UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

INSTITUTO DE CIÊNCIAS BÁSICAS DA SAÚDE

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA, IMUNOLOGIA E PARASITOLOGIA

REPLICAÇÃO VIRAL

FABRÍCIO SOUZA CAMPOS*

*Dr, MSc, Medico Veterinário
 Características virais
• Genoma DNA ou RNA
• Na célula hospedeira o genoma viral direciona a
síntese dos componentes necessários para a
produção de novos virions
• Virions são veículos para transmissão do genoma
viral para próxima célula hospedeira ou organismo
• Uma vez dentro da próxima célula, os virions são
“desmontados” iniciando um novo ciclo de infecção
Estratégias comuns entre os vírus
1. Todos os vírus empacotam o seu genoma dentro
de uma partícula utilizada para transmissão a um
hospedeiro

2. O genoma viral contém a informação para iniciar

e completar um ciclo de infecção dentro de uma
célula suscetível e permissível

3. Todos os genomas virais são capazes de

infectarem uma população de hospedeiro,
visando a sobrevivência viral
Estratégias comuns entre os vírus
4. Todos os genomas virais são parasitas
moleculares obrigatórios que somente se tornam
funcionais após se replicarem em uma célula

5. Todos os vírus devem transcrever o mRNA que

será traduzido pelos ribossomos do hospedeiro:

 Então, os vírus são parasitas da maquinaria de

síntese proteica da célula
Como parasitas moleculares obrigatórios, cada método de
replicação pode revelar algo sobre o hospedeiro e / ou vírus
 “Entendendo” os vírus
• Vírus dependem de seus hospedeiros
para sobreviver
Se são muito bem sucedidos e matam
seus hospedeiros, eles podem se eliminar
Se eles forem muito passivos e a defesa
do hospedeiro impedir o seu crescimento,
eles podem ser eliminados
Defesas do organismo
 Genética de “bottlenecks”
• Defesa do organismo ou drogas antivirais
 Objetivo da replicação
• Produzir progênie viral viável
• Consequências
– “Nenhuma” (TTV)

– Doença (Hepatites virais)

– Morte do hospedeiro (HIV)

• Termo replicação em virologia

 Replicação

• Replicação em biologia
– Síntese de moléculas
de ácidos nucléicos
X

• Em virologia
– Todo o processo de
multiplicação viral
 Alguns conceitos
• Infecção produtiva
– Produção de progênie viral viável
• Infecção abortiva
– Ciclo replicativo interrompido
• Susceptibilidade
– Capacidade das células de serem infectadas
• Permissividade
– Ocorrência de multiplicação viral
 Alguns conceitos

• Células suscetíveis e permissivas

– Suportam o ciclo replicativo completo
• Penetração + etapas intracelulares
• Céls não suscetíveis ou permissivas
– Faltam receptores para adsorção e
penetração
– Semipermissivas
– Exceção = transfecção (processo artificial)
 Aplicação prática

Tabela 1 - Conseqüências da infecção de espécies de ruminantes com BoHV-1.

 Veados e renas: células são apenas suscetíveis

 Não permitem a replicação viral: não permissivas Fonte: J. Thiry et al., 2006.
 Outros conceitos
• Espectro de hospedeiro
– Conjunto de espécies animais ou de
diferentes células
• Tropismo
– Predileção por células ou tecidos
• Receptores virais
• Ex.: H5N1
•Em humanos: ácido siálico-galactose: ligações α-2,6
•Em aves: ligações α-2,3
•Suínos: ambos receptores
 Ácido siálico: receptor influenza

Memb
celular
Ligação α-2,3 (aves)
 Etapas da replicação
1. Adsorção
2. Penetração
3. Desnudamento
4. Expressão gênica (transcrição e tradução)
5. Replicação do genoma
6. Morfogênese / maturação
7. Egresso
• Divisão
meramente
didática
Fases de infecção vírus lítico
Vírus lítico
Vírus lítico
Vírus lítico
 1. Adsorção
• Ligação específica das partículas víricas
na superfície das células hospedeiras

Proteínas de superfície
dos vírions (VAPs) Receptores celulares
Vírus nú: proteínas do Proteínas
capsídeo (glicoproteínas)
Vírus envelopados: Carboidratos
glicoproteínas
1. Adsorção
 1. Adsorção
• Vírus que utilizam receptores específicos
– Rinovírus, poliovírus, FMDV
• Vírus que utilizam receptores alternativos
– Herpesvírus, togavírus (rubéola)
– Vantagem evolutiva
• Maior espectro de hospedeiros e células
• Receptores virais
– Vírus DNA (tabela 2) e RNA (tabela 3)
 1. Adsorção
Tabela 2 – Receptores celulares e mecanismos de penetração dos principais vírus DNA
Família Vírus Receptor viral Forma/local de Penetração
 1. Adsorção
Tabela 3 – Receptores celulares e mecanismos de penetração dos principais vírus RNA
Família Vírus Receptor viral Forma/local de Penetração
 1. Adsorção

