RESUMO - PROBLEMA 2
4. Organelas – “pequenos órgãos” – são
Problema 2 - ASE2: Cientistas descobrem como a
mitocôndria regula o cálcio nas células.
OBJETIVOS:
Caracterizar o citoplasma e o citoesqueleto.
ross 60-66
As células do corpo são circundadas pela solução
salina diluída do líquido extracelular. A membrana celular
separa o meio interno da célula (o líquido intracelular) do
líquido extracelular.
Internamente, a célula é dividida em citoplasma e
núcleo. O citoplasma inclui todo o material envolvido
pela membrana celular, exceto o núcleo. Ele possui
quatro componentes:
1. Citosol, ou líquido intracelular: é um líquido semi
gelatinoso separado do líquido extracelular pela
membrana celular. O citosol contém nutrientes e 6
proteínas dissolvidos, íons e produtos residuais. Os
outros componentes do citoplasma – inclusões, fibras e
organelas – estão suspensos no citosol.
2. Inclusões são partículas de materiais insolúveis.
Algumas são nutrientes armazenados. Outras são
responsáveis por funções celulares específicas. Essas
estruturas são, às vezes, chamadas de organelas não
membranosas.
3. Proteínas fibrosas insolúveis formam o sistema de
sustentação interno da célula, ou citoesqueleto.
compartimentos delimitados por membrana que têm
papéis específicos a desempenhar na função geral da
célula. As organelas trabalham de maneira integrada,
cada uma assumindo uma ou mais das funções
celulares.
Citoesqueleto:
O citoesqueleto celular é uma rede de proteínas
fibrilares organizadas em filamentos ou túbulos.
Formado por três tipos de filamentos principais – os de
actina, os intermediários e os microtúbulos - e vários
tipos de proteínas acessórias classificadas como
reguladoras, ligadoras e motoras.
Filamentos de actina: entre suas funções mais
importantes está a de proporcionar motilidade às células.
Filamentos intermediários: são compostos por
proteínas fibrosas e sua função principal é mecânica.
Auxiliam o estabelecimento e a manutenção da estrutura
tridimensional da célula. Eles dão sustentação à célula.
Além de formar o arcabouço tridimensional deformável
da célula, ancorar o núcleo em seu local específico,
fornecer uma conexão adaptável entre a membrana
célula e o citoesqueleto, fornecer um arcabouço
estrutural para a manutenção do envoltório nuclear,
assim como a reorganização pós-mitose.
Microtúbulos: são estruturas tubulares rígidas que se
originam do centrossomo (dupla de centríolos no
núcleo). Com os filamentos de actina, têm a função de
deslocamento das organelas pelo citoplasma. Além
disso, os microtúbulos constituem as fibras do fuso
mitótico durante a divisão celular.
As proteínas reguladoras controlam o aparecimento, o
alongamento, o encurtamento e o desaparecimento
dos três filamentos principais do citoesqueleto.
As proteínas ligadoras conectam os filamentos entre si
e com outros componentes da célula;
As proteínas motoras servem para transportar
macromoléculas e organelas de um ponto para outro
do citoplasma e para fazer com que dois filamentos
adjacentes e paralelos entre si deslizem em direções
opostas.
As moléculas precursoras de proteína são sintetizadas
pelos ribossomos no citoplasma e se polimerizam para
formar os componentes do citoesqueleto. Ele é
responsável pelo formato da célula e tem influência em
outras importantes funções.
Caracterizar as organelas de acordo com sua
morfologia e função.
 As organelas incluem os sistemas de membrana da
célula e os compartimentos delimitados por membrana
que realizam as funções metabólicas e de síntese (que
exigem energia) e de geração de energia da célula, bem
como componentes estruturais não membranosos.
Todas as células têm o mesmo conjunto básico de
organelas intracelulares, que podem ser classificadas
em dois grupos: (1) organelas membranosas, com
membranas plasmáticas que separam o ambiente
interno da organela do citoplasma, e (2) organelas não
membranosas, desprovidas de membranas plasmáticas.
As membranas das organelas membranosas formam
padrões vesiculares. Essas configurações de membrana
aumentam acentuadamente a área de superfície onde
ocorrem reações fisiológicas e bioquímicas. Os espaços
cercados pelas membranas das organelas constituem os
micro compartimentos intracelulares, nos quais
substratos, produtos e outras substâncias são
segregados ou concentrados.
