6-Biologia de Microrganismos

Biologia de Microrganismos
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UNIDADE 1
INTRODUO MICROBIOLOGIA
Prof. Jos Soares do Nascimento
1. QUEM SO OS MICRORGANISMOS?
Os microrganismos so organismos microscpicos, impossvel de serem observados a
olho nu (vrus 1nn, bactrias 1m, e fungos 100m de dimetro). Embora, alguns, em
determinadas fases de seu crescimento atingem tamanho macroscpicos, a exemplo dos fungos
conhecidos como cogumelos, que chega a formar um falso tecido. Quem so os microrganismos?
Esta uma curiosidade comum para quem nunca deu ateno a estes seres microscpicos. Os
mais estudados na Microbiologia so as bactrias, fungos, vrus e algumas algas (Figura 1). Alm
destes, protozorios, helmintos, caros so estudados em Parasitologia.

Figura 1- Exemplos de microrganismos estudados em Microbiologia: 1. Vrus e 2. Bactrias
(modelos didticos); 3. Fungos (fotografados in situ); 4. Algas (atravs de microscopia).

Fonte: NASCIMENTO, J.S. (2010)

2. OS MICRORGANISMOS SO SERES UBQUOS
Os microrganismos habitam os mais diversos locais. Esta propriedade denominada de
ubiquidade. Habitam os diferentes ecossistemas, fazem parte da microbiota normal do corpo
humano, dos animais e das plantas, aos milhes, em termos de quantidades. Entre estes
organismos so estabelecidas relaes em diferentes graus de parasitismo, mutualismo e
comensalismos. So tambm patgenos causadores de doenas e deteriorao de equipamentos
e alimentos, quando no devidamente limpos ou mal armazenados, respectivamente.

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PERGUNTAS???

1. Em que partes de sua casa, voc acha que tem mais
microrganismos e onde existem menos?

2. A galinha vem do ovo. E os microrganismos vm de onde?

3. MODO DE VIDA DOS MICRORGANISMOS
Todos os microrganismos so benficos de alguma forma. Entretanto, destes um total de
3% podem causar danos aos demais organismos. Neste sentido, os microrganismos so divididos
em diferentes grupos, conforme o seu modo de vida, sendo estes alguns deles:
a) Saprbios (saprfitos): comensais ou decompositores de substncias orgnicas mortas;
So tambm conhecidos como microrganismos recicladores. Entre estes, muitos podem
desenvolver o parasitismo facultativo.
b) Parasitos: causam danos as clulas vivas de outros organismos. O parasitismo se
manifesta em diferentes graus, desde o parasito obrigatrio ao hiperparasitismo. No
parasitismo obrigatrio h uma completa dependncia do hospedeiro para a sua
multiplicao; no parasitismo mltiplo sobrevive em vrios hospedeiros e no parasito
facultativo existe outro modo de vida que o saprofitismo. J no hiperparasitismo ocorre
parasitismo no mesmo grupo.
c) Simbiontes: estabelecem relaes em diferentes graus, desde as mais prximas (simbiose
mutualstica, onde h interao morfolgica e fsica entre dois organismos, a exemplo dos
lquenes e das micorrizas) at as mais antagnicas (tipo de relao onde um deles
prejudicado em detrimento do outro).
FIQUE DE OLHO!!!

Alguns microrganismos so incapazes de causar doenas
no hospedeiro, a exemplo da levedura Saccharomyces cerevisae.
Os que so oportunistas podem causar doenas na dependncia
do sistema imunolgico do hospedeiro. Outros se comportam de
forma facultativa, ou seja, so saprfitos, porm, em determinadas
condies tornam-se patgenos. Alm destes, existem os que so
estritamente patognicos, onde a presena dele no hospedeiro
est sempre associada doena, como a Nesseria gonorrhoeae,
causadora da gonorreia.

