ÁCIDO ÚRICO

Kit para determinação do ácido úrico por metodologia enzimática-colorimétrica.

Cat. 430 MS 80022230171

MÉTODO · De acordo com as instruções de biossegurança, todas as amostras

Enzimático-Colorimétrico. devem ser manuseadas como materiais potencialmente infectantes.
· Os reagentes contêm azida sódica como conservante. Evitar contato
FINALIDADE
com os olhos, pele e mucosa. Não aspirar ou ingerir.
Reagentes para determinação quantitativa do ácido úrico no soro, urina e
· Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resoluções
líquidos sinovial e amniótico.
normativas locais, estaduais e federais de preservação do meio ambiente.
Somente para uso diagnóstico in vitro.
FUNDAMENTO AMOSTRA BIOLÓGICA
O ácido úrico é oxidado pela uricase (UOD) em alantoína, CO2 e H2O2. SORO, URINA e LÍQUIDOS SINOVIAL e AMNIÓTICO.
Através de uma reação de copulação oxidativa, catalisada pela peroxidase A utilização de plasma fornece resultados falsamente diminuídos
(POD), o peróxido de hidrogênio formado reage com o No soro, o analito é estável por 5 dias entre 2-8 ºC.
diclorohidroxibenzeno sulfonato (DHBS) e 4-aminoantipirina (4-AMP), Na urina, o analito é estável por 4 dias.
produzindo uma antipirilquinonimina de cor vermelha. A absorbância do Nota
complexo formado, medida em 520 nm, é diretamente proporcional à Recomendamos que a coleta, preparação, armazenamento e descarte das
concentração de ácido úrico da amostra. amostras biológicas sejam realizadas seguindo as recomendações das
UOD Boas Práticas de Laboratórios Clínicos.
Ácido Úrico + O2 + 2H2O Alantoína + CO2 + H2O2
Enfatizamos que os erros provenientes da amostra podem ser muito
POD maiores do que os erros ocorridos durante o procedimento analítico.
2H2O2 + DHBS + 4-AMP 4H2O + Antipirilquinoneimina

