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FACULDADE MAURÍCIO DE NASSAU

CURSO DE FARMÁCIA

TÉCNICAS DE PIPETAGEM

LUANA OLIVEIRA DE SOUSA

FARMÁCIA 4º PERÍODO (NA)

Petrolina - PE

2021
FUNDAMENTAÇÃO TEÓRICA

A glicose é a principal fonte de carboidrato do organismo e sua concentração


sérica está intimamente ligada à ação da insulina. Após uma refeição rica em carboidratos,
a glicose que é absorvida para o sangue causa uma rápida secreção de insulina. Esta, por
sua vez, provoca a captação, armazenamento e uso rápido da glicose por quase todos os
tecidos corporais, especialmente pelos músculos, tecido adiposo e fígado. Valores
elevados de glicose ocorrem nos vários tipos de diabetes primária, nos estados de
intolerância à glicose e nas diabetes secundárias a várias doenças (hipertireoidismo,
hiperpituitarismo, hiperadrenocorticismo, etc). Valores diminuídos de glicose ocorrem
nas hipoglicemias que têm várias causas.
A medida das proteínas totais no sangue reflete o estado nutricional da pessoa, e
pode ser usada no diagnóstico de doenças renais, hepáticas e de outros distúrbios. Se os
níveis de proteínas totais estiverem alterados, devem-se fazer outros testes para identificar
qual a proteína específica que está alterada, para que possa ser feito o diagnóstico correto.
As proteínas são estruturas muito importantes para o bom funcionamento do
organismo, tomando uma variedade de formas como albumina, anticorpos e enzimas,
desempenhando funções como o combate a doenças, regulação das funções do corpo,
construção do músculo, e transporte de substâncias pelo corpo.
MATERIAIS E MÉTODO

Materiais:

Apresentar em tópicos todos os materiais utilizados na aula prática.

Ex.:

 Pipeta automática;

 Ponteira;

 Estante para tubos de ensaio;

 Tubos de ensaio;
 Glicose enzimática;
 Proteína padrão enzimática;
 Reagente;
 Estufa;
 Espectrofotômetro;

Método

1. Conhecendo as pipetas.
Nesse momento da aula, obtivemos conhecimento sobre os tipos variados de
pipetas, mas nosso foco foi a pipeta automática.
2. Familiarizando-se com a pipeta automática e ponteiras.
Com água, treinamos o processo de passagem dos líquidos e a dosagem do volume
correto que queríamos obter com a ajuda da pipeta automática, entendemos na
prática como definir a quantidade que queríamos.
2.1 Informações importantes.
1000 microlitros é igual a 1 mililitro, saber disso facilita os cálculos. É
importante sempre olhar o volume que a pipeta aguenta a fim de não
descalibrar e pegar sempre o valor que pode. Algumas pipetas automáticas
vem com o valor já multiplicado (x10).
Na pipeta de 100-1000 microlitros o valor indicado no visor se for 100
significa 1000 e se for 10 significa 100.
Sobre os botões, o primeiro toque é para sugar, o segundo para desprezar,
nunca usar o segundo toque para sugar a fim de não pegar um volume a mais
do que o esperado. Por fim, há um botão que serve para ejetar a ponteira.
No que diz a respeito as ponteiras, a ponteira menor é mais indicada para pegar
volumes menores.

3. Exame de dosagem de glicose.


Separamos três tubos de ensaio, e marcamos cada um com letras, “P” indicando
(padrão), “B” (branco) e “T” (teste). Em cada um colocamos 2ml de reagente,
além disso, no tubo “T” foi colocado 2ml de soro do sangue a ser analisado, no
“B” apenas o reagente e no “P” 2ml de glicose enzimática. Em seguida foram
levados os três tubos a uma estufa onde permaneceram por 15 minutos ali dentro,
imitando a temperatura natural do corpo humano. Logo foi levado apenas o tubo
teste para o espectrofotômetro, onde verificou-se a absorbância da amostra a fim
de definir a concentração final obtida, quanto mais escura, mais proteína.
RESULTADOS E DISCUSSÃO

Colhido os resultados, fizemos os cálculos para a dosagem de glicose, através da


formula: absorbância vezes valor do teste dividido por absorbância vezes padrão, esse
resultado depois é multiplicado por 100. A amostra de sangue utilizada na aula prática
apresentou 39 miligramas por decilitro a respeito da dosagem de glicose, o certo seria
pelo padrão estabelecido normal ser de 80 miligramas por decilitro. Cabe citar o fato de
já ser fim de noite. Quanto a dosagem de proteína, um erro no espectrofotômetro
identificou que houve um erro na hora da dosagem das substancias de uma das pipetagens
feitas, sendo assim esta não houve como ser calculada. Isso já nos mostrou na pratica a
importância enorme que uma boa pipetagem feita da forma correta possui.
CONCLUSÃO
O objetivo foi alcançado visto que pudemos observar e praticar técnicas de
pipetagem com o instrumento automático, conhecer os materiais e equipamentos
utilizados e concluir os testes de dosagem de glicose e proteína pretendidos. Certamente,
constituiu-se uma aula satisfatória e de bom proveito.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

LEMOS, Marcela. Exame de proteínas totais e frações: o que é e como entender o


resultado. Disponível em: < https://www.tuasaude.com/exame-de-proteinas/>.
Acesso em: 22 ago. 2021.

ANALISA, Golden. Kit para determinação da glicose por metodologia enzimática-


colorimétrica. Disponível em: <
http://www.goldanalisa.com.br/arquivos/%7BC11BB7D7-319B-4A26-AF24-
9D2AB0CC3D44%7D_GLICOSE_PP_Cat_434.pdf>. Acesso em: 22 ago. 2021.

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