PROCEDIMENTO

OPERACIONAL
PADRÃO (POP)
Ms. Juliana de Andrade Cintra Malanotte
 ENTREGAR O POP COM A CAPA

Seguir normas de Vancouver

MODELO PARA A
CONFIGURAÇÃO
DA CAPA
 Procedimento Operacional Padrão
(POP)

Nº 01
PROCEDIMENTO OPERACIONAL
PADRÃO (POP) REVISÃO:
LOGO DA
EMPRESA
00
PAG.
NOME DO PROCEDIMENTO - MARCA
01/0..

* DEVERÁ SER INSERIDO EM TODAS AS PÁGINAS NO POP

1.0 FINALIDADE

2.0 PRINCÍPIO
A glicose oxidase (GOD) catalisa a oxidação da glicose para
ácido glicônico e peróxido de hidrogênio. Através de uma reação
oxidativa de acoplamento catalisada pela peroxidase (POD), o
peróxido de hidrogênio formado reage com 4-aminoantipirina e
fenol, formando um complexo de cor vermelha (quinoneimina),
cuja absorbância medida em 500 nm, é diretamente proporcional
à concentração de glicose na amostra.

GOD
Gli cos e  1/2 H 2 O   
  Ácido Glicônico  H 2O 2

POD
2 H 2O2  4  a min oantipirin a  Fenol  
 Quinonei min a  4 H 2O
3.0 SIGNIFICADO CLÍNICO

- Diabetes Mellitus Tipo I

- Diabetes Mellitus Tipo II
- Diabetes Mellitus Secundária
- Diabetes Mellitus Gestacional
4.0 INFLUÊNCIAS PRÉ-ANALÍTICAS

5.0 AMOSTRAS
 Preparo do Paciente
Colher sangue pela manhã após jejum 8 horas, salvo orientações
médicas.

 Amostras utilizadas
Soro, plasma, líquor e outros líquidos biológicos.
Anticoagulantes como heparina, oxalato, fluoreto ou EDTA, não
interferem.

 Estabilidade e armazenamento da amostra

O analito é estável por 7 dias a 2-8 ºC.
Separar o soro ou plasma dos elementos celulares no prazo
máximo de 1 hora.
Adicionando um inibidor de glicolise como o fluoreto, melhora a
preservação da amostra.
6.0 METODOLOGIA

7.0 REAGENTES
1- Padrão - Contém Glicose 100 mg/dL.

2- Reagente de Cor - Contém tampão pH 7,5 de fosfato

70 mmol/L, fenol 5,0 mmol/L, glicoseoxidase  10000
U/L, peroxidase  1000 U/L, e 4-aminoantipirina 0,4
mmol/L.
8.0 CURVA DE CALIBRAÇÃO: CASO NÃO TIVER ANOTAR
NÃO APLICÁVEL
Padrão Concentração Absorbância
(mg/L)
1 0 0,000
2 50 0,172
3 100 0,343
4 250 0,859
5 400 1,374
6 600 1,986
7 800 2,350
9.0 LINEARIDADE

A reação é linear até 600 mg/dL . Quando obtido valor

igual ou maior que 600 mg/dL, diluir a amostra com
NaCl 150mmol/L, realizar nova medição e multiplicar
o resultado pelo fator de diluição. Diluir a amostra de
tal modo que o valor encontrado se situe entre 80 e
200md/dL. Sugerimos a verificação d linearidade
metodológica e fotométrica, no mínimo
semestralmente, utilizando amostra com valores até
600 mg/dL.
10.0 MATERIAIS NECESSÁRIOS

Procedimento Técnico Manual

 Banho-Maria a 37ºC
 Espectrofotômetro ou fotômetro para leituras em
500 nm
 Pipetas automáticas – volume:...........µL /mL
 Cronômetro
11.0 CONTROLE INTERNO DA QUALIDADE

Utilização de amostras controles com valor:

 situado na faixa de referência (nível de decisão)

 em outra faixa de significância clínica

 12.0 PROCEDIMENTO TÉCNICO
Procedimento Manual

1- Deixar os reagentes atingirem a temperatura ambiente ou a do banho-maria

antes da realização do teste.
2- Identificar 3 tubos de ensaio com "Branco", "Teste" e "Padrão" e proceder:

Tubos Branco Teste Padrão

Amostra  10 L 
Padrão (1)   10 L
Reagente de Cor (2) 1000 L 1000 L 1000 L

3- Homogeneizar bem e incubar os tubos durante 10 minutos à temperatura

ambiente (15-30ºC) ou durante 5 minutos a 37ºC .
4- Ler a absorbância (A) do Padrão (Ap) e do Teste (At) zerando o aparelho com o
Branco em 500 nm.
5- A cor é estável durante 2 horas .
13.0 CÁLCULOS
Ver linearidade

Absorbância do teste
Glicose (mg/dL) = ____________________ X 100
Absorbância do Padrão

100
Fator de Calibração = ____________________
Absorbância do Padrão

Glicose (mg/dL) = Absorbância do Teste x Fator de Calibração

14.0 INTERVALO DE REFERÊNCIA /
VALORES RECOMENDÁVEIS OU DESEJADOS

 Plasma: 70 a 99 mg/dL ou 3,9 a 6,1 mmol/L

 Líquor: 40 a 70 mg/dL

 Líquidos Corporais: > 60 mg/dL (ou diferença entre

glicemia e concentração de glicose no líquido,
desde que não for > 40 mg/dL)
15.0 REFERÊNCIAS (normas de Vancouver)

 Bergmeyer HU. Methods of Enzimatic Analysis, Academic Press 2nd ed.

1205-1214.

 Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Textbook of Clinical Chemistry.

Philadelphia: W.B. Saunders Co. 1994: 932-958.

 Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamento de Química Clínica, 4a Ed -

Editora Guanabara Koogan; 1998.

 Kaplan A, Szabo LL, Opheim KE. Clinical Chemistry: Interpretation and

Techniques. Philadelphia: Lea & Febiger, 1988:288-293.

 Trinder P. Ann Clin Biochem 1969;6:24.

 Trivedi RC et al. Clin Chem 1978;24:1908-1911.

 GLICOSE-PP, Instruções de Uso, Gold Analisa Diagnóstica.

16.0 HISTÓRICO

Versão Descrição Data Elaborado por Aprovado por

Elaboração 20/03/2019
00 do
documento
Revisão com 19/03/2020
Dora Lucia Carrara
01 alterações
Moreti
ortográficas
 17.0 APROVAÇÃO
.
Documento revisado e aprovado pelos responsáveis abaixo, com vigência de um ano

Assinatura do colega Data:___/___/___

Setor Técnico: nome completo de um colega

Sua assinatura Data:___/___/___

Responsável Técnico: seu nome completo

Assinatura da Profa. Juliana Data:___/___/___

Gerente da Qualidade: Profa. Ms. Juliana de A. C. Malanotte