de indivduos, porm no possvel abranger todos
devido ao polimorfismo do MHC.

PROCESSAMENTO
Para os antgenos serem processados e apresentados tem que ter contato com a clula, isso
acontece em trs situaes:
- o antgeno est no meio extracelular e fagocitado: processamento e associao com MHCII, que
ir apresentar para TCD4, que ir estimular uma maior produo de anticorpos pelo linfcito B;
- o antgeno est no interior de uma vescula: processamento e associao com MHCII, que ir
apresentar para TCD4, que auxilia a macrfago a internalizar e degradar o antgeno;
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

- o antgeno est livre no citossol da clula (vrus): processamento e combinao com MHCI, sendo
apresentados para linfcito TCD8, que mata a clula.

VIAS DE PROCESSAMENTO DE ANTGENO


Para antgeno citoplasmtico (MHCI): naturalmente existe um processo de reciclagem das enzimas
citoplasmticas (principalmente para eliminar protena no funcional velha ou montada errada). Ele
acontece atravs de proteossoma, um complexo enzimtico que ir liberar peptdeos. Ele ser tambm
responsvel pela degradao de protena antignica presente no citoplasma. Em infeco, o INF- ir
aumentar a expresso de MHCI, criando uma maior chance de os peptdeos serem apresentados. INF-
tambm muda as subunidades catalticas do proteossoma, fazendo com que gerem peptdeos que
geralmente tenham aminocidos hidrofbicos (bsicos na poro 5), fazendo com que eles se ancorem
melhor a fenda do MHC.
Na membrana do retculo endoplasmtico existe uma protena que atravessa chamada TAP, em que
esses peptdeos se ligam para serem transferidos para o interior do retculo endoplasmtico, onde existem
MHCs presos face luminal. Existe, associada TAP no interior do retculo endoplasmtico, a Tapasina que
ir fazer a transferncia do peptdeo da TAP para a fenda do MHCI. Dentro do retculo endoplasmtico,
existem proteases que so capazes de agir nos peptdeos, se necessrio, para que eles se encaixem melhor
na fenda do MHC. O complexo MHC + peptdeo enviado para o Golgi e de l exportado para a
membrana extracelular. S iro para a membrana, os MHCs com peptdeo, sem ele os MHCs so instveis
estruturalmente, sendo degradados. Enquanto no h peptdeo associado ao MHC, no retculo
endoplasmtico, chaperonas ficam na fenda, para garantir a estabilidade da molcula.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Para antgenos extracelulares e dentro de vesculas (MHCII): o antgeno que for extracelular vai ser
fagocitado e ficar numa vescula. Essa vescula vai se fundir com o lisossoma, que est repleto de enzimas
que iro degradar o antgeno gerando peptdeos. O MHCII est sendo produzido no retculo
endoplasmtico, com o auxlio de chaperonas. No tem TAP ou Tapesina para transferir o peptdeo.
Quando est sendo sintetizado, ele vem com uma protena, chamada invariante, na fenda para manter sua
estabilidade at que ele receba o peptdeo. O MHCII vai para o Golgi, e sai numa vescula contendo MHCII
+ protena invariante e a protena HLADM. Essa vescula que sai do Golgi se funde com vescula contendo
os peptdeos degradados. A HLADM vai ser responsvel por colocar os peptdeos antignicos na fenda do
MHC. Para isso necessrio degradar a cadeia invarivel, o que feito pelas enzimas lisossomais, restando
apenas uma pequena parte dela, chamada de Clip. Assim, a HLADM vai trocar o Clip pelos peptdeos. Ento
o complexo MHCII + peptdeo exportado da vescula para a membrana da clula.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

APRESENTAO CRUZADA
Alguns antgenos fagocitados podem entrar na via de MCHI, por exemplo: Listeria possui a enzima
listeria lisina, que produz poros na membrana da vescula, fazendo com que ela atinja o citoplasma.
Algumas bactrias tem a capacidade de fugir do fagossoma, indo para o citossol. Sero patgenos
intracelulares (utiliza a clula para viver), ento s sero eliminados com a morte celular, por isso so
apresentados via MHCI para TCD8.
Um antgeno citoplasmtico pode ser apresentado por MHCII, por exemplo: clula infectada por um
vrus. Quando a clula infectada, ela capaz de apresentar os antgenos citosslicos via MHCI. comum
que permaneam antgenos virais na membrana durante a sada do vrus da clula. Esses antgenos podem
ser reconhecidos por DC, que ir fagocitar a clula. Ento esse antgeno estar dentro de uma vescula em
DC podendo ser apresentados por MHCII.
Importncia: a dendrtica precisa de uma maneira de apresentar os peptdeos que esto na vescula
no s por MHCII, mas tambm por MHCI. Isso necessrio porque a dendrtica a nica clula que ir ao
rgo linfide secundrio para ativar linfcitos, ento, ela precisa ser capaz de apresentar antgeno via
MHCI para ativar linfcito TCD8.

Mesmo durante uma infeco, que um processo natural, precisa-se produzir e degradar protenas
prprias, ento, a todo o momento, est se apresentando peptdeos self, principalmente via MHCI.
No necessria uma grande quantidade de MHC para ativar o linfcito T. Uma vez que o peptdeo
esteja bem preso, o MHC pode ficar dias na membrana, o que interessante, para haver mais tempo de
encontrar um linfcito T que reconhea, desenvolvendo a RI.
Numa inflamao, h filtragem de peptdeos de DC do tecido para os rgos linfides secundrios,
onde vai encontrar os linfcitos virgens. A DC ativada perde molculas que a mantm residente e passa a
expressar o receptor CCR7 para CCL19 e CCL21, quimiocinas que atraem essa clula at o rgo linfide
secundrio. Nesse local, ela vai se encontrar com vrios linfcitos T virgens, mas quando encontrar um que
reconhea o antgeno, a DC vai parar e vai interagir com esse linfcito virgem, ativando-o. Esse linfcito
ativado no ir ter sua funo no rgo linfide, ele apenas preparado, indo para o sangue. Quando
chega ao local de inflamao, sofre diapedese. Ele ir agir quando entrar em contato com a o antgeno
novamente, dessa vez j no tecido infectado.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Dendrtica

Tem maior capacidade de fazer macrofagocitose (englobar grandes volumes);

nica capaz de fazer apresentao cruzada, expressando, constitutivamente, molculas


essenciais para apresentao de T virgem (se ele reconhecer antgeno na ausncia dessas molculas, o
linfcito se tornar anrgico);

Presente no organismo inteiro (B restrito a sangue e tecido linfide);

nica que migra (mesmo que tenha macrfago no corpo inteiro, ele no chegar at os
rgos linfides).

MHCI: apresenta antgenos citosslicos para TCD8, j que a clula est infectada ou tumoral e
precisa ser morta.
MHCII: apresenta antgenos extracelulares para TCD4 que produz citocinas com ao em
macrfagos (aumenta a capacidade de fagocitose e degradao) e linfcitos B (produz anticorpos com
caractersticas opsonizantes).

Existem outros tipos de linfcito T:


- NKT: possui TCR ( invariante e com variabilidade restrita), eles tem molculas de superfcie
semelhantes a NK, so residentes;
- possui TCR, tambm com repertrio mais restrito compem a populao de Ts subendoteliais,
em mucosas. Reconhecem antgenos lipdicos apresentados via CD1 (polimorfismo restrito) por APCs.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

particularmente importante para infeco por micobactria, por exemplo, j que esto cheias de antgenos
lipdicos na superfcie.

