CENTRO UNIVERSITÁRIO FAMETRO

CURSO DE FARMÁCIA – 7ª PERÍODO – MATUTINO

PROFª MSc. LEILANE BENTES DE SOUSA
DISCIPLINA: BIOQUÍMICA CLÍNICA

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA

ALUNOS
BRUNA MENDES CARVALHO
DANIEL DE OLIVEIRA
ELLEN NUNES FEITOZA
JOÃO BOSCO MARTINS RIOS
MICAELE LIMA ANDRADE
ROBERT PEREIRA DE JESUS

MANAUS – AM
NOVEMBRO DE 2021
 1. OBJETIVOS DA AULA

1.1. Teste de glicose

Nesta aula foi realizado o teste de glicemia, com o objetivo de analisar os

níveis de glicose no plasma presentes na amostra, utilizando o método
colorimétrico enzimático.

1.2. Teste de ureia Enzimática

Utilizado para determinar o nível de ureia no sangue a fim de se verificar

a funcionalidade do fígado e dos rins; na possibilidade de um funcionamento
deficitário de alguns desses órgãos, a quantidade de ureia tende a elevar-se,
gerando um ambiente tóxico para o organismo humano, comprometendo, ainda,
a homeostase.
2. MATERIAIS UTILIZADOS

2.1. MATERIAIS PARA O EXAME DE GLICOSE

 Tubos de ensaio;
 Pipetas para medir amostras e reagentes;
 Reagente Glicose GOD-PAP;
 Solução padrão Estándar glicose;
 Banho Maria mantido à temperatura constante (37);
 Espectrofotômetro para medir a absorbância e a exatidão entre 490 e
520nm.

2.2. MATERIAIS PARA O EXAME DE UREIA

 Tubos de ensaio;
 Pipetas para medir amostras e reagentes;
 Reagente Ureia Enzimática R2;
 Solução padrão ureia enzimática Std;
 Banho Maria mantido à temperatura constante(37);
 Espectrofotômetro para medir a absorbância e a exatidão entre 589 a
620nm.
 3. METODOLOGIA

3.1. EXAME DE GLICOSE

O exame foi realizado pelo método de GOD-PAP do fabricante Kovalent,
pelo princípio colorimétrico enzimático que determina glicose após oxidação
enzimática pela glicose oxidase. O indicador colorimétrico é a quinonimina, o
qual é gerado a partir da 4-aminoantipirina e fenol pelo peróxido de hidrogênio
sob ação catalítica da peroxidase.
Primeiramente foi realizada a coleta de sangue do paciente no qual foi
submetido a centrifugação para obtenção do plasma, em seguida os tubos de
ensaio foram identificados como tubo do teste branco, amostra e padrão. No tubo
branco foram adicionados 10 µL de água destilada + 1000 µL de reagente, no
tubo da amostra foram adicionados 10 µL de plasma + 1000 µL de reagente e
no tubo do padrão foram adicionados 10 µL de solução padrão + 1000 µL de
reagente, todos os tubos foram homogeneizados e levados para incubar por 5
minutos a 37ºC, após esse tempo os tubos foram levados para o
espectrofotômetro para ser a realizado a leitura da absorbância.

3.2. EXAME DE UREIA

O exame foi realizado pelo método enzimático do fabricante BioTécnica
pelo princípio colorimétrico enzimático onde A ureia da amostra é hidrolisada
pela urease com produção de gás carbônico e íons amônio. Este reage com
salicilato e hipoclorito de sódio em meio alcalino, na presença de nitroprussiato,
produzindo indofenol, de coloração verde.
Primeiramente o sangue do paciente foi coletado e centrifugado para
obtenção do plasma, em seguida foi necessário a produção do reagente de
trabalho (RT), onde foi feita uma mistura na proporção: 25 partes do R1 + 1 parte
do R3, homogeneizados suavemente.
Com o reagente de trabalho pronto, os tubos de ensaio foram identificados
como tubo do teste branco, amostra e padrão. No tubo branco foram adicionados
10 µL de água destilada + 1000 µL de RT, no tubo da amostra foram adicionados
10 µL de plasma + 1000 µL de RT, no tubo do padrão foram adicionados 10 µL
de solução padrão + 1000 µL de RT, todos os tubos foram homogeneizados e
levados para incubar por 5 minutos a 37ºC, após esse período foi acrescentado
1000 µL de R2, foram novamente homogeneizados e levados para incubar a 37º
C por 5 minutos, depois do decorrer do tempo foi possível fazer a leitura da
absorbância no espectrofotômetro.
 4. RESULTADOS

4.1. GLICOSE
Ao medir a absorbância no espectrofotômetro no comprimento de onda
de 500nm os valores para o tubo padrão foi de 0,383 e o da amostra foi de
0,399.
Gli (mg/dL) = Abs A X 100 mg/dL
Abs P

Gli (mg/dL) = 0,399 X 100 mg/dL

0,383

Gli (mg/dL) = 104,17 mg/dL

4.2. UREIA
Ao medir a absorbância no espectrofotômetro no comprimento de onda
de 580nm os valores para o tubo padrão foi de 0,435 e o da amostra foi de
0,362.
Ureia (mg/dL) = Abs A X 70 mg/dL
Abs P

Ureia (mg/dL) = 0,362 X 70 mg/dL

0,435

Ureia (mg/dL) = 58,25 mg/dL

 5. VALORES DE REFERÊNCIA E INTERPRETAÇÃO DOS
RESULTADOS

De acordo com literatura utilizada para monitoramento de glicemia, acerca

dos níveis ideais de glicose em adulto em jejum, o valor pode apresentar-se entre
70 e 115mg/dL; tal valor pode ser considerado normal. A amostra de sangue do
paciente coletada durante aula prática revelou valor de 104,17mg/dL,
caracterizando um paciente normoglicêmico.
Acerca da interpretação dos valores de ureia, o material utilizado aponta
valores normais, em indivíduos adulto, entre 15 a 45 mg/dL. Tendo em vista o
valor obtido através de coleta realizado em laboratório, apontando 58,25 mg/dL,
pressupõe-se um valor alterado. Valores de bilirrubina até 32 mg/dL,
hemoglobina até 80 mg/dL e triglicérides até 900 mg/dL não são capazes de
produzir interferências as quais sejam significativas nos resultados.
6. CONCLUSÃO
 7. ANEXOS
Figura 1 - Coleta de amostra de sangue Figura 2 – Identificação e organização dos tubos

Fonte: acervo pessoal Fonte: acervo pessoal

Figura 3 – Pipetagem de água destilada Figura 4 – Pipetagem dos reagentes

Fonte: acervo pessoal Fonte: acervo pessoal

Figura 5 – Processo de homogeneização dos Figura 6 – Tubos de ensaio em banho-maria

tubos a 37ºC

Fonte: acervo pessoal Fonte: acervo pessoal