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MAIO 1996 NBR 13680

Clorofila - Prova de identificação

ABNT-Associação
Brasileira de
Normas Técnicas

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NORMATÉCNICA

Método de ensaio
Origem: Projeto 13:005.01-100/1995
CB-13 - Comitê Brasileiro de Alimentos e Bebidas
CE-13:005.01 - Comissão de Estudo de Conservadores
NBR 13680 - Chlorophyll - Identification test - Method of test
Copyright © 1996, Descriptors: Dye. Food
ABNT–Associação Brasileira Válida a partir de 01.07.1996
de Normas Técnicas
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Impresso no Brasil Palavras-chave: Corante. Alimento 1 página
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1 Objetivo 3.2 Ensaio

Esta Norma prescreve o método para prova de identificação 3.2.1 Aplicar solução (1:20) da amostra, dissolvida em
em clorofila. clorofórmio, a 2 cm da base da placa de sílica-gel G para
cromatografia em camada delgada. Após secar, desenvolver
2 Aparelhagem a placa na fase móvel, até a frente desta atingir 15 cm do
ponto de partida.
A aparelhagem necessária à execução do ensaio é a cuba
para cromatografia em camada delgada.
3.2.2 Evaporar o solvente, examinar visualmente as manchas
3 Execução do ensaio separadas e identificar as de interesse pelos valores de Rf
(fator de retenção) e pela cor, como segue:
3.1 Reagentes
a) feofitina “a”: Rf 0,77 e cor cinza-castanha;
Os reagentes necessários ao ensaio estão prescritos em
3.1.1 a 3.1.3.
b) feofitina “b”: Rf 0,75 e cor amarela-castanha;
3.1.1 Clorofórmio p.a.
c) clorofila “a”: Rf 0,50 e cor azul-esverdeada;
3.1.2 Fase móvel para cromatografia:
d) clorofila “b”: Rf 0,63 e cor amarela-esverdeada.
a) hexano: 50%;
Nota: Outras manchas podem ser visualizadas, como betacaroteno
b) clorofórmio: 45%; em Rf 0,81 e xantofila em Rf 0,47 e Rf 0,23.

c) etanol: 5%.
4 Resultado
3.1.3 Placas de sílica-gel G para cromatografia em camada
delgada. A prova de identificação deve obedecer a 3.2.