Tcnicas de Diagnstico

Laboratorial
:
Prof. Fernando Figueredo

NOVEMBRO DE 2011
JUAZEIRO DO NORTE - CE

Hemocultura
Urocultura
Cropocultura
Cultura de ponta de cateter
Espermocultura
Cultura de secreo vaginal
Secreo uretral
Secreo da orofaringe
Feridas, abscessos e exudatos

Secreo de ouvido
Secreo ocular
Swab nasal
Ponta de cateter
Cultura de lquor
Colorao de Gram
Colorao de bacilos cido-resistentes
(Baciloscopia)-Ziehl-Neelsen

Hemocultura

o exame realizado com

o objetivo de isolar e
identificar
microorganismos
patognicos na circulao
(Bacteremia ou
Fungemia).

Hemocultura

Estudos recentes mostram que

quanto maior o volume de sangue
por amostra, melhor a recuperao
do microorganismo, respeitando a
proporo sangue/meio.

Antissepsia prvia

Coleta

Fatores que influenciam os

resultados das hemoculturas

Agentes etiolgicos
Agentes de infeces hospitalares
- Staphylococcus aureus meticilino-resistente
- Staphylococcus epidermidis
- Pseudomonas aeruginosa
Bacteremias : estafilococos coagulasenegativo,
bacilos gram- negativos.
Fungos e polimicrobianas

Sepse - Fisiopatologia
Papel do endotlio vascular
- regulao do tnus vascular
- homeostasia
- fibrinlise
- permeabilidade

endotlio
vascular
citocinas

produo de
substncias

ao procoagulante e
protrombtica

produo
mediadores
inflamatrios

endotoxinas

Polimorfonucleares : lesam o endotlio pela aderncia c/ consequente aumento da

permeabilidade vascular ( edema, diminuio do DC e da PA)
Reduo da deformidade das hemcias - microcirculao
Modulao da apoptose celular

Fisiopatologia
ativao direta dos macrfagos e moncitos
componentes parede celula ativao indireta c/ a produo de citocinas
( FNT alfa, IL 1, IL 6, IL 8, leucotrienos e PAF)
Mediadores primrios

atuam em outras clulas

perpetuando a inflamao
( resposta inflamatria tardia)
Mediadores secundrios

Fisiopatologia

Fisiopatologia

HEMOCULTURA

COLETA
1:10 (Sangue:meio de
cultura)

Anticoagulante: Polianetol
Sufonato de Sdio (SPS)
0,05mL

Aerobiose

Anaerobiose

(BHI caldo Columbia)

(Tioglicolato)

Subcultivos

Agar Chocolate

Agar Sangue

EMB

Mac Conkey

24 48 horas aps o cultivo primrio fazer o

subcultivo;
Perodo mximo de incubao: 7 dias (se as
culturas permanecerem sem crescimento o

Meios para semeio

AS

EMB

Interpretando

Interpretando

Provas bioqumicas
Se o isolado for Gram-negativo, deve-se realizar as seguintes provas de
identificao:

Identificao bacteriana
E.

coli

Provas bioqumicas
Se o isolado for Gram-positivo, deve-se realizar as seguintes
provas de identificao:

ANTIBIOGRAMA

Crescimento
confluente
utilizado no
antibiograma

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UROCULTURA

A urocultura o exame mais solicitado no

laboratrio de bacteriologia, cerca de 40 a 70% das
amostras que chegam so representadas por esta
amostra clnica.

O diagnstico das infeces urinrias possue

grande importncia, porque uma infeco urinria
mal diagnosticada ou no diagnosticada pode
acarretar at uma insuficincia renal crnica.

INCIDNCIA

Mulher - maior
Por que?
Pelo curto tamanho da uretra.
Proximidade da uretra com a vagina e o nus.
Homem - menor
Por que?
Pelo longo tamanho da uretra, alm da presena de
substncias bactericidas encontradas no fluido
prosttico.

Agentesmaisfrequentes.

Bacilos Gram negativos, sendo a Escherichia coli

o microorganismo mais comumente isolado ( 80%
).
Outros Gram negativos: Klebsiella pneumoniae,
Proteus mirabilis, Enterobacter sp, Pseudomonas
aeruginosa.
Gram positivos: Staphylococcus aureus, S.
saprophyticus (em mulheres jovens), S. coagulase
negativa.

