ISSN 2358-5145

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Número 14, 2016

MEDICINA VETERINÁRIA TRANSFUSIONAL

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 EDITORIAL

TECSA Laboratórios, Qualidade certificada há 17 anos!

TECSA foi o primeiro laboratório da América Latina com certificado ISO 9000 em todos os segmentos de negócios tais como:
Análises e Exames Veterinários, Análises e Exames Industriais e Assessoria Científica. Desde 1994 a empresa busca excelência
nos serviços prestados dispondo de instalações bem elaboradas e equipe multidisciplinar de profissionais aptos a atender as
necessidades dos clientes. Além da certificação ISO, é credenciado junto ao Ministério da Agricultura em vários segmentos.
O TECSA é hoje reconhecido no mercado como Padrão Ouro em análises e serviços. A concessão do certificado ISO só é feita
quando todas as atividades de rotina do laboratório estão detalhadamente procedimentalizadas e os funcionários bem treinados
para compreender e cumprir as regras. Nada muda sem que todos os colaboradores sejam avisados e treinados, o certificado
foi concedido pela empresa Norueguesa DET NORSKE VERITAS (DNV) com sede no Rio de Janeiro. Esta empresa é
reconhecida por seu trabalho junto a indústria naval que exige segurança máxima. Mas a padronização na qualidade dos serviços
não significa que não possa haver tratamento diferenciado e personalizado para os clientes. Esta é a filosofia do TECSA: Mais
que resultados, COMPROMETIMENTO com VOCÊ.

Implantação da ISO 17025 – Conquista do TECSA Laboratórios para o mercado diagnóstico

O TECSA Laboratórios tem sido sinônimo de Segurança e Inovação em diagnóstico. Mais uma vez constatamos que o
caminho trilhado tem sido correto, devido ao grande apoio que recebemos dos colegas e clientes e pelo reconhecimento dado pela
Indústria Farmacêutica Veterinária aos trabalhos do TECSA neste último ano. Desde 2002 o TECSA implantou os quesitos
da NORMA ISO 17.025 (Ex ISO GUIA 25), específica para Laboratórios de medição e ensaios. Muito mais apropriada para
acreditar a qualidade em laboratórios de análises, a ISO 17.025 é reconhecida pelo Ministério da Agricultura e seus parâmetros
são utilizados para o credenciamento de laboratórios aos programas de sanidade animal . Durante vários meses, toda a equipe
técnica foi treinada por consultores específicos para esta Norma e se viu envolvida na implantação de ítens que constam deste
Sistema de Qualidade e que não estão presentes na norma ISO 9001. Com isto, logo no primeiro mês, todos os procedimento
para realização dos exames seguiam controles mais rígidos e com evidencias mais claras. Esta é mais uma conquista única do
TECSA Laboratórios para o mercado Veterinário do Brasil, colocando em destaque internacional os nosso meios de diagnosticar
doenças e de monitorar a sanidades de nossos animais. Compartilhamos com vocês a agradecemos o apoio de sempre.

Bons Negócios e muita Saúde a todos.

Dr. Luiz Eduardo Ristow

Diretor Técnico

PARA SABER MAIS:

ISO é uma palavra grega e também a sigla de uma instituição internacional. A palavra vem do grego, que significa igual. Portanto,
padrão, e por isso utilizada como abreviação de um importante organismo internacional INTERNATIONAL STANDARTIZATION
ORGANIZATION, uma organização não governamental fundada em 1947, cuja sede fica em Genebra (Suíça) e sua diretoria e
composta por 143 representantes de diversos países. A função da ISO e justamente distribuir certificados de qualidade e padronização
de serviços. Depois de conseguido o documento, a empresa ainda é submetida a inspeções semestrais. O documento ISO é reconhecido
internacionalmente.
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 ÍNDICE

31. BIOLOGIA MOLECULAR 32. BIOQUÍMICA

06. HEMATOLOGIA 31. ACOMPANHAMENTO DA EFICÁCIA 32. ELETROFORESE DE PROTEÍNAS
06. DOENÇAS TRANSMITIDAS POR CARRAPATOS - BABESIOSE E DE TRATAMENTO PELO PCR REAL 35. DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
ERLIQUIOSE MONOCÍTICA CANINA DIAGNÓSTICO E TRATAMENTO TIME X DAGNÓSTICO CLÍNICO
14. QUANDO E COMO UTILIZAR HEMOCOMPONENTES?
17. CUIDADOS NA HORA DE REALIZAR UMA TRANSFUSÃO SANGUÍNEA
19. ANEMIA HEMOLÍTICA IMUNE-MEDIADA
22. ISOERITRÓLISE NEONATAL E A IMPORTÂNCIA
DA TIPAGEM SANGUÍNEA EM FELINOS
24. COLETA, CONSERVAÇÃO E ARMAZENAMENTO DE
AMOSTRAS DESTINADAS AO COAGULOGRAMA
26. ALTERAÇÕES HEMATOLÓGICAS CAUSADAS
PELA LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA
28. INTERPRETANDO O RDW EM MEDICINA VETERINÁRIA
30. MONITORAMENTO DO PACIENTE TRANSFUNDIDO 38. DERMATOLOGIA 40. PATOLOGIA CLÍNICA
38. PÊNFIGO EM CÃES E GATOS 40. INTERNALIZAÇÃO DA
ROTINA LABORATORIAL

Colaboraram neste número:

Dr. Alexandre Augusto A. Torres, Dr. Eduardo Maia, Dr. Frederico Miranda Pereira, Dr. Guilherme Stancioli, Dr. João Paulo Fernandez Ferreira, Dr. João Paulo Franco, Dr. Luiz Eduardo Ristow,
Dra Isabela de Oliveira Avelar, Dra. Dyeme Ribeiro de Souza.
Todos membros da Equipe de Médicos Veterinários do TECSA Laboratórios.
Além do Médico Patologista Dr. Afonso Alvarez Perez Jr.

Contribuíram também para este número os renomados Colegas:

Dra. Mitika Kuribayashi Hagiwara, Dra. Luciana de Almeida Lacerda, Dra. Simone Gonçalves, Dr. Rubens Antônio Carneiro, Dr. Marthin Raboch Lempek, ORTIZ, M. C., ALVES, R. H. C,, TESTA, M.
F., SOUSA, C. R., LEMOS, R. L. O.

Obs.: os artigos assinados são de inteira responsabilidade dos autores e não representam necessariamente, a visão e opinião do TECSA Laboratórios.

EXPEDIENTE
Editores/Publishers: CIRCULAÇÃO DIRIGIDA
Dr. Luiz Eduardo Ristow . CRMV-SP 5560S . CRMV-MG 3708 . ristow@tecsa.com.br A revista VetScience® Magazine é uma publicação do Grupo TECSA dirigida somente
Dr. Afonso Alvarez Perez Jr. . afonsoperez@tecsa.com.br aos médicos veterinários, como parte do Projeto JORNADA DO CONHECIMENTO,
Equipe de Médicos Veterinários TECSA . tecsa@tecsa.com.br criado pelo mesmo. Este projeto visa a universalização do conhecimento em Medicina
Laboratorial Veterinária. A periodicidade é Bimestral, com artigos originais de pesquisa
Diagramação: Sê Comunicação . se@secomunicacao.com.br clínica e experimental, artigos de revisão sistemática de literatura, metanálise, artigos
Contatos e Publicidade: de opinião, comunicações, imagens e cartas ao editor.
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ISSN: 2358-1018
 HEMATOLOGIA
DOENÇAS TRANSMITIDAS POR CARRAPATOS -
BABESIOSE E ERLIQUIOSE MONOCÍTICA CANINA
DIAGNÓSTICO E TRATAMENTO
Dentre as doenças transmitidas
por carrapatos aos cães destacam-
se a babesiose, por sua distribuição
mundial e a erliquiose monocítica
canina, por sua ampla prevalência nos
países tropicais. A babesiose é causada
por Babesia canis (subespécies B. canis
canis, B. c. vogeli e B. c. rossi) e Babesia
gibsoni. No Brasil a Babesia c. vogeli é
a principal subespécie que infecta os
cães e é, dentre as subespécies, a menos
patogênica. A erliquiose monocítica
canina (EMC) é causada por Ehrlichia
canis, uma bactéria do gênero Ehrlichia,
família Anaplasmataceae que engloba
vários patógenos de interesse humano e
veterinário e se caracterizam por serem
bactérias intracelulares obrigatórias.
Ambas as infecções são transmitidas
por um mesmo vetor, Rhipicephalus
sanguineus, o carrapato marrom do cão,
que se encontra amplamente distribuído
no Brasil, inclusive nas grandes urbes,
principalmente nas regiões de clima
subtropical ou tropical (Figura 1).
Figura 1: Infestação por Rhipicephalus sanguineus.
A face medial da orelha é um dos locais preferidos
pelo carrapato.
Apenas a espécie tropical de R.
sanguineus parece estar envolvida
na transmissão de ambos os agentes
infecciosos, já que, nos estados brasileiros
da região sul, onde o clima é mais
ameno, os carrapatos da mesma espécie
carecem da competência para albergar e
transmitir, tanto B. c. vogeli quanto E.
6
Mitika K. Hagiwara (Prof. Senior – FMVZ-USP)
canis, o que torna muito menos frequente
o diagnóstico de ambas as infecções em
cães daquelas regiões. Além das infeções
citadas, o R. sanguineus é considerado o
vetor de Anaplasma platys, que infecta
plaquetas e causa a trombocitopenia
cíclica tropical e o Hepatozoon canis,
que infecta neutrófilos. Ambas as
infecções são consideradas mais
benignas e os cães infectados podem
permanecer assintomáticos por toda a
vida. Entretanto, em algumas ocasiões
podem ser observados citológica ou
molecularmente em co-infecções por
outros agentes transmitidos pelo mesmo
vetor, sem no entanto, terem claramente
definidos seu papel no desenvolvimento
ou agravamento do quadro clínico.
A babesiose e a EMC, principalmente
a última, estão tão disseminadas entre
os cães, acompanhando a distribuição
cosmopolita do vetor Rhipicephalus
sanguineus, de tal sorte que devem ser
incluídos no diagnóstico diferencial das
morbidades, principalmente quando há
a menção a existência de carrapatos, as
manifestações clínicas são vagas e quando
trombocitopenia (discreta a moderada)
e leucopenia são demonstradas no
exame hematológico do animal. A
tendência geral é a de imputar a EMC
a causa da trombocitopenia iniciando
imediatamente o tratamento com
doxiciclina o que se constitui em grave
equívoco, perdendo-se a oportunidade
de investigar outras possíveis causas
dessa alteração hematológica. A seguir,
apresentamos uma breve discussão
sobre alguns aspectos mais relevantes
de ambas as infecções, com ênfase no
diagnóstico e no tratamento.
Babesiose Canina
Considerações gerais de
relevância clínica
• A babesia é transmitida pela
saliva do carrapato durante o repasto
sanguíneo no cão, na forma de
esporozoítos, os quais aderem a parede
das hemácias, são internalizados por
endocitose e se multiplicam por fissão
binária em seu interior. O rompimento
da hemácia parasitada libera os
merozoítos na circulação sanguínea, os
quais infectam novas hemácias, até que o
sistema imune do hospedeiro seja capaz
de desenvolver imunidade humoral e
celular, eliminando totalmente o agente
ou confinando-o, tornando-se assim o
cão portador assintomático da infecção.
• Há evidências de que existe
transmissão transestadial e transovariana
da babesia no vetor. Isto significa que
pode ocorrer a perpetuação do agente
infeccioso no carrapato, de uma geração
a outra, sem haver necessidade de
repasto em um hospedeiro infectado.
Some-se a isso a ampla disseminação
do carrapato e sua capacidade de
reprodução (até quatro gerações de
carrapatos no período de um ano) e
entende-se porque a babesiose é tão
disseminada no Brasil.
• As manifestações clínicas
como febre, prostração, esplenomegalia
e anemia progressiva ocorrem na primo-
infecção, sendo sua ocorrência pouco
provável nas infecções subsequentes.
A imunidade eliciada pela infecção
protege o cão contra o desenvolvimento
da doença nas infecções posteriores (as
chances são muito grandes de ocorrer
repetidas infecções pela Babesia c. vogeli),
servindo a inoculação dos esporozoítos
como estímulo antigênico adicional.
• A doença ocorre, portanto,
principalmente nos adultos jovens e
em qualquer idade naqueles que vivem
livres da infestação por R. sanguineus e
por diversos motivos, são apresentados
pela primeira vez ao vetor. É pouco
provável que cães que vivem em contato

permanente ou intermitente com o
vetor apresentem a forma clínica da
babesiose tardiamente em sua vida,
implicando em que os resultados dos
testes sorológicos e moleculares devem
ser cuidadosamente interpretados tendo
em mente os aspectos epidemiológicos
inerentes ao parasito, vetor e hospedeiro.
• Em geral, a febre é observada
ao redor do quarto dia pós-infecção,
coincidindo com o primeiro pico de
parasitemia que em seguida regride
para se tornar novamente evidente ao
redor da segunda semana de infecção,
quando ocorre o segundo pico de
parasitemia. A intensa parasitemia e
a destruição das hemácias parasitadas
resultam no desenvolvimento de anemia
e complicações secundárias decorrentes
do processo hemolítico.
• A Babesia canis vogeli é
considerada a menos patogênica
dentre as demais babesias de modo
que muitas vezes a infecção pode
transcorrer silenciosamente ou com o
desenvolvimento de discreta anemia,
sem outras manifestações clínicas
evidentes.
Diagnóstico
O diagnóstico da babesiose canina
baseia-se na presença de sinais clínicos
sugestivos, no exame físico e na história
clínica do animal. Em geral, são cães
adultos jovens que se apresentam
com prostração, febre, perda de peso,
membranas mucosas pálidas, icterícia,
esplenomegalia e, com histórico de
contato recente com, ou de terem
frequentado locais onde sabidamente são
encontrados os carrapatos transmissores
da Babesia canis.
• O diagnóstico clínico nesses
animais é confirmado quando são
encontradas inclusões intraeritrocitárias
no exame microscópico do esfregaço de
sangue periférico corado pelos métodos
convencionais. Exames negativos no
entanto não excluem o diagnóstico de
babesiose, haja vista a baixa parasitemia
em alguns casos, na dependência do
momento em que está sendo realizada a
pesquisa.
• Hemácias parasitadas podem
ser vistas mais frequentemente nos
esfregaços de sangue obtido por punção
da ponta da orelha.
• O hemograma é altamente
esclarecedor, principalmente alguns dias
após o início da infecção e mais ainda, se
forem obtidas pelo menos duas amostras
de sangue com intervalos de 24 a 48horas.
Rápida queda do hematócrito sugere a
ocorrência de processo hemolítico e a
presença de hemácias policromatófilas
e a reticulocitose (> 60.000 ret/uL)
indicam o caráter regenerativo do
processo anêmico apontando para uma
possível causa extra medular da anemia.
• Trombocitopenia transitória
pode ser observada na fase aguda inicial,
com os cães apresentando número
de plaquetas < 50.000/ L, o que pode
predispor a hemorragias (Figura 2).
HEMATOLOGIA
Figura 2: Trombocitopenia em cães infectados
por Babesia canis. Nadir plaquetário observado
precocemente ao redor do 4o. dia pós-infecção;
discreto aumento e posterior queda ao redor de
9-15 dias, coincidindo com a parasitemia primária
e secundária. Cães tratados com dipropionato de
imidocarb na dose de 7,0 mg/kg de peso no 14o dia
apresentaram rápido aumento das plaquetas, logo
após a aplicação. Cães não tratados apresentaram
aumento gradativo do número de plaquetas
aproximando-se dos valores basais ao redor 40 dias,
coincidindo com o desenvolvimento da imunidade
humoral.
• Ocorre Leucopenia
(neutropenia) , durante a fase inicial de
parasitemia e leucocitose (neutrofilia)
durante o período de parasitemia
secundária e a partir da terceira
semana de infecção, linfocitose, estas
são as principais alterações vistas no
leucograma. A presença de linfócitos
reativos com grânulos azurrófilos é
indicativa de intensa resposta imune
do cão, com o desenvolvimento da
imunidade humoral e a subsequente
restrição a replicação da babesia.
Testes Sorológicos
São úteis na identificação de
portadores assintomáticos com baixo
grau de parasitemia, nos quais não se
obtém a confirmação parasitológica pela
pesquisa de inclusões intraeritrocitárias
de Babesia sp. Em geral, nesses animais
o título de anticorpos é alto. Entretanto,
mesmo após a esterilização da infecção,
os cães podem permanecer reagentes por
um longo período de tempo, mantendo
baixo título de anticorpos. O valor
diagnóstico do teste é baixo na ausência
de sinais clínicos e histórico do paciente.
Testes moleculares (PCR)
Na atualidade, PCR clássica ou a
PCR em Tempo Real são amplamente
utilizadas no diagnóstico de doenças
infecciosas ou parasitárias, inclusive
para a detecção de DNA de Babesia
canis vogeli em amostras de sangue
periférico. A alta sensibilidade analítica
do teste permite a detecção de mínimas
quantidades de DNA do agente sendo,
portanto, útil nos casos suspeitos da
hemoparasitose em que o diagnóstico
não foi confirmado pela pesquisa do
parasita no sangue periférico.
7
 HEMATOLOGIA
Tratamento
Dipropionato de imidocarb é o
babesicida de escolha para o tratamento
da babesiose canina. Apresenta boa
eficácia contra B. canis, porém seu
uso pode estar associado a efeitos
colinérgicos, e nessas condições, deve
ser precedido pela aplicação de atropina.
Embora menos frequentemente,
também se indica o uso de diaceturato
diaminazene, que possui menor margem
de segurança e pode estar associado
a efeitos colaterais indesejáveis que
incluem ataxia, ptialismo e diarreia.
• O tratamento é indicado em
cães que apresentam histórico e quadro
clínico compatível com babesiose,
com anemia hemolítica, de caráter
regenerativo, rapidamente progressiva
ainda que a pesquisa de inclusões
intraeritrocitárias tenha sido frustrante.
• PCR em tempo real pode ser
útil para a confirmação do diagnóstico.
Com a quantificação do agente este teste
é importante para o acompanhamento
de tratamento.
• Testes sorológicos não
permitem diferenciar infecção presente
de infecção passada, sendo de pouca
utilidade para a decisão clínica de tratar
o animal.
• Não há indicação de
tratamento em cães com resultados
de PCR positivos, sem o componente
clínico indicativo de infecção aguda.
Terapia Adjunta
Acelerada queda do hematócrito em
24 – 48 horas requer rápida intervenção
terapêutica, com o uso de babesicida e
transfusão sanguínea, de preferência
concentrado de hemácias quando o
hematócrito se aproxima rapidamente
de 15%. Em geral nesses casos há
intensa resposta reticulocítica, com os
reticulócitos alcançando facilmente
valores > 300.000 a 400.000/L.
Manutenção da volemia, com o uso de
fluidos e eletrólitos intravenosos, de
acordo com a necessidade do paciente
em questão. Não há indicação para
a suplementação de ferro, a não ser
naqueles casos em que houve profusa
hemorragia externa.
8
Fármaco Dose Via Observações
dipropionato de imidocarb 5,0 a 6,6 mg/kg, duas doses SC Prevenção dos efeitos colinérgicos.
com intervalo de 14 dias Atropina (0,04 mg/kg/SC) 15 minutos antes
entre as doses.
diaceturato de 3 a 5mg/kg , dose única SC Efeitos colaterais: ataxia, salivação e
4,4’diazoamino diarreia.
dibenzamidina
Figura 3: Tratamento da babesiose canina.
Erliquiose Monocítica Canina manter e transmitir o agente infeccioso
ao cão.
Os organismos do gênero Ehrlichia
Patogenia
são transmitidos aos respectivos
O agente é inoculado no cão pela
hospedeiros através da picada dos
picada do carrapato durante o repasto
carrapatos infectados. Assim se explica a
sanguíneo. É necessário que o carrapato
alta prevalência da erliquiose nas regiões
permaneça fixado no cão pelo menos
tropicais e subtropicais devido a ampla
oito horas para ocorrer a transmissão
distribuição geográfica dos vetores.
efetiva do agente infeccioso. A Ehrlichia
No Brasil, a ocorrência e prevalência
invade as células mononucleares do
da erliquiose canina acompanham a
hospedeiro na forma de corpúsculos
distribuição de Ripicephalus sanguineus,
elementares inibindo a fusão do
o carrapato transmissor da infecção.
fagosomo e lisossomo, possibilitando
• A erliquiose monocítica
assim o escape do sistema imune. A
canina (EMC) é transmitida aos
replicação do microrganismo e sua
cães por Ripicephalus sanguineus. O
disseminação por órgãos como o
microrganismo é adquirido pelo vetor
fígado, baço e tecido linfoide resultam
no estágio de larva ou ninfa, por ocasião
em intenso processo inflamatório e
do repasto sanguíneo em cão infectado e
resposta imunológica. É a fase aguda
persiste na glândula salivar do carrapato
da infecção, que persiste por cerca de
até a forma adulta.
quatro semanas. Passada essa fase, a
• Não há transmissão
infecção é gradativamente controlada
transovarina de E. canis; ocorre apenas a
pela resposta imune do hospedeiro,
transmissão transtadial. A nova geração
porém o microrganismo pode
de carrapatos oriunda de uma fêmea
permanecer nas células mononucleares
infectada está livre da infecção erliquial
por longo período de tempo, sem que o
até realizar o primeiro repasto sanguíneo
animal apresente qualquer manifestação
em um cão portador.
clínica aparente. É a fase subclínica ou
• A prevalência da erliquiose
assintomática da infecção. A persistência
canina em cães domiciliados é de cerca
de 9 a 10 % e em cães de rua, de 20 %. da infecção resulta na fase crônica da
• Mesmo em ambientes onde há infecção com a gradual deterioração
das condições gerais e evolução para
cães com erliquiose, apenas 6 a 10 % dos
pancitopenia terminal. As alterações
carrapatos estão infectados por E. canis.
clínicas e laboratoriais que podem
• Apenas as espécies tropicais de
ocorrer durante a evolução da erliquiose
Ripicephalus sanguineus são capazes de
são apresentadas a seguir (figura 4.)
Fase Aguda Fase assintomática Fase crônica
2 – 4 semanas meses a anos meses a anos
Febre, anorexia, prostração, perda de Sem manifestações clínicas Anemia
peso, esplenomegalia, linfadenomegalia, detectáveis Infecções secundárias
alterações oculares, neurológicas, DRC
respiratórias, gastrointestinais
Anemia arregenerativa Anemia arregenerativa Pancitopenia variável
Trombocitopenia (discreta) Hipergamaglobulinemia
Leucopenia variável Leucopenia (ou não) Relação A:G < 5,0
Aumento de ALT e FA variável Uréia e creatinina variáveis
Hipoalbuminemia Trombocitopenia (ou não)
Aumento de proteína C reativa variável
Hipergamaglobulinemia
variável
Figura 4: Manifestações clínicas e alterações laboratoriais nas diferentes fases da erliquiose monocítica canina
 HEMATOLOGIA

