ÉBP

Cultura celular → n° de células elevado crescem e

multiplicam num

meio de cultura rico em nutrientes

↓
1 -
microbianas
a- animal
> c/ características ≠ 's
z
vegetais
-

1- Escherichia coli , Saccharomyces cerevisiae

;
Pichia pastoris Penicillium chrysogenum
CHO ) HEK29;
2-
Sf 9
Microalga 3-
biorejinaria
;
seep
reptars
Ajugaalimentares
.
L .

; Echinaceaangustifdia
cosmética .
DC

Biorreator de
opunitária
tanque agitado
↳ ambiente controlado p/ otimizar biorreaaobs produção ideal de bioprodutos
fornece para .

regulação
cresc.cc/.--- pH pressão da T e
e-

adição / remoção controlada de nutrientes/produtos prod biomd . .

biomolnomet cel
aquosos ou
gasosos
. .

Mistura Power input Rei

Np
NÉ
→ =
= Di -

diametro do impulsor , m

{ vi -
velocidade de rotação is"
P
power input
→
w

kg/m3
Reynolds → adim
( →

Pa S
massa

viscosidade
especifica
µ
'
.

"↓"
Npr adim
power number ° ""
>
liquido
fase
-
gasosa dispersa
na G. !!;
%bubble
adiarão
ocorre

partículas
{
como
pequenas
de modo a maximizar a eoa ""
inter alrilm')
area
facial ,
↓ (barreira
difusional ) jieloiid
Nota Outros metabolitos de baixo danado limite
peso
:

⑤
molecular ( voláteis) têm tendência a

transferidos p/ a
fase gas .

Transf .
de massa bas -

Liq
↓
✓
MÉT ]
metanol ; etanol ICHACHSOH qi [ Lei difusional de Nerst
"
CH, 0H ; .
.
.
→

(E) (dgas-jcoeftranj.d e
Reação P
Cinética de
Origen Transferiste
IOTR) Kia = ✗

global
"

pq -

pressão parcial de Q fase

na massa T

produção de energia catabolismo

gasosa
( no ar v0.21 atm)

produção de componentes celulares Anabdismo Qgas fluxo de gas (( )%)

-
m
CÊ =pa /
H Solubilidade do Q ML-3
↓
taxa de reação especifica V volume liq no reator m meio
Henry 's Law
aq
- →

G- SING DW
. .

os, taxa de consumo h)

área de secção reta ( m2)
✗
especifica A
8mg / L em /água
: -

"
ar
-

taxa crescimento h"

µ especifica g-DW /(g- Dwxh)
: =
a 20°C

taxa volumétrica de reação 902 Ka ( loa Cost ) = OTR

Taxa de transj de 02
= -

Se / ( Hh) Était -4mg force das bolhas de

rs, os, ✗ g- gás
.

= ✗

"
g- DWII liquido
✗
" o
rx
µ para
= ×

ML -31--1
 Classificação dos sistemas birraciais
↓ Unstructured/
dlnsegregated → substrato e
produtos
da estrutura interna celular
Dependente extracelulares
Biomassa
das
propriedades individuais da célula população Cltxoptf
→
e na

Glucose → ( 6H12 06

Urea → ( shaolin

Rn :
crescimento celular c)
-
-

formação concomitante de Ra :

formação de produto dissociado

- -

(P )
produto ""
do crescimento celular
→ nação associada ao " " "
A : substrato metabolizado pl
bioreaça
,

Cinética de
"
unstructured
"
Rn : Morte da biomassa manutenção celular

_ Hans and
Moral
µ fumar
-

_
Leuenspiel

.li?fEF?-Fl-w!?tT-E;:E!,F )
Ks Es]
1
+

uma
Extended ÍT Ü€
Humor i. ,
Ei + Es;] i :p
Kpi + [Pi ]

Andrews
µ femax
-
_

Kgt [5) + TEI

KIP

Balanços materiais macroscópico

↓ Gasout
Balanço Material da Biomassa ↑
Fin
✓ Tout
[× ] biomassa gll ✓→ -
→ cone . da → L

¥-4 =p
XV - kd ✗ ✓ + Fin Xin - Foutx +
9- ✗
✓ [
gh
"
]
↑ Oasis
(remoção) (transf
(morte ) ( alimentação)
.

