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Revista Brasileira de Epidemiologia

verso impressa ISSN 1415-790Xverso On-line ISSN 1980-5497

Rev. bras. epidemiol. v.6 n.2 So Paulo jun. 2003

http://dx.doi.org/10.1590/S1415-790X2003000200009

Os biomarcadores e sua aplicao na avaliao da exposio aos


agentes qumicos ambientais

Biomarkers for evaluating exposure to chemical agents present in the


environment

Leiliane Coelho Andr Amorim

Departamento de Anlises Clnicas e Toxicolgicas, Faculdade de Farmcia, Universidade Federal


de Minas Gerais. Av. Olegrio Maciel, 2360; CEP 30180-112 - Bairro de Lourdes; Belo Horizonte,
MG - Brasil; leiliane@dedalus.lcc.ufmg.br

RESUMO

A Sade Ambiental tem como um de seus objetivos, a preveno dos danos sade causados por
contaminantes qumicos presentes no meio ambiente, fazendo com que os nveis desta exposio
sejam mantidos em valores que no constituam um risco inaceitvel. Para isso, tornam-se
necessrias a identificao e quantificao deste risco atravs da avaliao biolgica da exposio
humana.
Este um artigo de reviso que busca apresentar conceitos e concepes que abrangem o uso
dos parmetros biolgicos com a finalidade de avaliar a exposio s substncias qumicas e
estimar o risco das populaes expostas. Os biomarcadores podem ser usados para vrios
propsitos, dependendo da finalidade do estudo e do tipo da exposio e podem ser classificados
em trs tipos: de exposio, de efeito e de suscetibilidade, os quais so instrumentos que
possibilitam identificar a substncia txica ou uma condio adversa antes que sejam
evidenciados danos sade. Novos parmetros so apresentados, como os biomarcadores de
neurotoxicidade (ou marcadores substitutos), que tm como desafio detectar aes precoces de
agente qumicos que agem no sistema nervoso central atravs da identificao de indicadores
presentes no sistema perifrico, que so equivalentes aos parmetros presentes no tecido
nervoso.

Palavras-chave: Exposio s substncias qumicas. Biomarcadores de dose interna.


Biomarcadores de efeito. Biomarcadores de suscetibilidade. Biomarcadores de neurotoxicidade.

ABSTRACT

One of goals of environmental health is to prevent disease and injuries caused by chemical
pollutants present in the environment. The main objective is to keep chemical exposure to an
acceptable level that does not imply in risk. In order to accomplish that, it is necessary to identify
and quantify chemical risk through biological assessment of human exposure.
In this review, we present concepts and principles covering the utilization of biological indicators
in order to evaluate exposure to chemicals and risk to human health.
The use of biomarkers with different purposes may be classified in to three types: of exposure
(internal dose), of effect and of susceptibility, which are means for identifying toxic substances or
hazardous conditions before demage to health has occurred. New parameters are presented, such
as biomarkers of neurotoxicity (or surrogate indicators), whose purpose is to detect early action
of chemicals on the nervous system, through the determination of indicators present in peripheral
body fluids, which are equivalent parameters of the nervous tissue.

Key Words: Chemical exposure. Biomarkers of internal dose. Biomarkers of effect. Biomarkers of
susceptibility. Surrogate indicators.

Introduo

Diante do processo de modernizao e suas conseqncias, incluindo as desigualdades sociais,


poluio e degradao ambiental; a crescente concentrao de poder econmico e poltico; a
industrializao acelerada e o uso de novos mtodos tecnolgicos na agricultura, a espcie
humana est sujeita a uma srie de riscos decorrentes dos fatores ambientais envolvidos, tais
como: fatores psicolgicos, fatores acidentais, fatores biolgicos, fatores fsicos e fatores
qumicos.

No que se refere aos fatores qumicos, so inmeros os agentes potencialmente txicos, aos
quais a populao est exposta cotidianamente, atravs do ar que respira, da gua que bebe e do
alimento que ingere, representando as principais fontes de exposio. A avaliao da exposio
aos agentes qumicos constitui um importante aspecto para a sade pblica, tendo em vista a
possibilidade de se prevenir ou minimizar a incidncia de mortes ou doenas decorrentes da
interao das substncias qumicas com o organismo humano.

A avaliao da exposio, associada aos conhecimentos relativos aos efeitos na sade e os limites
considerados seguros, permite estabelecer as prioridades e as formas de interveno efetiva para
proteger uma populao dos riscos qumicos. Os estudos dos efeitos das substncias qumicas
sobre a sade possibilita avaliar o risco da populao exposta e constitui o primeiro passo na
fixao de normas ambientais para um contaminante qumico presente num meio. E para isso
importante conhecer a solidez e as limitaes dos dados toxicolgicos, assim como as
informaes disponveis provenientes destes estudos1.