Além disso, cada tipo de organela contém um conjunto
de proteínas únicas; nas organelas membranosas, essas
proteínas são incorporadas às suas membranas ou
sequestradas dentro de seus lumens. Por exemplo, as
enzimas dos lisossomos são separadas da matriz
citoplasmática por uma membrana resistente a enzimas
específicas, visto que suas atividades hidrolíticas são
deletérias para a célula. Nas organelas não
membranosas, as proteínas específicas organizam-se
geralmente em polímeros que formam os elementos
estruturais do citoesqueleto.
Organelas membranosas:
- Endossomos:
O MET revela a existência de compartimentos
delimitados por membrana no citoplasma, associados a
todas as vias endocíticas do transporte vesicular. Esses
compartimentos, denominados endossomos jovens, são
restritos a uma porção do citoplasma nas proximidades
da membrana celular onde ocorre fusão de vesículas
que se originam da membrana celular. A partir daí
muitas vesículas retornam à membrana plasmática. No
entanto, grande número de vesículas que se originam
dos endossomos jovens seguem um trajeto até
estruturas mais profundas no citoplasma, denominadas
endossomos maduros. Estes últimos, em geral,
amadurecem em lisossomos.
Os endossomos podem ser considerados como
organelas citoplasmáticas estáveis ou como estruturas
transitórias, formadas como resultado da endocitose. Os
que são destinados a se tornar lisossomos recebem
enzimas lisossômicas recém sintetizadas, que são
direcionadas por meio do receptor de manose-6-fosfato
(M6P).
- Lisossomos:
O lisossomo representa um compartimento digestivo
principal na célula que degrada macromoléculas
derivadas de vias endocíticas, bem como da própria
célula, em um processo conhecido como autofagia.
Eles contêm uma coleção de enzimas hidrolíticas e
são circundados por uma membrana singular, que
resiste à hidrólise pelas suas próprias enzimas. A
membrana lisossômica dispõe de uma estrutura
fosfolipídica incomum que contém colesterol e um lipídio
peculiar, denominado ácido lisobifosfatídico. As
proteínas estruturais da membrana lisossômica são
classificadas, em sua maioria, em proteínas de
membrana associadas a lisossomos, glicoproteínas da
membrana lisossômica e proteínas integrais da
membrana lisossômica. Elas representam mais de 50%
do total das proteínas de membrana dos lisossomos e
são altamente glicosiladas na superfície luminal. As
moléculas de açúcar cobrem quase toda a superfície
luminal dessas proteínas, protegendo-as, assim, da
digestão pelas enzimas hidrolíticas.
A membrana lisossômica também contém proteínas
de transporte, que transportam os produtos finais da
digestão (aminoácidos, açúcares, nucleotídeos) para o
citoplasma, onde são usados nos processos de síntese
da célula ou sofrem exocitose.
Autofagia:
Uma das funções mais importantes dos lisossomos é
a autofagia. Eles realizam a degradação de organelas e
proteínas que são indesejadas para a célula. É muito
importante no processo de crescimento e
desenvolvimento celular, além de auxiliar em
momentos de estresse, como privação alimentar e
infecções. A autofagia tem dois subtipos, as seletivas e
as não-seletivas.
• Seletivas: cargas específicas são empacotadas
dentro dos autofagossomos que tendem a conter pouco
citosol, e sua forma reflete a forma da carga. A autofagia
seletiva medeia a degradação de mitocôndrias,
ribossomos e retículo endoplasmático que estão
debilitados ou indesejados; ela também pode ser
utilizada para destruir micróbios invasores.
• Não-Seletivas: uma porção do citoplasma é
sequestrada em autofagossomos. Pode ocorrer, por
exemplo, em condições de privação alimentar: quando
os nutrientes externos são limitados, os metabólitos
derivados da digestão do citosol capturado podem
ajudar a célula a sobreviver.
- Proteossomo:
 Além da via lisossômica de degradação proteica, as
células têm a capacidade de destruir proteínas sem a
participação dos lisossomos. Esse processo ocorre
dentro de grandes complexos proteicos citoplasmáticos
ou nucleares, denominados proteossomos.
Representam complexos de proteases dependentes
de ATP que destroem proteínas especificamente
marcadas para essa via. A degradação mediada por
proteossomo é usada por células para destruir proteínas
anormais que estão inadequadamente dobradas,
desnaturadas ou que contêm aminoácidos anormais.
