UNIVERSIDADE DE CAXIAS DO SUL

Área de Conhecimento de Ciências da Vida

Bioquímica Metabólica

Aula Prática 1 - Glicose

Princípio

A glicose é a aldo-hexose mais importante para a manutenção energética do organismo. Em

condições normais, a glicose sanguínea (glicemia) é mantida em teores apropriados por meio de
vários mecanismos regulatórios.

Após uma refeição contendo carboidratos, a elevação da glicose circulante provoca:

- Secreção de insulina pelas células β do pâncreas.
- Remoção pelo fígado de 70% da glicose transportada via circulação. Parte da glicose é
oxidada e parte é convertida em glicogênio para ser utilizada como combustível no jejum. O
excesso de glicose é parcialmente convertido em ácidos graxos e triglicerídeos e transportado
para os estoques do tecido adiposo.
- Aumento da captação da glicose pelos tecidos periféricos
- Inibição da liberação do glucagon

Estas atividades metabólicas levam a redução da glicemia em direção aos teores encontrados em
jejum. Quando os níveis de glicose no sangue em jejum estão acima dos valores de referência
denomina-se hiperglicemia, quando abaixo destes valores denomina-se hipoglicemia. A glicose
é normalmente filtrada pelos glomérulos e quase totalmente reabsorvida pelos túbulos renais.
Entretanto, quando os valores sanguíneos atingem a faixa de 160 a 180 mg/dL, a glicose aparece
na urina, com o surgimento de glicosúria.

Material
• Soro ou plasma (jejum de 8h)

Procedimento

1 - Separar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir

2 - Misturar vigorosamente e colocar em banho-maria 37 ºC 15 minutos. O nível de água no

banho deve ser superior ao nível de reagentes nos tubos de ensaio.

3 - Determinar as absorbâncias do teste e padrão em 505 nm, acertando o zero com o branco. A
cor é estável por 30 minutos.

Cálculo

Referências
Manual Labtest
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Bioquímica Metabólica

Aula Prática 2 – Colesterol

A determinação do colesterol em amostras de sangue é útil na investigação das dislipidemias e

faz parte da avaliação do risco de doença coronariana isquêmica.

PRINCÍPIO

O colesterol total é determinado de acordo com as seguintes reações:

Colesterol
Ésteres de colesterol ! Colesterol + Ácidos graxos
Esterase

Colesterol
Colesterol + O2 ! Colest-4-en-ona + H2O2
Oxidase

Peroxidase
2H2O2 + Fenol + 4-Aminoantipirina ! Antipirilquinonimina + 4H2O

A intensidade da cor vermelha formada é diretamente proporcional à concentração de

colesterol na amostra.

AMOSTRA

• Soro ou plasma (jejum de 8h)

PROCEDIMENTO

1 - Separar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir

2 - Misturar vigorosamente e colocar em banho-maria 37 ºC 10 minutos. O nível de água no

banho deve ser superior ao nível de reagentes nos tubos de ensaio.

3 - Determinar as absorbâncias do teste e padrão em 500 nm, acertando o zero com o branco. A
cor é estável por 60 minutos.

CÁLCULOS

Absorbância do teste
Colesterol mg/dL = x 200
Absorbância do padrão
g/dL = g/dL

Referências:
Manual Labtest https://docplayer.com.br/311575-Colesterol-liquiform-instrucoes-de-uso.html
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Bioquímica Metabólica

Aula Prática 3 – Uréia

A determinação da uréia em amostras de sangue é útil para investigar alteração na função

renal.

PRINCÍPIO

A uréia é hidrolisada pela urease produzindo íons amônio e dióxido de carbono. Os íons
amônio reagem em pHalcalino com salicilato e hipoclorito de sódio, sob a Ação catalizadora do
nitroprussiato de sódio para formar azul de indofenol.
A intensidade da cor formada é diretamente proporcional à quantidade de uréia na amostra.

AMOSTRA

• Soro ou plasma (jejum de 8h)

PROCEDIMENTO

1 - Separar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir

2 - Misturar e colocar em banho-maria 37 ºC por 5 minutos. O nível de água no banho deve ser
superior ao nível de reagentes nos tubos de ensaio.

3 - Retirar do banho e adicionar 1 ml de Oxidante de uso em cada um dos tubos.

4 - Misturar e colocar em banho-maria 37 ºC por 5 minutos.

5 - Determinar as absorbâncias do teste e padrão em 600 nm, acertando o zero com o branco. A
cor é estável por 120 minutos.

CÁLCULOS

Absorbância do teste
Uréia mg/dL = x 70
Absorbância do padrão
g/dL = g/dL

Referências:
Manual Labtest https://labtest.com.br/wp-content/uploads/2016/09/Ur%C3%A9ia_CE_27_Port.pdf