Alguns tipos de informaes sobre os efeitos txicos de agentes qumicos s podem ser obtidos
mediante observaes diretas no homem. Estes estudos, cuidadosamente controlados, so
realizados com pequenas doses consideradas incuas para alguns tipos de efeitos. Ou so
realizados simplesmente por observaes clnicas em indivduos, em geral expostos no trabalho
s substncias qumicas2.

No entanto, as exposies controladas de seres humanos s substncias perigosas ou


potencialmente perigosas vem-se restringidas por consideraes ticas e, por isso, com grande
freqncia se recorre a estudos em animais para predizer a reao humana aos efeitos destas
substncias. O grau de confiabilidade com o qual se pode estimar os riscos sade humana,
tendo como base os testes de toxicidade realizados em animais, depende da qualidade dos dados,
assim como da quantidade e dos tipos de testes realizados2.

Alm destes estudos citados acima, os estudos epidemiolgicos sobre as populaes humanas
podem estabelecer os riscos associados a um determinado agente qumico. No entanto, ao
estudar as substncias qumicas presentes no ambiente, a fragilidade principal destes estudos se
deve a eles serem relativamente pouco eficazes para determinar se os efeitos observados na
sade so o resultado direto da exposio a uma substncia qumica em particular. Pelo fato de
de ser necessrio ocorrer uma exposio a um agente qumico durante um perodo longo para
que possam ser observadas diferenas perceptveis em uma populao, a Epidemiologia no deve
ser a base das decises regulamentares2. Entretanto, a Epidemiologia Ambiental procura
estabelecer associaes entre a exposio aos agentes qumicos e os efeitos adversos na sade,
presumivelmente causados por esta exposio 1, desafiando os limites estabelecidos frente aos
novos conhecimentos e possibilitando a proteo da sade de populaes expostas atravs do
controle e da vigilncia.

Avaliao da exposio aos contaminadores qumicos

A deteco precoce de uma exposio perigosa pode diminuir significativamente a ocorrncia de


efeitos adversos na sade. As informaes provenientes da monitorizao da exposio ambiental
ou ocupacional possibilitam a implantao de medidas de preveno e controle apropriadas,
sendo necessrios: a definio dos nveis permissveis de exposio, que, de acordo com os
conhecimentos atuais, so estabelecidos para no causar efeitos adversos decorrentes da
exposio qumica; e a avaliao regular dos possveis riscos sade associados exposio por
comparao com estes limites permissveis3.

A monitorizao da exposio um procedimento que consiste em uma rotina de avaliao e


interpretao de parmetros biolgicos e/ou ambientais, com a finalidade de detectar os possveis
riscos sade. A exposio pode ser avaliada por medida da concentrao do agente qumico em
amostras ambientais, como o ar (monitorizao ambiental), ou atravs da medida de parmetros
biolgicos (monitorizao biolgica), denominados indicadores biolgicos ou biomarcadores. A
Monitorizao Biolgica da exposio aos agentes qumicos, propriamente dita, significa a medida
da substncia ou seus metablitos em vrios meios biolgicos, como sangue, urina, ar exalado e
outros (por exemplo, mercrio na urina). Algumas vezes, o conceito de Monitorizao Biolgica
estendido para incluir tambm a deteco precoce de efeitos no adversos reversveis
(monitorizao biolgica de efeito) (por exemplo, cido delta aminolevulnico na urina). A
deteco de um efeito adverso (por exemplo, proteinria aumentada) indica que a exposio ou
tem sido excessiva, e alm disso tal medida mais apropriada para ser includa num programa
de deteco precoce de prejuzo sade (vigilncia da sade), devido exposio a uma
determinada substncia qumica, e no para fins de preveno4,5.

A Avaliao Biolgica da exposio s substncias qumicas s possvel quando estiverem


disponveis suficientes informaes toxicolgicas referentes ao mecanismo de ao e/ou
toxicocintica dos agentes qumicos aos quais os indivduos esto expostos. Quando a
Monitorizao Biolgica est baseada na determinao da substncia qumica ou do seu
metablito no meio biolgico, torna-se essencial o conhecimento de como a substncia
absorvida pelas diferentes vias; posteriormente, de como distribuda para os diferentes
compartimentos do organismo; de como biotransformada; e, finalmente, de como eliminada.
Alm de ser necessrio saber tambm se a substncia se acumula ou no no organismo 3,6.

