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2 edio
Andrea Thompson Da Poian
Debora Foguel
Marlvia Dansa Petretski
Olga Lima Tavares Machado
Bioqumica II
Bioqumica II
Volume 2 - Mdulos 4, 5, 6 e 7 Andrea Thompson Da Poian
2a edio
Debora Foguel
Marlvia Dansa Petretski
Olga Lima Tavares Machado
Apoio:
Fundao Cecierj / Consrcio Cederj
Rua Visconde de Niteri, 1364 Mangueira Rio de Janeiro, RJ CEP 20943-001
Tel.: (21) 2299-4565 Fax: (21) 2568-0725
Presidente
Masako Oya Masuda
Material Didtico
ELABORAO DE CONTEDO Departamento de Produo
Andrea Thompson Da Poian
Debora Foguel EDITORA COORDENAO DE
Marlvia Dansa Petretski Tereza Queiroz ILUSTRAO
Olga Lima Tavares Machado Eduardo Bordoni
COORDENAO EDITORIAL
COORDENAO E REVISO Jane Castellani ILUSTRAO
Ana Tereza de andrade Jefferson Caador
REVISO TIPOGRFICA
Salmo Dansa
DESIGN INSTRUCIONAL E REVISO Jane Castellani
Sami Souza
Alexandre Rodrigues Alves Ktia Ferreira dos Santos
Carmen Irene Correia de Oliveira CAPA
COORDENAO DE
Jos Meyohas Eduardo Bordoni
PRODUO
REVISO TCNICA Jorge Moura PRODUO GRFICA
Marta Abdala Andra Dias Fies
PROGRAMAO VISUAL
Fbio Rapello Alencar
Equipe CEDERJ
Governador
Srgio Cabral Filho
Universidades Consorciadas
UENF - UNIVERSIDADE ESTADUAL DO UFRJ - UNIVERSIDADE FEDERAL DO
NORTE FLUMINENSE DARCY RIBEIRO RIO DE JANEIRO
Reitor: Almy Junior Cordeiro de Carvalho Reitor: Alosio Teixeira
SUMRIO Mdulo 4
Aula 12 - Respirao celular ____________________________________ 7
Aula 13 - Ciclo de Krebs - Parte 1 ______________________________ 17
Aula 14 - Ciclo de Krebs - Parte 2 ______________________________ 29
Aula 15 - Metabolismo de carboidratos I _________________________ 51
Aula 16 - Metabolismo de carboidratos II ________________________ 65
Mdulo 5
Aula 17 - A oxidao dos aminocidos e a produo de uria _________ 83
Aula 18 - Ciclo da uria______________________________________ 95
Aula 19 - Metabolismo de aminocidos ________________________ 103
Mdulo 6
Aulas 20 / 21 - Degradao de lipdeos _______________________ 115
Aulas 22 / 23 - Sntese de cidos graxos _______________________ 135
Mdulo 7
Aula 24 - Via das pentoses-fosfato ____________________________ 149
Aula 25 - Degradao do glicognio ___________________________ 159
Aula 26 - Biossntese do glicognio ___________________________ 167
Aula 27 - Regulao do metabolismo do glicognio _______________ 175
Aula 28 - Introduo gliconeognese _________________________ 187
Aula 29 - A via gliconeognica _______________________________ 199
Aula 30 - Regulao da gliconeognese ________________________ 211
Aula 31 - Introduo aos hormnios ___________________________ 223
Aula 32 - Glucagon e adrenalina _____________________________ 235
Aula 33 - Insulina e glicocorticides ___________________________ 249
8 CEDERJ
12 MDULO 4
Surgiu, ento, em 1760, a Teoria do Flogstico ou Princpio do
AULA
Fogo, postulada por Georg Ernst Sthal, que unificava o pensamento da
poca. Esta teoria propunha que todo corpo suscetvel combusto
contm um princpio de inflamabilidade (flogstico) que era liberado
durante a queima.
Assim, o flogstico existia no s na matria inanimada como
tambm nos seres vivos. Neste caso, o flogstico ou alma da matria
seria liberado durante a respirao no decorrer da vida, levando ao
envelhecimento.
E E
TERRA (Pobre em flogstico)
FOGO (Flogiston)
Figura 12.3: Representao resumida da Teoria do Flogstico. A Terra
era considerada um elemento pobre em flogstico, enquanto o metal
era um elemento rico em flogstico.
CEDERJ 9
BIOQUMICA II | Respirao celular
LAVOISIER
10 CEDERJ
12 MDULO 4
Pense
Conhecendo o contexto em que os resultados de Lavoisier foram
sobre isso!
AULA
obtidos, pense sobre o que esses resultados indicam em relao Teoria
do Flogstico.
CEDERJ 11
BIOQUMICA II | Respirao celular
Experimentos de Priestley
1. Calcinao
Hg + O2 2HgO
metal de xido de
oxignio
mercrio mercrio
2. Decomposio do xido
2HgO 2Hg + O2
xido de metal de
oxignio
mercrio mercrio
12 CEDERJ
12 MDULO 4
Pense
O que voc faria se fosse Lavoisier?
sobre isso!
AULA
Paralelamente s experincias de caracterizao do ar bom e do
ar ruim, Lavoisier observou que a queima de velas de tamanhos iguais
originava velas menores e de tamanhos diferentes quando aprisionadas
em campnulas de dimenses variadas.
Esse resultado despertou no cientista o interesse em relacionar o
tamanho da vela com a liberao do flogiston. Assim, percebeu que o
critrio de pesar a vela poderia ser de grande utilidade.
Com balana de alta preciso, pde realizar diversos experimentos
de medidas de peso e obteve a seguinte tabela:
CEDERJ 13
BIOQUMICA II | Respirao celular
a b
14 CEDERJ
12 MDULO 4
Esses resultados foram capazes de esclarecer a dvida que restava Pense
sobre isso!
AULA
em relao combusto e respirao?
Descreva sua opinio sobre os dois fenmenos, baseada nos
resultados mostrados at aqui.
Esta aula foi baseada no material organizado pelo Departamento de Bioqumica Mdica, CCS, UFRJ.
RESUMO
Nesta aula voc acompanhou como Lavoisier chegou equao geral da respirao
celular, aceita at hoje (matria orgnica + ar respirvel CO2 + gua + calor).
CEDERJ 15
13
AULA
Ciclo de Krebs - Parte 1
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 1
18 CEDERJ
13 MDULO 4
AULA
OXIDAO E FERMENTAO
CEDERJ 19
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 1
20 CEDERJ
13 MDULO 4
A prxima etapa desse quebra-cabea foi resolvida por David
AULA
Keilin, em 1925, que redescobriu uma substncia que ele denominou
cytochrome (CITOCROMO). Esta substncia, como o Atmungsferment, CITOCROMOS
estava intimamente ligada aos processos oxidativos. Segundo Keilin, o Os citocromos foram
primeiro descritos
citocromo era diretamente oxidado na sua forma divalente para a forma como mio-hematina
e histo-hematina
trivalente (frrica). Os dois sistemas, Atmungsferment e Cytochrome, por MacMunn. Essa
foram denominados sistemas W.K. (sistema Warburg-Keilin). histria voc ver
com mais detalhes na
Szent-Gyrgyi sabia do envolvimento do O2 nos processos Aula 15.
CEDERJ 21
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 1
Fermentao
cido lctico
HCOH
C O
Respirao
Esquema 13.2
!
Levando em conta o esquema proposto por Szent-Gyrgyi, que transformaes voc verifica em cada
etapa desta seqncia de reaes?
Qual o papel das trioses nos processos fermentativos e oxidativos propostos por Szent-Gyrgyi?
O que ocorreria nesta seqncia de reaes na presena e na ausncia de O2?
22 CEDERJ
13 MDULO 4
Chegamos ento ao primeiro esquema que tentava explicar como
AULA
ocorre a respirao celular (ver Esquema 13.2). O prximo passo foi a
observao de que a adio de pequenas quantidades de cidos orgnicos
ativava tremendamente essa via. Este efeito, chamado efeito cataltico, j
havia sido observado por Krebs durante a descoberta do ciclo da uria
(que voc conhecer na Aula 18).
A respeito da oxidao dos cidos orgnicos e o efeito cataltico
do cido succnico, Krebs escreveu:
!
De acordo com esta passagem, tal efeito cataltico exercido pelos cidos orgnicos C4 pode ser explicado
com a seqncia de reaes proposta por Szent-Gyrgyi?
A seqncia de reaes de Szent-Gyrgyi explica convenientemente a equao de Lavoisier?
CEDERJ 23
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 1
24 CEDERJ
13 MDULO 4
Considerando a juno das duas reaes imediatamente anteriores,
AULA
possvel passar do cido ctrico ao cido succnico, e esta reao pode
CIDO MALNICO ser diretamente demonstrada se cido malnico adicionado. CIDO
Ou malonato um MALNICO inibe especificamente a oxidao do cido succnico, mas no
inibidor da respirao
celular, no passo inibe a degradao do cido ctrico e cido -cetoglutrico.
de formao do
succinato no ciclo do
cido ctrico.
!
Qual a relao entre tais reaes e a seqncia
de reaes de Szent-Gyrgyi?
PS. A nomenclatura das molculas apresentadas aquela utilizada nos trabalhos da poca.
CEDERJ 25
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 1
Martius e Knoop
!
Baseado nos resultados mostrados acima e nas
citaes, proponha um esquema de reaes que
explique o efeito cataltico do cido ctrico e
do -cetoglutarato, integrando as trioses nesta
seqncia.
26 CEDERJ
13 MDULO 4
Alm disso, a coenzima A foi tambm encontrada como
participante na formao de succinato a partir de -cetoglutarato,
AULA
formando succinil coenzima A (succinil-CoA) como intermedirio.
!
Com base nessas informaes, construa o seu esquema representando o ciclo
do cido ctrico.
RESUMO
Nesta aula ns vimos a histria do ciclo do cido ctrico, seus principais personagens
e as etapas iniciais de elucidao dessa via. A evoluo do conceito de Lavoisier
at chegar aos principais intermedirios e reaes do ciclo.
CEDERJ 27
14
AULA
Ciclo de Krebs - Parte 2
objetivos
INTRODUO Como voc viu na Aula 12 o ciclo do cido ctrico foi descoberto por Hans
Krebs e, portanto, tambm denominado de Ciclo de Krebs.
Voc viu nas Aulas 9 e 10 que algumas clulas obtm energia por processos
fermentativos em que a molcula de glicose quebrada na ausncia de
oxignio. Para a maioria das clulas eucariticas e para algumas bactrias, sob
condies aerbicas, seus combustveis orgnicos so transformados em CO2
mais gua, sendo a gliclise o primeiro estgio da degradao completa da
glicose. Aps esse estgio, voc viu que a molcula de piruvato poderia seguir
diversos caminhos metablicos; entre eles, podia ser convertida em etanol e em
lactato, se a clula estivesse na ausncia de oxignio. No entanto, a molcula
de piruvato pode tambm ser convertida a acetil-CoA. Na realidade, o grupo
acetil, na forma de acetil-CoA, um intermedirio comum ao metabolismo de
quase todos os compostos biolgicos. Ele pode ser formado a partir de glicdios,
lipdeos e protenas (veja a Figura 14.1).
30 CEDERJ
14 MDULO 4
graxos
AULA
CEDERJ 31
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
32 CEDERJ
14 MDULO 4
- Mercaptoe
tanolamina
AULA
Coenzima A (CoA ou CoASH)
piruvato desidrogenase
Piruvato + NAD + CoASH Acetil-CoA + CO2 + NADH + H +
(Go= - 8kcal\mol)
Esta reao uma descarboxilao oxidativa, um processo
irreversvel no qual o grupo carboxila removido do piruvato como
uma molcula de CO2 e os dois carbonos, remanescentes formam o
grupo acetil da molcula de acetil-CoA.
Como vimos, nessa reao ocorre a formao de uma molcula de
NADH. Os eltrons transportados por essa molcula sero transferidos
para o oxignio na cadeia transportadora de eltrons, levando formao
de ATP. Esse assunto voc estudar nas Aulas 14 e 15.
A desidrogenao combinada com a descarboxilao da molcula
de piruvato em acetil-CoA requer a ao seqencial de trs enzimas e
cinco coenzimas diferentes ou grupos prostticos, que so: 1) tiamina
pirofosfato (TPP); 2) flavino adenino dinucleotdeo (FAD); 3) coenzima
A (CoA); 4) nicotinamida adenina dinucleotdeo (NAD); 5) cido lipico.
Veja a Figura 14.4.
CEDERJ 33
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
34 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
Acetaldedo
ativado
CEDERJ 35
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
Figura 14.5: Representao do complexo piruvato desidrogenase e das etapas de descarboxilao da molcula
de piruvato.
36 CEDERJ
14 MDULO 4
AS REAES DO CICLO DE KREBS
AULA
Para comear a primeira volta do ciclo, a molcula de acetil-
CoA doa seu grupo acetil para um composto de quatro carbonos, o
oxaloacetato, para formar a molcula de citrato com seis carbonos.
Citrato ento transformado em isocitrato, uma molcula tambm com
seis carbonos. Essa molcula desidrogenada, com perda de CO2 para
produzir um composto com cinco carbonos, o -cetoglutarato. Essa
molcula perde CO2, produzindo um composto com quatro carbonos,
chamado succinato. O succinato ento convertido enzimaticamente, em
trs etapas, regenerando a molcula de oxaloacetato, a qual est pronta
para reagir novamente com outra molcula de acetil-CoA. Como voc
pde ver, duas molculas de CO2 foram formadas e sero eliminadas.
Uma molcula de oxaloacetato foi utilizada, mas foi regenerada ao final
do processo. Assim, em teoria, uma molcula de oxaloacetato poderia
ser utilizada infinitamente no ciclo; de fato, oxaloacetato est presente
nas clulas em baixssimas concentraes. Quatro das oito etapas desse
ciclo so oxidaes nas quais a energia de oxidao conservada na
forma das coenzimas reduzidas NADH e FADH2. Um resumo dessas
etapas apresentado na Figura 14.6.
succinil-CoA
CEDERJ 37
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
38 CEDERJ
14 MDULO 4
A reao envolve sucessiva desidratao e hidratao, atravs da
AULA
formao de um intermedirio, o cis-aconitato, que normalmente no
se dissocia do stio ativo da enzima.
Essa reao impulsionada no sentido de formao do isocitrato,
pois essa molcula constantemente consumida na etapa seguinte do
ciclo. Veja Figura 14.8.
CEDERJ 39
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
40 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
Figura 14.11: Reao de formao do succinato.
Succinato
CEDERJ 41
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
42 CEDERJ
14 MDULO 4
Etapa 7 Hidratao do fumarato a malato
AULA
A hidratao do fumarato que resulta em malato catalisada pela
enzima fumarase (Figura 14.15).
L-malato oxaloacetato
CEDERJ 43
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
44 CEDERJ
14 MDULO 4
AULA
Condensao
acetil
succinil-CoA
REAES ANAPLERTICAS
CEDERJ 45
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
46 CEDERJ
14 MDULO 4
Regulao do ciclo do cido ctrico
AULA
A regulao das enzimas-chave em vias metablicas, por
efetores alostricos e por modulao covalente, assegura a produo de
intermedirios e de produtos na velocidade requerida para manter a clula
em um estado estvel, evitando a superproduo de um intermedirio. O
fluxo de tomos de carbono do piruvato finamente regulado em dois
nveis: em nvel de formao do acetil-CoA e em nvel de formao de
citrato. O ciclo tambm regulado em nvel das reaes catalisadas pelas
enzimas isocitrato desidrogenase e da -cetoglutarato desidrogenase.
Veja a Figura 14.20.
O complexo piruvato desidrogenase modulado por dois tipos de
regulao. Primeiro, dois produtos da reao da piruvato desidrogenase,
acetil-CoA e NADH, inibem o complexo (Figura 14.21). Segundo, o
complexo piruvato desidrogenase existe de duas formas: 1) um ativo,
desfosforilado; 2) um inativo, fosforilado (Figura 14.21). A inativao
do complexo feita por uma protena quinase que est fortemente ligada
ao complexo. A reativao catalisada por uma protena fosfatase que
desfosforila o complexo (Figura 14.21).
Resumindo esse processo de regulao, podemos dizer que quando
a situao energtica da clula alta, ou seja, quando os nveis de ATP,
acetil-CoA e NADH so altos, os produtos de reao catalisados por esse
complexo enzimtico, o complexo enzimtico inibido. O que tambm
ocorre quando os nveis de cidos graxos esto aumentados. Essa inibio
ocorre porque cidos graxos podem ser convertidos em acetil-CoA no
processo de -oxidao que voc ir estudar na Aula 22 desta disciplina.
Por outro lado, quando os nveis energticos da clula esto baixos, ou
seja, quando os nveis de AMP (adenosina monofosfato), NAD+ e CoA
esto reduzidos, ocorre uma ativao alostrica do complexo piruvato
desidrogenase.
CEDERJ 47
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
48 CEDERJ
Figura 14.20: Regulao do complexo piruvato desidrogenase por fosforilao e por desfosforilao. 14 MDULO 4
AULA
CEDERJ 49
BIOQUMICA II | Ciclo de Krebs - Parte 2
50 CEDERJ
15
AULA
Metabolismo de
carboidratos I
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos I
RESPIRAO CELULAR
52 CEDERJ
15 MDULO 4
!
