Universidade Federal de Juiz de Fora

Faculdade de Farmcia

ACOMPANHAMENTO DO
PREPARO DE MATERIAL E
ANLISES
MICROBIOLGICAS
Fernanda Pampanelli
Franciely Ferraz
Las Melquades
Lina Penasso
Marina Loures

Introduo
Manter a qualidade da gua
Preveno de doenas por
microrganismos
Anlise Microbiolgica

Introduo

So utilizados Indicadores de Contaminao Fecal:

fezes de

animais de sangue quente

E. Coli

Coliformes
Totais

Coliformes
Termotolerantes

Bacilos gram-negativos;
Aerbios ou anaerbios facultativos;
Fermentadores de lactose com produo de gs;

Portaria n
2.914/2011 do
Ministrio da
Sade: Ausncia

Introduo
Queijo e leite ( Fran)

Preparo de Materiais

Antes da anlise: material preparado e esterilizado;

7 placas de petri contendo Plate Count gar (PCA)
2 tubos contendo 9 mL de gua pepitonada 0,1%
10 tubos contendo 10 mL de caldo Lauril Sulfato Triptose (LST)
com tubos de Durhan;
10 tubos contando 10 mL de caldo Verde Bile brilhante 2% (VBB)
com tubos de Durhan;
10 tubos contendo 10 mL de caldo EC-MUG com tubos de
Durhan
10 placas de petri contendo gar Eosina Azul de Metileno (EMB);

Princpio dos meios de cultura

e reagentes

Contagem total em placas:

Indicado
para
contagem
de
microrganismos em gua e alimentos;
Plate Count gar (PCA)
Hidrolisado
enzimtico de casena:
aminocidos e outras substncias
nitrogenadas complexas;
Extrato de levedura: Vitaminas do
complexo B;
Dextrose: fonte de energia;

Fonte: Google imagens. Acesso em 21/11/2016

Princpio dos meios de cultura

e reagentes
Teste Presuntivo: detectar fermentadores de lactose
(Coliformes totais), permitindo o crescimento rpido
dos microorganismos e a recuperao de clulas
estressadas.
Caldo Lauril Sulfato:

Lauril Sulfato de Sdio: Inibe o

crescimento
da
microbiota
acompanhante;
Produo
de
gs:
indica
fermentao da lactose e presena de
coliformes

Fonte: Google imagens.

Acesso em 21/11/2016

Princpio dos meios de cultura

e reagentes
Confirmatrio: pretende-se confirmar a presena de
Coliformes Totais.

Verde Bile Brilhante 2% (VBB):

Bile Bovina: inibidor de gram positivo;

Corante Verde Brilhante: inibidor de
gram positivo;
Liberao de gs: fermentador de
lactose gram negativo, tpico de
coliformes totais;

Fonte:BD, 2009.

 Deteco de Coliformes Termotolerantes: pretendese detectar coliformes de origem fecal e para isso
utiliza-se um meio seletivo.
Caldo EC-MUG:

Sais Biliares e temperatura elevada:

privilegiam crescimento de E. coli;
MUG: quebrado pela enzima -Dglucuronidase,
produzida
exclusivamente por E. coli, produzindo
um composto que emite fluorescncia.
Fonte:BD, 2009.

-D-glucuronidase
4-metilumbeliferil--D-glucurondio
(MUG)

4-metilumbeliferona

Princpio dos meios de cultura

e reagentes
Confirmatrio para presena de E. coli:

gar
EMB:
meio
ligeiramente
seletivo
utilizado para o isolamento
e diferenciao de bacilos
entricos gram negativos.

Eosina
Y
e
azul-de-metileno:
inibidores de de gram positivos e
indicadores, que coram as colnias
em resposta fermentao da
lactose;
E. coli : produzem colnias com um
brilho verde metlico

Fonte:Google imagens.
Acesso em: 21/11/2016.

Preparo de Materiais
Fran

Princpio dos meios de

cultivo e reagentes
Fran

ANLISES
MICROBIOLGICAS

Anlise microbiolgica do leite

Contagem de coliformes totais e fecais

Anlise microbiolgica do leite

Contagem de Salmonella
25 mL da
amostra

Agar
MacConkey

35C/24 h

alquotas
de 1 mL e
0,1 mL

225 mL de
Caldo
Lactose

Agar
SalmonellaShigella

h
/24
C

37

banho-maria
42
C
/24
h

10 mL caldo
Rappaport
(RV)

Agar Verde
Brilhante

TSI

cido na base e
alcalino no pice
para Agar TSI e
alcalino com ou
sem produo
de gs para LIA

10 mL de caldo
Tetrationato
(TT)

35C/24 h

identificao bioqumica
TSA

teste sorolgico

LIA

Anlise microbiolgica do leite

Contagem de Bactrias heterotrficas

Anlise microbiolgica do
queijo
fernanda

Anlise microbiolgica da
gua
Lina

Interpretao e discusso da
anlise de gua
Lina

Referncias

Acumedia. gar eosina azul metileno holt eosinmethylene blue agar (7134). 2011. Disponvel em:
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