Da mesma forma, se a Monitorizao Biolgica estiver baseada na medida de uma alterao


biolgica do organismo, causada pelo agente qumico, necessrio conhecer o processo da
toxicodinmica, ou seja, preciso conhecer o mecanismo de ao da substncia qumica para
identificar quais so os efeitos no adversos decorrentes daquela ao 3,6. Isso se faz necessrio
porque s a identificao e a medida de um efeito precoce, no adverso, podem ser usadas para
fins de preveno.

Indicadores biolgicos (ou biomarcadores)

Vrios so os parmetros biolgicos que podem estar alterados como conseqncia da interao
entre o agente qumico e o organismo; entretanto, a determinao quantitativa destes
parmetros usados como Indicadores Biolgicos ou Biomarcadores, s possvel se existir
correlao com a intensidade da exposio e/ou o efeito biolgico da substncia. Desta forma, o
Biomarcador compreende toda substncia ou seu produto de biotransformao, assim como
qualquer alterao bioqumica precoce, cuja determinao nos fluidos biolgicos, tecidos ou ar
exalado, avalie a intensidade da exposio e o risco sade4.
Seleo e validao dos biomarcadores

O processo de seleo e validao dos indicadores biolgicos requer cuidado em relao


especificidade e sensibilidade, assim como a medida da exposio e a manifestao dos efeitos
observados. A validao um processo utilizado para estabelecer a relao quantitativa e
qualitativa do biomarcador com a exposio, em funo da substncia qumica e do objetivo
selecionado7.

Para que uma substncia qumica, seu metablito ou uma alterao biolgica sejam validados
e/ou propostos como biomarcador, desejvel que o mesmo apresente as seguintes
caractersticas:7

A quantificao do indicador deve:

- refletir a interao (qualitativa ou quantitativa) do sistema biolgico com a


substncia qumica;

- ter conhecida e apropriada sensibilidade e especificidade para a interao;

- ser reprodutvel qualitativamente e quantitativamente.

Estar contido em um meio biolgico acessvel de anlise, considerando a necessidade de


manuteno da integridade da amostra entre a coleta e o procedimento analtico, e de
preferncia no ser invasivo.
A medio analtica tem que apresentar exatido e preciso adequadas.
Conhecer os valores normais do indicador em populaes no expostas ao agente qumico
de interesse, assim como as variaes intra e interindividuais.

Aplicao dos Biomarcadores

Os Biomarcadores podem ser usados para vrios propsitos, dependendo da finalidade do estudo
e do tipo da exposio qumica. Podem ter como objetivos avaliar a exposio (quantidade
absorvida ou dose interna), avaliar os efeitos das substncias qumicas e avaliar a suscetibilidade
individual. Alm disso, podem ser utilizados independentemente da fonte de exposio, seja
atravs da dieta, do meio ambiente geral ou ocupacional. A utilizao destes Biomarcadores pode
ter como finalidade elucidar a relao causa-efeito e dose-efeito na avaliao de risco sade;
para fins de diagnstico clnico; e para fins de monitorizao biolgica, realizada de maneira
sistemtica e peridica7.

O uso dos Biomarcadores na avaliao de risco fornece uma ligao crtica entre a exposio
substncia qumica, dose interna e prejuzo sade, e eles so valiosos na avaliao de risco.
Contudo, existe uma necessidade de identificar e validar para cada sistema orgnico estes
parmetros caractersticos que so indicativos de induo de disfuno orgnica, alterao clnica
e toxicidade patolgica, alm de estabelecer a especificidade e sensibilidade de cada biomarcador
e seu mtodo para determinao7.

Os Biomarcadores podem ser utilizados no diagnstico clnico para 7:

confirmar diagnstico de intoxicao agudo ou crnico;


avaliao da efetividade de tratamento;
avaliar o prognstico de casos individuais.

Os biomarcadores podem ser usados ainda na atividade de monitorizao para confirmar a


exposio individual ou de uma populao a uma determinada substncia qumica e avaliar o
risco, quando comparados com uma referncia apropriada. Sabendo-se que a Monitorizao
Ambiental realizada para reduzir as exposies ocupacionais e comprovar se as medidas
preventivas adotadas no ambiente so satisfatrias, a Monitorizao Biolgica tem como meta
principal verificar se existe segurana enquanto ocorre a presena do agente qumico no
ambiente de trabalho, em exposies presentes, e inclusive passadas, para evitar a ocorrncia de
efeitos adversos sade7.