Aula 7 Professora Clo ATIVAO DOS LINFCITOS T 17/12/2012

A importncia maior de T denota toda sua capacidade de regular as outras clulas. Ento, se T
ajudar, o macrfago vai fagocitar muito mais, o neutrfilo tambm se tornar mais eficiente. Enfim, todas
as clulas do sistema imune dependem da clula T. Em especial um subtipo de T. Temos 2 subtipos : CD4 e
CD8 e a mais importante a TCD4 porque a TCD8 depende de TCD4. Se a APC no funcionar direito, a T
tambm no vai funcionar e a comea um evento em cascata que pode culminar, por exemplo, em uma
auto-imunidade.
Ento, a clula dendrtica vai reconhecer os patgenos, principalmente atravs do reconhecimento
seus PAMPs, e vai tentar fagocit-los. Se o patgeno, a protena, for capturado por fagocitose ou
endocitose, os peptdeos gerados por proteases se acoplam ao MHC de classe II. Ao contrrio, se os
peptdeos forem clivados de protena citoplasmtica, esses peptdeos vo ser carreados para o MHC de
classe I.
Ela sai do local de infeco, de inflamao e adentra o santurio mais prximo, um rgo linfide
secundrio ou um tecido linfide associado mucosa, fenmeno conhecido como recirculao de
linfcitos.
Quando h uma reao inflamatria, as clulas em que h um reconhecimento de PAMP, as DCs,
passam a expressar em sua superfcie receptores como o CCR7, que obedecem a um gradiente
quimioatraente de quimiocinas produzidas por clulas que esto na regio paracortical do gnglio, e so
elas CCL19 e CCL21.
A DC chega rea atravessando as vnulas ps-capilares altas, os HEVs. A DC vai apresentar os
peptdeos para TCD4, se for MHC de classe II, e para TCD8 se for MHC de classe I. Na verdade, quando a DC
adentra o rgo linfoide secundrio ou o MALT, a T tambm adentra. um circuito dinmico, elas
interagem: T e a APC. Essa sinapse imunolgica realizada atravs de molculas de adeso, o que muito
utilizado na clnica para tentar evitar rejeio de transplantes. Lembra do rolling? Parada? Diapedese? So
quase as mesmas molculas, mostrando que, quando a DC entra na rea de T, elas interagem superfcie
com superfcie atravs de vrias molculas de adeso.
O gnglio capsulado, tem vasos linfticos aferentes e eferentes. A DC, ao chegar, interage com as
clulas T especificas para aquele antgeno sendo apresentado. Quando as DC chegam ao gnglio,
expressam molculas de adeso. Atravs delas, a T vai se ligar e reconhecer o antgeno para o qual
especifica. Os primeiros contatos so feitos entre Fab e ligante. A proximidade fsica importante para a
verificao, membrana prxima membrana, permitindo que o TCR toque no clice, e, se o peptdeo,
algum dos muitos que a DC pode apresentar, for compatvel, a T pode ser ento ativada.
Os peptdeos vm de vias de processamento diferente. O peptdeo que se acopla ao MHC gerado
em um proteossoma, a partir de antgeno fagocitado. As vias identificam de onde veio os peptdeos que se
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

acoplam ao MHCI e MHCII. MHCII expresso constitutivamente em uma quantidade menor de clulas,
MHCI expresso em todas as clulas nucleadas.
Ento uma das formas que as DC tm de ativar T virgem deixar seu estado imaturo, para seu
estado maduro. E uma das primeiras atitudes para que a DC possa burlar essa baixa afinidade
aumentando a expresso de MHC. Se eu tiver muito MHC, eu vou ter muito peptdeo. Ento a fora total
acaba sendo elevada, apesar de cada TCR ter baixa afinidade, porque eu tenho uma alta densidade de
molculas de MHC de classe I e de classe II.
Morfologicamente, a DC superior a qualquer outra APC. Suas longas projees citoplasmticas
fazem com que possam entrar em contato com mais clulas T. A DC tem que dar 2 sinais para T. O primeiro
a identificao do peptdeo especifico para o qual foi preparada para reconhecer. Esse primeiro sinal
importante para dar a especificidade, para que a resposta no seja to policlonal. Se no houver segundo
sinal, a T entra em anergia: estado de no funcionalidade.
Em suma, a vigilncia imunolgica no esttica. O linfcito ainda no ativado vai percorrer os
vasos linfticos e sanguneos, as vsceras, at que encontre, em um santurio, uma APC (necessariamente
uma DC para o primeiro sinal) que o ative.
A anergia importante no caso de T autorreativas.
O segundo sinal s vai ser dado pela APC se a APC estiver vindo de uma rea inflamada. Durante a
vida uterina, a presena de citocinas inflamatrias deletria. Se em altos nveis, atravessando e ativando
a placenta, pode causar patologias. Uma patologia seria a autoimunidade. Pois a T anrgica autorreativa
pode ser ativada, se receber sinal da APC vinda de altos nveis de inflamao.
As molculas de MHC em estado fisiolgico expressam peptdeo self. Em uma gravidez saudvel,
no houve reaes inflamatrias, por exemplo. A evoluo de infeces em grvidas diferente do que em
no grvidas, pois sua resposta imune reduzida. Se h resposta imune especifica reduzida, h dificuldade
de eliminar patgenos.
As citocinas inflamatrias do foco de infeco materna vo afetar a placenta. Dali, as citocinas
podem cair no sangue do cordo umbilical. Qualquer clula T autorreativa, que tenha escapado do timo,
pode ser ativada por uma DC que tenha recebido essas citocinas do sangue vindo do cordo umbilical.
Lembrando que a inflamao para vencer a anergia deve ser crnica e forte.
SEGUNDO SINAL: j descobriram um par de molculas (uma expressa na APC: B7. Tem B7-1 e B7-2.
Tambm conhecidos como CD80 e CD86. A outra expressa na clula T, CD28). A expresso de CD28
constitutiva, e a de B7 induzida no processo inflamatrio. A APC que fornece, ento, os dois sinais.
Descobriu-se depois outro par de molculas: CD40 (expresso constitutivamente na APC) e seu
ligante CD154 ou CD40L. Qual a diferena? O B7 expresso de forma induzida, e vai se ligar ao CD28,
sendo fundamental para ligar com T virgem. O sinal forte. Quando a clula T j foi ativada, pode ser
reativada agora com B7 ou CD40.
T virgem no tem o marcador CD40L, ento apenas vai se ligar com CD28. A clula T ativada pode
ser reativada, reestimulada mais vezes, mas atravs de CD40 e CD40L. A T s pode utilizar ento a segunda
via de ativao quando no for mais virgem.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Os receptores do tipo TLR so muito eficazes em induzir inflamao e a expresso de B7. Quando
h um processo crnico de inflamao (como pessoas com distrbios de humor), sustentado por DAMPS,
tambm h essa estimulao expresso de B7.
Quem estressado tem uma baixa imune, e quem tem baixa imunolgica tem infeco de
repetio, uma faringoamidalite de repetio, uma poliesculhambose trmica de repetio, uma vaginose,
candidase de repetio, essas pessoas somadas ao stress tem PAMPs, citocinas inflamatrias, mas no h
uma boa resposta contra o patgeno, ento a reao tende a cronificar. Stress + PAMP so os grandes
viles da autoimunidade.
A primeira APC da T virgem a dendrtica, mas qualquer APC que seja ativada pode expressar B7,
agora quem mais expressa B7 so as APCs que expressam classe I e classe II: B, macrfago, dendrtica.
A via CD40 no capaz de ativar T virgem. O patgeno reconhecido na rea de entrada, boca,
clon, pelas clulas dendrticas, que vo fagocitar, processar e gerar peptdeos, essa clula vai migrar para
a rea de T e vai apresentar os peptdeos para aquelas que so especficas. Ela sai de uma rea inflamada
que reconheceu o patgeno, por isso ela possui B7, que vai se ligar ao seu receptor constitutivo CD28.
Essa clula T ento ativada, e passa a expressar CD40L. Esta clula expressa esta molcula mesmo
j sendo ativada, devido dinmica da resposta, que constituda: a dendrtica ativa T, T ativado ativa B.
Quando a T for ativar B ela ir utilizar esta via. A clula dendrtica usa esta via e a clula T deixa de ser
virgem, passa a expressar o CD40L ou CD154 e vai ativar a clula B.
Propriedades que tornam a Clula Dendrtica a melhor APC:
1- Morfologia: Emite longos processos citoplasmticos que aumentam a superfcie de contato. Pode
interagir com centenas de Ts diferentes. Cada ilha de MHCs apresentando os seus peptdeos.
2- Elas so mveis: Saem do local de inflamao e vo para os locais onde existem T (tecidos
linfoides II) apresentar peptdeos. Essa migrao feita atravs de um gradiente de quimioatrao
mediado pelo receptor CCR7 (expresso quando a DC ativada) e pelas quimiocinas liberadas T (CCL19 e
CCL21 ou L19/L21.)
3- Baixo limiar de ativao: O mnimo sinal inflamatrio j a ativa: Aumenta expresso de MHCs (o
que aumenta a expresso de peptdeos antignicos), aumenta citocinas pr-inflamatrias, faz uma upregulation das vias inflamatrias.
4- Altos nveis de molculas de adeso: Obrigam as T a fazerem sinapse e verificarem se o seu TCR
se liga ao peptdeo.
5- Pode realizar ligao cruzada com vrios peptdeos diferentes.