Essa via também degrada proteínas reguladoras
normais de vida curta, que precisam ser rapidamente
inativadas e degradadas.
- Peroxissomo:
Fisicamente parecidos com os lisossomos, formados
por auto replicação ou brotamento do REL.
Essa organela contém grande quantidade de enzimas
oxidativas que realizam a produção e decomposição de
peróxidos de hidrogênio (H2O2 – Água Oxigenada),
importante para a realização de várias funções
metabólicas. As enzimas mais comuns dos
peroxissomos são a catalase, a D-aminoácido oxidase, a
urato oxidase e as responsáveis pela BETA-oxidação
dos ácidos graxos. Por conta desse processo de
oxidação, é umas das organelas que mais consomem
oxigênio.
Função:
• Desintoxicação celular;
• Formação e decomposição do peróxido de
hidrogênio;
• Oxidação do ácido graxo para formação da
acetil-coenzima A, que é exportada para as mitocôndrias
e está presente no ciclo de Krebs.
• Catálise das primeiras reações na formação de
plasmalogênios, que são a classe mais abundante de
fosfolipídeos na mielina.
- Retículo endoplasmático rugoso:
Com o MET, o RER aparece como uma série de
sacos achatados delimitados por membrana e
interconectados, denominados cisternas, com partículas
ao longo da superfície externa da membrana. Essas
partículas, denominadas ribossomos, estão fixadas à
membrana do RER pelas proteínas de ancoragem
ribossômicas. Os ribossomos medem 15 a 20 nm de
diâmetro e consistem em uma subunidade pequena e
outra grande. Cada subunidade contém RNA
ribossômico (rRNA) de diferentes comprimentos, bem
como numerosas proteínas diferentes.
- Retículo endoplasmático liso:
Funções:
• Produção de lipídios (principalmente os fosfolipídios
da membrana, que se aderem à face citosólica e só vão
pra face externa por flip-flop),
• Síntese de esteróides (pregnenolona é o precursor
de hormônios androgênios, estrogênios ou corticoides
suprarrenais),
• Desintoxicação (enzimas neutralizam substâncias
tóxicas e as convertem em substâncias hidrossolúveis.
REL muito presente nos hepatócitos. A desintoxicação
se dá por coagulação, oxidação, hidrólise, conjugação
com o ácido glicurônico, etc.)
• Armazenamento e liberação de cálcio:
especialmente importante em células musculares, nas
quais o retículo endoplasmático liso é chamado de
retículo sarcoplasmático; ocorre liberação e recaptação
de Ca2+, de modo que a liberação causa a contração
das miofibrilas e a recaptação causa o relaxamento.
Os hepatócitos (células do fígado) apresentam grande
quantidade de RE liso. Esse RE liso apresenta enzimas
em sua membrana que sintetizam os componentes
lipídicos das lipoproteínas, as quais carregam lipídeos
para outras partes do corpo pela corrente sanguínea.
Além disso, a membrana desse RE contém enzimas que
catalisam uma série de reações que tiram a toxicidade
substâncias lipossolúveis e de vários compostos
danosos produzidos pelo metabolismo.
- Complexo de golgi:
Funções:
• Armazenamento de substâncias;
• Recepção, em sua face cis (formadora), de
proteínas sintetizadas no retículo endoplasmático e
alteração destas, finalizando as modificações proteicas
pós-tradução;
• Empacotamento e liberação, pela face trans,
(maturadora) de vesículas que contém as proteínas
modificadas; algumas destas vesículas despejam seus
conteúdos em outras partes da célula onde serão
usados. Outras se fundem à membrana plasmática,
disponibilizando as proteínas necessárias para a
membrana e secretando outras proteínas para o meio
extracelular;
• Ele também tem a capacidade de sintetizar certos
carboidratos que não são formados no retículo
endoplasmático como na formação de grandes
polímeros de sacarídeos ligados a pequenas
quantidades de proteína; os exemplos mais importantes
incluem o ácido hialurônico e o sulfato de condroitina.
Estrutura: Formado por unidades funcionais
chamadas dictiossomos, que são o conjunto de cisternas
e túbulos interconectados. É dividido em 5 regiões:
 • ERGIC: é um acúmulo de vesículas e túbulos
formados pela fusão de vesículas de transferência
originárias da cisterna final do REG.
• Face cis: Mais próxima do REG, tem forma convexa,
é a face de entrada.
• A face medial (face intermediária): Região
intermediária que conecta as faces cis e trans.