Figura 4: Petéquias e sufusões em um cão com

trombocitopenia causada pela infecção por E. canis

Diagnóstico
O diagnóstico de EMC constitui-se
em um grande desafio para o médico
veterinário. A erliquiose deve ser
suspeitada quando houver histórico
de infestação por carrapatos (figura
1) ou viagem para locais onde a
doença ocorre frequentemente e os
sintomas apresentados pelo animal
forem compatíveis com a infecção por
E. canis, principalmente as alterações
de hemostasia. A confirmação do
diagnóstico é baseada nas alterações
hematológicas e bioquímicas, pesquisa
de inclusões de E. canis, testes
sorológicos e testes moleculares.

Alterações Hematológicas
• Durante a fase aguda, pode ser
encontrada trombocitopenia moderada
a grave, acompanhada de discreta a
moderada anemia e leucopenia. A
trombocitopenia é a principal alteração
hematológica e pode ser acompanhada
de megaplaquetas. A anemia nessa
fase é em geral não regenerativa, o que
a diferencia da anemia causada por
Babesia canis (altamente regenerativa);
os parâmetros eritrocitários tendem
a retornar aos valores basais após a
fase aguda. A leucopenia é devida
principalmente a linfopenia, mas
a neutropenia também pode ser
encontrada.
• Nesta fase podem ser
encontradas mórulas em monócitos do
sangue periférico, embora a pesquisa
seja difícil e laboriosa. Porém a pesquisa
pode ser otimizada, preparando-se
esfregaços a partir da nata leucocitária
ou ainda, preparados com sangue obtido
por punção da ponta de orelha. Mórulas
dificilmente serão encontradas nas fases

9
 HEMATOLOGIA
subclínicas ou crônicas da infecção.
• Cães que não receberam
tratamento ou que receberam
tratamento inadequado ou incompleto
podem progredir para a fase subclínica.
Nesta fase, discreta a moderada
trombocitopenia com o volume
plaquetário médio maior, indicam
distúrbio na trombocitopoiese. Embora
seja dada pouca atenção aos leucócitos,
a leucopenia moderada, devido a
neutropenia e linfopenia, é também
encontrada nesses animais. Se a
trombocitopenia pode ser considerado
indicador da persistência de infecção,
a leucopenia associada a primeira
sugere a necessidade de se realizar
esforços diagnósticos adicionais para
o esclarecimento dessas alterações
hematológicas.
• A fase crônica da erliquiose
é caracterizada por hipoplasia da
10
medula óssea e disfunção das células da
medula óssea, resultando-se assim em
pancitopenia, refratária ao tratamento
cm doxiciclina. O prognóstico nessas
condições é reservado.
Alterações bioquímicas
• As anormalidades da
bioquímica sanguínea incluem
hipoalbuminemia, elevadas atividades
séricas de alanina aminotransferase
(ALT) e fosfatase alcalina (FA) na fase
aguda da infecção. Hiperproteinemia,
hiperglobulinemia, hipoalbuminemia
e baixa relação albumina: globulina
na fase crônica da infecção (figura 5).
A hiperproteinemia é resultante da
hiperglobulinemia; na eletroforese do
soro sanguíneo pode ser observada
hiperglobulinemia policlonal, embora Figura 5: Perfil eletroforético de cão com erliquiose
crônica. Observar pico de alfa-2 globulina (seta
também possa ser observada gamopatia fina) e de gamaglobulina (seta larga)
monoclonal.

Testes Sorológicos
• O teste de imunofluorescência
indireta para pesquisa de anticorpos é
o teste mais frequentemente usado, é
considerado o teste padrão-ouro e indica
exposição a Ehrlichia canis. O resultado
positivo em apenas um teste pode indicar
apenas exposição prévia ao agente,
não representando necessariamente
doença atual. A interpretação dos
resultados do teste deve ser realizada
simultaneamente aos achados
clínicos e aos resultados de outros
testes laboratoriais. Recomenda-se a
realização de teses sorológicos pareados
para a confirmação do diagnostico.
Aumento significativo dos títulos de
anticorpos pode indicar infecção ativa.
Na nossa experiência clínica, os cães que
estão ativamente infectados apresentam
altos títulos de anticorpos, no mínimo
> 640. Cães reagentes na diluição 1:40
são considerados positivos por outros
autores.
• Teste baseado em tecnologia
ELISA (Dot-ELISA) está disponível
comercialmente para detecção de
anticorpos anti-E. canis com a vantagem
de poder ser realizado durante o
atendimento (point of care test). O
resultado do teste é qualitativo (positivo/
negativo) e constitui-se em limitação
do teste a baixa sensibilidade em soros
com títulos <320 e possibilidade de
reações cruzadas com outras espécies de
Ehrlichia e Anaplasma. Os resultados
desse teste também devem ser
interpretados associados as informações
clínicas e de patologia clínica, pois não
permitem diferenciar infecção presente
de infeção passada. O valor maior deste
Figura 6: Antimicrobianos e regimes terapêuticos para o tratamento da erliquiose canina
HEMATOLOGIA
teste repousa no resultado negativo em
um animal doente há mais de quinze
dias, cujo histórico, clínica e patologia
clínica geraram suspeita de se tratar de
infecção por E. canis. Nessas condições,
devem ser pesquisadas outras causas
responsáveis pelas condições mórbidas
do cão.
• Testes moleculares (PCR ou
PCR em tempo real). É um método
com alta sensibilidade para detecção
de mínimas quantidades de DNA do
agente infeccioso, fornecendo resultados
positivos antes mesmo da soroconversão.
Na prática, podem ocorrer resultados
negativos falsos por falhas inerentes a
técnica e, na fase crônica a sensibilidade
da prova tende a se tornar mais baixa
pela ausência de E. canis no sangue.
Resultados positivos falsos podem
ser devidos a contaminação das
amostras durante o processamento.
Para o diagnóstico definitivo, ambas
as provas devem ser interpretadas em
conjunto. Na fase crônica da infecção a
sensibilidade da PCR tende a ser mais
baixa, fornecendo resultados negativos,
porém deve ser detectada a presença
de alto título de anticorpos em virtude
da estimulação antigênica ocorrida nas
fases anteriores.
Tratamento
O tratamento da erliquiose
canina consiste no uso de agentes
antibacterianos e na instituição de
terapia de suporte. Antimicrobianos
eficazes incluem tetraciclinas e
cloranfenicol (Figura 6).
11
 HEMATOLOGIA
Como regra geral, quanto mais
precocemente for iniciado o tratamento
dos cães na fase aguda da infecção,
melhor o prognóstico e a resolução da
infecção. Os cães que se encontram
na fase crônica da infecção em geral
não respondem ao tratamento por
causa das alterações multissistêmicas e
severa mielossupressão. O prognóstico
é reservado, nessas condições. A
doxiciclina é o antibiótico de escolha,
embora também possam ser empregados
minociclina e oxitetraciclina, com
resultados satisfatórios. Entretanto,
a doxiciclina apresenta inúmeras
vantagens sobre os demais
antimicrobianos.
• A doxiciclina é uma
tetraciclina semissintética, lipossolúvel
que é facilmente absorvida e produz
altas concentrações sanguíneas,
tissulares e intracelulares. Alta
concentração intracelular é mandatória,
já que a Ehrlichia canis é um organismo
intracelular obrigaatório.
• Possui maior meia-vida e
maior penetração no sistema nervoso
central quando compa.
• Excreção basicamente
intestinal, o que reduz o potencial de
nefrotoxicidade especialmente em
animais com lesão renal decorrente da
infecção por E. canis.
• Apresenta baixa ligação com
cálcio, evitando-se assim o acúmulo e
possíveis alterações na coloração dos
dentes.
A doxiciclina é indicada na dose
de 10mg/kg/a cada 24 horas, por 28 a
30 dias. Entretanto, em alguns casos
esse regime terapêutico mantido por
seis semanas ainda não foi eficaz em
eliminar a infecção. A discrepância entre
os resultados obtidos por diferentes
autores quanto a duração e eficácia do
tratamento, pode estar relacionada a
duração da infecção antes de se iniciar
o tratamento. O tratamento padrão foi
eficaz em cães com infecção aguda ou
subclínica, o mesmo não ocorrendo
com os cães com infecção crônica.
Após o tratamento dos cães com
12
infecção crônica, os resultados da PCR
permaneceram positivos nesses cães,
bem como nos carrapatos que foram
colocados para fazerem o repasto nesses
animais. A doxiciclina possui espectro
de ação limitado em relação a outras
bactérias patogênicas. Assim, em cães
com infecção crônica que apresentam
infecções bacterianas secundárias como
abscessos, pneumonia secundária ou
infecções urinárias devem receber outro
antimicrobiano de amplo espectro.
Nessas condições, recomenda-se o uso
de cloridrato de ceftiofur (7,5 mg/kg /IV
ou IM/ 24 horas) ou ciprofloxacina (10
mg/kg/IV/ 12 horas). O cloranfenicol
é uma opção para o tratamento da
erliquiose principalmente nos casos
de infecções persistentes, refratárias a
doxiciclina. Pelo seu amplo espectro
antimicrobiano, atua ainda no combate
as infecções bacterianas secundárias
em cães com erliquiose. Quanto a
dipropionato de imidocarb apresenta
eficácia discutível no tratamento da
infeção por E. canis. Entretanto, como
pode ocorrer coinfeção por Babesia
canis ou Hepatozoon canis, organismos
transmitidos pelo mesmo vetor e que
eventualmente podem agravar o quadro
clínico, o dipropionato de imidocarb
pode ser usado em conjunto com a
doxiciclina quando a presença desses
agentes for detectada por citologia ou
por técnicas moleculares.
Monitoramento do tratamento
A resposta ao tratamento deve ser
monitorada, por se tratar de agente
intracelular obrigatório que pode causar
infeção persistente e permanecer por
meses a anos no organismo do cão.
Após o tratamento realizar a avaliação
do hemograma, testes sorológicos
(quantitativo, IFI) e PCR ou
preferencialmente, PCR em tempo real.
Indicadores da resolução da infecção
após o tratamento:
• Melhora clínica e normalização
hematológica.
• Queda no título de anticorpos,
embora permaneça sorologicamente
positivo por longo período de tempo.
• Negativação do teste molecular
em três avaliações consecutivas em
intervalos regulares.
• Indicadores da persistência da
infecção.
• Melhora clínica, porém
persistência de trombocitopenia e
leucopenia variáveis.
• Os cães permanecem reagentes
com variáveis títulos de anticorpos, em
geral bastante altos.
• Negativação intermitente do
teste molecular. Nessas condições, é
indicada a realização do teste molecular
em material obtido do baço.
• O estímulo antigênico
persistente resulta no aumento
de globulinas (gamaglobulina) e,
consequentemente, hiperproteinemia.
A relação albumina globulina tende a
ser mais baixa, principalmente se houver
concomitantemente a diminuição da
síntese de albumina. Relação A:G < 5,0
é altamente sugestiva de persistência de
infecção (figura 7).
Prognóstico e Considerações Finais
Em geral o prognóstico é bom,
quando o diagnóstico e o tratamento
são realizados na fase aguda da infecção
e na fase subclínica, quando ainda
não houve dano medular grave. Uma
vez instalada a pancitopenia ou grave
comprometimento orgânico como a
DRC, o prognóstico torna-se reservado.
Assim, em cães que vivem em regiões
ou locais onde a EMC é encontrada
sistematicamente, recomenda-se
que cães com trombocitopenia e
leucopenia moderadas, associadas ou
não a hiperproteinemia e baixa relação
A:G sejam vasculhados quanto a
possibilidade de infecção crônica por E.
canis, procedendo a pesquisa e titulação
de anticorpos anti-Ehrichia canis e a
realização de PCR para detecção de
material genético do organismo. Se
necessário, realizar punção aspirativa
do baço com agulha fina, submetendo
o material obtido para os testes
moleculares.
 HEMATOLOGIA
Figura 8. Alterações clínicas e laboratoriais nas diferentes fases da erliquiose monocítica canina
Fase Aguda Fase assintomática Fase crônica
2 – 4 semanas meses a anos meses a anos

Febre, anorexia, prostração, Sem manifestações clínicas detectáveis Anemia

perda de peso, esplenomegalia, Infecções secundárias
linfadenomegalia, alterações DRC
oculares, neurológicas,
respiratórias, gastrointestinais
Anemia arregenerativa Anemia arregenerativa (discreta) Pancitopenia variável
Trombocitopenia Leucopenia (ou não) Hipergamaglobulinemia
Leucopenia variável variável Relação A:G < 5,0
Aumento de ALT e FA Trombocitopenia (ou não) variável Uréia e creatinina
Hipoalbuminemia Hipergamaglobulinemia variável variáveis
Aumento de proteína C reativa

Figura 7: Alterações clínicas e laboratoriais nas diferentes fases da erliquiose monocítica canina

Patogenia da erliquiose canina

EXAMES REALIZADOS PELO

Fase aguda
TECSA LABORATÓRIOS
Picada do carrapato e Invasão dos Eliminação ou
transmissão do leucócitos perpetuação do
agente mononucleares e agente
disseminação
orgânica CÓD - EXAME PRAZO/DIAS

793 - PERFIL PCR REAL TIME PARA

HEMOPARASITAS - EHRLICHIA E BABESIA - 4
Desaparecimento dos sintomas e QUALITATIVO
Pancitopenia
persistência da estimulação
(Aplasia medular) antigênica 326 - PERFIL COMPLETO PARA
HEMOPARASITAS 2
Fase terminal Fase crônica