INFLUÊNCIAS PRÉ-ANALÍTICAS
SIGNIFICADO CLÍNICO
A bilirrubina até 19 mg/dL, lipemia (triglicérides até 1800 mg/dL) e hemólise
O ácido úrico é um metabólito das purinas, ácidos nucleicos e
(hemoglobina até 90 mg/dL) não produzem interferências significativas.
nucleoproteínas. Numerosas doenças, condições fisiológicas, alterações
Amostras com valores hemoglobina entre 90 e 180 mg/dL produzem
bioquímicas, fatores sociais e ambientais estão associados a elevações na
resultados falsamente elevados que podem ser minimizados com a
concentração do urato plasmático.
utilização do Branco de Amostra.
Enquanto drogas como salicilatos, fenilbutazona aumentam a excreção de
Para minimizar a ação de interferências fotométricas na dosagem, utilizar o
ácido úrico, outras como o alopurinol interfere na síntese, diminuindo assim
Branco de Amostra.
sua concentração no sangue.
Branco de Amostra
Valores aumentados
Misturar 20 µL do soro com 1,0 mL de solução de NaCl 150 mmol/L (0,85%).
A hiperuricemia ocorre na maioria dos pacientes com gota, na insuficiência
Medir a absorbância da mistura em 520 nm, acertando o zero de
renal, leucemia, policitemia, mieloma multiplo, intoxicação por chumbo,
absorbância com água deionizada.
cetoacidose, nos tratamentos com citostáticos ou tiazídicos, na síndrome
Subtrair a absorbância obtida do Branco de Amostra da absorbância do
de Lesch-Nyhan, nas hiperuricemias idiopáticas.
Teste e calcular o resultado final.
O aumento de urato está positivamente relacionado a hiperlipidemia,
obesidade, aterosclerose, diabetes mellitus e hipertensão, embora os PROCEDIMENTO DO TESTE
mecanismos destas alterações ainda não sejam bem compreendidos. A-Condições de Reação
Valores diminuídos Leitura: Comprimento de onda 520 nm (490 a 540 nm)
As causas da hipouricemia são pouco frequentes, ocorrendo na síndrome Medida: Contra o tubo Branco
de Fanconi, doença de Wilson e doenças malígnas como linfoma de Tipo de reação: Ponto final
Hodgkin e carcinoma broncogênico.
Preparo do Reagente de Trabalho
QUALIFICAÇÕES DO PRODUTO De acordo com o consumo, misturar suavemente os reagentes 2 e 3 na
· Metodologia enzimática colorimétrica de ponto final, rápida e direta para seguinte proporção:
dosagem do ácido úrico, facilmente adaptável para a maioria dos 4 volumes de Tampão (2) mais 1 volume de Uricase (3 ).
analisadores automáticos e semi-automáticos. Estável por 90 dias em frasco âmbar entre 2-8 ºC, quando não houver
· A metodologia permite obter resultados exatos e precisos se for contaminação química e/ou bacteriana.
executada conforme descrita nesta Instrução de Uso. Evitar exposição à solar direta. Na temperatura ambiente (15 a 25 ºC) a
estabilidade é de 5 dias.
IDENTIFICAÇÃO DOS REAGENTES Atenção
Conservar entre 2-8 ºC. Não utilizar o Reagente de Trabalho quando sua absorbância medida
contra a água em 520 nm for igual ou superior a 0,300 ou quando estiver
1. Padrão - Contém 6,0 mg/dL de ácido úrico. Armazenar bem vedado turvo ou com sinais de contaminação.
para evitar evaporação.
2. Tampão Contém 4-aminoantipirina 0,82 mmol/L, peroxidase 16000 U/L, B- Técnica de Análise
octilfenol polioxietanol 1 g/L e azida sódica 0,8 mmol/L em tampão 80 1- Deixar os reagentes e as amostras atingirem a temperatura ambiente ou
mmol/L pH 7,0. a do banho-maria (37 ºC) antes de realizar o teste.
3. Uricase - Contém 3,5-dicloro-2-hidroxibenzenosulfonato (DHBS) 10
mmol/L, uricase 500 U/L, octilfenol polioxietanol 1 g/L e azida sódica 0,8 Tubos Branco Teste Padrão
mmol/L em tampão 80 mmol/L pH 7,0. Padrão (1) ------- ------- 20 µL
Amostra ------- 20 µL -------
ESTABILIDADE Reagente de Trabalho 1000 µL 1000 µL 1000 µL
Os reagentes são estáveis até o vencimento da data de validade impressa 2- Misturar bem e incubar os tubos por 10 minutos em banho-maria a 37 ºC.
no rótulo do produto e na caixa quando conservados na temperatura 3- Ler as absorbâncias do Teste e do Padrão em 520 nm ou filtro verde (490
recomendada bem vedados e se evite a contaminação durante o uso. a 540 nm), acertando o Zero com o Branco.
A cor é estável por 15 minutos.
Sinais de Deterioração dos Reagentes
1- Presença de partículas e turbidez indicam deterioração dos reagentes. C- Cálculos
2- A absorbância do Reagente de Trabalho lida contra a água em 520 nm Ver Linearidade.
deverá ser inferior a 0,300 durante toda a sua utilização ou até a expiração da Como a metodologia obedece a lei de Lambert-Beer, os cálculos podem
data de validade do mesmo. ser feitos através do Fator de Calibração (Fc).
MATERIAIS NECESSÁRIOS E NÃO FORNECIDOS Concentração do Padrão = Cp
· Espectrofotômetro (leitura entre 490 e 540 nm); Concentração do Teste = Ct
· Banho-maria ou termostatizador mantido a 37 ºC; Absorbância Padrão = Ap