Para ocorrer uma doena infecciosa necessrio algumas etapas importantes:
a) Inculo: haver um nmero suficiente de microrganismos capaz de invadir o hospedeiro;
b) Colonizao ou infeco: estabelecimento e multiplicao do microrganismo no local da
infeco. A entrada do patgeno/toxina no hospedeiro pode ocorrer diretamente na

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corrente sangunea ou nos rgos internos. Pode haver infeco endgena por
microrganismos da prpria microbiota e exgena por patgenos adquiridos;
c) Intoxicao: o hospedeiro recebe o fator (ex. toxina) causal da doena, conhecida como
intoxicao alimentar;
d) O microrganismo pode ser eliminado do hospedeiro por algum mecanismo de defesa e no
causar a doena;
e) Doena infecciosa: quando o microrganismo passa a expressar seus fatores de
patogenicidade (estrutural, enzimas ou toxinas) no hospedeiro, alterando a funcionalidade
normal da clula, tecido ou rgos.
4. CLASSIFICAO DAS BACTRIAS
As bactrias pertencem ao reino Monera segundo a classificao de Whittaker, em 1969.
Woese, em 1978, agrupa os organismos em domnios (Figura 2), seguindo a organizao
filogentica (MURRAY, 2005). Sendo assim, h trs domnios: Eubactria (bactrias verdadeiras),
Archea (bactrias de composio qumica e formas distintas, habitantes de ambientes
extremfilos) e Eucaria (fungos, algas, protistas, plantas e animais).

Figura 2- Os trs domnios filogenticos, segundo Woese (1978).

Fonte: http://pt.wikipedia.org/wiki/%C3%81rvore_filogen%C3%A9tica

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UNIDADE 2
MEIOS DE CULTURA UTILIZADOS PELOS MICRORGANISMOS
1. INTRODUO
Os microrganismos necessitam de uma variedade de substncias nutritivas capazes de
promover o seu crescimento. Esses elementos so necessrios para a sntese e para as funes
normais dos componentes celulares. No ambiente, os microrganismos encontram os nutrientes
nas formas de compostos orgnicos e/ou inorgnicos. Desta forma, podem desenvolver-se em
meios inteiramente inorgnicos, outros em meios orgnicos ou mistos.
2. COMPONENTES DOS MEIOS DE CULTURA
Os microrganismos necessitam de fontes de energia, fontes de carbono, fontes de
nitrognio, sais minerais, gua, fatores de crescimento (vitaminas e outras substncias). Estas
substncias so fornecidas a partir de fontes orgnicas e/ou inorgnicas.
Como principio bsico, o meio de cultura deve ser o mais prximo das condies reais
onde habita o microrganismo, para que este cresa satisfatoriamente. Existem microrganismos
que crescem em diversos meio de cultura, outros crescem apenas em meios especiais. Sendo
assim, no existe um meio de cultura universal, de forma que cada microrganismo tem suas
exigncias nutricionais.
3. CLASSIFICAO DOS MEIOS DE CULTIVO
3.1. QUANTO CONSISTNCIA
Meio lquido: sem agente solidificante, apresentando-se como caldo. O meio distribudo
em tubos de ensaio, erlenmeyers, balo; Mais utilizado para o crescimento massal ou
provas bioqumicas, em fermentao industrial etc.
Meio semi-slido: adiciona-se uma pequena quantidade de agente solidificante (0,5 a 1%
de gar). Apresenta uma consistncia intermediria, sendo distribudo em tubos de ensaio.
Utilizado para o teste de motilidade, como exemplo.
Meio slido: contm maior quantidade de agente solidificante (1,5 a 2,0%). Apresenta uma
consistncia slida e pode ser distribudo tanto em tubos de ensaio (meio inclinado),
quanto em placas de Petri. Utilizado para diversas finalidades, sendo o meio indicado para
observao da morfologia colonial.
A substncia solidificante utilizada nos meios o gar, extrado de algas vermelhas
(Gelidium corneum alga marinha japonesa) a 80C com cido sulfrico diludo (H
2
SO
4
). Esse o
agente solidificante mais usado, sendo considerado tambm o melhor, porque se funde
temperatura de fervura e solidifica a 42-45C. Portanto, deve ser distribudo entre 50-60
o
C, antes
de solidificar. O gar ainda um excelente agente gelatinizador porque no degradado por
microrganismos, sendo um polmero composto principalmente por D-galactose, 3,6-anidro-L-
galactose e cido D-glucurnico.

