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COLESTEROL HDL
INDICAO MDICA DO EXAME
A determinao do colesterol ligado s lipoprotenas til na investigao das dislipidemias e faz parte
da avaliao do risco de doena coronariana isqumica.
PRINCPIO
As lipoprotenas de muita baixa densidade (VLDL) e as lipoprotenas de baixa densidade (LDL) so
quantitativamente precipitadas e, aps centrifugao, o colesterol ligado s lipoprotenas de alta
densidade (Colesterol HDL) determinado no sobrenadante.
AMOSTRA
Preparo do paciente
O paciente deve estar com peso e dieta estveis por trs semanas e em jejum de 12 a 14 horas (O
jejum no imprescindvel para a dosagem de colesterol total, mas o para a determinao dos
triglicrides e fraes do colesterol). A abstinncia alcolica desejvel nas 72 horas que antecedem o
teste. Evitar garroteamento por perodo superior a 2 minutos e colher aps repouso de 5 minutos.
Tipos de amostra
Usar soro.
Armazenamento e estabilidade da amostra
O analito estvel por 3 dias entre 2 8 C.
Volume mnimo
(Definir o volume mnimo a ser encaminhado para anlise)
Volume ideal
(Definir o volume ideal a ser encaminhado para anlise)
Critrios para rejeio da amostra
Presena de hemlise intensa.
Fazer referncia ao manual ou POP de colheita, separao e distribuio de material.
PRODUTO UTILIZADO
Colesterol HDL, Ref. 13-50
Labtest Diagnstica
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600
Lagoa Santa, MG, 33400-000

ANVISA - 10009010026

Precipitante: Armazenar entre 2 8 C.

Contm cido fosfotngstico 1,5 mmol/L e cloreto de magnsio 54 mmol/L.
Padro - 20 mg/dL: Armazenar entre 2 8 C. Armazenar bem vedado para evitar evaporao.
Precaues e cuidados especiais
1. Os cuidados habituais de segurana devem ser aplicados na manipulao do reagente. Fazer
referncia ao manual ou POP de segurana.
2. Os reagentes no abertos, quando armazenados nas condies indicadas so estveis at a
data de expirao impressa no rtulo. Durante o manuseio, os reagentes esto sujeitos
contaminao de natureza qumica e microbiana que podem provocar reduo da
estabilidade. O laboratrio deve estabelecer a estabilidade em suas condies operacionais.
EQUIPAMENTOS
Procedimento manual
1. Fotmetro capaz de medir com exatido a absorbncia em 500 nm ou filtro verde (490 a 540 nm).
2. Banho-maria mantido temperatura constante (37 C).
3. Pipetas para medir amostras e reagentes.
4. Cronmetro.
Procedimento automatizado
Indicar o nome, modelo e o local onde se encontra o equipamento analtico; fazer referncia ao manual
ou POP para utilizao do mesmo.
Procedimento alternativo
Indicar o equipamento alternativo e os procedimentos para medio dos ensaios. Enumerar as
diferenas esperadas quando procedimentos manuais substituem procedimentos automatizados.
CONTROLE DA QUALIDADE
Materiais
Identificar os materiais para controle interno e externo da qualidade (fabricante, nmero de catlogo),
instrues de preparo e frequncia da utilizao dos mesmos.

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Limites de tolerncia
Descrever o procedimento para definio dos limites de tolerncia, o sistema adotado para utilizao do
mapa de Levey-Jennings e das regras de controle e as providncias a serem tomadas diante de
valores que ultrapassem tais limites. Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao dos
materiais de controle.
Verificao de novo lote de controles e/ou reagentes
Descrever o procedimento de verificao de novos lotes de controles e de reagentes.
Gerenciamento dos dados
Definir como os dados relativos ao controle da qualidade so arquivados e gerenciados.
Fazer referncia ao manual ou POP de garantia da qualidade.
PROCEDIMENTO
Procedimento manual - Precipitao das VLDL e LDL
1. Em um tubo 12 x 75 colocar:
Soro
0,25 mL
Precipitante
0,25 mL
2. Agitar vigorosamente durante 30 segundos. A agitao sugerida fundamental para obteno de
resultados consistentes.
3. Centrifugar a 3.500 rpm por pelo menos 15 minutos para obter um sobrenadante lmpido.
4. Pipetar o sobrenadante lmpido imediatamente aps a centrifugao, tomando o cuidado para no
ressuspender o precipitado, a fim de evitar resultados falsamente elevados.
Procedimento manual - Dosagem do colesterol HDL
Utilizar com o Reagente 1 - Colesterol Liquiform Labtest Cat. 76.
1. Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Sobrenadante
Padro (n 2)
Reagente 1

