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Journal of Insect Physiology 131 (2021) 104228

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Revista de Fisiologia de Insetos

Página inicial do jornal: www.elsevier.com/locate/jinsphys

Avaliando a resistência de cultivares de tecnologia de blocos de soja ao

percevejo marrom neotropical, heróis de Eusquisto (F.)

Tiago Lucini uma, Antônio R. Panizzi b,*, Adeney de F. Bueno c

uma Departamento de Zoologia, Universidade Federal do Paraná, 82590-300 Curitiba, Brasil
b Laboratório de Entomologia, Centro de Pesquisa do Trigo Embrapa, 99050-970 Passo Fundo, Brasil
c Laboratório de Entomologia, Centro de Pesquisa em Soja da Embrapa, 86001-970 Londrina, Brasil

INFORMAÇÕES DO ARTIGO RESUMO

Palavras-chave: Estudos laboratoriais foram realizados com o percevejo marrom neotropical, heróis de Eusquisto (F.), para avaliar a biologia de
Percevejo ninfas e adultos em vagens imaturas de soja, Glicina max (L.) Merrill (Fabaceae), com tecnologia de blocos (resistente a danos
Resistência da planta hospedeira
por percevejos – cvs. BRS 391, BRS 543 RR e BRS 1003 IPRO) em comparação com uma cultivar suscetível (BRS 5601 RR). Os
Biologia
resultados indicaram que o tempo de desenvolvimento e sobrevivência das ninfas foram semelhantes em todas as cultivares
Gráfico de penetração elétrica
testadas. O mesmo foi observado para a sobrevivência adulta e desempenho reprodutivo. No entanto, dados de
EPG
eletropenetrografia (EPG) demonstraram que adultos deE. heróisgastaram significativamente menos tempo em atividades de
alimentação em plantas resistentes em comparação com a suscetível. Grandes diferenças foram observadas nas atividades de
alimentação nas sementes; em plantas resistentes, os insetos dedicaram um período de tempo menor para se alimentar no
endosperma de sementes do que no BRS 5601. Além disso, quando os percevejos se alimentaram de sementes de cultivares
de bloco, a maioria das sondas foi composta apenas por atividades de laceração/maceração (forma de onda Eh3a) sem
eventos de ingestão do conteúdo da célula (forma de onda Eh3b). Em contraste, na cultivar suscetível, os eventos de forma de
onda Eh3a foram repetidos com muito mais frequência (3-5X) com mais sondas contendo também a ingestão do conteúdo da
semente. Esses resultados sugerem que as cultivares de soja com tecnologia de blocos apresentaram menor preferência
(antixenose) pelos percevejos com menor atividade alimentar, principalmente no endosperma da semente,

1. Introdução com parasitóides de ovos (por exemplo, Corrêa-Ferreira e Moscardi, 1995;

Os percevejos (Pentatomidae) são tradicionalmente conhecidos como
pragas de várias culturas em todo o mundo.Panizzi et al., 2000; McPherson e
McPherson, 2000). Nos neotrópicos, o percevejo marrom neotropical, heróis
de Eusquisto (F.), é de longe a espécie praga mais abundante na soja, Glicina
max (L.) Merrill (Fabaceae), particularmente no Brasil, um dos maiores
produtores mundiais desta commodity (Panizzi e Corrêa-Ferreira, 1997).
heróis de Eusquisto tem sido tradicionalmente controlado em soja
principalmente usando inseticidas químicos duros (por exemplo, Basso et al.,
2016; Tuelher et al., 2017; Marques et al., 2019). Seu uso excessivo tem
desencadeado efeitos colaterais negativos, como redução do controle biológico
natural, aumento dos custos de produção da soja e seleção de populações de
percevejos resistentes, além da contaminação das pessoas e do meio ambiente.
Sosa-Gómez e Silva, 2010; Bueno et al., 2011). Assim, há uma necessidade
crescente de usar medidas de controle mais sustentáveis. Os esforços diretos de
pesquisa estão investigando outras estratégias, como o uso de controle biológico
Laumann et al., 2010; Tillman, 2016; Abram et al., 2020; Bueno et al., 2020a),
bem como o uso de cultivares de soja resistentes, que é outra estratégia de
manejo de pragas altamente recomendada e um grande objetivo dos
pesquisadores (Bueno et al., 2020b).
As três principais categorias clássicas de resistência – antibiose, tolerância e
não preferência (mais tarde renomeada como antixenose) descritas por Painter
(1951), foram recentemente reduzidas a resistência (ou seja, características da
planta que limitam a lesão à planta subdividida em constitutiva/induzível). e
subcategorias diretas/indiretas) e tolerância (características de plantas que
reduzem a quantidade de perda de rendimento por unidade de dano) (Forte, 2013
). A resistência em cultivares de soja já foi tentada e introduzida em cultivares
liberadas, como a cv. IAC 100 (Instituto Agronômico) na década de 1990, e as
categorias de resistência foram descritas (Rossetto et al., 1995). No entanto, esta e
outras cultivares não obtiveram sucesso comercial devido à falta de características
agronômicas adequadas e/ou baixa produtividade (especialmente produtividade
de sementes).
Mais recentemente, a cultivar de soja BRS 1003 IPRO foi lançada pela

* Autor correspondente em: Laboratório de Entomologia, Centro de Pesquisas do Trigo Embrapa, BR 285, Km 294, Passo Fundo, Brasil. Endereço
de e-mail: antonio.panizzi@embrapa.br (AR Panizzi).