(crescimento)
(variação)
gas G) reator
-

→
-
perfeitamente agitado
]
cinética de reação
volumétrica

d¥ Faut volume VEL] da

fase liquida não é cte Doin guti ]
'
=
Iin - O .
= r + -
Da +
q [

DA taxa volumétrica termo

diluição
taxa
detransf .

acumulação de
produção de
gas liq
-

volumétrica
de massa

-1h -1]
¥ MX kd ✗ Dxin DX qx [gl
- + +
= -

↳ =
Fin - Faut

D= Fin / V → taxa de Diluição [ h" ]

fase liqlgl ]
"

C. → Vetor de E] na

vetor de taxa uol.de reação [gl ]

" "
✓→ h

Cin → vetor de [ 3in na corrente liq [gl ]

.
"

9- →
vetordetransf.de massa v01 da -

fase gasosa p/ fase líquida -41-11-7

a
MOdofed.ba/-chddt-
Modopãth Gas out I
↑ Gasaut
FÉ -74 ! ¥
r + Doin De 9
↑
=
-
+

= r + DÁ -

* +
q
.
.

I tout ¥7
¥ Fins
= Fin
existe D ↑ aasi
-

Foout Não
¥ =
FEI -

,
i. D= #
nlv ↑Gasin
Modo transiente CSTR Modo estado estacionário
¥ -7in Faut
igual dá ddcç
tout Tudo
Tudo
aiai ↑
apenas =
Fin -
= O
igual apenas = o
dt
-

↑ 2
= O

¥ faut - → r + Dcin Da -
+
g-
= o

Gasin ↑ ↑

Processos de células imobilizadas

Contrariar de cultura de células células livremente )
meios
suspensas (onde as se movem num meio liquido ,

células estão
as
ligadas
sólido
a:

(a) à sup de um .

(b) dentro dos poros de um sólido

outras celulares
d) umas às
formando grandes grupos de agregadosdevido ↓
ao seu tamanho existe uma
potenciais
Imobilização limite coexistente
,
camada a

limitações de de massa através da

transj
Auto imobilização células ligam umas às camada limite e/ou dentro dos poros
.

• -
-

se

outras
formando pellet lenuioonmental
celularesolho visíveis a nu
biqrocesses)
Imobilização numa superficie sólida bio filmes de /multi camada
formando mono
• -

É necessário um transportador sólido biocompatível .

células
ligam covalentes
sup
sólida
-

se à
por . adsorçao fisica
{ iônica
por ligações
ou
→ Culturas de mãocamadas
são
geral) encontradas em
bio células animais
Contenção
de
processos
•
mecânica Recipiente poroso c/tamanho poros de
tamanho das células mantêm as células num volume
que
menor o

confinado
•

Aprisionamento numa
matriz porosa → 1) as células
livre intraparticular
crescem dentro dos poros
ocupando o
espaço

2) as
partículas sólidas são
polimerizada durante
o crescimento
reticulado células
O
polímero prende assim as

Biorreator de células imobilizadas células modo contínuo

imobilizadas
: são cultivadas
gerayem .

4-
CSTR
; tubulares, heitofhidzado; esquema dede
imobilização
membrana
 Problemas Difusionais
células imobilizadas numa
matiz porosa A
competição entrede concentrações
cinéticas de reação
as
difusão e
-

t geram gradientes
-

Substrato limitante ,
S →
transportado através da Sb -
cone . de Subs dissolvida em massa
fronteira por difusão Ss -
cone .
de Subs dissolvida na
superficie [ Kgm ]
-

→
transportado ao longo dos
scr) -

cone de Subs dissolvida dentro da matriz

poros da
matriz por difusão
contacto
→
quando
reage células em

c/ as no interior dos
poros da
matriz .

Cinética intrínseca
↓ taxa é determinada
a
,
rs ,
segundo concentração
lei cinética a

intrínseca ( Michaels Marten modell a

-

,
NÉ .

Uma
v7 que S varia c/ posição
a
,

de Substrato S [ kgm-9 e a cone de biomassa ✗ [rgm.z.ae ]

.

. r também irá variar c/a posição

tomarão
rg (r) =

kg + scr)
✗ =

↳§{ [kgm-%adh.it

P
{P
→
☐ G) ≈ rsmax → ordem o
P G-=
(adin)

rsG) ≈
Emoji ordem 1
→
scr) →

Taxa de reação observada de S ,

voos s é
,
a taxa de reação intrínseca média sobre o volume da
partícula ,
V .
A dependência c/ posição a
partícula desaparece
da .

É
portanto
,
taxa de , uma reação representativa do volume total de
partículas [ kgm-7.ua h ]
"

É chamado de observado robs LÊ rs (r ) (

4%2dr)
¥ dsiy
→ s = >
=
,
sistema bath vp
porque em

relacionada
(c) volume Vr) é
direta rs (r)
4TH dr × r
→
rir

c/ a concentração em massa de ✓obs S =

←◦

,
substrato .