Figura 8: Patogenia da erliquiose canina 327 - BABESIA - SOROLOGIA IGG 3

632 - BABESIA- SOROLOGIA IGM 3

633 - BABESIA CANINA -

MÉTODO PCR REAL TIME QUALITATIVO 5

667 - EHRLICHIA - IGG - RIFI 3

666 - EHRLICHIA - IGM - MÉTODO RIFI 3

771 - EHRLICHIA SP - 7
MÉTODO PCR REAL TIME QUANTITATIVO

13
 HEMATOLOGIA
QUANDO E COMO UTILIZAR HEMOCOMPONENTES?
(Médica Veterinária - Responsável pelo Hemovet – Laboratório e Centro de Hemoterapia Veterinário)
Sangue Total (ST)
O sangue total é classificado em fresco
e estocado. Por definição, o sangue total
é denominado de fresco até 8 horas em
relação à coleta sem refrigerá-lo, ou seja,
mantido em temperatura ambiente (20-
24°C). Ele contém um número máximo
de plaquetas funcionais se permanecer
em temperatura ambiente até 6-8
horas após a coleta. Após este período,
o sangue total passa a ser chamado de
estocado, mantido refrigerado (2-6°C),
entretanto ocorre a perda de grande parte
das características hemostáticas sendo,
portanto, indicado apenas para correção
de anemia em pacientes hipovolêmicos.
Em geral, o sangue total refrigerado
permanece viável por um período de
35 dias quando mantido em CPDA-1
(citrato-fosfato-dextrose-adenina – 1)
que é a solução preservativa mais comum
das bolsas sanguíneas disponíveis no
mercado. A principal indicação do
sangue total fresco ou estocado é a
hemorragia aguda em que a reposição
de hemácias e da volemia é requerida.
É contraindicada a administração
de sangue total fresco como terapia
para pacientes trombocitopênicos não
anêmicos devido à possibilidade de
14
Simone Gonçalves
piorar ainda mais o quadro clínico do
animal. Para estes casos, a indicação de
concentrados de plaquetas é soberana.
Em geral, a dose recomendada para
cães é de 20 mL/kg de sangue total para
elevar 10 % o hematócrito. Em geral,
uma unidade de sangue total felino
(50mL) aumenta mais ou menos 5 %
do hematócrito de um gato de 5kg.
Desta forma, o objetivo da transfusão
sanguínea em felinos é alcançar um
hematócrito de pelo menos 20% que,
segundo os autores, é suficiente para
estabilizar um gato doente. A meia vida
das hemácias compatíveis transfundidas
na espécie canina é de 21 dias e 35 dias
para felinos.
Concentrado de Hemácias
(CH) – Cães e Gatos
O concentrado de hemácias é a primeira
escolha no tratamento de anemias em
pacientes normovolêmicos, ou seja, na
maioria dos casos atendidos na rotina
clínica resultante de hemorragia crônica,
hemólise ou eritropoiese ineficiente.
A vantagem deste hemocomponente é
que ele possui a mesma quantidade de
hemácias de uma bolsa de sangue total,
porém em menor volume beneficiando
pacientes que apresentam cardiopatia
ou nefropatia concomitante.
O concentrado de hemácias, também
denominado de papa de hemácias, é
obtido após a primeira centrifugação
refrigerada do sangue total (figura
1). Ele possui uma quantidade bem
reduzida de plasma o qual foi transferido
em seu maior volume para outra bolsa
satélite. Desta forma, minimiza-se a
ocorrência de reações transfusionais não
hemolíticas, pois a quantidade de plasma
transfundida é muito reduzida quando
comparada ao sangue total. O volume
médio de uma bolsa de concentrado de
hemácias de cães é de 250-300 mL e
de 25 mL para gatos. Recomenda-se a
diluição do CH com NaCl 0,9% antes
do uso (10 mL de NaCl 0,9% para 30-
40 mL de concentrado de hemácias de
cães e 10 mL de NaCl a 0,9% para CH
felino) para diminuir a sua viscosidade
e melhorar o fluxo sanguíneo. A dose
recomendada para cães é 10 mL/kg
para elevar 10% o hematócrito. Um
concentrado de hemácias para gatos
eleva em torno de 5-10% o hematócrito
de um gato de 5 kg.

Indicação e Velocidade de
Administração ( ST e CH )
Em geral, a transfusão de sangue total
não é indicada quando a hemoglobina
é maior que 10g/dL. Pacientes com
valores entre 7 e 10 g/dL, a decisão para
transfundir será individual dependendo
de vários fatores, dentre eles, quando
clínico do animal, possibilidade
de intervenção cirúrgica ou não,
sangramento presente, perda sanguínea
aguda ou crônica. A transfusão está
habitualmente indicada para valores
abaixo de 7 g/dL de hemoglobina. A
transfusão sanguínea com sangue total
ou concentrado de hemácias deve ser
administrada em até 4 horas para reduzir
o risco de contaminação e colonização
bacteriana. A administração mais rápida
é indicada em pacientes com hemorragia
aguda ou hipovolêmicos. O cuidado deve
ser redobrado em pacientes nefropatas
ou cardiopatas devido ao risco de
sobrecarga circulatória. A velocidade
de administração recomendada é: 0, 25
mL/kg na primeira meia hora passando
posteriormente para 10 a 20 mL/kg/
hora em pacientes normovolêmicos e 2
a 4 mL/kg/hora em cães cardiopatas ou
nefropatas.
Plasma Fresco Congelado
(cães e gatos)
O plasma fresco congelado é obtido
após a centrifugação do sangue total
devendo ser congelado até 6 a 8 horas
após a coleta para preservação de suas
propriedades. Este hemocomponente
permanece com suas características
viáveis por 1 ano congelado ( -18°C
a – 30°C). Ele contém fatores
de coagulação (incluindo von
Willebrand), anti-trombina III,
albumina, imunoglobulinas, proteínas
e antiproteases como a α1antitripsina e
a α2macroglobilinas além de contribuir
para elevação da pressão coloido
osmótica. É indicado no tratamento de
coagulopatias (hereditárias, síndromes
paraneoplásicas, hepatopatias,
dicumarínicos) e expansor agudo
de volume na ausência de colóides
sintéticos. A dose recomendada para o
plasma fresco congelado é de 10 a 30
mL/kg podendo ser administrado em 1
hora e repetido conforme o necessário.
Antes de sua administração, deve-
se submetê-lo ao descongelamento
em banho-maria com um envoltório
plástico.
HEMATOLOGIA
Concentrado de Plaquetas
(disponível apenas para cães)
A terapia com concentrados
de plaquetas é a primeira escolha
no tratamento de pacientes
trombocitopênicos ou com
trombocitopatias. O uso de concentrado
de plaquetas permite a transfusão de
grande quantidade de plaquetas sem
a transfusão simultânea de eritrócitos
ou plasma. Assim, são minimizados
efeitos colaterais associados com
administração de outros componentes
sanguíneos desnecessários e, portanto,
diminuindo os riscos de reações
transfusionais hemolíticas. Existem
duas indicações para a transfusão de
plaquetas: terapêutica e profilática.
A transfusão terapêutica é indicada
em trombocitopenia grave (< 50.000
plaquetas/μL) acompanhada de sinais
e sintomas de sangramento como
petequeias, sufusões, hematoquesia,
hematoemese e epistaxe. A transfusão
profilática é indicada para prevenir
a ocorrência de sangramentos
durante procedimentos cirúrgicos
sendo desejável pelo menos 100.000
plaquetas/μL no pré operatório ou,
ainda, em casos de trombocitopenia
15
 HEMATOLOGIA
severa (< 10.000 plaquetas/μL) em
que há risco de hemorragia súbita. A
dose recomendada é de 1 concentrado
de plaquetas (= 50 a 70 mL) para cada
10 kg que poderão ser administrados
em torno de 1 hora com velocidade
reduzida nos primeiros 15 minutos para
verificação de reações transfusionais.
É contraindicada a refrigeração ou o
aquecimento deste hemocomponente
antes de sua administração devido
à alteração de sua função. Deve
ser armazenado e transfundido em
temperatura ambiente (20-24°C) e no
máximo até 3 horas após a retirada do
agitador de plaquetas.
Crioprecipitado
(apenas para cães)
O crioprecipitado é um
precipitado branco obtido através do
descongelamento lento do plasma
fresco congelado. Ele contém uma
concentração elevada do fator VIII,
von Willebrand e fibrinogênio. Além
disso, contém os seguintes fatores
de coagulação: IX, XI e XIII. Este
hemocomponente permanece viável
por 6 meses congelado a pelo menos -
20°C. O crioprecipitado é indicado
no tratamento de coagulopatias
hereditárias (Hemofilia e Doença
de von Willebrand) e hemorragias
por hipofibrinogenemia. Este
hemocomponente é administrado
na dose de 1 unidade (= 40 a 50 mL)
para cada 10 kg podendo ser repetido
conforme necessário para o controle
do sangramento. A transfusão pode
ser realizada em torno de 1 hora. É
recomendado o descongelamento deste
hemocomponente antes do seu uso
protegido com um envoltório plástico.
Considerações Gerais
Os produtos sanguíneos devem ser
administrados por via intravenosa com
um equipo que contenha um filtro de
tamanho padronizado de 170 µm para
retenção de coágulos e debris durante a
administração. A Associação Americana
dos Bancos de Sangue não recomenda
a administração de medicamentos no
mesmo acesso venoso que o produto
sanguíneo. Além disso, a administração
16
simultânea ou a diluição com algumas
soluções cristalóides pode ocasionar
consequências deletérias. A solução de
Ringer Lactato não deve ser utilizada,
pois contém cálcio que poderá se ligar ao
citrato presente no anticoagulante das
bolsas de sangue e levar a formação de
microêmbolos. Por outro lado, soluções
hipotônicas como glicose a 5% podem
resultar em hemólise do componente Figura 1: Fracionamento de sangue total felino
sanguíneo. A solução recomendada em plasma fresco congelado (parte clara superior)
e concentrado de hemácias (parte avermelhada
para administração concomitante
inferior)
ou diluição do hemocomponente é
a solução fisiológica a 0,9%. Não é
necessário aquecer a bolsa de sangue
total ou concentrado de hemácias em
banho-maria antes do uso. Esta prática
vem sendo cada vez menos utilizada
devido ao risco de contaminação do
sangue, pois o plástico da bolsa é poroso.
Atualmente, é recomendado manter a
bolsa de sangue total ou concentrado de
hemácias 30 minutos em temperatura
Figura 2: Concentrado de hemácias da esquerda
ambiente antes de sua administração. de coloração avermelhada com suas características
Se optar pelo aquecimento, recomenda- macroscópicas preservadas. Concentrado de
hemácias da direita de coloração enegrecida
se colocar um envoltório plástico na indicando comprometimento da qualidade deste
bolsa para evitar a penetração da água hemocomponente como hemólise ou contaminação
bacteriana
do banho-maria cuja temperatura
não deverá estar mais alta que 37°C
EXAMES REALIZADOS PELO
para evitar hemólise, precipitação do TECSA LABORATÓRIOS
fibrinogênio e degradação de proteínas
e dos fatores de coagulação. Os níveis de CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
citocinas se elevam durante o período
810 - PERFIL PCR DOADORES DE SANGUE -
de estocagem dos produtos sanguíneos PCR PARA EHRLICHIA, BABESIA, 7
(sangue total ou concentrado de LEISHMANIA CHAGASI QUALITATIVO
hemácias). Recomenda-se que pacientes 715 - PERFIL TIPAGEM SANGUINEA+CHECK
nefropatas, hepatopatas, anemia UP GLOBAL DE FUNÇÕES+HEMOGRAMA 1
CANINO
hemolítica e em terapia intensiva sejam
transfundidos com hemocomponentes 44 - HEMOGRAMA COMPLETO – FELINO 1
com menos de 14 dias de
armazenamento. Não se recomenda o
reaproveitamento das bolsas de sangue 39 - HEMOGRAMA COMPLETO – CANINO 1
para outro paciente após a violação
das mesmas devido à contaminação 712 - PERFIL TIPAGEM SANGUINEA+
bacteriana que ocorre cada vez que se CHECK UP GLOBAL DE FUNCOES+ 1
HEMOGRAMA FELINO
rompe o sistema estéril. Não utilizar
hemocomponentes com alterações
713 - TIPAGEM SANGUINEA DE CÃES 1
macroscópicas como coloração e
partículas em suspensão. O sangue total
ou concentrado de hemácias escurecidos 710 - TIPAGEM SANGUINEA DE GATOS 1
podem indicar contaminação bacteriana
ou hemólise acentuada comprometendo
a viabilidade do hemocomponente 788 - CHECK UP GLOBAL DE FUNÇÕES 1
COM HEMOGRAMA
e com chances do animal apresentar
reações transfusionais graves. (figura 2)
 HEMATOLOGIA

CUIDADOS NA HORA DE REALIZAR

UMA TRANSFUSÃO SANGUÍNEA
Dra. Luciana de Almeida Lacerda
(Médica Veterinária especialista em Hematologia e Hemoterapia – Blut’sCentro de Diagnósticos Veterinários – Porto Alegre, RS)

Ao realizar uma transfusão
sanguínea, ou seja, infusão endovenosa
de sangue total ou subprodutos
(hemocomponentes e hemoderivados),
o médico veterinário deve ter alguns
cuidados com as etapas do processo
transfusional:
Cuidados com o Produto
a ser Transfundido
Seja qual o for o hemocomponentes
ou hemoderivado, o profissional
responsável deve se certificar da origem
do produto. O hemocomponente deve
ser de um doador comprovadamente
sadio através de exame físico e testes
laboratoriais (incluindo triagem para
agentes que possam ser transmitidos
pelo sangue). O produto deve estar
dentro da validade e deve ter sido
armazenado de acordo com critérios
pré-estabelecidos para tal. É importante
realizar inspeção visual do produto
quanto à presença de bolhas de ar,
coágulos e qualquer coloração incomum
ou turvação (crescimento bacteriano
pode resultar em formação de bolhas;
presença de hemólise pode acarretar
em coloração anormal ou turvação).
Amostras do produto a ser infundido
devem ser armazenadas para possíveis
testes em caso de reação transfusional.
Cuidados com o
Material Utilizado
Além do uso de EPIs (equipamento
de proteção individual – ex. avental,
luvas). A escolha do material adequado
para a transfusão também é um fator
importante. O profissional deve
escolher um equipo que contenha um
filtro (específico para transfusão) para
evitar que coágulo, fibrina ou debris
celulares entrem na circulação do
paciente. Deve-se utilizar um equipo
para cada bolsa infundida. Em geral,
utiliza-se um cateter de acordo com o
calibre e fragilidade da veia de acesso.
Parece dispensável o comentário, mas
é necessário lembrar que o material
deve ser estéril e deve se manter livre de
contaminações do ambiente.
Cuidados com os Testes
Pré-transfusionais
Prova-cruzada (ou teste de
compatibilidade) e tipagem sanguínea
devem ser realizados antes de cada
transfusão. A tipagem para o sistema
AB em gatos e para DEA 1 em cães está
disponível no Brasil, mas o profissional
deve ter em mente que existem outros
tipos sanguíneos, portanto o teste de

17
 HEMATOLOGIA
compatibilidade deve ser realizado em
conjunto. Antes de qualquer transfusão
é essencial que o médico veterinário
procure entender a doença de base, o
motivo pelo qual o paciente necessita
de transfusão, caso contrário as
consequências do procedimento podem
confundir o caso clínico.
Cuidados com a Instalação
do Hemocomponente
Antes de iniciar o procedimento, o
profissional deve procurar a posição de
maior conforto do paciente e que permita
o acesso venoso e o fluxo sanguíneo do
vaso acessado. O vaso selecionado deve
ser exclusivo para a transfusão, não deve
conter hematomas ou lesões próximas,
o que pode ser um desafio em pacientes
crônicos, muito jovens ou idosos que
passaram por outros procedimentos. O
hemocomponente deve ser instalado
e a velocidade deve ser controlada de
acordo com o estado clínico do paciente.
O acesso venoso pode ser mantido com
solução fisiológica 0,9%.
Cuidados na Monitorização
do Paciente
Monitorar o paciente durante toda
a transfusão: verificar a frequência
cardíaca, a temperatura e a frequência
respiratória do animal receptor a cada
20 ou 30 minutos. Os primeiros 15
minutos devem ser acompanhados junto
ao paciente para identificação precoce
de possíveis reações transfusionais.
O profissional responsável deve
manter as anotações realizadas sobre
o procedimento no prontuário do
paciente. Em pacientes normovolêmicos
(pacientes com anemia severa crônica),
cardiopatas ou com anemia hemolítica
imunomediada (AHIM), a velocidade
de transfusão deve ser a mais lenta
possível. Nestes casos, é possível pedir
ao serviço de hemoterapia que separe o
HEMOCOMPONENTE
Sangue total (ST)
Concentrado de eritrócitos com solução aditiva
Plasma fresco congelado
Concentrado de plaquetas (CP)
18
volume em bolsas menores para que o
hemocomponente não fique exposto à
temperatura ambiente por muitas horas.
Cuidados ao Finalizar
o Procedimento
Após a transfusão, o paciente deve
permanecer em observação para
Figura 1: Testes de compatibilidade em tubo
acompanhar a evolução do quadro de ensaio: Teste compatível (esquerda) e
clínico e detectar possíveis complicações. incompatível na prova maior (direita).
EXAMES REALIZADOS PELO
TECSA LABORATÓRIOS
CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
810 - PERFIL PCR DOADORES DE SANGUE -
PCR PARA EHRLICHIA, BABESIA, 7
LEISHMANIA CHAGASI QUALITATIVO
808 - TESTE DE REAÇÃO CRUZADA PARA 1
TRANSFUSÃO CANINA
44 - HEMOGRAMA COMPLETO – FELINO 1
39 - HEMOGRAMA COMPLETO – CANINO 1
715 - PERFIL TIPAGEM SANGUINEA+
CHECK UP GLOBAL DE FUNÇÕES+ 1
HEMOGRAMA CANINO Figura 2: Transfusão de concentrado de
eritrócitos felino.
712 - PERFIL TIPAGEM SANGUINEA+
CHECK UP GLOBAL DE FUNÇÕES+ 1
HEMOGRAMA FELINO
713 - TIPAGEM SANGUINEA DE CÃES 1
710 - TIPAGEM SANGUINEA DE GATOS 1
788 - CHECK UP GLOBAL DE FUNÇÕES 1
COM HEMOGRAMA
Referências Bibliográficas
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Medicine. Gloucester, UK: BSAVA, 2012.
DAY, M.J.; MACKIN, A.; LITTLEWOOD, J. Manual of Canine and Feline Haematology and
Transfusion Medicine. Gloucester, UK: BSAVA, 2000.
FIDLARCZYK D, FERREIRA SS. Enfermagememhemoterapia. 1ed. Rio de Janeiro:
Medbook - EditoraCientífica Ltda., 2008. 200p
HELM, J.R.; KNOTTENBELT, C. Blood transfusions in dogs and cats 1. Indications. In
Practice, 32: 184-189, 2010.
HELM, J.R.; KNOTTENBELT, C. Blood transfusions in dogs and cats 2. Practicalities of
blood collection and administration. In Practice, 32: 231-237, 2010.
TOCCI, L.J. Transfusion medicine in small animal practice. Vet Clin North Am: Small
Figura 3: Transfusão de plasma fresco congelado
AnimPract. 40(3):485-94, 2010.
YAGI K.; HOLOWAYCHUK M., eds. Manual of Veterinary Transfusion Medicine and Blood
canino.
Banking. Ames: Wiley Blackwell, 2016.
DOSE VELOCIDADE
10 a 22 mL/kg 1 a 4 mL/kg/hora
10 a 15 mL/kg 2 a 4 mL/kg/hora
10 a 30 mL/kg 2 a 6 mL/kg/hora
1 unidade para cada 10 kg 2 a 6 mL/kg/hora