https://doi.org/10.1016/j.jinsphys.2021.104228
Recebido em 27 de novembro de 2020; Recebido em formulário revisado em 12 de março de 2021; Aceito em 13 de março de 2021
Disponível on-line em 19 de março de 2021
0022-1910/© 2021 Elsevier Ltd. Todos os direitos reservados.
T. Lucini et ai.
Centro de Pesquisa em Soja da Embrapa, em Londrina, Paraná, Brasil. Esta cultivar
é o primeiro lançamento comercial a usar a 'tecnologia de bloco', que os
pesquisadores sugerem que apresenta tolerância ao ataque de percevejos. Para
isso, cientistas da Embrapa Soja selecionaram plantas de soja resistentes ao
percevejo, por meio de seleção recorrente. Linhagens de soja foram
sucessivamente expostas a altos níveis de infestação do percevejo por vários anos.
Plantas mais tolerantes ao ataque que apresentaram alta produtividade e boa
qualidade de sementes (baixa quantidade de sementes anormais ou danificadas)
foram selecionadas para compor as plantas com a tecnologia de blocos. No
entanto, não há dados publicados sobre as categorias de resistência a percevejos
e efeito dessas cultivares resistentes na biologia e comportamento alimentar de
percevejos. Atualmente, quatro cultivares de soja foram caracterizadas como
plantas de bloco (BRS 391, BRS 523, BRS 543 RR e BRS 1003 IPRO). Essas cultivares
toleram mais de duas vezes o limiar econômico de percevejos (ET) de 2
percevejos/m sem redução significativa no rendimento, em comparação com
cultivares suscetíveis (Árias et al., 2020).
A eletropenetrografia (EPG) é o método mais rigoroso e preciso para avaliar o
comportamento alimentar (aqui, alimentação no sentido de abranger todas as
atividades desde a penetração do estilete até a ingestão de alimentos) de insetos
sugadores perfurantes, como percevejos, em plantas com diferentes níveis de
resistência. O EPG tem sido amplamente aplicado para estudar o efeito de
plantas/genótipos resistentes no comportamento alimentar de várias espécies de
insetos sugadores (por exemplo,Rangasamy et al., 2015; Todd et al., 2016; Koch et
al., 2018). No entanto, até onde sabemos, para pentatomídeos, apenas um
trabalho recente foi publicado usando EPG, para avaliar a defesa de plantas
induzidas por insetos contra o percevejo marmorizado marromHalyomorpha halys
(Serteyn et al., 2020); tais dados não estão disponíveis paraE. heróis. As formas de
onda produzidas por adultosE. heróisenquanto se alimentavam de vagens de soja
foram caracterizados previamente usando um monitor AC-DC EPG e seus supostos
significados biológicos foram estabelecidos (Lucini e Panizzi, 2018).
Portanto, neste trabalho objetivou-se avaliar o efeito de cultivares de soja
resistentes (portando a tecnologia de blocos) sobre o desempenho ninfal e adulto
de E. heróis. Além disso, usamos EPG para quantificar e comparar contagens e
durações de formas de onda produzidas porE. heróisenquanto se alimenta dessas
cultivares resistentes em comparação com uma cultivar suscetível. Como as
categorias de resistência das plantas foram reclassificadas e nossas descobertas
se encaixam no termo mais antigo 'antixenose', decidimos ficar com as categorias
de Painter anteriormente descritas para explicar nossos resultados.
2. Materiais e métodos
2.1. Colônia de percevejos e plantas de soja
Durante setembro/outubro de 2019, ninfas e adultos de E. heróisforam
coletados em campo de diferentes plantas de cultivo e de restos de cultivos na
Estação Experimental do Campo de Trigo da Embrapa, localizada em Passo Fundo,
estado do Rio Grande do Sul, Brasil (latitude 28◦ 15′ 46" S, longitude 52◦ 24′
24" C). Ninfas e adultos foram levados ao laboratório e colocados em gaiolas
plásticas de criação (25× 20 × 20 cm) com o piso forrado com papel filtro. Eles
foram alimentados com uma dieta natural composta por uma mistura de vagens
de feijão verde,Phaseolus vulgaris L., amendoim sem casca cru, Arachis hypogaea
L. (Fabaceae), e sementes maduras de soja.
Bolas de algodão comerciais e papel higiênico foram fornecidos como
substratos de oviposição para os adultos coletados em campo. As massas de ovos
foram coletadas e colocadas dentro de caixas plásticas (11× 11 × 3,5 cm), e o piso
foi forrado com papel filtro. Parte das ninfas obtidas foram utilizadas no estudo
ninfal, e as demais foram criadas, utilizando a mesma mistura de alimentos citada
acima, para obtenção de adultos a serem utilizados no estudo de adultos. As
gaiolas de criação de ninfas e adultos foram mantidas em uma câmara walk-in a
25± 1 ◦C, 65 ± 10% de umidade relativa e fotoperíodo L14:D10 h no Laboratório de
Entomologia do Trigo da Embrapa. Os estudos de ninfas e adultos no laboratório
foram realizados de dezembro de 2019 a março de 2020.
Quatro diferentes cultivares de soja (Embrapa®) foram usados no
2
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bioensaios: BRS 391, BRS 543 RR, BRS 1003 IPRO (cultivares resistentes – com
tecnologia de bloco) e BRS 5601 RR (cultivar suscetível – testemunha). As sementes
dessas cultivares foram plantadas quinzenalmente, de novembro de 2019 a
janeiro de 2020, em vasos plásticos (2L) contendo uma mistura de solo preparado
e mantidos em casa de vegetação. Para todos os estudos, as vagens de soja foram
usadas no estágio de desenvolvimento R5 (estágio de enchimento de vagens) (
Fehr et ai., 1971).
2.2. Estudo de biologia de ninfas
2.2.1. Tempo de desenvolvimento e sobrevivência
Para este estudo, ninfas no primeiro dia do segundo ínstar (primeiro ínstar
ingerem apenas do xilema e podem completar o estádio apenas na água - Rivera e
Mitchell, 2020) da colônia estabelecida foram colocados individualmente dentro de
placas de Petri (6 cm de diâmetro) forradas com papel filtro. Cada prato continha
uma vagem de soja imatura e uma tampa plástica (2 cm de diâmetro) com
algodão úmido para fornecer água e manter a umidade. A ração e o papel filtro
em cada prato foram trocados a cada dois dias. As placas foram colocadas
aleatoriamente em uma câmara ambiental mantida a 25± 1 ◦C com 65 ± 5% UR e
fotoperíodo de 14:10 L:D. Observações diárias foram feitas na muda e
mortalidade. O tempo de desenvolvimento da ninfa e a porcentagem de
mortalidade do 2º instar ao adulto foram calculados. No dia da emergência dos
adultos, machos e fêmeas tiveram seu peso vivo aferido em balança eletrônica de
precisão (Mettler Toledo MS 3002S/A01, Barueri, SP, Brasil). O experimento foi
conduzido em delineamento inteiramente casualizado com quatro tratamentos
(cultivares de soja) e 45 repetições. Cada réplica consistia de uma ninfa individual.
2.3. Estudo de biologia para adultos
2.3.1. Sobrevivência e reprodução adulta
Das colônias de percevejos mantidas em laboratório, no dia da emergência,
adultos de E. heróis foram separados e os pares fêmea/macho foram colocados
individualmente em caixas plásticas de criação (11 × 11 × 3,5 cm) forrado com
papel filtro contendo um pedaço de caule de soja com 3 a 4 vagens na fase de
enchimento de grãos. Para manter o tecido vegetal túrgido e evitar a dessecação,
a ponta do caule da soja foi envolvida com algodão úmido e mantida dentro de
uma placa de Petri (6,0 cm de diâmetro), sendo substituída, conforme necessário.
As caixas de criação foram colocadas aleatoriamente em uma câmara ambiental
mantida nas mesmas condições acima.
Observações diárias foram feitas para determinar a sobrevivência de fêmeas e
machos até 20 dias, bem como a reprodução (% de fêmeas que puseram ovos,
tempo de pré-oviposição, número de massas de ovos e total de ovos postos). Além
disso, os adultos (fêmeas e machos) tiveram seu peso medido no dia da
emergência e após três semanas de vida adulta utilizando a mesma balança
eletrônica de precisão (conforme descrito acima). As alterações percentuais no
peso corporal fresco de adultos para fêmeas e machos foram calculadas e
comparadas ao longo do tempo. Os ensaios foram conduzidos em delineamento
inteiramente casualizado com quatro tratamentos (cultivares de soja) e 24
repetições. Cada réplica consistia de um par individual feminino/masculino.
2.4. Procedimentos de EPG
2.4.1. Fiação de insetos e gravações de EPG
Fêmeas adultas (10-15 dias de idade) de E. heróisforam retirados da colônia e
mantidos em caixa plástica (11 × 11 × 3,5 cm) sem comida/água (com fome) por 4
h antes da fiação. Em seguida, as inserções foram conectadas individualmente
com o eletrodo inseto (um pedaço de fio de ouro − 3 cm de comprimento; 0,1 mm
de diâmetro) usando cola de prata à base de água, conforme metodologia
anterior descrita em Lucini e Panizzi (2016). Insetos com fio foram novamente
famintos enquanto pendurados por 1 h antes de conectá-los ao amplificador de
estágio principal do monitor EPG e colocá-los nas vagens de soja.
As gravações de EPG foram realizadas usando um monitor AC-DC de quatro
canais de terceira geração (Backus et al., 2019; EPG Technologies, Inc., Gainesville,
Flórida, EUA). Para gravações, o monitor EPG foi configurado para
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aplique uma impedância de entrada (Ri) de 107 Ohms e corrente alternada de 50
mV (sinal AC) em todos os canais (Lucini e Panizzi, 2018). Para fechar o circuito
elétrico, o eletrodo da planta (pedaço de fio de cobre) foi inserido no solo do vaso
de planta. Amplificadores de EPG, insetos e plantas foram mantidos dentro de
uma gaiola de Faraday. Os sinais elétricos gerados durante as atividades do
estilete foram registrados a uma taxa de amostragem de 100 Hz por canal (por
inseto) usando um software de aquisição WinDaq (DATAQ Instruments, Akron, OH)
conectado a um computador.
Insetos com fio e plantas hospedeiras (BRS 391, BRS 543 RR, BRS 1003 IPRO e
BRS 5601 RR) foram aleatoriamente designados para um dos quatro canais de
monitoramento de EPG em um delineamento de blocos completos ao acaso. As
atividades dos estiletes de cada percevejo foram registradas ininterruptamente
por 15 h (17:00 – 08:00) no laboratório de EPG com luz e temperatura contínuas
(~25◦ C). A unidade experimental (combinação inseto/planta hospedeira) foi
replicada 17 vezes, totalizando 68 insetos registrados com sucesso.
2.4.2. Descrição e quantificação da forma de onda
Treze formas de onda EPG foram identificadas e descritas para E. heróis
em vagens de soja por Lucini e Panizzi (2018). Eles foram agrupados como
formas de onda sem alimentação (também conhecidas como sem sondagem) (Z,
Np, Dw1 e Dw2) e formas de onda de alimentação (também conhecidas como
sondagem) (Eh1, Eh2, Eh3, Eh4 e Eh5). As atividades de alimentação primárias
incluem via (Eh1a, Eh1b, Eh1c, Eh1w), ingestão de tecido vascular (Eh2 e Eh4) e
ruptura de células em sementes (Eh3a e Eh3b), que é o local de alimentação
preferido da espécie. Eh3a e Eh3b ocorrem intercalados entre si durante a
alimentação. O primeiro subtipo combina movimentos rápidos do estilete
(laceração) mais salivação aquosa (maceração), resultando em solubilização do
tecido; enquanto Eh3b representa a ingestão do conteúdo celular previamente
degradado em Eh3a (Lucini e Panizzi 2018).
Formas de onda representativas e seus significados biológicos/
comportamentais estão resumidos em Figura 1 e tabela 1. Para medição e análise
estatística, combinamos as quatro formas de onda sem alimentação em apenas
um tipo de forma de onda, aqui denominado como “Np”; além disso, a forma de
onda de interrupção do xilema Eh5 (que não foi observada com frequência) foi
combinada com Eh2 (ingestão de xilema).
As formas de onda EPG foram medidas manualmente usando o software
WinDaq Waveform Browser (DATAQ Instruments, Akron, OH). Oito variáveis
EPG não sequenciais (Backus et al., 2007) foram calculados para

