Serologia Infecciosa

UNIVERSIDADE NOVA DE LISBOA
Faculdade de Cincias Mdicas Departamento de Medicina Laboratorial
SEROLOGIA INFECCIOSA
2007/2008
Consideraes gerais Sfilis Brucelose Mononucleose Infecciosa Toxoplasmose Rubola VIH
SEROLOGIA INFECCIOSA CONSIDERAES GERAIS

A presena de um anticorpo para uma determinada protena ou componente depende da resposta imunitria do doente pelo que a deteco de anticorpos utilizada para avaliar qualitativa e quantitativamente essa resposta. A deteco de anticorpos e antignios depende da formao do complexo antignio-anticorpo. Uma das partes (Ag ou Ac) definida podendo ou no estar marcada e usada para procurar a outra parte.

Um Ac monoclonal especfico usado para um determinado epitopo antignico e a formao do complexo Ag-Ac monitorizada pela precipitao do complexo ou pela presena de um marcador (fluorescncia, radioactividade ou enzimas) ligado ao Ac.
Quando os Ac e os Ag esto presentes em quantidades equimolares formam complexos insolveis que precipitam naturalmente. As concentraes de Ag e Ac so os factores mais determinantes para a formao dos complexos.

A precipitao mxima ocorre quando as concentraes de Ac e Ag so equivalentes zona de equivalncia, nas zonas com excesso de Ag ou de Ac observa-se uma diminuio do precipitado <> formao de complexos. A formao de imunocomplexos pode ser usada para quantificar um Ag se a concentrao do Ac usado for conhecida.
IC formados
ZONA EQUIVALNCIA ZONA DE EXCESSO DE AC ZONA DE EXCESSO DE AG

Concentrao de Ag

TESTES QUE DEPENDEM DA FORMAO DOS COMPLEXOS Imunodifuso nefelometria/turbidimetria Fixao do complemento Crioglobulinas TESTES NOS QUAIS O AG/AC EST LIGADO FASE SLIDA Aglutinao ELISA Ensaios de micropartculas
Consideraes gerais Sfilis Brucelose Mononucleose Infecciosa Toxoplasmose Rubeola VIH
SEROLOGIA INFECCIOSA SFILIS

ETIOLOGIA
Treponema pallidum spp pallidum

Famlia Espiroquetas Gnero Treponema Espcie Treponema pallidum Constituio: membrana citoplasmtica peptidoglicano (sensvel penincilina) membrana externa No visvel ao microscpio comum em coloraes de gram ou giemsa. As formas mveis podem ser vistas ao microscpio de fundo escuro ou com colorao com anticorpos anti-treponema marcados com fluorescncia.

EPIDEMIOLOGIA
Distribuio mundial incidncia nos anos 40 com a introduo da teraputica com penincilina mas agora mais estvel Vias de transmisso: - sexual - placentria - tranfusional A contagiosidade da doena influenciada pelo estadio da doena (principalmente nos estadios iniciais)

EVOLUO CLNICA I. Sfilis precoce 1- Sfilis primria ulcerao / cancro duro 2- Sfilis secundria 3- Sfilis latente precoce testes serolgicos positivos mas sem sintomatologia no primeiro ano aps a infeco II. Sfilis tardia 1- Sfilis latente tardia inicia-se um ano aps a infeco 2- Sfilis terceria gomas neurosfilis * sfilis cardiovascular *Doentes imunocomprometidos

DIAGNSTICO LABORATORIAL DETECO DIRECTA DE T. PALLIDUM POR MICROSCOPIA O diagnstico de sfilis primria, secundria ou congnita pode ser feito rapidamente pelo exame do exsudado das leses em microscopia de fundo escuro. O treponema surge com movimentos em espiral. Nas leses orais e anais dficil diferenciar o T. pallidum de outros treponemas no patognicos, pelo que a tcnica de campo escuro no se deve aplicar. Para excluir o diagnstico requerem-se 3 exames negativos. Imunofluorecncia consiste na marcao do T. pallidum com anticorpos antitreponema marcados com fluorescncia

