Genética Médica

Prof. Dr. Vladimir da Mota Silveira Filho

vladimir.filho@upe.br
Livros
Conteúdo
Imunogenética
Farmacogenética
Distúrbios genéticos de herança mendeliana
Distúrbios genéticos de herança citoplasmática
Análise de heredograma
Distúrbios genéticos de herança complexa
Mapeamento genético funcional (Prática)
Alterações cromossômicas numéricas
Alterações cromossômicas estruturais
Técnicas de análise cromossômica
Defeitos congênitos
Consulta genética
Epidemiologia molecular
Genética do câncer
 Conteúdo

Análise de Distúrbios genéticos Imunogenética

Heredograma de herança
Mapeamento mendeliana Farmacogenética
Genético Funcional

Distúrbios
genéticos de Genética do Câncer
herança complexa

Consulta Genética Distúrb genéticos de

Alterações
Técnicas de Análise herança citoplasmática
cromossômicas
Cromossômica
numéricas e estruturais Defeitos Congênitos
Epidemiologia
Molecular
 Conteúdo

Análise de Distúrbios genéticos Imunogenética

Heredograma de herança
Mapeamento mendeliana Farmacogenética
Genético Funcional

Distúrbios
genéticos de Genética do Câncer
herança complexa

Consulta Genética Distúrb genéticos de

Alterações
Técnicas de Análise herança citoplasmática
cromossômicas
Cromossômica
numéricas e estruturais Defeitos Congênitos
Epidemiologia
Molecular
Farmacogenética

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Conceitos
• farmacocinética
Taxa em que o organismo absorve, transporta, metaboliza ou excreta
as drogas e seus metabólitos: fase I e fase II.
Conceitos
• farmacocinética
• fase I do metabolismo de drogas
Introdução de um grupo mais polar (hidroxila) a um composto,
permitindo, assim, a ligação de um grupo lateral mais rapidamente.

-OH
Conceitos
• farmacocinética
• fase I do metabolismo de drogas
• fase II do metabolismo de drogas
Ligação de um grupo açúcar ou acetil à droga para destoxificá-la e
torná-la mais facilmente excretada.

-OH
-O-
Conceitos
• farmacocinética
• fase I do metabolismo de drogas
• fase II do metabolismo de drogas
• farmacodinâmica
Efeitos do fármaco no organismo (mecanismo de ação): droga → alvo.
Conceitos
• farmacocinética
• fase I do metabolismo de drogas
• fase II do metabolismo de drogas
• farmacodinâmica
• farmacogenética
Área da medicina personalizada que permite aos médicos escolher um
medicamento ou uma dose do medicamento para os quais o paciente não
esteja sob risco de um efeito adverso.

Nos EUA, 2.000.000 pacientes/ano

100.000 mortes/ano
 -OH

Farmacogenética – fase I da farmacocinética

• proteínas do citocromo P450

hemeproteína
hepática
 -OH

Farmacogenética – fase I da farmacocinética

• proteínas do citocromo P450
• 56 enzimas (genes) divididas em 20 famílias

CYP1 CYP2 CYP3 CYP4 CYP5 CYP6 CYP7 CYP8

CYP9 CYP10 CYP11 CYP12 CYP13 CYP14 CYP15

CYP16 CYP17 CYP18 CYP19 CYP20

 -OH

Farmacogenética – fase I da farmacocinética

• proteínas do citocromo P450
• 56 enzimas (genes) divididas em 20 famílias
• 3 famílias: responsáveis pela fase I de 96% drogas
CYP1 CYP2 CYP3 CYP4 CYP5 CYP6 CYP7 CYP8

CYP9 CYP10 CYP11 CYP12 CYP13 CYP14 CYP15

CYP16 CYP17 CYP18 CYP19 CYP20

 -OH

Farmacogenética – fase I da farmacocinética

• proteínas do citocromo P450
• 56 enzimas (genes) divididas em 20 famílias
• 3 famílias: responsáveis pela fase I de 96% drogas
CYP1 CYP2 CYP3 outros CYP1A1
CYP1A1 CYP2C9 CYP3A4 CYP1A2
CYP1A2 CYP2C19
CYP2D6