A realizao da Monitorizao Biolgica da exposio ocupacional permite avaliar a exposio


global ao agente txico, alm de considerar os aspectos individuais de exposio aumentada
provenientes, por exemplo, de esforo fsico; e as suscetibilidades biolgicas 3.

Classificao dos Biomarcadores

Independente da finalidade e aplicao dos Biomarcadores, eles podem ser classificados em 3


tipos, a saber:

Os Biomarcadores de Exposio podem ser usados para confirmar e avaliar a exposio


individual ou de um grupo, para uma substncia em particular, estabelecendo uma ligao
entre a exposio externa e a quantificao da exposio interna.
Os Biomarcadores de Efeito podem ser usados para documentar as alteraes pr-clnicas
ou efeitos adversos sade decorrentes da exposio e absoro da substncia qumica.
Dessa forma, a ligao dos biomarcadores entre exposio e efeitos contribui para a
definio da relao dose-resposta.
Os Biomarcadores de Suscetibilidade permitem elucidar o grau de resposta da exposio
provocada nos indivduos6,7.

Biomarcadores de exposio (ou dose interna)

O indicador biolgico de exposio estima a dose interna, atravs da determinao da substncia


qumica ou de seu produto de biotransformao em fludos biolgicos, como sangue, urina, ar
exalado e outros, possibilitando quantificar a substncia no organismo, quando a toxicocintica
bem conhecida8.

Os biomarcadores de exposio refletem a distribuio da substncia qumica ou seu metablito


atravs do organismo, e por isso so identificados como dose interna. Conseqentemente, a dose
externa se refere concentrao do agente qumico presente no ambiente em contato com o
organismo. Teoricamente, a distribuio da substncia no organismo pode ser traada atravs de
vrios nveis biolgicos, como tecidos e clulas, at seu alvo definitivo 7, como mostra a Figura 1.
Da quantidade total absorvida da SQ, somente uma poro chegar at o tecido alvo. Uma
poro alcanar o stio crtico (stio alvo) na macromolcula, com somente uma frao da ltima
quantidade agindo como a dose biologicamente ativa. A escolha dos Biomarcadores para cada
uma destas formas de dose interna seria til para avaliao do risco 9. Na figura, o afunilamento
da base, a diminuio da quantidade total absorvida para cada nvel, a maneira como ocorre a
distribuio e o metabolismo, demonstram a diminuio da concentrao da dose interna que
alcana o tecido alvo (clula ou stio crtico)7.

Dependendo da substncia qumica e do parmetro biolgico analisado, o termo "dose interna"


pode abranger diferentes concepes. O biomarcador de dose interna pode refletir a quantidade
absorvida imediatamente antes da amostragem, como, por exemplo, a concentrao de um
solvente no ar alveolar ou no sangue durante a jornada de trabalho de indivduos expostos; pode
refletir a quantidade absorvida no dia anterior, como, por exemplo, a concentrao do solvente
no ar alveolar ou no sangue coletados 16 horas aps o final da exposio; ou refletir a quantidade
absorvida durante meses de exposio, quando a substncia tem um tempo de meia vida longo,
como, por exemplo, a concentrao de alguns metais no sangue 4,8.

A dose interna pode significar tambm a quantidade da substncia qumica armazenada em um


ou vrios compartimentos do organismo ou distribuda em todo o organismo. Isto geralmente se
aplica aos agentes txicos cumulativos4,8. Por exemplo, a concentrao dos inseticidas
organoclorados no sangue reflete a quantidade acumulada no principal stio de depsito (tecido
adiposo).

Por ltimo, como uma forma ideal, a dose interna pode representar a dose "verdadeira", ou seja,
a quantidade da substncia ligada ao stio alvo ou biodisponvel para interagir. Estes indicadores
podem ser viveis quando o rgo crtico for acessvel (por exemplo, a hemoglobina, no caso da
exposio ao monxido de carbono) ou quando o agente txico interage com constituintes do
sangue de forma similar aos constituintes do rgo crtico (por exemplo, alquilao da
hemoglobina, refletindo a ligao com DNA no tecido alvo). Neste caso, a dose interna pode ser o
produto da interao entre um xenobitico e alguma molcula crtica ou clula, como a medio
dos aductos covalentes formados com a substncia qumica e que podem ser mensurados num
compartimento dentro do organismo4,8. No entanto, a maioria dos indicadores biolgicos de dose
interna refletem apenas a exposio, ou seja, a quantidade absorvida do toxicante no organismo.