→
 Transferência de massa interna assumindo
que o diametro
poros dos é
pequeno, então
o
fluido dentro dos mesmos está completa/ estagnado
e
portanto transporte do substrato
o ocorre

A- taxa de Hicks Law)

difusão de S na
posição r: unicamente
por difusão >
,
( adin )
micro porosidade
constrição Cadin)
9-slr) =
-

Ds e [ gm-2s -1
] ✓✓
DS
,
dr # Ds < Di
↓ ,
e =

Difusividade efetivadas na
matriz porosa [ m %] T
↓ ↓
tortosidade
molecular de S Em %]
( Adin) Difusividade em massa

externa
Transferência de massa O transporte de S ao
longo da camada limite é dado pela
concentração linear
Lei de
Difusão de Nernst resultando numa

c/ declive de= de lkrnst

coef -

dif .
.

Ns kgs (Sb Ss) [

Nernsttdiffusion Law =

↓
-

Kgm-2s-11

Nota :
coef .

Kris
difusaomokadardepthogtbeb.e.Rcrit.FI?-
' ✗
A- ( IÉ)
=
= 1-

R2
GDsesb-xpi.co#F
-

Fator de
↓
efetividade (adin)
M , rsmaj.ru
Interno
é razão entre taxa

}
a robs s e a que
intrínseca
,

deveria ser observada caso a resistência → taxa cinética

interna
partícula vs (Ss )
à
transf.de massa
seja eliminada .

para as
☐ na
Sap .
da

{
7- = rodá ≤1 ①
fator de
efetividade Easton (adin) YE
rs (Ss ) ↓ da
a taxa
de reação à
superficie partícula
razão entre rslss) e a taxa deveria ser observada
que
externa
caso a resistência à
transf.de massa

seja eliminada rsls B)

ME
=

%↳ ≤1

Coeficiente de
efetividade global y
.is?:?!Fn;:?!I:+.On..acini .intrins
" FÉ Y =
NI ✗
ME
"

interno externo para as concentrações em

massa

Módulo de Thide observado ∅ Weisztlodulus adim →

razão entre a taxa de reação observada
e ataxa de
difusãointerna
→ Detalhes sobre a reação não são baseada em

necessários propriedades
medidas
 O
fator de
efetividade
característico
interna
módulo Yi
mostra
thiele obs ,
um
padrão de variação
geometrias de
,
de
com o
reação
∅
p/ dif
dif
.

ordens de Kslss
P
. =
,

Criterio de Prater
↓
Weisz -

p/detodas geometrias
as e/ou todas as ordens
reação .

Pode ser usado p/a avaliação rápida do

sistema independente da e da lei
geom
.

,
cinética intrínseca

Importante determinar qual a concentração ∅ < 0.3

lfint ≈ 1
Ilimitados difasionás
minima de substrato dentro da
partícula negligenciarei
5min
p/ substratos algum 93 & 3 situaçao intermédia
principaltotal
→ com < <

células (q dissolvido abaixo ( limitações dif fortes)

{
impacto nas
critico
qnt << 1

¥
vaor ,
∅
§
>
o
= ≤ Me ≤
% =

Esfera ∅ 0,667 5min = O

É-É
⑦ < 0,667 S min = Ss ( 1- 3/2 ∅) 7-
=

1+
p
Ts Correlação de
Moo
Yang & Kobayashi
-

Ilatplate ∅ ≥ 2 5min = O
p/ todas geometrias
as

∅ <2 5min = Ss ( 1- 1k$) c/ erro <9%

As limitações de transf de interna são minimizadas por 1

q
massa ∅ → o →

↓
1. Decrease the size
of the partido dp ,

partículas minimizam
↓
limitações int
fator ⊕ desde
critico ∅ ✗ dp? pequenas as
de
transf de massa .

2. Decrease ↓
rçobss limitações de transf de também diminuem o
minimiza as massa int . mas desempenho do reator .

Uma boa
estratégia é
minimizar a concentração celular × e aumentar a concentração das
partículas
(Your)

3.IM?esEYher um método de imobilização diferente c/ maiorporosidade e menor tortuosidade

< *"*
Aumentara [] de Subs dissolvido SB ,
.