ANEMIA HEMOLÍTICA IMUNE-MEDIADA
Introdução
A hemólise consiste em necrose do
eritrócito e tem ocorrência no fim da sua
vida. Quando a taxa de hemólise in vivo
aumenta, trata-se então de um estado
patológico. A hemólise patológica pode
ser definida como um aumento da
destruição de eritrócitos, diminuindo
seu tempo de vida. A hemólise pode
ser caracterizada como intravascular e
extravascular. Na hemólise intravascular,
a destruição do eritrócito ocorre dentro
do vaso sanguíneo ou do coração (não
incluindo fagocitose por macrófagos
teciduais enquanto passam pelo baço,
fígado ou medula óssea). A causa
geralmente pode estar relacionada a
hemoglobinemia e hemoglobinúria. A
hemólise extravascular ocorre fora do
sistema arterial-capilar-venoso e não
está relacionada com hemorragia. Esta
hemólise ocorre dentro de macrófagos,
por isso é chamada de hemólise
extravascular. Isto ocorre quando
eritrócitos cobertos por imunoglobulinas
são fagocitadas pelos macrófagos. A
anemia hemolítica imunomediada
(AHIM) é definida como uma redução
do número de eritrócitos em decorrência
HEMATOLOGIA
Prof. Dr. Rubens Antônio Carneiro
(Universidade Federal de Minas Gerais – UFMG)
Dr. Marthin Raboch Lempek
(Universidade Federal de Minas Gerais – UFMG)
da destruição por imunoglobulinas ou de água e eletrólitos causando edema
pelo sistema complemento (hemólise celular e lise. Esta ativação ocorre
intravascular) ou ainda, pela remoção também com IgM, ligando também com
promovida pelo sistema monocítico C1. Este complexo pode ser fagocitado
fagocitário (hemólise extravascular). pelos macrófagos do fígado.
Ocorre quando o sistema imune de um
animal produz anticorpos que se ligam
direta ou indiretamente seus próprios
eritrócitos (IgA SE) e provocam a
sua destruição. As moléculas IgASE
podem ser IgG, IgM ou IgA, e o
grau de lise vai depender do tipo e
quantidade de anticorpo que se liga ao
eritrócito e também do envolvimento Figura 1: Ilustração exemplificando os métodos de
do complemento de fixação. hemólise. Fonte: Google
Patofisiologia:
O IgG geralmente só provoca
hemólise quando há uma grande
quantidade de anticorpos. A ativação
do sistema do complemento e ligação
as proteínas causam a lise de eritrócitos.
O complemento 1 (C1), produzido no
fígado, através de uma série de reações
enzimáticas, lideram um ataque a
membrana do eritrócito através de
C8C9C5bC6C7 que por permitir
a abertura de pequenos orifícios na Figura 2: Ilustração de hemácias normais e
membrana da célula, permitem o influxo hemácias danificadas. Fonte: Google
19
 HEMATOLOGIA
Figura 3: Esferócito Fonte: Google
Sintomas
As causas de anemia podem ser dividas
em regenerativas e não regenerativas. As
regenerativas estão relacionadas com
hemorragias e processos hemolíticos. Os
processos hemolíticos se devem a várias
causas como imune-mediadas, defeitos
eritrocitários, parasitismo, bactérias,
substâncias químicas e microangiopatias.
A AHIM é reconhecida como causa
frequente do desenvolvimento de
quadros anêmicos agudos em cães,
podendo ter diferentes manifestações
clínicas, como esplenomegalia quando
os macrófagos são esplênicos e
hepatomegalia quando os macrófagos
são hepáticos. As anemias imune-
mediadas geralmente são regenerativas
caracterizadas por reticulocitose,
policromasia e anisocitose, mas podem
ser arregenerativas quando os anticorpos
ou complementos se direcionarem contra
os precursores eritrocitários na medula
óssea. A AHIM pode ser primária,
também chamada de idiopática, mas na
maioria das vezes é secundária, advinda
de anticorpos resultante de uma reação
20
imunológica. Em felinos pode estar
associada ao FeLV (vírus da leucemia
felina), doenças linfoproliferativas,
micoplasma e reações a várias drogas.
Pode-se ligar a AHIM a infecções
como parasitas, vírus, riquétzias, fungos,
bactérias, neoplasias, intoxicações,
transfusões sanguíneas, medicamentos
(cefalosporina, penicilina) defeitos
eritrocitários. Artigos conseguem
relacionar a vacinação recente com
quadros imune-mediados.
Figura 4: Mucosas pálidas de um felino como
exemplo de sinal clinico de anemia.
Fonte: Google
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Pacientes
É mais comum em animais jovens
e de meia idade, em geral castrados.
Níveis elevados de estrógenos tem sido
observado em algumas fêmeas com
AHIM e ainda em fêmeas com ciclo
estral anormal.
Achados Laboratoriais
Dentre as alterações laboratoriais
observadas, a ocorrência de anemia
moderada a intensa é frequentemente,
apresentando hematócrito inferior a
15%, com características regenerativas
(macrocitose,policromasia,reticulocitose
eritroblastose), é considerada como
patognomônica desta afecção; no
entanto, casos de AHIM sem sinais
de eritroregeneração são frequentes
em 50% dos casos, devendo-se ater
cuidadosamente à sua ocorrência. Outras
alterações como anemia regenerativa,
ou arregenerativa, esferocitose,
hemoglobinemia e hemoglbinúria,
leucocitose, trombocitopenia. Azotemia,

hiperproteinemia, aumento de enzimas
hepáticas e bilirrubinas, podem ser
encontradas em animais acometidos
pela AHIM.
Diagnóstico
Para se obter um diagnóstico
confiável, existem alguns exames
laboratoriais disponíveis como o Teste
de Coombs, o Exame da medula
óssea e o Coagulograma, que podem
ser ferramentas indispensáveis na
identificação de animais com AHIM.
Tratamento
Terapia Imunossupressora -
Glicocorticoides:
Os glicocorticoides diminuem
a afinidade das imunoglobulinas a
membrana eritrocitária e altera a função
ou reconhecimento do complemento
ao receptor dos macrófagos, inibindo
o reconhecimento do sistema
Fagocítico monocitário ao IgG, IgM
e C3b. Diminui ainda a produção
de imunoglobulinas, a esferocitose
e a cascata de complemento. Inibe a
produção de citocinas (Interleucina
6 (IL-6; IL-1 e interferon gama)
necessários para a geração e função de
linfócito T. A escolha entre prednisona e
dexametasona vai depender do uso BID
ou SID. A prednisona é usada na dose
de 2mg/kg BID via oral ou injetável. A
dose de dexametasona é de 0,5 – 1,0mg/
kg SID. A prednisona deve ser mantida
na dose máxima por duas semanas ou até
o volume globular (VG) se estabilizar, o
que é alcançado em torno de 3 – 14 dias.
Após a estabilização do VG, o desmame
deve ser feito com 25% da dose a cada
duas a quatro semanas. O tratamento
pode durar cerca de 3- 6 meses. O VG
deve ser checado duas vezes por semana
até a estabilização.
Antimetabólitos:
Existe sempre uma questão quando
adicionar outro imunossupressor ao
tratamento. A presença de VG baixo
e ainda aglutinação, não devem ser
parâmetros para adição de outro
medicamento. A indicação para sua
associação seria a continuidade da
aglutinação, presença de hemólise
intravascular, concentração de
bilirrubina maior que 10 mg, e falta
de resposta a corticoterapia. Essa
associação é onerosa e pode causar
efeitos indesejáveis. Os mais comuns
são azatioprina, ciclofosfamida,
ciclosporina, danazol.
Azatioprina:
É a forma mais efetiva de inibir a
função de linfócitos T, mas também
afeta linfócitos B. Pode ser usada
concomitante com prednisona, na
dose de 2mg/kg SID. Após quatro
semanas de remissão, a terapia pode
ser descontinuada. O hemograma deve
ser realizado a cada semana devido à
ação mielossupressora. Pode ocorrer
hepatotoxicose e pancreatite.
Ciclofosfamida:
Inibe a resposta primária e secundária.
Pode provocar anorexia, sinais
gastroentéricos, mielossupressão, queda
de pelos, cistite hemorrágica. Inicia-se a
dose de 200mg/m² IV e continua com
50mg/m² por mais quaro dias e a cada
semana até estabilização do VG.
Ciclosporina:
Age no impedimento de ativação
de linfócitos e macrófagos. Bloqueia
a liberação de célula T Helper. Tem
graus variáveis de absorção intestinal,
causando vômitos, diarreia e anorexia.
A dose recomendada é de 10mg/kg oral
BID deve ser descontinuado por duas
semanas quando o VG estabilizar.
Danazol:
É um Andrógeno sintético que
diminui a produção de IgG e reduz
a ligação de anticorpos ás células
vermelhas. Inibe a ativação e ligação
a membrana eritrocitária e diminui o
número de receptores nos macrófagos.
A resposta com aumento do VG pode
durar três semanas pode ser iniciada com
corticosteroides. As dosagens variam de
5mg/kg via oral BID ou 4mg/kg TID.
Tratamento Suporte
Dependendo dos sintomas, pode ser
necessário transfusões sanguíneas e
ou substitutos de hemoglobina. O uso
da transfusão é controverso e alguns
HEMATOLOGIA
autores acreditam que pode aumentar
a hemólise, acentuando os sintomas
nos animais acometidos. Outra
forma de tratamento de suporte é a
realização de Esplenectomia, esta por
sua vez, permite a remoção de fontes de
linfócito B e macrófagos ativados. Tem
que se ter em mente que o baço pode
ser potencial recurso de hematopoiese
extramedular. Podemos realizar
também a Plasmaférese, que é uma
técnica que visa a transfusão do plasma
sanguíneo de um cão doente ou um cão
doador. A utilização de Eritropoietina,
visando controlar a produção de células
vermelhas do sangue e a realização de
Imunoglobulina intravenosa.
EXAMES REALIZADOS PELO
TECSA LABORATÓRIOS
CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
39 - HEMOGRAMA COMPLETO -
1
CANINO
44 - HEMOGRAMA COMPLETO -
FELINO 1
591 - PERFIL COAGULOGRAMA 1
132 - MIELOGRAMA 4
814 - COOMBS DIRETO
3
(ANEMIA HEMOLITICA IMUNOMEDIA)
271 - FIV / FELV – LEUCEMIA E
IMUNODEFICIENCIA FELINA 1
Referências Bibliográficas
1) Schalm’s Veterinary hematology – sexta edição – 2010 -1206pag
DOUGLAS J. WEISS
K. JANE WARDROP
2) Immune-mediated hemolytic anemia: understanding the nemesis
Sheila McCullough
Vet Clin Small Anim
33 (2003) 1295–1315
3) Fundamentos de Patologia clínica veterinária
Steven L. Stockham
Michael A. Scott – segunda Edição 2011 – 726pag
4) Anemia hemolítica imunomediada não regenerativa em um cão
Leonardo Pinto Brandão1 Júlia Habu Ikesaki2 Samantha Ive Miyashiro3
Maria Luisa Franchini2 Mitika Kuribayashi Hagiwara4
Ciência Rural, Santa Maria v.34, n.2, p.557-561, mar-abr, 2004
21
 HEMATOLOGIA
ISOERITRÓLISE NEONATAL E A IMPORTÂNCIA
DA TIPAGEM SANGUÍNEA EM FELINOS
Introdução
A isoeritólise neonatal é uma hemólise
(destruição das hemácias) que ocorre em
recém-nascidos, e que resulta de uma
incompatibilidade de grupos sanguíneos
entre estes últimos e a mãe. É uma
doença mais conhecida nos humanos
e nos cavalos, mas pode também
acometer felinos e quase sempre fatal. A
ocorrência em felinos atualmente é rara
devido à disponibilidade da técnica de
Tipagem sanguínea em gatos e da ação
de tipificação do grupo sanguineo cada
vez maior dos criadores e veterinários
tanto para os acasalamentos quanto para
transfusões sanguíneas.
Tipos Sanguíneos dos Gatos
Os gatos podem ter sangue dos
grupos A, B, ou AB, sendo que A e
AB são dominantes em relação ao B
(um gato tem de herdar B de ambos
os pais para ser B). Gatos com grupo
sanguíneo B possuem naturalmente
anticorpos anti-A, podendo reagir logo
no primeiro contato (não é necessário
haver um primeiro contato, como
gestação ou transfusão de sangue, para
haver sensibilização, ou seja produzir
anticorpos contra A, para só reagir num
futuro contato). Estes anticorpos anti-A
estão presentes em grande quantidade
no soro e são fortemente hemolíticos
(fortemente reativos). Gatos de grupo A
possuem poucos anticorpos anti-B, que
são também pouco reativos.
O acasalamento de fêmeas tipo B com
22
machos tipo A ou AB, pode dar origem somente quando existem gatos tipo B
a gatinhos tipo A ou AB. O colostro na população.
das gatas tipo B contém anticorpos As raças Devon Rex, Angorá Turco,
anti-A em elevado título, os quais vão Van Turco, Exótico de pelo curto,
ser transferidos para o recém-nascido, Pêlo curto Britânico e Cornish Rex,
causando hemólise, intravascular e extra apresentam uma prevalência do tipo
vascular dos seus eritrócitos. B bastante alta, com percentagens que
Os tipos sanguíneos são definidos variam de 30 a 60%. Por outro lado, a
por antígenos espécie-específicos raça Siamês e outras relacionadas com
presentes na superfície dos eritrócitos. o Oriental de pêlo curto, assim como
A maior parte dos antígenos é um o Tonquinês, possuem exclusivamente
componente integral de membrana tipo sanguíneo A.
composto por carboidratos complexos
associados a proteínas ou lipídeos
Sinais Clínicos
inseridos na membrana eritrocitária.
Os gatos afetados nascem saudáveis,
São determinados por pelo menos
ativos e procuram alimentar-se do leite
dois alelos (A, b) no mesmo locus. O
da mãe. Os primeiros sinais clínicos
alelo tipo A parece ser completamente
surgem apenas algumas horas ou dias
dominante sobre o alelo b. Portanto,
após a ingestão do colostro, sendo que,
gatos com fenótipo A podem ter
em alguns casos, os gatos recém-nascidos
genótipo A/A ou A/b, enquanto que
podem falecer antes do desenvolvimento
somente gatos homozigotos para o
de qualquer sintomatologia. Os sinais
alelo b (b/b) expressam quantidades
clínicos dos filhotes afetados variam
suficientes do antígeno eritrocitário B e
de gravidade de acordo com o grau de
não possuem antígeno A. Um terceiro
hemólise podendo ser hemoglobinúria,
alelo, AB, que é recessivo em relação ao
fraqueza, icterícia, anorexia, dispnéia
alelo A, mas dominante sobre o alelo B,
e, eventualmente morte da maioria
ainda é estudado, mas acredita-se que
dos filhotes. Os sintomas vão de
seja determinante para a herança do
fraqueza, icterícia, necrose da ponta
tipo sanguíneo AB.
da cauda, hemoglobinúria até morte
O tipo sanguíneo A é o mais comum,
súbita. Também podem surgir sinais
porém nota-se que a proporção dos
secundários como mucosas pálidas,
gatos tipo B varia conforme a região
taquicardia, taquipnéia (relacionados
geográfica. A prevalência de gatos tipo
com a deficiente oxigenação), colapso e
B também varia muito entre raças,
morte, geralmente na primeira semana
enquanto que gatos tipo AB são raros.
de vida.
Os gatos tipo AB são encontrados