Para escolha do indicador biolgico de dose interna mais adequado a uma situao especfica de
exposio, necessrio o conhecimento do comportamento cintico do agente qumico presente
no ambiente. Alm disso, necessrio o conhecimento do tempo de permanncia da substncia
qumica no organismo para a definio do momento ideal para a coleta. Alguns biomarcadores de
dose interna, como benzeno no sangue, cido hiprico na urina, 2,5 hexanodiona na urina,
refletem apenas a exposio recente ao benzeno, tolueno e n-hexano, respectivamente.
Enquanto outros, como chumbo e mercrio, aps a quelao, refletem a exposio mdia dos
ltimos meses, e o cdmio na urina reflete a exposio dos ltimos anos 4,8.

Biomarcadores de efeito

O Biomarcador de Efeito um parmetro biolgico, medido no organismo, o qual reflete a


interao da substncia qumica com os receptores biolgicos. Muitos biomarcadores de efeito so
usados na prtica diria para confirmar um diagnstico clnico. Mas, para o propsito
da preveno, um biomarcador de efeito considerado ideal, aquele que mede uma alterao
biolgica em um estgio ainda reversvel (ou precoce), quando ainda no representa agravo
sade.

Geralmente, as alteraes bioqumicas so consideradas como uma fonte potencial de indicadores


biolgicos de efeito. Se considerarmos que estas alteraes precedem um dano estrutural, a
deteco destas alteraes biolgicas permite a identificao precoce de uma exposio excessiva
e interveno para prevenir um efeito irreversvel, ou seja, a doena. Esta estratgia baseada
na identificao das alteraes bioqumicas precoces e reversveis que so indicadores sensveis e
especficos de uma resposta do organismo exposio. A extenso em que estes biomarcadores
vo predizer uma resposta mais avanada (como doena ou risco de doena) requer
necessariamente mais pesquisas e evidncias atravs de estudos epidemiolgicos6.

Em geral, um marcador precoce no progresso de uma resposta do organismo tem uma


associao menor com o dano; no entanto mais til a sua aplicao com o propsito de prevenir
a doena (Figura 2). Para a ao preventiva de uma exposio excessiva (ou que provoca danos
sade), o efeito biolgico medido, que um biomarcador, tem que ser, necessariamente, um
efeito no adverso4.

A distino entre um efeito biolgico adverso e um efeito biolgico no adverso nem sempre
clara e algumas vezes torna-se arbitrria devido dificuldade de se avaliar o alcance do efeito na
sade. Entretanto, considera-se a ocorrncia de efeitos no adversos quando7:

ao serem produzidos numa exposio prolongada, no resultem em transtornos da


capacidade funcional nem da capacidade do organismo para compensar nova sobrecarga;
so reversveis e no diminuem perceptivelmente e capacidade do organismo de manter
sua homeostase orgnica;
no aumentam a suscetibilidade do organismo aos efeitos indesejveis e a outros fatores
de risco ambiental.

Dentre os indicadores biolgicos de efeito tem-se a carboxiemoglobina, a atividade da enzima


colinesterase eritrocitria, nveis de enzimas e intermedirios da biossntese do HEME, de
protenas na urina etc. Cada um apresenta caractersticas diferentes segundo a sua
especificidade. Por exemplo4:

Carboxiemoglobina (COHb): a COHb, apesar de ser um biomarcador de efeito, apresenta


uma correlao muito significativa com a exposio ambiental ao monxido de carbono, e
reflete a dose interna deste toxicante ligado ao tecido alvo;
Colinesterases: a determinao da atividade das enzimas colinesterase eritrocitria e
colinesterase plasmtica em indivduos expostos aos inseticidas organofosforados e/ou
carbamatos utilizada tambm para o diagnstico e o tratamento das intoxicaes.
Entretanto, no apresenta correlao muito significativa em exposies ambientais e/ou
ocupacionais leves ou moderadas a estes inseticidas. Ainda assim, considerado o
indicador biolgico de escolha.
Enzima cido delta amino-levulnico (ALA-D) nos eritrcitos: esta enzima altamente
sensvel inibio pelo chumbo. Em uma concentrao de chumbo na faixa de 5 a 40
mg/dL j possvel observar uma correlao negativa entre a ALA-D e o Pb/sg. Por isso,
representa um adequado indicador de efeito para exposio ambiental ao chumbo.
cido delta amino-levulnico (ALA) na urina: devido inibio da ALA-D pelo chumbo, o
ALA se acumula nos tecidos e excretado em grande quantidade na urina. No entanto,
este biomarcador apresenta correlao com concentraes de Pb/sg acima de 40ug/dL,
mostrando uma sensibilidade diferente da enzima. Por isso, considerado mais adequado
para avaliar a exposio ocupacional a este metal.

