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Biologia dos Vírus

Prof. Everlon Cid Rigobelo

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Vírus Envelopados

• Presença de Membrana circundando o


nucleocapsídeo

• Maioria afeta animais - influenza

• Minoria infecta bactérias e plantas

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Vírus Envelopados

Constituição do Envelope

Bicamada Lipídica

Proteínas

Glicoproteínas

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Lipídeos

– Provenientes de Células Hospedeiras (HO)

• Proteínas

– Responsáveis pela Adesão HO

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Adesão Viral

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Qual é a função do envelope?

• Componente responsável pelo contato

– Relacionados
• Especificidade da infecção
• Aspectos da penetração viral no HO

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Envelope regula a penetração

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Vírus Complexos

• Constituídos por várias partes

• Geralmente são bacteriófagos

– T4 de E. coli

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Vírus Complexos

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Vírus Complexos - Herpes

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Vírus Complexo – Febre Amarela

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Estrutura dos Vírus Complexos

• Cauda – estrutura complexa


– Contem 20 proteínas diferentes

• Cabeça
– Contem outras 20 proteínas diferentes

• Formação
– Cauda e cabeça separadamente

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Enzimas Virais

• Partículas virais não realizam metabolismo


– Parasitas obrigatórios
– Metabolicamente inertes

• Penetração viral no HO
– Exige a presença de enzimas
– Realizam orifício na parede celular bacteriana
– Entrada do ácido nucléico viral

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Enzimas virais

• Estágios Tardios da Infecção


– Síntese de grande quantidade de lisozima
– Lise celular
– Liberação de virions

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Enzimas virais

Entricitabine
Inibe a síntese da enzima viral
Vírus de RNA

• Enzimas
– Transcriptase reversa
– DNA polimerase dependente de RNA

• RNA polimerase viral


– Célula HO possuem RNA polimerase
– RNA incompetente para sintetizar DNA ou RNA
– Quando o MOLDE RNA viral

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Enzimas

• Auxiliam a liberação do vírus no HO


– Neuraminidases
– Vírus de animais

• Agem em células animais


– Clivando ligações glicosídicas
– Glicoproteínas e glicosídeos

Promovem a
TECIDO CONECTIVO liberação do vírus

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Enzimas Virais

• Substituem ausência ou enzimas não funcionais

HOSPEDEIRO

Ausência de Enzimas

Ausência de Replicação Viral


Brotamento Saída do Vírus
Hospedeiro Viral

• Vírus são parasitas obrigatórios


– Replicação exige HO apropriados

• Enzimaticamente falando
– O vírus precisa carregar toda enzima
– Que seu HO não tem

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Três Tipos de Hospedeiros Virais

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Hospedeiros Virais

• Podem estar em culturas puras


– Meios liquídos ou semi-sólidos (ágar)

• Culturas de tecidos
– Facilitou os estudos de vírus
– Animais e plantas
– Plantas exigem a planta inteira

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Planta inteira

• Células possuem metabólitos diferenciados

• Estágio independentes
– Cada estágio de desenvolvimento
– Ocorre a síntese de metabolitos diferentes

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Estágios Metabolismos
Cultura de Células Animais

• Células retiradas de animais experimentais


– Órgãos dos animais

– Remoção asséptica de partes do tecido

– Dissociação das células

– Remoção do cimento intracelular

– Semeadura da suspensão sob superfície de garrafa

– Placa de Petri
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Culturas de Células Animais
• Formação de monocamada
– Meio de cultura adequado

– Meios complexos

– Amino ácidos

– Vitaminas

– Sais

– Glicose

– Sistema de tambonamento CaHCO3

– Soros sanguíneo
Cultura de células

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Cultura de Célula Animal

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Cultura de células eucarióticas

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Tecido da Pele Animal

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Diversidade de células

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Cultura de Célula Vegetal

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Piadas

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Cultura de Células

• Uso de antibióticos
– Evitar contaminação bacteriana

• Algumas culturas podem crescer subcultivadas


– Crescem indefinidademente
– Células Hela

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Em alguns casos

• Cultura não cresce indefinidamente

• Exige o cultivo de novas culturas

• Preparadas frescas

• Processo de altos custos

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Uso de órgãos

• Inteiros ou partes

• Permitem a inserção da cultura viral

• Condições laboratoriais controladas


– Sintomatologia da infecção na célula HO

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Quantificação dos Vírus

• Necessário quantificar o n. de partículas virais

• Pode-se usar microscópio eletrônico

• Medir seus efeitos sobre a célula hospedeira

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Unidade Infecciosa Viral (UIV)

• Menor unidade capaz de promover efeito


– Detectável

• Quando inoculada em um hospedeiro


– Susceptível

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Unidade Infecciosa Viral

• Pode corresponder somente a um vírion

• Geralmente exige um inoculo maior

• Determinar o número de UI por volume

• Medida da quantidade de vírus

• Uma medida é denominada TÍTULO


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UIV

• UIV por volume

• Capaz de causar um infecção

• Determinada por placa de lise

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Placas de Lise

• Infecção viral em uma camada celular

• Células hospedeiras crescendo em uma


superfície plana

• Formação da zona de lise

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Zona de lise

• Área clara

• Convenção – surge pela infecção de um único


virion

• São janelas cortando o crescimento confluente

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Bacteriófago

• Fina camada de bactérias hospedeiras

• Espalhadas na forma de sobrecamada

• Agar – meio sólido

• Presença de vírus

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Bacteriófagos

• Com o crescimento bacteriano

• Surge uma camada turva

• Regiões onde há infecção

• Ocorrerá lise celular

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Contar Lise

• Unidade Formadoras de Placas de Lise

• Contar UFPL – determinar

• Número de Unidades Virais da Amostra

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Ensaio de formação de placas de lise
Replicação

Curva de crescimento de Bacteriófagos:

Período de eclipse: partículas virais em replicação dentro das


células
Ensaios de Formação de Placas de Lise

• Permite isolar culturas puras

• Identificar vírus geneticamente puros

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Vírus Animais

• Usar células animais como hospedeiras

• Placas de lise – zonas de destruição

• Pelo número de placas formadas

• Estima-se o título viral

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Sazonalidade de mortalidade
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Ciclo celular

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Apoptose

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Apoptose

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Necrose – morte por trauma

Apoptose morte programada

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Autólise

• A autólise ou citólise -- A ruptura dos


lisossomos no interior da célula pode digerir
as organelas celulares.

• É a autodissolução celular (autólise)

• A Autólise é a autodestruição celular por


ativação das lisosimas em decorrência da
falta de nutrientes e O2. É a desorganização
progressiva até a desintegração completa.
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Gripe Espanhola

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Gripe Espanhola

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AIDS
Gripe aviária
Gripe aviária
Gripe aviária
Cultura de células
Papilomatose
Papilomatose
Prevenção/vacinação
Vírus Intestinais de Maior Ocorrência

• Rotavírus
– Vírus entéricos

– Dores abdominais

– Contaminação por alimentos

– Pessoa pessoa

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Mecanismo de Ação Viral

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CANSEI
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