CYP2C9

CYP3A4

CYP2C19

Contribuição de seis enzimas do citocromo

CYP2D6
P450 na fase I do metabolismo de drogas
 -OH
Acetaminofen
Farmacogenética – fase I da farmacocinética Redutores de colesterol
Bloqueadores adrenérgicos
• proteínas do citocromo P450 Propranolol
Metronidazol
• 56 enzimas (genes) divididas em 20 famílias Hipoglicêmicos orais
Varfarina
• 3 famílias: responsáveis pela fase I de 96% drogas Antiepilépticos
Antidepressivos
CYP1 CYP2 CYP3 Ansiolíticos
CYP1A1 CYP2C9 CYP3A4 Antiarrítmicos
Analgésicos narcóticos
CYP1A2 CYP2C19
Ciclosporina A
CYP2D6 Antipsicóticos
Codeína
Diazepam
• Alelos com atividade normal (selvagem) Eritromicina
Taxol
• Alelos com atividade reduzida ou ausente Fungicidas
Cocaína
• Alelos com atividade aumentada Cafeína
AINE
...
 -OH

Farmacogenética – fase I da farmacocinética

• proteínas do citocromo P450
• 56 enzimas (genes) divididas em 20 famílias
• 3 famílias: responsáveis pela fase I de 96% drogas
CYP1 CYP2 CYP3
CYP1A1 CYP2C9 CYP3A4
CYP1A2 CYP2C19
CYP2D6 Possui 26 alelos diferentes
- Alelos selvagens
- Alelos CYP2D6 com atividade reduzida (mut. de sentido trocado)
- Alelos CYP2D6 sem atividade (mut. de recomposição)
- Alelo CYP2D6*1XN atividade aumentada (múltiplas cópias)
 -OH

Farmacogenética – fase I da farmacocinética

• proteínas do citocromo P450
• 56 enzimas (genes) divididas em 20 famílias
• 3 famílias: responsáveis pela fase I de 96% drogas
CYP1 CYP2 CYP3
CYP1A1 CYP2C9 CYP3A4 Fenótipos do
CYP1A2 CYP2C19 metabolismo na fase I
CYP2D6

Alelo em um cromossomo
selvagem atv. reduzida atv. ausente atv. aumentada
selvagem normal
Alelo em atv. reduzida normal lento
outro
cromossomo atv. ausente normal lento lento

atv. aumentada rápido - - -

 -OH

Farmacogenética – fase I da farmacocinética

• proteínas do citocromo P450
• 56 enzimas (genes) divididas em 20 famílias
• 3 famílias: responsáveis pela fase I de 96% drogas
CYP1 CYP2 CYP3
CYP1A1 CYP2C9 CYP3A4
CYP1A2 CYP2C19
CYP2D6 Metabolizadores lentos: risco de acumular níveis tóxicos de drogas

Metabolizadores rápidos: tratados com subdosagem

(fora da faixa terapêutica)
 -OH

Farmacogenética – fase I da farmacocinética

• proteínas do citocromo P450
• 56 enzimas (genes) divididas em 20 famílias
• 3 famílias: responsáveis pela fase I de 96% drogas

Metabolizador lento Metabolizador normal Metabolizador rápido

 -OH

Farmacogenética – fase I da farmacocinética

• proteínas do citocromo P450
• 56 enzimas (genes) divididas em 20 famílias
• 3 famílias: responsáveis pela fase I de 96% drogas
CYP1 CYP2 CYP3
CYP1A1 CYP2C9 CYP3A4
CYP1A2 CYP2C19
CYP2D6 Frequência de metabolizadores lentos
Origem Étnica
Gene CYP2D6 Gene CYP2C19
África subsaariana 3,4% 4%
Ameríndia 0% 2%
Asiático 0,5% 15,7%
Branca 7,2% 2,9%
Centro-Oeste e Norte da África 1,5% 2%
Habitantes das Ilhas do Pacífico 0% 13,6%
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação

UGT1A1
glicuronato-transferase

Irinotecan (7-etil-10-hidroxicamptotecina)
alcaloide vegetal com atividade antitumoral
inibidor da DNA topoisomerase
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação

UGT1A1
glicuronato-transferase

Variações no sítio promotor (TATAA box)

•A(TA)5TAA = transcrição aumentada
•A(TA)6TAA = selvagem
Toxicidade grave •A(TA)7TAA = transcrição reduzida
•A(TA)8TAA = transcrição muito reduzida
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação
• polimorfismo da acetilação

Hidralazina
tratamento da hipertensão
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação
• polimorfismo da acetilação

NAT2
N-acetiltransferase

Hidralazina
tratamento da hipertensão
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação
• polimorfismo da acetilação

NAT2
N-acetiltransferase

Lúpus eritematoso sistêmico •Alelos de acetilação lenta (recessivos)