• Co-receptores: auxiliam na interação

– HIV: o complexo gp120 – gp41 vai se ligar
ao receptor CD4
– E os receptores de citocinas vão atuar
como co-receptores celulares
Co-receptores
 2. Penetração
Principais mecanismos de
penetração dos vírus nas
células hospedeiras:

A) Fusão com a memb. plasmática

B) Fusão após endocitose mediada

por clatrina

C) Fusão após endocitose mediada

por caveolina

D-E) Penetração após endocitose

mediada por lipídios
 3. Desnudamento
• Série de eventos que ocorre após a
penetração
• Exposição do genoma para transcrição /
tradução
• Estar acessível as enzimas
• Vírus DNA: penetração do genoma nos
poros nucleares
 Estrutura dos genomas
• Os genomas virais de DNA ou RNA são
estruturalmente diversos
– linear
– circular
– segmentado
– Fita única de polaridade (+)
– Fita única de polaridade (-)
– Fita dupla
– Fita dupla parcial
 Evolução viral
• Complexos e inúmeros métodos de
infecções com apenas sete tipos de
genomas (DNA ou RNA)
• A composição e a estrutura desses sete
tipos de genomas virais são mais variados
do que qualquer genoma dos reinos
bacterianos, arquea ou eucarióticos
• Diferentes estratégias de replicação são
fontes constantes de pesquisa
Qual o objetivo de ter genoma DNA ou RNA

• Alguns argumentam que durante o processo

evolutivo o genoma de RNA surgiu primeiro

• Atualmente somente os vírus possuem

genomas RNA

• Vestígios de um mundo ancestral de RNA?

• Quando e por que houve uma mudança para

genomas DNA para todas as formas de vida,
porém exceto para alguns vírus?
 GENOMAS VIRAIS
Classificação de Baltimore (1975)
Vírus de DNA fs

Síntese da outra fita

Vírus de DNA fd (±) Intermediário
de DNA fd

Transcrição
Transcrição reversa

Transcrição fita (-) Retrovírus

mRNA RNA fs (+)
Pode ser usado (sentido +)
diretamente
Transcrição fita (-)

Vírus de
Vírus RNA fs (+) Vírus RNA fs (-) RNA fd (±)
Fonte: Madigan, 2004.
Qual informação é codificada em um genoma
viral?
• Produtos de genes e sinais de regulação para:

 A replicação do genoma viral

 Montagem e empacotamento do genoma

 Regulação do ciclo de replicação

 Modulação de defesas do hospedeiro

 Disseminação para outras células e hospedeiros

 Qual informação NÃO é codificada em um
genoma viral?
• Não possuem genes que codificam a síntese
completa de proteína
– dependem da maquinaria celular

• Não possuem genes que codificam proteínas

envolvidas na produção de energia ou na
síntese de membrana

• Não possuem genes que codificam centrômeros

ou telômeros encontrados nos cromossomos
 Qual a estratégia comum entre os vírus
DNA ou RNA
• Os genomas virais devem produzir mRNA que
pode ser lido pelos ribossomos das células
hospedeiras
 Vírus DNA
• Replicação no núcleo
– Exceção: poxvírus (replicam no citoplasma)

• DNA fita dupla: dsDNA (Classe I) maioria

• DNA fita simples: ssDNA (Classe II)
• DNA parcialmente dupla: pdsDNA (Classe
VII)
 Genomas dsDNA: DNA fita dupla
Traduzido

Transcrito Transcrito

Replicado

• Genoma é copiado pela DNA polimerase hospedeiro (polioma,

papiloma)
• Alguns carregam DNA polimerase viral (Adeno, herpes)
Ciclo replicativo dos vírus da classe I - dsDNA
Traduzido

Transcrito Transcrito

Replicado

• Genes cedo: codificam proteínas não estruturais

relacionadas com a interface com o hospedeiro
• Genes intermediários: codificam proteínas não estruturais
relacionadas com a replicação
• Genes tardios: codificam proteínas estruturais envolvidas na
montagem
 Genomas ssDNA: DNA fita simples
Traduzido

Transcrito

Replicado
Replicado

• NÃO codificam a DNA polimerase

• Toda replicação é realizada pela polimerase do hospedeiro

TT virus
Parvovirus B19
Ciclo replicativo dos vírus da classe II - ssDNA
Traduzido

Transcrito

Replicado
Replicado

• Mais dependentes da maquinaria celular

• O genoma de DNA fita simples é convertido em fita dupla
pela DNA polimerase celular
• A RNA polimerase celular transcreve os mRNA virais
• Proteínas não estruturais (enzimas que vão atuar na
replicação e interface com o sistema imune)
• Proteínas estruturais que irão formar o capsídeo viral
 Genomas pdsDNA – fita parcialmente dupla

