UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARAÍBA

CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

CURSO DE BIOMEDICINA
BIOQUÍMICA MÉDICA

Discente: Matheus Victor de Souza Laurentino

Relatório da aula prática 21-03-2022

Dosagem de glicose
Realizamos a prática de quantificação de glicose, pois determinar os níveis glicêmicos é
fundamental para o diagnóstico e supervisão de doenças que afetam o metabolismo de
carboidratos como o diabetes mellitus. Quantificamos a glicose de amostras de soro, mas ela
pode ser quantificada em amostras de plasma, liquido cefalorraquidiano, líquido pleural e
urina para diversos fins de diagnósticos e de monitoramento.
O método enzimático de ponto final, que só é analisada no ponto final (end point) da reação
enzimática, foi o utilizado para a quantificação. Esse é o método mais utilizado em
laboratórios clínicos, pois proporcionam especificidade e podem ser compactados em Kits de
teste rápidos.
Segundo o Henry, atualmente temos três sistemas de enzimas em uso: glicose
desidrogenase, glicose oxidase e hexoquinase. Essas enzimas participam de reações que
geram corrente elétrica ou um produto cromogêneo, cuja a concentração pode ser
determinada por espectrofotometria, de modo proporcional à concentração inicial de glicose.
Na aula usamos um Kit Glicose GOD que usa a glicose oxidase, o kit é um sistema enzimático
para a determinação dá glicose no sangue, líquor, líquido pleural e sinovial por método
cinético.
O kit tem apenas um reagente que contém:

• Tampão de fosfato 30mmol/L pH 7,5;

• Fenol 1mmol/L;
• Glicose oxidase 1000U/L;
• Peroxidase 80 U/L;
• 4-aminoantipirina 290µmol/L;
• Azida sólida 7,5 mmol/L e surfactantes.
Nesse sistema ocorre duas reações em cadeia, primeiro a glicose oxidase catalisa a oxidação
da glicose gerando ácido glucônico e peróxido de hidrogênio (reação 1). O peróxido de
hidrogênio formado reage com o 4-aminoantipirina e fenol, sob ação catalisadora da
peroxidase (reação 2), através de uma reação oxidativa que resulta na formação de uma
antipirilquinonimina vermelha, cuja a intensidade de cor é proporcional à concentração da
glicose na amostra.
Reação 1:
Reação 2:

Resumo do procedimento
1. Preparo do padrão: foi preparado um padrão calibrador com que possuí uma
concentração conhecida de glicose.
2. Preparo da análise:
a. Colocado em um tubo 300µL de reagente do Kit
b. Adicionado no tubo 3,0µL de amostra de soro
c. Homogeneizado
d. Colocado em banho maria à 37°C por 5 min
3. Analise: passados os 5 min, a solução foi passada para uma cubeta e analisada por
espectrofotometria como comprimento de onda de 505nm.
4. Resultado:
a. O padrão tem a concentração de 100mg/dL de glicose deu a absorbância de
0,033.
b. O teste deu 0,228 de absorbância, como a absorbância é proporcional a
concentração de glicose chegamos ao valor de 690mg/dL.
Obs: os valores obtidos pelos alunos para a mesma amostra divergiram muito, essas
diferencias provavelmente vem de erros de pipetagem, como foi uma aula prática para
demonstrar o método enzimático de ponto final os erros foram tolerados. No laboratório tais
erros devem ser evitados.

Referências
MCPHERSON, R.A.; PINCUS, M.R. Diagnósticos Clínicos e Tratamento por Métodos
Laboratoriais de Henry. [Digite o Local da Editora]: Editora Manole, 2012. 9788520451854.
Disponível em: https://integrada.minhabiblioteca.com.br/#/books/9788520451854/. Acesso em:
16 Apr 2022

LABTEST, GLICOSE GOD. Instruções de uso. REF 134, MS 10009010243.