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CENTRO

Procedimento Operacional Padro

MDICO SALUS

BILIRRUBINA

POP 2010

Elaborado por: Dra. Marilene Carvalho de Lima


CRF: 02013/AM

BILIRRUBINA
INDICAO MDICA DO EXAME
A determinao da bilirrubina em amostras de sangue til na avaliao de doenas
hepatobiliares e hematolgicas que cursam com alterao no metabolismo da
bilirrubina. Sua dosagem no lquido amnitico auxilia na avaliao da eritroblastose
fetal.
PRINCPIO
A bilirrubina dosada por diazotizao e formao de azobilirrubina vermelha com
absoro mxima em 525 nm. A bilirrubina direta (diglicurnide) dosada em meio
aquoso, enquanto que a total (direta e indireta) dosada por ao de potente
solubilizador de ao catalisadora.
AMOSTRA
Preparo do paciente
Recomenda-se jejum mnimo de 8 horas.
Tipos de amostra
Usar soro ou plasma (Heparina, EDTA) e lquido amnitico.
Armazenamento e estabilidade da amostra
Quando protegido da luz, o analito estvel 4 dias entre 2 8 C e 3 meses a 20 C
negativos.
Volume ideal: 2ml
Critrios para rejeio da amostra
Presena de hemlise (ver Precaues e Cuidados Especiais).
PRODUTO UTILIZADO
Bilirrubina, Catlogo 31
Labtest Diagnstica

ANVISA - 10009010022

Acelerador: Armazenar entre 15 25 C.


Contm cafena 130 mmol/L, benzoato de sdio 260 mmol/L, acetato de sdio 460
mmol/L e surfactante.
cido sulfanlico: Armazenar entre 15 25 C.
Contm cido sulfanlico 5,75 mmol/L e estabilizador.
Nitrato de sdio: Armazenar entre 15 25 C.
Contm nitrito de sdio 72,5 mmol/L e estabilizador.
Precaues e cuidados especiais
1. Os cuidados habituais de segurana devem ser aplicados na manipulao do
reagente.
2. Os reagentes no abertos, quando armazenados nas condies indicadas so
estveis at a data de expirao impressa no rtulo. Durante o manuseio, os
reagentes esto sujeitos contaminao de natureza qumica e microbiana
que podem provocar reduo da estabilidade.

Rua Rio Juta Quadra 35- Casa 08 Vieiralves


Fone/Fax (092) 3307-0314/ 3307-0316

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BILIRRUBINA

POP 2010

Elaborado por: Dra. Marilene Carvalho de Lima


CRF: 02013/AM

EQUIPAMENTOS
Procedimento manual
1. Fotmetro capaz de medir com exatido a absorbncia em 525 nm ou filtro verde
(500 a 540 nm).
2. Pipetas para medir amostras e reagentes.
3. Cronmetro.
PROCEDIMENTO
Preparo do Diazo Reagente: Adicionar 0,010 mL de Nitrito de Sdio (n 3) a 0,3 mL do
cido Sulfanlico (n 2). Misturar e usar no dia da preparao.
Procedimento manual
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
gua destilada ou
deionizada
Acelerador (n 1)
cido sulfanlico (n 2)
Diazo reagente
Soro ou plasma

Branco
1,0 mL

Direta
1,0 mL

Total
-----

----0,1 mL
----0,05 mL

--------0,1 mL
0,05 mL

1,0 mL
----0,1 mL
0,05 mL

Misturar e esperar 5 minutos. Determinar as absorbncias das bilirrubinas direta e total