•Alelos selvagens

Falha no tratamento •Alelos de acetilação rápida (dominantes)

Hidralazina
tratamento da hipertensão
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação
• polimorfismo da acetilação

NAT2
N-acetiltransferase

Lúpus eritematoso sistêmico •Alelos de acetilação lenta (recessivos)

•Alelos selvagens

Falha no tratamento •Alelos de acetilação rápida (dominantes)

Dapsona
tratamento da hanseníase
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação
• polimorfismo da acetilação
• polimorfismo da metilação

TPMT
tiopurina-metiltransferase

6-mercaptopurina (MG) e 6-tioguanina (TG)

tratamento de leucemias infantis e imunossupressão
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação
• polimorfismo da acetilação
• polimorfismo da metilação

TPMT
tiopurina-metiltransferase

Metabolismo lento: •Três alelos com mutação de sentido trocado = enzima

aumenta a eficiência, mas pode instável que se degrada rapidamente
levar à intoxicação

6-mercaptopurina (MG) e 6-tioguanina (TG)

tratamento de leucemias infantis e imunossupressão
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação
• polimorfismo da acetilação
• polimorfismo da metilação
• polimorfismo da colinesterase
BCHE
butiril-colinesterase

Succinilcolina
anestésico comumente empregado em cirurgias
 -O

Farmacogenética – fase II da farmacocinética

• polimorfismo da glicuronidação
• polimorfismo da acetilação
• polimorfismo da metilação
• polimorfismo da colinesterase
BCHE
butiril-colinesterase

Metabolismo lento: •Alelos com mutação de sentido trocado = atípico (recessivo)

Paralisia pós-operatória prolongada

Succinilcolina
anestésico comumente empregado em cirurgias
Farmacogenética – variações na resposta farmacodinâmica

NADPH
(protege as hemácias de danos oxidativos)

G6PD
(glicose-6-fosfato desidrogenase)
Farmacogenética – variações na resposta farmacodinâmica
Alguma drogas causam danos oxidativos
Tratamento com primaquina (antimalária)

Deleções in frame do G6PD = deficiência de NADPH  anemia hemolítica

 Farmacogenética – variações na resposta farmacodinâmica

Homens mais
suscetíveis anemia hemolítica
hemizigoto
Farmacogenética – variações na resposta farmacodinâmica
anemia hemolítica
Primaquina

Sulfonamidas

Naftaleno

Fava (Vicia faba) - anemia hemolítica e icterícia neonatal

Farmacogenética – variações na resposta farmacodinâmica
anemia hemolítica
febre maligna
Tratamentos com: anestésico inalatório (halotano)
relaxantes musculares despolarizantes (succinilcolina)
1 / 50.000 adultos apresentam reação
50% dos casos = mutação no gene RYR1 (canal de
cálcio intracelular)
↑ nível de cálcio ionizado no sarcoplasma

• Contração muscular prolongada (rigidez muscular)

• Febre com risco de morte
• Hipercatabolismo
Farmacogenômica
• analisar vários genes simultaneamente
• influência na farmacocinética e farmacodinâmica
• considerar a etnia
• variantes sinérgicas e antagônicas
• interferência ambiental
• medicina personalizada
Imunogenética

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Aspectos Gerais
• a resposta imune pode ser dividida em três etapas:
- reconhecimento da entidade exógena
- comunicação deste reconhecimento às células apropriadas
- eliminação da entidade invasora
Aspectos Gerais
• moléculas:
- anticorpos (linfócitos B/plasmócito)
- receptores de célula T (linfócito T)
- MHC (complexo principal de histocompatibilidade):
classe I (céls somáticas)
classe II (linfócitos B, macrófagos, APC)
classe III (complemento)
Anticorpo

NH

2
H
-N
2
-
NH

2
H
-N
2
-

λ (22q11)
κ (2p13)
| |
HOOC COOH
IgM μ
IgE ε
IgD δ
IgA α (14q32)
IgG γ
| |
HOOC COOH
Anticorpo

NH

2
H
-N
2
-
NH

2
H
-N
2
-

λ (22q11)
κ (2p13)
| |
HOOC COOH
IgM μ
IgE ε
IgD δ
IgA α (14q32)
IgG γ
| |
HOOC COOH
 Segmentos gênicos da cadeia leve λ AC