Resposta primaria: 7 dias para proliferao de T ser mais evidente, at 15 dias. Na resposta de
memria, mais rpido. (3 dias +-)
Existe uma droga que inibe a citocina (IL-2) que esta relacionada proliferao. Usada para
controlar rejeio em transplante, a ciclosporina. Impede a proliferao clonal. Assim, impede-se o resto
da resposta imunolgica.
IL-2 e IL-2R: o receptor completo formado por 3 cadeias (heterotrimero), cadeia alfa, beta e gama.
Uma clula T no ativada expressa s beta e gama, e pode responder a IL-2 com baixssima intensidade. A
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Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

concentrao de IL-2 para conseguir induzir proliferao em T no ativada absurdamente alta. Quando T
est ativada, passa a expressar a cadeia alfa, que recebe o nome de CD25.

O primeiro sinal fundamental, pois determina qual(is) a(s) T(s) dever(o) ser ativada(s), d a
ESPECIFICIDADE. O segundo sinal se junta ao primeiro para ocorrer a ATIVAO.
Quando a clula T ativada EFICIENTEMENTE pela APC ocorre imediatamente tumefao da clula
(vira um blasto) e em seguida a PROLIFERAO. Na microscopia, quando ocorre proliferao, as clulas
ficam em forma de "cacho de uva". A proliferao fundamental para aumentar a quantidade de clones
para que seja possvel combater o patgeno.
O 1 e 2 sinais deflagram uma cascata bioqumica cujo objetivo preparar a clula para a mitose.
A mitose induzida por uma citocina produzida pela PRPRIA T chamada IL-2 que agir de maneira
AUTCRINA. A IL-2 se liga ao receptor IL-2R presente na membrana de T, que ativa a proliferao.
OBS: a proliferao que causa o aumento do gnglio linftico - inchao, dor.
O TCR est sempre associado a outros dois tipos de cadeia na membrana, as CD3 e as cadeias
(zeta). Tais cadeias associadas tem a funo de SINALIZAO intracelular, pois percebem a ligao do TCR
com o peptdeo. Essa sinalizao vai culminar na proliferao e na seguida diferenciao.

As molculas associadas, o CD3 e a cadeia , vo perceber que o peptdeo foi reconhecido e vo


deflagrar uma cascata de sinalizao que vai induzir a expresso da cadeia alfa, chamada CD25, que o
receptor de alta afinidade pra IL-2.
Os trs ativadores precisam chegar ao ncleo, se ligar regio promotora de IL e ai a clula vai
sintetizar IL-2. So o AP-1(jun+fos), NF-AT e NF-kB.
Como ns chamamos enzimas que fosforilam? Quinases, e tem gente que fala cinases, a traduo
correta seria cinase, mas eu tambm falo quinase. E uma enzima, uma ase que desfosforila? Fosfatase, ela
remove fosfato. Metila? Metilase. Hidrolisa? Hidrolase. E uma protena que vai ao ncleo liga a um
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Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

promotor e permite a leitura, a transcrio daquele gene em RNA mensageiro e traduzido em protena se
chama trans-ativador.
No caso, elas passam por uma mudana conformacional, o que ns chamamos de ativao
alostrica. Quando o TCR encaixa o complexo MHC peptdeo, essa tem que se encaixar, e como ela tem
que se encaixar existe uma modelagem molecular. E isso vai ser o percebido por essas cadeias que
tambm rodam 30 e expem reas que antes estavam escondidas, no accessveis chamadas de ITAM,
que significa Motivo de Ativao do Imunoreceptor que contm Tirosina. Bioquimicamente falando, so
regies conservadas, presentes nas caudas citoplasmticas das cadeias associadas, CD3 e da cadeia , que
tm nessas sequncias um resduo de tirosina, que um aminocido, conservado. De novo, o que um
ITAM? So regies conservadas que contm tirosina em uma posio conservada e que vai ser
fundamental para que sejam recrutadas vrias vias de sinalizao para que ns tenhamos os trs transativadores (o complexo AP-1, o NF-AP e o NF-kB).
A sinalizao comea com a abertura dos ITAMS, que acontece apenas quando o TCR reconhecer
com alta afinidade o peptdeo que est sendo apresentado. Esses ITAMs so abertos e vo ser
fosforilados, pela enzima LCK (protena tirosina quinase). Ento a protena chamada LCK est presente
constitutivamente na cauda citoplasmtica da molcula CD4 e da molcula CD8. Ento qual o primeiro
evento? Abrir os ITAMs. Qual o segundo evento? Fazer com que a LCK fosforile esses ITAMs.

A LCK encontrada assim, fosforilada ento algum tem que remover esse fosfato. S quando esse
fosfato for removido, que a LCK se dirige at os ITAMs prximos e ento ela fosforila todos os ITAMs.
Ento quem a LCK? uma protena tirosina quinase que vai fosforilar os ITAMs iniciando a cascata.
Como ela encontrada? Inativa. Como que est sua forma inativa? Fosforilada. Como ela ativada?
Desfosforilando. Ento essa molcula chamada CD45, qual a funo dela no complexo de sinalizao?
Remover o fosfato da LCK, liberando esta LCK para que ela possa ento se dirigir aos ITAMs e fosforil-los.
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

A LCK precisa se desprender da cauda da CD4, perdendo um fosfato. A prxima etapa chamar
uma protena tirosina quinase chamada ZAP70, que associada cadeia zeta. A ZAP70 tambm
fosforilada, pela LCK. A ZAP70 estimulada quando fosforilada. Depois dessa etapa, a LCK perde sua
funo. A partir daqui, a cascata guiada pela ZAP70.
A ZAP70 fosforilada ganha atividade enzimtica, recruta LAT (uma protena adaptadora que permite
aproximao de molculas), ela fosforila o LAT para que esse LAT possa trazer para baixo do TCR, a
fosfolipase C. A fosfolipase C vai degradar alguns fosfolipdios da parte interna da membrana celular. A LAT
recruta a fosfolipase C, que vai ser fosforilada pela ZAP70 ganhando atividade enzimtica e agindo em nvel
da camada interna da bicamada de fosfolipdio, especificamente o lipdio PIP2.
Degradando o PIP2, gera IP3 e DAG. O DAG fica preso a membrana (hidrofbico) e IP3 age sobre
canais de clcio, aumentando o fluxo citoplasmtico de clcio. O DAG vai ativar a PKC. O NF-kB est pronto
para ir ao ncleo, o que o impede a cadeia inibidora do NF-kB. Essa cadeia deve ser retirada, para que o
NF-kB v para o ncleo, removida a custa da PKC, que fosforila a cadeia inibitria e se desprende.
A protena adaptadora SOS vai se ligar a uma protena sinalizadora, a protena RAS. uma protena
que liga nucleotdeo, ligada a GDP est inativada, ligada a GTP est ativada. Quando a RAS-GDP se
aproxima da SOS, que est ligada ZAP70, e h ativao alostrica, passando a ser RAS-GTP. O SOS facilita
a troca de fosfato. A RAS-GTP, ativada, age em MAPKs (protenas tirosinas quinases ativadas por
microorganismos e substncias exgenas). Assim, as MAPKs vo ao ncleo e induzem a expresso do Fos.
Enquanto algumas MAPKs induzem Fos, outras vo agir sobre o Jun, que vo fosforilar. O Jun ativo vai para
o ncleo, se une ao Fos e forma o complexo AP-1.
A terceira via: na presena de excesso de clcio, existe uma molcula chamada calmodulina. Ela se
liga ao clcio e, quando fica saturada, h uma protease chamada de calcineurina, fosfatase que depende
de clcio, e no tem capacidade de se ligar diretamente a ele, utilizando a calmodulina para isso. Este
complexo (calmodulina-calcio) ativa a calcineurina, que desfosforila a NF-AT, que vai para o ncleo.
O AP-1+NF-AT+NF-kB se juntam no ncleo e induzem a produo de IL-2.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