• A face trans: Forma côncava, é a face de saída, a
proteína modificada está pronta para ser empacotada e
enviada para seu destino.
• Rede trans: lado distal do complexo de golgi, é a
porção final que media a saída das substâncias com os
demais destinos.
- Mitocôndrias:
As mitocôndrias estão em todas as áreas
citoplasmáticas de cada célula, mas o número total por
célula varia de menos de cem até vários milhares,
dependendo da quantidade de energia necessária para
a célula.
Funções:
• Realizar a respiração celular e liberar gradualmente
a energia das moléculas de açúcares e ácidos graxos
provenientes da alimentação, produzindo calor e
moléculas de ATP;
• Remoção do excesso de cálcio do citosol (a Ca2+
ATPase, proteína transportadora da membrana interna
das mitocôndrias, bombeia o Ca2+ para o interior da
mitocôndria);
• Síntese de esteróides (o colesterol captado pelas
células é convertido em pregnenolona, e essa é enviada
para o retículo endoplasmático, onde serão sintetizados
os hormônios esteróides
• Síntese de aminoácidos (a partir de algumas
moléculas geradas no ciclo de Krebs, nas mitocôndrias
dos hepatócitos, há a possibilidade de produção de
aminoácidos por diversas vias metabólicas.
• Morte Celular (o citocromo c é liberado do espaço
intermembranoso mitocondrial para dentro do citoplasma
da célula, regulado pela família das proteínas Bcl2 e
assim inicia a cascata de reações enzimáticas
proteolíticas que levam à apoptose.
Estrutura: Compostas por duas membranas, de modo
que a membrana interna se projeta para o interior da
mitocôndria dando origem às cristas mitocondriais.
Entre as cristas mitocondriais existe uma matriz amorfa,
rica em proteínas e com pequena quantidade de
DNA e RNA. O DNA mitocondrial se apresenta como
filamentos duplos e circulares.
As mitocôndrias se acumulam nas partes do
citoplasma em que o gasto energético é mais intenso.
Nas células não renováveis ou com interfase
prolongada, as mitocôndrias envelhecidas são
degradadas por fagolisossomos, mas seu número se
mantém estável porque se formam outras mitocôndrias,
por meio de fissão binária.
- Núcleo:
Funções:
• Armazenamento do material genético;
• Local de ocorrência da duplicação do DNA e da
transcrição (síntese de RNA mensageiro, primeira
etapa da síntese de proteínas);
Estrutura: envolta pela carioteca, a qual é composta
por duas membranas concêntricas que se unem ao
nível dos poros, gerando uma membrana externa e
outra interna. Os poros permitem a comunicação do
interior do núcleo com o citosol e são compartimentos
complexos. Possuem uma parede cilíndrica composta
por oito colunas periféricas; proteínas de ancoragem
para afixa-los; proteínas radiais, permitindo uma
flexibilização necessária na entrada e saída de
substâncias; fibrilas protéicas, implicadas na passagem
de substâncias pelo poro.
Nucléolo: região que pode ser vista no interior do
núcleo e possui formato arredondado. O nucléolo é
formado, principalmente, por RNA ribossomal e
proteínas. Esse RNA é sintetizado a partir de instruções
do DNA. No nucléolo, são formadas as subunidades
ribossomais. Para que isso aconteça, proteínas
importadas do citoplasma devem unir-se ao RNAr,
levando à formação de subunidades grandes e
pequenas que formam um ribossomo.
Organelas não membranosas:
- Ribossomos:
Função:
Realizar a síntese de proteínas (tradução de RMAm
em cadeia de aminoácidos).
Estrutura: Compostos por duas subunidades, uma
maior (40S) e outra menor (60S). Cada uma dessas
subunidades é composta por um RNAr e mais um
determinado número de proteínas. A subunidade maior é
dividida nos sítios de ligação A, P e E. O sítio A recebe o
RNAt e liga-o ao RNAm; O sítio P faz a ligação peptídica
entre os aminoácidos que vão compondo a cadeia
polipeptídica da proteína em formação; O sítio E
libera o RNAt.
- Centríolos:
Cada centríolo consiste principalmente em nove
estruturas tubulares paralelas, organizadas em forma de
cilindro. O centrossomo ou diplossomo é constituído por
um par de centríolos e uma substância aparentemente
amorfa que os circunda, a matriz centrossômica.
