UNIVERSIDADE TUIUTI DO PARANÁ

Patrícia Ferreira

DOSAGEM DE COLESTEROL TOTAL

CURITIBA
2016
 Patrícia Ferreira

DOSAGEM DE COLESTEROL TOTAL

Relatório técnico-científico apresentado ao Curso

de Biotecnologia da Faculdade de Ciências
Biológicas da Universidade Tuiuti do Paraná, como
requisito parcial para a obtenção do título de
Biotecnologista.
Orientadora: ProfªMichelli

CURITIBA
2016
AULA 1- DOSAGEM DE COLESTEROL 03/05
Os principais lipídeos do plasma humano são colesterol, ésteres do
colesteril, triglicerídeos, fosfolipídios e ácidos graxos não esterificados. A função
principal das lipoproteínas plasmáticas é a de transporte dos triglicerídeos e do
colesterol dos locais de origem que é o intestino e fígado para os locais de
armazenamento e utilização. O colesterol exerce papel essencial na estrutura das
membranas de todas as células do organismo, bem como é precursor dos
hormônios esteróides, da vitamina D e dos ácidos biliares.
O colesterol pode ser proveniente da dieta nos produtos de origem animal e
sintetizado endogenamente a partir do composto simples com dois átomos de
carbono (acetil-CoA). Praticamente todas as células humanas são capazes de
produzir colesterol.
Em termos quantitativos, o fígado é o principal local de biossíntese do
colesterol, como também o córtex da supra renal, os ovários, os testículos e o
epitélio intestinal são particularmente ativos na síntese do colesterol. O córtex da
supra renal, os ovários e os testículos usam o colesterol e seus ésteres para a
síntese de hormônios esteróides.
Em condições normais, a velocidade hepática na síntese do colesterol
parece estar inversamente relacionada com a quantidade de colesterol da dieta que
chega por meio de quilomicra ao fígado. Esta relação sustenta um suprimento diário
relativamente constante de colesterol e explica por que sua restrição na dieta
somente garante uma redução de 15% nas concentrações de colesterol circulante.
A síntese hepática de colesterol sofre interferência do ritmo circadiano, tendo
um pico por volta de 6 h. após o anoitecer e um mínimo por volta de 6 h. após a
exposição à luz. Esse ritmo resulta de modificações correspondentes na atividade da
HMG-CoAredutase, enzima que controla a síntese endógena.
Aproximadamente 70% do colesterol plasmático estão esterificados
principalmente pelo ácido linoléico; isto aparentemente ocorre no plasma sob a
influência da enzima lecitina colesterol aciltransferase, que é liberada do fígado. Em
doenças hepáticas graves, há a diminuição da atividade enzimática no plasma e
também da proporção de colesterol esterificado
Os triglicerídeos são as gorduras que fornecem energia para o organismo,
sendo assim a forma de gordura mais comum em osso corpo. Quando a quantidade
de triglicérides está elevada, eles são armazenados nos tecidos adiposos (tecidos
gordurosos) para o caso de serem necessários no futuro. Quando você desenvolve
aquelas gordurinhas pelo corpo, como nos quadris ou na barriga, você está na
verdade armazenando os triglicérides que estão em excesso.
As triglicéridesem nível elevado representam um fator de risco para doenças
cardíacas. No entanto alguns especialistas discordam sobre o ruim do efeito de
triglicérides elevados que atuam no coração. Parte da controvérsia vem do fato de
que altos níveis de triglicérides geralmente acontecem simultaneamente com outros
fatores de risco. E na maioria das vezes, eles coexistem com altos níveis de LDL
que são conhecidos como colesterol “ruim” e baixos níveis de HDL conhecidos como
colesterol "bom", já que baixos valores de colesterol "bom" são um fator de risco
para a doença cardíaca.O que os especialistas realmente acreditam é que níveis
altos de triglicérides podem ser marcadores de outros fatores de risco para doenças
cardíacas, como aumentar os efeitos ruins de colesterol alto, pressão alta e
diabetes.

OBJETIVO
O objetivo dessa aula foi realizar a dosagem de colesterol totale
triglicerídeos de alguns alunos adultos e saudáveis, utilizando um kit pré-
determinado que usa a metodologia enzimática-colorimétrica e correlacionar os
resultados com a bibliografia para avaliar anormalidades metabólicas.

MATERIAIS E REAGENTES
1 centrifuga 2.000 rpm por 05 minutos
5 tubos de ensaios
1 espectrofotometro
1 banho maria a 37º C
1 pipeta automática de 1000µL
1 pipeta automática de 10 µL
1 cronometro
Tampão/enzima
Sulfactante
Solução padrão 200 mg/dL
PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
A amostra foi coletada na hora da análise, por duas alunas: Patrícia e
Fabíola. Após a coleta foi centrifugada as amostras de sangue na centrifuga a
2.000rpm por 5 minutos com a finalidade de separar os compostos sólidos do
sangue de seu plasma.
Na sequência identificou se os tubos de ensaio para a realização dos testes
para o colesterol: branco, padrão e teste.
No tubo branco foi utilizado apenas o reagente de cor, na quantia de 1000
µL.No tubo padrão foram inseridos 10 µL de solução padrão que é estabilizado com
colesterol e 1000 µL de reagente de cor.No último tubo de ensaio denominado como
teste,foi pipetado 10 µL da amostra de soro celular mais 1000 µL de cor reagente.
Após realizada a homogeneização, os tubos de ensaios foram incubados
durante 5 minutos em banho-maria a 37ºC para que ocorressem as quebras
necessárias do reagente de cor, que é a quebra do emulsificante com as enzimas
que dão a coloração vermelha.
Após agitação e o tempo necessário para a reação química, foram
realizadas as leituras da sua absorbância no espectrofotômetrocalibrado em 500
nanômetros zerando o aparelho com o branco e fazendo a leitura do padrão e do
teste. Adquirindo assim o resultado do teste.
Para a realização do teste de triglicerídeos, os tubos de ensaio foram
novamente identificados em: branco, padrão e teste.
No tubo branco foi utilizado apenas o seguinte reagente: 1000 µL de
reagente de cor. No tubo padrão foram inseridos 10 µL de solução padrão e 1000 µL
de reagente de cor. No tubo denominado como teste, foi pipetado 10 µL da amostra
de soro celular mais 1000 µL de cor reagente.
Após ser realizada a homogeneização, os tubos de ensaios também foram
incubados durante 5 minutos em banho-maria a 37ºC para que as quebras
necessárias do reagente de cor ocorressem.