em 525 nm ou filtro verde (500 a 540 nm), acertando o zero com o branco. A cor
estvel por 30 minutos.
Precaues e cuidados especiais
1. Para manusear e descartar reagentes e material biolgico, aplicar as normas
estabelecidas de segurana.
2. A limpeza e secagem adequadas do material so fatores fundamentais para a
estabilidade dos reagentes e obteno de resultados corretos.
3. A gua utilizada no laboratrio deve ter a qualidade adequada a cada
aplicao. Assim, para preparar reagentes e usar nas medies, deve ter
resistividade 1 megaohm ou condutividade 1 microsiemens e concentrao
de silicatos 0,1 mg/L (gua tipo II). Para o enxge da vidraria a gua pode
ser do tipo III, com resistividade 0,1 megaohms ou condutividade 10
microsiemens. No enxge final utilizar gua tipo II. Quando a coluna
deionizadora est com sua capacidade saturada ocorre a produo de gua
alcalina com liberao de vrios ons, silicatos e substncias com grande
poder de oxidao ou reduo que deterioram os reagentes em poucos dias
ou mesmo horas, alterando os resultados de modo imprevisvel. Assim,
fundamental estabelecer um programa de controle da qualidade da gua.
4. Para a dosagem da bilirrubina no lquido amnitico, utilizar 1,8 mL do
acelerador nos tubos branco e total e 3,0 mL do lquido amnitico para cada
tubo. Usar 0,5 mL do reagente sulfanlico no tubo branco e 0,5 mL do diazo
reagente no tubo total. O resultado obtido deve ser dividido por 10.
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CLCULOS
Ver linearidade.
Obter os valores em mg/dL para as bilirrubinas direta e total utilizando o fator de
calibrao obtido com o Padro de Bilirrubina (Labtest Cat. 32).
Absorbncia do teste
Bilirrubina (mg/dL) =

x 10
Absorbncia do padro

Devido a grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a metodologia, o mtodo
do fator pode ser empregado.
10
Fator de calibrao =
Absorbncia do padro
Bilirrubina (mg/dL) = Absorbncia do teste x Fator
A bilirrubina indireta obtida pela diferena das bilirrubinas total e direta.
RESULTADOS
Unidade de medida
mg/dL
Converso de mg/dL para Unidade SI: mol/L = mg/dL x 17,1
Intervalo de Referncia
Recm-nascidos
Bilirrubina Direta: at 0,4 mg/dL
Bilirrubina Total: 1 dia: at 5,1 mg/dL
1 a 2 dias: at 7,2 mg/dL
3 a 5 dias: at 10,3 mg/dL
Crianas, Adolescentes e Adultos
Bilirrubina Direta:
at 0,4 mg/dL
Bilirrubina Total:
at 1,2 mg/dL
Lquido amnitico:
Idade gestacional (semanas)
15
25
40
0,13 mg/dL
0,14 mg/dL
0,04 mg/dL
Valores crticos
Soro: > 15,0 mg/dL em recm-nascidos a termo.
10 - 15 mg/dL em recm-nascidos pr-termo.
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Incluir o procedimento a ser adotado diante de um resultado crtico.


LIMITAES DO PROCEDIMENTO
Linearidade
A medio linear at 25 mg/dL. Para valores maiores, diluir a amostra com NaCl 150
mmol/L, (0,85%) e repetir a determinao. Multiplicar o resultado obtido pelo fator de
diluio.
Indicar o procedimento de diluio utilizado no laboratrio.
Interferncias
1- Valores de Hemoglobina at 30 mg/dL e Triglicrides at 170 mg/dL no produzem
interferncias significativas.
Valores de Triglicrides entre 170 e 3500 mg/dL produzem resultados falsamente
diminudos.
Valores de Hemoglobina entre 30 e 180 mg/dL produzem resultados falsamente
elevados na determinao da Bilirrubina Total e falsamente diminudos na
determinao da Bilirrubina Direta.
2- Para uma reviso das fontes fisiopatolgicas e medicamentosas de interferncia nos
resultados e na metodologia, sugere-se consultar Clin Chem 1975;21:1D-432D.
SIGNIFICADO CLNICO
As causas mais comuns de aumento da bilirrubina direta so as doenas hepatocelulares e das vias biliares, tais como, hepatites, colangites, colecistites, neoplasias,
cirrose, alcoolismo, obstruo biliar intra ou extra-heptica, mononucleose infecciosa. A
bilirrubina direta solvel em gua e, quando sua concentrao encontra-se elevada
no soro, esta torna-se positiva na urina.
O aumento da bilirrubina indireta indica: (1) aumento da produo (hemlise); (2)
diminuio do transporte (anticorpos e medicamentos); (3) defeito da captao
(deficincia ou bloqueio das ligandinas) e (4) defeito da conjugao (doena de Gilbert,
entre outras).

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