30 V 4 JC
L Vλ1 L Vλ2 L Vλ3 L Vλn (...) Jλ1 Cλ1 Jλ2 Cλ2 Jλ3 Cλ3 Jλ4 Cλ4
 Segmentos gênicos da cadeia leve λ AC

L Vλ1 L Vλ2 L Vλ3 L Vλn (...) Jλ1 Cλ1 Jλ2 Cλ2 Jλ3 Cλ3 Jλ4 Cλ4
 Segmentos gênicos da cadeia leve λ AC

L Vλ1 L Vλ2 Jλ3 Cλ3 Jλ4 Cλ4

5’- AAAAAAAA

H2N- -COOH

Variável Constante
110 aa 104 aa
Segmentos gênicos da cadeia leve λ AC

H
2N
-
H2N- -COOH

-C
OO H
Anticorpo

NH

2
H
-N
2
-
NH

2
H
-N
2
-

λ (22q11)
κ (2p13)
| |
HOOC COOH
IgM μ
IgE ε
IgD δ
IgA α (14q32)
IgG γ
| |
HOOC COOH
 Segmentos gênicos da cadeia leve κ AC

40 V 5J 1C
L Vκ1 L Vκ2 L Vκ3 L Vκn (...) Jκ1 Jκ2 Jκ3 Jκ4 Jκ5 (...) Cκ
 Segmentos gênicos da cadeia leve κ AC

L Vκ1 L Vκ2 L Vκ3 L Vκn (...) Jκ1 Jκ2 Jκ3 Jκ4 Jκ5 (...) Cκ
 Segmentos gênicos da cadeia leve κ AC

L Vκ1 L Vκ2 Jκ3 Cκ

5’- AAAAAAAA

H2N- -COOH

Variável Constante
110 aa 104 aa
Segmentos gênicos da cadeia leve κ AC

H
2N
-
H2N- -COOH

-C
OOH
Anticorpo

NH

2
H
-N
2
-
NH

2
H
-N
2
-

λ (22q11)
κ (2p13)
| |
HOOC COOH
IgM μ
IgE ε
IgD δ
IgA α (14q32)
IgG γ
| |
HOOC COOH
 Segmentos gênicos da cadeia pesada AC

40 V 25 D 6J 9C
L VH1 L VH2 L VHn (...) D1 D2 Dn (...) JH1 JH2 JHn (...) CHμ CHδ CHγ CHα
 Segmentos gênicos da cadeia pesada AC

VH1 VH2 D2 JH1 CHμ CHδ CHγ CHα

5’- AAAAAAAA

H2N- -COOH

Variável Constante
μ
Segmentos gênicos da cadeia pesada AC

NH
H2

2-
N-

IgM -COOH
-COOH
Segmentos gênicos da cadeia pesada AC

VH1 VH2 D2 JH1 CHμ CHδ CHγ CHα

Segmentos gênicos da cadeia pesada AC

VH1 VH2 D2 JH1 CHγ CHα

5’- AAAAAAAA

H2N- -COOH

Variável Constante
γ
Segmentos gênicos da cadeia pesada AC

NH
H2

2-
N-

IgG -COOH
-COOH
Anticorpos
• classes:
- IgA; presente em secreções (leite, saliva, lágrima); protege mucosas 14%
- IgD; presente no sangue e linfócitos B; função incerta 01%
- IgE; presente em céls. inflamatórias; estimula liberação de histamina <1%
- IgG; no sangue e leucócitos; ativa as respostas imune secundárias 80%
- IgM; no sangue e linfócitos B; ativa as respostas primárias 05%

• recombination activating genes:

RAG1
RAG2

• diversidade:
110 segmentos V
25 segmentos D
15 segmentos J
1010 a 1014 AC distintos
100 trilhões de combinações múltiplas
Anticorpos
• diversidade adicional:
- posição juncional (códons)

ATCGGTCACGT CGTACGTCGTGG
Anticorpos
• diversidade adicional:
- posição juncional (códons)

ATCGGTCACGT CGTACGTCGTGG

ATCGGTCACGT GTACGTCGTGG

ATCGGTCACGT CGTACGTCGTGG ATCGGTCACGT TACGTCGTGG

ATCGGTCACG GTACGTCGTGG
Anticorpos
• diversidade adicional:
- posição juncional (códons)
- hipermutação somática (mutação induzida por desaminase)
ocorre nos órgãos linfóides secundários

Y
Y
Anticorpos
• exclusividade: um único AC por plasmócito (exclusão alélica)
Anticorpos
• exclusividade: um único AC por plasmócito (exclusão alélica)

