CLONAGEM E

CÉLULAS-TRONCO
PROF. ALEXANDRE S. OSÓRIO
 CLONAGEM
CLONE (do grego Klón, ramo)

Linhagem de organismos geneticamente

iguais, descendentes de um mesmo e
único indivíduo por sucessivas
reproduções vegetativas ou assexuadas.
Técnicas Artificiais de Clonagem
• Em Vegetais
- Propagação vegetativa (mergulhia,
estaquia e brotamento).
- Cultura de Meristemas.

• Em Animais
- Fissão de Embriões.
- Transferência Nuclear.
ALPORQUIA
MERGULHIA
PROPAGAÇÃO VEGETATIVA

DIVISÃO DE RIZOMAS DIVISÃO DE BULBOS DIVISÃO DE

PSEUDOBULBOS
FISSÃO DE EMBRIÕES
MZ (univitelinos) e DZ
(bivitelinos)

MZ DZ
 1. A clonagem reprodutiva.
• Na clonagem reprodutiva, o núcleo de uma célula
adulta seria introduzido no ovócito enucleado, com
núcleo removido, e transferido para um "útero de
aluguel", na fase de blastocisto, com a finalidade de
gerar um embrião geneticamente idêntico ao doador do
material genético.
 A ovelha Dolly
• A ovelha Dolly só nasceu depois de 276 tentativas que fracassaram. A
equipe retirou uma célula embrionária normal de uma ovelha e removeu
seu núcleo. Depois, retiraram o núcleo de uma célula da glândula mamária
de outra ovelha e usaram corrente elétrica para fundi-la com a célula
enucleada. Além disso, dentre as 277 células da mãe de Dolly que foram
inseridas em um óvulo sem núcleo, 90% não alcançaram nem o estágio de
blastocisto. De todos os outros embriões que conseguiram se dividir e ser
implantados, apenas Dolly nasceu.
 A ovelha Dolly, o primeiro mamífero
clonado de uma célula adulta, foi
sacrificada, anunciou o Instituto Roslin,
na Escócia (14/02/2003). A ovelha foi
sacrificada no Instituto Roslin, na Escócia,
após ser diagnosticada com uma doença
pulmonar progressiva comum em animais
mais velhos.

A hipótese que tem sido discutida é que

essa doença, comum em animais mais
velhos, poderia estar associada ao
encurtamento dos telômeros
(seqüências de DNA que ficam na
ponta dos cromossomos).
Embrapa apresenta segundo bezerro de
clone bovino
Em 2001 nasceu Vitória, primeiro clone bovino da América Latina. Dois
anos depois, a vaca gerou Glória.
Nascem os primeiros cavalos gerados de
embrião bipartido
Em 2003, obteve-se os dois primeiros eqüinos (Neve e Branca) oriundos
da bipartição embrionária.
Nasceu “Fábula”, filha do clone bovino “Lenda
da Embrapa”.

Também em 2003, a Embrapa conseguiu dar vida a células do ovário de

uma vaca morta, e de um dos oito embriões formados nasceu Lenda, uma
vaca da raça holandesa, que pariu a bezerra Fábula.

Lenda
Lenda e Fábula
 Nascem dois clones bovinos com risco de
extinção
Em maio de 2005 nasceram dois clones bovinos (Potira e Porã) da raça
Junqueira, em risco de extinção.
 Clones da Embrapa e seus filhotes serão
atrações em dia de campo

Entre as atrações do evento este ano, estarão as bezerrinhas "Bela" e "Fada",

ambas da raça holandesa nascidas este ano e, respectivamente, filha e neta
naturais do clone bovino "Lenda da Embrapa". "Lenda" carrega o importante
predicado de ter sido o primeiro animal clonado no Brasil, em 2003, a partir de
células ovarianas de um animal morto. Esse resultado abriu para a ciência o
excelente precedente de recuperar animais de alto valor genético ou
ameaçados de extinção.
 CÉLULAS-TRONCO
células-tronco, também conhecidas
como células-mamãe ou células
estaminais, são células que possuem a
capacidade de se dividir dando origem a
células semelhantes às progenitoras e de
se transformar (num processo também
conhecido por diferenciação celular) em
outros tecidos do corpo, como ossos,
nervos, músculos e sangue.
 CÉLULAS-TRONCO
• CLASSIFICAÇÃO
De acordo com a origem:
- Células-tronco embrionárias = encontradas
até cerca de cinco dias após a fecundação
(fase de blastocisto).
 CÉLULAS-TRONCO
• CLASSIFICAÇÃO
De acordo com a origem:
- Células-tronco adultas = encontradas na pele, no
intestino, na medula óssea, no fígado, no
pâncreas,nos músculos esqueléticos (associados
ao sistema locomotor), no tecido adiposo e no
sistema nervoso
CÉLULAS-TRONCO
 CÉLULAS-TRONCO
As células-tronco ainda se classificam de acordo
com o tipo de células que podem gerar:
• Totipotentes: podem produzir todas as células
embrionárias e extra embrionárias;
• Pluripotentes: podem produzir todos os tipos
celulares do embrião;
• Multipotentes: podem produzir células de várias
linhagens;
• Oligopotentes: podem produzir células dentro de
uma única linhagem;
• Unipotentes: produzem somente um único tipo
celular maduro.
 CÉLULAS-TRONCO