No lugar de MacMunn, o que voc faria para ratificar sua descoberta frente s crticas sobre uma provvel
AULA
contaminao dos tecidos analisados, com derivados da hemoglobina?
Espectro de
absoro
Prisma
Lente
Lente
Objeto
Estgio do
microscpio
Fonte de luz
CEDERJ 53
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos I
Figura 15.2: Espectro de absoro da luz visvel de msculos de abelha (a). As linhas
mais escuras so as linhas de absoro que aparecem sobre um espectro de luz visvel
de fundo caracterstico (b).
!
Sabendo-se da propriedade oxirredutora dos citocromos e do possvel envolvimento com o fenmeno da
respirao, o que voc espera que acontea com o espectro de absoro quando a abelha movimenta as
asas e quando esta permanece quieta?
Keilin tambm trabalhou com suspenso de levedura. O que voc espera ter acontecido quando Keilin
borbulhou ar na cubeta contendo uma suspenso de levedura?
!
No lugar de Keilin e Hartree, o que voc concluiria a partir destas
observaes?
Qual o destino final dos eltrons aps o ltimo citocromo?
54 CEDERJ
15 MDULO 4
Pouco tempo depois, o ciclo dos cidos tricarboxlicos (ciclo
AULA
do cido ctrico) foi elucidado por Sir Hans Krebs, mas ainda havia
muita discusso sobre os mecanismos que acoplavam as oxidaes ao
fornecimento de energia para os seres vivos.
Neste contexto, dois pesquisadores russos, Belitser e Tsybakova,
em 1939, estabeleceram uma possvel relao entre a gliclise e as reaes
de oxidao e reduo associadas fosforilao. Suas descobertas foram
assim descritas:
V. A. Belitser e E. T. Trybakova
!
Levando em considerao estes achados em que etapa est ocorrendo
o armazenamento de energia na forma de fosfagen (steres de
fosfato)?
CEDERJ 55
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos I
6,0
Fosfagen, mgP2O5
5,0
4,0
3,0
2,0
1,0
I II III
100,0
Respirao, LO2
V
200,0
300,0
400,0
500,0 IV
!
O que sugere este resultado?
56 CEDERJ
15 MDULO 4
Tabela 15.1: Sntese de fosfagen ligada oxidao de vrios substratos.
AULA
Datas dos Substrato Respirao em L O2 Aumento de
Tecido
Experimentos
por 1 g de tecido por fosfagem em mg de
30 minutos P3O2 por g de tecido
Sem Com Sem Com
substrato substrato substrato substrato
1939
CEDERJ 57
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos I
Fritz Lipmann
I- Introduo Histrica
!
Logo foi reconhecido o papel do ATP como um carreador de energia nos
processos metablicos. Mas, qual o stio de sntese de ATP na clula? O que
voc faria para responder a esta questo?
58 CEDERJ
15 MDULO 4
ACELERAO FRAO CELULAR
AULA
1.000 X g: Precipita clulas ntegras e ncleo.
de 5.000 at 15.000 X g:Precipita grandes vacolos, cloroplastos e mitocndrias.
de 50.000 at 150.000 X g: Precipita microssomas de retculo endoplasmtico.
Acima de 500.000 X g: Precipita algumas protenas solveis.
Consumo de
Frao Substrato
oxignio (M)
Mitocndria Citrato 7,1
-cetoglutarato 6,3
Nada 0,18
-cetoglutarato 1,7
Nada 0,0
-cetoglutarato 0,0
Nada 0,31
!
Comparando a taxa respiratria (consumo de oxignio) das trs fraes obtidas (mitocndria, precipitado
nuclear e sobrenadante), qual das fraes celulares est envolvida com a respirao, e como voc integraria
os resultados obtidos por Keilin e Belitser & Tsybakova?
CEDERJ 59
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos I
60 CEDERJ
15 MDULO 4
1 sem adio de citocromo
AULA
2 adio de 5 x 10-6 M
10 20 30 40 50
tempo em minutos
!
O que sugere o experimento da Figura 15.4?
desaparecido
0 5 10 15 20 25 30
tempo em minutos
CEDERJ 61
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos I
!
Qual a relao entre o desaparecimento de NADH2 e o
consumo de oxignio na Figura 15.5?
17 7,27
Tubos duplicados contendo 0,005M de MgCl2, 0,005M de KCl, 0,002M a 0,004M de ADP, 0,02M de
tampo glicil-glicina pH 7,4, citocromo c, ortofosfato, DPNH2, na concentrao indicada na tabela e
0,03M de NaF. Cada tubo recebeu 0,30 ml da suspenso da partcula indicada (partculas derivadas
de 50 mg de fgado de rato) para um volume total de 2,0 mL. A temperatura nos diferentes experi-
mentos variou de 17 24o C.
!
Observando as medidas de A.L. Lehninger na Tabela 15.4,
sugira o papel do NADH2 durante a oxidao da glicose e
relacione com a sntese de ATP.
62 CEDERJ
15 MDULO 4
AULA
Em 1948, Loomis e Lipmann publicam um trabalho
investigando o acoplamento entre o consumo de oxignio e
a fosforilao, com o efeito do 2,4-dinitrofenol (DNP):
!
Que concluses voc tiraria destes dados?
CEDERJ 63
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos I
!
Durante muitos anos, o DNP foi prescrito para uso em tratamento da obesidade, pois os pacientes que o
utilizavam mostravam uma rpida diminuio em seu peso. Como voc explicaria este fenmeno do ponto
de vista bioqumico? Voc acharia adequado tal tratamento?
64 CEDERJ
16
AULA
Metabolismo de
carboidratos II
objetivos
CONCEITOS INICIAIS
66 CEDERJ
16 MDULO 4
E agora confira o resultado que voc encontrou.
AULA
Durante a gliclise saldo de 2 ATPs e 2 NADHs.
No ciclo do cido ctrico saldo de 2 ATPs (1 para cada volta
no ciclo), 6 NADHs (3 para cada volta no ciclo) e 2 FADH2 (1 para
cada volta no ciclo).
O que foi gerado no ciclo do cido ctrico encontra-se na matriz
mitocondrial, onde ele acontece. O que foi gerado na gliclise est no
citoplasma da clula. Portanto, para que o NADH, reduzido durante a
gliclise, possa estar disponvel para a cadeia transportadora de eltrons,
ele precisa atravessar as membranas mitocondriais, particularmente
a interna, que menos permevel. Para isso, existem transportadores
especficos na membrana interna mitocondrial. O NADH glicoltico pode
entrar na mitocndria por dois caminhos diferentes, ou seja, existem dois
transportadores capazes de carregar esta molcula do citoplasma para
a matriz mitocondrial. Estes transportadores so chamados lanadeira
malato-aspartato e lanadeira do glicerofosfato.
AS LANADEIRAS
A lanadeira malato-aspartato
Este sistema usa as molculas de malato e aspartato para
transportar os hidrognios que esto associados ao NADH no citoplasma
da clula. Envolve tambm outras molculas normalmente presentes na
matriz mitocondrial e no citoplasma. Um hidrognio ligado ao NADH
transferido para o oxaloacetato (que voc j conhece), formando
malato no citoplasma da clula. A membrana interna mitocondrial tem
um transportador de malato do tipo ANTIPORTA que leva o malato do A N T I P O R TA
citoplasma para dentro da mitocndria e, simultaneamente, transporta Reveja as aulas de
transporte atravs
- cetoglutarato da matriz mitocondrial para o citoplasma. Na matriz de membranas em
Biologia Celular I.
mitocondrial, o malato volta a oxaloacetato, transferindo o hidrognio
para o NAD+ mitocondrial, formando novamente NADH. Note que
apenas os hidrognios foram transportados. O NAD+ citoplasmtico no
capaz de atravessar a membrana interna mitocondrial. Como resultado
da transferncia do hidrognio para formar NADH, o malato volta a
ser oxaloacetato na matriz mitocondrial. Este oxaloacetato convertido
em aspartato, que pode ento sair da mitocndria por um transportador
(antiporta) que, em troca, transfere glutamato do citoplasma para a
matriz mitocondrial (o resumo do mecanismo de transporte pode ser
CEDERJ 67
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos II
A lanadeira do glicerofosfato
O segundo caminho para entrada dos eltrons na matriz
mitocondrial a lanadeira do glicerofosfato ou fosfoglicerol. Nesse
caso, os hidrognios associados ao NADH reduzido na gliclise so
transferidos para a diidroxiacetona-fosfato (DHAP) formando o 3-
fosfoglicerol no citoplasma. A enzima que catalisa esta reao a
3-fosfoglicerol desidrogenase. A enzima flavoprotena desidrogenase
catalisa a transferncia deste hidrognio para o FADH2 (o resumo do
mecanismo de transporte est na Figura 16.3).
Diidroxiacetona
fosfato
68 CEDERJ
16 MDULO 4
Assim, cada NADH reduzido na gliclise ser transformado em
AULA
FADH2 para participar da CTE na mitocndria. Neste caso, portanto,
temos uma diferena essencial quanto ao saldo de ATPs aps a CTE.
Lembre que cada NADH gera energia suficiente para a sntese de 3 ATPs,
enquanto o FADH2 apenas para 2 ATPs.
Agora temos todo NADH na matriz mitocondrial. Alm do
FADH2, claro. Estes aceptores so o ponto de partida para a sntese
de ATP. Cada NADH que transfere seus hidrognios para a cadeia
transportadora gera energia suficiente para a sntese de 3 molculas de
ATP. Cada FADH2 gera energia para a sntese de apenas 2 molculas
de ATP.
Tabela 16.1: Balano energtico da respirao celular em cada uma das etapas a partir da
oxidao completa de uma molcula de glicose.
Fosforilao
Etapa da respirao celular Fosforilao oxidativa
substrato
2NADHx3= 6 ATP
Gliclise 2 ATP
2NADHx3= 6ATP
Piruvato Acetil-CoA
6NADHx3 = 18 ATP
Ciclo do cido ctrico 2 ATP
2FADH2x2 = 4 ATP
Total = 38 4 34
CEDERJ 69
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos II
70 CEDERJ
16 MDULO 4
A seqncia de transporte de eltrons
AULA
Vejamos agora mais detalhadamente cada um dos complexos
proticos e o papel que eles desempenham na cadeia transportadora de
eltrons.
CEDERJ 71
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos II
72 CEDERJ
16 MDULO 4
Em situaes especiais pode haver um acmulo de semiquinona, que
AULA
considerado um radical livre e, portanto, capaz de reagir fortemente
com vrias biomolculas, causando danos sua estrutura. A cadeia
transportadora de eltrons , em potencial, um dos caminhos pelos
quais os radicais livres so gerados.
A B C
CEDERJ 73
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos II
O ciclo Q
A coenzima Q (CoQ) ou ubiquinona (Q ou UQ) passa seus
eltrons para o citocromo c (e bombeia prtons) num ciclo redox nico
! chamado ciclo Q. A coenzima Q uma benzoquinona ligada a vrias
Para relembrar o conceito
de unidades isoprenides, unidades isoprenides (normalmente 10 em clulas de mamferos e 6
veja aula de outros lipdeos
em Bioqumica I. em bactrias). A cauda isoprenide d molcula seu carter apolar,
que permite CoQ difundir-se rapidamente pela membrana interna
mitocondrial. A CoQ tem a habilidade de aceitar um par de eltrons
(aceptor dieletrnico) e pass-los, um de cada vez, atravs de um
intermedirio semiquinona at o complexo III. Isso ocorre em duas
etapas: a primeira etapa a migrao do ubiquinol (UQ2) para o stio
Qp da citocromo c redutase. Dois eltrons e dois prtons so liberados,
resultando em uma oxidao a um intermedirio semiquinona (UQH*)
e, finalmente, ubiquinona (UQ), que pode deixar o stio e entrar no
pool da membrana. Um eltron passado a uma protena ferro-enxofre
atravs do citocromo c1 e, finalmente, ao citocromo c mvel no espao
intermembranas. O outro eltron passa atravs dos citocromos bL e
bH, reduzindo a ubiquinona a semiquinona no stio Qn da enzima.
A primeira etapa do ciclo Q pode ser resumida atravs da
seguinte equao:
74 CEDERJ
16 MDULO 4
O resumo do ciclo est no Esquema 16.1, a seguir:
AULA
UQH2 + CITOCROMO C (ox.) UQH* + 2H+fora + CITOCROMO C (reduz.)
2e-
UQH2 + 2H+dentro+ 2 CITOCROMO C (ox.) 4 H+fora + 2 CITOCROMO C (reduz.) + UQ
CEDERJ 75
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos II
Em resumo:
O oxignio o aceptor final dos eltrons na cadeia transportadora.
76 CEDERJ
16 MDULO 4
A FOSFORILAO OXIDATIVA
O COMPLEXO V - ATP SINTASE
AULA
O complexo V - ATP sintase
A ATP sintase uma enzima que catalisa a sntese de ATP. Voc
j viu uma enzima parecida na fotossntese (veja fase clara, Aula 6).
No processo de respirao celular, esta enzima responsvel pela etapa
chamada FOSFORILAO OXIDATIVA. Nesta etapa, a energia do
fluxo de eltrons convertida em ATP.
At o complexo IV, o resultado da cadeia transportadora de
eltrons a sntese de duas molculas de gua e um aumento da
concentrao de prtons no espao intermembranas. Lembre que esses
prtons foram bombeados pelos complexos I, III e IV. O bombeamento
de prtons estabelece um gradiente de prtons atravs da membrana
mitocondrial interna (veja na Figura 16.11).
Figura 16.12: O gradiente dos prtons formado durante a cadeia transportadora de eltrons.
CEDERJ 77
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos II
a b
Figura 16.14: Estrutura tridimensional da ATP sintase. Em (a) uma vista lateral e em (b) uma viso frontal da
estrutura da protena. Note o arranjo das subunidades.
Fonte: Biochemistry. 2a ed. Garrett e Grisham, Saunders College Publishing.
Disponvel online em: http://www.people.virginia.edu/~cmg/slides_download.html
78 CEDERJ
16 MDULO 4
A SEQNCIA DA CADEIA DE TRANSPORTE DE ELTRONS
REFLETE OS POTENCIAIS REDOX DE SEUS COMPONENTES
AULA
Os componentes da cadeia transportadora de eltrons esto
organizados segundo seu potencial de oxirreduo (Figura 16.15). O
potencial de reduo padro dos diferentes componentes da membrana
interna mitocondrial permite a progressiva passagem dos eltrons do
NADH e do FADH2 do menor ao maior potencial de reduo padro.
Conforme os eltrons atravessam sucessivamente os complexos I, II e
IV, gerada energia livre suficiente para a sntese de uma molcula
de ATP. No caso do FADH2, o complexo II no capaz de bombear
prtons. Assim, a energia livre gerada na reoxidao desta molcula
menor, e portanto menos ATP gerado por molcula de FADH2.
Figura 16.15: O potencial de reduo padro dos componentes mveis e dos complexos
indicado pela escala esquerda. Tambm esto indicados os pontos onde a energia
liberada suficiente para sintetizar ATP e os stios dos vrios inibidores respiratrios
(rotenona, amital, antimiciana A e cianeto). Os complexos I, II e IV no sintetizam
diretamente ATP, mas capturam a energia livre necessria para a sntese de ATP pelo
bombeamento de prtons que gera o gradiente utilizado como fora eletromotriz
pela ATP sintase.
CEDERJ 79
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos II
DESACOPLAMENTO
Voc j sabe que a CTE e a fosforilao oxidativa so eventos
acoplados, interdependentes. Para que a mitocndria sintetize ATP,
necessrio que os eltrons passem atravs dos componentes da cadeia e
que os prtons sejam bombeados.
Entretanto, em alguns casos possvel desacoplar os dois processos.
Isso pode ocorrer com a utilizao de substncias qumicas chamadas
desacopladores, como o 2,4-dinitrofenol (DNP) ou o carbonilcianeto-p-trif
luorometoxifenilhidrazona (FCCP) (ver Figura 16.16). Estas molculas, por
serem capazes de atravessar facilmente a membrana interna mitocondrial
por difuso, podem levar os prtons do espao intermembranas de volta
para a matriz, desfazendo o gradiente eletroqumico. Na presena dessas
substncias, ento, a cadeia transportadora de eltrons funciona sem que
haja sntese de ATP.
80 CEDERJ
16 MDULO 4
O DNA foi utilizado, por algum tempo, no tratamento da
obesidade. Voc pode imaginar por qu?
AULA
Voc acha que este tipo de tratamento no eficiente para
o que ele se prope? Por qu?
CEDERJ 81
BIOQUMICA II | Metabolismo de carboidratos II
RESUMO
EXERCCIOS
7. Explique por que a mitocndria de uma clula heptica contm menos cristas do
que a mitocndria da clula do msculo cardaco.
82 CEDERJ
A oxidao dos
17
AULA
aminocidos
e a produo de uria
objetivos
Pr-requisitos
Conhecimento da estrutura e da simbologia dos
aminocidos obtido em Bioqumica I
(Mdulo 2, Aulas 8 a 10).