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3.2. QUANTO FUNO
Meios simples: meios de cultura, nos quais os componentes possuem todas as fontes de
nutrientes requeridas pelos microrganismos mais comuns e menos exigentes
nutricionalmente. Ex: gar nutriente ou caldo nutritivo.
Meios seletivos: promovem o crescimento de um determinado microrganismo em
detrimento de outros, devido presena de substncias adicionadas ao meio de cultura ou
a condio de cultivo. Alguns meios seletivos possuem corantes na sua composio,
feniletanol e antibiticos, que inibem determinados grupos de organismos. Ex: gar
MacConkey (contm sais biliares e cristal violeta para inibir o crescimento de bactrias
Gram-positivas, permitindo, portanto, o crescimento de bactrias Gram-negativas); o meio
de Chapman ou gar manitol possui alta concentrao de cloreto de sdio (NaCl 7,5%),
para selecionar bactrias halfitas (vivem em alta concentrao de sal), adequado para o
isolamento de Staphylococcus; o Meio Sabouraud muito utilizado no cultivo de fungos,
devido sua composio desfavorvel para bactrias, em funo do pH e concentrao de
acares; meio batata-dextrose-gar (BDA) acidificado que seletivo apenas para fungos
em funo do pH.
Meios enriquecidos: meios convencionais enriquecidos com um ou mais componentes
qumicos, que favorea o crescimento de determinados microrganismos numa populao
mista. Meios mais indicados para microrganismos fastidiosos. Ex: gar-sangue e gar
chocolate, ambos utilizados no crescimento de Streptococcus, Neisseria e Haemophilus.
Meios diferenciais ou indicadores: so utilizados para diferenciar microrganismos entre os
vrios tipos que crescem numa mesma placa de Petri. Ex: meio gar MacConkey, alm de
selecionar o grupo de bactrias Gram-negativas como visto por ser seletivo, permite uma
diferenciao entre as mesmas pela produo de cido, baseada na utilizao da lactose
presente no meio. Bactrias que utilizam lactose acidificam o meio e as colnias ficam na
cor vermelha ou rosa, enquanto as demais no adquirem essa colorao. Meio de
Chapman tambm um meio diferenciador, pois contm manitol. Quando a bactria utiliza
esse polissacardeo como fonte de C o meio, originalmente vermelho, muda de cor para
amarelo. Entre as espcies de estafilococos apenas S. aureus fermenta manitol.
Meios de transporte: estes meios conservam as caractersticas da amostra desde a coleta
ao semeio final. Este meio muito utilizado para bactrias sensveis ao deslocamento,
evitando, muitas vezes a inativao da bactria, em ambiente longe do laboratrio. Ex.
meio Stuart.
Meio de manuteno: utilizado na manuteno de amostras de bactrias. So meios
pobres em nutrientes, nos quais as bactrias no podem crescer muito, para evitar a
formao de compostos txicos.
3.3. QUANTO NATUREZA
Natural: so preparados com base em produtos naturais, como: peptona, extrato de carne,
soro, leite, folhas, frutos etc. Neste, a quantidade exata de cada nutriente no
especificada.
Sintticos: so quimicamente definidos, onde a quantidade exata de cada nutriente ou
elemento qumico conhecido, permitindo saber se um elemento em particular essencial
para o crescimento de determinado microrganismo (fator de crescimento).
Mistos ou semi-sinttico: meios preparados com a mistura dos naturais com os sintticos.

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FIQUE LIGADO!!!

No existe um meio de cultura universal, ou seja, cada
microrganismo tem sua exigncia.
A classificao dos meios de cultura tem fins meramente
didticos. Como observado, um mesmo meio pode ter mais
de uma funo.

PRTICA 1- ISOLAMENTO DE MICRORGANISMOS
1. Materiais:

Placas de Petri com meios de cultura (slido).
Swab (zaragatoa) estril para coleta de microrganismos.
gua esterilizada em tubo de ensaio.
Bico de Bunsen

2. Procedimento:

Umedecer o swab na gua e preparar para a coleta de microrganismos;
Selecionar o local especfico para coleta, sendo um da microbiota humana e outro do
ambiente;
Coletar os microrganismos ao friccionar suavemente o swab sobre o local ou superfcie
de coleta. Colocar o swab de volta no tubo de ensaio;
Com o bico de Bunsen aceso, prximo chama, abrir a placa de Petri e semear
suavemente, friccionando o swab sobre a superfcie do meio de cultura;
Identificar o local de coleta e a data na tampa da placa de Petri;
Incubar as placas em estufa durante 48h (36
o
C para as da microbiota humana e 25
o
C para
os do ambiente). As placas so incubadas invertidas, com a base para cima;
Depois de incubadas, observar a morfologia colonial: diversidade, cor, tamanho, bordas,
consistncia etc. sem abrir a placa de Petri ou se abrir, sempre prximo ao bico de
Bunsen.