Auxiliam na separação do material genético (formação
do fuso acromático) e na conclusão da citocinese na
divisão celular e podem formar cílios e flagelos.
Inclusões:
As inclusões das células não possuem membranas
limitantes, de modo que estão em contato direto com o
citosol. O movimento de material entre inclusões e
citosol não requer transporte através de uma membrana.
Os nutrientes são armazenados como grânulos de
glicogênio e gotas lipídicas. A maioria das inclusões com
funções que não o armazenamento de nutrientes é
constituída de proteínas ou combinações de RNA e
proteínas
Explicar as etapas da respiração celular.
A produção de energia na célula consiste na formação
de moléculas de adenosina trifosfato, que armazena em
suas ligações químicas quantidades de energia. Quando
a célula precisa de energia para que funcione uma
bomba de sódio e potássio, por exemplo, a ATP é
quebrada por hidrólise, e a energia de ligação entre dois
grupos fosfatos é liberada. Essa hidrólise dá origem a
uma adenosina difosfato (ADP), que pode ser reutilizada
pela célula para a formação de uma nova molécula de
ATP por meio da adição de um grupo fosfato;
A molécula de ATP não pode ser estocada, ela precisa
ser utilizada praticamente de imediato pela célula. Dessa
forma, para o estoque de energia em longo prazo, a
célula utilizará as moléculas de carboidrato e de lipídios.
A membrana interna da mitocôndria apresenta a
proteína carreadora de ADP/ATP. Esse carreador lança
o ATP produzido na matriz através da membrana interna
para o espaço intermembranas, a partir do qual ele se
difunde ao longo da membrana mitocondrial externa
para o citosol. Em troca, o ADP passa do citosol para a
matriz para ser reciclado em ATP.
Respiração Celular
1. GLICÓLISE: Ocorre no citoplasma.
Quebra de 1 molécula de glicose em 2 moléculas de
piruvato. Libera H + que é capturado por aceptores de
hidrogênio (NAD) formando 2 NADH2. Assim, produz 4
moléculas de ATP.
A quebra da glicose consome 2 ATP, gerando um
saldo energético de 2 ATP. É a única etapa da
respiração que consome ATP.
2. CICLO DE KREBS (CICLO DO ÁCIDO CÍTRICO):
Ocorre na matriz mitocondrial, de acordo com as
seguintes etapas:
a. Cada piruvato (ácido pirúvico - C3H4O3)
combina-se com a coenzima A, formando
acetil-coenzima A, entrando no ciclo;
b. A acetil-coA reage com ácido oxalacético,
formando o citrato por meio de uma reação catalisada
pela enzima citrato sintase;
c. O citrato é desidratado e hidratado em seguida,
com o auxílio da enzima aconitase, gerando o isômero
isocitrato;
d. O isocitrato perde um hidrogênio com o auxílio do
NAD, que é transformado em NADH, e é descarboxilado
(-CO2). Essas reações são catalisadas pela enzima
isocitrato desidrogenase e geram o α-Cetoglutarato.
e. O α-Cetoglutarato sofre uma reação semelhante à
anterior, com o auxílio da α-cetoglutarato desidrogenase,
formando mais uma molécula de NADH e perdendo um
hidrogênio e um carbono com a geração de um
composto de apenas quatro carbonos que se combina
imediatamente com a coenzima A, formando o
succinil-CoA, um composto instável;
f. Em reação catalisada pela succinil-CoA sintetase, o
succinil-CoA gera energia ao perder a coenzima A e
substituí-la por um grupo fosfato, que logo é transferido
ao ADP para formar ATP. A molécula de quatro carbonos
formada nessa etapa é o succinato.
g. O succinato perde dois hidrogênios e gera o
fumarato, com o auxílio da succinato desidrogenase. O
FAD recebe os dois hidrogênios, sendo reduzido a
FADH2.
h. O fumarato é hidratado (recebe H2O), gerando o
malato, com o auxílio da enzima fumarase.
i. A enzima malato desidrogenase catalisa a perda de
um hidrogênio do malato, dando origem a uma molécula
de NADH e ao oxaloacetato, que volta ao início do ciclo.
NAD (nicotinamida-adenina-dinucleotídeo) e FAD
(flavina-adenina-dinucleotídeo) são aceptores de
hidrogênios, que posteriormente serão transferidos a
outras substâncias, em reações que liberam energia;
essa energia é utilizada para a síntese de moléculas de
ATP, onde ficam armazenadas. O NADH2 leva à
formação de três moléculas de ATP, enquanto o FADH2
leva à formação de duas moléculas.