DIAGNSTICO LABORATORIAL DETECO INDIRECTA DE T. PALLIDUM PROVAS SEROLGICAS A infeco sifiltica produz dois tipos de anticorpos, os anticorpos reagnicos e os anticorpos anti-treponema especfico. O diagnstico da sfilis feito na maioria dos doentes com base nos testes serolgicos que podem ser notreponmicos e treponmicos Testes no-treponmicos avaliam os Ac IgM e IgG dirigidos a um antignio lipdico que o resultado da interaco do T. Pallidum com os tecidos do doente (cardiolipina-lecitina-colesterol) e provavelmente tambm do prprio Treponema pallidum Os testes no-treponmicos mais usados so: RPR - Rapid Plasm Reagin VDRL Venereal Disease Rechearch Laboratory

DIAGNSTICO LABORATORIAL DETECO INDIRECTA DE T. PALLIDUM PROVAS SEROLGICAS II VDRL Prova de microaglutinao no treponmica teste qualitativo que utiliza como Ag uma soluo de cardiolipina, lecitina e colesterol positivo 6 semanas aps a infeco 2 a 3 semanas aps leso primria RPR teste de floculao macroscpica que utiliza micropartculas de carvo que diferencia melhor o positivo e o negativo usa soro no aquecido

DIAGNSTICO LABORATORIAL DETECO INDIRECTA DE T. PALLIDUM PROVAS SEROLGICAS III Testes no-treponmicos Tanto o RPR como o VDRL so bons marcadores da infeco na sua fase aguda e teis no controlo da resposta ao tratamento. Ambos podem ser executados rapidamente, mas o VDRL exige uma inactivao a 56C e a sua leitura microscpica, ao contrrio do RPR cuja leitura macroscpica e permite fazer titulaes importantes na monitorizao da resposta teraputica O VDRL a prova de eleio para o diagnstico da neurosfilis em amostras de LCR.

DIAGNSTICO LABORATORIAL DETECO INDIRECTA DE T. PALLIDUM PROVAS SEROLGICAS IV Testes no-treponmicos Problemas Falsos positivos inf. virais (hepatite, sarampo, varicela, MNI) inf. por parasitas (malria) doenas do colagnio doenas autoimunes neoplasias gravidez Fenmeno zona ausncia de aglutinao nas diluies iniciais Positivos crnicos

DIAGNSTICO LABORATORIAL DETECO INDIRECTA DE T. PALLIDUM PROVAS SEROLGICAS V Testes treponmicos so testes com Ac especficos que se baseiam na resposta aos componentes antignicos do T. Pallidum e estabelecem uma alta probabilidade de infeco seja presente ou passada. Os testes treponmicos mais usados so: FTA-ABS TPHA ELISA

DIAGNSTICO LABORATORIAL DETECO INDIRECTA DE T. PALLIDUM PROVAS SEROLGICAS VI Testes treponmicos FTA-ABS teste treponmico, especfico e sensvel em todas as fases da sfilis, que se mantm sempre positivo. Uma vez positivo mantm-se para toda a vida pelo que no deve ser usado como controlo da eficcia teraputica. Ag T. pallidum + amostra doente Ac anti Tp Complexo Ag-Ac
Complexo Ag-Ac +
Conjugado Ac marcado com fluorescena

FLUORESCNCIA

DIAGNSTICO LABORATORIAL DETECO INDIRECTA DE T. PALLIDUM PROVAS SEROLGICAS VII Testes treponmicos - TPHA usa um antignio treponmico e detecta IgM e IgG. til para teste confirmatrio dos testes no treponmicos ou quando estes so negativos. No muito sensvel na sfilis primria. GV + partic. Treponema cls sensibilizadas Aglutinao
cls sensibilizadas + Ac doente
Sem aglutinao
Aglutinao

DIAGNSTICO LABORATORIAL DETECO INDIRECTA DE T. PALLIDUM PROVAS SEROLGICAS VIII Testes treponmicos ELISA Permite a deteco de Ac IgM e IgG, especialmente til para screening de grandes populaes Como regra geral uma prova treponmica negativa indica a ausncia de infeco, passada ou presente. A maioria das pessoas tratadas adequadamente permanecem positivas para provas treponmicas para muitos anos e muitas para toda a vida.
Biologia molecular (sondas e PCR)
SEROLOGIA INFECCIOSA BRUCELOSE

ETIOLOGIA
Gnero Brucella 4 espcies B. melietensis (caprinos) mais patognica B. suis (bovinos) B. abortus (sunos) B. canis (ces) pequeno coco bacilo gram negativo, imvel e nocapsulado, que no forma esporos; fastidioso desenvolve-se melhor a 37C com atmosfera enriquecida em CO2; no fermentam hidratos de carbono; catalase +; oxidase+