Alguns indicadores biolgicos de efeito possibilitam a avaliao da ao de uma substncia


qumica no orgo alvo (ou stio crtico) a partir da medida de uma alterao biolgica associada a
esta ao. No entanto, esta medida pode ter como limitao a dificuldade de acesso a certos
tecidos do organismo. Embora sejam parmetros importantes para prevenir possveis efeitos
nocivos sade, no so, em sua maioria, especficos para as substncias qumicas envolvidas, e
por isso requerem pesquisas com o propsito de validao dos mesmos. Alguns exemplos so
descritos abaixo:

Biomarcadores de nefrotoxicidade

Vrios tipos de parmetros tm sido testados e usados como biomarcadores de dano renal. Estes
tm sido classificados como10:

marcadores funcionais (por exemplo, creatinina srica e 2 microglobulina);


protenas de baixo ou alto peso molecular (por exemplo, albumina, transferina, globulina
ligada ao retinol);
marcadores de citotoxicidade (por exemplo, antgenos tubulares);
enzimas urinrias (por exemplo, N-acetilglicosaminidade, -galactosidade).

Os biomarcadores de nefrotoxicidade foram bem validados em relao exposio ao cdmio; no


entanto, no tm evidncias cientficas suficientes para a exposio ao mercrio e chumbo 10,11.

Biomarcadores de hepatoxicidade

Os efeitos de substncias qumicas no fgado tm sido estimados tradicionalmente por


determinao da atividade de vrias enzimas, como, por exemplo, aminotransferases, lcool
desidrogenase, lactato desidrogenase, glutationa-S-transferase, entre outras7.

A hepatotoxicidade causada por vrias substncias que so metabolizadas pelo Sistema


Citocromo P-450 a intermedirios reativos. Por exemplo, para o tetracloreto de carbono, tem sido
extensivamente estudada e bem documentada a sua ao hepatotxica. O metablito reativo do
tetracloreto de carbono inicialmente reduz a glutationa peroxidade (GPX) intracelular a um nvel
que predispe a reao do metablito com macromolculas crticas, levando morte celular e
hepatoxicidade. Neste caso, os biomarcadores de efeito poderiam incluir nveis de glutationa,
peroxidao lipdica ou nmero de clulas necrosadas 7,12. Estes biomarcadores de
hepatotoxicidade tambm esto associados exposio ao cromo VI no estudo de Huang
(1999)13.

Biomarcadores de genotoxicidade

Tcnicas sensveis baseadas em mtodos fsicoqumicos ou imunoqumicos para a deteco de


uma variedade de substncias conhecidas como carcinognicas tm sido desenvolvidas. Entre
estas esto includas as aflatoxinas, os hidrocarbonetos policclicos aromticos, as aminas
aromticas, e os praguicidas7.

Estes biomarcadores incluem os aductos de DNA e protena (aductos de hemoglobina e


albumina), que se referem ligao do xenobitico ou de seu metablitos a estas molculas,
formando os aductos6,14. Tendo em vista que os aductos constituem a prpria substncia qumica
ligada ao stio alvo, os mesmos so tambm considerados como biomarcadores de exposio ou
dose interna.

Biomarcadores de neurotoxicidade

A complexidade das funes do sistema nervoso, os eventos neurotxicos de natureza mltipla e


a variabilidade e inacessibilidade dos stios celulares e moleculares deste rgo so fatores que
limitam o estabelecimento de indicadores para se avaliar a ao neurotxica das substncias
qumicas. Acrescente-se a estes fatores, o fato de os efeitos neurotxicos, em geral, se iniciam
tardiamente, aps exposies prolongadas ou mesmo, aps um perodo de latncia, depois de
terminada a exposio. Neste sentido, tem-se procurado validar alguns parmetros que possam
permitir a deteco precoce da ao neurotxica, antes que seja evidenciado um dano sade do
indivduo exposto, seja por exposio ocupacional ou ambiental, considerando principalmente as
crianas. So vrios os indicadores utilizados para se avaliar o risco e a exposio a uma
substncia neurotxica. Alguns estudos abordam trs enfoques 15,16,17:

Enfoque neurofisiolgico

O enfoque neurofisiolgico, como o estudo da conduo nervosa, o eletroencefalograma etc.,


bastante til no diagnstico de desordens neurolgicas, mas a utilizao destes parmetros na
identificao dos efeitos neurolgicos iniciais ainda pouco estabelecida e por isso apresenta um
baixo valor preditivo. Quanto avaliao clnica, a mesma deve ser realizada com base num
protocolo muito bem detalhado15,18.