Conhecimento do ciclo de Krebs obtido nas
Aulas 13 e 14 desta disciplina.
BIOQUMICA II | A oxidao dos aminocidos e a produo de uria
84 CEDERJ
17 MDULO 5
Voc pde observar, nas Aulas de 9 a 11, que a degradao dos carboidratos
AULA
forneceu piruvato, que, por sua vez, foi convertido a acetil-CoA; a degradao
de cidos graxos tambm gerou molculas de acetil-CoA que foi oxidada no
ciclo de Krebs.
Um ponto importante para distinguir o metabolismo dos aminocidos
do processo de degradao dos cidos graxos e dos carboidratos que
todos os aminocidos contm grupamento amino; logo, seu processo
de degradao inclui uma etapa chave, na qual o grupamento amino
separado do esqueleto de carbonos e desviado para vias especficas de
utilizao de aminocidos. Veja um resumo esquemtico da transformao
dos aminocidos na Figura 17.1. Nela, podemos observar que os aminocidos
podem vir tanto da dieta quanto de outras protenas intracelulares. A cadeia
de carbonos utilizada em rotas metablicas que voc j conhece, enquanto a
parte nitrogenada dos aminocidos, na forma de amnia, processada
em uma via denominada ciclo da uria, que ser abordada em detalhes
na Aula 18.
CEDERJ 85
BIOQUMICA II | A oxidao dos aminocidos e a produo de uria
DESTINO DO
endgenas. Os carbonos dos aminocidos entram no metabolismo
ESQUELETO DE intermedirio em um dos pontos apresentados a seguir: AMINOCIDOS
CARBONOS DOS
denominados GLICOGNICOS (podero formar glicose) so metabolizados
AMINOCIDOS
em piruvato, 3-fosfoglicerato, -cetoglutarato, oxaloacetato, fumarato
Os aminocidos,
quando desaminados, ou succinil-CoA; AMINOCIDOS CETOGNICOS (que podem formar corpos
produzem -
cetocidos que, cetnicos) produzem acetil-CoA ou acetoacetato. O metabolismo de
diretamente ou
atravs de reaes
alguns aminocidos resulta em mais de um dos pontos apresentados e,
adicionais, rendem assim, alguns aminocidos podem ser tanto glicognicos como cetognicos.
componentes do
ciclo de Krebs. Os Veja, na Figura 17.2, os pontos de entrada dos aminocidos glicognicos
aminocidos podem
ser agrupados e cetognicos nas rotas metablicas.
em duas classes:
glicognicos e
cetognicos.
86 CEDERJ
17 MDULO 5
At este ponto da aula voc aprendeu que os aminocidos, para
AMINOCIDOS
AULA
serem utilizados como fonte de energia, perdem seus grupamentos amino GLICOGNICOS
e so convertidos em intermedirios do ciclo de Krebs e que a amnia Os esqueletos
carbnicos dos
pode ser convertida em uria para ser eliminada. Na realidade, a amnia aminocidos
pode ser eliminada como amnia nos animais aquticos, como cido glicognicos
so degradados
rico em aves e rpteis e como uria em muitos vertebrados terrestres. em piruvato ou
intermedirios, de
Assim, daremos prosseguimento nossa aula, apresentando inicialmente 4 e 5 carbonos,
as formas de transferncia do grupamento amnia (NH3) e em seguida o do ciclo de Krebs.
Os aminocidos
processo de formao da uria, que ser aprofundado na Aula 18. glicognicos so as
principais fontes
Os aminocidos da dieta so a principal fonte de grupos amino; de carbono da
gliconeognese
a maioria metabolizada no fgado. Alguma amnia gerada nesse
quando os nveis de
processo reciclada e usada em diversas vias biossintticas. O excesso glicose caem. Eles
podem ser degradados
eliminado como uria, amnia ou cido rico. O excesso de amnia para produzir energia
ou ser convertidos em
gerado em outros tecidos tambm transportado para o fgado para ser glicognio ou cidos
convertido em sua forma de excreo. Para entendermos o mecanismo graxos para estocar
energia.
de oxidao dos aminocidos, devemos considerar alguns aspectos
importantes que sero abordados de forma integrada; no entanto, voc AMINOCIDOS
CETOGNICOS
dever ler com ateno os tpicos destacados nas caixas laterais, para
Os esqueletos
fix-los separadamente. Abordaremos os seguintes pontos: de carbonos dos
aminocidos
1. A importncia das transaminases e a formao do glutamato. cetognicos so
degradados em acetil-
2. O papel da glutamina no processo de desintoxicao.
CoA e acetoacetato.
3. A importncia da alanina para o transporte de grupamentos amino O esqueleto carbnico
dos aminocidos
gerados pelo catabolismo dos aminocidos em tecidos extra-hepticos, cetognicos pode ser
catabolizado para a
como os msculos. produo de energia
Glutamato e glutamina tm um papel crtico no metabolismo ou ser convertido a
corpos cetnicos ou
do nitrognio. A maioria dos grupamentos NH3 dos aminocidos cidos graxos.
CEDERJ 87
BIOQUMICA II | A oxidao dos aminocidos e a produo de uria
DESAMINAO
DE AMINOCIDOS
Alm de equilibrar os
grupamentos amino
entre -cetocidos,
as transaminases
recolhem o
grupamento amino
do excesso de
aminocidos da dieta
e transferem para
aqueles aminocidos
Figura 17.3: Reao catalisada por uma transaminase ou
que podem ser
aminotransferase enzimas que catalisam a transferncia
desaminados, como
reversvel de um grupo amino entre dois -cetocidos.
por exemplo o
glutamato.
O esqueleto de
carbonos dos Transaminases so enzimas que transferem grupamentos amino de
aminocidos,
aminocidos para -cetocidos.
que podem ser
desaminados, pode Essas enzimas equilibram os grupamentos amino entre os -cetocidos.
ser catabolizado para
obter energia ou ser Elas permitem a sntese de aminocidos no-essenciais a partir de outros
usado para a sntese
de glicose ou cidos aminocidos. Assim, o balano entre diferentes aminocidos mantido, e
graxos para estocar vrias protenas podem ser sintetizadas.
energia.
Somente alguns
aminocidos podem
ser desaminados
diretamente. A Figura 17.4 mostra como os amino grupos da alanina e do cido
asprtico so transferidos para o -cetoglutarato para formar glutamato.
Nessa reao, o piruvato produzido fornece carbonos para formar glicose
(gliconeognese, voc ver na Aula 30) ou pode ser descarboxilado a
acetil-CoA (Aula 14) para entrar no ciclo de
A
Krebs e gerar energia. A transaminao a
reao mais comum envolvendo aminocidos;
somente dois aminocidos, lisina e treonina,
no participam de reaes de transaminao.
Observe novamente a Figura 17.4 e note que
o par -cetoglutarato e glutamato est sempre
presente; o que muda o aminocido a ser
transformado e, conseqentemente, o novo -
B
cetocido formado.
Figura 17.4: A) Reao catalisada pela alanina
aminotransferase; B) Reao catalisada pela aspartato
aminotransferase. Observe em A que a alanina
doa seu grupamento amino sendo convertida no
-cetocido, o piruvato; em B o aspartato doa seu
grupamento amino sendo convertido no -cetocido,
o oxaloacetato; em ambas as reaes o -cetoglu-
tarato recebe o grupamento amino, tornando-se o
aminocido glutamato.
88 CEDERJ
17 MDULO 5
Assim, por exemplo, no caso da alanina o produto formado o piruvato;
AULA
se o aminocido for o cido asprtico, na forma de aspartato, o produto
gerado ser o oxaloacetato.
As transaminases so enzimas que apresentam como co-fator
o grupamento piridoxal fosfato, a forma funcional da vitamina B6. O
stio ativo das transaminases contm piridoxal fosfato associado, por uma
ligao covalente, ao grupo -amino do aminocido lisina, denominado
base de Schiff. esse grupamento que se encarrega de transportar o
grupamento NH3 dos aminocidos. A Figura 17.5 (letras AaD)
apresenta o esquema de formao da base de Schiff e do mecanismo de
reao catalisado por transaminases, o primeiro passo para o catabolismo
da maioria dos aminocidos.
D
C
Figura 17. 5: Aminocido PLP na forma de uma base de Schiff C) O -amino grupo do
substrato aminocido desloca lisina da enzima, para formar uma base de Schiff com o PLP.
D) Esse tipo de ligao promove a posterior hidrlise, liberando o -cetocido derivado do
aminocido, o piridoxal fosfato convertido em uma piridoxaminafosfato.
CEDERJ 89
BIOQUMICA II | A oxidao dos aminocidos e a produo de uria
MECANISMOS
POSTULADOS
PA R A A
TOXICIDADE DA
AMNIA
1 - Altas
concentraes de
amnia deslocam o
equilbrio da reao
catalisada pela
glutamina sintetase no
sentido de formao
de glutamina. Isso
leva a um consumo
Figura 17.6: Reao catalisada pela glutamato desidrogenase. A gluta-
aumentado do
mato desidrogenase remove os grupamentos N do pool de aminocidos.
glutamato, um
Ela uma das poucas enzimas que podem utilizar tanto NAD+ como
neurotransmissor
NADP+ como aceptor de eltrons.
e precursor para a
sntese de um outro
neurotransmissor, o
cido gama-amino
A amnia muito txica para o tecido animal. Em muitos animais
butrico (GABA). ela convertida em componentes no-txicos antes de ser exportada dos
2 - O consumo de
glutamato e altas tecidos extra-hepticos para o sangue, para ser levada para os rins ou
concentraes de
amnia poderiam fgado. Novamente o glutamato crtico nessa etapa. Ele recebe mais
deslocar o equilbrio um grupamento amino, sendo convertido em glutamina, a qual exerce
da reao catalisada
pela glutamato essa funo de transporte. Observe que, nesse caso, houve a formao
desidrogenase no
sentido reverso, de uma amida. Vale ressaltar que a amnia, gerada em muitos tecidos,
ou seja, no sentido
como o crebro, por exemplo, pode ser produzida pelo metabolismo de
de consumir -
cetoglutarato, um outras molculas, como os nucleotdeos. A enzima que combina a amnia
intermedirio essencial
para o ciclo de livre com o glutamato para formar a glutamina a glutamina sintetase.
Krebs. Isso limita o
metabolismo
Essa reao requer ATP (j que uma reao de sntese, onde ligaes
energtico do crebro. qumicas so formadas) e ocorre em duas etapas. Veja a Figura 17.7.
90 CEDERJ
17 MDULO 5
AULA
glutamato
Figura 17.7: Reao catalisada pelas enzimas glutamina sintetase e glutaminase. As duas primeiras
etapas so catalisadas pela enzima glutamina sintetase. Observe que h consumo de ATP na primeira.
A terceira etapa catalisada pela enzima glutaminase.
CEDERJ 91
BIOQUMICA II | A oxidao dos aminocidos e a produo de uria
FUNO DA
no transporte de grupamentos NH3. O msculo, ao degradar uma de
ENZIMA suas reservas energticas, o glicognio, produz glicose. Esta por sua vez
G L U TA M I N A S E
degradada a piruvato para produzir energia. Esse assunto foi abordado
Retirar a amnia
que estava sendo nas Aulas de 9 a 11. O piruvato uma molcula que pode ser utilizada
transportada pela
para regenerar glicose. Esse processo ocorre no fgado. Por outro lado,
glutamina. Essa reao
ocorre para alimentar o msculo degrada tambm protenas, gerando aminocidos. Uma
vias biossintticas e para
alimentar o ciclo da soluo econmica, para transportar tanto o piruvato quanto a amnia
uria.
dos aminocidos gerados nos msculos para o fgado, sintetizar o
aminocido alanina a partir desses componentes. Veja um resumo dessas
informaes no ciclo glicose-alanina, apresentado na Figura 17.8.
92 CEDERJ
17 MDULO 5
AULA
Figura 17.8: Ciclo glicose-alanina. A alanina atua como um carreador de amnia e de esqueletos de carbonos do
piruvato dos msculos para o fgado. A amnia excretada e o piruvato reutilizado para formar glicose, a qual
retorna ao msculo.
RESUMO
CEDERJ 93
BIOQUMICA II | A oxidao dos aminocidos e a produo de uria
EXERCCIOS
4. Pesquise, em outras fontes, razes que expliquem a toxicidade dos ons amnia.
94 CEDERJ
18
AULA
Ciclo da uria
objetivo
Pr-requisito
Conhecimentos adquiridos na Aula 17.
BIOQUMICA II | Ciclo da uria
INTRODUO Na Aula 17, voc aprendeu que a amnia um composto txico e que precisa
ser eliminada pelo organismo. Vimos que em vrios animais o produto de
excreo a uria. Na aula anterior, foram apresentadas algumas reaes
para a canalizao de ons amnio, de diversos aminocidos, at o fgado,
local onde o processo de desintoxicao ocorre. Falamos da importncia das
reaes de transaminao, desaminao oxidativa e do transporte da amnia
na forma de alanina e glutamina. Nesta aula, discutiremos sobre as reaes de
formao da uria, o principal produto final do catabolismo do nitrognio, no
homem. Um indivduo humano consome em torno de 300g de carboidratos,
100g de gordura e 100g de protenas, diariamente; excreta cerca de 16,5g
de nitrognio, sendo 95% na urina e 5% nas fezes. A uria pode constituir
cerca de 90% do nitrognio excretado. O ciclo da uria e o ciclo dos cidos
tricarboxlicos (TCA) foram descobertos por Hans Krebs e colaboradores. De
fato, o ciclo da uria foi descrito antes do ciclo TCA. Em mamferos, o ciclo da
uria o mecanismo de escolha para a excreo de amnia. Veja a estrutura
Figura 18.1: Estrutura da
uria. da uria na Figura 18.1.
96 CEDERJ
18 MDULO 5
No h perda ou ganho efetivo de ornitina, de citrulina, argino-succinato
AULA
e arginina. Todavia, on amnio, CO2, aspartato e ATP so consumidos.
Algumas reaes da sntese da uria ocorrem na mitocndria, enquanto
outras ocorrem no citosol. A uria ento transportada para o rim e
eliminada na urina.
CEDERJ 97
BIOQUMICA II | Ciclo da uria
98 CEDERJ
18 MDULO 5
Figura 18.4:
AULA
Transporte de citrulina e de ornitina.
Em cada ciclo, a citrulina deixa a
mitocndria e a ornitina entra na
matriz mitocondrial. Protenas carrea-
doras presentes na membrana interna
mitocondrial facilitam o fluxo trans-
membrana de citrulina e de ornitina.
CEDERJ 99
BIOQUMICA II | Ciclo da uria
100 CEDERJ
18 MDULO 5
RESUMO
AULA
A maioria dos animais terrestres converte o excesso de nitrognio em uria
antes de excret-lo.
A uria menos txica do que a amnia.
O ciclo da uria ocorre principalmente no fgado.
Os dois tomos de nitrognio entram no ciclo da uria como NH3, produzido
principalmente pela glutamato desidrogenase e como N do aspartato.
A amnia (NH3) e o bicarbonato (HCO3-) que iro formar a uria so incorporados
inicialmente ao carbamoil-fosfato.
O ciclo da uria composto por cinco reaes.
A biossntese da uria um processo cclico, ou seja, um dos compostos (a ornitina)
consumido no incio do processo e regenerado na ltima reao. No h perda
ou ganhos efetivos de ornitina, de citrulina, argino-succinato e arginina.
O on amnio, o CO2, o aspartato e ATPs so consumidos.
Algumas reaes da sntese da uria ocorrem na mitocndria, enquanto outras
ocorrem no citosol.
A uria formada no fgado, transportada para o rim e eliminada na urina.
EXERCCIOS
1. Que composto formado no ciclo da uria pode ser utilizado no ciclo de Krebs?
CEDERJ 101
19
AULA
Metabolismo
de aminocidos
objetivos
104 CEDERJ
19 MDULO 5
Os sintomas aparecem nas primeiras 24 horas de vida. O recm-
AULA
nascido mostra-se inicialmente irritado e, a seguir, aparecem vmitos
e um aumento da letargia. Logo depois, observa-se hipotonia (tnus
muscular deficiente) e angstia respiratria que podem levar ao coma.
Em alguns casos, os sintomas podem aparecer tardiamente durante a
infncia ou mesmo durante a vida adulta.
Existem sete principais DCUs. Cada uma delas recebe uma
denominao relacionada s iniciais da enzima deficiente. Assim:
CPS- deficincia na carbamoil-fosfato sintetase.
NAGS- deficincia na N-acetilglutamato sintetase.
OTC- deficincia na ornitina transcarbamilase.
AS- deficincia na cido arginino-succnico sintetase (citrulinemia).
AL/ASA- deficincia na arginino-succinato liase (arginino-succnico
aciduria).
AG- deficincia na arginase.
AO- deficincia na ornitina aminotransferase.
CEDERJ 105
BIOQUMICA II | Metabolismo de aminocidos
106 CEDERJ
19 MDULO 5
posteriormente ativa a formao de glutamina. Isso resulta numa queda
AULA
da concentrao dos estoques de glutamato. O glutamato , no tecido
neural, um neurotransmissor e tambm um substrato para a sntese de
outro neurotransmissor, o -aminobutirato.