EPIDEMIOLOGIA Os seres humanos desenvolvem a doena aps a ingesto de produtos alimentares provenientes de animais contaminados (queijo fresco) ou pelo contacto directo com a Brucella atravs da pele escoriada (ordenha de animais com mastite; queijarias; veterinrios). A nvel mundial a B. melitensis constitui a causa mais frequente de brucelose. Existem grandes diferenas na incidncia anual da brucelose humana em diferentes pases, dependendo principalmente da extenso da brucelose animal. As reas com maior prevalncia so as do Mediterrneo (Portugal, Espanha; Itlia e Malta), sia e Amrica Central e do Sul.

EVOLUO CLNICA A Brucelose pode ser assintomtica, com apenas evidncia serolgica da infeco. As manifestaes da brucelose sintomtica podem ser divididas em brucelose aguda, doena localizada e brucelose crnica Brucelose aguda O perodo de incubao da brucelose aguda varia entre 7 e 21 dias. O incio , com frequncia, insidioso, com febre baixa e sem queixas localizadas. Mal-estar geral, fraqueza, fadiga, cefaleias, mialgias, sudorese e calafrios so sintomas mais frequentes. O exame objectivo muito pobre, os principados achados so esplenomeglia (10-20%), adenopatias (15%) e hepatomeglia (<10%). Laboratorialmente leucopnia com linfocitose, anemia e V.S.

EVOLUO CLNICA - II Brucelose localizada A doena localizada pode ocorrer em quase todos os locais mas as mais frequentes so: osteomielite abcesso esplnico endocardite infeco genito-urinria doena pulmonar Brucelose crnica Quando as consequncias da doena se prolongam durante anos. de difcil limitao com artralgias, impotncia funcional musculo-esqueltica, parestesias e alteraes neurovegetativa

DIAGNSTICO LABORATORIAL A Brucelose uma doena com sintomatologia inespecfica e cujo diagnstico diferencial deve ser feito com algumas doenas como MNI, toxoplasmose, tuberculose, hepatite, lupus eritematoso sistmico e febre tifoide. CULTURA (isolamento do agente) O isolamento de Brucella constitui o mtodo de diagnstico definitivo. Este isolamento feito a partir da cultura de sangue perifrico (hemoculturas) ou de medula ssea (mielocultura). medida que a doena progride a bacterimia menos frequente

DIAGNSTICO LABORATORIAL CULTURA (caractersticas e sensibilidades)
Franco et al, 2007

DIAGNSTICO LABORATORIAL-II SEROLOGIA Na maioria dos casos o diagnstico de brucelose feito por serologia Testes de aglutinao so os mais testes frequentes devido sua rapidez e facilidade. O aumento significativo do ttulo de anticorpos a base do diagnstico da doena Reaco de Rosa de Bengala usa um antignio tamponado corado pelo Rosa de Bengala, que detecta precocemente aglutininas especficas. Proporciona um diagnstico em poucos minutos com uma sensibilidade e especificidade elevadas. Apresenta um elevado grau de correlao com a seroaglutinao pelo que, devido sua simplicidade, muito til como screening ou despiste inicial. negativa na 1 semana e por vezes na 2 mas mantm-se positiva durante muito tempo

DIAGNSTICO LABORATORIAL-III SEROLOGIA-II Reaco de Wright (seroaglutinao em tubo) diluies crescentes do soro em estudo s quais se adiciona uma quantidade constante de B. abortus . Este antignio tanto reage com os dessa espcie como com os B. Melitensis e B. Suis Um ttulo positivo de 1/160 considera-se o cut-off para o diagnstico da doena no sendo raros valores de 1/640 ou mais nos estadios inicias da mesma. Detecta anticorpos da classe IgM que surgem por volta do 10 dia da doena, apresentam um pico s 3-4 semanas e desaparecem em 3 a 6 meses quer haja ou no cura da doena Falsos positivos clera, tularmia, linfomas, LED, yersnia, tuberculose miliar Falsos negativos quando existem Ac bloqueantes