SLIDE 24: A cauda citoplasmtica do CD28 possui motivos que permitem a interao com ativadores
da via Ras, MAPKs e a via Vav. Essas vias inibem protenas envolvidas na morte celular programada (ex.:
cbl-b), enquanto induzem protenas anti-apoptticas (ex: bcl-2 e bcl-xl) assim como estabilizam os mRNA
para diferentes citocinas.
A contribuio geral do CD28 fazer com que as vias explicadas sejam mantidas a longo prazo, para
que a produo de IL-2 seja em quantidade satisfatria.
Quando a clula T ativada, ela prolifera e pode executar diferentes funes, dependendo da sua
diferenciao.
A diferenciao depende do terceiro sinal, dado pela APC, geralmente dado em forma de
citocinas. Dependendo da citocina dada pela APC a T, a T vai se diferenciar e desempenhar diferentes
funes.
As clulas T ativadas, que esto proliferando, precisam saber a maquinaria que vo precisar para
atacar adequadamente o patgeno. Essa informao vem atravs do terceiro sinal.
Uma clula Th0 pode se diferenciar em (as TCD4) Th1, Th2, Tr3, Tr1, Th9, Th17.
Se, durante a sinapse imunolgica, o terceiro sinal for IL-12, essa Th0 ativada vai se diferenciar em
Th1. Essa resposta chamada RIC. a mais importante contra todos os patgenos, com exceo de
helmintos. O fentipo Th2 induzido se o terceiro sinal for IL-4. A a Th0 ser Th2, que medeia a RIH contra
vermes.
H ainda a RIS (supressora) que inibe Th1 e Th2. importante para controlar reaes inflamatrias.
Vive majoritariamente em nvel de mucosa, colaborando com B para produzir o anticorpo eleito para
mucosa IgA.
Para Th0 se diferenciar em Tr3 (Th3), TGF-B e IL-2. A IL-2 vem da prpria T, j que a APC no
produz IL-2.
A Tr1, resposta regulatria, induzida por IL-10 e IL-27, inibe Th1, importante para resposta a
bactria encapsulada, induzindo produo de IgG2 e diminuindo inflamao.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Os ltimos trs fentipos tambm seguem esse esquema, a Trn (reguladora natural) que depende
de TGF-B, cortisol e IL-10. H a Th9 que libera IL-9, induzida por TGF-B e IL-4.
A Th17 a resposta imune contra bactrias extracelulares, fungos e DAI. Ela produz muita IL-17,
sendo induzida por IL-23 e IL-1.

Existe uma populao celular T que tem TCR e CD2, mas reconhece PAMP. E PAMP dificilmente
proteico (flagelina por exemplo, e pilina). So chamadas de linfcitos T primitivos.
Essas clulas podem contribuir com o terceiro sinal. Primeira coisa sobre elas que se formam no
fgado e vo para o omento. Segundo: diferente das T clssicas, que circulam, elas so residentes,
colaborando com a imunidade natural local. Existem na mucosa, pele, trato urinrio, etc. Possuem baixa
variabilidade gentica, pois no possuem TdT. Possuem 1 a 3 Vs e poucos J. No passam por seleo
negativa. Algumas delas reconhecem PAMPS (at diretamente, sem processamento), que so antgenos
timo-independentes, e at molculas self (protenas de choque trmico (chaperonas)) que quando
expressadas de forma crnica podem ser reconhecidas por T primitivos. As clulas T primitivas no tem
memria, ento no existe risco de autoimunidade.
Podem reconhecer PAMPS processados pela CD1 (da famlia do MHCI). CD1 no polimrfica, h 5
subtipos apenas (ABCDE), que podem processar PAMPS processados por APC.
Uma terceira via de reconhecimento durante a gestao, pois so majoritrias no tero.
Promovem a aceitao do feto (o TCR reconhece diretamente HLA-G e HLA-E da placenta).

Aula 8 Professora Clo DIFERENCIAO DOS LINFCITOS T CLSSICOS 18/12/2012

A diferenciao deflagrada por um 3 sinal, geralmente citocinas produzidas pela APC. As


diferentes citocinas iro induzir a diferenciao em diferentes fentipos.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

FENTIPO TH1 (Resposta Imune Celular ou RIC)


A principal citocina responsvel IL-12, mas necessrio que a TH0 passe a expressar o receptor
para IL-12. As citocinas (produzidas por clulas da imunidade natural) que fazem com que haja expresso
do IL-12R:

IL-27 produzida por APC, principalmente DC, presentes no local de inflamao. Vai agir nas
clulas NK ou NKT (T primitiva do tipo 6 que tem marcadores similares a NK), via IL-27, que iro produzir
INF-. IL-27 + INF- agem sobre TCD4 e induzem essa clula ao estgio de pr-TH1, que ir ter o IL-12R. A
clula TH1 produz grande quantidade de INF-gama e IL-2. Se no houver a presena de IL-12 essa clula
volta a ser indiferenciada (TH0). O prprio INF-gama vindo da NK e da pr-TH1 age na APC, fazendo com
que ela libere o IL-12, garantindo que a clula passe a ser permanentemente TH1. Para manter o fentipo
funcional tambm necessria a IL-12.

As T primitivas so, majoritariamente, residentes e trabalham junto com a imunidade


natural, principalmente para a diferenciao dos fentipos T clssicos. Muitas dessas T primitivas, ao
reconhecer antgenos, liberam INF-gama, que ir agir nas APCs, induzindo a produo de IL-27 e IL-12.
Tambm pode atuar diretamente no TCD4.

Quando uma clula se diferencia em TH1 produz duas citocinas clssicas, IL-2 e INF-. Essa clula
tem trs funes:

Produz grande quantidade de INF-, aumentando a funo microbicida dos fagcitos. (As
armas dos fagcitos: RIO, xido ntrico e enzimas lisossomais.) Isso faz com que sejamos capazes de matar
muitos patgenos, mas alguns tm mecanismos de escape. O INF- liberado apenas para as clulas que
esto fagocitando o patgeno, esse controle feito atravs do MHC. Se a clula tiver MHC com peptdeo
para qual TH1 especfico, ele libera o INF- para a APC. Em alguns casos, nos quais a ao de uma clula
fagoctica no efetiva, ocorre fuso de diversas clulas, formando a clula gigante multinucleada, com o
objetivo de eliminar o patgeno. Se, mesmo assim, ele persiste, pode ocorrer um granuloma, podendo
levar a perda de funo do tecido adjacente. No centro do granuloma existem diversos macrfagos e
clulas gigantes, que esto cercadas por linfcitos, predominantemente, TH1; numa ltima etapa, ocorre o
recrutamento de fibroblastos, que iro produzir colgeno, isolando essa rea. O teste do PPD (teste para
avaliar a resposta contra o BK, por exemplo) pode mimetizar essa reao. Essa reao chamada de
hipersensibilidade do tipo tardio (DTH).

O INF- induz linfcito B a produzir anticorpos. Quando a DC chega ao gnglio linftico, vinda
do local de inflamao, colabora com T, que foram ativadas, iro se proliferar. Tambm chega ao gnglio a
drenagem do edema contendo citocinas, pedaos de complemento, pedaos de patgeno, patgeno
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

inteiro; ento B vai ter a chance de reconhecer os seus antgenos. A clula B reconhece o antgeno via BCR,
esse complexo internalizado e, ento, ir apresentar esse antgeno, agindo como APC para T. Assim, T ir
auxiliar B a produzir anticorpos devido ao de determinadas citocinas. O primeiro anticorpo a ser
apresentado IgM, ele denuncia a fase aguda (pegadinha: paciente com autoimunidade no incio da
doena tem uma reao inflamatria muito intensa, podendo ter excesso de IgM para diferentes
patgenos). A troca de cadeia vai depender do fentipo de T. O INF- leva B a produzir IgG1 e IgG3
(DECORAR). Os anticorpos chegam ao local de infeco e os plasmcitos ficam nos rgo linfides
secundrios. Quando se tem plasmcitos nos tecidos geralmente autoimunidade.