3. FOSFORILAÇÃO OXIDATIVA: Ocorre nas cristas
mitocondriais; é a etapa da respiração celular na qual é
utilizado o oxigênio respirado.
É formada por dois componentes: a cadeia de
transporte de elétrons e a quimiosmose. A cadeia de
transporte de elétrons é uma série de proteínas e
moléculas orgânicas presentes na membrana interna da
mitocôndria, na qual os elétrons passam de um
componente para outro por meio de reações redox, e a
energia liberada durante essa transferência é usada
para formar um gradiente eletroquímico. Na
quimiosmose, a energia armazenada no gradiente é
usada para formar ATP.
a. Os carreadores NADH e FADH2 transferem seus
elétrons para as moléculas no início da cadeia, voltando
a ser NAD e FAD para serem usados em outras etapas;
b. Conforme os elétrons se movem pela cadeia, vão
de um nível de energia mais alta para um de energia
mais baixa, e a energia que é liberada nesse transporte
é usada para bombear H+ da matriz celular para o
espaço entre membranas, estabelecendo um gradiente
eletroquímico;
c. Ao fim da cadeia de transporte de elétrons, os
elétrons são transferidos para a molécula de oxigênio,
que se divide e junta-se ao H+, formando água. Se o
oxigênio proveniente da respiração é escasso, a
fosforilação oxidativa não pode ter continuidade e a
produção de energia da célula é prejudicada, causando
morte celular se ocorrer por período prolongado;
d. Conforme os íons H+ fluem a favor do gradiente,
passam por uma enzima chamada ATP sintase, que, por
meio desse fluxo de prótons, sintetiza ATP, no processo
chamado de quimiosmose.
Rendimento total da respiração celular:
O rendimento máximo de ATP por molécula de glicose
é de cerca de 30-32 ATP;
Entender a relevância do cálcio, com foco na célula e
suas organelas.
O organismo contém aproximadamente um quilograma
de cálcio distribuído entre três principais
compartimentos: osso, líquido intracelular e líquido
extracelular. Cerca de 99% desse cálcio encontram-se
nos ossos, principalmente sob a forma de hidroxiapatita,
que é um cristal complexo contendo cálcio, fosfato e
água. A segunda maior reserva de cálcio no organismo
encontra-se no meio intracelular. Existem cerca de 10g
de cálcio nesse compartimento, cuja maior parte está
ligada às proteínas ou sequestradas nas mitocôndrias e
retículo endoplasmático. Os níveis de cálcio são
mantidos através de bombas dependentes de energia
localizadas na membrana, que transportam ativamente o
cálcio de fora do citosol para o líquido extracelular, as
mitocôndrias e o retículo endoplasmático. Em muitas
células, as concentrações citosólicas de cálcio
aumentam acentuadamente, caso haja estimulação da
célula, e essa elevação do cálcio desencadeia uma
resposta funcional característica para cada tipo celular
(p. ex., contração muscular ou secreção hormonal).
Nas mitocôndrias, a captação de cálcio para a matriz
mitocondrial ocorre através de um canal uniporter
mitocondrial (MCU) e é impulsionada pelo potencial de
membrana mitocondrial interna, que atrai espécies
positivamente carregadas. Dentro das mitocôndrias, os
íons cálcio atuam como reguladores de importantes vias
metabólicas, determinando a velocidade de síntese de
ATP. O excesso de cálcio mitocondrial, no entanto, é
prejudicial para a integridade celular em várias
condições patológicas, como acidente vascular cerebral,
doença cardíaca isquêmica e condições inflamatórias do
fígado.
Entender os diferentes tipos de transporte
intracelular.
Algumas substâncias entram e deixam as células por
transporte vesicular, um processo que envolve
modificações da configuração na membrana plasmática,
em sítios localizados, e formação subsequente de
vesículas a partir da membrana ou fusão de vesículas
com a membrana.
Endocitose:
É o termo geral para referir-se a processos de
transporte vesicular no qual as substâncias entram na
célula. Em geral, a endocitose controla a composição da
membrana plasmática e a resposta celular a alterações
do ambiente externo. Além disso, desempenha funções
essenciais na captação de nutrientes, sinalização celular
e alterações no formato da célula.