Fenilcetonria (PKU)
Figura 19.4: Fenilce-
Alm dos erros inatos ligados diretamente s enzimas do ciclo da tonria a incapacidade
uria, algumas outras doenas genticas so conseqncias de outras de converter fenilalanina
em tirosina.
alteraes no metabolismo de aminocidos. A fenilcetonria (PKU)
uma delas, que se caracteriza por uma inabilidade do corpo de utilizar
o aminocido essencial, fenilalanina. A PKU ocorre quando a criana
herda dois genes mutantes para a enzima fenilalanina hidroxilase
(PAH). Essa enzima, normalmente, converte molculas de fenilalanina
em tirosina. Tal reao usa O2 como substrato e requer o co-fator tetra-
hidrobiopterina (THB) como agente redutor. Fenilalanina hidroxilada Figura 19.5: A estrutura
da fenilalanina hidroxi-
produzindo tirosina, enquanto o THB transfere tomos de hidrognio lase (PAH).
!
Uma das causas do autismo
a PKU no tratada!
Para saber mais sobre
autismo, ver
h t t p : / / w w w. a u t i s m -
Sem esta enzima, a fenilalanina e os produtos de sua society.org
CEDERJ 107
BIOQUMICA II | Metabolismo de aminocidos
A inabilidade de remover
o excesso de fenilalanina do
sangue, e o conseqente acmulo
daqueles produtos durante a infncia, produz uma variedade de problemas, incluindo o retardo
mental. Felizmente, um teste simples (o teste do pezinho) feito logo aps o nascimento pode
identificar esse defeito gentico e, com muita ateno quantidade de fenilalanina em sua dieta,
a criana pode desenvolver-se normalmente.
Fenilalanina
108 CEDERJ
19 MDULO 5
Temas para reflexo e discusso e um pouco da histria Pense
sobre isso!
AULA
A seguir apresentaremos alguns temas para voc pensar em
casa e discutir com seus colegas ou com seu tutor no plo. Vrios
dos experimentos que sero apresentados so parte da histria que
nos levou ao conhecimento mostrado, nas aulas anteriores, sobre o
metabolismo de aminocidos. A idia dessas discusses, como voc j
Figura 19.8: Ces foram
sabe, desenvolver a lgica e o pensamento cientfico. Encare como e so at hoje utilizados
para experimentos como
um quebra-cabea e ento, divirta-se... este apresentado na
questo.
1.1. Desenhe as curvas que voc esperaria encontrar, mostrando a Para lembrar
Bioqumica I...
evoluo do peso mdio da populao de animais, nos seguintes Sabendo-se que o cido
glutmico um amino-
casos: cido e o cido pirvico
a) Administrao de uma dieta de tirosina e uma semana aps uma dieta no, identifique quem
quem nas duas figuras
de fenilalanina. abaixo.
CEDERJ 109
BIOQUMICA II | Metabolismo de aminocidos
110 CEDERJ
19 MDULO 5
Tema 6. Observe a seqncia de resultados abaixo:
AULA
a) Entre 1894-1897, CHARLES RICHET verificou que o fgado que foi
macerado e deixado para apodrecer formava uria, cuja quantidade
aumentava medida que o tempo transcorria, com simultnea e notvel
liberao de arginina.
b) Em 1904, Kossel e Darkin mostraram a existncia de um fermento obtido
a partir de contedo intestinal, capaz de catalisar a reao a seguir:
CEDERJ 111
BIOQUMICA II | Metabolismo de aminocidos
8.1. Por que este resultado era inesperado? O que voc postularia ento?
112 CEDERJ
19 MDULO 5
Tema 9. Em 1930, Mitsouri Tada chegou frmula de um composto
AULA
chamado citrulina, que j havia sido isolado do suco da melancia em
1924.
CEDERJ 113
BIOQUMICA II | Metabolismo de aminocidos
RESUMO
Voc viu nesta aula alguns dos erros inatos do metabolismo de aminocidos que
levam a doenas que, em muitos casos, acarretam a morte de recm-nascidos,
crianas e adultos. A maior parte dos danos provocados por estas desordens
do ciclo da uria conseqncia da toxicidade dos altos nveis de amnia
(hiperamonemias), principalmente no crebro. Nesta aula, pudemos tambm
discutir aspectos experimentais do ciclo da uria, mostrando os principais pontos
da histria da elucidao desta via metablica.
Nesta aula no apresentaremos exerccios: voc j usou neurnios suficientes
por ora.
114 CEDERJ
20/21
AULAS
Degradao
de lipdeos
objetivo
INTRODUO Vimos em Bioqumica I como extenso o grupo dos lipdeos. Existem vitaminas
de natureza lipdica, como as vitaminas A, D; existem o colesterol e outros
fosfolipdeos que formam as membranas das clulas; existe a testosterona, as
ceras, os sais biliares, enfim, uma enorme variedade de lipdeos.
Nesta aula, vamos conhecer como os lipdeos so degradados quando nosso
organismo precisa de energia. Entretanto, ao contrrio do que era de se esperar,
no so todos os lipdeos que so metabolizados com o intuito de fornecer
energia para o nosso organismo, mas sim um grupo particular de lipdeos
denominado cidos graxos. Os cidos graxos (AG) ficam acumulados no tecido
adiposo. L esto aquelas gordurinhas ou pneuzinhos que tanto incomodam
a gente! Quando fazemos regime e, portanto, comemos menos calorias do
que precisamos, nosso organismo vai buscar energia nas suas reservas, isto ,
nas gorduras do tecido adiposo. Estas gorduras so quebradas e utilizadas
como fonte de energia. Nesse caso, a gente at emagrece!
Funciona igualzinho a uma caderneta de poupana. Quando nosso salrio
menor do que nossas contas a pagar, precisamos usar nossas reservas de
dinheiro para saldar nossas dvidas. O organismo faz o mesmo: se comemos
menos do que o necessrio para nos mantermos funcionando, no tenha
dvida! Utilizamos nossas reservas de energia e a que entram os lipdeos,
mais especificamente os cidos graxos!
Agora vamos mergulhar nas nossas clulas e ver como a coisa acontece!
116 CEDERJ
MDULO 6
20/21
OS CIDOS GRAXOS SO ESTOCADOS NOS ADIPCITOS
AULAS
Estas clulas so curiosas, ao microscpio eletrnico, pois possuem
uma enorme vescula cheia de gordura dentro do seu citoplasma. Veja
a figura abaixo:
CEDERJ 117
BIOQUMICA II | Degradao de lipdeos
118 CEDERJ
MDULO 6
20/21
Veja a Figura 20.3, que resume o at ento descrito:
AULAS
Figura 20.3: O glucagon
se liga a um receptor
de membrana e ativa a
lipase. Veja a molcula
do palmitato.
CEDERJ 119
BIOQUMICA II | Degradao de lipdeos
Acil-CoA sintase
palmitato + CoA + ATP palmitoil-CoA + AMP + PPi
120 CEDERJ
MDULO 6
20/21
Esse translocador, como o prprio nome diz, transloca o palmitato-
carnitina para dentro da mitocndria, colocando, ao mesmo tempo,
AULAS
carnitina livre para fora da mitocndria.
Ufa!!! Aps esta seqncia de reaes, o palmitato-carnitina final-
mente chega dentro da mitocndria. Vale a pena lembrar que isto ocorre
porque a mitocndria possui duas membranas e, portanto, o palmitato
precisa cruzar essas duas membranas antes de chegar matriz mitocon-
drial e se encontrar com as enzimas responsveis pela sua degradao.
Dentro da mitocndria, o palmitato-carnitina que chega precisa
ser reconvertido em palmitoil-CoA de novo e, para isso, precisa perder
a carnitina e ganhar novamente uma coenzima A (CoA).
Dentro da mitocndria existe uma enzima chamada carnitina
acil transferase II (CAT II) que faz essa reao. Veja:
CAT II
palmitato-carnitina + coenzima A palmitoil-CoA + carnitina
CEDERJ 121
BIOQUMICA II | Degradao de lipdeos
122 CEDERJ
MDULO 6
20/21
O destino do palmitoil-CoA dentro da mitocndria:
a -oxidao
AULAS
Uma vez na matriz mitocondrial, o palmitoil-CoA passar por
uma seqncia de quatro reaes, conhecida como -oxidao, conforme
Figura 20.5:
CEDERJ 123
BIOQUMICA II | Degradao de lipdeos
124 CEDERJ
MDULO 6
20/21
E agora? O que fazemos com o novo cido graxo formado, que
tem 14 tomos de carbono (miristoil-CoA)? Ele passa por uma nova
AULAS
seqncia de quatro reaes, idnticas s que acabamos de descrever, e,
no final, forma-se uma nova molcula de acetil-CoA (que possui dois car-
bonos) e um cido graxo com 12 tomos de carbono. E agora? A mesma
coisa! Esse cido graxo com 12 carbonos passa por uma nova rodada
de -oxidao, gerando uma nova acetil-CoA e um outro cido graxo
com 10 carbonos e assim sucessivamente at que todo o palmitoil-CoA
vire uma sopa de acetil-CoA. Uma vez que o palmitoil-CoA apresenta
16 carbonos, podemos dizer que a sua completa oxidao atravs da
-oxidao gera 8 molculas de acetil-CoA (8 x 2 =16); 7 molculas de
FADH2 e 7 molculas de NADH + H+. Em suma temos:
CEDERJ 125
BIOQUMICA II | Degradao de lipdeos
126 CEDERJ
MDULO 6
20/21
FORMAO DOS CORPOS CETNICOS
AULAS
j que esta molcula utilizada na produo de glicose, o acetil-CoA vindo
da -oxidao tem outro destino: a formao de corpos cetnicos.
Corpos cetnicos (CC) so compostos solveis em gua e consistem
basicamente de acetoacetato e -hidroxibutirato. Veja essas duas molculas
na figura abaixo.
CEDERJ 127
BIOQUMICA II | Degradao de lipdeos
128 CEDERJ
MDULO 6
20/21
Estamos aqui chamando os tecidos de famintos pois estamos numa
situao de fome, ou seja, baixa de energia nas clulas e no organismo
AULAS
como um todo. Veja as reaes de transformao do acetoacetato em
acetil-CoA na Figura 20.8.
CEDERJ 129
BIOQUMICA II | Degradao de lipdeos
130 CEDERJ
MDULO 6
20/21
Entretanto, o que vai diferir neste caso o produto da ltima volta da
-oxidao. Vejamos. Tomemos como exemplo um cido graxo com 15
AULAS
tomos de carbonos. Depois da primeira rodada de -oxidao (que
envolve as quatro reaes mencionadas anteriormente), o cido graxo
passa a ter 13 tomos de carbono (pois haver perdido uma molcula de
acetil-CoA). Esse cido com 13 tomos de carbono vai passar por uma
nova rodada de -oxidao, gerando um cido graxo com 11 tomos de
carbono e assim por diante, at que se formar um cido com 5 tomos de
carbono. Agora que temos a diferena. Esse composto com 5 tomos de
carbono quebrado em acetil-CoA (2 carbonos) e propionil-CoA (3 tomos
de carbono). O propionil-CoA, no entanto, no pode mais passar por uma
nova rodada de -oxidao. O propionil-CoA convertido a succinil-CoA
(4 carbonos), conforme reaes mostradas na Figura 20.10.
CEDERJ 131
BIOQUMICA II | Degradao de lipdeos
Figura 20.11: O acetil-CoA tem duas portas de entrada: o ciclo de Krebs (porta 1) e a
formao de corpos cetnicos (porta 2). A porta 1 ficar fechada se falta oxalacetato.
Neste caso, o acetil-CoA entrar pela porta 2 formando corpos cetnicos. Se houver
grande disponibilidade de oxalacetato, a porta preferencial ser a 1 e, com isso, a
produo de corpos cetnicos diminui. Isso ocorre, por exemplo, quando o fgado
oxida cidos graxos com nmero mpar de tomos de carbono.
132 CEDERJ
MDULO 6
20/21
RESUMO
AULAS
Na aula de hoje vimos as reaes envolvidas na oxidao do palmitato. Lembre-se
que oxidar um composto significa quebr-lo em compostos menores. No caso
do palmitato, vimos que este composto quebrado em 8 molculas de acetil-CoA
gerando, durante esta quebra, 7 molculas de FADH2 e 7 molculas de NADH. Essas
coenzimas reduzidas vo para a cadeia de transporte de eltrons entregar seus eltrons
para formar ATP. O acetil-CoA (2 carbonos), ao se juntar ao oxalacetato (4 carbonos)
forma o citrato (6 carbonos), que roda no ciclo de Krebs, gerando mais FADH2 e NADH,
que tambm vo formar mais ATP na cadeia de transporte de eltrons. Entretanto, no
fgado, devido ausncia de oxalacetato (ir formar glicose na gliconeognense), o
acetil-CoA formado na -oxidao transformado em corpos cetnicos (acetoacetato
e -hidroxibutirato). Esses compostos, por serem altamente solveis, viajam pelo
sangue, sendo captados pelos demais tecidos. L, eles so reconvertidos em acetil-CoA,
que roda, ento, no ciclo de Krebs, gerando energia. Quando cidos graxos de nmero
mpar de tomos de carbono so quebrados no fgado, h uma menor produo de
corpos cetnicos, j que temos a formao de oxalacetato que acaba por consumir o
acetil-CoA que seria utilizado na formao dos corpos cetnicos.
EXERCCIOS
Reflita e responda:
3. Explique com suas palavras por que os cidos graxos com nmero mpar geram
menos corpos cetnicos que os cidos graxos de nmero par?
CEDERJ 133
22/23
AULAS
Sntese de
cidos graxos
objetivo
ASPECTOS HISTRICOS
136 CEDERJ
MDULO 6
22/23
Quando comemos mais do que o necessrio, o excesso convertido em
cidos graxos (palmitato) que se acumulam no tecido adiposo, formando
AULAS
aqueles pneuzinhos na barriga que a gente tanto detesta...
Vamos estudar agora como ocorre a sntese do palmitato (e a
formao dos tais pneuzinhos...). Ento, mos obra!
SNTESE DO PALMITATO
O citrato
CEDERJ 137
BIOQUMICA II | Sntese de cidos graxos
O destino do acetil-CoA
138 CEDERJ
MDULO 6
22/23
Citosol
AULAS
oxalacetato
oxalacetato
CEDERJ 139
BIOQUMICA II | Sntese de cidos graxos
140 CEDERJ
MDULO 6
22/23
Na segunda rodada do complexo, a situao a seguinte: o butiril
(composto com 4 tomos de carbono) se encontra ligado cistena e o
AULAS
malonil-CoA perde seu CoA e se liga como malonato fosfopantotena.
Em seguida, o butiril pula para cima do malonato com a
ajuda da enzima de condensao. Ocorre uma nova descarboxilao
do malonato dando origem a um composto com 6 tomos de carbono
(4 + 3 = 7 1 = 6).
Da mesma forma que descrito anteriormente, esse composto vai
sofrer uma reduo dependente de NADPH, uma desidratao e uma
nova reduo dependente de NADPH.
Tudo isso ocorre sobre a fosfopantotena. Agora, esse composto
com 6 tomos de carbono transferido de volta para cistena deixando
a fosfopantotena livre para a entrada de um novo malonil-CoA.
Esse processo se repete 7 vezes, at que o palmitato se forma dentro
do complexo da AGS. Como o palmitato uma molcula muito grande
(16 tomos de carbono), a afinidade do complexo AGS por ele muito
pequena e, com isso, o complexo libera o palmitato. Esse palmitato pode
ser transportado para o tecido adiposo onde permanecer at que seja
necessria a sua utilizao como reserva energtica.
CEDERJ 141
BIOQUMICA II | Sntese de cidos graxos
142 CEDERJ
MDULO 6
22/23
Desta forma, o produto da acetil-CoA carboxilase (malonil-CoA)
substrato da AGS. Veja.
AULAS
Acetil-CoA carboxilase complexo AGS
Acetil-CoA malonil-CoA palmitato
substrato produto
substrato produto
CEDERJ 143
BIOQUMICA II | Sntese de cidos graxos
144 CEDERJ
MDULO 6
22/23
O segundo controle da acetil-CoA carboxilase a fosforilao
induzida pelo hormnio glucagon. Conforme voc ver nas aulas de regu-
AULAS
lao hormonal, o glucagon, um hormnio que liberado no momento do
jejum, ativa uma protena cinase que fosforila (pendura um grupamento
fosfato) diversas enzimas, dentre as quais a acetil-CoA carboxilase.
Quando fosforilada, a acetil-CoA carboxilase passa a ficar inibida.
Desta forma, quando estamos em jejum sob a ao do glucagon, a acetil-CoA
carboxilase est completamente inibida, j que se encontra fosforilada.
enzima defosforilada ativa
-P
enzima fosforilada inibida
NADPH
CEDERJ 145
BIOQUMICA II | Sntese de cidos graxos
Citosol
oxalacetato
oxalacetato
Figura 22.5: O transporte de citrato para fora da mitocndria gera OA, que, ao
retornar para a mitocndria na forma de piruvato, gera poder redutor (NADPH)
para a sntese do palmitato.