Ativao de TCD8 em CTL (linfcito T citotxico ou clula T assassina), mediada pela IL-2
produzida em grande quantidade pelo TH1. A CTL vai ao local de infeco e comea a produzir um arsenal
de protenas lticas, so clulas citotxicas. Uma dessas protenas a perforina, que uma molcula
anfiptica que, na presena de excesso de clcio, perfuram as membranas de fosfolipdios. Esse canal
gerado ser a via de entrada de outras protenas desse arsenal, as granzinas, que iro matar a clula e,
junto, o patgeno. O linfcito TCD8 ir agir sobre as clulas que apresentem peptdeos especficos para o
seu TCR. Essa resposta predominantemente contra vrus, mas age contra qualquer patgeno presente no
citoplasma. As CTLs tambm intensificam a resposta inflamatria produzindo INF- e TNF-.

OBS: Fatores nucleares de diferenciao: para que uma clula se determine em um fentipo
necessrio que os genes para as suas citocinas caractersticas sejam sempre traduzidos. Esse fator que age
nos promotores desses genes so os fatores nucleares de diferenciao. Eles mantm determinados genes
sendo transcritos e impede a transcrio de outros. necessrio que se conhea esse fator para se
identificar uma nova linhagem.

FENTIPO TH17
Residem principalmente nas mucosas. Produz IL-17. Est muito relacionada com as doenas
autoimunes (LES, AR e Esclerose Mltipla, por exemplo). Tambm imperativa na resposta contra
bactrias extracelulares e fungos. Pessoas que tm problemas em transativadores para o TH17,
geralmente expressam TH2 (fentipo alrgico: asma, bronquite, rinite...).
Uma TH0 vai se transformar com em uma clula pr-TH17 e, depois, numa TH17 verdadeira. O
terceiro sinal o trio IL-1, IL-6 e IL-23, produzidas pela APC / DC. A IL-6 e a IL-1 fazem com que a clula
TH0 passe a expressar o receptor para IL-23 (as T virgens, geralmente, no expressam o IL-23R), que a
citocina mais importante para a determinao do fentipo TH17. Essa clula diferenciada produz a
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

quimiocina CCL20 e as citocinas IL-17 (que IL-17A), IL-17F, IL-22 e IL-21. O fator nuclear de transcrio o
ROR- -t.

IL-17: induz, no local de infeco, macrfagos e clulas epiteliais a produzirem IL-8, atraindo
os neutrfilos, que iro executar o mecanismo de proteo, agindo principalmente em bactrias
extracelulares e fungos.

IL-22: age nas clulas epiteliais aumentando sua proliferao, a produo de muco e a
produo de protenas de ocluso, que so os mecanismos de resistncia da mucosa, diminuindo a
translocao de patgeno.

IL-21: produzida por TH17, tem efeito autcrino, favorecendo a manuteno desse fentipo
junto com IL-23. Age em linfcito B, estimulando a diferenciao em plasmcitos, que podero produzir
todas as classes de anticorpo, menos IgE. Recruta e ativa fibroblasto a liberar alguns membros da famlia
metaloproteinases de matriz (MMP), com o objetivo de matar bactrias e fungos, mas que so
responsveis pelos danos teciduais na autoimunidade.

CCL20: uma quimiocina que atrai outras clulas com fentipo TH17. O receptor para ela
o CCR6 ( o marcador que define TH17).
um fentipo que produz uma grande reao inflamatria; ento, se no estiver regulada, ir gerar
autoimunidade.
Uma resposta contra bactria extracelular e fungos , predominantemente, por TH17, mas tem
auxlio de TH1. A TH1 auxilia porque produz a INF- que atua aumentando o poder de fagcitos, como o
neutrfilo e estimula a produzir anticorpos. IL-2 induz ativao de CTL, que pode agir sobre clulas que
foram alteradas.

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

FENTIPO TH2
O terceiro sinal da APC IL-4. Ela secreta IL-3, IL-4, IL-5, IL-6 e IL-13. Estimula B, eosinfilo e
mastcito. So recrutadas para agir contra helmintos.

IL-4 e IL-13: induzem B a produzir IgE;

IL-5: vai medula ssea e induz a produo de maior quantidade de eosinfilo;

IL-6: amplifica a produo de anticorpo de todas as classes (no cai! \o/);

IL-3: ativa os mastcitos, estimulando a sua multiplicao.

Mastcitos e eosinfilos se ligam a IgE, que quando se ligam a antgeno estimula a degranulao da
clula. Mastcitos estocam histamina. Eosinfilos estocam enzimas. No precisa mencionar os produtos
de degranulao na P1.

Aula 9 Professora Vera INDUO DE RESPOSTA IMUNE


HUMORAL ESPECFICA 07/01/2013
Linfcito B ativado dentro de tecido linfide secundrio. A resposta que B oferece a produo
de anticorpos. A maneira como produzido o anticorpo varia de acordo com a estrutura qumica do
antgeno (timo-dependente e timo-independente), j que pode haver o envolvimento ou no de linfcitos
T nesta resposta imune.
O anticorpo secretado tem a mesma estrutura bsica do que a Ig de membrana, mas sem a regio
que o prende membrana. Quando o RNAm sofre processamento decorrente da ativao, acarreta em
mudana da cauda do BCR / Ig de membrana. Quando B no est ativado, a cauda hidrofbica e fica
aderida membrana. Aps a ativao e modulao do RNAm, no se realiza mais a transcrio destes
aminocidos hidrofbicos, e a Ig secretada para o meio externo, ao invs de se ancorar membrana.
A Ig de membrana vem sempre associada no covalentemente s cadeias Ig e Ig, que tem a
funo de transduzir o sinal gerado pela ligao do antgeno ao BCR. Nas suas pores citoplasmticas, Ig
e Ig apresentam domnios ITAMS.
ANTGENO TIMO-INDEPENDENTE (por linfcito B1 e B da ZM)
Antgeno no protico, com eptopos repetitivos e idnticos. Ao se ligarem os receptores aos
eptopos simultaneamente, h aproximao dos BCRs na membrana. Consequentemente, as cadeias Ig e
Ig de cada complexo BCR tambm se aproximam. Na poro citoplasmtica, h uma famlia de quinases
Src (ex: Lyn, Fyn, Blk) que fosforilam os ITAMS. Uma vez fosforilados, so stios de recrutamento da
protena Syk. A Syk presa Ig e Ig fica passvel a fosforilao pelas Src, para ser ativada. A fosfolipase C
ativada (fosforilada pela Syk) e degrada fosfolipdeo de membrana fosfoinositol trifosfato, gerando
diacilglicerol (DAG) e inositol trifosfato (PI3). O PI3 fica solvel e aumenta o influxo de clcio intracelular,
que ativa DAG. O diacilglicerol continua preso membrana e ativa PKC. Em ltima anlise, h ativao de
fatores de transcrio envolvidos na transformao do linfcito B. Paralelamente, tambm ocorre a
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

ativao de SOS, uma trocadora de GDP por GTP, que age nas protenas Ras e Rac, ativando-as. Elas, ento,
ativam as vias paralelas da ERK e da JNK, que tambm levam ativao de fatores de transcrio (NFAT,
NF-B, AP-1).