,
que indireta aumenta a [] de Subs
à
superficie da
partícula Ss
Transf . de massa externa

de S da camada limite
otransp
é dado pela
.

longo
ao

lei de
difusão de Nernst

Minimização da limitação detrans de massa eoot

f. ✓
5¥ tag %b%- esfera 4g Nos
1 + n n - =
= o
-

1. Diminuir ( Pp / Ap) S
esfera =
41%2

Quanto ⊕
paquete aparteado ,
⊕
/ ) ⑦
pequeno Cvp Ap h
,
pequeno e
esct ( Ss Ss)
⑦
pequeno têm de
transf
de ≈
a .
.
massa .

2. Diminuir rolos s ,

minimizaas limitações detrans-f.de massa int . mas também diminuem o desempenho do reator .

Uma boa
estratégia é minimizar a concentração celular × e aumentar a concentração das
partículas
Às (Vp/ Vr)
s
,
sxx)

3. Aumentar SI
Quanto ⊕ [ ] de Subs dissolvido Sb ⊕
for a .

,
pequeno será

}
,

será a limitação externa de

transj
R ⊕
e
pequena .

de massa .
( ≈ ) Ss Ss

4. Aumentar Kas
Melhorar os patrões de aumentar turbulência
fluxo →

→
a

diminuir a espessura da
camada limite
Determinação dos parâmetros intrínsecos cinéticos

linearWeaver Burk
-

Diagrama
Partículas de
tamanhos ≠'s
mostram curvas
muito -1-5

Em
alguns
linearidade
casos

não
,

é
a

observada ( R ri
para
Método exp Slides HÁ.
 Módulo de Thiele Generalizado
-

[
→ adin →
razão entre as taxas de
o
reação e
a cinética de reação é o limitante
difusão
∅ → →
passo
→ o→
a cinética de
dj
é o limitante
passo
. .

válido
p/ todas as leis cinéticas egeometrias

Geometria
Esférica
Balanço material intraparticular
5¥ c/ [] = Scr) sobre uma concha
" "

esférica na
posição r e o volume
/ /
infinitesimal (41%4)
Assumindo o E. E
. → Acumulação = o

Din ✓
De
s ¥→
↑
partia I Differential
Eq .

O Não varia

ao
longo do
→ ordem O
} raio R

E. E
Ordem 0 :
rs = -

rs ,
mãe
, quando f- Kstss → o tempo ! ! !
BI ]
.

quando f- Ksks
1ª ordem
Borges
O
:
rs =
.
→
,

solução analítica em EE .
 Geometria Flat Plate
" "

BI →

flat plate poroso c/ area ,

A e
profundidade ,
b

[3=56-1 vá Afz
c/
posição
→ e = na Z

Assumindo o E.E. Acumulação

VIII. ◦

a- Nao varia do tempo LEE)

Rede Metabólica
structured /
unsegregated - ✓àriaueis intra e extra cel
células ←
↑"
→ todas as são
iguaisgramsog
NY ¥ Dryweight
"
h

jÃ
7¥ g.
= ""
MMM
Cinética de Reação Intracelular sistemof MODE 's
] m
espécies
Lei cinética de Michaels Mentem
generalizada
-

/
Lei da velocidade modular
de

1
extensão de UM .

p/ reac genérica
.
de vários Subs

ns Substratos si
.

equilibrio
prod .
em

Assume mea de reac enzimático →

ligam rapido se em ordem
]
.
-

aleatória
np produtos pj
.

A cinética de Ação de Massa Generalizada (GMA) são aproximações

não ligadas a um mecanismo. A velocidade da reação é proporcional à
probabilidade de colisão dos reagentes. Esta é por sua vez
proporcional à concentração de reagentes elevada à sua
molecularidade. GMAs podem ser construídas automaticamente a partir
da estequiometria. Podem originar rapidamente modelos cinéticos de
grande escala com um número relativamente baixo de parâmetros.

Modelo de biorreator estruturado

BEL-bateh.mn
AI

✗✗ ✗✗

Unstruotured/ Variáveis de estado

segregated → extracelulares
células (tamanho/ morfologia )
→
população de ≠ 's . .
.

Pop .
de ≠ 's tamanhos ,
L → [ 1min , Lmax] → distribuição ,
✗ lht
 Equação do Balanço
populacional

¥
O

Modelo do Biorreator
segregado

})_ATTTmTmãomomO
ligar PBE

População de ≠ células
A mostra
imagemtempo
a

evolução no da

distribuição de células CHO

4 ≠ 's níveis
para
de
experiências
osmótica
pressão
.

↓
uma sub
população / de
variava
> dian
todas
apareceu
em
grau ,
em as exp .