DIAGNSTICO LABORATORIAL-IV SEROLOGIA-III Teste de Coombs de grande interesse para o diagnstico da brucelose crnica. Demonstra a presena de Ac aglutinantes e no aglutinantes, fundamentalmente IgG. O soro de Coombs (imunoglobulina humana) facilita a aglutinao de Ac no aglutinantes do soro em estudo previamente colocado numa suspenso antignica de B. Abortus . O ttulo obtido geralmente muito mais elevado quanto maior for a evoluo da doena Prova do 2-mercaptoetanol uma modificao seroaglutinao em que se usa uma soluo salina com mercaptoetanol. Este composto capaz de destruir as molculas IgM perdendo a sua capacidade aglutinante sem interferir com IgG que so as que se quantificam nesta prova. da 2de as

DIAGNSTICO LABORATORIAL-V SEROLOGIA-IV Em regra a seroaglutinao em tubo reaco de Wright e o teste de Coombs permitem o diagnstico da maioria dos casos. Resultados negativos em ambos os testes, salvo nos primeiros dias da doena, permite excluir a doena.
Imunofluorescncia indirecta e fixao do complemento Apresentam maior complexidade tcnica sem acrescentar vantagens aos mtodos anteriores.
SEROLOGIA INFECCIOSA MONONUCLEOSE INFECCIOSA

ETIOLOGIA
A sndrome de mononucleose infecciosa (MI) caracteriza-se por febre, odinofagia (com ou sem exsudado farngeo) adenopatias cervicais e frequentemente com hepato ou esplenomeglia ou ambas. Existem vrias causas para este sndrome mas mais de 80% dos casos so devido infeco aguda pelo Vrus Epstein-Barr (EBV)

ETIOLOGIA
Agentes associados ao sndrome de MI Agente especfico Vrus Epstein-Barr Citomegalovrus Primoinfeco pelo VIH Vrus herpes humano 6 (VHH-6) Frequncia 80-90% 5-7% pouco frequente pouco frequente pouco frequente
Toxoplasma gondii

PATOGNESE Infeco EBV cls orofaringe
Activao dos lyn T citotxicos pelos Ag EBV Produo de lyn atpicos
Infeco dos lyn B
EBNA T T
Produo de Ac heterfilos

CLNICA A MI pelo EBV apresenta-se com um quadro febril de durao varivel (2 a 3 semanas), faringite associada a exsudado em 30% dos casos e adenopatias cervicais. Na fase prodmica observa-se cansao, astenia, anorexia, cefaleias e febre. Os sintomas so geralmente mais intensos no fim da 1 semana e diminuem progressivamente nas semanas seguintes.

CLNICA II A esplenomeglia frequente. Raramente ocorre dor abdominal, hepatomeglia, ictercia e edema palpebral. exantema,
O exantema ocorre em cerca de 5% dos doentes e varivel. 90-100% dos doentes medicados com ampicilina nos 10 dias precedentes apresentam exantema maculo-papular.

DIAGNSTICO LABORATORIAL Os doentes apresentam caracteristicamente: - Leucocitose - Linfocitose com linfcitos atpicos/estimulados/activados
clulas grandes mononucleadas com abundante citoplasma e ncleo habitualmente excntrico. O citoplasma basfilo. - Trombocitopnia (50%) - Anemia hemoltica (3%)
Transaminases Critrios de diagnstico para MI por EBV

Febre, odinofagia e adenopatias cervicais Linfocitose 50% Linfocitose atpica 10% suspeita de MI (em jovens) sensibilidade 66% especificidade 80% sensibilidade 74% especificidade 90%

DIAGNSTICO LABORATORIAL LINFCITOS ACTIVADOS

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA O diagnstico definitivo da fundamentalmente serolgico. MI por EBV
Actualmente dispomos de tcnicas que detectam Ac heterfilos cujo aparecimento comum no decorrer da doena e outras que demonstram a presena de Ac especficos para determinadas protenas do vrus.