· Tubos e pipetas; Absorbância do Teste = At
· Cronômetro.
Exemplo
Cp = 6,0 mg/dL
PRECAUÇÕES E CUIDADOS ESPECIAIS
Se Ap = 0,142
· Aplicar os cuidados habituais de segurança na manipulação dos
Se At = 0,152
reagentes e amostra biológica.
FC = Cp ÷ Ap = 6,0 ÷ 0,142 = 42,2
· Recomendamos o uso das Boas Práticas de Laboratórios Clínicos para a
CT = FC x At = 42,2 x 0,152 = 6,4 mg/dL
execução do teste.
Dosagem na Urina
A- Coleta e preparo da Amostra
Instruir o paciente para coletar corretamente a urina no período de tempo
estipulado pelo médico (12 - 24 horas ou outro).
Homogeneizar bem a amostra de urina, medir o seu volume em mL.
Separar uma alíquota de 10 mL e acertar o pH entre 7 e 9 com solução de
NaOH 5%.
Aquecer por 10 minutos a 56 °C para dissolver os cristais de urato e de
ácido úrico presentes.
Diluir a urina a 1/10 com água deionizada ou destilada.
Exemplo: 0,1 mL de urina + 0,9 mL de água deionizada.
B- Dosagem e cálculos
Seguir as mesmas instruções contidas em Técnica de Análise para a
dosagem no soro.
No final, multiplicar o resultado obtido por 10.
CT em mg/dL = valor obtido na dosagem x 10.
CT em mg/24 horas é encontrado multiplicando o valor obtido em mg/dL
pelo volume de urinário (mL) de 24 horas e dividindo o resultado por 100.
Exemplo
Se ácido úrico na urina = 36 mg/dL
Se volume urinário de 24 h = 1600 mL
CT em mg/24 h = (36 x 1600) ÷ 100 = 576 mg/24 horas
Atenção
· Esta técnica de dosagem é adequada para fotômetros cujo volume mínimo
de solução para a leitura é igual ou menor do que 1000 µL.
· O analista sempre deve fazer uma verificação da necessidade de ajuste
do volume para o fotômetro empregado no seu laboratório.
· Os volumes de amostra e de reagente podem ser modificados
proporcionalmente, sem alterar o desempenho do teste e os cálculos. Em
caso de redução dos volumes é necessário observar o volume mínimo de
leitura fotométrica.
· Volumes da amostra menores do que 10 µL são críticos em aplicações
manuais e devem ser usados com cautela porque aumentam a imprecisão
da medição.
Fator de Conversão de Unidades (mg/dL para SI)
µmol/L de Ácido Úrico = mg/dL de Ácido Úrico x 59,5
VALORES DE REFERÊNCIA
· Para amostras de Soro
Adultos Crianças
Homens 2,5 a 7,0 mg/dL 1,5 a 6,0 mg/dL
Mulheres 1,5 a 6,0 mg/dL 0,5 a 5,0 mg/dL
· Para amostras de Urina
250 a 750 mg/24 horas
Estes valores devem ser usados como uma orientação. É recomendado
que cada laboratório estabeleça seus próprios valores de referência.
Sensibilidade Analítica
O limite de detecção é igual a 0,071 mg/dL, equivalente a média mais dois
desvios padrão (DP) obtidos a partir de 20 determinações em uma amostra
protéica não contendo ácido úrico.
Comparação de Métodos
O produto foi comparado com outro disponível no mercado através da
análise de 40 amostras de soro humano com valores de ácido úrico
desconhecidos. Os resultados analisados por modelos estatísticos
demonstraram que não há diferença significativa em um intervalo de
confiança de 95% com um coeficiente de correlação linear r = 0,996 e uma
equação de regressão y = 1,030x 0,137.
OBSERVAÇÕES
1- A observação minuciosa da limpeza e secagem da vidraria, da
estabilidade dos reagentes, da pipetagem, da temperatura e do tempo de
reação é de extrema importância para se obter resultados precisos e
exatos.
2- Na limpeza da vidraria pode-se empregar um detergente neutro ou uma
solução ácida. A última lavagem deve ser feita com água destilada ou
deionizada.
3- A água utilizada nos laboratórios clínicos deve ser purificada utilizando-
se métodos adequados para as finalidades de uso. Colunas deionizadoras
saturadas liberam diversos íons, aminas e agentes oxidantes que
deterioram os reativos.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Barham D, Trinder P. Analist 1972;97:142-145.
2. Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Química Clínica, 4ª Ed -
Guanabara Koogan SA; 1998.
3. Duncan PH, Gochman N, Cooper T, Smith E, Sayze D Clin Chem
1982;28:284-290.
4. Elin RJ, Johnson E, Chesler R. Clin Chem 1982;28:2089.
5. Fossati P, Prencipe L, Berti G Clin Chem 1980, 26:227-31.
6. Inmetro - Boas Práticas de Laboratório Clínico e Listas de Verificação
para Avaliação, Qualitymark ed., Rio de Janeiro, 1997.
7. Kaplan A, Szabo LL, Opheim KE. Clinical Chemistry: Interpretation and
Techniques. Philadelphia, Lea & Febiger, 1988:140-143.
8. Trinder P. Ann Clin Biochem, 1969;6:24.
9. Westgard JO, Barry PL, Hunt MR. Clin Chem 1981; 27:493-501.
10. Ferraz MHC, Delgado RB - Valores de Referência para Exames
Laboratoriais: Leão E, Corrêa EJ, Viana MB, Mota JAC - Pediatria
Ambulatorial 3ª Ed. Belo Horizonte, COOPMED, Belo Horizonte, 1988:837-
848.
11. GOLD ANALISA: Informe Técnico do Produto.
APRESENTAÇÃO
Cat. Embalagem Nº de Testes Reagentes Volume
Padrão 1 x 5 mL

