PROTEÍNAS: DESNATURAÇÃO E

PROCESSOS DE SEPARAÇÃO
 HEMOGLOBINA
Tetrâmero – 4 cadeias polipeptídicas.
Duas cadeias α e duas cadeias β.
Grupo heme
 PROTEÍNAS: ANEMIA FALCIFORME

Doença genética

Hemácias não conseguem ligar o O2

Troca de um resíduo de aminoácido na

sequência primária

ácido glutâmico (Glu) pela valina (Val)

COLÁGENO
 QUERATINA
DUAS -HÉLICES
ENTRELAÇADAS
 Desnaturação e Renaturação de Proteínas
Conformação nativa de uma proteína refere-se à estrutura tridimensional em
que a molécula apresenta suas propriedades biológicas naturais.

Desnaturação refere-se a alterações da conformação nativa de uma proteína,

podendo resultar em perda parcial ou total, reversível ou irreversível, de sua
atividade biológica.

Interações não-covalentes são fracas

Fatores: calor, pH, sais, substâncias caotrópicas, detergentes
 Desnaturação e Renaturação de Proteínas

Calor

A clara do ovo, que contém albumina, coagula formando um sólido branco.

Não adianta tentar ressolubilizar (renaturação) abaixando a temperatura.

pH

A variação do pH interfere nas cargas das cadeias laterais dos resíduos de

aminoácidos. Em pH ácido durante a formação do ácido láctico, a caseína do
leite pode precipitar.
 Desnaturação e Renaturação de Proteínas
Sais: salting out
O aumento na concentração de sais causa uma competição entre os sais e as
proteínas pelas moléculas de água do meio (força iônica); resultando numa menor
quantidade de água disponível para a solubilização das proteínas. precipit. por sais

Sais: salting in
Em soluções com baixa força iônica, pequenos aumentos na concentração de
sais também aumenta a solubilidade das proteínas. (solubilização por sais)
 Desnaturação e Renaturação de Proteínas
Detergentes

O dodecilsulfato de sódio
(SDS) desnatura as
proteínas introduzindo
cargas negativas ao longo
da proteína desnaturada.
 Desnaturação e Renaturação de Proteínas

Substâncias Caotrópicas

O -mercaptoetanol e a uréia
causam desnaturação por
interagir com os aminoácidos.
 Desnaturação e Renaturação de Proteínas
Cabelo permanente

peróxido de hidrogênio (oxidante)

 Processos de Separação de Proteínas

1) Cromatografia
Por exclusão:
Também chamada de filtração em gel.

As proteínas maiores são

eluídas primeiramente
através da coluna
cromatográfica, enquanto
as menores são eluídas
posteriormente.
 Processos de Separação de Proteínas

1) Cromatografia

Por troca iônica:

Coluna com substâncias de carga positiva –
coluna aniônica.

Coluna com substâncias de carga negativa

– coluna catiônica.

Por afinidade:
Separação de uma proteína específica –
anticorpo.
 Processos de Separação de Proteínas

2) Eletroforese Unidimensional

Gel de poliacrilamida – proteínas

 Processos de Separação de Proteínas
2) Eletroforese Unidimensional

SDS-dodecil sulfato de sódio

-mercaptoetanol
 Processos de Separação de Proteínas

2) Eletroforese Bidimensional
Gel formado com um gradiente de pH
– focalização isoelétrica.
 Processos de Separação de Proteínas
2) Eletroforese Bidimensional