Enfoque neurocomportamental

Mtodos para avaliar alteraes de funes cognitivas, como, por exemplo, aprendizagem e
memria, tm sido extensivamente utilizados em indivduos expostos a solventes e metais
pesados. No entanto, em relao aos testes neurocomportamentais, estes podem estar alterados
por motivos outros que no por ao de um xenobitico. Por isso, para concluir sobre uma ao
neurotxica atravs de testes neurocomportamentais, estes devem ser extremamente bem
delimitados e interpretados15,19,20.

Enfoque neuroqumico

No enfoque neuroqumico, vrias evidncias experimentais mostram que, na progresso de


doenas neurotxicas, os eventos bioqumicos precedem as alteraes estruturais e danos
permanentes ao SNC. Dessa forma, a medida destas alteraes poderiam fornecer informaes
teis sobre os efeitos precoces (ou iniciais) detectveis, imediatamente antes ou logo aps o
incio da doena (intoxicao) 15,16,17.

Em geral, os eventos bioqumicos que ocorrem no Sistema Nervoso so considerados como


potenciais biomarcadores; no entanto, a principal limitao da medida destes parmetros a
inacessibilidade do tecido alvo. Geralmente, no Sistema Nervoso Central, muitos precursores e
produtos so reciclveis e retidos no local. Alm disso, as mudanas que acompanham a funo
neurolgica ocorrem dentro de um pequeno espao intra ou extra celular do prprio rgo, o que
leva impossibilidade de se implementar as rotinas de anlises dos mesmos. Diante disso, uma
nova metodologia de biomarcadores tem sido desenvolvida, procurando alcanar os propsitos da
avaliao de risco sade, utilizando tecidos mais acessveis para determinar indicadores
"substitutos" daqueles localizados no tecido nervoso15,16.

Por isso, tem-se observado que alguns parmetros bioqumicos e moleculares, semelhantes aos
envolvidos na ao txica ocorrida dentro do SNC, podem estar presentes em tecidos mais
acessveis, como fludo cerebral espinhal, sangue, plasma e clulas sangneas. Alguns destes
parmetros so15:
Receptores:

Receptores muscarnicos da Acetilcolina em linfcitos


Receptor sigma; receptor Beta e alfa2 em plaquetas

Enzimas:

Acetilcolinesterase eritrocitria
Esterase neurotxica em linfcitos
MAO tipo B em plaqueta
Dopamina Beta hidoxilase no soro

Sistema de recaptao:

5-Hidroxindolactico (serotonina) em plaquetas

Transduo do sinal nervoso:

Concentrao de clcio intracelular


Fosfoinositol em plaquetas e linfcitos

A medida destes parmetros permite avaliar, atravs de mtodos acessveis, a ao de um


agente qumico no sistema nervoso central, os quais so denominados Indicadores Substitutos de
Neurotoxicidade ou, simplesmente, Marcadores Substitutos. O estudo destas alteraes
bioqumicas pode possibilitar a oportunidade de se identificar precocemente uma exposio
excessiva e avaliar a neurotoxicidade para prevenir o aparecimento de efeitos ou danos
irreversveis21,22.

Entretanto, a escolha dos indicadores substitutos no fcil e nem sempre possvel.


necessrio que estes parmetros perifricos sejam equivalentes ou ento correlacionados
funcionalmente ao parmetro correspondente no SNC. Esta correspondncia deve ser
comprovada atravs de estudos experimentais que demonstrem que o parmetro sob
investigao tenha a mesma caracterstica bioqumica e funcional daquele presente no SNC; e
que as alteraes quimicamente induzidas neste parmetro ocorrem do mesmo modo nos dois
sistemas (perifrico e nervoso)15.

Posteriormente, a comprovao de que tal marcador biolgico substituto preditivo para


determinado xenobitico (seja para avaliar risco ou doena), requer necessariamente mais
pesquisas, incluindo vigilncia epidemiolgica e estudos prospectivos para a validao dos
mesmos. Vrios trabalhos23-30 tm apresentado, ultimamente, contribuies e discusses sobre o
uso destes marcadores perifricos (ou marcadores substitutos) de neurotoxicidade, nos quais
vrios autores apontam a necessidade de se incluir a avaliao de outros parmetros de
neurotoxicidade, como as alteraes neurocomportamental, neurofisiolgica e neuroclnica.

Biomarcadores de suscetibilidade

Por que alguns indivduos adoecem e outros no?