Figura 1. Formas de onda representativas registradas para adultos de heróis de Eusquisto alimentando-se de vagens de soja da cultivar BRS 5601 RR (50 mV de sinal AC aplicado). A,
Visão expandida da forma de onda da via (Eh1), que seus subtipos Eh1a, Eh1b e Eh1c. B, Estrutura fina da forma de onda Eh2 (ingestão de xilema). C, Visão geral da forma de onda de
ruptura celular nas sementes (Eh3) e estrutura fina de cada subtipo, Eh3a (laceração/maceração do tecido da semente) e Eh3b (ingestão do conteúdo da semente), que ocorrem
intercalados entre si.

3
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tabela 1 3. Resultados
formas de onda EPG de heróis de Eusquisto adultos registrados em vagem de soja (estágio R5 –
enchimento de vagem) e suas atividades biológicas propostas. 3.1. Ninfa e biologia adulta
Estágio Família Digite ou Atividades biológicas propostas
subtipo Os dados sobre as variáveis biológicas avaliadas para ninfas e
Não- Z Parado na superfície da planta E. heróisindicou que, para as ninfas, o tempo total de desenvolvimento (do 2º
alimentando ínstar ao adulto) foi semelhante nas cultivares resistentes, em comparação com a
Np Andar na superfície da planta Secreção de saliva/ cultivar suscetível comercial (ca. 20 dias) (F3.129 = 0,141, P = 0,935) (mesa 2). Da
Dw1 regurgitação de alimento líquido na superfície da
mesma forma, a sobrevivência de ninfas ao desenvolvimento completo foi
vagem
Dw2 Provavelmente re-ingestão de saliva/regurgitação
semelhante e relativamente alta (ca. 75%) em todas as cultivares testadas. O peso
de alimento líquido Início da penetração do estilete corporal fresco na emergência dos adultos para as fêmeas não diferiu
Caminho P Eh1a e secreção de saliva gelificante para formação de significativamente entre as cultivares (ca. 84 mg) (F3,69 = 0,771, P = 0,514); para os
bainha salivar
machos, o peso corporal significativamente maior foi alcançado no BRS 5601
suscetível (ca. 79 mg), em comparação com o BRS 391 resistente (67 mg) (F3,60 =
Eh1b Penetração profunda do estilete e secreção de
saliva gelificante para formar ramos de uma bainha 3.604, P = 0,018), não diferindo significativamente das demais cultivares
salivar (mesa 2).
Eh1c Inseto encontrando uma camada de células Adulto E. heróiso desempenho, de acordo com o observado para as ninfas,
rígidas exigindo protração e retração do estilete
não diferiu entre cultivares resistentes e suscetíveis em todas as características
Eh1w Retirada do estilete do tecido vegetal Ingestão
Ingestão eu Eh2 sustentada de seiva do xilema
biológicas registradas. A sobrevivência de adultos até 20 dias foi alta (>93%) em
Salivação eu Eh3a Laceração celular e maceração enzimática do todas as cultivares testadas. A porcentagem de fêmeas ovipositando também foi
tecido do endosperma alta e semelhante (>90%) entre as cultivares. O tempo de pré-oviposição não
Ingestão eu Eh3b Ingestão curta de tecido do diferiu entre as cultivares (ca. 12 dias) (F3,85 = 0,876, P = 0,457). A fecundidade em
endosperma lacerado/macerado.
número de massas de ovos/fêmea e número total de ovos/fêmea, embora
eu Eh4 Ingestão curta, provavelmente de
vasos do floema numericamente maior para os percevejos alimentados com BRS 5601 suscetível
Interrupção N Eh5 Interrupções curtas durante a ingestão de seiva (5,3 e 70,3, respectivamente), não diferiu estatisticamente dos valores observados
do xilema para as cultivares resistentes ( variando de 4,7 a 5,0 e de 59,1 a 65,1,
Fonte: adaptado de Lucini e Panizzi (2018). respectivamente) (número de massas de ovos:F3,85 = 0,339, P = 0,797; número
total de ovos:F3,85 = 0,437, P = 0,727) (mesa 2).