A proteína mais bem conhecida que interage com a
membrana plasmática na formação de vesículas é a
clatrina. Embora a clatrina seja certamente importante
na formação de vesículas endocíticas, muitas vesículas
são formadas independentemente da clatrina, utilizando
proteínas diferentes (i. e., caveolinas ou flotilinas). Por
conseguinte, a endocitose pode ser classificada como
dependente de clatrina ou independente de clatrina. Em
geral, são reconhecidos três mecanismos de endocitose
na célula:
- Pinocitose:
Refere-se à ingestão inespecífica de líquido e de
pequenas moléculas proteicas através de vesículas
pequenas. A pinocitose é realizada por praticamente
todas as células do organismo e é constitutiva. O
mecanismo proposto para a formação de vesículas na
pinocitose está associado às proteínas caveolina e
flotilina, que são encontradas nas balsas lipídicas. Além
disso, mecanoenzimas como a GTPase (dinamina)
estão envolvidas na cisão das vesículas pinocitóticas (o
processo de separação da membrana plasmática).
Como a caveolina forma complexos que efetuam
alterações na curvatura da membrana, levando à
formação de vesículas, a pinocitose não necessita de
clatrina e, portanto, pode ser designada como
endocitose independente de clatrina.
- Fagocitose
Refere-se à ingestão de grandes partículas, como
restos celulares, bactérias e outros materiais estranhos.
Nesse processo não seletivo, a membrana plasmática
emite pseudópodos para engolfar partículas fagocitadas
dentro de grandes vesículas, denominadas
fagossomos. A fagocitose é realizada principalmente por
um grupo especializado de células, que pertencem ao
sistema mononuclear fagocitário (SMF).
Em geral, a fagocitose é um processo mediado por
receptor, em que receptores na superfície celular
reconhecem domínios de ligação não antígenos de
anticorpos que recobrem a superfície de um
microrganismo invasor ou célula.
Esse processo não necessita de clatrina para a
formação de fagossomos. Contudo, devido a extensões
de pseudópodos da membrana plasmática, que
contribuem para a formação do fagossomo, o
citoesqueleto de actina precisa ser reorganizado em um
processo que exige despolimerização e repolimerização
dos filamentos de actina. Por conseguinte, a fagocitose é
designada como uma endocitose independente de
clatrina, mas dependente de actina.
- Endocitose mediada por receptor:
Possibilita a entrada de moléculas específicas na
célula. Nesse mecanismo, os receptores para moléculas
específicas, denominados receptores de carga,
acumulam-se em regiões bem definidas da membrana
celular. Tais regiões, que são representadas pelas
balsas lipídicas na membrana plasmática, acabam se
tornando depressões revestidas. O termo depressão
revestida deriva do aspecto dessas regiões ao
microscópio eletrônico, que aparece como acúmulo de
material elétron denso que representa a agregação de
moléculas de clatrina na superfície citoplasmática da
membrana plasmática.
Os receptores de carga reconhecem e se
ligam a moléculas específicas que entram em contato
com a membrana plasmática. Em seguida, as moléculas
de clatrina reúnem-se em uma estrutura semelhante a
uma cesta, que ajuda a mudar o formato da membrana
plasmática, formando uma invaginação semelhante a
uma vesícula.
O tipo de vesícula formada em consequência da
endocitose mediada por receptor é designado como
vesícula revestida, e o próprio processo é conhecido
como endocitose dependente de clatrina.
Exocitose:
É o termo geral para descrever processos de transporte
vesicular nos quais as substâncias deixam a célula. É o
processo pelo qual uma vesícula se move do citoplasma
para a membrana plasmática, onde descarrega seu
conteúdo para o espaço extracelular.
Diversas moléculas produzidas pela célula para
exportação são inicialmente liberadas do local de sua
formação para o complexo de Golgi. A etapa seguinte
envolve a seleção e o acondicionamento do produto
secretor em vesículas de transporte, que são destinadas
a se fundir com a membrana plasmática, em um
processo conhecido como exocitose.
O tráfego intracelular dessas vesículas é obtido pela
existência de proteínas específicas em sua superfície,
que medeiam seus movimentos. As moléculas que
seguem esse trajeto são, com frequência, quimicamente
modificadas à medida que passam por diferentes
compartimentos celulares.
Existem duas vias gerais de exocitose:
- Constitutiva:
As substâncias destinadas para exportação são
continuamente mobilizadas em vesículas de transporte
até a membrana plasmática. As proteínas que deixam a
célula por esse processo são secretadas imediatamente
após a sua síntese e passagem pelo complexo de Golgi.