Para que o processo seja eficiente, atravs da ampliao da cascata descrita, necessria a
fosforilao de Syk e PI3-quinase. Isso ocorre quando se envolve o co-receptor do linfcito B (CR2, tambm
chamado de CD21, que sempre est associado ao CD19, que est associado, por sua vez, ao CD81). CR2
receptor de complemento, que reconhece C3d (originrio da quebra de C3b). Ele no transmite sinal, mas
est associado no covalentemente a CD19 que tem, na sua cauda citoplasmtica, domnios ITAM. O papel
desses componentes pode aumentar em 100x a fora da resposta.
H uma populao de linfcito B que expressa esse complexo co-receptor em grande quantidade, a
B de ZM.
ANTGENO TIMO-DEPENDENTE (por linfcito B2)
Antgenos proticos, de pequeno tamanho, que no tem a capacidade de interagir com diversos
BCRs ao mesmo tempo. A interao do antgeno com a Ig acarreta em internalizao do imunocomplexo,
seu processamento, a apresentao por MHCII. Ocorre aumento da expresso de MHC e B7,
potencializando sua capacidade de APC. Assim, com o processamento do antgeno, B estar equipado para
apresentar peptdeos para T, sendo eficientemente ativado.
T, aps ativado por DC, passa a expressar CD40L, e est preparado para sair do tecido linfide
guiado pelo gradiente de esfingosina1-fosfato. O linfcito T efetor diminui a expresso de CCR7 (receptor
para CCL19 e CCL21), o que diminui a tendncia para ficar inerte na regio de T. Em contrapartida,
aumenta CXCR5, migrando em direo ao folculo. Enquanto isso, B, que j reconheceu o antgeno, altera
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

expresso de receptores de quimiocina. O B, que reconhece antgeno, diminui CXCR5 e aumenta CCR7,
tendendo a migrar para fora do folculo. Assim, aumenta-se a chance de encontro entre esses dois tipos de
clulas, ambas especficas para o mesmo antgeno, na borda do folculo, mas podendo reconhecer
eptopos diferentes.
T efetor, ento, pode comear a produo de citocinas relacionadas ao fentipo que ele apresentar.
Nesse momento, h a cooperao entre os linfcitos T e B, atravs da apresentao de antgeno de B para
T (segundo momento de reconhecimento de antgeno por T) e da interao de CD40L (T) e CD40 (B). B vai
comear a produzir, ento, anticorpos, passando antes pelos processos de proliferao (em um foco extra
folicular e no to intensa) e diferenciao (em plasmcito). a fase inicial da resposta humoral. Leva em
mdia 3 dias e B secretar, predominantemente, IgM (que j estava presente em sua membrana). IgD no
secretada e h baixa produo de IgG. IgM caracteriza a fase aguda de uma infeco.

Parte de B no prolifera e se diferencia, mas migra de volta para o folculo, gerando o centro
germinativo. Dentro do folculo, B continua o processo de proliferao e diferenciao em plasmcitos. O
centro germinativo distinguvel histologicamente. H a zona escura (centroblastos e centrcitos), seguida
pela zona clara (FDC clulas dendrticas foliculares e linfcito Th folicular) e a zona do manto (linfcito T
folicular e FDC). Centroblastos so os B originais que esto se proliferando. Centrcitos j esgotaram o
processo de proliferao e esto em processo de diferenciao. FDC, no so iguais as DC que vimos at
agora, pois no apresentam antgenos via MHC.
Linfcito T folicular: a interao com as clulas B (CD40, CD28, etc) faz com que T passe a expressar
o fator de transcrio Bcl6, alm da forma estvel do receptor CXCR5. A expresso de Bcl6 regula a
produo de IL-21, que essencial para a regulao do centro germinativo. Ento, o linfcito T folicular
importante para fornecer sinais via CD40 e via IL-21 para a clula B sobreviver e diferenciar-se.
Centro germinativo palco para (1) hipermutao somtica ou maturao da afinidade da Ig pelo
antgeno; (2) troca de classe de Ig; (3) plasmcitos de vida longa e; (4) clulas de memria.
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

OBS: Os plasmcitos foliculares tem uma diferena dos gerados no foco extra-folicular. O gerado no
centro germinativo tem vida longa, o gerado no foco extra-folicular de vida curta.
Uma parte de B se diferencia em clulas de memria. Uma parte dessas que se diferenciaram fica
confinada ao tecido linfide e a outra parte circulante.
Hipermutao somtica e troca de classe so eventos que dependem essencialmente do CD40 e
CD40L. A deficincia nesse processo leva a uma sndrome de hiper IgM, uma imunodeficincia em que no
h troca de cadeia pesada da Ig.
A ligao do CD40 induz a ativao de AID (deaminase induzida pela ativao), que deamina
citosina, transformando-a em uracila. Isso suficiente para causar modificaes relevantes. O processo de
proliferao que ocorre intensamente no centro germinativo passvel de mutaes, em uma taxa muito
alta. Essa mutao ocorre na sequncia de DNA que codifica o domnio varivel. So 3 subregies dentro
do domnio varivel, que so chamados regies de alta complementariedade com o antgeno (entra mais
em contato com o antgeno), chamadas CDR. So essas 3 regies que mais sofrem mutao. A AID coloca
uracila no lugar de citosina no DNA, e isso no se sustenta, fazendo com que a uracila seja transformada
em timina. Esse o tipo de mutao mais comum, com a troca de C por T. Tambm pode ocorrer a
remoo da uracila e, para ocupar seu espao, h a substituio por qualquer outra base. Assim, so
geradas as mutaes em CDR.
Hipermutao somtica: Essas mutaes geram opes que podem ter melhor
complementariedade / afinidade pelo antgeno. As FDC possuem, em sua membrana, receptores para o
complemento, receptores para Fc de Ig. O antgeno pode estar ligado a anticorpos ou ao complemento,
ficando preso superfcie da FDC, ou seja, no uma apresentao via MHC. A T folicular faz com que B
aumente sua expresso de protenas apoptticas. Caso haja o reconhecimento do antgeno pelo BCR,
haver o aumento da expresso de protenas anti-apoptticas. Assim, enquanto isso ocorrer, B fica livre da
apoptose. medida que se trabalha a resposta, h diminuio da concentrao de antgenos disponveis
no centro germinativo. Assim, h uma seleo positiva das clulas B que tenham altssima afinidade pelo
antgeno.
A mutao ocorre tanto na resposta primria, quanto nas subsequentes. A cada vez que o
organismo for atingido por um mesmo antgeno, mais especfica ser a resposta humoral do SI.
Coeficiente de dissociao: a medida da facilidade de desligar um anticorpo do antgeno. Quanto
mais difcil desligar, maior a afinidade pelo antgeno. Quanto maior a afinidade, menor a constante de
dissociao.
TROCA DE CLASSE DE Ig
Quando B entra em processo de ativao, continua sintetizando IgM, s que solvel. Sem o sinal de
T (ou ainda que tenha, mas que seja na fase inicial), o que temos IgM. O linfcito refina sua afinidade
pelo antgeno atravs de hipermutao somtica e, com afinidade maior, pode produzir uma classe
diferente de Ig. Isso acontece atravs da ativao por T e guiado pela citocina secretada pelo fentipo de T.
No DNA, temos em sequncia os genes VDJ; regio promotora e codificante para cadeia (IgM);
regio promotora e codificante para cadeia (IgA); regio promotora e codifi cante para cadeia (IgG);

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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

regio promotora e codificante para cadeia (IgE). O que o linfcito sempre transcreve VDJ e o que est
diretamente adjacente a ele, que .
Quando h ativao de B por T, ocorre ativao de fatores de transcrio, dependentes das
citocinas que so produzidas pelo fentipo de T. O fator de transcrio uma protena que entra no ncleo
e estimula regies promotoras. A partir da sequncia de recombinao adjacente, a fita se abre,
comeando onde se inicia e terminando antes da cadeia pesada que passar a ser expressada, o que
determinado pelo fator de transcrio. Isso gera um loop onde entra AID, que troca C por U. As regies de
troca so riqussimas em citosina e guanina. Quando troca a base por U, a glicosidase remove as uracilas e
a endonuclease cliva os stios sem base. Por um mecanismo, quando a endonuclease corta a fita no inicio e
no fim do loop, tambm corta a fita molde, que serve de substrato para o mRNA. A sequncia de
nucleotdeos clivada, que codificava IgM, eliminada e as fitas que ficaram com as extremidades livres se
unem.
Aproxima-se outra regio de troca, relacionada outra cadeia pesada do VDJ. Assim, B se diferencia
em plasmcito que secreta Ig dessa nova classe.