COLETA

ADULTOS

CRIANAS

ACONDICIONAMENTODAAMOSTRA

URINA PARA UROCULTURA

Aps higienizao prvia jato mdio

Pela manh ou at 4horas de reteno urin

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URINA

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1JATOURINRIO
MATERIAL:1jato-primeiraurinade
manh(20ml)
1jato-mnimode4hapsaltima
mico
CUIDADOS:Rpidoprocessamento.
Mantersobrefrigerao.Higienizao
adequada

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CULTURADOJATOMDIO
MATERIAL:jatomdioejatofinal(810ml).Primeiraurinademanhouurinar
comomnimode4hapsaltimamico.
CUIDADOS:
Higienizaodagenitliaexternacom
guaesabo.
Noencherofrascoataborda.
Sutilizarfrascosesterilizados.
Rpidoprocessamento.
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CULTURADOJATOMDIO
Mantereenviaramostrassob
refrigerao.
Todaurinadeversermantidanuma
geladeiraetransportadaa4C.
Interferente:antibiticos

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UROCULTRA (Mulheres)

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Semeio

Meios de cultura utilizados

Mtodo da ala calibrada (0.001)

Tipo de semeio utilizado

Confecodalminadagotadeurina
nocentrifugada.

LEITURA

LEITURA DAS LMINAS

Avaliao da microscopia da gota de urina
no centrifugada:

Presena de diversos morfotipos bacterianos

e clulas epiteliais, demonstram coleta
inadequada.

LEITURA DAS LMINAS

Ausncia de bactrias e leuccitos,

correlaciona-se com resultados de culturas
negativos.
Presena de leuccitos e ausncia de
bactrias correlaciona-se com uretrite ou
infeco por Micoplasma ou Chlamydia.

LEITURA DAS PLACAS

Critriosdeinterpretao

Ausncia de leuccitos e crescimento de trs ou mais

espcies de microorganismos sugere contaminao
(Pedir nova amostra).
At 10.000 unidades formadoras de colnias (U.F.C.) /
ml de urina = sugestivo de contaminao.
10.000 a 90.000 U.F.C. / ml = suspeita de infeco.
Acima de 100.000 U.F.C. / ml = indcio de infeco.

UMA OBSERVAO...

Uma baixa contagem pode ser devido:

A um incio de infeco,
Uma diluio por ingesto aumentada de lquidos,
Fluxo rpido da urina,
Presena de agentes anti-spticos ou antimicrobianos.

IDENTIFICAO DO
MICROORGANISMO ISOLADO

ANTIBIOGRAMA

COPROCULTURA
MATERIAL: Fezes recentes
CUIDADOS: Colher in natura (pus, muco o
sangue ). Colocar uma poro no Cary Blain e
enviar ao laboratrio at no mximo 12 horas
aps colheita. Sem conservador = 1 hora no
mximo.
INTERFERENTE: antibitico

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FEZES
A coprocultura auxilia o clnico no
diagnstico da etiologia de diarrias
bacterianas, por meio do isolamento de
patgenos entricos.
Pode-se utilizar frasco contendo o meio
conservante para transporte (CARY-BLAIR),
fornecido pelo Laboratrio.
Colocar uma quantidade de fezes no meio
conservante (equivalente a uma colher de
sobremesa). Preferir sempre as pores
muco-sanguinolentas.

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Amostras No Aceitveis:
Sem conservantes que foram
obtidas h mais de 1 hora;
Vrias amostras colhidas no
mesmo dia;
Fezes lquidas em fraldas.

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A Cultura Deve Ser Realizada De

Preferncia A Partir De Fezes Frescas

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ESPERMOCULTURA

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Material: Esperma
Cuidados: Antes da coleta, proceder a limpeza
das mos e do pnis, usando gua e sabo.
O paciente deve urinar imediatamente antes da
coleta do esperma
Interferente: Antibitico

Indicaomdica

A espermocultura pode elucidar a presena

de infeces nas glndulas acessrias do
aparelho reprodutor masculino, como uma
prostatite, prostovesiculite, etc.Significado

SECREODA
OROFARINGE

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Indicaomdica

Deteco de processos infecciosos;

avaliao da flora normal do local;
diagnstico das faringites;

Pesquisa de Streptococcus pyogenes.

Beta Hemolitico do grupo A.

SECREO DE OROFARINGE
A coleta feita em jejum aps a higiene oral apenas com gua
e bochechos

Usar esptula como abaixador de lngua

Pedir para o paciente dizer Ah!!!!

Introduzir o swab nas reas hiperemiadas

(avermelhadas e com foco de ps)
sem tocar na lngua e bochecha

Retirar o ps e colher embaixo deste local

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Colocar o swab no meio de transporte (Stuart)

55

Aspiradotraqueal
A coleta deste material realizada em pacientes entubados
ou traqueostomizadas atravs de sonda de aspirao de
calibre adequado e estril seus resultados refletem a
colonizao do trato respiratrio. Deve-ser cortar a ponta da
sonda com tesoura estril colocando-a em recipiente tambm
estril enviando imediatamente ao laboratrio.

Cultura de feridas abscessos

e exsudatos

Furnculos,
lceras,
Fstulas,
Abscessos
Drenados,
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Mordidas e
picadas de
animais,
lceras de
decbito.