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA AC HETERFILOS So maioritariamente Ac da classe IgM Fixam-se a Ag localizados na membrana dos eritrcitos de mamferos No reagem com os Ag do EBV Surgem em 80-90% dos doentes com MI e idade >10 anos
Doentes com idade <10 anos surgem em < 50%
80-95%)
Aparecem na fase aguda da doena (durante primeira semana) Raramente persistem para alm dos 2 meses EXCELENTE MARCADOR DA FASE AGUDA DA DOENA No aparecem nos sndromes MI like de outras etiologias A especificidade deste teste prxima dos 100% A sensibilidade varia consoante o grupo etrio (idade > 10 anos de

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA ANTICORPOS PARA EBV Podem ser detectados Ac anti complexos antignicos do EBV: VCA protenas da cpside viral EA early antigen protenas no estruturais que intervm na replicao do cido nucleico viral EBNA EBV nuclear antigen protenas reguladoras multifuncionais no estruturais de localizao nuclear

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA ANTICORPOS PARA EBV A cintica deste Ac durante a primoinfeco a EBV caracterstica: Fase aguda: VCA IgM e EA
os VCA IgM desparecem na fase da convalescncia, raramente persistem por mais de 6 meses Pouco depois: seroconverso VCA IgG (aparecimento quase simultneo ao VCA IgM) Durante o primeiro ms: EBNA IgM (podem no ser detectados)
Entre o 2 eo 6 ms: EBNA IgG permanecem por toda a vida Reactivao: EBNA IgG e reaparecimento Ac anti-EA

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA INTERPRETAO DOS TESTES SEROLGICOS Susceptibilidade - se no existirem Ac VCA o doente susceptivel a infeco pelo EBV Infeco primria Ac VCA IgM e Ac EBNA ausente Um ttulo elevado de Ac VCA IgG e AC EBNA negativo aps 4 semanas de doena muito sugestivo de infeco primria. 80% dos doentes com infeco activa EBV produzem Ac EA Infeco antiga Ac VCA e Ac EBNA presentes (IgG) 95% dos adultos foram infectados com EBV pelo que apresentam Ac durante anos no se tratando de infeco recente.

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA INTERPRETAO DOS TESTES SEROLGICOS Reactivao - na presena de Ac EBNA um Ac EA sugestivo de reactivao. VCA IgM pode tambm estar presente A reactivao da infeco a EBV pode no estar associada a um sndrome clnico definido, muitas vezes ocorre assintomaticamente. Infeco crnica EBV

ALGORITMO DIAGNSTICO
Suspeita clnica de MI
Pesquisa de Ac heterfilos
POSITIVA
NEGATIVA ou DUVIDOSA
MI por EBV
Ac anti EBNA IgG

Ac anti EBNA IgG
POSITIVO
NEGATIVO
NO MI (AGUDA)
Ac anti VCA IgM
POSITIVO
NEGATIVO
MI por EBV
Procurar outras causas de MI
SEROLOGIA INFECCIOSA TOXOPLASMOSE

ETIOLOGIA
Toxoplasma gondii
parasita que infecta algumas espcies de animais e o Homem causando a doena toxoplasmose. Os gatos so o nico reservatrio do T. gondii sendo infectados a partir da ingesto de animais infectados. Os oocistos so excretados pelas fezes e podem sobreviver no meio ambiente durante meses.

ETIOLOGIA
O Homem pode infectar-se de vrios modos: -Ingesto de carne mal cozinhada -Ingesto de frutas/legumes mal lavados contaminados (via -Transmisso placentria
-Inoculao acidental fecal)

CLNICA
A toxoplasmose em doentes imunocompetentes geralmente assintomtica. Cerca de 10-20% dos doentes podem apresentar um quadro semelhante a sind. gripal com adenopatias cervicais. A evoluo habitualmente benigna. Nos doentes com SIDA a encefalite por toxoplasma a causa mais frequente de leso intracerebral e parece ser devida a reactivao da infeco.

CLNICA
Nos doentes imunodeprimidos pode existir doena do SNC, olho e pulmo e resulta de nova infeco ou reactivao de infeco latente. A toxoplasmose congnita resulta de infeco primria adquirida pela me durante a gravidez. A sua incidncia e gravidade varia consoante o trimestre durante o qual ocorreu a infeco.

DIAGNSTICO LABORATORIAL O diagnstico da toxoplasmose pode ser efectuado por: Observao do parasita em amostras dos doentes como LBA (doentes imunodeprimidos) ou em bipsias de ndulos linfticos Isolamento do parasita a partir do sangue ou outro lquido orgnico atravs de inoculao intraperitoneal em ratos Deteco do parasita por PCR (infeces congnitas in utero) Testes serolgicos que constituem a rotina habitual para o diagnstico da toxoplasmose uma vez que as tcnicas anteriores so dispendiosas, complexas e no acrescentam mais informao.

