1. Introduo Carboidratos so aldedos ou cetonas poliidroxiladas de frmula emprica geral Cn(H2O)n.

Os carboidratos e seus produtos de hidrlise so so poliidroxilados, portanto solveis em solventes polares como gua e e etanol. Classificam-se em mono, oligo e polissacardeos. Os monossacardeos (acares) so os carboidratos mais simples. No podem ser hidrolisados a acar de menos peso molecular. Consistem em unidades aldedicas ou cetnicas poliidroxiladas. Os acares simples que tm um grupo carbonila terminal (aldedo) so designados aldoes, e cetoses quando a carbonila no se encontra na extremidade da cadeia carbnica. Entre os acares simples mais importantes que ocorrem nos alimentos destacam-se a glicose(aldose) e a frutose(cetose). Os monossacardeos em soluo esto presentes em maior quantidade na forma cclica, as formas mais comuns para glicose so apresentadas na figura I, sendo a primeira em maior quantidade quando em soluo.

Figura I- Formas do monossacardeo glicose me soluo aquosa. Os polissacardeos so carboidratos de peso molecular alto, na natireza os mais abundantes so a amilose que tem na estrutura unidades de glicose unidas por ligao glicosdicas 14, e a celulose formada tambm por unidades de glicose mas em ligaes glicosdicas 14. Essa diferena proporciona a amilose estrutura linear e a celulose estrutura helicoidal. So considerados oligossacardeos os carboidratos de cuja hidrlise total resultam em 10 unidades de monossacardeos. Os dissacardeos amis importantes so a sacarose, constituda de glicose e frutose; a lactose constituda de glicose e galactose; e a maltose, um dissacardeo proveniente da hidrlise do amido, formada por duas unidades de glicose. As dificuldades da anlise de carboidratos devem-se s suas formas isomricas (um acar simples como glicose pode existir em seis formas: simples, hidratada, e glicopiranose, e glicofuranose) e ao fato de muitos monossacardeos diferirem de maneira discreta, como na direo de seus grupos hidroxilas. As possibilidades das formas isomricas aumentam muito em funo dos possveis ismeros de monossacardeos existentes, podendo ocorrer mutarrotao dos acares em soluo.

Os diversos mtodos de anlise de mono, oligo e polissacardeos baseiam-se nas propriedades qumicas, reatividade e estruturais dessas substncias. As principais caractersticas utilizadas como principio de anlise so: - A presena de um tomo de carbono estereognico nos monos e dissacardeos, fato que os torna oticamente ativos, permitindo a anlise por mtodos polarimtricos; - A presena de um grupo carbonila livre, permitindo a oxidao dos monossacardeos a cidos, propriedade utilizada em mtodos de deteco por oxireduo; - A posio do grupo carbonila, numero e posies de grupos hidroxilas na cadeia de carboidratos, contribuindo para mudanas na densidade do meio em que esto contidos, alterando a refrao da luz quantificada pelo princpio da refratometria; - A reao de monossacardeos (especficos ou no) e dissacardeos para formao de substncias cromognicas para identificao e;ou quantificao colorimtrica. Os mtodos de anlise de carboidratos dividem-se basicamente em mtodos quantitativos e qualitativos.Nos mtodos qualitativos, detecta-se a presena de um determinado carboidrato ou grupo dessa substncia. Normalmente representam testes de resposta rpida, em que os carboidratos reagem para formao de substncias cromognicas. Nos mtodos quantitativos, determinam-se no somente quais carboidratos esto presentes como tambm a sua quantidade. 2. Objetivo: Efetuar diluio de soluo a partir de uma soluo estoque; preparar solues quando a concentrao real no exata; calcular o fator de correo, fazer a correo e determinar a concentrao real de uma soluo padro secundria; determinar o volume de uma soluo j conhecida, que reage com outra soluo de concentrao que se deseja determinar; reconhecer as modificaes na estrutura de um aminocido por efeito da variao do pH do meio onde ele se encontra. 3. Material e Mtodo 3.1 Materiais: Tubos de ensaio; Reativo de Molish; cido sulfrico; Reativo de Fehling; gua; Bico de Buchner; Reativo de Barfoed; cido clordrico concentrado; Reativo de Seliwanoff; Reativo de Bial; Aparelho de banho-maria.

3.2 Procedimentos: Reao de Molisch Em um tubo de ensaio foi pipetado 2 ml de soluo de carboidratos, em seguida adicionado 3 gotas de reativo de Molish e misturado. O tubo foi inclinado e deixado escorrer pela parede 2 ml de cido sulfrico concentrado, de modo que os dois lquidos no se misturassem. Reativo de Fehling Em um tubo de ensaio foi pipetado 2ml de reativo de Fehling(1ml de A + 1 ml de B), misturado com 2 ml de gua e aquecido por 5 minutos. Em seguida, foi verificado se a soluo foi inalterada. Em outro tubo juntou-se 2 ml de reativo de Fehling(1 ml de A + 1 ml de B) e 1 ml da soluo de carboidratos. Misturo-se tudo e aqueceu-se at a fervura. Reao de Barfoed Em um tubo de ensaio foi pipetado 2 ml de soluo de carboidratos + 2 ml do reativo de Barfoed. Foi fervido diretamente na chama durante 1 minuto. Reao de Seliwanoff Em um tubo de ensaio foi pipetado 1 ml da soluo de carboidrato + 3 ml de cido clordrico + 1 ml de reativo de Seliwanoff.E foi aquecido diretamente na chama por alguns minutos. Reao de Bial Em um tubo de ensaio foi pipetado 1 ml da soluo de carboidratos, 2 m,l do reativo de Bial emisturado. Em seguida, foi aquecdio em banho-maria fervente PR 15 minutos. 4. Resultados e discusses: Obtiveram-se estes resultados mostrados na tabela para a anlise qualitativa: Reaes Molish Fehling Seliwanoff Bial Barfoed Controle Glicose + + + Arabinose + + + + Sacarose + + + Frutose + + + + +

Teste de Molisch: O surgimento de um anel de colorao lils estvel indica que houve formao de furfurais, revelando a presena de acares na amostra. Teste de Molisch: O surgimento de um anel de colorao lils

estvel indica que houve formao de furfurais, revelando a presena de acares na amostra.

Reao de Barfoed:

Reao de Bial:

Reao de Seliwanoff: A reao positiva caracterizada pelo aparecimento de colorao avermelhada, que indica a formao do complexo entre furfural ou HMF com o resorcinol e, conseqentemente, indica presena de aldoses e cetoses. Como foi dito, a reao para cetoses mais rpida e mais intensa do que para aldoses.

Teste de fehling:

5. Concluso: A partir dos resultados obtidos, realizou-se uma anlise comparativa entre os mtodos, para cada tipo de amostra. Com resultados e discusses foi possvel uma contextualizao prtica dos conhecimentos vistos em sala de aula, culminando em um aprendizado mais dinmico.

6. Bibliografia 1. Remio, J.O.R., Siqueira, A.J.S. & Azevedo, A.M.P. Bioqumica: Guia de aulas prticas. Porto Alegre: EDI-PUCRS, 2003 2. Nelson, DL. & Cox,M.M. Lehningher: Princpios de bioqumica. Editora M&F Academic Book Services, So Paulo, 2005.