Produção de Esteroides

Prof. Thiago Claudino

thiago.claudino@ipa.metodista.br

Biotecnologia Farmacêutica
Curso de Farmácia
Centro Universitário Metodista – IPA
Introdução

• Esteroides
• Compostos orgânicos que possuem em sua estrutura um
núcleo esteroide (ciclo pentanoperidrofenantreno)

Distribuição:
 Microrganismos: ergosterol
 Animais: colesterol, corticosteroides
 Vegetais 2
Introdução

• Biotransformação
• Processo biológico pelo qual um composto orgânico é
modificado para um produto recuperável, mediante reações
simples, quimicamente definidas, catalisadas por enzimas
celulares

Exemplo de biocatálise utilizando microorganismo isolado de solo,

para a transformação do -sitosterol em adrostadiendiona
Introdução

 Células microbianas  Suspensas: meio com recipientes

 Células animais aerados e agitados
 Células vegetais  Empacotadas em colunas: processo
contínuo
 Imobilizadas em suporte sólido:
 Células em crescimento aumento da estabilidade e
 Células em repouso prolongamento da operação
 Esporos
 Células dessecadas
 Enzimas isoladas
 Enzimas do tipo indutiva 4
 Ação detoxificante,
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Introdução

• Vantagens e Desvantagens
• Vantagens
 Especificidade, estereosseletividade e conversão

 Condições reacionais (20-40 ºC, pressão atmosférica)

 Meio aquoso

• Desvantagens
 Diluições

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Introdução

• Aplicações
• Preparação de intermediários
• Ácido 6-aminopenicilânico

• Produção de produtos finais

• Hormônios esteroidais

• Resolução de misturas racêmicas

• Sistemas analíticos

• Estudo de metabolismo
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Biotransformação de Esteroides

• Seleção e Manutenção de Microrganismos

• Fungos filamentosos, actinomicetos, bactérias

• Isolamento ou coleções

• Seleção baseada na reação desejada com o substrato

• Falta de métodos seletivos ou reativos específicos

• Enriquecimento para isolamento de mutantes

• Manutenção de acordo com métodos normais ou

congelados (–20 a – 70 ºC)
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Biotransformação de Esteroides

• Matérias-Primas
• Substrato
• Microbiano

• Animal

• Vegetal
• Baixo custo e maior concentração de esteroides

• Meio de Cultura
• Fonte de C: melaço, solução de glicose e de outros açúcares

• Fonte de N: extrato de levedura, água de milho ou minerais 10

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Biotransformação de Esteroides

• Processo de Biotransformação
• Processo de fermentação direta
• Introdução do inóculo e crescimento microbiano
• Entre 17 e 48 horas

• Temperatura ótima para o crescimento celular entre 27 e 37 °C

• Meio de cultura com níveis nutricionais mínimos para facilitar a

extração e purificação do produto fermentado

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Biotransformação de Esteroides

• Processo de Biotransformação
• Processo de fermentação direta
• Adição do substrato ao meio de cultura
• Após concentração de células desejada

• Substrato dissolvido em solvente miscível em água (propilenoglicol,

etanol, metanol, acetona, dimetil-sulfóxido, dimetilformamida)

• Alimentação de substrato contínua ou semicontínua, sendo esta

última interessante por minimizar os efeitos tóxicos dos solventes
sobre os microrganismos, seguida de forte agitação para favorecer
as transformações e a formação de cristais
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Biotransformação de Esteroides

• Processo de Biotransformação
• Processo de fermentação direta
• Processo de transformação
• Entre 24 e 48 horas, em torno de 30 °C e sob baixa aeração

• Purificação
• Meio de cultura filtrado para recuperação do produto e solvente
imiscível em água (cloreto de etila, clorofórmio, acetato de etila)
utilizado para extrair o produto

• Evaporação do solvente, sendo o produto separado como pó ou

óleo e submetido a etapas de cristalização 18
Biotransformação de Esteroides

• Processo de Biotransformação
• Processo de fermentação dupla
• Introdução do inóculo e crescimento microbiano
• Semelhante à fermentação direta, com meio nutritivo mais rico para
favorecer o crescimento.

• Após concentração de células desejada, microrganismo é separado

do meio de cultura através de filtração ou centrifugação

• Microrganismo lavado para retirada de nutrientes e mantido em

suspensão em meio volume de água destilada, solução fisiológica
ou em um tampão
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Biotransformação de Esteroides

• Processo de Biotransformação
• Processo de fermentação dupla
• Adição do substrato ao meio de cultura
• Substrato dissolvido em solvente é adicionado ao meio contendo os
microrganismos

• Processo de transformação
• Em algumas horas, sob aeração e agitação, em temperatura em
torno de 30 °C

• Tempo de duração menor e controle favorecido

• Custo com aparelhagem menor 20

Biotransformação de Esteroides

• Processo de Biotransformação
• Processo de fermentação dupla
• Purificação
• Ao finalizarem as transformações, produto extraído de maneira
semelhante à fermentação direta

• Maior facilidade na extração das células permitem que estas sejam

reutilizadas

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Referências

• ANDREI, C. C. et al. Da química medicinal à química

combinatória e modelagem molecular: um curso prático. 2.
ed. Barueri: Manole, 2012.

• LIMA, U. A. et al. Biotecnologia industrial: processos

fermentativos e enzimáticos. São Paulo: Blucher, 2001.

• VITOLO, M. Biotecnologia farmacêutica: aspectos sobre

aplicação industrial. São Paulo: Blucher, 2015.

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