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA A pesquisa de Ac da classe IgG e IgM so os testes mais utilizados Um ttulo de IgG positivo indica contacto com o parasita num perodo de tempo passado ou presente. Para melhor caracterizar esta situao deve-se pesquisar Ac IgM: um resultado negativo exclui infeco recente um resultado positivo difcil de interpretar porque os Ac IgM toxoplasmose podem ser detectados at 18 meses aps a infeco aguda.

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA Na determinao dos Ac IgM podem ocorrer duas situaes: 1. IgM positiva e IgG negativa 2. IgM positiva e IgG positiva Como proceder? 1. IgM positiva e IgG negativa Colher 2 amostra 2 a 3 semanas aps a 1 e test-las em paralelo: Se a primeira colheita coincidiu com um estadio muito inicial da doena a 2 amostra apresentar agora valores aumentados de IgG e IgM evoluo da doena

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA Se a 2 amostra confirmar os dados da primeira este resultado deve ser considerado como um falso positivo e o doente no est infectado 2. IgM positiva e IgG positiva Colher 2 amostra e test-las em paralelo (considerar o envio para lab
de referncia em toxoplasmose):
Grvida efectuar o teste da avidez das IgG: forte avidez nas 12-16 semanas exclui infeco durante a gestao.
DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA
fraca avidez das IgG no deve ser de imediato considerado como infeco recente (alguns doentes apresentam fraca avidez durante meses aps a infeco), uma 2 amostra poder ser colhida para documentar a subida dos ttulos de Ac IgG. Em qualquer dos casos estas amostras devem ser estudadas num lab de referncia antes de interveno teraputica. Como estes casos correspondem a situaes de toxoplasmose certa/provvel deve-se realizar um estudo de infeco do feto deteco de toxoplasma por PCR no lquido amnitico

Pesquisa de Ac anti-toxoplasma IgG
IgG POSITIVA
IgG NEGATIVA
Contacto com parasita

(infeco antiga vs recente)
Ausncia de Infeco
(repetir aps 3 semanas se suspeita clnica de infeco aguda)

IgG POSITIVA
Pesquisa de Ac anti-toxoplasma IgM

(datar a infeco)
IgG POSITIVA IgM NEGATIVA INFECO PASSADA

(> 6 MESES)
IgG POSITIVA IgM POSITIVA INFECO RECENTE ou IgM FALSAS POSITIVA

IgG POSITIVA IgM POSITIVA
Determinao da avidez dos Ac IgG
FORTE AVIDEZ
FRACA AVIDEZ
(AT 12 SEMANAS ANTES)
INFECO PASSADA
INFECO RECENTE PROVVEL
OBTER 2 AMOSTRA 3 SEMANAS APS A 1 ENVIAR PARA LAB DE REFERNCIA
SEROLOGIA INFECCIOSA RUBOLA

ETIOLOGIA Vrus da rubola: togavrus RNA vrus facilmente inactivvel por agentes qumicos, luz ultra violeta e calor Descoberto no sculo XVIII inicialmente descrito como uma variante do sarampo 1 referencia enquanto entidade clnica distinta foi na literatura alem em 1814. Sndrome da rubola congnita descrito pelo oftalmologista australiano Norman Gregg em 1941 que reportou 78 casos de crianas com cataratas ocorridos aps infeco materna no incio da gravidez.

PATOGNESE
Transmisso do vrus por via area Replicao do vrus na nasofaringe e no gnglios linfticos locais Virmia 5-7 dias aps a exposio com disseminao aos tecidos A placenta e o feto so infectados durante a virmia

CLNICA RUBOLA ADQUIRIDA Perodo de incubao 14 dias (pode variar de 12-23 dias) At 50% dos casos so assintomticos Prdromo de febre baixa, fadiga, mau-estar, adenopatias e sintomas respiratrios antes do rash. Nas crianas o rash pode ser a manifestao inicial e no existir prdromo. O rash caracteristicamente maculo-papular e surge 14-17 dias aps a exposio. A sua evoluo craneo-caudal. As adenopatias esto mais frequentemente localizadas s cadeias retroauriculares, occipitais e cervicais posteriores.