• ativação gênica no momento certo

• produção de 10 milhões de moléculas por hora

5’- AAAAAAAA

H2N- -COOH

- promotor Variável Constante

- acentuador 110 aa 104 aa
Receptores de Célula T
• 90% α (14q11) + β (7q35)
• 10% γ (7p15) + δ (14q11)
• mecanismos de diversidade semelhantes aos AC (exceto hipermutação)
• recombinação VDJC ocorre no Timo (seleção clonal)

α β
Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC)
• genes HLA (antígenos humanos associados a leucócitos)
• >200 genes e pseudogenes
• cada gene contém dezenas a centenas de alelos
• poligenia com polimorfismo

4 Mb

Classe II Classe III Classe I

Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC)
• genes HLA (antígenos humanos associados a leucócitos)
• >200 genes e pseudogenes
• cada gene contém dezenas a centenas de alelos
• poligenia com polimorfismo
4 Mb
Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC)
• genes HLA (antígenos humanos associados a leucócitos)
• >200 genes e pseudogenes
• cada gene contém dezenas a centenas de alelos
• poligenia com polimorfismo
4 Mb
Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC)

Chances de compatibilidade:
• Gêmeos monozigóticos 100%
• Irmãos legítimos (gêmeos dizigóticos) 25%
• Outros parentes 3-10%
• Qualquer indivíduo na população <0,0001%
 Exercício
Assinale a alternativa errada:
a) Dentre as 56 enzimas do citocromo P450, seis proteínas são responsáveis pela fase I da
farmacocinética de >95% das drogas.
b) Indivíduos homozigotos para um alelos CYP2 com atividade reduzida serão classificados
como metabolizadores lentos de drogas.
c) Alelos do citocromo P450 com atividade aumentada podem resultar em intoxicação
pelo acúmulo da droga no organismo.
d) Tratamentos com sulfa ou primaquina podem resultar em anemia hemolítica por dano
celular oxidativo.
e) A farmacogenômica é uma área da medicina personalizada que visa analisar todos os
genes envolvidos na farmacocinética e farmacodinâmica de cada paciente.
 Exercício
A acetilação é uma das rotas metabólicas mais ativas na degradação de xenobióticos.
Vários alelos do gene NAT2 (N-acetiltransferase tipo 2) se traduzem em uma enzima de
baixa/alta atividade, dividindo a população em acetiladores rápidos (AR) e lentos (AL)
de fármacos como isoniacida, hidralazina, dapsona, sulfamidas, dipirona e cafeína.
Entretanto, embora este marcador farmacogenético seja conhecido há mais de 50 anos,
a caracterização genotípica do NAT2 ainda não faz parte da prática clínica. Sendo assim,
podemos dizer que:
a) Pequenas quantidades de cafeína ingeridas à tarde são suficientes para manter um
indivíduo AR hiperativo durante a noite.
b) Pessoas com hiperssensebilidade à dipirona por mutações no NAT2 apresentam falhas
na fase I da farmacocinética.
c) Pessoas AL estão propensas a falhas no tratamento da tuberculose com isoniazida.
d) Indivíduos hipertensos medicados com hidralazina podem desenvolver lúpus
eritematoso sistêmico se possuir o fenótipo AR.
e) É recomendado que pessoas AR com hanseníase adotem outro tratamento contra o
bacilo, já que a dapsona não terá efeito terapêutico.
 Exercício
Marque V (verdadeiro) ou F (falso):
( ) A diversidade dos anticorpos é garantida essencialmente pelas combinações múltiplas
dos segmentos gênicos, variações juncionais e hipermutações somáticas.
( ) Entre os locus que codificam anticorpos, apenas o locus da cadeia pesada possui
quatro segmentos gênicos: V (variável), D (diversidade), J (junção) e C (constante).
( ) Dentro dos genes que codificam o complexo principal de histocompatibilidade, os loci
HLA-A, HLA-B e HLA-DRB1 são rotineiramente comparados entre doador e receptores de
medula óssea.
( ) As variações juncionais promovem diversidade por desaminação aleatória de algumas
bases, já as hipermutações promovem exclusão alélica.
 Exercício
Ao deletar o gene Rag1, que codifica uma enzima de recombinação somática importante
na imunogenética, criou-se uma linhagem mutante de camundongos...
a) ...que produzem apenas um tipo de anticorpo.
b) ...cujos anticorpos desenvolverão uma resposta autoimune.
c) ...que não possuem linfócitos B e T maduros.
d) ...capaz de superproduzir anticorpos.
e) ...incapaz de mudar a classe dos seus anticorpos.