cada tipo/subtipo de forma de onda, como segue: 1) duração total da sondagem

(TPD; nível de coorte), 2) duração total da forma de onda (TWD; nível de coorte), 3) mesa 2
número de sondas por inseto (NPI; nível de inseto), 4 ) duração de sondagem por Desempenho de ninfa e adulto heróis de Eusquisto em vagens de soja das
inseto (PDI; nível de inseto), 5) duração da forma de onda por inseto (WDI; nível de cultivares resistente (BRS 391, BRS 543 RR, BRS 1003 IPRO) e suscetível (BRS 5601
inseto), 6) duração de sondagem por sonda por inseto (PDPI; nível de sonda); 7) RR), em laboratório.
número de eventos de forma de onda por inseto (NWEI; nível de evento) e 8) Parâmetros biológicos Cultivares de soja P
duração da forma de onda por evento por inseto (WDEI; nível de evento). avaliado valores
BR BR BR BR
Doravante, seguindo a convenção de nomenclatura da forma de onda Backus,
391 543 1003 5601
“sonda” representa o período que inclui todas as atividades do estilete realizadas
Ninfas
pelo percevejo desde sua inserção no tecido vegetal e remoção do estilete.
Tempo de desenvolvimento da ninfa 20,0 ± 20,3 ± 19,9 ± 20,0 ± 0,935
Utilizamos o termo “sonda” porque é utilizado no programa EPG no cálculo de (2º instar a adulto) (média 0,4 a 0,6 a 0,4 a 0,4 a
variáveis, que é sinônimo do nosso termo alimentação descrito anteriormente (ver ± SE; dias) (n inicial = 45) (34) (32) (34) (33)
na Introdução). Em contraste, um “evento” de forma de onda representa uma
Sobrevivência da ninfa (%) 76 71 76 73 -
ocorrência ininterrupta de um tipo ou subtipo de forma de onda específico dentro
Peso corporal fresco no adulto ♀ 84,2 82,3 ± 81,3 ± 87,2 ± 0,514
uma sonda.
surgimento (média ± SE; ± 1,8 a 3,5 a 3,0 a 3,2 a
mg) (n) (24) (15) (20) (14)
♂ 67,0 70,9 ± 75,5 ± 78,7 ± 0,018
2.5. Análise de dados ± 3,8 b 2,2 ab 2,8 ab 2,2 a
(12) (18) (15) (19)
Os dados sobre a biologia da ninfa e do adulto foram verificados quanto à Adultos
homogeneidade das variâncias (P < 0,05) (Burr e Foster, 1972), e transformados quando Sobrevivência adulta após 20 93,8 97,9 97,9 95,8 –
necessário para atender aos pressupostos da análise de variância (ANOVA). Os dados dias (fêmea + macho) (%) (n
inicial = 24 pares) Fêmeas
foram ajustados em um modelo de análise de variância unidirecional usando a função
ovipostando (%) 91,7 91,7 91,7 95,8 –
“aov” no software R (Equipe Principal de Desenvolvimento R, 2016). As médias foram Tempo de pré-oviposição (dias) 12,4 ± 11,9 ± 12.3 ± 11,5 ± 0,457
separadas, quando aplicável, pelo teste de Tukey (P < 0.05) aplicando o pacote “TukeyC” (n) 0,6 a 0,4 a 0,4 a 0,3 a
no software R (Faria et al., 2018). (22) (22) (22) (23)
Em relação ao estudo EPG, os valores (contagens e durações) das oito Número de massas de ovos postas/ 4,8 ± 4.7 ± 5,0 ± 5.3 ± 0,797
feminino (média ± SE) (n) 0,5 a 0,5 a 0,5 a 0,4 a
variáveis não sequenciais foram testados para diferenças significativas
(22) (22) (22) (23)
usando o programa Backus 2.0 para Statistical Analysis Software (Instituto Número total médio de ovos 60,8 ± 59.1 ± 65,1 ± 70,3 ± 0,727
SAS, 2009) (programa completo disponível no site do EPG Workshop http:// deitado/feminino (média ± SE) 7,5 a 8,5 a 7,9 a 6,5 a
www.crec.ifas.ufl.edu/extension/epg). A análise de variância usando (n) (22) (22) (22) (23)
Mudança de peso corporal fresca ♀ 53.1 58,2 ± 46,7 ± 54,8 ± 0,094
estimativa de máxima verossimilhança restrita (REML-ANOVA; PROC
(%) ± 3,5 a 3,1 a 3,3 a 3,0 a
GLIMMIX) foi realizada para determinar diferenças entre as quatro cultivares (23) (23) (23) (22)
de soja testadas para cada uma das variáveis acima. Comparações ♂ 41,7 46,8 ± 45,8 ± 46,6 ± 0,621
pareadas foram feitas usando diferenças menos significativas (LSMEANS; α ± 4.1 a 2,0 a 3,5 a 2,5 a
= 0,05). Quando necessário, contagens e durações foram transformadas em raiz (22) (24) (24) (24)

quadrada e logaritmo, respectivamente, para atingir os pressupostos de normalidade e Meios (±SE) seguido da mesma letra em cada linha (comparações entre cultivares) não
homocedasticidade. são significativamente diferentes usando o teste de Tukey (P < 0,05).

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Por fim, a variação do peso corporal fresco, após 3 semanas de vida adulta, também Tabela 4
foi semelhante entre os percevejos alimentados em todas as cultivares testadas, sendo Duração da forma de onda por evento por inseto (WDEI; min) de diferentes formas de
nas cultivares tolerantes ca. 53 mg e 46 mg, e na cultivar suscetível ca. 55 mg e 47 mg, onda EPG produzidas por heróis de Eusquisto em vagens de soja de cultivares resistentes
para mulheres e homens, respectivamente (mulheres:F3,87 = (BRS 391, BRS 543 RR, BRS 1003 IPRO) e suscetíveis (BRS 5601 RR).