CLNICA RUBOLA CONGNITA A infeco pode afectar todos os orgos Pode conduzir a aborto, morte in utero ou parto pr-termo A gravidade da leso do feto depende da idade gestacional em que a infeco ocorreu: 3-12 sem 85% infeco fetal
13-16 sem 35% infeco fetal > 16 sem risco mnimo infeco fetal
85% das crianas infectadas no 1 trimestre de gestao apresentam doena

CLNICA SNDROME DA RUBOLA CONGNITA Surdez o mais comum e por vezes o nico sintoma Cataratas outas alteraes oculares incluem glaucoma, retinopatia e
microftalmia
Defeitos cardacos Microcefalia Atraso mental Alteraes sseas Leses hepticas e esplnicas
As manifestaes podem s ocorrer 2 a 4 anos aps o nascimento.

CLNICA COMPLICAES DA RUBOLA Artralgia ou artrite adulto at 70% crianas rara Prpura trombocitopnica 1/3 000 casos Encefalite Neurite Orquite 1/6 000 casos rara rara

DIAGNSTICO LABORATORIAL O diagnstico da rubola pode ser efectuado por: Isolamento do vrus a partir de amostras de urina ou nasofarngeas em culturas celulares Deteco do vrus por PCR Testes serolgicos Ac anti rubola IgM positivo ou Aumento do ttulo de Ac anti rubola IgG

DIAGNSTICO LABORATORIAL

DIAGNSTICO LABORATORIAL O vrus da rubola pode ser isolado de amostras nasais, sangue, farngeas, urina e LCR . Na orofaringe o vrus pode ser isolado 1 semana antes do rash e at 2 semanas aps o seu aparecimento. Idealmente estas amostras deveriam ser colhidas at 4 dias aps o rash. Apesar deste mtodo ser diagnstico laborioso e dispendioso pelo que no o escolhido por rotina. A deteco do vrus por PCR pode ser efectuada nas culturas celulares ou directamente a partir das amostras. Estas amostras podero ser usadas para caracterizao molecular til em vigilncia epidemiolgica

DIAGNSTICO LABORATORIAL A serologia acaba por ser o mtodo mais comum para confirmar o diagnstico de rubola. A infeco aguda confirmada serologicamente pelo aparecimento de Ac anti-rubola IgGM: - Os Ac IgM podem no ser detectados nos primeiros 4-5 dias aps o rash pelo que se deve proceder a nova colheita depois. Poder haver falsos positivos em pessoas com outras inf virais (parvovrus, EBV, CMV) ou factor reumatoide positivo A infeco aguda tambm confirmada pela subida dos ttulos de Ac anti-rubola IgG na fase aguda e na convalescncia Habitualmente colher a 1 amostra 7-10 dia e depois 14-21 dia (min 7 dias)

IgG IgM
IgG POSITIVA IgM NEGATIVA IMUNIDADE IgG NEGATIVA IgM POSITIVA Incio de seroconverso Falso positivo OBTER 2 AMOSTRA 1 SEMANA APS IgG negativa IgM positiva Falso positivo IgG positiva IgM positiva Seroconverso

IgG POSITIVA IgM POSITIVA
Primo-infeco IgM persistente Reinfeco Reaco cruzada Estimulao no especifica do sistema imunitrio
Determinao da avidez IgG

FORTE AVIDEZ
INFECO PASSADA (>2-3 meses)
FRACA AVIDEZ
INFECO RECENTE PROVVEL (<2 meses)
(OBTER 2 AMOSTRA 2 SEMANAS APS E COMPARAR O TTULO DE IgG)
Infeco fetal: IgM (sangue fetal) RNA viral (liq. amnitico/vilosidades)
SEROLOGIA INFECCIOSA VIH

ETIOLOGIA
Vrus do VIH: retrovrus possui transcriptase reversa que permite ao vrus sintetizar uma cpia DNA do seu genoma RNA 2 tipos de VIH:
VIH 1 frica central, EUA, Europa e Austlia VIH 2 frica ocidental, alg reg Europa
Vrias variantes de VIH 1 e VIH 2 so conhecidas: VIH 1 grupo M (major) mais predominante grupo O (outlier) n pequeno de estirpes divergentes Em relao ao VIH 1, o VIH 2 tem um perodo de latncia clnica maior e uma taxa de transmisso vertical menor.