Teste de Tipagem
Para o teste de tipagem sanguínea
o sangue total deve ser colhido
e acondicionado em tubos com
anticoagulante, preferencialmente
EDTA. O princípio de todos os métodos
utilizados para tipagem sanguínea na
medicina veterinária é a visualização
de reações de hemoaglutinação entre os
antígenos da superfície das hemácias e
um reagente contendo antisoro mono
ou policlonal específico. Recentemente,
um laboratório de Lion, na França
(Alvedia, Lion, França) desenvolveu
um método rápido de determinação
HEMATOLOGIA
de fenótipo B. Quando é necessário que
se faça o cruzamento de progenitores
incompatíveis, os filhotes devem ser
retirados do contato com as fêmeas
progenitoras e a alimentação deve ser
realizada com colostro e leite de gatas
compatíveis. Todos os gatos devem ter
o tipo sanguíneo determinado como de
praxe em seus cartões de vacina, para
poder ajudar na identificação destes
animais e evitar futuros problemas com
a Isoeritrólise neonatal felina.
Donor = Doador
Recipient = Receptor
EXAMES REALIZADOS PELO
TECSA LABORATÓRIOS
CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
do tipo sanguíneo em gatos e cães, com
interpretação mais simples e com menor 710 - TIPAGEM SANGUINEA DE GATOS 1
margem de erro. O Tecsa realizou uma
parceria com a Alvedia e é representante
exclusivo deste Kit em toda a América 712 - PERFIL TIPAGEM SANGUINEA+-
CHECK UP GLOBAL DE 1
do Sul para comercialização e análises FUNÇÕES+HEMOGRAMA FELINO
internas.
44 - HEMOGRAMA FELINO 1
Conclusão
Concluiu-se que apesar de a
isoeritrólise neonatal ser rara, possui alta
taxa de mortalidade. A melhor forma
de prevenção é a tipagem sanguínea
dos progenitores, principalmente
daqueles de raças com alta frequência
23
 HEMATOLOGIA
COLETA, CONSERVAÇÃO E ARMAZENAMENTO DE
AMOSTRAS DESTINADAS AO COAGULOGRAMA
PONTOS CRÍTICOS PRÉ-ANALÍTICOS NO DIAGNÓSTICO
DE DISTÚRBIOS DE COAGULAÇÃO
Introdução
Os exames de coagulação são
amplamente utilizados na prática
médica veterinária. Sua solicitação está
indicada para a avaliação da hemostasia
por meio dos exames convencionais
incluídos no coagulograma e na
investigação de doenças hemorrágicas e
trombóticas. Em associação com outros
exames complementares laboratoriais, o
coagulograma é também um exame de
triagem muito realizado na rotina de
pré-operatórios.
Coagulograma
No perfil coagulograma estão
inclusos os seguintes testes: Tempo
de tromboplastina parcial ativada
(TTPA), Tempo de protrombina (TP)
e Dosagem de fibrinogênio. É um
eficiente método de análise do sistema
de coagulação como um todo, o TP
avalia a deficiência de fatores envolvidos
na via extrínseca ou comum da cascata
de coagulação, enquanto o TTPA avalia
o sistema intrínseco e comum da cascata
de coagulação. Portanto, como ambos
avaliam indiretamente a via comum,
devem ser utilizados em conjunto para
se chegar a uma melhor interpretação
de resultados, da seguinte forma: TTPA
aumentado e TP normal indicam
alteração da via intrínseca; TTPA
normal e TP aumentado indicam
alteração na via extrínseca; e, ambos os
tempos aumentados indicam alteração
da via comum ou de vários fatores
concomitantemente (por exemplo,
insuficiência hepática). O fibrinogênio
é uma proteína de fase aguda positiva,
consumido durante a coagulação à
medida que é convertido em fibrina
pela trombina, avaliando, portanto, a via
comum da cascata de coagulação.
24
Figura 1: Representação esquemática da cascata
de coagulação conforme avaliada pelos testes
de triagem da coagulação in vitro do perfil
coagulograma. A formação de fibrina é o ponto final
de cada teste.
Fonte: STOCKHAM e SCOTT, 2011.
Fatores Pré-Analíticos
Determinantes
É muito importante conhecer os
fatores que afetam a qualidade da
amostra antes do início dos testes de
coagulação para obtenção de resultados
confiáveis e de qualidade, mesmo
que todo o processo de controle de
qualidade esteja satisfatório. As decisões
e conclusões que seguem os resultados
de exames só serão válidas se os fatores
pré-analíticos forem confiáveis. Sendo
assim, é indispensável o conhecimento
sobre o preparo do paciente, a coleta, o
transporte e a manipulação das amostras,
sempre seguindo procedimentos
determinados e que foram validados
pelo laboratório.
Coleta e Conservação
das Amostras
Para a coleta desses exames, é
fundamental que o médico veterinário
esteja devidamente treinado e necessária para anticoagular volumes de
capacitado para a função, pois são
exames sensíveis, e qualquer falha
na técnica pode afetar diretamente
seus resultados, além de ter um papel
importante na qualidade do processo. O
citrato de sódio é um quelante de cálcio
que reage com o cálcio livre do sangue
formando sais insolúveis. A ausência
de cálcio livre impede a efetivação do
mecanismo de coagulação sanguínea.
É o anticoagulante mais utilizado para
conservação dos exames que avaliam
a coagulação e que necessitam do uso
do plasma do paciente. As amostras
para os testes de coagulação devem
ser coletadas em tubos contendo
citrato de sódio a 3,2%, respeitando
a proporção de 9 partes de sangue
total para 1 parte de anticoagulante
e o preenchimento estabelecido no
próprio tubo. Se a proporção não for
respeitada (preenchimento abaixo ou
acima do nível do tubo), pode haver
resultados inadequados para testes
dependentes de cálcio. Amostras
citratadas em excesso podem apresentar
atividade de coagulação reduzida
(tempos prolongados) ao passo que
amostras subcitratadas, podem ser
hipercoaguláveis (tempos reduzidos).
Mesmo com volume correto de
sangue, o hematócrito (Ht) pode afetar
o resultado de TP e TTPA. Na vigência
de anemia (Ht<25%), o plasma pode
ser subcitradado porque há excesso
plasma para a mesma qualidade de
citrato, podendo resultar em tempos
de coagulação falsamente mais curtos.
Já na presença de eritrocitose (Ht >
55%), o plasma pode ser citratado em
excesso, porque há menos plasma com
a mesma concentração de citrato, o que
pode prolongar o tempo de coagulação.
Nestes casos é recomendado recalcular
a concentração de citrato de sódio
sangue com hematócritos alterados. O
mais indicado para coleta, são materiais
que contenham vácuo, diminuindo a
manipulação das amostras, uma vez
que a agitação mecânica excessiva pode

contribuir para a ativação da coagulação.
Após a coleta, as amostras devem ser
homogeneizadas, gentilmente, por
inversão de 5 a 10 vezes, para garantir
o contato de toda a amostra com o
anticoagulante. Amostras coaguladas
ou com formação de agregados de
fibrina são inadequadas para realização
dos testes. Amostras hemolisadas, por
fatores in vitro, também não devem ser
testadas, pois existe a possibilidade da
cascata de coagulação e das plaquetas
terem sido ativadas pelos mesmos
fatores responsáveis pela hemólise.
Figura 2: Tubos para coleta de sangue à vácuo
contendo citrato de sódio a 3,2%.
Fonte: Google imagens.
A comunicação com a área técnica
laboratorial, caso haja alguma
intercorrência no momento da coleta, é
importante para uma adequada análise
crítica dos resultados e para avaliar
se as alterações foram decorrentes de
problemas pré-analíticos. Nesse caso,
é fundamental que seja feita uma
nova coleta. Após a coleta do sangue,
as amostras devem ser armazenadas
em local adequado ou devem ser
imediatamente encaminhadas para
processamento, de acordo com o fluxo
já definido pelo responsável do setor
de coleta. Uma boa recomendação
caso a amostra não seja imediatamente
encaminhada para processamento,
é, na primeira hora após a coleta,
centrifugar a amostra de sangue total
para separar somente o plasma e estocá-
lo. A centrifugação deve ser feita em alta
rotação e por tempo aproximado de 10
a 15 minutos, para evitar o excesso de
plaquetas remanescentes no plasma. Na
centrifugação inadequada, com presença
de plaqueta acima de 10.000/mm³,
ocorre liberação de fator plaquetário 4
(PF4), levando à possíveis alterações de
resultados.
Armazenamento e
Estabilidade das Amostras
Com relação a estabilidade e ao
armazenamento de amostras para
exames de coagulação, é importante
seguir algumas orientações básicas e
obrigatórias. Em geral, as amostras para
teste de TTPA são menos estáveis ​​do
que para a realização do TP. Para TP,
o sangue total é estável à temperatura
ambiente por quatro horas, e o plasma,
à temperatura ambiente (24°C) por
24 horas, sob refrigeração (4°C) até
48horas, podendo ocasionalmente
quando necessário, ser congelado (-70 °
C) por duas semanas. Em contrapartida,
o teste TTPA deve ser priorizado, uma
vez que amostras armazenadas em
condições não padronizadas podem
degradar-se rapidamente, levando a
um resultado falsamente alterado. As
amostras de sangue total destinadas ao
teste de TTPA, devem ser encaminhadas
para processamento em até 4 horas,
ao mesmo tempo que, o plasma, à
temperatura ambiente (24°C), é estável
por 12 horas e, sob refrigeração (4°C),
por até 24horas. Em diversos estudos
consultados, as amostras congeladas
designadas para TTPA, apresentaram
diferenças significativas nos resultados
normais e prolongados, quando
processadas em 6 e 12 horas após a
coleta. Sendo o congelamento, portanto,
um meio inadequado para armazenar
amostras de plasma destinadas a testes
de TTPA. Em contraste com o TP
e TTPA, as variações induzidas pelo
armazenamento e congelação nos níveis
de fibrinogênio se apresentaram mínimas
e irrelevantes para a interpretação
clínica. As alterações relevantes na
concentração do fibrinogênio ocorreram
apenas em amostras armazenadas por
mais de 18 meses.
Considerações Finais
Em síntese, para uma avaliação
eficiente da cascata de coagulação como
um todo, o coagulograma (TP, TTPA
HEMATOLOGIA
e Fibrinogênio) deve ser realizado
em conjunto, preferecialmente no
plasma citratado fresco, podendo
ser adequadamente armazenado sob
refrigeração (4°C) por até 24horas.
Estes cuidados são fundamentais para
garantir acurácia no resultado de todos
os exames. Resultados deturpados em
decorrência de condições pré-analíticas
inadequadas, alterariam a interpretação
clínica, comprometendo gravemente o
diagnóstico de distúrbios de coagulação.
EXAMES REALIZADOS PELO
TECSA LABORATÓRIOS
CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
591 - PERFIL COAGULOGRAMA 1
346 - TEMPO DE PROTROMBINA (TP) 1
347 - TEMPO DE TROMBOPLASTINA
PARCIAL ATIVADA (TTPA) 1
186 – FIBRINOGÊNIO 1
43 - CONTAGEM DE PLAQUETAS 1
39 – HEMOGRAMA COMPLETO 1
333 – PERFIL HEPÁTICO 1
Referências Bibliográficas
ALESCI, S.; BORGGREFE, M. C.; DEMPFLE, E. Effect of freezing
method and storage at−20 °C and−70 °C on prothrombin time, aPTT and
plasmafibrinogen levels. Thrombosis Research, 124, Elsevier Ltd, 2009,
p.121–126.
PAES, P.R.O.; LEME, F.O.P.; CARNEIRO, R. A. Hematologia dos
Animais Domésticos. Belo Horizonte: FEPMVZ, 2009. 119p.
STOCKHAM, L. S.; SCOTT, M. A. Fundamentos de Patologia Clínica
Veterinária. 2.Ed. Rio de Janeiro. Guanabara Koogan, 2011. p.213-262.
RAO, L.V.; et al. Stability of prothrombin time and activated partial
thromboplastin time tests under different storage conditions. Clinica
Chimica Acta, 300, 2000 p. 13–21.
RIZZO, F.; et al. Measurement of prothrombin time (PT) and activated
partial thromboplastin time (APTT) on canine citrated plasma samples
following different storage conditions. Research in Veterinary Science, 85,
2008, p.166–170.
25
 HEMATOLOGIA
ALTERAÇÕES HEMATOLÓGICAS CAUSADAS
PELA LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA
Introdução
A Leishmaniose Visceral é onicogrifose sem contar as inúmeras
uma doença infecciosa sistêmica
caracterizada pelo elevado potencial de
morbidade e letalidade. Esta doença é
causada pelo protozoário Leishmania
chagasi (infantum), considerado um
parasita intracelular obrigatório
que infecta as células do sistema
mononuclear fagocitário de mamíferos
suscetíveis de infecção, quando o animal
está infectado, este pode desenvolver
alterações clínicas e alterações nos
exames de rotina que além dos
sorológicos, muitas vezes, auxiliam no
diagnóstico da Leishmaniose Visceral
Canina.
Para a confirmação do diagnóstico,
podem ser realizados exames sorológicos,
exames de imunohistoquímica e
pesquisa de Leishmania sp. em lâminas
com esfregaços de linfonodos infartados,
baço e medula óssea. Cerca de 60% dos
animais acometidos pela Leishmaniose
são assintomáticos. Alguns podem
apresentar alguns sinais clínicos que
não são patognomônicos como perda
de peso, febre, espleno e hepatomegalia
26
além de várias dermatopatias,
alterações hematológicas e bioquímicas
que podem ser observadas no decorrer
da doença.
Os principais órgãos acometidos
são: baço, fígado, linfonodo e medula
óssea, que estão diretamente ligados
ao sistema hematopoiético, responsável
pela produção e regulação das células
do sangue. Normalmente anemia e
neutropenia são os achados mais comuns
em exames de animais acometidos,
porém, outras alterações podem ser
evidenciadas.
Principais Alterações
Encontradas
A Leishmaniose Visceral é uma
doença que pode evoluir gradativamente
e de várias formas diferentes, podendo
ser identificada com leves alterações
hematológicas ou com expressivas
alterações dependendo do momento
em que o animal é identificado. Os
linfonodos, baço e principalmente
a medula óssea são os principais
sítios onde podemos encontrar este
protozoário. A medula óssea é o
principal responsável pela hematopoese,
quando esta se encontra parasitada, no
início da infecção podemos verificar
que sua função de eritropoese e
granulopoese se encontram dentro
dos níveis normais de referência. Com
a progressão da doença, podemos
identificar que alguns animais começam
a desenvolver uma anemia associada
a leucopenia e trombocitopenia. A
anemia é caracterizada como de
origem multifocal, surgindo devido à
combinação de fatores como hemólise,
mecanismos autoimunes, destruição
de eritrócitos, sequestro esplênico e
redução na hematopoese pela medula.
Essas anemias podem ser descritas
como normocíticas e normocrômicas,
apresentando níveis bastante inferiores
aos valores de referência para os animais
da mesma espécie. Na leucopenia
podemos identificar uma acentuada
redução na contagem de basófilos,
neutrófilos e eosinófilos. A presença
de neutropenia pode ser recorrente
da hipoplasia medular decorrente da
infecção pela leishmaniose. Ocorre um
moderado aumento na contagem de
 HEMATOLOGIA

EXAMES REALIZADOS PELO

TECSA LABORATÓRIOS

CÓD - EXAME PRAZO/DIAS

39 - HEMOGRAMA COMPLETO -
CANINO 1

788-CHECK UP GLOBAL DE
FUNCOES COM HEMOGRAMA 1

109 - PROTEINA TOTAL E FRAÇÕES 1

316 – PERFIL COMPLEMENTAR PARA 1

LEISHMANIOSE
83 - LEISHMANIOSE CANINA
(DPP + ELISA + RIFI) 2

447 – LEISHMANIOSE DILUIÇÃO TOTAL 2

582 – PERFIL LEISHMANIOSE (DP-

P+ELISA+RIFI) E PROTEÍNAS TOTAIS 1

680 - LEISHMANIA CHAGASI –

MÉTODO PCR REAL TIME QUANTITATIVO 7

macrófagos, em alguns casos, podendo
ser visualizado a presença de formas
amastigotas de Leishmania sp. no
citoplasma de macrófagos infectados,
podemos evidenciar também uma
discreta linfocitose com uma presença
marcante de plasmocitose.
456 – LEISHMANIOSE –
MÉTODO IMUNOHISTOQUÍMICA 6
a alguns fatores como alteração na
parede vascular causada por vasculite 408 – PESQUISA DE LEISHMANIA SP. 4
devido à presença de imunocomplexos
circulantes, pode estar relacionado
também a presença de imunoglobulinas
antiplaquetárias. Outras alterações como
hiperglobulinemia e hipoalbuminemia
podem ser evidenciadas em alguns
animais, estas podem ser identificadas
devido ao comprometimento hepático
e ou devido a proteinúria em casos de Referências Bibliográficas
animais nefropatas e ou desnutridos. ÇELIK, Ü. et al. Immune Hemolytic Anemia in Association with Visceral
Leishmaniasis.

Conclusão J.Pediatr.Inf., 1: 36-8, 2007;

Para a realização do diagnóstico COUTINHO, J.F.V.; XIMENES, M.F.F.M.; JERÔNIMO, S.M.B.;

de Leishmaniose Visceral Canina CARVALHO, G.F.;

Figura 1: Figura utilizada para ilustrar QUEIROZ, P.V.S.; BATISTA, L.M.M.; CARLOTA, F.C.A. Estudo
macrófagos fortemente infectados por formas é imprescindível a realização de clínico-laboratorial
amastigotas de Leishmania sp., macrófagos de um exames específicos (Sorológico, PCR e histopatológico em cães infectados naturalmente por Leishmania
Hamster infectado por Leishmania infantum.
Fonte: Imagem retirada do “The Journal of -RT, Imunohistoquímica, Pesquisa chagasi. Revista
Universidade Rural, Série Ciência da Vida, v.25, n.1, p.123-124, 2005;
Infectious Disease” disponível em: http://jid. direta) e também exames laboratoriais
oxfordjournals.org/content/207/8.cover-expansion
de rotina (hemograma, exames BANETH, G.; KOUTINAS, A.F.; SOLANO-GALLEGO, L.;
BOURDEUA, P.;

A trombocitopenia está presente de bioquimicos, etc.). Assim, pode-se FERRER, L. Canine leishmaniosis - new concepts and insights on

forma acentuada nos casos crônicos
da doença, normalmente os animais
cronicamente infectados apresentam
sinais clínicos como gengivorragias,
diagnosticar precocemente essa doença,
principalmente em animais que ainda
não apresentaram sinais clínicos e adotar
medidas que aumentam a sobrevida
an expading
zoonosis: part one. Trends in Parasitology, v.24, p.324-330, 2008
BOURDOISEAU, G.; BONNEFONT, C.; MAGNOL, J.P.; SAINT-
ANDRÉ, I.;
CHABANNE, L. Lymphocyte subset abnormalities in canine leishmaniasis.

epistaxe e até em alguns casos, dos animais infectados e medidas Veterinary

hemorragias. Isso pode ocorrer devido preventivas/profiláticas que reduzam os Immunology and Immunopathology, v.56, n.3-4, p.345-351, 1997.