2.20, P = 0,094; machos:F3,90 = 0,594, P = 0,621) (mesa 2). Formas de onda Cultivares de soja P valores

BR BR BR BR
3.2. Quantificação das formas de onda de Euschistus heros 391 543 1003 5601

Np Caminhada de insetos/ 174,6 174,9 131,1 137,4 0,3826

3.2.1. Não- -atividades de alimentação ficar parado ± ± ± ±
superfície da planta 27,87 a 17,41 a 14,27 a 13,50 a 0,5±
Aqui, a forma de onda não alimentar Np compreendeu uma combinação de
Eh1a Começo de 0,6 ± 0,4 ± 0,4 ± 0,0499*
comportamentos parado (Z), andando (anteriormente chamado Np), regurgitação estilete 0,05 ab 0,06 a 0,03 b 0,03 b
alimentar (Dw1) e re-ingestão alimentar (Dw2). A duração da forma de onda penetração em
presente sem alimentação (Np) por inseto (WDI) foi significativamente maior em tecido

todas as plantas resistentes em comparação com a suscetível (F3,64 = 4,70,P = Eh1b Estilete profundo 1,7 ± 2.1 ± 2.3 ± 1,9 ± 0,3361
penetração em 0,19 a 0,50 a 0,21 a 0,30 a
0,0050). Na média,E. heróisos adultos gastaram mais de dois terços de seu tempo
tecido
de acesso de 15 h em comportamentos não alimentares em todas as cultivares de Eh1c Erro 3.9 ± 4.3 ± 4.4 ± 5.2 ± 0,1261
soja testadas, ca. 77% na planta suscetível (BRS 5601), e mais de 85% nas plantas encontrando um 0,29 a 0,48 a 0,39 a 0,36 a
resistentes (BRS 391, BRS 543 e BRS 1003) (Tabela 3). Diferentemente, a duração camada de células rígidas

Eh1w Estilete 0,1 ± 0,1 ± 0,2 ± 0,2 ± 0,4336

da forma de onda por evento por inseto (WDEI) e o número de eventos da forma
cancelamento 0,02 a 0,02 a 0,04 a 0,08 a
de onda por inseto (NWEI) não foram significativamente diferentes entre as Eh2 seiva do xilema 20,6 ± 22,5 ± 25,9 ± 32,4 ± 0,2839
plantas de soja (WDEI:F3,64 = 1,04, P = 0,3826; NWEI:F3,64 ingestão 1,54 a 2,71 a 4.11a 5,77 a
= 0,87, P = 0,4605) (Tabelas 4 e 5, respectivamente). Eh3a Laceração/ 7.1 ± 7.1 ± 5,0 ± 5.6 ± 0,2545
semente de maceração 1,22 a 1,15 a 0,83 a 0,86 a
endosperma
3.2.2. Atividades de alimentação: geral
Eh3b Ingestão de 0,2 ± 0,2 ± 0,2 ± 0,2 ± 0,8891
Os adultos realizaram atividades de estilete mais curtas (durações totais de semente macerada 0,10 a 0,04 a 0,03 a 0,03 a
sondagem: TPD; Figura 2) quando alimentados com plantas resistentes (<15%) em endosperma

relação à cultivar suscetível BRS 5601 (ca. 23%). O padrão das durações totais de formas Eh4 Provavelmente 1,6 ± 2.61 1,6 ± 1,8 ± 0,7738
seiva do floema 0,46 a 0,11 a 0,69 a
de onda (TWD) (incluindo todas as famílias e tipos de formas de onda) foi diferente entre
ingestão
as cultivares testadas (Figura 2, fatias de torta). O número de vezes que os insetos
inseriram estiletes no tecido da planta (ou seja, número de sondas Meios (±SE) dentro de uma linha seguida pela mesma letra não são significativamente
diferentes em α = 0,05 (LSD significa teste). Dados transformados usando log (x) antes da
análise. Significado deP-valores em negrito são *(P<0,05).
Tabela 3
1 Apenas um inseto realizou a forma de onda
Duração da forma de onda por inseto (WDI; min) de diferentes formas de onda EPG
produzidas por heróis de Eusquisto em vagens de soja de cultivares resistentes (BRS 391,
BRS 543 RR, BRS 1003 IPRO) e suscetíveis (BRS 5601 RR).
Tabela 5
Formas de onda Cultivares de soja P valores Número de eventos de forma de onda por inseto (NWEI) de diferentes formas de onda

BR BR BR BR EPG produzidas por heróis de Eusquisto em vagens de soja de cultivares resistentes (BRS
391 543 1003 5601 391, BRS 543 RR, BRS 1003 IPRO) e suscetíveis (BRS 5601 RR).

Np Caminhada de insetos/ 787,2 788,0 764,1 689,0 0,0050** Formas de onda Cultivares de soja P valores
parado em ± ± ± ± BR BR BR BR
superfície da planta 20,92 19,73 20.08 26.09 391 543 1003 5601
uma uma uma b
Eh1a Começo de 2,5 ± 2,5 ± 2,5 ± 1,9 ± 0,7196 Np Caminhada de insetos/ 6.2 ± 5.4 ± 6.6 ± 5.6 ± 0,4605
estilete 0,41 a 0,36 a 0,27 a 0,21 a ficar parado na superfície 0,89 a 0,65 a 0,53 a 0,44 a
penetração em da planta

tecido Eh1a Começo do estilete 5.2 ± 4.4 ± 5.6 ± 4.6 ± 0,4592

Eh1b Estilete profundo 9.6 ± 10,9 ±17,9 ±12.2 ±0,0415* penetração em 0,89 a 0,65 a 0,53 a 0,44 a
penetração em 1,79 b 2,67b 2,49 a 2,41 tecido
tecido ab Eh1b Estilete profundo 6.1 ± 5.4 ± 7.6 ± 6.2 ± 0,2054
Eh1c Erro 13,5 ±12,7 ±17,8 ±18,3 ±0,2145 penetração em 1,29 a 0,89 a 0,66 a 0,67 a
encontrando um 1,76 a 2,14 a 2,35 a 2,76 a tecido
camada de células rígidas Eh1c Encontro de bugs 3.8 ± 3.2 ± 4.1 ± 3,5 ± 0,5155
Eh1w Estilete 0,7 ± 0,6 ± 1.1 ± 1,0 ± 0,1740 uma camada de células 0,63 a 0,61 a 0,36 a 0,45 a
cancelamento 0,12 a 0,14 a 0,29 a 0,24 a Eh1w rígidas Retirada do estilete 4,8 ± 4.2 ± 5.6 ± 4,5 ± 0,3109
Eh2 seiva do xilema 46,4 ±48,2 ±58,3 ±57,7 ±0,5712 0,86 a 0,60 a 0,52 a 0,41 a
ingestão 8,10 a 9,82 a 9,22 a 6,83 a Eh2 seiva do xilema 2.1 ± 2.3 ± 2.4 ± 2.1 ± 0,9278
Eh3a Laceração/ 54,7 ± 44,6 ± 40,6 ± 122,8 0,0084** ingestão 0,32 a 0,45 a 0,29 a 0,30 a
semente de maceração 15,13 11,69 13,25 ± Eh3a Laceração/ 9,5 ± 8.4 ± 6.3 ± 30.1 0,0003***
endosperma b b b 21.03 semente de maceração 3,14 b 2,57 b 1,42 b±
uma endosperma 6,63 a
Eh3b Ingestão de 4.9 ± 2.1 ± 1.1 ± 8,0 ± 0,0529* Eh3b Ingestão de 11.2 10.1 6.1 ± 33.2 0,0050**
semente macerada 3,87 1,06 b 0,43 b 2,67 a semente macerada ± ± 2,48b ±
endosperma ab endosperma 5.22b 3,34b 7,21 a
Eh4 Provavelmente 3,5 ± 7,81 2,8 ± 1,8 ± 0,2170 Eh4 Provavelmente floema 3.7 ± 3,01 1,8 ± 1,0 ± 0,6151
seiva do floema 1,47 a 0,72 a 0,69 a ingestão de seiva 2,67 a 0,48 a 0,00 a
ingestão
Meios (±SE) dentro de uma linha seguida pela mesma letra não são significativamente
Meios (±SE) dentro de uma linha seguida pela mesma letra não são significativamente diferentes em α = 0,05 (LSD significa teste). Dados transformados usando raiz quadrada
diferentes em α = 0,05 (LSD significa teste). Dados transformados usando log (x) antes da (x) antes da análise. Significado deP-valores em negrito são **(P<0,01), ***(P<0,001).
análise. Significado deP-valores em negrito são *(P<0,05), **(P<0,01). 1 Apenas um inseto realizou a forma de onda
1 Apenas um inseto realizou a forma de onda