PATOGNESE
Ligao da gp120 ao receptor CD4 Fuso do vrus e da membrana da clula e mediada pela gp41 Penetrao do vrus na clula
Transcriptase transversa Integrao no DNA do hospedeiro

EPIDEMIOLOGIA A primeira referncia foi em 1981 nos EUA Grande epidemia mundial De 1981 at 2005 mais de 900 000 casos de SIDA nos EUA TRANSMISSO - via sexual - transmisso vertical
muito raro)
- administrao de sangue ou derivados contaminados (hoje
- partilha de seringas contaminadas
Comportamentos de risco

CLNICA 1. DOENA DA SEROCONVERSO Aps a infeco com o VIH o individuo pode permanecer assintomtico ou desenvolver um quadro agudo de doena MI like. Este quadro surge 2-6 semanas aps a infeco com febre, fadiga, mal estar, amigdalite, adenopatias e rash cutneo. Neste perodo os Ac podem ser detectados 2. PERODO DE INCUBAO Durante este perodo o doente completamente assintomtico e pode durar alguns meses at 10 anos. A mediana de 8-10 anos. Nas crianas o periodo de incubao menor.

CLNICA 3. INFECO VIH SINTOMTICA No fim do perodo de incubao podem surgir sinais e sintomas que evidenciam a disfuno progressiva do sistema imunitrio como febre persistente, perda de peso, diarreia crnica, alteraes dermatolgicas. CD4; citopnias 2. SIDA A transio para esta fase pode ocorrer lenta ou rapidamente e parece ser influenciada por cofactores. O diagnstico de SIDA estabelecido com o aparecimento de infeces oportunistas como pneumonite a pneumocystis jiroveci , toxoplasmose, meningite a criptococcus ou sarcoma de Kaposi . O CDC estabeleceu como diagnstico de SIDA CD4< 200cels/mm3

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA O diagnstico da infeco a VIH baseado em testes serolgicos: 1. Screening VIH deteco de anticorpos os testes ELISA so os mais usados para a deteco de anticorpos anti VIH. A sua sensibilidade e especificidade > 99% mas mesmo assim podem ocorrer reaces falsas positivas ou negativas. os testes iniciais no detectavam Ac anti VIH 2 e VIH 1 grupo O. os ELISA actuais permitem detectar Ac anti VIH 1 e VIH 2 PROBLEMA: RN filhos de mes seropositivas (Ac maternos atravessam a placenta e podem persistir at 15 meses.

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA 2. Seroconverso deteco de antignios na fase inicial da doena no se detectam Ac no soro, estes geralmente surgem 3-4 semanas aps a infeco. A antigenmia VIH ( p24) precede a seroconverso e permite detectar a doena nesta fase inicial.

DIAGNSTICO LABORATORIAL SEROLOGIA 3. Testes confirmatrios um teste ELISA positivo deve ser confirmado por Western blot. um teste ELISA negativo no necessita de confirmao. Detecta Ac especficos para protenas do VIH Interpretao por vezes subjectiva, mas existem critrios para designar positivo, indeterminado ou negativo. Geralmente a presena de 2-3 protenas virais (p24, gp41 e gp 120/160) constituem um resultado positivo.

DIAGNSTICO LABORATORIAL OUTROS TESTES CARGA VIRAL A carga viral tem grande valor prognstico na avaliao do doente VIH + e monitoriza a resposta ao tratamento antiretrovital. Os doentes cuja carga viral era menor na fase inicial da doena ou que diminuiu aps intituio de teraputica tm melhor prognstico.

DIAGNSTICO LABORATORIAL OUTROS TESTES CONTAGEM DE CD4 Apesar da monitorizao com a carga viral a contagem de clulas CD4+ continua a ser de grande valor na avaliao da progresso da doena e da resposta teraputica indicando o esatdio da doena. The measurement of HIV viral load tells us where the disease is going, whereas CD4 tells us where the disease is at this moment TESTE DE RESISTNCIA AOS ANTIRETROVIRAIS

DIAGNSTICO LABORATORIAL OUTROS TESTES TESTE DE RESISTNCIA AOS ANTIRETROVIRAIS Podem ser fenotpicos ou genotpicos Fenotpicos define se uma estirpe em particular sensivel ou resistente a um agente antiretroviral determinando a concentrao de frmaco necessria para inibir o crescimento do vrus in vitro nem todas as estirpes crescem em culturas celulares Genotpicos determinao de mutaes associadas a resistncia por tecnologia de biologia molecular (PCR)

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UNIVERSIDADE NOVA DE LISBOA

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