Branco
--------1,0 mL

Teste
0,1 mL
----1,0 mL

Padro
----0,1 mL
1,0 mL

2. Misturar e colocar no banho-maria a 37 C durante 10 minutos. O nvel da gua no banho deve ser
superior ao nvel do reagente nos tubos de ensaio.
3. Determinar as absorbncias do teste e padro em 500 nm ou filtro verde (490 a 540 nm) acertando
o zero com o branco. A cor estvel por 60 minutos.
Procedimento automatizado
Fazer referncia ao manual ou POP para utilizao do equipamento analtico. Anexar o guia de
aplicao dos reagentes para o sistema automtico.
Precaues e cuidados especiais
1. Para manusear e descartar reagentes e material biolgico, aplicar as normas estabelecidas
de segurana. Fazer referncia ao manual ou POP de segurana.
2. A limpeza e secagem adequadas do material so fatores fundamentais para a estabilidade
dos reagentes e obteno de resultados corretos. Fazer referncia ao manual ou POP de
limpeza e verificao da qualidade da limpeza dos materiais.
3. A gua utilizada no laboratrio deve ter a qualidade adequada a cada aplicao. Assim, para
preparar reagentes e usar nas medies, deve ter resistividade 1 megaohm ou
condutividade 1 microsiemens e concentrao de silicatos 0,1 mg/L (gua tipo II). Para o
enxge da vidraria a gua pode ser do tipo III, com resistividade 0,1 megaohms ou
condutividade 10 microsiemens. No enxge final utilizar gua tipo II. Quando a coluna
deionizadora est com sua capacidade saturada ocorre a produo de gua alcalina com
liberao de vrios ons, silicatos e substncias com grande poder de oxidao ou reduo
que deterioram os reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados de
modo imprevisvel. Assim, fundamental estabelecer um programa de controle da qualidade
da gua. Fazer referncia ao manual ou POP de gua reagente.
4. Manter sempre a relao Amostra/Precipitante igual a 1:1.
5. Aps a centrifugao, remover o sobrenadante lmpido dentro de 15 minutos, para evitar
resultados falsamente elevados.
CLCULOS
Devido a diluio 1:2 aplicada s amostras durante o procedimento de precipitao das VLDL e LDL, o
valor do Padro para clculo dos resultados deve ser corrigido para 40 mg/dL.

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Absorbncia do teste
HDL mg/dL =

x 40
Absorbncia do padro
g/dl =
g/dl
Devido a grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a metodologia, o mtodo do fator pode ser
empregado.
40
Fator de calibrao =
Absorbncia do padro
Clculo da concentrao do Colesterol VLDL e LDL
A concentrao do Colesterol VLDL e LDL pode ser calculada utilizando a equao de Friedewald, que
exata para amostras cujas concentraes de triglicrides no ultrapassem 400 mg/dL e no pertenam a
pacientes portadores de lipoproteinemia do Tipo III.
Equao de Friedewald:
Colesterol VLDL = Triglicrides / 5
Colesterol LDL = Colesterol Total - (HDL + VLDL)
RESULTADOS
Unidade de medida
mg/dL
Converso de mg/dL para Unidade SI: mmol/L = mg/dL x 0,026
Valores desejveis ou recomendados
Estes valores devem ser usados apenas como orientao. Eles substituem os valores de referncia e
so determinados a partir de dados epidemiolgicos, calculados estatisticamente, que relacionam os
nveis do Colesterol com a prevalncia de doena coronariana isqumica (DCI).
mg/dL
Colesterol LDL
Colesterol total
Colesterol HDL (m)
Colesterol HDL (f)