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T. Lucini et ai. Journal of Insect Physiology 131 (2021) 104228

Figura 2.Duração total da sondagem (TPD; como porcentagem do tempo total de acesso) e porcentagem total de tempo em diferentes categorias de forma de onda (TWD; fatias de pizza) gasto por
heróis de Eusquisto em vagens de soja de cultivares resistentes (BRS 391, BRS 543 RR, BRS 1003 IPRO) e suscetíveis (BRS 5601 RR). Formas de onda da via combinada (Eh1a
+ Eh1b + Eh1c + Eh1w), ingestão de vasos vasculares (Eh2 e Eh4), laceração celular e maceração enzimática do endosperma da semente (Eh3a) e ingestão do endosperma
da semente degradado (Eh3b). Figura colorida na versão online e preto e branco na versão impressa.

por inseto – NPI) não diferiu entre as plantas (F3,64 = 0,87, P = 0,4592) (Fig. 3
UMA). No entanto, a duração de cada sonda realizada por cada percevejo
(ou seja, duração da sondagem por sonda por inseto – PDPI), foi de ca. 2X
mais curto em plantas resistentes (F3,64 = 4,62, P = 0,0055) em comparação
com BRS 5601 (Fig. 3B). Além disso, a duração total de sondagem por inseto
(PDI) foi significativamente menor nas cultivares BRS 391 e BRS 543 em
comparação com BRS 5601. A PDI em BRS 1003 foi intermediária (F3,64 = 3,59,
P = 0,0183) (Fig. 3C).
Considerando cada sonda individual realizada por E. heróis, o número de sondas
compreendendo apenas formas de onda da via (tipos Eh1), durante o período de acesso
de 15 h, foi ligeiramente maior em plantas resistentes (variando de 9,5 a 14,5%) do que
BRS 5601 (ca. 8%) (Fig. 4). Sondas contendo ingestão em vasos vasculares (Eh2 e/ou Eh4)
foram semelhantes entre os insetos que se alimentam das diferentes cultivares de soja
estudadas (de 26% a 31%). Em contraste, grandes diferenças foram observadas quando
as sondas analisadas continham atividades de alimentação em sementes – o local de
alimentação preferido da espécie (formas de onda Eh3a e Eh3b). Os adultos produziram
mais sondas contendo apenas a forma de onda Eh3a (atividades de laceração/maceração
em
sementes) em plantas resistentes (>41% das sondas) em comparação com
BRS 5601 (33%). Além disso, o número de sondas contendo Eh3b (ingestão
do tecido da semente solubilizado) foi menor em plantas resistentes (de 9%
a 13,5%) do que em BRS 5601 suscetíveis (23%) (Fig. 4).
3.2.2.1. Atividades do caminho.O caminho inclui a inserção inicial do estilete e a
penetração profunda no tecido da planta (representada pelas formas de onda
Eh1a, Eh1b e Eh1c) e a remoção do estilete do tecido da planta após a alimentação
(representada pela forma de onda Eh1w) (Lucini e Panizzi 2018). Em plantas
resistentes,E. heróisos adultos gastaram mais tempo em atividades de vias
combinadas (variando de 23% a 29% da duração total da sondagem - TPD) em
comparação com BRS 5601 (16% de TPD) (Figura 2). No entanto, pequenas
diferenças foram observadas nas variáveis de EPG para cada forma de onda da
via constituinte, separadamente. Em resumo, a duração total (WDI) de Eh1b foi
significativamente maior (F3,64 = 2,90, P = 0,0415) na BRS 1003 em relação à BRS
391 e BRS 543; enquanto a BRS 5601 foi intermediária (Tabela 3). A duração da
forma de onda por evento (WDEI) de Eh1a foi maior na BRS 543 (F3,64 = 2,75, P =
0,0499) em comparação com BRS 1003 e BRS 5601