índices de transmissão.
27
 HEMATOLOGIA
INTERPRETANDO O RDW
EM MEDICINA VETERINÁRIA
Introdução
A anemia pode ser definida como a
diminuição da concentração sanguínea
de hemácias, hemoglobina e/ou volume
globular(VG) de um animal. Entretanto,
apenas constatar a existência da anemia
representa uma avaliação superficial da
condição fisiopatológica do paciente.
A análise de parâmetros como o
volume corpuscular médio (VCM),
a concentração de hemoglobina
corpuscular média (CHCM), a
concentração de reticulócitos,
características hematoscópicas e o
RDW permitem classificar o processo
anêmico e auxiliar na determinação da
sua causa, prognóstico e alternativas
terapêuticas. A literatura relacionada
com hematologia veterinária relata
amplamente a existência de três tipos de
classificações básicas para as anemias.
As anemias podem classificadas de
acordo com as alterações apresentadas
por seus índices eritrocitários em
macrocíticas, normocíticas, microcíticas,
hipocrômicas e normocrômicas.
28
Também podemos classificar as
anemias de acordo com os mecanismos
patofisiológicos de formação da
anemia. Desta forma as anemias
podem ser hemolíticas, hemorrágicas
ou hipoproliferativas. Por último,
classificamos as anemias de acordo
com a existência de resposta medular
em regenerativas ou arregenerativas. A
utilização do RDW juntamente com
outros parâmetros hematológicos para
analisar o eritrograma de um animal
representa uma maneira eficiente de
enquadrar a anemia dentro destas
classificações.
VCM
O VCM é um índice eritrocitário
responsável por informar o volume
médio de cada eritrócito. Conforme
a anemia vai se instaurando, a medula
óssea começa a receber o estímulo
da eritropoietina secretada em maior
quantidade pelo rim para produzir
e liberar mais células eritróides na
corrente sanguínea na tentativa de
reestabelecer a concentração sanguínea
de hemácias dentro do intervalo de
referência. Durante este processo
ocorre a liberação de células eritróides
mais jovens, ou imaturas, na corrente
sanguínea, chamadas de reticulócitos. Os
reticulócitos apresentam volume celular
maior comparado a uma hemácia adulta
e, por este motivo, quando começam a
atingir uma concentração significativa
na corrente sanguínea, ocorre um
consequente aumento no VCM.
Quando o VCM assume valores acima
do intervalo de referência definido para
a espécie nós definimos esta anemia
como macrocítica. A reticulocitose
não é a única causa de macrocitose,
porém quando observada em um
animal anêmico sugere a existência
de um processo regenerativo medular
eritróide ativo ou prévio. Entretanto
a reticulocitose é considerada o
achado confirmatório de existência de
resposta medular e pode ser aferida
precisamente através da mensuração de
sua concentração sérica ou altamente

sugerida através da observação de
policromasia na hematoscopia. Além
da macrocitose, outros parâmetros
que podem sugerir a existência de
resposta medular são presença de
corpúsculos de howelljolly, hipocromia,
metarrubricitose e RDW aumentado. O
VCM também pode alterar-se para baixo
quando uma população eritrocitária
é formada predominantemente por
células eritróides microcíticas ou
com volume celular reduzido. As
anemias microcíticas costumam ser
causadas pelo desenvolvimento de uma
deficiência de ferro que, em cães e gatos
adultos, normalmente é causada por
hemorragias crônicas.
Anisocitose
A anisocitose (FIG 1) é uma
alteração morfológica celular observada
através da microscopia óptica em
esfregaço sanguíneo, ou hematoscopia.
É caracterizada pela diferença de
diâmetro celular e pode ser quantificada
em discreta, moderada e intensa ou
em cruzes (1+, 2+ e 3+). É esperado
que quando hemácias de diferentes
tamanhos comecem a compor a
população eritróide em concentrações
mais expressivas seja possível observar a
presença de anisocitose na hematoscopia.
Quanto maior a concentração destas
células com volume alterado na
concentração sanguínea, maior será o
grau de anisocitose observado.
Figura 1: Anisocitose moderada em um esfregaço
de sangue de cão. Fonte: http://www.koofers.
com"www.koofers.com
RDW
O RDW é a sigla para a expressão em
inglês “Redcell Distribution Width” que,
em tradução direta para o português,
significa amplitude de distribuição
eritrocitária. É um parâmetro que
HEMATOLOGIA
visa quantificar a heterogeneidade do Entretanto, para que possamos realizar
volume celular eritrocitário presente em este tipo de interpretação devemos
uma amostra, ou traduzir em números associar a avaliação do RDW com a
contínuos o grau de anisocitose avaliação de outros parâmetros como o
eritrocitária presente em uma amostra VCM. Presença de anemia associado a
de sangue animal. Esta ferramenta RDW dentro do intervalo de referência
diagnóstica representa o coeficiente sugere anemia arregenerativa. Para que
de variação da curva de histograma do a melhor interpretação diagnóstica seja
volume eritrocitário e é calculada através obtida, a avaliação do RDW nunca deve
da razão entre o desvio padrão desta ser feita de maneira isolada à avaliação
curva pelo VCM (ou média exibida dos outros parâmetros hematológicos.
pela curva) da amostra, conforme fica
demonstrado pela fórmula e figura a
seguir. EXAMES REALIZADOS PELO
TECSA LABORATÓRIOS
CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
39 - HEMOGRAMA COMPLETO -
CANINO 1
44 - HEMOGRAMA COMPLETO -
FELINO 1
146 - HEMOGRAMA COMPLETO -
EQUINO 1
245 - CONTAGEM DE
RETICULOCITOS - PET 1
Figura 2: Histograma da distribuição dos diferentes
volumes eritrocitários presentes na amostra de 717 - CONTAGEM DIFERENCIAL |DE
sangue analisada. O RDW é proporcional à largura RETICULOCITOS FELINO 2
da curva destacada na figura. Fonte: Adaptado de
Thrall (2007).
132 - MIELOGRAMA 4
Desta forma, quando o RDW
apresenta valores acima do intervalo de
referência podemos imaginar que exista
um número aumentado de hemácias
de diferentes volumes, ou tamanhos na
circulação. Estas hemácias de tamanho Referências Bibliográficas
alterado podem ser microcíticas, CAPORAL, F. A., COMAR, S. R. Evaluationof
macrocíticas ou um conjunto dos dois
RDW-CV, RDW-SD, and MATH-1SD for
thedetectionoferythrocyteanisocytosisobservedbyopticalmicroscopy. J
tipos de hemácias, dependendo do BrasPatolMed Lab, v. 49, n. 5, p. 324-331, 2013.
tipo de processo formador da anemia a HODGES, J., CHRISTOPHER,
Diagnosticaccuracyofusingerythrocyteindicesandpolychromasiato
M. M.
que o animal está submetido. Também identifyregenerative anemia in dogs. Journalofthe American Veterinary
Medical Association. v.238, p. 1452-1458, 2011.
podemos esperar que, possivelmente LASSEN, E. D., WEISER, G. Tecnologia Laboratorial em Medicina
este número de hemácias com volume Veterinária. In: Hematologia e Bioquímica Clínica Veterinária, 1ª ed.,
Roca, São Paulo, 2007. p. 7-30.
alterado ainda não seja suficiente para JAIN, N. C. Essentials ofVeterinaryHematology. Lea &Febiger,
deslocar o valor do VCM para cima ou Philadelphia, 1993.
para baixo do intervalo de referência e, MEYER, D. J., HARVEY, J. W. VeterinaryLaboratory Medicine:
InterpretationandDiagnosis. 3rd ed. Saunders, St. Louis, 2004. p. 52-80.
por este motivo, o RDW é considerado RIZZI, T. E., MEINKOTH, J. H., CLINKENBEARD, K. D. Normal
um parâmetro mais sensível ou precoce Hematologyofthe Dog. In: Schalm’sVeterinaryHematology, 6th ed.,
Wiley-Blackwell, Iowa, 2010. p. 799-809.
para detectar as variações de volume STOCKHAM, S. L., SCOTT, M. A. Fundamentals ofVeterinary
celular existentes em uma amostra de ClinicalPathology. 2ª ed. BlackwellPublishing, Iowa, 2008.
p. 151-153/158-172.
sangue decorrentes de reticulocitose TVEDTEN, H. LaboratoryandClinicalDiagnosisof Anemia. In:
ou deficiência de ferro. Caso o tipo de Schalm’sVeterinaryHematology, 6th ed., Wiley-Blackwell,
Iowa, 2010. p. 152-160.
hemácia predominante seja o macrocítico WEISS, D. J. Normal Hematologyofthe Dog. In: Schalm’sVeterinary
podemos suspeitar da existência de um Hematology, 6th ed., Wiley-Blackwell, Iowa, 2010. p. 167-170.
processo regenerativo medular frente à
anemia e caso seja microcítico podemos
suspeitar de deficiência de ferro.
29
 HEMATOLOGIA
MONITORAMENTO DO
PACIENTE TRANSFUNDIDO
A maior incidência de transfusão
sanguínea é em pacientes críticos com
anemia decorrente de perda de sangue,
hemólise ou não produção de eritrócitos
pela medula óssea. Em geral as alterações
clínicas decorrem da hipóxia tecidual
e dos mecanismos compensatórios tais
como aumento no débito cardíaco,
diminuição da viscosidade do sangue,
diminuição da afinidade do oxigênio à
hemoglobina e vasoconstrição periférica.
As principais alterações clínicas são
palidez de membranas mucosas, apatia,
menor tolerância ao exercício, aumento
da frequência respiratória, aumento da
frequência cardíaca e sopros cardíacos.
Figura 1: Banco de sangue animal.
Fonte: http://cdn.phys.org/newman/gfx/news/
hires/2013
A indicação da transfusão de sangue
deve ser baseada principalmente no
histórico e severidade dos sinais clínicos,
além dos parâmetros laboratoriais
do animal. É importante monitorar
o paciente que recebe transfusão
sanguínea para detectar precocemente
a ocorrência de reações transfusionais e
avaliar sua melhora clínica.
A avaliação pré-transfusional do
paciente pode ser realizada pela
mensuração do volume globular,
hematócrito e concentração
de hemoglobina através do
HEMOGRAMA COMPLETO. Pela
dosagem de PROTEÍNAS TOTAL E
FRAÇÕES, na qual serão verificadas as
concentrações de albumina e globulinas.
Coloração de mucosas, frequências
cardíaca, respiratória e temperatura.
Além da coloração e composição da
30
urina (URINA ROTINA – EAS). Além
disso, vale ressaltar que é de extrema
importância a avaliação dos doadores.
Para tanto, além de um exame clínico
completo, hemograma e proteinograma,
recomenda-se a pesquisa de agentes
infecciosos como hemoparasitoses e
viroses.
Para cães recomenda-se a sorologia
para Brucelose, Leishmaniose,
Ehrlichiose, Babesiose, Tripanossomose,
Dirofilariose e Lyme. No caso de felinos,
é de extrema importância a realização
de exames de triagem para FIV, FELV e
PIF. Um ponto chave e importantíssimo
para o sucesso de uma transfusão, além
da obtenção de histórico de transfusões
prévias, a ser considerado tanto para
doadores quanto para receptores, é a
compatibilidade sanguínea. Esta pode
ser realizada através de TIPAGEM
SANGUÍNEA e provas cruzadas.
Durante o procedimento de transfusão,
é importante a avaliação a cada 15
minutos das frequências cardíaca,
respiratória e temperatura na primeira
hora e na ausência de reações adversas, a
cada hora do restante da transfusão.
Figura 2: Transfusão sanguínea.
Fonte: site http://www.vetnext.com
Caso haja alguma reação, deve-
se interromper o procedimento
imediatamente, administrar soluções
cristaloides intravenosas e se possível,
avaliar o débito urinário e a pressão
sanguínea.No período pós-transfusional,
deve-se avaliar a frequência respiratória,
coloração de mucosas e o TPC (tempo
de preenchimento capilar), atentando
para quaisquer alterações no paciente.
Além disso, como o procedimento
de transfusão é emergencial, deve-
se então avaliar criteriosamente as
funções biológicas através do CHECK
UP GLOBAL DE FUNÇÕES,
principalmente as funções relacionadas
ao fígado e rins (Perfil Hepático e Perfil
Renal) e é claro, determinar e tratar o
distúrbio primário. A coleta de sangue
para a realização de hemogramas com
o intuito de avaliar a viabilidade das
células transfundidas deve ser feita com
1h, 24h e 72 horas após a transfusão.
EXAMES REALIZADOS PELO
TECSA LABORATÓRIOS
CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
39 - HEMOGRAMA COMPLETO -
PET E ANIMAIS SILVESTRES 1
788-CHECK UP GLOBAL DE
FUNCOES COM HEMOGRAMA 1
109 - PROTEINA TOTAL E FRACOES 1
273 - FERRO SERICO 2
231- CAPACIDADE LIVRE DE
LIGACAO DE FERRO 2
234 - URINA ROTINA 1
713 - TIPAGEM SANGUINEA DE CAES 1
710 - TIPAGEM SANGUINEA DE GATOS 1
668 - PERFIL DOENCA TRANSMITIDA
PELO CARRAPATO 3
83 - LEISHMANIOSE CANINA
(DPP + ELISA + RIFI) 2
361 - CORONAVIRUS FELINO - SOROLO-
GIA (PERITONITE INFECCIOSA 1
FELINA - PIF)
271 - FIV / FELV - LEUCEMIA E 1
IMUNODEFICIENCIA FELINA
Referências Bibliográficas
Disponível em: http://cdn.phys.org/newman/gfx/news/hires/2013
Disponível em: http://www.vetnext.com

ACOMPANHAMENTO DA EFICÁCIA DE
TRATAMENTO PELO PCR REAL TIME
DIAGNÓSTICO QUANTITATIVO PARA LEISHMANIOSE VISCERAL CANINA
Atualmente estão disponíveis diversas
metodologias para o diagnóstico da
Leishmaniose Visceral Canina (LVC).
O diagnóstico laboratorial pode ser feito
através do exame parasitológico direto,
por meio de métodos imunológicos: a
Imunofluorescência indireta (RIFI) ou
ensaios imunoenzimáticos (ELISA),
por método de imuno-histoquímica e,
mais recentemente, através de métodos
moleculares de amplificação do ácido
nucléico (PCR e PCR-Real Time).
Cada metodologia tem particularidades
que devem ser conhecidas pelo clínico
no momento da requisição e da
interpretação do exame.  Leishmania: graças à amplificação e
PCR – Reação em
Cadeia de Polimerase
Vários estudos demonstram que
a PCR é altamente específica e
mais sensível do que os métodos
parasitológicos clássicos utilizados para
o diagnóstico da LVC. A utilização da
PCR permite a detecção do parasita
com uso de sondas específicas de forma
não invasiva, através da amplificação do
cinetoplasto da Leishmania sp. A PCR
pode ser utilizada em qualquer amostra
biológica, incluindo pele, sangue, biópsia
de linfonodo e medula óssea. Reações
falso-negativas podem ocorrer quando
a quantidade de DNA está abaixo da
sensibilidade de detecção do teste.
PCR- Real Time
A técnica PCR Real Time é uma
categoria de PCR que permite a detecção
e quantificação em tempo real de uma
região específica do material genético.
Para que isso ocorra, são empregadas
sondas específicas para o fragmento alvo,
marcadas com fluoróforos. Durante a
amplificação do DNA, essas sondas se
ligam ao fragmento alvo e são inativadas
enzimaticamente. Ao serem inativadas,
ocorre emissão de fluorescência, que é
proporcional a um determinado produto
da PCR. A detecção de fluorescência
indica a presença ou ausência das
regiões pesquisadas, de forma rápida,
precisa e sensível.
Dúvidas mais Freqüentes
Quais as vantagens da Técnica
PCR Real Time na detecção das
Leishmanioses?
• Monitoramento da carga
parasitária: quantificação da expressão
gênica em diferentes amostras
biológicas.
• Detecção rápida da
à detecção simultânea dos produtos a
cada ciclo realizado, a PCR Real Time
representa uma significativa redução
de tempo na realização nos testes
moleculares.
• Especificidade: no PCR Real
Time para Leishmania é utilizado
material genético específico desse
parasita, garantindo que apenas
material genético de Leishmania chagasi
(responsável pela Leishmaniose visceral)
seja alvo da reação.
• Sensibilidade: a seleção da
sequência alvo determina a sensibilidade
e a especificidade do teste. Uma
maior sensibilidade é atingida quando
sequências de DNA presentes em
cópias múltiplas são utilizadas, como,
por exemplo, a região conservada dos
minicírculos de DNA do Cinetoplasto
(kDNA). O kDNA apresenta cerca
de 10.000 minicírculos de DNA
distribuídos em uma região conservada
e uma região variável. Iniciadores
específicos para amplificar esta região
conservada são úteis na detecção
de todas as espécies de Leishmania,
enquanto aqueles direcionados para a
região variável permitem a diferenciação
de cada espécie ou complexo de espécies
existentes. Tais particularidades
BIOLOGIA MOLECULAR
fornecem maior eficiência à reação e,
consequentemente, ao diagnóstico e
monitoramento durante a terapêutica
da leishmaniose.
Quando solicitar testes
moleculares por PCR Real Time
na detecção das leishmanioses?
A abordagem quantitativa pode
ser útil no monitoramento da carga
parasitária em tecidos caninos em
fase de tratamento e pós-tratamento.
Assim, é possível identificar recidivas da
leishmaniose, acompanhar a evolução
da patologia e avaliar a eficiência
de um tratamento farmacológico.
Consequentemente, o teste fornece
informações para a otimização do
tratamento e quanto ao prognóstico da
infecção.
O TECSA Laboratórios realiza todos
os testes para um diagnóstico completo,
juntamente com a avaliação do Clínico
Veterinário.
 Observações:
• Todas as amostras devem ser
coletadas em frasco estéril.
• Enviar as amostras refrigeradas em
até 72 horas.
• A confiabilidade, especificidade
e sensibilidade do teste dependem
do cumprimento de todas estas
recomendações.
EXAMES REALIZADOS PELO
TECSA LABORATÓRIOS
CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
483 - LEISHMANIA CHAGASI - MÉTODO
PCR REAL TIME QUALITATIVO 5
680 - LEISHMANIA CHAGASI - MÉTODO
PCR REAL TIME QUANTITATIVO 5
408 - PESQUISA DE LEISHMANIA SP. 4
83 - LEISHMANIOSE CANINA
(ELISA + RIFI) 1
447 - LEISHMANIOSE CANINA (ELISA +
RIFI ) COM DILUIÇÃO TOTAL 2
31
 BIOQUÍMICA
ELETROFORESE DE PROTEÍNAS
A eletroforese refere-se à migração
de solutos ou partículas carregadas em
um meio líquido sob a influência de um
campo elétrico. As distâncias percorridas
pelas proteínas variam, formando
bandas, essas são denominadas albumina,
alfa-1-globulina, alfa-2-globulina,
betaglobulina e gamaglobulina. É
utilizada para auxiliar o diagnóstico de
disproteinemias, gamopatias e processos
inflamatórios. Os resultados devem ser
dados sempre em valor percentual da
concentração das diversas frações e na
forma gráfica.
Figura 1: Perfil eletroforético.
Fonte: 1
Albumina
A albumina é a proteína mais
abundante do plasma, a sua principal
32
função é a manutenção da pressão
coloidosmótica e o transporte de diversas
substâncias. A hipoalbuminemia
pode estar presente em inúmeras
doenças e é altamente inespecífica.
Em algumas condições pode-se
observar a redução dessa proteína:
inflamação aguda ou crônica, doença
hepática, glomerulopatias, lesão tubular,
enteropatia perdedora de proteínas,
doença inflamatória intestinal, linfomas,
leucemia, desnutrição protéica,
hipertireoidismo e uso de corticóides.
Figura 2: Perfil eletroforético em que há perda de
albumina.
Fonte: 1
Alfa-1-globulinas
A principal proteína é a alfa-
1-antitripsina. O aumento desta
geralmente ocorre quando há processos
inflamatórios agudos ou crônicos,
infecciosos e imunes, neoplasias e após
traumas e cirurgias. Já a redução dessas
proteínas ocorre na hepatite viral aguda,
má absorção, enfisema pulmonar, jejum
prolongado e síndrome nefrótica.
Figura 3: Perfil eletroforético em que há perda de
alfa-1antitripsina.
Fonte: 1
Alfa-2-globulinas
As proteínas presentes nesta banda são
a haptoglobina, a alfa-2-macroglobulina
e a ceruloplasmina. Raramente é
observada alteração nessa banda,
uma vez que quando há diminuição
de uma há aumento das outras para
compensar. A elevação da alfa-2-
macroglobulina associada a redução da
albumina ocorre na síndrome nefrótica.