RESULTADOS E DISCUSSÕES
Após o procedimento concluído os resultados obtidosno teste de colesterol
para o tubo padrão da amostra de Patrícia foi de 0,367u.a e do teste 0,211u.a para
conseguir o valor em mg/dL é necessário fazer a média e multiplicar por 200 que é o
F (fator) da equação, que consta na literatura para este teste segundo a lei de Beer.
 absorbância teste
colesterol mg/dL= x 200
absorbância padrão

0,211
colesterol mg/dL= x 200
0,367

Colesterol mg/dL= 114,98 mg/dL

O resultado para o teste de colesterol da amostra de sangue da Fabiola apresentou

os seguintes resultados:

0,328
colesterol mg/dL= x 200
0,367

Colesterol mg/dL= 178,74 mg/dL

Após o procedimento do teste de triglicerídeos ser concluído, os resultados

obtidos para o tubo padrão da amostra de Patrícia foi de 0,211u.a e do teste
0,060u.a. Seguindo a reação corada da lei de Beer, basta a determinação de um
fator(F) para cálculo dos resultados.

absorbânciateste
triglicerídes mg/dL= x 200
absorbância padrão

0,060
triglicerideosmg /dL= x 200
0,221

Triglicerídeos mg/dL= 54,29 mg/dL

O resultado de triglicerídeos para a amostra de sangue da Fabiola apresentou os

seguintes resultados:

0,036
triglicerideosmg /dL= x 200
0,221
Triglicerídeos mg/dL= 32,57 mg/dL

RESULTADOS E DISCUSSÕES
A taxa de colesterol desejado em mg/dL é: <200 Bom, 200-239 Limítrofe ou
>240 alto risco (DCI).
Nossa amostra revelou que as alunas em questão ficaram com uma taxa
abaixo da média, e é um resultado excelente, pois seu plasma celular esta com
baixa taxa de colesterol o que impede varias patologias que tem correlação com a
mesma.
O cuidado com a alimentação é muito importante para o controle do
colesterol, as práticas de atividade física, junto com adoção de hábitos de vida
saudáveis, colaboram na diminuição do colesterol e aumentam os níveis de HDL.
Tendo níveis satisfatórios de HDL existe um menor risco de desenvolver doenças
cardiovasculares. Isso se deve ao fato desta lipoproteína atuar na remoção da
gordura acumulada nos vasos sanguíneos.
Para o triglicerídeosa taxa desejada em mg/dL para pessoas adultas é de:
<150 Bom, 150-200 Limítrofe ou >200-499 elevado.
Sendo assim, as alunas também apresentaram ótimos valores.
Pessoas com níveis elevados de triglicerídeos podem estar relacionados
com a obesidade, estresse emocional, certas dietas e algumas doenças como
diabetes, uremia, alcoolismo, gravidez, hipotireoidismo e mieloma múltiplo. No
entanto a melhora no estilo de vida pode ajudar na redução do nível de
triglicerídeos. Fazer atividade física frequentemente e iniciar uma dieta saudável é a
melhor forma de se começar o combate para diminuir os níveis de triglicerídeos.

CONCLUSÃO
O colesterol no plasma é quantificado através das seguintes reações
enzimáticas:
 O produto formado pela oxidação da 4- Aminoantipirina é de coloração
avermelhada e sua intensidade, diretamente proporcional à concentração de
colesterol no soro.
Por estes motivos devemos fazer este teste para podermos avaliar as taxas
de colesterol em um teste simples, para que se haja uma alteração poder detectar
uma doença inicialmente.
Para o triglicerídeo que está presente no plasma, a quantificação é dada
através das seguintes reações enzimáticas:

O produto formado
pela oxidação da 4-
Aminoantipirina (4-
Antipirilquinonimina) é
de coloração
avermelhada e sua
intensidade esta proporcionalmente ligada à concentração de triglicérides no soro.

REFERENCIAS
SCHIAVO, M.; LUNARDELLI, A.; OLIVEIRA, J.R.; Influência da dieta na
concentração sérica de triglicerídeos. Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina
Laboratorial.Rio de Janeiro,v.39, n.4, p.283-289. 2004.

O que são triglicerídeos? (Online) Disponivelem:

<http://www.mdsaude.com/2012/08/triglicerideos-alto.html > acesso 22 maio 2016.

FORNAZARI, M.; SUNNAZZARO, M.J..; SUNNAZZARO,C.R.; Comparação dos

valores do colesterol total, LDL colesterol e HDL colesterol com os valores da
porcentagem de gordura corporal.Rev. Fac. Ciênc. Méd. Sorocaba, v. 6, n. 1, p. 15 -
20, 2004.

CARACTERIZAÇÃO FISICO QUIMICA DO OLEO DE COCO

OBJETIVO