Desejvel
130
200
55
65

Risco moderado
130 159
200 239
35 - 55
45 - 65

Alto risco
160
240
35
< 45

LIMITAES DO PROCEDIMENTO
Linearidade
1- A reao linear at 200 mg/dL. Quando for obtido um valor igual ou maior que 200 mg/dL, diluir a
amostra 1:2 com NaCl 150 mmol/L (0,85%), realizar nova medio e multiplicar o resultado obtido pela
diluio. Indicar o procedimento de diluio utilizado no laboratrio.
Interferncias
1- Amostras lipmicas e ocasionalmente amostras no lipmicas podem apresentar o sobrenadante
turvo. Neste caso diluir a amostra 1:2 com NaCI 150 mmol/L e repetir a precipitao. Multiplicar o
resultado final por 2. Caso o sobrenadante permanea ainda turvo a amostra no pode ser utilizada para
determinar o colesterol HDL.
2- Algumas amostras, principalmente lipmicas, podem apresentar o sobrenadante lmpido com um
precipitado na sua superfcie que no deve ser pipetado, para evitar resultados falsamente elevados.
3- Valores de Bilirrubina acima de 5 mg/dL produzem resultados falsamente diminudos.
4- Tem sido relatado aumento nos nveis de colesterol HDL com o uso de estrgenos e plulas
contraceptivas. Tiazdicos e bloqueadores beta-adrenrgicos no seletivos podem reduzir o colesterol
HDL.
5- Para uma reviso das fontes fisiopatolgicas e medicamentosas de interferncia nos resultados e na
metodologia, sugere-se consultar Clin Chem 1975;21:1D-432D.

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SIGNIFICADO CLNICO
O colesterol circulante nos seres humanos encontra-se distribudo entre as trs maiores classes de
lipoprotenas: as Lipoprotenas de Baixa Densidade (LDL) as Lipoprotenas de Densidade Muito Baixa
(VLDL), e as Lipoprotenas de Alta Densidade (HDL). Quantidades menores de colesterol esto
presentes nas Lipoprotenas de Densidade Intermediria (IDL) e na Lipoprotena-a (Lp-a).
A determinao da concentrao srica do Colesterol da Lipoprotena de Alta Densidade (HDL-C)
constitui parte integrante da avaliao laboratorial do metabolismo lipdico e tem sido utilizada para
estimar o risco de desenvolvimento de Doena Arterial Coronariana (DAC).
Encontra-se bem estabelecida a relao inversa entre a concentrao do HDL-C e DAC. O estudo
clssico de Framingham, conduzido entre 1969 e 1971, apontou evidncias de uma forte associao
negativa entre os nveis do HDL-C e a incidncia de DAC em homens e mulheres (com idade superior a
50 anos). Os resultados de diversos estudos clnicos e epidemiolgicos tm demonstrado que o
aumento de 1 mg/dL na concentrao do HDL-C reduz em 2 a 3% o risco de desenvolvimento de DAC.
As concentraes do Colesterol Total e do Colesterol HDL dependem de metabolismos distintos e no
se deve fazer qualquer tentativa de buscar correlao entre seus nveis de concentrao.
REFERNCIAS
1. Friedewald WT, Levy RI, Fredrickson DS. Estimation of the concentration of the low-density
lipoprotein cholesterol in plasma without use of the preparative ultracentrifuge. Clin Chem 1972; 18:
499-502.
2. Inmetro Boas Prticas de Laboratrio Clnico e Listas de Verificao para Avaliao, Qualitymark
ed., Rio de Janeiro, 1997.
3. Tonks DB. Quality Control in Clinical Laboratories, Warner-Chilcott Laboratories, Diagnostic
Reagents Division, Scarborough, Canada, 1972.
4. 2o Congresso Brasileiro sobre Dislipidemias. Sociedade Brasileira de Cardiologia. Arq Brs Cardiol
1996:67:1-16.
5. Virella MFL, Stone P, Ellis S, Colwell G. Clin Chem 1977; 23:882-884.
6. Warnick RG, Naguyent T, Albers AA. Clin Chem 1985; 2:217-222.
7. Warnick RJ. Handbook of lipoprotein testing. Washington:AACC Press, 1997.
8. Warnick RG, Wood PD. Clin Chem 1995; 41:1427-33.
9. Westgard JO, Barry PL, Hunt MR. Clin Chem 1981; 27: 493-501.
10. Colesterol HDL, Instrues de Uso, Labtest Diagnstica.
Nome

Assinatura

Elaborado por:
Aprovado por:
Implantado por:
Substitui POP:
Revisado por:
Revisado por:
Revisado por:
Desativado por:
Razo:

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Nmero

Cpias

Data
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Destino