A haptoglobina sofre uma redução
em sua concentração quando há uma
hepatopatia grave, hemólise e durante
terapias com corticóides e estrógenos.
A ceruloplasmina aumenta durante
uma terapia com estrógenos e sofre uma
queda quando há desnutrição, síndrome
nefrótica e em enteropatias com perda
de proteínas.
Figura 4: Perfil eletroforético das proteínas de fase
aguda.
Fonte: 1
Betaglobulinas
São compostas pelas seguintes
proteínas: transferrina, betalipoproteínas
(LDL), C3 e outros componentes
do complemento, antitrombina III e
beta-2-microglobulina. O aumento
das betalipoproteínas geralmente
ocorre quando há hipotireoidismo,
icterícia obstrutiva, nefroses e diabetes
mellitus, pois nesses casos pode ocorrer
aumento do colesterol. Já a anemia por
deficiência de ferro leva a um aumento
da transferrina. Quando há hepatite
grave pode haver sobreposição ou fusão
das bandas beta e gama pelo aumento
de IgA presentes nas cirroses hepáticas,
infecções do trato respiratório e de pele
e na artrite reumatóide. Quando há
elevações dos complementos, pode estar
presente um carcinoma ou síndrome
de Cushing. A queda do C3 está
relacionada a doenças glomerulares.
Gamaglobulinas
São os anticorpos produzidos pelos
plasmócitos quando estimulados por
antígenos. As gamaglobulinas são
formadas por duas cadeias pesadas (G,
A, M, D e E) e duas cadeias leves (kappa
ou lambda). Algumas características
importantes das imunoglobulinas (Igs)
são: IgG, migra por toda a fração gama,
representa a maior parte das Igs normais
e age contra antígenos bacterianos; IgA,
migração na junção das frações beta e
gama, proteção de mucosas e fluidos
corporais; IgM, migração na junção
das frações beta e gama, age na fase
BIOQUÍMICA
aguda de doenças infecciosas; IgD,
função desconhecida; IgE, reação de
hipersensibilidade.
Figura 5: Padrão eletroforético de proteínas séricas
Fonte: 1
A fração gama tem dois principais
padrões eletroforéticos, um pico
policlonal e um monoclonal. O pico
policlonal ocorre quando há uma
resposta imunológica simultânea de
vários clones plasmocitários devido a
um estímulo antigênico. Esses estímulos
podem ser inflamatório, imune ou
infeccioso, como por exemplo em
sarcoides, lúpus eritematoso sistêmico
entre outros. Há um aumento difuso do
padrão gama, em que há uma curva de
base larga, pois há produção de todas as
classes das Igs.
33
 BIOQUÍMICA
Figura 6: Padrão eletroforético de pico policlonal
Fonte: 1
O pico monoclonal ocorre quando há
produção homogênea de um único clone
plasmocitário de um tipo específico de
imunoglobulina. Como são moléculas
idênticas entre si apresentam a mesma
mobilidade forética, o que produz
uma curva de base estreita, é o padrão
que ocorre na Leishmaniose Visceral
Canina.
Figura 7: Padrão eletroforético de pico monoclonal
Fonte: 1
34
Hipogamaglobulinemia/
Agamaglobulinemia
Consiste na redução do nível das
gamaglobulinas, geralmente sem
alteração pronunciada nas outras regiões
da globulina. Esse padrão está presente
nas hipo ou agamaglobulinemias
congênitas ou secundárias, em que há
ausência de um ou mais anticorpos
específicos, que resulta em infecções
frequentes algumas vezes fatais.
Figura 8: Esquema ilustrativo
hipoglobulinemia/agamaglobulinemia.
Fonte: 1
Conclusão
Para que um resultado de eletroforese
de proteínas seja interpretado da forma
correta, é importante saber o que leva
às alterações em cada banda das frações
protéicas. A banda de albumina sofre
alteração quando há alteração direta
ou indireta em sua produção, pode
ser pela redução na ingesta ou perda
pela via enteral ou proteinúria. Já as
alfaglobulinas aumentam em todos os
processos inflamatórios, infecciosos
e imunológicos. As betaglobulinas
aumentam quando há alteração no
metabolismo dos lipídeos ou quando
há colestase. Também há aumento nos
casos de anemia ferropriva, quando não
há síntese de transferrina. Mas a queda
dessa fração pode ocorrer quando está
em fase crônica. A fração gamaglobulina
aumentará todas as vezes que houver
processo infeccioso, inflamatório ou
imunológico. Esse aumento ocorre
de forma policlonal. Em doenças
linfoproliferativas, haverá um aumento
monoclonal. É importante que o
Médico Veterinário saiba interpretar de
forma correta este exame, pois auxilia
no diagnóstico de algumas patologias,
possui um custo acessível e fornece
os componentes principais de cada
fração protéica facilitando e guiando
o raciocínio clínico para as doenças
que apresentam padrões eletroforéticos
característicos.
EXAMES REALIZADOS PELO
TECSA LABORATÓRIOS
CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
264 - ELETROFORESE DE PROTEINAS 4
311 - TRANSFERRINA 2
39 - HEMOGRAMA COMPLETO - PET E 1
ANIMAIS SILVESTRES
de
Referências Bibliográficas
1 - Eletroforese de proteínas séricas: interpretação e correlação clínica. Paula
e Silva, Roberta Oliveira, Lopes, Aline de Freitas e Faria, Rosa Malena
Delbone. 116-122, Belo Horizonte : Revista Médica de Minas Gerais, 2008,
Vol. 18 (2).

DIAGNÓSTICO LABORATORIAL X
DAGNÓSTICO CLÍNICO
QUANDO RESULTADOS OBTIDOS NÃO SÃO
COMPATÍVEIS COM ESTADO CLÍNICO DO ANIMAL
O Diagnóstico Laboratorial
O diagnóstico laboratorial é um
recurso diagnóstico complementar e
não conclusivo, ou seja, de apoio, que
confirma ou não uma suspeita clínica
inicial, podendo nos remeter a realização
de provas adicionais para que se
possam elucidar cada quadro e traçar as
diretrizes terapêuticas, preventivas e de
controle para determinada enfermidade
ou condição patológica.
Exames Laboratoriais:
Uma Ferramenta de Apoio
As análises laboratoriais não
substituem em hipótese alguma uma boa
anamnese e exame clínico, sendo assim,
quanto maior o número de informações
disponíveis ao clínico, maior a chance
de fechar um diagnóstico correto. Além
disso, nem sempre é possível estabelecer
o diagnóstico a partir de uma única
avaliação, podendo ser necessário
acompanhamento seriado com o intuito
de acompanhar a evolução de uma
provável patologia em curso, uma vez
que deve se considerar o dinamismo
de várias enfermidades, como período
de incubação, pré-patente, curso agudo
ou crônico e resposta imunológica
individual. Todos os exames
laboratoriais oferecidos pelo laboratório
de apoio possuem valor diagnóstico
determinado pela sua especificidade,
sensibilidade e valor preditivo (grau
de confiabilidade) e tais características
são inerentes à metodologia utilizada
nos ensaios. Portanto, a escolha dos
exames a serem realizados é dependente
da sintomatologia e/ ou suspeitas
clínicas, além de histórico do animal e
dados epidemiológicos levantados pelo
Médico Veterinário responsável, o qual
deverá posteriormente associar todas
essas informações e estabelecer assim
um diagnóstico definitivo e diferencial
para conclusão do caso.
Resultados Incoerentes com
Estado Clínico do Paciente
Em algumas situações, ao realizar-
mos/solicitarmos suporte clínico-
laboratorial para auxílio na interpretação
de exames e sugestão de demais provas
complementares aos nossos colegas, em
função de determinado quadro clínico,
podemos nos deparar com resultados
que nem sempre são esperados
(resultados anormais ou normais que
conflitam com a hipótese diagnóstica),
o que às vezes pode nos surpreender e
gerar dúvidas quanto a confiabilidade
do serviço prestado pelo laboratório
de apoio. Nesse ponto o clínico deve se
questionar quanto à existência de outras
hipóteses diagnósticas (diagnóstico
diferencial). Além disso, deve-se
enfatizar que é relativamente comum
alguns exames laboratoriais acusarem
mais de uma enfermidade ou durante
a realização de check-ups rotineiros
revelarem uma doença pré-existente
que ainda não fora manifestada clinica-
mente. Muitas vezes esquecemos que
vários fatores influenciam no resultado
obtido e a grande maioria deles está
ligada às variáveis pré-analíticas,
basicamente no preparo do paciente,
coleta, armazenamento e conservação
das amostras. Todos esses fatores
podem ser determinantes de uma
errônea interpretação dos resultados
laboratoriais e questionamentos quanto
ao processo analítico.
Variáveis Pré-Analíticas
O primeiro ponto a se destacar como
variável pré-analítica é a qualidade da
conduta profissional, em que a falta
de preparo de alguns profissionais tem
influência direta sobre o procedimento
BIOQUÍMICA
de coleta, armazenamento e conservação
das amostras. Além desse, a bagagem
de conhecimento científico adquirido
na vida acadêmica e pós-acadêmica
são fundamentais para a escolha do
conjunto de exames a serem realizados
diante de determinado paciente, sinais e
sintomas, daí a importância do processo
de educação continuada na aquisição
de novos conhecimentos, reciclagem e
atualização de conteúdos. Esse é um dos
focos da VetScience Seminários. Em
segundo lugar, os fatores intrínsecos
que devem ser levados em consideração
na interpretação de resultados são
sexo, idade, raça e gestação (influências
biocronológicas - ciclo estral, circadiano
e sazonalidade). Os fatores extrínsecos
envolvem o jejum (mínimo de 12 horas
sempre),estresse e redução das atividades.
Em relação aos métodos de coleta e
amostras, os principais determinantes
de alterações em resultados são:
tempo de garroteamento excessivo,
baixo volume de amostra, proporção
inadequada do volume de amostra em
relação ao aditivo (ex.: anticoagulante),
tipo de acondicionamento de amostra
(SEMPRE use tubo fornecido pelo
laboratório), homogeneização e
contaminação bacteriana, além de
identificação do material coletado
e correto/completo preenchimento
da requisição de exames. Destaca-
se também outro fator fundamental
ligado à conservação de amostras, como
oscilação de temperatura de geladeira na
clínica veterinária, estabilidade de certos
componentes biológicos in vitro, além
de exposição à luz.
Exemplos de Fatores Pré-
Analiticos que Podem Alterar
Alguns Parâmetros:
• Medicamentos, Vitaminas, etc
Diversas drogas podem interferir,
35
 BIOQUÍMICA
in vivo ou in vitro, nos resultados de
análises laboratoriais. É importante que
o clínico esteja atento ao que o paciente
está tomando como ferro, minerais,
vitaminas etc. Altas concentrações de
vitamina C, por exemplo, podem elevar
os resultados das frutosaminas e do
ácido úrico, produzir falso-negativos
para sangue oculto nas fezes e provocar
possíveis alterações na creatinina sérica.
O uso de contraceptivos em fêmeas
eleva os níveis séricos da globulina
ligadora da tiroxina e, em consequência,
os hormônios tireoidianos T3 total
e T4 total. Elevam-se também os
níveis séricos do ferro, triglicerídeos,
transaminase pirúvica, gamaglutamil-
transpeptidase, enquanto diminuem
os níveis de albumina. As drogas
diuréticas frequentemente diminuem
a concentração de potássio e elevam o
sódio, o cálcio e a glicose. A dosagem
de creatinina pode sofrer interferência
de vários medicamentos, como, por
exemplo, a dipirona. No monitoramento
36
de drogas terapêuticas, é importante
observar o horário da coleta em
relação à ultima dose. Para muitos
medicamentos, o monitoramento é feito
no intervalo entre as doses, utilizando-
se, em alguns casos, a coleta durante o
pico de concentração da droga (T4 total
e fenobarbital, por exemplo).
• Gestação
A gestação provoca mudanças meta-
bólicas profundas e diversos exames têm
seus valores modificados dependendo
do período de gestação. Concentrações
de estrogênios e progesterona resultam
em aumentos na secreção de prolactina,
da globulina ligadora da tiroxina e o
consequente aumento do T3 e T4 totais.
Porém, o oposto pode ocorrer com o
hormônio luteinizante e o hormônio
folículo estimulante. Há mudanças na
função renal, com especial elevação dos
níveis de filtração glomerular que levam
a uma maior excreção da glicose, ureia,
creatinina e proteína. Observam-se,
portanto, diminuições no nível sérico
destas substâncias. Há no soro elevações
de lipídios, colesterol e triglicerídeos,
inclusive um aumento da atividade das
enzimas: lactato desidrogenase e da
fosfatase alcalina, especialmente pela
presença da isoenzima placentária. Com
frequência, ocorrem mudanças nos
parâmetros hematológicos: hematócrito
e hemoglobina diminuem. As plaque-
tas podem gradualmente ter seus níveis
reduzidos.
• Exercício Físico
A atividade física influencia e interfere
consideravelmente no metabolismo e
deve-se avaliar com cuidado os resulta-
dos obtidos de amostras coletadas
após exercícios. Dependendo da
duração e da intensidade, várias são as
substâncias afetadas nas concentrações
urinárias e sanguíneas. Na fase inicial
dos exercícios, há um aumento de
glicose e de insulina que pode levar à
hipoglicemia com a intensificação da