Vírus da Hepatite B

RNA
proteína

• Genoma ligado a proteínas

• Genoma ligado a uma pequena sequencia de RNA
• Um fita completa e a outra parcial
Ciclo replicativo dos vírus da classe VII - pdsDNA
Traduzido

Transcrito

Replicado Replicado
Replicado
Transcrito

Transcriptase reversa

•Replicação parte núcleo e parte no citoplasma

•RNA polimerase viral (transcriptase reversa)
•Expressão gênica: inicial, intermediaria e tardia
•Quebra do dogma da biologia
 DNA => RNA => X Proteínas
 Vírus RNA
• Replicação no citoplasma
– * Ortomixovírus: no núcleo
• As células não possuem a RNA polimerase
dependente de RNA viral
• Enzima é codificada pelo genoma viral
• Vai sintetizar o genoma de RNA e o mRNA
viral
• mRNA será lido pelos ribossomos da célula
 RNA fita simples
Vírus RNA Maioria

• Vírus RNA (+): genoma “infeccioso”

– Vírus RNA (+) = mRNA
• Vírus RNA (-): não “infeccioso”
• RNA fita simples (+): ssRNA (+) (Classe IV)
• RNA fita simples (-): ssRNA (-) (Classe V)
• RNA fita dupla: dsRNA (Classe III)
• RNA fita simples (+) com DNA intermediário:
ssRNA-RT (+) (Classe VI)
Genomas ssRNA (+): RNA fita simples (+)
Traduzido

Replicado Replicado

Coronavírus: SARS

Febre amarela, dengue, BDVD, Hepatite C

Febre aftosa, Rinovírus, Enterovírus

Encefalite equina, rubéola

Ciclo replicativo dos vírus da classe IV – ssRNA (+)
Traduzido

Replicado Replicado

• Genoma com ORF única e longa

• Origem uma poliproteína que é clivada pelas proteases
celulares e virais e dá origem as enzimas virais
• Dentre elas RNA polimerase viral: replicação do genoma
num intermediário de RNA (-) que é replicado em RNA (+)
Genomas ssRNA (-): RNA fita simples (-)
Replicado Traduzido

Replicado
Replicado

Influenzavírus

Parainfluenza, Sarampo, hRSV,

Pneumo e Metapneumovirus

Vírus da raiva
Ciclo replicativo dos vírus da classe V – ssRNA (-)
Replicado Traduzido

Replicado
Replicado

• Trazem a replicase viral (RNA polimerase)

• RNA (-) => RNA (+) = mRNA
• mRNA sem CAP e cauda de poli A (ir no núcleo)
• Proteínas estruturais e não estruturais
 Genomas dsRNA : RNA fita dupla
Replicado Traduzido

• Muitos vírus com

Replicado
dsRNA são
segmentados
• Reoviridae: 10 a
12 segmentos
(Rotavírus)
Ciclo replicativo dos vírus da classe III - dsRNA (+/-)

Replicado Traduzido

Replicado

• Carregam a polimerase viral

• Produção de mRNA
• Transcrição primária: proteínas não estruturais
• Transcrição secundária: proteínas estruturais
Genomas ssRNA (+) com DNA intermediário
Traduzido
Transcrito
Replicado Replicado

Transcriptase provírus
reversa

• Única família: Retroviridae

• HIV e HTLV (vírus T-linfotrófico humano)
• Replicação no citoplasma e núcleo
• Carregam: RT, integrase, protease
Ciclo replicativo dos vírus da classe VI - ssRNA (+)

• Vídeo exemplificando a replicação do HIV

• Existem cerca de 1016 genomas de HIV no
planeta atualmente

• Com este número de genomas, é

altamente provável que os genomas de
HIV existentes são resistentes a qualquer
uma das drogas antivirais atuais e futuras!
 6. Morfogênese/maturação

• Morfogênese
– Processo de montagem das partículas
víricas
– Ocorre no final do ciclo replicativo

• Maturação
– Aquisição da capacidade infectiva
– Envelopados = aquisição do envelope
 7. Egresso
• Maturação intracelular e egresso dos vírus sem envelope
- Vírus nú já sai pronto do citoplasma (RNA) ou núcleo (DNA)
- Liberados quando ocorre a destruição das células infectadas
 Maturação por brotamento
• Envelope adquirido das membranas celulares internas
- Retículo endoplasmático e complexo de Golgi contendo as
glicoproteínas virais
-Os Herpesvírus podem adquirir o envelope da membrana nuclear
 Brotamento
• Processo de aquisição do envelope

- Envelope é adquirido da membrana plasmática

- Liberação por exocitose com ou sem lise celular

 Sedimentação do aprendizado
1. Quais as etapas da replicação viral?
2. Qual genoma é considerado infeccioso?
3. O que os vírus que se replicam no citoplasma
necessitam?
4. Cite a principal peculiaridade dos retrovírus?
5. Quais organelas podem dar origem ao envelope
viral?
6. Qual a melhor maneira de controlar infecções virais?
Grato pela atenção!!!

camposvet@gmail.com