ÁREA BÁSICA DAS CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE

LABORATÓRIO DE PROCESSOS BIOLÓGICOS

DISCIPLINA DE PROCESSOS BIOLÓGICOS

PRÁTICA 2
DOSAGEM DE GLICOSE
= Roteiro de Aula Prática =
PRÁTICA I – Sistema enzimático para determinação da Glicose (mg/dL) = Absorbância do Teste x Fator
glicose.
VALORES DE REFERÊNCIA: 70 – 100 mg/dL.
1. OBJETIVO:
CONSIDERAÇÕES CLÍNICAS:
Identificar a concentração de glicose presente no
soro/plasma humano. Valores elevados de glicose ocorrem no
Diabetes melito. Valores diminuídos de glicose
ocorrem nas hipoglicemias, que podem ser
2. INTRODUÇÃO: derivados de várias causas, como por exemplo:
tumores extrapancreáticos, doença hepática
2.1 REAÇÕES ENZIMÁTICAS grave e hipoglicemia alimentar.
Glicose + O2 + H2O Oxidase ácido glicônico + H2O2

2 H2O2 + 4-aminoantipirina + fenol Oxidase Antipirilquinonimina + 4H2O 5. REGISTRO DOS RESULTADOS:

A intensidade da cor da Antipirilquinonimina é

proporcional à concentração de glicose na amostra. Padrão _________

3. MATERIAIS NECESSÃRIOS: Teste __________

 Enzimas e Tampão – Reagente de cor.
 Padrão de glicose – 100mg/dL
 Soro – Teste (amostra de material biológico Anotações
infectante)

4. PROCEDIMENTOS:
Tomar 3 tubos de ensaio, indentificá-los e proceder
como a seguir:
BRANCO TESTE PADRÃO

Amostra - 0,02mL -

Padrão - - 0,02mL

Reagente de 2mL 2mL 2mL

cor

Homogeneizar e colocar em banho-maria à 37 oC

durante 15’. O nível da água no banho-maria deve ser
superior ao nível dos reagentes nos tubos de ensaio.
Determinar as absorbâncias do teste e do padrão em
505 nm ou filtro verde (490-540 nm) acertando o zero
com o branco. A cor é estável por 60’.

*CÁLCULOS:

Glicose (mg/dL) = Absorbância do Teste x 100

Absorbância do Padrão

Devido à grande reprodutibilidade que pode ser obtida

com a metodologia, o método do fator pode ser
empregado.

Fator de Calibração = 100 .

Absorbância do Padrão