Resposta mediada por Th1: produz preferencialmente IgG, depois de ter produzido IgM.
O fentipo de T vai induzir a produo da classe de Ig mais adequada, de acordo com suas funes.
Th1 produz IFN-, que induz IgG1 e IgG3. Th2 induz troca para IgE atravs de IL -4. Tr1 produz IL-10, que
induz IgG2. Th3 produz TGF-, que induz IgA.
Destino dos plasmcitos. Os de vida curta permanecem na polpa vermelha ou cordes medulares
por pouco tempo, morrendo. Os de vida longa migram, de acordo com sua origem: plasmcitos originados
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

dos linfonodos perifricos e bao vo para a medula ssea; enquanto que os originados nos linfonodos
mesentricos e nas placas de Peyer, para a lmina prpria.
Cada leva de plasmcitos produzir anticorpos mais afins pelo antgeno, pelo processo de seleo
que sofre no centro germinativo.

10 a 15 dias aps a entrada de um patgeno no organismo identificada a quantidade mxima de


anticorpos contra aquele patgeno e seus antgenos. Em uma segunda infeco, em menos de uma
semana h o pico de produo. Isso devido estimulao das clulas B de memria. Alm disso, h
anticorpos prprios j circulantes, que so secretados pelos plasmcitos de memria.

Comparao entre as respostas primria e secundria

Propriedade
Resposta por clula B
Incio da produo de anticorpo
Pico de anticorpos
Quantidade de anticorpo
produzido durante o pico
Ig produzida
Tipo de antgeno
Afinidade dos anticorpos

Resposta primria
Virgem
4-7 dias
7-10 dias

Varia dependendo do antgeno


IgM predomina no incio
Todos
Menor

Resposta secundria
De memria
1-3 dias
3-5 dias
De 100 a 1000 vezes maior que na
resposta primria
IgG predomina
Timo dependente
Maior

Clula de memria possui elevada expresso de integrinas, Igs de membrana, de protenas antiapoptticas e conseguem proliferar (autorrenovvel).
Em algumas doenas, como a toxoplasmose, a IgM identificvel por tanto tempo, que no
condizente com o quadro de infeco aguda. Para esses casos, pesquisa-se a afinidade da IgG com o
antgeno, atravs do coeficiente de dissociao. Quanto maior o coeficiente de dissociao, menor a
afinidade e a menos tempo ocorreu infeco.
Classicamente, resposta timo-independente produz resposta que no gera clula de memria. Mas
pode ser induzida. Primeiro, liga-se o antgeno timo independente covalentemente a uma protena. O
complexo antgeno-protena, chamado de hapteno-carreador, usado para induzir resposta timo
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

dependente. Ento, o clone de B que tenha BCR que reconhece o antgeno, vai internalizar o complexo
todo, que ir sofrer processamento. Como B uma APC, apresentar protena para T. Logo, T e B vo
reconhecer eptopos diferentes de um mesmo antgeno, T o antgeno protico e B o polissacardeo. Essa
estratgia serve para imunizao ativa, principalmente contra microorganismos capsulados (como
pneumococo).

O B folicular a populao que produz resposta para antgeno timo dependente. Ele internaliza,
processa e apresenta para TCD4. Ele favorecido pela arquitetura do tecido linfoide, uma vez que T
ativado e B, que tenha reconhecido antgeno, vo migrar na direo um do outro.
O B da ZM responde contra antgeno timo dependente, junto com B1. Ele apresenta elevada
expresso de receptor para CD21/CD19 (aps 2 anos de idade). O sangue percorre mais lentamente a zona
marginal, ento a chance do antgeno ser reconhecido aumenta. Assim, tanto B da ZM quanto B1 possuem
menor variabilidade de BCR e caractersticas de resposta inata, como a resposta mais rpida. As crianas
at 2 anos esto mais suscetveis a infeces por bactrias capsuladas, porque ainda no expressam
elevadas concentraes dos receptores, ou seja, so as que devem receber vacinas que usem o princpio
do hapteno-carreador.
Esse linfcito B da ZM tem marcador CD27+ (marcador de memria), podendo ser chamado de
linfcito B IgM de memria. No expressam AID, portanto a troca de classe e a hipermutao somtica so
menores, mas ainda conseguem fazer.
B1 produzido no fgado durante o perodo fetal e perinatal, ocupando a cavidade peritoneal e a
lmina prpria, tem diversidade restrita de receptor (TCR) e auto-renovvel. Responde a antgenos timo
independentes provenientes principalmente da flora bacteriana, produzindo IgM e IgG3 de baixa
afinidade, podendo realizar ligao cruzada (ou seja, so polireativos). Suas Igs so chamadas de
anticorpos naturais, porque so produzidos contra antgenos naturais, da flora. Esses antgenos so muito
semelhantes aos da superfcie dos eritrcitos, sendo eles que geram resposta contra os antgenos dos
grupos sanguneos (anticorpos Anti - antgeno do grupo sanguneo).
Breg: nova populao que ainda no foi toda estudada. Identificada pelos marcadores CD38, CD27,
CD24, CD5. Produzem IL-10, que tem carter imunossupressor. Inibe proliferao de Th, inibe
diferenciao em Th1, induz Treg, inibe fortemente as atividades microbicidas de macrfagos e moncitos.

Aula 10 Professora Vera ANTICORPOS: ESTRUTURA E FUNO 08/01/2013

ESTRUTURA
Anticorpo uma glicoprotena solvel. Na forma no solvel o receptor de antgeno do linfcito
B, associado Ig e Ig. A molcula formada por dois pares de cadeias idnticas: um de cadeia pesada e
outro de cadeia leve. A associao entre as cadeias feita por pontos de dissulfeto. O anticorpo
subdividido em domnios globulares, numerados a partir de N-terminal (regio Fab). Na cadeia pesada, os
domnios constantes variam de acordo com a classe, podendo ter 3 ou 4. Possuem dois pares de domnios
variveis, sendo cada um formado por uma cadeia pesada e uma cadeia leve.
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Carolina Yeh, Ceclia Isicke e Viviane Paiva

Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

Em funo da estrutura, os domnios constantes so classificados em 5 isotipos diferentes. A


variao pode ser no nmero de domnios, as chamadas pontes de dissulfetos. As classes ainda podem ser
divididas em subclasses, IgA tem 2 (IgA 1 e IgA2) e IgG tem 4 (IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4).
As cadeias leves podem ser de duas classes, escolhidas aleatoriamente, mas que se mantm numa
mesma proporo: (60%) e (40%). Quando o indivduo tem alguma alterao em que um clone se
multiplica descontroladamente, h uma modificao dessa proporo.
Existem regies hipervariveis, tanto na cadeia pesada quanto na leve, na regio varivel, so
chamados de CDR. O CDR3 est codificada pelas junes que ocorrem entre V-J, na cadeia leve, e V-D e D-J,
na cadeia pesada.
Anticorpo uma molcula antignica, com eptopos em diferentes posies da sua estrutura.
Dependendo da posio do eptopo, ele recebe uma nomenclatura. Determinantes isotpicos so os
encontrados na estrutura do domnio constante da cadeia pesada. Essa caracterstica antignica
observada quando as imunoglobulinas so diferentes de indivduos de espcies diferentes. Com relao s
cadeias leves: atravs de um anticorpo anti-cadeia e anti-cadeia que possvel quantificar a
proporo entre as duas. Essa caracterstica antignica muito importante para realizao de pesquisas e
para diagnsticos.
Existem, tambm, determinantes alotpicos. Devido a pequenas diferenas allicas, de
polimorfismo, entre as cadeias pesadas da mesma classe de Ig de diferentes indivduos da mesma espcie,
possvel gerar anticorpos. Isso pode acontecer em casos de transplante, inclusive de sangue, mas no
comum.
Por fim, os determinantes idiotpicos, os quais esto presentes na regio hipervarivel (CDR). So
formados anticorpos especficos contra a estrutura conformacional formada pelos domnios variveis das
cadeias leves e pesadas, mais especificamente contra CDR. Existe a Teoria da rede anti-idioptpica: esse
mecanismo de formar anticorpos contra os domnios variveis um dos processos de regulao do
processo inflamatrio, produzido pela ligao do anticorpo com o antgeno. Esses anticorpos antiidiotpicos so valiosos para RI contra neoplasias, como a leucemia, j que vo se ligar ao BCR do linfcito
B, induzindo a citotoxicidade dessa clula que est se multiplicando descontroladamente.