146 CEDERJ
MDULO 6
22/23
Sntese de palmitato x degradao do palmitato
AULAS
com a sua degradao (-oxidao).
CEDERJ 147
BIOQUMICA II | Sntese de cidos graxos
RESUMO
EXERCCIOS
148 CEDERJ
24
AULA
Via das pentoses-fosfato
objetivos
Pr-requisitos
Seria interessante que voc relesse as aulas sobre
gliclise, ciclo de Krebs e sntese de cidos graxos
antes de comear. Vamos retomar alguns pontos
dessas vias metablicas nesta aula.
BIOQUMICA II | Via das pentoses-fosfato
Ateno! Voc no deve confundir NADH com NADPH. Estas duas coenzimas
diferem apenas pela presena de um grupamento fosfato a mais na molcula
de NADPH. Entretanto, elas desempenham papis bastante diferentes na clula.
O NADH participa indiretamente da sntese do ATP, transferindo os eltrons
liberados nas reaes de oxidao dos nutrientes para a cadeia transportadora
de eltrons. O NADPH est envolvido na utilizao da energia livre das reaes
de oxidao para as reaes de biossntese redutivas. Esta diferenciao
possvel graas especificidade das enzimas por suas coenzimas.
Para relembrar
como so as reaes
Bem, voltando s reaes de biossntese, estvamos dizendo que elas
catalisadas pelas requerem, alm da energia armazenada na molcula de ATP, o poder
desidrogenases, voc
pode retornar s redutor do NADPH.
aulas que trataram
das reaes da Na aula de hoje, voc vai aprender como o NADPH formado
gliclise e do ciclo de
Krebs, e observar as nas clulas.
reaes catalisadas
pelas enzimas
Voc j aprendeu que o NAD+ reduzido a NADH em uma
gliceraldedo-3- srie de reaes de oxidao catalisadas por enzimas chamadas
fosfato desidrogenase,
isocitrato desidrogenases. O NADPH tambm reduzido em reaes de oxidao
desidrogenase,
-cetoglutarato catalisadas por desidrogenases; neste caso, outras desidrogenases que
desidrogenase, ou usam como coenzima o NADP+ e no o NAD+. Vamos, agora, conhecer
malato desidrogenase.
estas reaes, que fazem parte da via metablica que chamamos via das
pentoses-fosfato.
Para simplificar, vamos
A via das pentoses-fosfato pode ser dividida em duas etapas, o ramo
substituir a palavra
fosfato pela letra P oxidativo e o ramo no-oxidativo. O ramo oxidativo comea com a glicose-
nas nomenclaturas
usadas a partir de 6-fosfato (glicose-6P), que desviada da via glicoltica, sendo convertida a
agora. Assim, glicose-
6-fosfato passa a ser
uma pentose-fosfato. Como o nome diz, pentoses so acares contendo
denominada glicose-6P, 5 carbonos. Voc j sabe que a glicose-6P possui 6 carbonos. Ento, tente
frutose-6-fosfato passa
a ser frutose-6P, ribose- responder: que tipo de reao deve ocorrer no ramo oxidativo da via das
5-fosfato passa a ser
ribose-5P e assim por pentoses de forma a gerar um acar de 5 carbonos?
diante. A glicose-6P deve perder 1 carbono, o que ocorre atravs de uma
reao de descarboxilao.
150 CEDERJ
24 MDULO 7
O RAMO OXIDATIVO DA VIA DAS PENTOSES-FOSFATO
AULA
Observe, em seguida, as reaes que compem o ramo oxidativo
da via das pentoses-fosfato na Figura 24.1:
Como voc pode observar, no ramo oxidativo ocorrem duas
reaes de oxidao, cujas enzimas usam o NADP+ como coenzima,
sendo a ltima uma reao de descarboxilao tambm.
6-fosfogluconato
CEDERJ 151
BIOQUMICA II | Via das pentoses-fosfato
isomerase
152 CEDERJ
24 MDULO 7
Assim, os 15 carbonos presentes nas trs pentoses so rearranjados
AULA
como duas molculas de 6 carbonos (2 frutose-6P) e uma molcula de 3
carbonos (o gliceraldedo-3P), somando 15 carbonos. Estas reaes so
catalisadas por dois tipos de enzimas, as transaldolases e as transcetolases.
As transaldolases transferem fragmentos de 3 carbonos e as transcetolases
transferem fragmentos de 2 carbonos. Acompanhe a srie de reaes
mostradas na Figura 24.3:
gluconolactona
ribulose P
isomerase
4P
CEDERJ 153
BIOQUMICA II | Via das pentoses-fosfato
154 CEDERJ
24 MDULO 7
REGULAO DA VIA DAS PENTOSES-FOSFATO
AULA
O fluxo atravs da via das pentoses-fosfato e, conseqentemente, a
taxa de reduo de NADP+ a NADPH so regulados essencialmente pela
atividade da glicose-6P desidrogenase. Esta enzima regulada pelos nveis
de NADP+, um de seus substratos. Quando a clula consome NADPH,
quando comea a sintetizar lipdeos, por exemplo, a concentrao de
NADP+ aumenta, favorecendo a atividade da glicose-6P desidrogenase,
regenerando o NADPH.
Um outro aspecto importante da regulao desta via requer uma
Se voc tiver
viso mais integrada do metabolismo. Vamos relembrar o que ocorre dificuldade de
acompanhar esta parte,
durante a sntese de cidos graxos. O citrato, em excesso na mitocndria, volte aula que trata
da sntese de cidos
transportado para o citoplasma, onde ir fornecer acetil-CoA para o
graxos e relembre
incio da sntese de cidos graxos. Ao mesmo tempo, o citrato funciona os principais pontos
abordados.
tambm como um regulador da atividade de duas enzimas citoplasmticas:
a acetil-CoA carboxilase, que se polimeriza na presena de citrato, se
tornando ativa; e a fosfofrutocinase (PFK), enzima da gliclise, que
inibida por citrato. A inibio da PFK permite o acmulo de glicose-6P,
que pode, ento, seguir pela via das pentoses-fosfato. Para compreender e
integrar melhor todas estas informaes, observe com cuidado o esquema
mostrado na Figura 24.5.
CEDERJ 155
BIOQUMICA II | Via das pentoses-fosfato
156 CEDERJ
24 MDULO 7
RESUMO
AULA
As clulas usam NAD+ nas reaes oxidativas e NADPH nas biossnteses redutivas.
O NADPH sintetizado atravs de um caminho alternativo de oxidao da
glicose, a via das pentoses-fosfato. Esta via pode ser dividida em duas fases: o
ramo oxidativo e o ramo no-oxidativo. O ramo oxidativo tem como funo a
reduo de NADPH para as reaes de biossntese, assim como a formao de
pentoses-fosfato para a sntese de nucleotdeos, atravs da oxidao da glicose-
6P. A velocidade desta via determinada pela atividade da enzima glicose-6P
desidrogenase, controlada basicamente pelos nveis de NADP+. A capacidade das
enzimas de distinguirem NADH (que essencialmente utilizado no metabolismo
energtico) de NADPH (utilizado essencialmente como poder redutor das reaes
biossintticas) permite que as reaes de sntese e de degradao sejam reguladas
independentemente. O ramo no-oxidativo permite a converso das pentoses
formadas em intermedirios da via glicoltica, possibilitando sua utilizao em
outras vias do metabolismo da clula.
EXERCCIOS
CEDERJ 157
25
AULA
Degradao do glicognio
objetivo
Pr-requisitos
Ter compreendido a estrutura da clula vegetal
(Aula 5) e ter pleno conhecimento da organizao
dos meristemas primrios e secundrios (Aula 6),
bem como dos sistemas fundamental (Aula 8) e
vascular xilema (Aula 9).
BIOQUMICA II | Degradao do glicognio
1
Peso do fgado = 1800g
2
Massa muscular = 35 kg
3
Volume total = 10l
160 CEDERJ
25 MDULO 7
O glicognio do msculo uma fonte de ATP para aumentar a atividade
AULA
muscular. A maioria da glicose do glicognio muscular consumida dentro
das clulas musculares sem a formao de glicose livre como intermedirio.
O glicognio do fgado convertido em glicose para que esta alcance
a corrente sangnea no momento de jejum. A converso de glicose em
glicognio no msculo mais importante do que a glicognese heptica para
diminuir os nveis de glicose sangnea aps as refeies.
Os grnulos de glicognio so abundantes no fgado de animais bem
alimentados, mas so bem reduzidos no fgado de animais aps 24 horas
de jejum. Veja a Figura 25.1. Exerccios intensos causam a mesma perda de
glicognio muscular. Os grnulos de glicognio correspondem a agregados de
molculas de glicognio e possuem massa molecular em torno de 2x107 Da.
CEDERJ 161
BIOQUMICA II | Degradao do glicognio
GLICOGENLISE
no-redutor
Glicognio fosforilase
162 CEDERJ
25 MDULO 7
AULA
Figura 25.3: Reao catalisada pela enzima fosfo-glicomutase.
CEDERJ 163
BIOQUMICA II | Degradao do glicognio
164 CEDERJ
25 MDULO 7
RESUMO
AULA
A degradao dos estoques de glicognio (glicogenlise) ocorre atravs da ao
da glicognio fosforilase. A ao desta enzima remover fosforoliticamente
um resduo de glicose a partir da quebra de uma ligao 1,4 da molcula de
glicognio. O produto desta reao a glicose-1-fosfato.
CEDERJ 165
26
AULA
Biossntese do glicognio
objetivo
Pr-requisito
fundamental rever os assuntos ligados
estrutura e funo dos carboidratos, abordados
nas Aulas 32, 33 e 34 de Bioqumica I.
BIOQUMICA II | Biossntese do glicognio
168 CEDERJ
26 MDULO 7
A BIOSSNTESE DO GLICOGNIO ENVOLVE UM
NUCLEOTDEO ESPECIAL DA GLICOSE
AULA
A glicose fosforilada a glicose 6-fosfato (=glicose 6-P), uma
reao que comum primeira reao da via glicoltica. Esta reao
catalisada pela hexoquinase no msculo e pela glicoquinase no fgado.
Ento a glicose 6-P convertida em glicose-1-P na reao catalisada pela
fosfoglicomutase. Esta enzima, a fosfoglimutase, fosforilada e o grupo
fosfato participa na reao reversvel em que a glicose-1,6-bifosfato
um intermedirio da reao. Veja a reao abaixo:
P
ENZ-P + Glicose-6-P ENZ + Glicose-1,6-biP Enz-P + glicose-1-P
CEDERJ 169
BIOQUMICA II | Biossntese do glicognio
170 CEDERJ
26 MDULO 7
At recentemente, a fonte da primeira molcula de glicognio
AULA
que podia atuar como um primer na sua sntese era desconhecida.
Recentemente, foi descoberto que uma protena conhecida como
glicogenina e que est localizada no centro da molcula de glicognio,
pode ajudar nesta questo. A glicogenina tem uma propriedade
incomum: a de catalisar a sua prpria glicosilao, fixando o carbono-1
da UDP glicose a um resduo de tirosina na enzima. A glicose fixada
pode servir como um primer requerido pela glicose sintase.
CEDERJ 171
BIOQUMICA II | Biossntese do glicognio
172 CEDERJ
26 MDULO 7
RESUMO
AULA
A sntese do glicognio a partir da glicose executada pela glicognio sintase.
Esta enzima utiliza como substratos: a UDP glicose e o estado final no reduzido
do glicognio com outro substrato.
CEDERJ 173
27
AULA
Regulao do metabolismo
do glicognio
objetivos
Pr-requisito
Conhecimentos adquiridos nas
Aulas 2, 3, 25 e 26 de Bioqumica II.
BIOQUMICA II | Regulao do metabolismo do glicognio
INTRODUO Na Aula 25 voc viu uma figura (25.1) que comparava os grnulos de glicognio,
presentes no citosol de um hepatcito de rato bem alimentado, com os grnulos
existentes em um hepatcito de um rato em jejum. Voc aprendeu, nas Aulas
25 e 26, que a degradao do glicognio e a sua sntese ocorrem prximo a
estes grnulos, e, portanto, no citosol. Assim, podemos deduzir que as duas
enzimas chaves do metabolismo do glicognio, a glicognio fosforilase e a
glicognio sintase, estejam distribudas no citosol.
176 CEDERJ
27 MDULO 7
REGULAO DA GLICOGNIO FOSFORILASE
AULA
Como voc deve ter aprendido na Aula 25, a glicognio fosforilase
degrada glicognio para gerar glicose quando os nveis desta, na corrente
sangnea, esto baixos. Assim, utilizamos glicognio durante o jejum
(como, por exemplo, no intervalo entre as refeies) ou ainda quando
necessitamos de energia. Um indicativo para a clula de que a demanda
energtica est baixa pode ser visualizado por aumentos nos nveis de
AMP ou por decrscimo na concentrao de ATP. Em funo destas
observaes, fcil compreendermos que a glicognio fosforilase esteja
sujeita ativao alostrica por AMP cclico e inibio por glicose e
ATP. Alm da regulao alostrica, a glicognio fosforilase est sujeita
tambm a uma regulao por modulao covalente.
A glicognio fosforilase existe em uma forma a, ativa, e
em uma forma b que inativa. Estas formas so interconvertidas
pela ao das enzimas glicognio fosforilase quinase e fosfo protena
fosfatase. A primeira enzima catalisa a adio de um fosfato na enzima
glicognio fosforilase (lembre-se de que toda enzima classificada como
quinase catalisa reaes de fosforilao), enquanto a fosfo-protena
fosfatase retira este fosfato adicionado. Voc pode ento observar
que a glicognio fosforilase quinase ativa a glicognio fosforilase, e a
fosfo-protena fosfatase inibe a glicognio fosforilase. Essas reaes de
fosforilao ou de desfosforilao (um tipo particular de modulao !
Se voc teve dvida sobre o
covalente) promovem mudanas conformacionais na glicognio que regulao alostrica
fosforilase, que tm como conseqncias a transformao da enzima e regulao por modulao
covalente, leia novamente
para um estgio cataltico mais ativo, quando fosforilada, ou um estgio a Aula 3.
CEDERJ 177
BIOQUMICA II | Regulao do metabolismo do glicognio
178 CEDERJ
27 MDULO 7
REGULAO DA PROTENA QUINASE A
AULA
A protena quinase A formada por quatro cadeias polipeptdicas,
ou seja, um tetrmero com duas subunidades reguladoras e duas
subunidades catalticas que se encontram associadas, quando a enzima
est na forma inativa. Quatro molculas de AMP cclico (adenosina
mono-fosfato cclica cAMP) se ligam s subunidades reguladoras,
sendo duas por subunidade. Aps a associao das molculas de AMP
cclico s subunidades reguladoras, as duas subunidades catalticas so
liberadas, expondo seus stios ativos. Neste caso dizemos que a protena
quinase foi ento ativada. Veja a Figura 27.2.
CEDERJ 179
BIOQUMICA II | Regulao do metabolismo do glicognio
180 CEDERJ
27 MDULO 7
AULA
CEDERJ 181
BIOQUMICA II | Regulao do metabolismo do glicognio
182 CEDERJ
27 MDULO 7
REGULAO DA GLICOGNIO SINTASE
AULA
Bem, voc j sabe que a glicognio sintase catalisa a sntese da
molcula de glicognio e que usa os componentes que so gerados na
degradao. Assim, a glicognio sintase deve ser ativada no mesmo
momento em que a glicognio fosforilase for inativada para que ciclos
de reao fteis no ocorram na clula. Veja a forma eficiente que a
clula adotou para solucionar esta situao: a mesma protena quinase
que fosforila a glicognio fosforilase quinase, ativando-a, fosforila a
glicognio sintase, tornando-a inativa.
Podemos concluir ento que os hormnios que dispararam o
processo de ativao das enzimas envolvidas nas etapas de degradao
do glicognio, no caso o glucagon e a adrenalina, so capazes de inibir
a enzima-chave do processo de biossntese.
Se voc observar cuidadosamente a parte inferior das Figuras 27.1
e 27.6, notar que o hormnio insulina ativa a fosfoprotena fosfatase,
uma enzima que catalisa a hidrlise da ligao ster-fosfato de protenas
que foram fosforiladas, tanto glicognio sintase quanto glicognio
fosforilase. Assim, a insulina um hormnio que possui uma
ao sobre o metabolismo do glicognio, antagnica ao
glucagon e adrenalina. Ou seja, ela estimula os
processos que levem sntese do glicognio.
Este hormnio liberado pelo nosso
organismo logo aps as refeies para
que os estoques de glicognio sejam
repostos. Este assunto ser tambm
abordado nas Aulas 30, 31 e 32.
CEDERJ 183
BIOQUMICA II | Regulao do metabolismo do glicognio
RESUMO
184 CEDERJ
27 MDULO 7
EXERCCIOS REFERENTES S AULAS 25, 26 E 27
AULA
1. Explique como as seguintes observaes identificam o ponto de regulao da
sntese de glicognio no msculo esqueltico.
A- Glicognio fosforilase
B- Enzima desramificadora
C- Protena quinase
D- Adenilato ciclase
E- Glicose 6-fosfatase
4. Qual enzima no est presente nos msculos mas est presente no fgado?
CEDERJ 185
BIOQUMICA II | Regulao do metabolismo do glicognio
A- Glicognio fosforilase.