- As células-tronco embrionárias são denominadas pluripotentes

(totipotentes para alguns autores), porque podem proliferar indefinidamente
in vitro sem se diferenciar, mas se diferenciam se forem alteradas as
condições de cultivo.
- As células-tronco adultas são chamadas multipotentes. Algumas
pesquisas sugerem que as células-tronco adultas podem se transformar
em tipos muito mais variados de células do que se supunha
anteriormente.
 CÉLULAS-TRONCO
A célula-tronco prototípica é o óvulo fertilizado (zigoto).
Essa única célula é capaz de gerar todos os tipos
celulares existentes em um organismo adulto, até os
gametas — óvulos e espermatozóides — que darão
origem a novos zigotos. A incrível capacidade de gerar um
organismo adulto completo a partir de apenas uma célula
tem fascinado os biólogos desde que o fisiologista alemão
Theodor Schwann (1810-1882) lançou, em 1839, as bases
da teoria celular
 CÉLULAS-TRONCO
Devido a capacidade de diferenciação, as células-tronco
são muito importantes, principalmente na aplicação
terapêutica, sendo úteis para em terapias,combate a
doenças cardiovasculares, neurodegenerativas,
diabetes tipo-1, acidentes vasculares cerebrais, doenças
hematológicas, traumas na medula espinhal e
nefropatias. O principal objetivo das pesquisas com
células-tronco é usá-las para recuperar tecidos
danificados.
CÉLULAS-TRONCO
CÉLULAS-TRONCO
Produção de células-tronco embrionárias por
transferência nuclear - clonagem
 Clonagem terapêutica
• Na técnica de clonagem para fins
terapêuticos, um aprimoramento das técnicas
hoje existentes para culturas de tecidos, há
transferência de um núcleo de uma célula
diferenciada para um ovócito do qual foi
retirado o núcleo, através de uma micro-
cirurgia. Este núcleo continha metade de todo
o material genético (DNA), que programaria o
desenvolvimento posterior do embrião. A
outra metade viria do espermatozóide que o
fertilizaria. A seguir é inserido o núcleo
retirado de uma célula adulta. Essa célula é
diplóide, ou seja, tem o conjunto completo de
cromossomos e genes. Por um choque
elétrico, a divisão é induzida, dando início à
geração do embrião.
 1. As células-tronco
embrionárias.

• Portanto, o ovócito transnucleado entrou em divisão celular e originou um

"embrião", e este, em vez de ser transferido para o útero de uma mulher
(como na clonagem reprodutiva), foi desenvolvido in vitro até a fase de
blastocisto com cerca de 100 a 200 células - as externas constituindo o
trofoblasto e as internas o botão ou nó embrionário. São extraídas do seu
interior, então, células especiais chamadas “estaminais” (stem cells), as
células-tronco embrionárias. Estas são ainda suficientemente
indiferenciadas.
Existem substâncias ou fatores de diferenciação que, quando colocados
em culturas de células-tronco cultivadas em laboratório, determinam que
elas se diferenciem em um certo tecido.
 Brasilcord
• No Brasil, o ministro da saúde, Humberto Costa anunciou, em 24
de setembro de 2004, no hospital Albert Einstein, em São Paulo, a
implantação da Rede Pública de Bancos de Sangue de Cordão
Umbilical e Placentário - Brasilcord. Resolverá, entre outras, as
dificuldades de se encontrar doadores de medula óssea, buscando-
se fontes alternativas de células-tronco.
O projeto pretende reunir até 2006, cerca de 20 mil bolsas de
sangue de cordão umbilical, suficientes para cobrir toda a variedade
genética do país, tornando desnecessária a procura de um parente
para doação. Para coletar amostras de sangue de cordão umbilical
capazes de representar toda a diversidade étnica brasileira, as dez
unidades da Brasilcord serão instaladas em hemocentros
distribuídos pelas cinco regiões do país. As cidades-sede dos
bancos serão Belém (PA), Belo Horizonte (MG), Brasília (DF),
Campinas (SP), Curitiba (PR), Porto Alegre (RS), Recife (PE),
Ribeirão Preto (SP), Rio de Janeiro (RJ) e São Paulo (SP).