Essa via está presente em algum grau em todas as
células.
- Secretora regulada:
Células especializadas, como células endócrinas e
exócrinas e neurônios, concentram proteínas secretoras
e as armazenam transitoriamente em vesículas
secretoras dentro do citoplasma. Nesse caso, um evento
regulador (estímulo hormonal ou neural) precisa ser
ativado para que ocorra secreção. O estímulo de
sinalização provoca um influxo transitório de Ca no
citoplasma, que, por sua vez, estimula a fusão das
vesículas secretoras com a membrana plasmática e a
descarga de seus conteúdos.
Endereçamento de Proteínas
O endereçamento de proteínas, existente tanto em
eucariotos quanto em procariotos, pode ser feito através
de sequências sinalizadoras (aminoácidos), pela própria
estrutura da proteína ou por modificações pós-
traducionais (como Fosforilação). Esses sinais
determinam aonde as proteínas devem ir na célula, pois
se ligam a receptores em membranas, organelas e
outros.
O primeiro passo é a síntese de polipeptídeos, há a
transcrição de um trecho do DNA em um RNA
mensageiro. Esse RNA se une a um ribossomo e dai
ocorre a tradução da sequencia em proteínas.
Em geral, as proteínas são endereçadas para o
Núcleo, para o Retículo Endoplasmático, Peroxissomo
e para as Mitocôndrias. As membranas, com sua
bicamada lipídica, dificultam a entrada/passagem de
proteínas, para isso há adaptações nas células como os
Poros no Carioteca do Núcleo, nas Mitocôndrias e as
Vias Secretórias e de Transporte.
Como ocorre o tráfego de proteínas nas células?
Na célula há um intenso fluxo de vesículas para o
transporte de substancias de uma organela para outra,
como no caso do Retículo Endoplasmático para o Golgi
e vice versa. Mas ha também um fluxo de vesículas do
meio interno para o externo (e vice versa), na
Endocitose e Exocitose.
Há transporte do RE para a Membrana e vice versa.
Para ocorrer o brotamento de vesículas e sua formação
existem proteínas acessórias, como a prot. Motora
Cinesina (sentido núcleo para membrana) e a Dineina
(da membrana plasmática para o Núcleo). Outras
substancia essenciais para o transporte são: Clatrina
(reveste vesículas atua na endocitose e exocitose);
COP I (forma vesículas do Golgi para o RE); e COP II
(forma vesículas do RE para o Golgi).

Endereçamento para o Núcleo – muitas proteínas de

baixo peso molecular conseguem entrar no núcleo por
difusão através de Poros na carioteca. Já as com mais
de 65000 daltons precisam de proteínas canais – as
Importinas e Exportinas – tanto para entrar quanto para
sair no núcleo.
Endereçamento para as Mitocôndrias – as proteínas
que não são sintetizadas pelo DNA mitocondrial
precisam chegar ao interior da organela, para isso
atravessam as duas membranas mitocondriais por
Poros (TIM e TOM). Porem, elas não conseguem entrar
com um a estrutura terciaria (que possui grande
volume), por isso entram associadas a outras proteínas
Chaperones, que mantem sua função e ao se soltarem
permitem a reestruturação terciária.
Endereçamento via Vesículas – As proteínas que
possuem como destino final lisossomos, membrana
celular ou meio extracelular, normalmente, possuem,
em sua região amino-terminal, uma sequência
sinalizadora ou peptídeo sinal. Uma partícula
reconhecedora de sinal (PRS) liga-se ao ribossomo
contendo a proteína nascente com o peptídeo sinal e
leva este complexo até a membrana do Retículo
Endoplasmático, onde existem receptores para PRS.
Apos o término da síntese, ocorre a passagem da
proteína para a luz do Retículo Endoplasmático – nele
são formadas vesículas (no Retículo Liso) as quais são
enviadas ao Complexo de Golgi. Do Golgi são
liberadas vesículas que se fundem com a membrana
plasmática ou ficam no citosol (lisossomos e
Peroxissomos).

O Retículo Endoplasmático e o Complexo de Golgi

são sítios de modificações pós-traducionais (que dão
função a proteínas e determinam atividades
metabólicas), por isso é importante que varias proteínas
passem por essas organelas.

Vias de Secreção de Proteínas