CULTURADEFERIDASSUPERFICIAIS

MATERIAL:Furnculo,lcera,fstulas,abscessos
drenados,mordidaepicadasdeanimais.CUIDADOS:

Removerasec.superficialcomgazesestrileaspirarum
poucomaisprofundamente,mesmoqueacoletaseja
feitocomswab,evitarasecreosuperficial.

Crostaseexsudatosdevemserremovidos,poisa
amostraapropriadaestabaixodessematerial.Enviarno
meiodetransporte(Stuart)

INTERFERENTE:antibitico
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FERIDAS E AMOSTRAS DE
TECIDOS

Furnculo
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Abscesso

Coleta: Descontaminar as margens e superfcie da

leso com soluo de povidine-iodine (PVPI) e soro
fisiolgico (metade/metade)

Aspirar o mais profundamente por meio de seringa

e agulha

Caso no d para aspirar(ideal) colher com

swab(menos recomendado)

Crostas e exsudatos devem ser removidos e

desprezados

Colher abaixo
60

61

SECREODEOUVIDO
Remover secreo superficial com um swab
umedecido em soro fisiolgico e obter material
com outro swab fazendo rotao no canal.
SECREOOCULAR
Desprezar a secreo purulenta superficial e
coletar com swab o material da parte interna da
plpebra inferior.

SECREO OCULAR

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NEISSERIA GONORRHEAE

SWAB NASAL
Colherasecreocomswabestrilda
narina

Caso o paciente no tiver secreo,

umedecer o swab em soro fisiolgico estril

Colocaremmeiodetransporte(Stuart)
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CulturadePontadeCateter
Significado clnico:
As infeces de cateteres em gerais
importantes e devem ser diagnosticadas
rapidamente.
Bacteremias ou fungemias.
Geralmente no seu local de insero sinais
inflamatrios como:
Eritemas, ps, rubor, etc.
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CATETER VENOSO CENTRAL

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CulturadeLquor
MATERIAL:Lquor(5ml)

CUIDADOS:Enviaromais

rapidamente.Norefrigeraraamostra
INTERFERENTE:antibitico

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Coleta em 3 tubos 1,5mL:

1. Analises bioqumicas e sorolgicas;
2. Microbiolgico ;
3. Contagem de clulas;

Secreovaginal

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SECREO VAGINAL
No Estar Em Perodo Menstrual;

Evitar Ducha Ginecolgica e Cremes Vaginais;

Trs Dias de Abstinncia Sexual;
No Usar Medicao Tpica Nas ltimas 24hs;
Esfregao Em Duas Lminas;
Material deve ser colhido no laboratrio;
70

Suspenso Em Tubo Com Salina.

Culturasdesecreesuretrais

Uretrite o nome genrico usado para designar

inflamao ou infeco na uretra, canal que sai
da bexiga e chega ao meato urinrio, o ponto de
contato com o meio exterior.

Prurido Disria Corrimento

Inflamao

Atlas de DST, Anthony Wisdom. Artes Mdicas, 1994

UretriteNoGonoccica(UNG)
Sodenominadasuretritesno

gonoccicasasuretritessintomticas,cujas
bacterioscopiase/ouculturasonegativas
paraogonococo;

Vriosagentestmsidoresponsabilizados,
sendoosprincipais:Chlamydia trachomatis,
Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma
hominis,Trichomonas vaginalis, dentre
outros.

Trichomonas vaginalis

Chlamydia trachomatis

Mycoplasma hominis

UretriteNoGonoccica(UNG)
Sintomatologia

CorrimentoMucode;
Disria;
Pruridouretral;
Incubao7-21dias;

Corrimento Uretral

Aconselhar
Oferecer
Anti-HIV
VDRL
Adeso
Notificar
Parceiro
Retorno

Anamnese
e Exame Fsico
sim
Bacterioscopia disponvel?
Diplococos
Gram negativos
intracelulares

No
Sim
Clamdia e Gonorria

No
Clamdia

A colorao de Gram usada para classificar bactrias com base no

tamanho, na morfologia celular e no comportamento diante de corantes.
No laboratri
o de microbiologia clnica, um teste adicional rpido para diagnstico de
agentes infecciosos, sendo tambm utilizada para avaliar a qualidade da
amostra clnica analisada. Considerando os aspectos de identificao de
microrganismos, assinale a opo correta

a) Colorao mencionada til para a classificao de bactrias e de

vrus.
b) O mtodo de Gram permite corar bactrias em diversas amostras,
tais como escarro,liquor ou urina.
c) Colorao mencionada no til para a identificao de fungos.
d) A Escherichia coli, um coco gram-positivo, o agente causador de
faringites.
e)Todos os microrganismos gram-positivos so patognicos.

No diagnstico laboratorial das

bacteremias deve ser utilizada a:
a) Hemocultura.
b) Urocultura.
c) Espermocultura.
d) Coprocultura.
e) Orocultura.