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T. Lucini et ai.
Fig. 3. Meios (±SE) das contagens e durações das sondas realizadas por heróis de
Eusquisto em vagens de soja de cultivares resistentes (BRS 391, BRS 543 RR, BRS 1003
IPRO) e suscetíveis (BRS 5601 RR). A, número de sondas por inseto (NPI) (A). B, duração da
sondagem por sonda por inseto (PDPI; min). C, duração da sondagem por inseto (PDI;
min). As médias nas barras seguidas da mesma letra, em cada variável EPG, não são
significativamente diferentes em α = 0,05 (teste de médias LSD).
(Tabela 4). Para formas de onda Eh1c e Eh1w, não há diferenças em qualquer EPG v
ariável e fomos para e, um embora, WDEI duração s era e numericamente maior
on BRS 1003 an d BRS 5601.
siderando o t tempo total gastar t por inse cts com caminho inicial
Vigarista
C avefo rms (ou seja, soma informação de Eh1a, Eh1b, a nd Eh1c), os resultados mostraram
no stati diferença stica ferenc es para co tias ( NWEI) um nt durações (WDEI)
véspera de feriado
uma
mong cultivares . O d geral urati em (WDI) de patividades athway em
BRS 10 03 foi m argin aliado longo r (aprox. 38 minutos) (F 3,64 = 2,61, P = 0,0589)
º um o n BRS 391 24 minutos) a nd BRS 543 (c uma. 25 min); BRS 5601 foi
(cerca de
prazo editar (ca . 31 min).
dentro
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Journal of Insect Physiology 131 (2021) 104228
Fig. 4. Porcentagem de sondas contendo formas de onda específicas produzidas
por heróis de Eusquisto alimentando-se de vagens de soja de cultivares
resistentes (BRS 391, BRS 543 RR, BRS 1003 IPRO) e suscetíveis (BRS 5601 RR). Eh1
inclui as formas de onda da via Eh1a, Eh1b e Eh1c.
3.2.2.2. Ingestão de tecido vascular.Adultos de E. heróisfrequentemente ingeriu
seiva do tecido do xilema (Eh2) (90% dos insetos registrados realizaram Eh2) e
raramente do tecido provável do floema (Eh4) (16% dos insetos registrados). O
período de ingestão de vasos vasculares, principalmente Eh2, foi responsável por
um terço ou mais do TPD (soma de todas as formas de onda de sondagem) em
plantas resistentes (variando de ca. 32 a 41%), enquanto no BRS 5601 a ingestão
somou ca. 26% de TPD (Figura 2). As durações (WDI, WDEI) e contagens (NWEI) das
formas de onda Eh2 e Eh4 não diferiram entre as cultivares de soja testadas (
Tabelas 3–5, respectivamente). Numericamente, BRS 5601 e BRS 1003
apresentaram eventos e durações globais maiores de Eh2.
3.2.2.3. Ruptura celular nas sementes.Em BRS 543 e BRS 1003 resistentes, a forma
de onda de laceração/maceração celular (Eh3a) foi responsável por quase um
terço de TPD (soma de todas as formas de onda de sondagem), enquanto em BRS
5601 suscetível, Eh3a somou mais de metade (55%) de TPD. BRS 391 foi
intermediário (43%) (Figura 2). Em contraste, a atividade de ingestão nas sementes
(Eh3b) de todas as cultivares de soja representou<3% de TPD, com o menor valor
na BRS 1003 (0,4%), aumentando na BRS 543 (1%), BRS 391 (2,1%) e BRS 5601
(2,9%) (Figura 2).
A duração total (WDI) da forma de onda Eh3 (soma de Eh3a e Eh3b) foi
significativamente reduzida (F3,60 = 4,33, P = 0,0079) em plantas resistentes
(variou de ca. 41 a 58 min) em comparação com a suscetível BRS 5601 (ca.
130 min). Da mesma forma, a duração por evento também foi menor (F3,60 =
5,48, P = 0,0021) em plantas resistentes (de ca. 12 a 21 min) do que em BRS
5601 (ca. 58 min). No entanto, o número de eventos Eh3 (ou seja, o número
de vezes que o percevejo atinge a semente) não diferiu entre as cultivares
de soja (variou de 2,9 a 3,5) (F3,60 = 0,63, P = 0,5982).
Em plantas resistentes, os adultos apresentaram a menor (ca. 3X) duração
total (WDI) das atividades de laceração/maceração (forma de onda Eh3a) em
comparação com BRS 5601 (F3,60 = 4,28, P = 0,0084). A duração total da ingestão de
tecido de sementes (Eh3b) foi marginalmente significativa e menor em BRS 543 e
BRS 1003 do que em BRS 5601. BRS 391 mostrou uma duração intermediária (
Tabela 3). Em contraste, a duração da forma de onda por evento por inseto (WDEI)
para Eh3a e Eh3b não foi significativamente diferente entre as cultivares de soja
(Eh3a:F3,60 = 1,39, P = 0,2545; Eh3b:F3,34 = 0,21, P = 0,8891) (Tabela 4). No entanto,
o número de eventos de forma de onda por inseto (NWEI) foi significativamente
menor (ca. 3-5X) em plantas resistentes (Eh3a:F3,60 = 7,41, P = 0,0003; Eh3b:F3,34 =
5,11, P = 0,0050) (Tabela 5); assim, o número de eventos é diretamente
responsável pelas maiores diferenças na duração geral das formas de onda de
ruptura celular (WDI). Em resumo, as atividades de ruptura celular em sementes
de soja (Eh3a e Eh3b) foram realizadas com mais frequência e em geral por mais
tempo na planta suscetível (BRS 5601) em comparação com plantas resistentes
(BRS 391, BRS 543 e BRS 1003).
T. Lucini et ai.
4. Discussão
Os resultados do nosso estudo de biologia de ninfas e adultos demonstraram
que cultivares de soja resistentes (BRS 391, BRS 543 e BRS 1003) não afetaram
significativamente as variáveis biológicas de ninfas e adultos de
E. heróisem comparação com a cultivar suscetível (BRS 5601). Assim, um efeito antibiótico
(antibiose) provavelmente não é a categoria envolvida na resistência das cultivares em
bloco. Em contraste, as gravações de EPG demonstraram que os insetos gastaram
significativamente mais tempo em geral em atividades não alimentares (como descansar
e caminhar) em plantas resistentes em comparação com a planta suscetível (BRS 5601).
Além disso, a curta duração das atividades do estilete, principalmente no endosperma da
semente, em plantas resistentes, além de uma duração significativamente maior no BRS
5601 indica um comportamento de não preferência (antixenose) deE. heróispara
alimentação nas cultivares de soja em bloco estudadas. De fato, a EPG pode ser muito
detalhada na revelação de comportamentos, e diferenças que podem ser muito sutis no
nível de comportamento de todo o inseto podem ser bastante significativas usando a
técnica de EPG.
Múltiplas características da estrutura da planta (física e/ou química) podem
afetar diversos comportamentos dos insetos, incluindo sua alimentação. Uma
delas é a espessura da parede celular, que está diretamente correlacionada com o
tempo gasto pelos insetos em atividades associadas à via (ou seja, penetração dos
estiletes através do tecido epidérmico e do parênquima). Esta característica pode
indicar uma resistência física da planta; por exemplo, atividades de vias mais
longas sugerem dificuldade em encontrar e acessar o local de ingestão. Nas
vagens de soja, sabe-se que os percevejos precisam superar uma camada celular
rígida, composta por células do esclerênquima (o que foi observado em cortes
histológicos,Lucini e Panizzi, 2018), para atingir o endosperma da semente (essa
atividade é representada pela forma de onda Eh1c – veja Lucini e Panizzi, 2018).
No entanto, a duração geral das formas de onda relacionadas às atividades da via
(principalmente Eh1c) não diferiu entre todas as cultivares de soja testadas; de
fato, foi numericamente maior na cultivar suscetível. Portanto, a resistência
apresentada pelas cultivares de soja em bloco testadas não está relacionada à
presença de uma barreira física na parede da vagem que dificulte a penetração do
estilete em direção à semente.
O número de sondas contendo apenas formas de onda da via (ou seja, os estiletes
foram retirados antes de localizar o tecido de ingestão), no entanto, foi ligeiramente
maior em plantas resistentes do que BRS 5601, o que indica que os percevejos tiveram
mais dificuldade em encontrar o tecido de ingestão em cultivares resistentes, em
comparação para um suscetível. Diferentes fatores podem ser avaliados sensorialmente
por percevejos na busca por plantas adequadas e preferidas para explorá-las como
fontes de alimento (Panizzi e Lucini, 2017). As respostas comportamentais (por exemplo,
falha em encontrar o tecido de ingestão em cultivares resistentes) podem indicar a
aceitação ou rejeição do inseto de uma cultivar em particular (Bernays e Chapman, 1994).
As características das plantas relacionadas a essa maior ou menor aceitação do percevejo
podem incluir características químicas que não foram avaliadas neste estudo. Pesquisas
futuras poderiam se concentrar na qualificação de características de cultivares de blocos
de soja que desencadeiem as dificuldades para os percevejos encontrarem o tecido de