B- Protena quinase.
C- Fosforilase quinase.
D- Glicognio sintase.
186 CEDERJ
28
AULA
Introduo
gliconeognese
objetivo
Pr-requisito
Voc deve ter acompanhado bem a matria at
agora, pois vai ser necessrio retornar a vrios
pontos explorados anteriormente.
BIOQUMICA II | Introduo gliconeognese
188 CEDERJ
28 MDULO 7
Vamos, agora, observar a Tabela 28.1. Ela mostra algumas
AULA
medidas obtidas a partir do acompanhamento dos pacientes obesos
em tratamento.
Tabela 28.1: Variaes das concentraes plasmticas de glicose e cidos graxos e do contedo de glicognio
heptico de um paciente em jejum prolongado.
heptico (g)
Contedo de glicognio heptico (g)
CEDERJ 189
BIOQUMICA II | Introduo gliconeognese
190 CEDERJ
28 MDULO 7
Mas, e aps alguns dias? Vemos no grfico que os nveis dessas molculas se
AULA
estabilizam, permanecendo constantes ao longo de todo o jejum. Como voc
explicaria essa observao? Ser que o organismo de repente pra de usar os
cidos graxos?
Ser que todas as nossas clulas esto usando os cidos graxos como fonte de
energia nessa situao?
CEDERJ 191
BIOQUMICA II | Introduo gliconeognese
hemato-enceflica, que filtra o sangue antes que Os lipdeos obtidos da alimentao circulam
associados aos quilomcrons; os lipdeos
este atinja o crebro. Os cidos graxos, que
sintetizados no fgado circulam associados s
circulam associados albumina, no conseguem LDL ou VLDL (lipoprotena de densidade baixa
atravessar essa barreira, e, por isso, no chegam ou muito baixa, respectivamente); os cidos
graxos liberados do tecido adiposo circulam
ao crebro. Assim, o nutriente disponvel para
associados albumina.
o metabolismo cerebral a glicose.
192 CEDERJ
28 MDULO 7
VARIAES NA CONCENTRAO SANGNEA DE GLICOSE
DURANTE O JEJUM
AULA
Vamos voltar ao nosso grfico.
Agora que voc j sabe que existem alguns tipos celulares que,
por serem incapazes de usar os cidos graxos, requerem a glicose como
fonte de energia, tente explicar a curva de variao da concentrao de
glicose no sangue dos indivduos em jejum.
Observe que, no incio, a GLICEMIA cai um pouco. Entretanto, logo GLICEMIA
aps esse perodo inicial de jejum, a concentrao sangnea de glicose Concentrao de
glicose no sangue.
se mantm estvel.
De fato, a concentrao sangnea de glicose sempre mantida
dentro de limites bastante estreitos, independentemente de qual seja o
consumo deste nutriente pelo organismo. Essa homeostase de glicose se
d devido a uma srie de mecanismos reguladores, que vamos estudar
em aulas mais frente. Estes mecanismos so extremamente importantes,
j que disfunes na capacidade de manter a glicemia levam a graves
conseqncias: a diminuio acentuada dos nveis de glicose no sangue,
mesmo que por perodos curtos, pode causar graves distrbios no crebro,
e, se for prolongada, pode levar at morte. E no s durante o
jejum que a glicemia mantida constante. A hiperglicemia por longos
perodos tambm provoca vrios problemas metablicos, como aqueles
observados em quadros de diabetes. Estudaremos tambm este aspecto
da homeostase de glicose em aulas mais frente.
CEDERJ 193
BIOQUMICA II | Introduo gliconeognese
A VIA GLICONEOGNICA
194 CEDERJ
28 MDULO 7
E como isso ocorria? A lactato desidrogenase
apresenta isoformas
expressas nos
AULA
J se sabia, na poca, que o lactato podia ser convertido em
diferentes tecidos.
piruvato atravs de reao reversvel catalisada pela enzima lactato Estas isoformas se
desidrogenase, presente em vrios tipos celulares, inclusive no fgado. diferenciam com
relao ao seu KM
(levando a diferentes
Veja a reao na Figura 28.2: afinidades) para
seus substratos. Por
exemplo, a isoforma
presente no msculo
esqueltico possui mais
afinidade pelo piruvato
do que pelo lactato.
Por isso, quando o
msculo entra em
alta atividade, logo
aps um pequeno
acmulo de piruvato,
que no pode ser
completamente
oxidado devido a um
aporte insuficiente de
Figura 28.2: Reao catalisada pela enzima lactato desidrogenase.
oxignio, o lactato
produzido. Por outro
lado, a isoforma
Logo, o que estava de fato ocorrendo no homogeneizado prepa- heptica tem maior
afinidade pelo lactato,
rado pelo casal Cori era a transformao de piruvato em glicose. transformando este
Esses achados levantavam a hiptese de que a via de formao de em piruvato quando
sua disponibilidade
glicose, ou seja, a gliconeognese, seria a inverso da via glicoltica, que, como
aumenta.
voc j sabe, converte a glicose em duas molculas de piruvato. Entretanto, se
observamos atentamente as reaes da gliclise, podemos encontrar algumas
que so irreversveis nas condies fisiolgicas. Veja a Figura 28.3, que
contm as variaes de energia livre de Gibbs (G) envolvidas em cada
reao da gliclise. Lembre-se de que quanto mais negativo forem os valores
de G, mais energia liberada na reao, e, conseqentemente, mais difcil
ser a sua inverso nas condies da medida.
CEDERJ 195
BIOQUMICA II | Introduo gliconeognese
Piruvato
196 CEDERJ
28 MDULO 7
RESUMO
AULA
Embora muitos rgos e tecidos possam manter seus nveis de ATP essencialmente
atravs da oxidao de cidos graxos, alguns tipos celulares dependem
exclusivamente ou preferencialmente da glicose como nutriente. Este o caso
do crebro, das hemcias e de algumas outras clulas em menor nmero no
organismo. Para a sobrevivncia dessas clulas em situaes nas quais a ingesto de
carboidratos baixa ou nula, necessria a sntese de glicose a partir de precursores
no-glicdicos, atravs de uma via metablica chamada gliconeognese.
EXERCCIOS
CEDERJ 197
29
AULA
A via gliconeognica
objetivo
Pr-requisito
Para seguir bem esta aula, voc deve estar
com uma boa viso geral das seguintes vias
metablicas: gliclise, ciclo de Krebs,
degradao de aminocidos, sntese e
degradao de cidos graxos.
BIOQUMICA II | A via gliconeognica
200 CEDERJ
29 MDULO 7
A LOCALIZAO INTRACELULAR DAS DUAS PRIMEIRAS
ETAPAS DA GLICONEOGNESE
AULA
A piruvato carboxilase uma enzima de localizao essencialmente
mitocondrial, de modo que a formao de oxalacetato a partir de piruvato
ocorre dentro da mitocndria.
A localizao da PEPCK varia entre as diferentes espcies.
No fgado de camundongos e ratos, ela se localiza exclusivamente
no citosol, enquanto em fgado de coelhos e pombos essa enzima
mitocondrial. J em humanos, a PEPCK igualmente distribuda no
citosol e na mitocndria das clulas hepticas.
Quando a PEPCK usada a isoforma mitocondrial, o oxalacetato
pode ser diretamente convertido a PEP dentro da mitocndria, sendo
este transportado para o citosol atravs de uma protena transportadora
presente na membrana mitocondrial. O PEP, ento, segue pelas reaes
reversveis da via glicoltica, cujas enzimas se localizam no citosol, at
formar frutose-1,6-bisfosfato (frutose-1,6-BP).
Quando a PEPCK usada a isoforma citoplasmtica, o oxalacetato,
primeiramente, deve ser transportado para o citosol. Entretanto, no
existe transportador de oxalacetato na membrana mitocondrial. Assim,
neste caso, o que acontece um pouco mais complicado. O oxalacetato
deve ser convertido em outra molcula, antes de ser transportado para o
lado de fora da mitocndria. Isso pode ocorrer de duas maneiras, como
mostrado na Figura 29.2.
CEDERJ 201
BIOQUMICA II | A via gliconeognica
Figura 29.2: Transporte do oxalacetato da mitocndria para o citosol. O oxalacetato pode ser transportado
atravs de sua converso em aspartato (1) ou em malato (2). O caso 2 envolve oxidao de NADH mitocondrial
com concomitante reduo de NAD+ citoplasmtico, levando ao transporte simultneo de equivalente de NADH
da mitocndria para o citosol.
202 CEDERJ
29 MDULO 7
OS PRECURSORES PARA A GLICONEOGNESE
AULA
Vamos montar um esquema com o que j sabemos at agora para
que fique mais fcil a visualizao da gliconeognese, tornando possvel
a identificao dos precursores no glicdios usados na sntese de glicose.
Observe a Figura 29.3. Com base nos conhecimentos que voc j adquiriu
nas aulas anteriores desta disciplina, tente sugerir possveis precursores que
poderiam entrar na via gliconeognica. Pense um pouco e tente responder
sozinho antes de prosseguir a leitura.
Fosfoenolpiruvato Oxalacetato
Oxalacetato
CEDERJ 203
BIOQUMICA II | A via gliconeognica
204 CEDERJ
29 MDULO 7
Voc j aprendeu que a maioria dos aminocidos gera intermedirios
AULA
do ciclo de Krebs quando transaminados. Esses intermedirios podem ser
convertidos em oxalacetato se seguirem pelas reaes do ciclo de Krebs.
Assim, todos os aminocidos que gerem intermedirios do ciclo de Krebs,
ou piruvato, aps sua transaminao, so precursores para a sntese de
glicose. As nicas excees so a leucina e a lisina, cujo metabolismo gera
acetil-CoA. Veja um esquema mostrando os produtos da transaminao
dos aminocidos na Figura 29.5. Os aminocidos usados na sntese de
glicose podem ser provenientes da alimentao, ou mobilizados a partir
da degradao das protenas musculares.
CEDERJ 205
BIOQUMICA II | A via gliconeognica
Quando o cido
Alm dos aminocidos, uma outra molcula tambm pode ser
graxo oxidado, convertida em um intermedirio do ciclo de Krebs, e conseqentemente
os carbonos so
retirados de dois em formar oxalacetato: o propionil-CoA proveniente da -oxidao de
dois, gerando vrias
molculas de acetil- cidos graxos de cadeia mpar. O propionil-CoA convertido a succinil-
CoA. Se o cido CoA dentro da mitocndria, entrando no ciclo de Krebs.
graxo possui nmero
mpar de carbonos, Por ltimo, temos o glicerol. Essa molcula liberada do tecido
uma molcula de trs
carbonos, o propionil- adiposo durante a hidrlise dos triacilgliceris e segue para o fgado,
CoA, sobra ao final.
onde transformada em di-hidroxiacetona-P (DHAP), um intermedirio
da gliclise, que pode seguir a via gliconeognica.
Antes de prosseguir a leitura, copie, em uma folha parte, o esquema
metablico apresentado na Figura 29.3, e tente acrescentar a ele as reaes
de entrada dos precursores na via gliconeognica recm-discutidas. Agora,
compare o seu esquema com o mostrado na Figura 29.6.
206 CEDERJ
29 MDULO 7
VOLTANDO AO TRANSPORTE DO OXALACETATO PARA
O CITOSOL
AULA
Agora que voc j descobriu quais so as molculas que podem
ser usadas como precursoras para a sntese de glicose, vamos voltar ao
ponto onde estvamos quando discutamos a Figura 29.2.
CEDERJ 207
BIOQUMICA II | A via gliconeognica
208 CEDERJ
29 MDULO 7
AS OUTRAS REAES CONTORNADAS: AS CONVERSES
DE FRUTOSE-1,6-BP EM FRUTOSE-6P E DE GLICOSE-6P
AULA
EM GLICOSE
contornada
CEDERJ 209
BIOQUMICA II | A via gliconeognica
RESUMO
EXERCCIO
NAD+ NADH
CH3CH2OH CH3COH
210 CEDERJ
30
AULA
Regulao da
gliconeognese
objetivo
Pr-requisitos
Para seguir esta aula, voc deve ter
compreendido bem as aulas sobre gliclise e as
aulas sobre gliconeognese. Tenha-as em mos
para eventuais consultas ao longo da leitura.
BIOQUMICA II | Regulao da gliconeognese
As enzimas hexoquinase
de ATP. Os ATPs utilizados nas reaes catalisadas pelas enzimas
e fosfofrutoquinase hexoquinase (a converso de glicose em glicose-6P) e fosfofrutoquinase
catalisam duas etapas
da gliclise. (a converso de frutose-6P em frutose-1,6BP) no seriam ressintetizados
durante a gliconeognese. Isto porque as reaes que revertem estas etapas
(as duas converses), e que so catalisadas pela G6Pase (converso de
Em todo este trecho,
estamos comparando as glicose-6P em glicose) e pela FBPase (converso de frutose-1,6BP em
reaes da gliclise com
as da gliconeognese, frutose-6P), no levam sntese de ATP. O ATP sintetizado durante a
principalmente
reao da fosfoglicerato quinase na gliclise seria gasto quando esta
com relao ao
requerimento reao fosse revertida na gliconeognese. A sntese de PEP a partir de
energtico de cada
etapa. Tenha as duas piruvato gasta um ATP e um GTP, enquanto a reao da piruvato quinase
vias em mos para
compreender o que est
na gliclise leva sntese de apenas um ATP. Assim, a ausncia de um
sendo discutido. controle sobre a gliclise e a gliconeognese poderia levar a grandes
desperdcios de energia.
De fato, isso no ocorre. Ao contrrio: a gliclise e a gliconeognese
so reguladas reciprocamente, de acordo com as necessidades do
organismo.
Logo aps a alimentao, os nveis de glicose no sangue se encontram
elevados, e nossas clulas metabolizam esse nutriente atravs da gliclise,
garantindo os nveis adequados de ATP e armazenando o excesso de
energia a partir da sntese de nossas reservas. No fgado, o glicognio
sintetizado, a gliclise ativada, e o excesso de acetil-CoA produzido
segue, atravs da formao de citrato, para a sntese de cidos graxos.
Por outro lado, quando no ingerimos carboidratos, o fgado
mantm os nveis sangneos de glicose, tanto atravs da degradao do
glicognio como pela produo de glicose, graas inibio da gliclise
e ativao da gliconeognese.
212 CEDERJ
30 MDULO 7
PRINCIPAIS PONTOS DE REGULAO DA GLICONEOGNESE
AULA
Regulao da piruvato carboxilase
Oxalacetato
CEDERJ 213
BIOQUMICA II | Regulao da gliconeognese
214 CEDERJ
30 MDULO 7
Assim, a piruvato desidrogenase fica inibida e a piruvato carboxilase fica
AULA
ativa, possibilitando a sntese de mais oxalacetato para a gliconeognese
(Figura 30.3).
Oxalacetato
Oxalacetato
Figura 30.3: Esquema da regulao do destino do piruvato durante situaes de baixa glicemia.
CEDERJ 215
BIOQUMICA II | Regulao da gliconeognese
216 CEDERJ
30 MDULO 7
Eles descobriram que essa substncia formada no fgado e
AULA
pode atingir concentraes bem altas em animais bem alimentados.
Por outro lado, ela destruda aps dietas pobres em
carboidratos. Observou-se ainda que esta mesma substncia era
capaz de inibir a FBPase, quando em concentraes semelhantes
quelas necessrias para levar ativao da PFK.
Assim, esta substncia capaz de regular antagonicamente
a gliclise e a gliconeognese, ou seja, enquanto uma via est
ativada, a outra est inibida e vice-versa.
Depois de muito tempo tentando identificar esta
molcula ativadora da PFK, o grupo de van Schaftingen
conseguiu mostrar que era frutose-2,6-bisfosfato, que a partir
de agora vamos designar por F2,6BP.
Cuidado, agora, para no fazer confuso! Esta molcula
diferente do intermedirio frutose-1,6-bisfosfato e no participa
diretamente nem da gliclise nem da gliconeognese. A diferena
entre estas duas molculas est apenas no carbono ao qual est
associado o grupamento fosfato.
Analise esses dados e procure integr-los a um esquema
metablico mais geral. Depois de refletir um pouco sozinho,
observe o esquema mostrado na Figura 30.6.
CEDERJ 217
BIOQUMICA II | Regulao da gliconeognese
218 CEDERJ
30 MDULO 7
A fosforilao da enzima bifuncional PFK-2/F2,6BPase catalisada
AULA
por uma importante protena quinase, a protena quinase dependente de
AMPc (PKA). Como seu nome diz, esta protena quinase regulada por
AMPc. Os nveis de AMPc aumentam dentro da clula em funo de
um estmulo hormonal. Esse modulador, ento, se liga s subunidades
regulatrias da PKA, liberando as subunidades catalticas que fosforilam
uma srie de protenas, dentre as quais a PFK2/F2,6BPase.
Dentre os hormnios que regulam os nveis de AMPc dentro da
Voc vai aprender mais
clula, podemos citar o GLUCAGON. Este hormnio liberado pelo pncreas sobre o GLUCAGON na
Aula 31.
em decorrncia da diminuio da concentrao sangnea de glicose.