AUTOMAÇÃO 430M Mini 100 Tampão 1 x 80 mL

Este kit pode ser utilizado na maioria dos analisadores automáticos.
Uricase 1 x 20 mL
O consumidor poderá solicitar mais informações através do Setor de Apoio
ao Cliente (SAC) ou acessando o site www.goldanalisa.com.br Padrão 1 x 5 mL
A calibração com o Padrão aquoso pode causar desvios em alguns
analisadores. Nestes casos, recomenda-se calibrar com calibrador 430 Normal 200 Tampão 2 x 80 mL
protéico - Calibrador - Cat. 410 - Gold Analisa.
Uricase 2 x 20 mL
CONTROLE DA QUALIDADE
TERMOS E CONDIÇÕES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO
O laboratório clínico deve manter um Programa de Garantia da Qualidade
Lei nº 8.078 de 11-9-90 - Código de Defesa do Consumidor
para assegurar que todos os procedimentos laboratoriais sejam realizados
A Gold Analisa garante a substituição, sem ônus para o consumidor, de
de acordo com as Boas Práticas de Laboratórios Clínicos.
todos os produtos que comprovadamente apresentarem problemas
Para controle e verificação do desempenho do kit usar Soro Controle N e
técnicos, desde que o usuário utilize equipamentos e materiais em boas
Soro Controle P da Gold Analisa.
condições técnicas, siga rigorosamente o procedimento técnico e as
É importante que cada laboratório estabeleça os seus próprios valores
recomendações estabelecidas nas Instruções de Uso.
médios e os respectivos limites de variação.
Nº do lote e data de validade: Vide Rótulos do Produto
Gold Analisa Diagnóstica Ltda - CNPJ: 03.142.794/0001-16
CARACTERÍSTICAS DO DESEMPENHO11
AF MS Nº 800222-3 - Reg. MS - Nº 80022230171
Linearidade
Farm. Resp. Homero Jackson de Jesus Lopes - CRF- MG -2010
A reação é linear até 20,0 mg/dL. . Para valores maiores, diluir a amostra
Av. Nossa Senhora de Fátima, 2363 - Carlos Prates - Fone: (31) 3272-1888
com solução de NaCl 150 mmol/L (0,85%) e realizar uma nova
Belo Horizonte MG Brasil CEP: 30710-020
determinação. Multiplicar o valor obtido pelo fator de diluição empregado.
Home page: www.goldanalisa.com.br
E-mail: goldanalisa@goldanalisa.com.br
Repetitividade
Setor de Apoio ao Cliente (SAC): 0800 703 1888
A imprecisão intra-ensaio foi calculada com 20 determinações sucessivas
de ácido úrico utilizando duas amostras de soro com concentrações
Analisa é marca registrada da Gold Analisa Diagnóstica Ltda
diferentes.
As médias dos coeficientes de variação obtidas foram de 1,3 e 0,8%.
Edição: 05/11
Reprodutibilidade
A imprecisão inter-ensaio foi calculada com 20 determinações de ácido
úrico em dias diferentes utilizando duas amostras de soro com
concentrações diferentes.
As médias dos coeficientes de variação obtidas foram de 2,0 e 1,4%.