ingestão em plantas resistentes.
As contagens e durações da ingestão de tecido vascular (principalmente Eh2
– ingestão de seiva do xilema) não apresentou diferenças significativas entre as
cultivares de soja testadas; embora BRS 5601 e BRS 1003 tenham apresentado eventos e
durações totais de ingestão de xilema numericamente maiores. Da mesma forma, o
pentatomídeoDichelops furcatus (F.) não mostrou diferenças significativas para o
número e duração dos eventos do xilema ao se alimentar de estruturas reprodutivas de
soja e cereais de primavera (Lucini e Panizzi, 2020). Os percevejos que se alimentam de
sementes não são relatados para usar a ingestão de seiva do xilema como fonte de
nutrientes, mas apenas para manter a hidratação corporal.Rivera e Mitchell, 2020) e para
o equilíbrio de nutrientes, após alimentação a partir de sementes – tecido altamente
concentrado em nutrientes (Lucini et al., 2016). No entanto, em plantas resistentes, os
insetos tenderam a dedicar maior porcentagem de suas atividades totais de sondagem
na ingestão de seiva do xilema do que na cultivar suscetível, talvez esse comportamento
tenha compensado a forte redução das atividades de estilete nas sementes (discutido
adiante).
As principais diferenças encontradas E. heróisentre cultivares de soja resistentes e
suscetíveis estão relacionadas às duas atividades do endosperma da semente: laceração/
maceração celular, conforme refletido pela forma de onda Eh3a,
8
Journal of Insect Physiology 131 (2021) 104228
e ingestão de tecido de sementes, conforme refletido pela forma de onda Eh3b.
Considerando ambas as atividades em conjunto, os percevejos foram menos ativos
quando alimentados com plantas resistentes (BRS 391–45%, BRS 543–38% e BRS
1003-30% de sua duração total de sondagem) em comparação com o suscetível BRS 5601
(58%) . Esta atividade mais curta em sementes de cultivares resistentes foi causada
principalmente pelo número significativamente diminuído (3-5X menos) de eventos de
laceração/maceração celular (Eh3a) e ingestão (Eh3b) por inseto. Ele permite que as
cultivares de bloco tolerem mais números de percevejos na cultura sem redução de
produtividade em comparação com a cultivar suscetível.
Embora mais de 88% dos insetos registrados tenham atingido o endosperma da
semente em todas as quatro cultivares testadas, menos de 50% dos insetos registraram
o conteúdo celular ingerido das sementes enquanto alimentados com cultivares
resistentes/tolerantes, enquanto que na cultivar suscetível mais de 75% dos insetos
ingeriram a semente. conteúdo. Em outras palavras, a maioria das sondagens em
sementes realizadas por percevejos em cultivares resistentes compreendeu apenas
atividades de laceração/maceração sem eventos de ingestão do conteúdo celular. Esse
resultado sugere que essas cultivares podem ter reduzido a palatabilidade ou
digestibilidade das sementes, talvez devido à presença de compostos químicos, como
relatado para outros insetos.Mitchell et al., 2016). Tal hipótese precisa ser melhor
estudada em pesquisas futuras envolvendo cultivares de soja em bloco.
Em todas as cultivares de soja testadas, na maioria das vezes (>95%) das atividades
de alimentação de percevejos nas sementes foram gastos para “preparar” o alimento por
meio de atividades de laceração e maceração; menos de 5% do tempo foi usado para
ingerir o conteúdo celular. Essa discrepância entre laceração/maceração e duração da
ingestão nas sementes também foi observada com o comedouro de sementes.D.
furcatus após se alimentar de diferentes fontes alimentares (Lucini e Panizzi, 2020). No
entanto, as sementes são bolsões de nutrientes altamente concentrados e esse curto
período de ingestão nas sementes de soja provavelmente fornece quantidades
suficientes de nutrientes essenciais para o desenvolvimento do percevejo, uma vez que
as variáveis biológicas de ninfas e adultos de
E. heróisnão foram significativamente afetados em todas as cultivares testadas.
É importante destacar que esta pesquisa fornece a primeira documentação
detalhada do comportamento alimentar de um pentatomídeo semeador em
cultivares de soja resistentes. Os resultados demonstraram que as cultivares de
bloco de soja estudadas (BRS 391, BRS 543 RR e BRS 1003 IPRO) não afetam a
biologia deE. heróisninfas e adultos, mas os adultos mudaram seu
comportamento alimentar e diminuíram muito o tempo total gasto nas atividades
dos estiletes, principalmente no endosperma das sementes dessas cultivares.
Esses resultados sugerem que a resistência das cultivares de soja, portando a
tecnologia de blocos, é resultado da menor preferência à alimentação (ie,
antixenose), ao invés da tolerância proposta pelos pesquisadores. Os resultados
do presente trabalho são notavelmente semelhantes aos resultados de EPG
encontrados pela cigarrinha de ruptura celularEmpoasca kraemeri Ross & Moore
em feijão comum resistente e suscetível (Serrano e Backus, 1998; Serrano et al.,
2000). Os pesquisadores relataram que os acessos de feijão que os criadores
pensavam ser tolerantes eram, na verdade, antixenóticos.
O efeito antixenótico apresentado em cultivares de blocos de soja parece estar
associado ao endosperma da semente que pode ser causado por fatores químicos
presentes nas vagens/sementes que afetam negativamente o comportamento do inseto,
induzindo o percevejo a reduzir fortemente suas atividades no tecido da semente. Silva et
ai. (2013)relataram que o comportamento alimentar de E. heróisem vagens de soja é
significativamente reduzido quando metabólitos secundários (por exemplo, isoflavonas)
são produzidos. Além disso, a análise fisiológica (via teste de tetrazólio) de sementes das
mesmas cultivares de bloco de soja testadas aqui, após serem submetidas à infestação
de 4 indivíduos/m durante a fase de enchimento de vagens, mostrou muito menos danos
nas sementes em comparação com a cultivar suscetível testada (Bueno e Dall'Agnoll,
2020); o que indica mudanças significativas no comportamento alimentar do percevejo.
Da mesma forma, Serrano e colaboradores relataram que as cigarrinhas mudaram seu
comportamento de uma estratégia potencialmente menos prejudicial (ingestão de
floema usando uma bainha salivar parcial) para uma estratégia mais prejudicial
(alimentação por ruptura celular). No entanto, apesar da mudança no comportamento
alimentar, a alimentação dos insetos foi limitada o suficiente para não causar sérios
danos às vagens.
T. Lucini et ai.
5. Conclusões
Nossos resultados sugerem que a resistência expressa pelas cultivares de soja
(BRS 391, BRS 543 RR e BRS 1003 IPRO) é resultado da menor preferência por
alimentação (antixenose), ao invés da tolerância, que induziu atividades de
alimentação mais curtas, principalmente no endosperma da semente, em
comparação com a cultivar suscetível testada. A presente pesquisa contribui para
o desafio de desenvolver variedades de soja resistentes ao percevejo, fornecendo
detalhes sobre o comportamento alimentar deE. heróis, que sugerem fatores de
resistência baseados em sementes. Estudos adicionais, com análise química,
devem ser feitos para esclarecer o principal fator envolvido nessa resistência.
Declaração de Interesse Concorrente
Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes
conhecidos ou relacionamentos pessoais que possam ter influenciado o
trabalho relatado neste artigo.
Agradecimentos
Este estudo foi parcialmente financiado por uma bolsa do Conselho
Nacional de Pesquisa e Tecnologia do Brasil (CNPq) 302293/2017-5 à
ARP; Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
(CAPES) por bolsa de pós-doutorado para TL (processo número
88887.371769/2019-00). Agradecemos a Gabriela Adames Pinto pelo
apoio nas atividades do laboratório/estufa. Agradecemos também à
Embrapa Trigo e Embrapa Soja pelo apoio à pesquisa, e à Dra. Elaine A.
Backus e Dra. Paula L. Mitchell pela leitura crítica do manuscrito.
Atividade de pesquisa registrada no banco de dados Sisgen sob o
número AA93702. Registrado no Comitê de Publicação da Embrapa
Trigo sob o número 21205.002034/2020-64.
Contribuições do autor
TL, ARP e AFB co-planejaram e co-escreveram o manuscrito. TL
coexecutou os experimentos e a análise estatística. Todos os autores leram,
corrigiram e aprovaram o manuscrito.
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