Com esses novos dados, procure analisar o quadro metablico quando a
gliconeognese se encontra ativada ou inibida, levando em considerao
todas as informaes fornecidas. Faa um resumo e mostre ao tutor. Essa
uma boa maneira de estudar! Na prxima aula, quando estivermos
falando de glucagon, voltaremos a esse ponto.
CEDERJ 219
BIOQUMICA II | Regulao da gliconeognese
RESUMO
220 CEDERJ
30 MDULO 7
EXERCCIOS
AULA
1. Indique ao lado do nome de cada enzima listada seu regulador alostrico e o
efeito promovido por ele na atividade enzimtica (inibio ou ativao):
piruvato carboxilase
piruvato desidrogenase
PFK
FBPase
CEDERJ 221
31
AULA
Introduo aos hormnios
objetivo
Pr-requisitos
As Aulas 13 e 14 de Biologia Celular I tratam de
temas complementares aos que vamos abordar
aqui. Seria interessante que voc relesse essas
aulas antes de comear.
BIOQUMICA II | Introduo aos hormnios
INTRODUO Vamos comear esta aula com uma apresentao dos hormnios e de suas
caractersticas. Nas prximas duas aulas, vamos falar especificamente dos quatro
hormnios que so os principais reguladores do metabolismo energtico:
o glucagon, a adrenalina, a insulina e os glicocorticides.
Uma caracterstica essencial dos organismos multicelulares a diferenciao
celular, que resulta na diviso de atividades entre seus rgos e tecidos, que
desta forma desempenham funes especializadas. Para entendermos o papel
das diferentes vias metablicas e de sua regulao, preciso consider-las
durante o funcionamento do organismo como um todo. A capacidade de os
tecidos especializados funcionarem de uma maneira integrada foi possvel,
em grande parte, pelo aparecimento do sistema endcrino, que, juntamente
com o sistema nervoso, promove a coordenao das atividades metablicas
dos organismos complexos, otimizando a distribuio de nutrientes e de
precursores para os diferentes rgos e tecidos. Essa integrao mediada
H ORMNIOS por uma importante classe de mensageiros qumicos, os HORMNIOS.
Esta terminologia foi
utilizada inicialmente
para definir apenas NATUREZA QUMICA DOS HORMNIOS
as substncias
sintetizadas pelas
glndulas endcrinas
Os hormnios podem ser peptdeos, lipdeos ou derivados de
e secretadas aminocidos.
na circulao,
levando a respostas Os hormnios peptdicos so assim denominados por apresentarem
especficas de um
ou mais tecidos- de 3 at 2.000 resduos de aminocidos. Variam com relao a tamanho,
alvo. Atualmente, composio, nmero de cadeias e grupos modificados. Podemos citar
o termo se refere a
qualquer molcula como exemplo o glucagon, que apresenta uma nica cadeia polipeptdica,
sinalizadora, capaz
de gerar uma resposta e a insulina, formada por duas cadeias polipeptdicas derivadas do
em determinada
processamento proteoltico de um nico produto gnico (pr-insulina)
clula. Assim,
podemos classificar os (Figura 31.1).
hormnios como: (a)
endcrinos aqueles
que circulam pelo
corpo at atingirem Insulina
o rgo-alvo; (b) Glucagon
parcrinos aqueles
que interagem com
clulas vizinhas;
e (c) autcrinos
aqueles que atuam
sobre a prpria
clula secretora. Ou
seja, os hormnios
so classificados de
acordo com seu raio
de ao.
Figura 31.1: Exemplos de hormnios peptdicos: glucagon e insulina.
224 CEDERJ
31 MDULO 7
Os hormnios esterides e as prostaglandinas so derivados dos
AULA
lipdeos colesterol e cido aracdnico, respectivamente. Veja na Figura
31.2 alguns exemplos de esterides derivados do colesterol.
CH3
CH3 Colestanos: 27 carbonos
ex: colesterol
CH3
cidos clicos: 24 carbonos
CH3
COOH
CH3
CH3 Pregnanos: 21 carbonos
ex: progesterona
CH3
CH3 Andranos: 19 carbonos
ex: testosterona
CH3
CH3 Estranos: 18 carbonos
ex: estradiol
Adrenalina Noradrenalina
OH OH
OH OH
CH OH CH OH
CH2 CH2
NH CH3 NH2
Hormnios da tireide
I I H2N I H2N
5 5
CO2H CO2H
HO B O A HO O
3 3
I I I I
CEDERJ 225
BIOQUMICA II | Introduo aos hormnios
!
Os hormnios da tireide (T3 e T4), que no sero estudados no nosso curso,
tambm so armazenados. Eles so produzidos a partir da clivagem de uma
protena, a tireoglobulina. Essa protena possui vrios resduos de tirosina que
so modificados pela adio de iodo, formando T3 e T4. Grandes quantidades
de tireoglobulina podem ser armazenadas na tireide, garantindo a produo
de T4 mesmo em longos perodos de falta de iodo.
226 CEDERJ
31 MDULO 7
MECANISMOS DE AO DOS HORMNIOS
TRANSDUO
AULA
DE SINAL
Para atuar, os hormnios devem interagir com stios especficos,
Para que uma
altamente seletivos, presentes nas clulas-alvo: os receptores. Estes clula responda a
um determinado
devem desempenhar pelo menos duas funes: ter a capacidade de ligar
hormnio,
os hormnios com alta afinidade e especificidade, distinguindo essas necessrio que a
ligao do hormnio
molculas entre as outras substncias presentes; e tambm transmitir a a seu receptor
desencadeie uma
informao, levando ao desencadeamento da resposta celular. Entretanto, srie de reaes
a resposta a um determinado hormnio no depende apenas da presena intracelulares que
levem modificao
do receptor, mas tambm da presena dos sistemas de TRANSDUO DO SINAL do metabolismo da
clula. Os eritrcitos,
hormonal na clula-alvo. por exemplo, possuem
A ao hormonal em tecidos especficos pode ser direcionada ou receptores para
insulina, mas, pela
amplificada por vrios mecanismos. A distribuio dos receptores pode falta de molculas
necessrias sua
variar consideravelmente: enquanto o receptor da insulina est presente ao, no exibem
respostas tpicas a esse
em todos os tipos celulares, os receptores para mineralocorticides so
hormnio.
encontrados apenas em clulas renais. A liberao de hormnios dentro
de um sistema de circulao restrita consiste em um outro mecanismo de
SISTEMA
direcionamento hormonal. O fgado recebe mais insulina que os demais
P O R TA - H E P T I C O
tecidos, uma vez que a quantidade desse hormnio que chega ao tecido O sangue proveniente
heptico pelo SISTEMA PORTA bem maior do que a que atinge os tecidos do trato gastro-
intestinal chega ao
extra-hepticos pela circulao sistmica. fgado pela veia
porta-heptica, cujas
Receptores hormonais podem ser subdivididos em dois grupos ramificaes banham
principais: aqueles que se encontram na superfcie celular, que vo mediar os lbulos hepticos.
Assim, os nutrientes
respostas citoplasmticas, e aqueles de localizao intracelular, que vo provenientes da
alimentao so
atuar geralmente no ncleo da clula-alvo (Figura 31.4). filtrados pelo fgado
antes de atingirem a
Hormnios esterides
circulao sistmica.
O mesmo ocorre
Transmissores com o hormnio
Hormnios tireoideanos Hormnios peptdeos insulina, que tambm
Vitamina D liberado do pncreas
Receptor de na veia porta-
membrana heptica.
AMPc Ca2+
CEDERJ 227
BIOQUMICA II | Introduo aos hormnios
228 CEDERJ
31 MDULO 7
Receptor com Receptores associados Receptores acoplados Receptores associados
Classe
atividade cinsica a cinases protena G a canais inicos
AULA
Ligantes Insulina, fatores Hormnio do Insulina, fatores Neurotransmissores,
de crescimento crescimento, de crescimento aminocidos
prolactina, citocinas
Estrutura
Segundo mensageiro
Protena tirosina ou Tirosina cinase (AMPC IP3 on) on
serina cinase associada ao receptor
Protenas cinases
citoplasmticas
Figura 31.5: Principais classes de receptores de membrana para hormnios e neurotransmissores. A insulina e
muitos fatores de crescimento se ligam a receptores de membrana que atuam como tirosinas cinases, catalisando a
fosforilao de protenas em seus resduos de tirosina; o hormnio do crescimento, a prolactina e muitas citocinas
se ligam a receptores que se associam a tirosinas cinases citoplasmticas; uma terceira classe de agonistas se liga
a receptores (R) que se acoplam a um efetor (geralmente enzimas que produziro segundos mensageiros) (E)
atravs de protenas G (G); a quarta classe de receptores inclui aqueles associados a canais inicos.
CEDERJ 229
BIOQUMICA II | Introduo aos hormnios
1 molcula Receptor
do sinalizador
Protena-
cinase
Cada cinase fosforila
muitas cpias de uma Amplificao
enzima
Enzima X
230 CEDERJ
31 MDULO 7
A subunidade apresenta atividade GTPsica,
AULA
convertendo o GTP em GDP, tornando-se
inativa e dissociando-se da adenilato ciclase.
Cada receptor pode interagir e ativar muitas ATP
!
Voc j viu exemplos de enzimas reguladas atravs de fosforilao catalisada
pela PKA em aulas anteriores.
CEDERJ 231
BIOQUMICA II | Introduo aos hormnios
PT R
R
R
R
R
RNAm
R
Protena
hsp
Efeitos fisiolgicos
Figura 31.7: Mecanismo de ao de hormnios esterides. O esteride () chega clula-alvo associado a uma
protena transportadora (PT). Os receptores (R) so protenas intracelulares presentes no ncleo ou no citoplasma
associados a protenas de choque trmico (heat shock proteins, hsp), quando no ligados ao hormnio. O complexo
hormnio-receptor se liga ao DNA em regies especficas, modulando a expresso gnica.
232 CEDERJ
31 MDULO 7
RESUMO
AULA
Nesta aula, voc aprendeu que a comunicao entre as diferentes clulas de um
organismo, para que ele funcione de forma integrada, se d graas aos hormnios.
Estas molculas podem ser peptdeos, como o caso da insulina e do glucagon;
lipdeos, como os hormnios esterides; ou derivados de aminocidos, como, por
exemplo, a adrenalina e os hormnios da tireide. Voc viu, tambm, que os
mecanismos de sntese, secreo e degradao dos hormnios podem ser muito
variados. Para fins didticos, os hormnios podem ser agrupados em duas grandes
classes, de acordo com seu mecanismo de ao: aqueles cuja ao se d a partir de
sua ligao superfcie celular e aqueles que se ligam a receptores intracelulares
e atuam sobre a expresso gnica.
EXERCCIOS
CEDERJ 233
32
AULA
Glucagon e adrenalina
objetivos
Pr-requisitos
Esta aula e a prxima vo explorar a
integrao hormonal do metabolismo. Por
isso, ser importante que voc tenha uma
viso geral bem clara do metabolismo e das
vrias vias que o compem. Aproveite para
adiantar o estudo de toda a matria antes
de comear a ler estas aulas. Assim, elas
serviro para reforar seus conhecimentos e
podero fornecer uma viso mais ampla do
funcionamento do nosso organismo.
BIOQUMICA II | Glucagon e adrenalina
GLUCAGON
Para fins didticos, glndula de fundamental importncia para a digesto dos alimentos e
o pncreas pode ser
estudado em duas para a regulao do metabolismo de macronutrientes.
pores:
O pncreas contm um grupo de clulas especializadas, as Ilhotas
Pncreas exgeno: de Langerhans. Nas Ilhotas de Langerhans, existem trs subpopulaes
sintetiza e secreta
enzimas responsveis de clulas distintas, as clulas , as clulas e as clulas , que so
pela digesto de
protenas (tripsina,
responsveis pela sntese e secreo dos hormnios glucagon, insulina e
quimotripsina e somatostatina, respectivamente.
carboxipeptidase),
carboidratos (amilase) Uma vez sintetizado, o glucagon pode ser secretado diretamente ou ficar
e lipdeos (lipase)
provenientes da dieta, estocado dentro de vesculas secretrias no interior das clulas . Os principais
alm de secretar controladores fisiolgicos da liberao de glucagon so a hipoglicemia, a
bicarbonato de sdio.
hiperaminoacidemia (aumento dos nveis de aminocidos no sangue; neste
Pncreas endgeno:
sintetiza e secreta caso, principalmente aumento de arginina), baixos nveis circulantes de cidos
os hormnios
graxos e estmulo do sistema adrenal (estresse ou exerccio).
glucagon, insulina e
somatostatina.
O receptor de glucagon
!
Voc aprendeu sobre receptores acoplados protena G na Aula 31 de
Bioqumica II e na Aula 14 de Biologia Celular I.
236 CEDERJ
32 MDULO 7
AULA
Figura 32.1: Representao esquemtica do receptor de glucagon. As sete hlices
transmembrana so exemplificadas na figura. A regio superior corresponde s
regies extracelulares do receptor, enquanto a regio inferior representa a poro
intracelular. Associadas ao receptor esto esquematizadas as trs subunidades da
protena G.
Mecanismo de ao do glucagon
!
Para relembrar o que so as protenas G e como os nveis intracelulares de
AMPc so controlados por elas, releia o final da Aula 31 de Bioqumica II e a
Aula 14 de Biologia Celular I.
CEDERJ 237
BIOQUMICA II | Glucagon e adrenalina
Adenilato ciclase
ATP
Protena G
AMPc
PKA
Figura 32.2: Eventos desencadeados pela ligao do glucagon a seu receptor presente na superfcie celular.
C C PKA ativa
238 CEDERJ
32 MDULO 7
Agora voc deve estar se perguntando: afinal, que enzimas so
AULA
essas e quais so os efeitos do glucagon no metabolismo energtico?
Vamos responder a essa pergunta a seguir.
O metabolismo de glicognio
!
Antes de ser batizado com seu nome atual, o glucagon era conhecido como fator hiperglicemiante
glicogenoltico. Isso se deveu a algumas experincias realizadas entre 1921 e 1938, que mostraram que
extratos pancreticos injetados em animais sem pncreas provocavam rapidamente hiperglicemia, em
decorrncia da mobilizao do glicognio heptico. De fato, o primeiro efeito conhecido do glucagon foi
o estmulo da degradao do glicognio.
fosforilar esta enzima. Essa fosforilao faz com que a glicognio sintase
passe de sua forma a (ativa) para a forma b (inativa).
A fosforilase cinase tambm fosforilada pela PKA, tornando-se
ativa. Essa enzima catalisa a fosforilao da glicognio fosforilase, a
enzima-chave da degradao do glicognio. Quando fosforilada, a
glicognio fosforilase sofre uma mudana conformacional, passando
da forma b (inativa) para a forma a (ativa).
Veja um esquema da regulao da sntese e da degradao do
glicognio na Figura 32.4.
CEDERJ 239
BIOQUMICA II | Glucagon e adrenalina
Glicognio sintase
a (ativa)
Glicognio
fosforilase b
(inativa)
Protena cinase
Fosfoprotena fosfatase
P
Glicognio
fosforilase b
(inativa)
P
Glicognio
fosforilase a (ativa)
P
Figura 32.4: Esquema da regulao das enzimas-chave da sntese (glicognio sintase) e da degradao (glicognio
fosforilase) em resposta ao do glucagon.
240 CEDERJ
32 MDULO 7
O principal efeito do glucagon sobre a gliclise/gliconeognese acontece
AULA
sobre a enzima bifuncional fosfofrutocinase-2/frutose-2,6-bisfosfatase.
Como voc j aprendeu na Aula 30, essa enzima catalisa duas reaes distintas:
a converso de frutose-6-fosfato (frutose-6P) em frutose-2,6-bisfosfato
(F2,6BP) e a reao reversa, a converso de F2,6BP em frutose-6P.
A fosforilao da enzima bifuncional pela PKA leva a uma
modificao de sua atividade. A enzima fosforilada apresenta atividade
F2,6BPase, enquanto sua defosforilao inibe essa atividade fosfatsica
e ativa a poro PFK2 da enzima.
Mas o que faz F2,6BP? Tente lembrar e confira se sua resposta
estava correta lendo o texto a seguir.
F2,6BP um potente ativador da fosfofrutocinase-1 (PFK-1),
enzima-chave da gliclise. Ao mesmo tempo, essa substncia tambm
inibe a frutose-1,6-bisfosfatase, enzima da gliconeognese.
Assim, quando a PKA ativada devido ao do glucagon, os
nveis intracelulares de F2,6BP diminuem, levando inibio da PFK-1
e, conseqentemente, da gliclise, e ativao da frutose-1,6-bisfosfatase e,
conseqentemente, da gliconeognese.
Outro efeito importante do glucagon sobre a gliclise a regulao
da enzima piruvato cinase (PK). Essa enzima catalisa a ltima reao
da gliclise, a converso de fosfoenolpiruvato (PEP) em piruvato com
concomitante sntese de uma molcula de ATP. A fosforilao da PK
heptica catalisada pela PKA e leva a uma drstica reduo de sua
atividade. Com isso, a gliclise fica inibida. Essa regulao tambm
importante para garantir que o PEP, formado na primeira etapa da
gliconeognese, no seja reconvertido em piruvato (voc j viu isso em
mais detalhes na Aula 30; se achar necessrio, volte at l).