A predisposio gentica, alm de fatores externos, tais como idade, dieta, estilo de vida, podem
influenciar/afetar a suscetibilidade de indivduos expostos a substncias qumicas 7.

Embora alguns indivduos experimentem exposio ambiental similar, diferenas genticas no


metabolismo podem produzir doses marcadamente diferentes no stio crtico e,
conseqentemente, nvel diferente de resposta. At mesmo quando as doses crticas so
similares, respostas diferentes podem ser notadas nos indivduos devido a variaes na
suscetibilidade biolgica. Os biomarcadores de suscetibilidade podem refletir fatores genticos ou
adquiridos que influenciam na resposta do organismo a uma determinada exposio qumica.
Estes so fatores pr-existentes e independem da exposio. So predominantemente genticos,
embora a patologia, alteraes fisiolgicas, medicamentos e exposio a outros agentes
ambientais tambm possam alterar a suscetibilidade individual. Os biomarcadores de
suscetibilidade identificam aqueles indivduos na populao que tm uma diferena gentica ou
adquirida na suscetibilidade para os efeitos da exposio a substncias qumicas 6,7,31.

Os biomarcadores de suscetibilidade indicam quais os fatores podem aumentar ou diminuir um


risco individual no desenvolvimento da resposta do organismo decorrente da exposio aos
agentes qumicos ambientais. A Tabela 1mostra alguns biomarcadores de suscetibilidade
estabelecidos (e/ou propostos) para alguns agentes qumicos6.

Nveis de ao

A presena e evidncia de um risco qumico num ambiente so reconhecidas com base nos limites
permissveis no meio biolgico, os quais so propostos a partir das informaes obtidas nos
estudos de toxicidade, atravs das relaes dose-resposta, e reconhecidos como nveis de
advertncia. Os mesmos no devem ser considerados como valores que separam exposies
seguras de exposies perigosas. Eles so estabelecidos de diferentes maneiras, dependendo de
sua origem (pas e/ou instituio), atravs de7:

estudos epidemiolgicos, clnicos e experimentais que estabelecem a relao entre a


concentrao medida de um agente ou de seu metablito num meio biolgico com
conseqncias para a sade. So nveis de ao da biomonitorizao relacionados
diretamente com a sade; ou
derivados matematicamente dos limites de exposio ocupacional, ou seja, representam a
concentrao da substncia qumica ou de seu metablito, que dever estar presente na
amostra biolgica coletado de um trabalhador exposto ao limite mximo permitido no
ambiente.

No Brasil, os Limites Biolgicos de Exposio so estabelecidos para os Biomarcadores de


exposio e de efeito para substncias qumicas presentes no ambiente de trabalho, os quais
constam do Quadro I da Norma Regulamentadora n 7 32, onde constam os respectivos valores de
referncia para indivduos no expostos ocupacionalmente. Estes limites foram atualizados em
1994, recebendo a denominao de ndice Biolgico Mximo Permitido, e so estabelecidos para
apenas 26 substncias qumicas.
No que se refere exposio ambiental, as concentraes aceitveis so referenciadas em
Normas Internacionais e na comunidade cientfica. Entretanto, deve ser considerado que algumas
desta normas podem no ter como base estudos de toxicidade confiveis e adequados e no
serem apropriadas para indivduos sensveis (crianas, idosos, enfermos) ou para exposies
contnuas. Por isso, torna-se pertinente a realizao de estudos ambientais utilizando estes
parmetros biolgicos na avaliao do risco qumico.

Consideraes finais

Os biomarcadores, sejam de exposio ou de efeito, so ferramentas utilizadas nos estudos


epidemiolgicos ambientais, buscando-se estabelecer uma relao entre a exposio aos agentes
qumicos e os efeitos na sade dos indivduos expostos. A importncia do uso destes
biomarcadores como parmetros biolgicos de exposio s substncias qumicas deve-se ao fato
de eles estarem mais diretamente relacionados aos efeitos na sade do que os parmetros
ambientais. Por isso, podem oferecer uma melhor estimativa do risco.

A avaliao biolgica leva em considerao a absoro por diferentes vias e rotas de exposio de
um agente qumico, permitindo avaliar a exposio global do indivduo ou populao.

Em relao aos efeitos das substncias neurotxicas, o uso de biomarcadores substitutos permite
a associao com a exposio a baixos nveis, fornecendo conhecimentos e evidncias cientficas
necessrios para a aplicao de medidas de preveno e controle da exposio aos agentes
qumicos ambientais no mbito das polticas pblicas.