Algumas Ig so produzidas numa forma multimrica, e no como monmero. Isso acontece com a
IgA e IgM. IgA est presente na forma monomrica na circulao, mais comumente est presente nas
secrees como um dmero, e tambm pode ser apresentada como trmero. IgM sempre secretada na
forma de pentmero.

Transcitose (transporte de imunoglobulina pelo epitlio). A IgA secretada pelos plasmcitos da


lmina prpria se difunde pelo meio extracelular. Na zona basal das clulas epiteliais da mucosa, ela
encontra um receptor especfico para ela, chamado de poli-Ig. A interao sinaliza para que o complexo Igreceptor seja internalizado numa vescula, que ir trafegar pelo citoplasma at chegar zona apical, onde
se funde membrana e libera a IgA ligada a um fragmento do receptor, chamado de componente secretor,
que ir protege-la contra a degradao. Esse processo tambm possibilita a presena de IgA na lgrima, no
leite materno ( um processo de imunizao passiva). IgA o anticorpo mais produzido, mas est em baixa
quantidade na circulao, devido eficincia desse processo que a transfere para as mucosas.
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Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

A IgG tambm passvel de transporte atravs do epitlio, mas ele feito atravs de outro
receptor, chamado de FcRn (Rn de recm -nato). Ele est presente no epitlio e no endotlio, sendo
encontrado, tambm, na placenta, possibilitando a transferncia da IgG materna para o feto atravs da
placenta, fazendo com que a criana quando nasce tenha a mesma qualidade e a mesma quantidade de
IgG que a me. A IgG tambm est presente no leite, em quantidade muito menor que IgA, mas
necessrio que ela seja absorvida no intestino, o que possvel porque esse receptor tambm est
presente na mucosa intestinal. Alm disso, esse receptor confere uma maior meia-vida IgG, porque eles
captam a IgG do sangue e a transportam para o tecido, impedindo sua degradao junto com as outras
protenas sanguneas. Depois, IgG retorna a circulao e esse processo vai se repetindo. IgG o anticorpo
com maior meia-vida.

As Ig tem uma regio em C1 e C2 (domnio constante 1 e 2) chamada de regio de dobradia, que


possibilita uma mobilidade do ngulo formado pelas regies Fab, que pode chegar a 90. Isso favorece a
ligao da Ig a mais de um antgeno ao mesmo tempo.
Afinidade: fora de reao com que um nico domnio varivel consegue se prender ao eptopo.
Quanto maior a complementariedade do stio de ligao com o antgeno, maior a afinidade.
Avidez: medida da estabilidade geral do complexo anticorpo-antgeno. A IgG tem baixa afinidade
pelo antgeno, mas compensa isso atravs da alta avidez que possui por ser um anticorpo multimrico (vai
ter 10 stios de ligao antgeno-anticorpo).

Existe uma protena chamada de papana que age na regio de dobradia e quebra a ligao,
separando a Ig em trs partes, dois Fab (tem funo efetora, reconhece o antgeno) e um Fc (funo
estrutural, identifica o tipo de anticorpo). Existe outra protena, chamada pepsina que age na regio de
dobradia tambm, mas digerem parte do Fc e mantm as duas Fab ligadas.
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Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

FUNO EFETORA

FUNES QUE NO DEPENDE DE CLULAS (So geradas pelo prprio anticorpo, sem auxlio celular.)

Neutralizao
O anticorpo bloqueia fisicamente molculas do patgeno ou da toxina que interagem com a clula.
Sem interao, no h infeco ou ao txica. So necessrios anticorpos de alta afinidade para essa
funo, que realizada principalmente por IgA e IgG.

Ativao da via clssica do complemento


Acontece quando h anticorpos IgG1, IgG3 e IgM ligados a uma superfcie antignica. A poro Fc
fica livre para a ligao de C1, que homologa a protena ligadora de manose da via das lectinas. Tem a
forma de um guarda-chuva: com domnios globulares nas extremidades que interagem com a poro Fc.
Em C1, h a associao de C1q, que se liga a poro Fc, com C1r e C1s, que so subunidades enzimticas
ativadas atravs da ligao de C1q ao anticorpo. Essas pores enzimticas agem em C4 e a ativao segue
igual via das lectinas.
Por que o complemento no ativado a todo o momento, j que sempre h anticorpo e
complemento circulantes? Para a ativao da via necessrio que C1q se ligue a mais de um anticorpo ao
mesmo tempo, o que no acontece normalmente na circulao. necessrio que a Ig esteja ligada ao
antgeno. Alm disso, para IgM isso no ocorre, mesmo sendo um pentmero, porque, na sua
conformao circulante, os monmeros esto ligados de forma que no permite a ligao com todas as
pores Fc ao mesmo tempo. Isso s possvel para IgM quando ela est ligada ao antgeno, porque ela
sofre uma mudana conformacional, expondo os domnios Fc.

FUNES QUE DEPENDEM DE OUTRAS CLULAS (Essas clulas possuem receptores de membrana
capazes de reconhecer a funo Fc do anticorpo. Alguns desses receptores tm funo inibitria, mas ser
abordada em outra aula).

Opsonizao
Fagcitos possuem receptores FcRI, ou seja, vai se ligar a IgG, mais especificamente IgG1 e IgG3. O
receptor induz a internalizao do antgeno ligado IgG. A sua expresso induzida por INF-, que a
citocina produzida por Th1. INF- induz linfcito B a produzir IgG1 e IgG3.

ADCC (citotoxicidade celular dependente de anticorpo)


O receptor CD16 expresso principalmente por clula NK. Quando ela reconhece a poro Fc de
vrios IgG simultaneamente (IgG1 e IgG3), ocorre uma aproximao dos receptores, que induz a
sinalizao intracelular. Isso s acontece quando IgG est ligada ao antgeno. Ela vai ter uma funo
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Imuno (Prova 1)

Segundo semestre de 2012

efetora citotxica como a do CTL, com perforinas e granzinas. Em caso de clulas infectadas que tenham
molculas do patgeno, os anticorpos se ligam a essas molculas, permitindo a ao de NK.

ADCC-like
Funo semelhante a ADCC, mas produzida por eosinfilo. Ele reconhece a poro Fc de IgG atravs
do receptor CD32. Essa ligao vai estimular a degranulao, liberando protena catinica eosinoflica e
protena bsica principal. Essa ao ocorre sobre helmintos.

Degranulao de mastcitos e basfilos


Eles possuem receptor de altssima afinidade para IgE, o FcRI. IgE produzida em maior
quantidade em infeco helmntica e alergias. Qualquer IgE que produzida vai ficando ligado a essas
clulas. S ocorre ativao e consequente degranulao, quando h a aproximao dos receptores, o que
acontece quando as IgE se ligam a um antgeno. Quando ativado, ocorre a liberao dos grnulos e uma
maior produo de mediadores lipdicos, citocinas e histamina.

PROPRIEDADES GERAIS DAS CLASSES DE ANTICORPOS


IgG maior prevalncia nos tecidos e sangue; tem maior meia-vida; ativador do complemento;
responsvel pelo mecanismo de ADCC
IgA proteo para os recm-nascidos; anticorpo produzido em maior quantidade, transportado
com alto grau de eficincia para secrees e mucosas, na forma de dmero; presente como monmero no
sangue.
IgM pentmero; dez stios de ligao ao antgeno; primeiro a ser sintetizado em resposta
primria; demasiado grande para a placenta; no tem grande especificidade; melhor ativador do
complemento
IgD pequenas quantidades no soro; receptor de ativao de clulas B.
IgE estimular a resposta inflamatria; mediador da anafilaxia, asma e alergias; relacionado a
resposta de helmintos.

PERGUNTA CLSSICA
Uma grvida, que entre em contato com uma criana com rubola, como saber se houve infeco e
se o feto tambm foi afetado? Essa me no sabe se teve rubola na infncia. colhido o sangue do feto e
feita uma sorologia. encontrado IgG. O que falar para a me?
No possvel garantir nada. Essa IgG pode ser da me, se ela foi infectada, o que ela no sabe. Se
encontrado IgM no sangue do feto ele foi infectado, j que essa classe no passa pela placenta.

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