CEDERJ 241
BIOQUMICA II | Glucagon e adrenalina
242 CEDERJ
32 MDULO 7
Pncreas
(clulas )
AULA
Glucagon
Protena
Intestino Fgado
Aminocido
Veia porta Glicerol
Glicose
Uria
Entercitos Lactato Corpos
cetnicos
Alanina Alanina
Glicerol Crebro
CO2 + H2O
cidos graxos
Alanina
Lactato
Lipdeos
Glutamina
Hemcias
Tecido adiposo
Protena
Tecido muscular
ADRENALINA
CEDERJ 243
BIOQUMICA II | Glucagon e adrenalina
Dopamina
Catecol
Norepinefrina
Epinefrina
ADRENAL A adrenalina secretada pela glndula ADRENAL (de onde vem seu
A adrenal pode nome), que se localiza acima dos rins e, por isso, tambm conhecida
ser dividida em
duas partes: o como glndula supra-renal.
crtex, que secreta
Em resposta a situaes de estresse agudo (estresse psicolgico,
glicocorticides e
mineralocorticides cansao fsico, jejum prolongado ou hipoglicemia, perda sangnea e
(falaremos desses
hormnios na Aula diversas condies patolgicas), ocorre ativao do sistema nervoso
33); e a medula, cujo
principal produto
simptico, que parte integrante do sistema nervoso autnomo.
de secreo a Como parte dessa resposta adaptativa, h aumento da liberao de
adrenalina.
catecolaminas pela adrenal. A liberao dessas substncias no sangue e
sua atuao em rgos perifricos, principalmente no caso da adrenalina,
promovem as conhecidas reaes de fuga ou luta. Essas reaes so
caracterizadas por dilatao pupilar, taquicardia, sudorese, tremores,
aumento da glicemia.
!
As aes dos produtos secretados pela adrenal tm grande correlao com as
funes do sistema nervoso simptico. Dessa forma, freqentemente usamos
o termo sistema simptico-adrenal para ressaltar as inter-relaes existentes
entre o sistema nervoso autnomo e o sistema endcrino representado pela
adrenal.
244 CEDERJ
32 MDULO 7
Receptores adrenrgicos
AULA
A adrenalina uma molcula polar e solvel em meio aquoso e,
portanto, incapaz de atravessar a membrana plasmtica das clulas.
Assim, uma vez liberada na circulao, a adrenalina exerce seus efeitos
intracelulares por intermdio da ao de receptores de membrana,
os chamados receptores e -adrenrgicos. Os receptores adrenrgicos,
assim como os receptores de glucagon, se encontram associados
protena G. Como voc j deve estar suspeitando, a seqncia de eventos
que ocorrem a partir da ligao da adrenalina a seu receptor semelhante
quela descrita para a ao do glucagon.
isso mesmo! Entretanto, a distribuio dos receptores
adrenrgicos entre os tecidos diferente da distribuio dos receptores
de glucagon, de forma que os efeitos gerais sobre o metabolismo tambm
vo ser diferentes frente a um estmulo de adrenalina ou de glucagon.
CEDERJ 245
BIOQUMICA II | Glucagon e adrenalina
Glicose
CO2
CO2
Lactato
246 CEDERJ
32 MDULO 7
Efeitos da adrenalina sobre o msculo cardaco
AULA
A adrenalina exerce efeitos bem caractersticos no msculo
cardaco. Como j comentamos, situaes de estresse muitas vezes
tornam necessrio o aumento da freqncia cardaca, o aumento da fora
de contrao e, por conseguinte, maior efetividade no bombeamento
de sangue, com oxignio e nutrientes para todo o organismo. Isso s
possvel se ocorrer um aumento na taxa de metabolismo basal do
cardiomicito, ou seja, aumento no consumo de oxignio e aumento na
produo de ATP. Torna-se bvio ento que, nessa situao, ao contrrio
do que ocorre em nvel heptico, necessrio que a adrenalina promova
um aumento da gliclise cardaca, a fim de maximizar a produo de
energia para a contrao muscular.
No cardiomicito, a adrenalina tambm age via receptor
-adrenrgico, com ativao da adenilato ciclase e de todos os outros
efeitos atrelados ao aumento nos nveis de AMPc, resultando na ativao
da PFK-1 pela F2,6BP, como ocorre no msculo esqueltico.
Estudos recentes mostraram que, no tecido muscular cardaco
sob influncia de adrenalina, o glicognio utilizado preferencialmente,
seguido pela glicose exgena e, finalmente, pela oxidao de cidos
graxos, que ocorre em nveis muito inferiores. Entretanto, a oxidao de
cidos graxos continua sendo muito importante no suprimento energtico
de outros tecidos, principalmente durante o jejum.
CEDERJ 247
BIOQUMICA II | Glucagon e adrenalina
RESUMO
EXERCCIOS
248 CEDERJ
33
AULA
Insulina e glicocorticides
objetivo
Pr-requisito
Esta aula tambm vai explorar a integrao
hormonal do metabolismo. Por isso, ser
importante, novamente, adiantar o estudo de
toda a matria antes de comear a ler a aula, de
forma que voc tenha uma boa viso geral do
metabolismo e das vrias vias que o compem.
BIOQUMICA II | Insulina e glicocorticides
INSULINA
+
NH3
+ +
Seqncia + H3N
NH3 NH3
de sinalizao
S SS S S S
Cadeia A Cadeia B
C B B S S
SS S S
-
OOC
Figura 33.1: Processo de formao da insulina. A insulina madura formada a partir de seu precursor pr-pr-insulina
atravs de sucessivas reaes de protelise. A remoo de 23 aminocidos (seqncia de sinalizao) na regio
animo-terminal da pr-pr-insulina e a formao de trs pontes dissulfeto produzem a pr-insulina. Posteriormente,
nova protelise remove o peptdeo C, formando a insulina madura, composta por duas cadeias A e B.
250 CEDERJ
33 MDULO 7
Secreo de insulina pelas clulas
AULA
As clulas do pncreas secretam quantidades precisas de insulina
em resposta a sutis aumentos na concentrao basal de glicose plasmtica.
O principal estmulo fisiolgico para a secreo de insulina , portanto,
!
a glicose.
Existem algumas drogas,
Quando nos alimentamos, a absoro dos nutrientes um processo utilizadas no tratamento
do diabetes, denominadas
gradual e contnuo, que se inicia aproximadamente 20 minutos aps o hipoglicemiantes orais,
que tambm estimulam
incio da refeio. Os nveis plasmticos de glicose aps uma refeio a secreo de insulina
(estmulo clnico).
podem chegar a mais de 10mM, ou seja, o dobro dos nveis basais.
Portanto, de suma importncia que a secreo de insulina seja um
processo tambm gradual, acompanhando as oscilaes dos nveis
plasmticos de glicose.
Receptor e mecanismos de ao
Insulina ligada
ATP
P
ADP
Protena-alvo Tyr
Efeitos intracelulares
CEDERJ 251
BIOQUMICA II | Insulina e glicocorticides
!
Os estudos referentes ao mecanismo de ao da insulina tm grande
importncia face alta prevalncia de diabetes mellitus em todo o mundo.
O diabetes a terceira maior enfermidade, que acomete pelo menos 3% da
populao europia e norte-americana e 100 milhes de pessoas em todo o
mundo.
252 CEDERJ
33 MDULO 7
Efeitos da insulina sobre a captao de glicose
AULA
Um dos principais efeitos promovidos pela PI3K o aumento da
captao de glicose por determinadas clulas, principalmente clulas
musculares e clulas do tecido adiposo. Isso evita um aumento indesejvel
da concentrao plasmtica desse acar. Mas como isso ocorre?
A entrada de glicose nas clulas se d atravs de protenas
transportadoras de glicose, que so chamadas GLUT (Glucose
Transporter, ou seja, transportador de glicose). Os diferentes tecidos
expressam diferentes tipos de GLUT (Tabela 33.1).
KM aproximado
Transportador Distribuio Caractersticas
para glicose (mM)
CEDERJ 253
BIOQUMICA II | Insulina e glicocorticides
Estimulao do
tranporte de glicose Membrana Insulina
GLUT-4 plasmtica Receptor
Exerccio
de insulina
ATP
Cinase ativada Protenas
por AMP ? ? cinase B Fosforilao nos resduos de tirosina
(Akt)
Cinases
Translocao dependentes de p110 p85 IRS-1
para fosfatidil inositol
membrana
plasmtica Fosfoditil Domnios SH2
Protenas inositol-3-cinase
? cinase C
atpica
Citoplasma
Vesculas contendo
GLUT-4 (responsivos Vesculas contendo
ao exerccio) GLUT-4 (responsivos
insulina)
Figura 33.4: Efeito da insulina sobre os GLUT4. A ligao da insulina a seu receptor induz um aumento da atividade
tirosina cinsica deste ltimo. Um dos principais substratos desse receptor a protena IRS-1 que, fosforilada, vai ativar
a PI3K. A fosforilao do fosfatidilinositol na posio 3, catalisada por essa enzima, levar migrao das vesculas
contendo GLUT4 para a superfcie das clulas adiposas e musculares. Quando a insulina se desliga dos receptores, os
transportadores de glicose GLUT4 so internalizados por endocitose e armazenados em vesculas citoplasmticas.
254 CEDERJ
33 MDULO 7
Fgado:
AULA
Ativao da gliclise e inibio da gliconeognese;
Ativao da sntese de glicognio e inibio da sua degradao;
Ativao da sntese de cidos graxos;
Ativao da via das pentoses.
Msculo:
Aumento da captao de glicose;
Ativao da sntese de glicognio e inibio da sua degradao.
Tecido adiposo:
Aumento da captao de glicose;
Ativao da sntese de cidos graxos;
Ativao da via das pentoses.
CEDERJ 255
BIOQUMICA II | Insulina e glicocorticides
CH2OH
C O
CH3
HO OH
CH3
Secreo de glicocorticides
256 CEDERJ
33 MDULO 7
Mecanismo de ao dos glicocorticides
AULA
Ao contrrio dos hormnios peptdicos, os glicocorticides no
necessitam ligar-se a receptores na membrana celular para desempenhar
seus principais papis. Por serem lipdeos, esses hormnios apresentam
natureza hidrofbica, podendo assim atravessar a membrana e encontrar
receptores especficos intracelulares, localizados no citoplasma ou no
ncleo das clulas-alvo. A ligao do hormnio promove mudanas
conformacionais no receptor, resultando na formao de um complexo
ativado, com alta afinidade por determinados stios do DNA, chamados
elementos regulatrios. Geralmente, a ligao do complexo hormnio-
receptor a esses elementos regulatrios afeta a expresso gnica,
induzindo ou reprimindo a iniciao da transcrio de genes especficos.
Os produtos da traduo dos RNA mensageiros de sntese regulada por
esses hormnios promovero efeitos metablicos nas clulas-alvo.
!
Lembre-se! Voc j aprendeu na Aula 31 que receptores hormonais podem ser
subdivididos em dois grupos principais: aqueles que se encontram na superfcie
celular e vo mediar respostas citoplasmticas e aqueles de localizao intracelular
e que vo atuar geralmente no ncleo da clula-alvo.
CEDERJ 257
BIOQUMICA II | Insulina e glicocorticides
200 200
100 100
0 0
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5
Dias de tratamento Dias de tratamento
Figura 33.6: Atividade das enzimas gliconeognicas durante tratamento com glicocorticides. 100%: atividades
obtidas nos animais controle; ( ) tratados com glicocorticide; ( o ) tratado com glicocorticide + actinomicina D.
258 CEDERJ
33 MDULO 7
Tabela 33.3: Nveis de RNA mensageiro para a PEPCK de hepatcitos em cultura,
mantidos na presena ou ausncia de glicocorticides.
AULA
Condio RNA da PEPCK (% mRNA total)
CEDERJ 259
BIOQUMICA II | Insulina e glicocorticides
RESUMO
260 CEDERJ
33 MDULO 7
EXERCCIOS REFERENTES S AULAS 31, 32 E 33
AULA
1. A meia-vida da maioria dos hormnios no sangue relativamente curta. Por
exemplo, se injetarmos insulina marcada radioativamente em um animal, metade
do hormnio desaparecer do sangue aps 30min.
a) Qual a importncia dessa inativao relativamente rpida dos hormnios
circulantes?
50 120
Atividade da glicognio
p (pmol/unidade)
sintase (%)
40 80
30 40
32
20 0
0 10-9 10-8 10-7 10-6 0 10-9 10-8 10-7 10-6
Glucagon (M) Glucagon (M)
CEDERJ 261
BIOQUMICA II | Insulina e glicocorticides
2,8 12 Lactato
0,6 AMPc Frutose-2,6-bifosfato
2,4 10
2,0 8
nmoles/g
nmoles/g
0,4
nmoles/g
1,6 6
1,2
4
0,2 0,8
0,4 2
0,0 0
0,0 0 10 20 30 40 50 60 70 80
0 10 20 30 40 50 60 70 80
0 10 20 30 40 50 60 70 80
Adrenalina Adrenalina
Adrenalina
262 CEDERJ
33 MDULO 7
3-metil-glicose 3-metil-glicose + insulina
AULA
Tipo Celular
mol/g mol/g
g/dia g/dia
tecido/min tecido/min
50,0
Concentro de Cortisol (mg/dl)
10,0
5,0
1,0
0,5
CEDERJ 263
Bioqumica II
Gabarito
Aulas 31, 32 e 33
266 CEDERJ
4. a) Os nveis de AMPc aumentam em resposta ao aumento da concentrao de
adrenalina no meio de incubao. Isso ocorre porque a ligao da adrenalina
ao seu receptor celular desencadeia mudanas conformacionais no receptor que
alteram sua interao com a protena G associada a ele, levando dissociao
da subunidade , que passa a interagir com a adenilato ciclase, ativando-a.
A adenilato ciclase catalisa a converso de ATP em AMPc, aumentando, assim,
os nveis intracelulares deste metablito.
Os nveis de F2,6BP aumentam em resposta ao aumento da concentrao
de adrenalina no meio de incubao. Isso ocorre porque o AMPc se liga s
subunidades regulatrias da PKA, levando a sua dissociao das subunidades
catalticas. Estas ltimas passam a catalisar a fosforilao de uma srie de
protenas celulares, dentre as quais a enzima bifuncional PFK2/F2,6Bpase.
A fosforilao da isoforma muscular desta enzima promove a ativao de sua
atividade PFK e a inibio de sua atividade F2,6Bpase, levando converso de
F6P em F2,6BP.
Os nveis de lactato aumentam em resposta ao aumento da concentrao de
adrenalina no meio de incubao. Isso ocorre porque F2,6BP um potente ativador
da enzima glicoltica PFK, aumentando, assim, o fluxo glicoltico. Como o aporte de
oxignio insuficiente para a completa oxidao da glicose, o excesso de piruvato
formado na via glicoltica convertido em lactato, permitindo a reoxidao dos
NADH formados na gliclise e a continuidade do metabolismo anaerbico.
b) No seria observado nenhum efeito j que as clulas musculares no possuem
receptores para glucagon.
CEDERJ 267
b) Intermedirios fosforilados no podem sair da clula porque a membrana
no permevel a molculas carregadas. Em situaes de fuga ou luta,
a concentrao de precursores glicolticos devem ser altas para garantir a
atividade muscular em anaerobiose. O fgado, por outro lado, deve liberar a
glicose necessria para manter a glicemia. A glicose-6-fosfato formada no fgado
convertida em glicose pela enzima heptica glicose-6-fosfatase sendo, ento,
liberada na corrente sangnea.
268 CEDERJ
8. a) A secreo de glicocorticides pode se desencadeada em resposta a estresses
de diferentes naturezas, dentre os quais, a hipoglicemia. A baixa concentrao
sangunea de glicose percebida por uma regio especializada do hipotlamo,
induzindo a secreo de um hormnio peptdico, o hormnio liberador de
corticotrofina (CRH) (corticotrophin releasing hormone). Este hormnio induz a
liberao de ACTH pela glndula pituitria. O ACTH atua na glndula adrenal,
estimulando a produo de glicocorticides.
b) Os glicocorticides so hormnios lipdicos, podendo atravessar a membrana
da clula e ligar a receptores intracelulares. O complexo formado pelo glicocor-
ticide associado ao seu receptor atua sobre a expresso gnica. Assim, esses
hormnios so capazes de induzir a expresso de uma srie de enzimas, dentre
as quais as transaminases, importantes enzimas relacionadas ao metabolismo
de aminocidos. Isso favorece a converso dos aminocidos a piruvato ou a
intermedirios do ciclo de Krebs, que podem ser utilizados como substratos
para a gliconeognese. Os glicocorticides tambm induzem a transcrio e a
sntese de vrias enzimas da gliconeognese, como a PEPCK, a F1,6BPase e a
G6Pase, levando, assim, a um aumento dos nveis celulares totais dessas enzimas.
Assim, o resultado da ao dos glicocorticides , principalmente, o aumento
da produo de glicose pelo fgado, especialmente a partir de aminocidos
provenientes da degradao de protenas musculares.
CEDERJ 269
I SBN 85 - 89200 - 46 - 9
cdigo
de barras
9 788589 200462