atividade física. A desidrogenase láctica,
a creatinofosfoquinase e a aldolase são
enzimas extremamente sensíveis, que se
elevam com exercícios de pouca duração
e intensidade. As glicoproteínas,
transferrina, transaminases, ureia,
creatinina, ácido úrico e contagem de
leucócitos podem elevar-se. O exercício
estimula a secreção do cortisol, podendo
desaparecer o ritmo circadiano. Também
observam-se aumentos na excreção de
cortisol livre urinário e nas concentrações
plasmáticas de aldosterona, hormônio de
crescimento, prolactina e catecolaminas
(tanto plasmática quanto urinária). O
colesterol e os triglicerídeos diminuem,
podendo permanecer assim por vários
dias. E, diretamente proporcional à
duração e à intensidade dessa atividade
física, podem surgir a hematúria e a
proteinúria.
• Ritmo Circadiano
Os valores de alguns constituintes
líquidos orgânicos variam ciclicamente
ao longo do dia. A magnitude do efeito
do ritmo circadiano pode ser maior
do que geralmente se leva em conta
na interpretação dos exames. Além
da influência de fatores individuais,
muitos hormônios mostram variações
diurnas e biológicas aleatórias ao longo
de 24 horas. O cortisol e o ACTH
apresentam valores mais elevados pela
manhã do que a tarde e a noite e são
muito influenciados pelo estresse. Em
grau menor, o TSH também apresenta
uma variação circadiana, com níveis mais
elevados após a meia-noite e mais baixos
em torno do meio-dia. A fosfatase ácida,
o potássio, a transferrina e o ferro sérico
mostram-se também mais elevados pela
manhã, alterações que, neste último,
podem atingir de 30% a 50%, além de
sua variação intra-individual no dia-a-
dia. Também os eosinófilos variam com
a hora do dia, apresentando-se mais
baixos à tarde; linfócitos e leucócitos
têm seus valores máximos pela manhã,
e o urobilinogênio urinário atinge sua
excreção máxima à tarde. É também
quando os triglicerídeos estão mais
altos, bem como o fosfato, a ureia e o
hematócrito. Outro importante fator
de influência é a sazonalidade. Como
BIOQUÍMICA
exemplo, a vitamina D que sofre quando há necessidade de repetir o
interferência da exposição à luz solar, exame na mesma amostra ou em nova
com redução dos seus níveis no inverno, coleta posteriormente para confirmação
principalmente em países onde as de resultados obtidos, “analisando com
estações são bem definidas. O oposto compromisso, diagnosticando com
se aplica ao T3 total que, por sua ação responsabilidade e orientando com
calorigênica, apresenta níveis mais ética”.
elevados no inverno. Os valores para as
provas funcionais foram padronizados
pela manhã, portanto elas devem ser
realizadas, preferencialmente, neste
período.
• Hemólise
A ruptura da hemácia, ou hemólise,
pode ocorrer por um processo mecânico
ou metabólico, seja em um processo
natural de renovação da célula vermelha
ou como consequência de doença. A Figura1: Diferentes graus de hemólise (Fonte:
hemólise por anemia hemolítica ou Retirado do site Capital Health)
por punção venosa causa elevação de
LDH, bilirrubinas, transaminases,
potássio, magnésio e fosfatase ácida.
Hemólises causadas por traumatismo EXAMES REALIZADOS PELO
durante a punção, o que se observa TECSA LABORATÓRIOS
mais frequentemente, podem invalidar
os resultados de testes de coagulação,
pela liberação de tromboplastinas. A CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
hemólise tem efeitos marcantes em
39 - HEMOGRAMA COMPLETO – CANINO 1
proteínas totais, fosfatase alcalina, ferro
e fósforo, mas podendo mascarar reações 570 - PERFIL CHECK UP GLOBAL DE
FUNCOES 1
com anticorpos hemolisantes, portanto,
quando se tem extravasamento de 626 - T4 LIVRE - DIALISE
(PRE-RADIOIMUNOENSAIO) 1
conteúdo celular, tem-se alteração de
pH e consequentemente desnaturação
73 - T4 LIVRE (RIE) 1
de algumas proteínas (como anticorpos)
podendo haver interferência em
74 - T4 LIVRE (QUIMIO) 1
exames sorológicos determinando
reações inespecíficas como por exemplo
147 - T4 TOTAL (RIE) 1
em exames de brucelose (IDGA),
ELISA e RIFI e quaisquer outras
164 - T4 TOTAL (QUIMIO) 1
técnicas que possuem princípios de
reações colorimétricas. Enfim, uma
gama de variáveis pré-analíticas são 624 - T3 TOTAL (RIE) 1
determinantes de alterações labora-
toriais nem sempre compatíveis com o 66 - T3 TOTAL (QUIMIO) 1
estado clínico do animal. Além disso,
71 - TSH - HORMONIO ESTIMULANTE 1
frisa-se a importância da interação DA TIREOIDE (RIE)
entre o Médico Veterinário Clínico e
845 - TSH - HORMONIO ESTIMULANTE 1
o suporte clínico-laboratorial de forma DA TIREOIDE (QUIMIO)
a discutir e orientar para uma melhor
578 - DIAGNOSTICO SOROLOGICO DE
condução da abordagem diagnóstica. No GESTACAO - DOSAGEM DA RELAXINA 1
TECSA Laboratórios estamos sempre
dispostos a discutir sobre os casos
clínicos, resultados obtidos, indicando
37
 DERMATOLOGIA
PÊNFIGO EM CÃES E GATOS
Introdução
As dermatopatias são doenças que
acometem o sistema tegumentar
provocando vários tipos de alterações,
muitas das vezes, essas alterações podem
ocorrer devido à fatores extrínsecos, mais
em alguns casos, elas podem ocorrer
devido à fatores intrínsecos. Dentre os
vários fatores intrínsecos que acometem
a pele dos animais, podemos citar o
complexo Pênfigo. O complexo Pênfigo
é um grupo de doenças autoimunes
de descrição rara, porém acomete
cães e gatos. Dentre as variações
que existem dentro do complexo,
podemos citar o Pênfigo Foliáceo,
o Pênfigo Eritematoso, o Pênfigo
Vulgar e o Pênfigo Vegetante. Estes se
distinguem de acordo com a forma e a
características das lesões apresentadas,
variando de vesículas bolhosas, pústulas
na pele, colaretes epidérmicos, eritema
e a despigmentação da área acometida.
Dentre esses, o Pênfigo Foliáceo é
a dermatopatia imunomediada de
ocorrência mais comum nos cães e nos
gatos.
Figura 1: Cão apresentando lesão com pústulas
no plano nasal.
Fonte: Imagem retirada do “Veterinary Articles/
Pemphigus Foliaceus” disponível em: http://
www.vmcli.com/veterinary-articles-pemphigus-
foliaceus.html
Etiopatogenia
Sua etiologia ainda não está totalmente
elucidada, porém, está relacionada à
produção irregular de autoanticorpos
específicos. Alguns estudos apontam
que o Pênfigo Foliáceo também pode
38
ocorrer devido à utilização de alguns
fármacos por períodos prolongados,
que possuem os compostos tióis em sua
composição, ou então, por apresentarem
enxofre, que em sua biotransformação
acaba por produzir grupos tióis ativos.
O Pênfigo Foliáceo é caracterizado
por produzir autoanticorpos contra
um dos antígenos responsáveis pela
adesão intercelular epidérmica, presente
nos desmossomos. A produção dos
autoanticorpos está diretamente ligada a
uma regulação imune anormal ou devido
a uma estimulação antigênica anormal.
O antígeno mais provável responsável
pela ocorrência do pênfigo foliáceo é a
desmogleína 1 do grupo da caderina.
Ainda não há estudos ou referências
bibliográficas que comprovem a
predisposição sexual, porém, já existem
algumas raças onde foram observadas
predisposição para a ocorrência do
Pênfigo Foliáceo, dentre elas, podemos
citar raças como Chow Chow, Akita,
Collie, Dachshund, Doberman, Bearded,
Pinscher e Schipperkes. O pênfigo pode
ocorrer em qualquer idade do animal,
mais alguns estudos indicam que a
maior incidência do mesmo é por volta
dos cinco anos de idade.
Sinais Clínicos
A ligação dos autoanticorpos com
o antígeno promove a ocorrência de
acantólise, que é caracterizada pela
separação da camada espinhosa da
epiderme, dando origem a pústulas
intradermicas bastante sensíveis e que
quando rompidas, resultam em lesões
secundárias. As lesões normalmente
têm início no plano nasal podendo
se estender ao redor dos olhos e
até o conduto auditivo dos animais
acometidos, com a progressão da doença,
as áreas afetadas podem atingir todo o
corpo do animal podendo chegar até a
virilha e acometendo os coxins causando
uma hiperqueratose. Estes animais
apresentam alopecia, despigmentação
da área acometida, desenvolvimento de
pústulas, assim como o aparecimento de
escamas, crostas e colaretes epidérmicos,
com a exacerbação da produção dos
autoanticorpos e o agravamento da
doença, podem ser observados eritema
e exsudação e em alguns casos erosões
e ulcerações cutâneas. Quando o animal
chega neste estágio, ele também pode
apresentar outras alterações como febre,
anorexia, edema de membro e em alguns
casos linfadenomegalia.
Figura 2: Cão de 05 anos de idade apresentando
lesões com pústulas intactas na face, mais ele
também apresenta leões na parede abdominal, no
tronco e nos membros.
Fonte: Imagem retirada do “Anatomia Patológica
Veterinária – FMV - ULisboa” disponível em:
http://www.fmv.ulisboa.pt/atlas/pele/pages_us/
pele035_ing.htm
Diagnóstico
O diagnóstico do Pênfigo Foliáceo é
baseado no histórico clínico do animal,
no exame físico, na realização de exames
hematológicos e bioquímicos para
monitoramento. Mais são exames como
os esfregaços diretos das lesões, citologia
das pústulas e o histopatológico que
realmente irão identificar as alterações
na epiderme causadas pelo pênfigo.
O diagnóstico diferencial de pênfigo
inclui várias outras doenças que
acometem a pele dos animas, dentre
elas podemos citar o Lúpus, Foliculite
Bacteriana, Dermatofitose, Demodicose
e Leishmaniose. Para uma clara
elucidação e exclusão de outras possíveis
dermatopatias, sugere-se a realização
do exame histopatológico. Nos exames
hematológicos podemos não encontrar
alterações significativas causadas
pelo Pênfigo Foliáceo, mas podemos
identificar uma leve a moderada
leucocitose com neutrofilia e uma
leve a moderada anemia normocítica
 DERMATOLOGIA

um processo de ativação de linfócitos

associado a uma produção de anticorpos
contra determinados componentes
específicos da pele do animal, havendo
influência direta na adesão dos
queratinócitos. Com este acumulo no
espaço intracelular, começa a ocorrer
uma separação das células com as células
adjacentes nas camadas mais superficiais,
provocando acantólise das mesmas. De
acordo com a progressão da doença e da
produção dos anticorpos autoimunes,
as lesões dérmicas começam a aparecer.
Normalmente as lesões começam a se
desenvolver no plano nasal, podendo
se estender para a rosto, fazendo com
que o animal seja levado ao consultório
veterinário para a obtenção de um
diagnóstico e um tratamento para a
remissão dos sinais clínicos.

normocrômica não regenerativa. ser coletadas em áreas onde a doença

EXAMES REALIZADOS PELO
No esfregaço direto das lesões e na ainda está ativa e sem contaminação
TECSA LABORATÓRIOS
citologia, quando bem realizados, secundária. Deve-se realizar uma
podemos identificar eosinófilos, biópsia incisional e acondicionar a CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
neutrófilos íntegros, a presença de mesma em formalina 10% e após 24
39 - HEMOGRAMA COMPLETO – CANINO 1
células acantolíticas e ausência de horas, encaminhar ao laboratório para
bactérias, o que reforça o diagnóstico, analise histopatológica.
44 - HEMOGRAMA COMPLETO – FELINO 1
porém, é preciso avaliar a presença de
células acantolíticas com cautela para Prognóstico 324 - PERFIL BIOQUIMICO 1
não confundir o diagnóstico com outras O prognóstico do Pênfigo
dermatites pustulares. Foliáceo normalmente é classificado 87 - CITOLOGIA - PET 3
como moderado à bom. Mais para
que isto aconteça, é necessário o 86 – HISTOPATOLOGIA COLORAÇÃO 4
acompanhamento de perto desse DE ROTINA (HE)
paciente, juntamente com o proprietário 650 – HISTOPATOLOGIA COM 7
COLORAÇÃO ESPECIAL
do animal, o Médico Veterinário deve
explicar que Pênfigo Foliáceo é uma 658 – PERFIL FACILITADOR 4
(CITO E HISTOPATOLOGICO)
doença autoimune, que acomete a pele
do animal e possui um prolongado 664 – GRAM CITOLÓGICO 1
tratamento terapêutico, visto que não
há cura, mais sim um controle com
Referências Bibliográficas
Figura 3: Exame citológico de uma pústula imunomoduladores. Em alguns casos
intacta de um cão com pênfigo foliáceo, podemos “Veterinary Articles / Pemphigus Foliaceus” disponível em: http://www.
durante o tratamento, pode haver
identificar a presença de queratinócitos acantolíticos vmcli.com/veterinary-articles-pemphigus-foliaceus.html;

(setas) e muitos neutrófilos não degenerados. recidivas e até infecções bacterianas

Fonte: Imagem retirada do “Canine and secundárias. Nestes casos a medicação
“Anatomia Patológica Veterinária – FMV - ULisboa” disponível em: http://

feline pemphigus foliaceus: Improving your www.fmv.ulisboa.pt/atlas/pele/pages_us/pele035_ing.htm;

chances of a successful outcome” disponível precisa ser analisada novamente

em: http://veterinarymedicine.dvm360.com/ e a infecção secundária tratada “Canine and feline pemphigus foliaceus: Improving your chances of a

c a n i n e - a n d - f e l i n e - pe m ph i g u s - f o l i a c e u s - successful outcome” disponível em: http://veterinarymedicine.dvm360.

improving-your-chances-successful- apropriadamente. com/canine-and-feline-pemphigus-foliaceus-improving-your-chances-

outcome?id=&sk=&date=&pageID=4 successful-outcome?id=&sk=&date=&pageID=4;

Conclusão Doenças autoimunes e imunomediadas. In: Dermatologia de pequenos

O histopatológico é o exame de eleição O Pênfigo Foliáceo é uma doença animais, atlas colorido e guia terapêutico. 2 ed. Editora: Roca, 2009, 528p.

para o diagnóstico de Pênfigo Foliáceo, que acomete a pele dos animais e possui Manual Colorido de Dermatologia do Cão e do Gato: Diagnóstico e
sendo que, as amostras de biópsia a um caráter autoimune, dessa forma, Tratamento. São Paulo: Revinter, 2004, 240p.
serem enviadas ao laboratório devem o organismo do animal dá início a

39
 PATOLOGIA CLÍNICA
INTERNALIZAÇÃO DA ROTINA LABORATORIAL
OS RISCOS DE UM DIAGNÓSTICO NÃO ESPECIALIZADO
Nos últimos anos, a facilidade
de aquisição de equipamentos de
laboratório, aliada a promessa de
diagnósticos rápidos e precisos, tem
encantado os clínicos e gerado um
movimento em prol da abertura de
laboratórios internos. Embora tal
estratégia agregue de fato agilidade
ao diagnóstico, a banalização dos
exames laboratoriais tem trazido
consequências graves à saúde animal.
A ideia de equipamentos criados para
o clínico é tentadora, no entanto, não
é verdadeira. Máquinas de diagnóstico
liberam números e não resultados.
E mesmo a confiabilidade de tais
números está diretamente relacionada
à precisão, exatidão, repetibilidade,
reprodutibilidade, ensaios de
proficiência, POPs, certificações,
acreditações, RDC 302... Termos
ainda desconhecidos pelos clínicos
veterinários. A transformação desses
números em uma informação precisa
e condizente com o estado de saúde
40
do animal depende de conhecimento,
análise crítica e de rigorosos processos
de controle de qualidade. Mais do que
saber manusear uma pipeta, é preciso
ter o discernimento para transformar
absorbâncias em resultados e corrigir
enganos comumente cometidos por
equipamentos criados para se adequar a
padrões de uniformidade.
Confiar cegamente em equipamentos
é uma irresponsabilidade que pode
resultar na morte de um paciente quando
lidamos com uma ciência cuja principal
característica é fugir dos padrões.
Antes de assumir um laboratório
interno, é preciso conhecimento para
identificar estruturas e experiência
para perceber alterações sutis que
podem fechar um diagnóstico ou
sugerir quadros específicos. As mesmas
alterações na morfologia de hemácias
que podem sugerir uma patologia, em
alguns casos estarão apenas indicando
problemas no pré analíticos ou
artefatos de técnica como excesso de
anticoagulante ou secagem inapropriada
das lâminas. Um CHCM alterado pode
não ser causado por hemólise, como
aprendemos na faculdade, e sim por
valores altos de Corpúsculos de Heinz
em um cão intoxicado ou em um gato
sadio, por exemplo. Uma contagem total
de leucócitos dentro da normalidade,
pode esconder um desvio a esquerda ou
até mesmo não chamar a atenção para
um animal extremamente doente cujas
células inflamatórias não respondem
mais a estímulos. Da mesma forma,
animais anêmicos podem apresentar
valores normais de hemácias em casos
de desidratação ou em situações de
estresse e um bom profissional com
conhecimento em análises clínicas pode
reconhecer essa situação, indicando não
apenas um hematócrito aumentado, mas
a presença de estruturas como específicas
hemácias crenadas e rouleaux.
Cabe a esse mesmo profissional,
esclarecer se alterações celulares
observadas na microscopia são apenas

artefatos de técnica, patológicas ou
fisiológicas para a espécie em questão.
No caso de alterações patológicas,
apenas o reconhecimento das estruturas
não é o suficiente para fechar um
diagnóstico, visto que a maioria dos
clínicos desconhece os significados
das alterações morfológicas mais
comuns. O responsável pela liberação
do hemograma também deve ser capaz
de sugerir exames complementares
específicos que indiquem a origem
dessas alterações. Análises bioquímicas,
embora tenham interpretação
aparentemente mais simples também
são responsáveis por falsos diagnósticos.
Apenas o conhecimento em patologia
clínica, permite ao profissional avaliar
o real significado de resultados zerados
em provas enzimáticas que podem
ser devidos tanto ao excesso quanto a
ausência de atividade. Além de ser capaz
de prever e mensurar o efeito de uma
fase pré analítica inadequada (coleta,
armazenamento e envio da amostra)
PATOLOGIA CLÍNICA
técnico que dita como deve ser o
funcionamento de laboratórios clínicos.
De acordo com o art. 4˚ do regulamento,
o descumprimento das determinações
previstas constitui infração de natureza
sanitária. O infrator está sujeito a
processo e penalidades previstas na lei.
Embora seu cumprimento ainda não seja
obrigatório para o segmento veterinário,
o não cumprimento dessas exigências
expõe os resultados a erros analíticos
graves, que podem ter consequências
legais.
É preciso lembrar que exames
laboratoriais são considerados
evidências e provas que podem ser
questionadas durante um processo
judicial e o veterinário responsável
pela liberação de um exame, responde
legalmente por esses resultados. A
Patologia Clínica é uma área de extrema
complexidade, que dita o prognóstico,
sugere um diagnóstico e direciona o
tratamento de um animal. Por isso, não
importa o quanto evoluído sejam os
equipamentos ou o quanto competente
sejam os clínicos; a Patologia Clínica
Veterinária sempre será uma questão de
especialidade.
para atuar no segmento de análises
clínicas o veterinário obrigatoriamente EXAMES REALIZADOS PELO
deve se certificar da composição correta TECSA LABORATÓRIOS
de reagentes, já que nem todas as
CÓD - EXAME PRAZO/DIAS
marcas e analitos se adequam a dosagens
animais; garantir a calibração correta 334 - PERFIL
HIPERADRENOCORTICISMO 3
dos equipamentos, sem engana-los com
fatores de correção inseridos de forma
aleatória; conhecer e aplicar as regras 336 - PERFIL HIPOTIREOIDISMO 3
de westgard e auxiliar o solicitante do
621 - CORTISOL POS SUPRESSÃO
exame na fase pós analítica, discutindo e DEXAMETASONA - 3 DOSAGENS 1
interpretando os resultados encontrados. (RADIOIMUNOENSAIO)
Problemas nas instalações, 86 - HISTOPATOLOGICO COM 4
aterramentos insuficientes, ruídos COLORAÇÃO DE ROTINA - HE
da corrente elétrica, temperatura
650 - HISTOPATOLOGIA COM 7
inadequada, contaminação de reagentes COLORAÇÃO ESPECIAL
ou um simples homogeneizador
colocado fora do lugar, podem ser 656 - IMUNOHISTOQUIMICA - VALOR 14
responsáveis por um diagnóstico PROGNÓSTICO DE MASTOCITOMA
equivocado, tornando normal uma 788 - CHECK UP GLOBAL DE FUNÇÕES 1
amostra alterada ou alterando a amostra COM HEMOGRAMA
de um animal saudável. Para evitar a
ocorrência desses erros e padronizar 856 - PERFIL CHECK UP CARDIO-RENAL 2
as instalações laboratoriais, a Anvisa
criou a RDC 302, um regulamento
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 Em primeira mão, nossa próxima edição:

ISSN 2358-1018
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TECSA TECSA MAGAZINE
MAGA ZINE Número
Número11,
14, 2016
2016
Número 15, 2017

HEMATOLOGIA
ONCOLOGIA VETERINÁRIA
VETERINÁRIA
DISTURBIOS
UMA CIÊNCIADAQUECOAGULAÇÃO, PROVAS
EVOLUI A CADA DIA CRUZADAS, TRANSFUSÕES E ANEMIAS

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