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UNIDADE 3
MORFOLOGIA MICROBIANA
As bactrias apresentam uma morfologia simplificada, sendo a maioria em formas comuns:
cocos, bacilos e espiralados e outras em formas especiais: quadradas e estreladas (Figura 3).
Destas, as trs primeiras so as mais estudadas, pois compreende as bactrias de interesse na
rea da sade e da indstria, sendo as mais comuns. As outras duas formas so de ocorrncia
ambiental e so raramente notificadas.

Figura 3- Diversidade da morfologia bacteriana: 1. cocos, 2. bacilos, 3. vrgula, 4. rspirilo, 5.
espiroqueta, 5. estrela, 7. quadrada, 8. Cocobacilo
1) 2) 3) 4)
5) 6) 7) 8)
Fonte: TORTORA, FUNKE, CASE (2003).

De natureza unicelular, alguns destes procariotos podem, em determinadas condies
ambientais, se agregar e formar pednculo frutificativo ou estruturas reprodutivas diferenciadas da
clula vegetativa, a exemplo do que ocorre em Myxococcus fulvus e nos actinomicetos, que se
assemelham aos fungos no padro de crescimento.
Os cocos so estruturas esfricas, medindo, em mdia, 0,5-3m de dimetro. Exemplo de
cocos: Staphylococcus, Streptococcus, Micrococcus, Neisseria. Conforme o plano de diviso e as
caractersticas genticas os cocos so agrupados em diversos arranjos caractersticos: a)
diplococos: forma cocos aos pares; estreptococos: cocos em cadeia com trs ou mais clulas; c)
ttrade: quatro clulas unidas entre si; d) sarcina: oito clulas em formato de cubo e, e)
estafilococos: cocos em cacho de uvas (Figura 4).

Figura 4- Arranjos formados pelos cocos e bacilos.

Diplococo Estreptococo Ttrade Estafilococo Sarcina

Os bacilos so em forma de bastonetes, curtos ou longos, com dimetro mdio de 0,5m e
comprimento varivel de 1m ou mais. Exemplo de bacilos: Escherichia, Psudomonas, Bacillus,

270
Clostridium, Rhizobium, Agrobacterium, Nitrosomonas, Nitrobacter, Xanthomonas. Algumas
bactrias apresentam-se na forma de bastonetes curtos, intermedirias entre cocos e bacilos, de
aspecto ovide, denominadas de cocobacilo. Os bacilos apresentam apenas um plano de diviso,
os quais formam os arranjos: a) diplobacilo: aos pares e; b) estreptobacilo: com trs ou mais
clulas (Figura 5). Alm destes arranjos, alguns bacilos se apresentam em forma de letra chinesa
e paliada (Corynebacterium). Muitos tambm no formam arranjos caractersticos,
permanecendo isolados.

Figura 5- Arranjos formados pelos bacilos e os arranjos especiais do Gnero Corynebacterium.

Diplobacilo Estreptobacilo

Letra chinesa (caracteres)

Chinesa e paliada (bacilos paralelos)

As formas espiraladas compreendem: a) vibrio: bacilos curvos em forma de vrgula (Vibrio
cholerae); b) espirilo: bastonete rgido de forma helicoidal; e c) espiroquetas: tambm helicoidal,
porm com vrias espirais e flexvel, contendo filamento axial (Leptospira, Treponema). Os
espiroquetdeos dividem-se ao meio e no formam arranjos caractersticos (Figura 6).

Figura 6- Bactrias espiraladas (espiroquetdeos).

Vibrio

Espirilo

Espiroqueta
Fontes:
1. http://dhiez.files.wordpress.com/2008/05/cholera.jpg
2.http://www.steadyhealth.com/articles/user_files/11361/Image/Helicobacter%20The%20Bact
eria%20that%20Cause%20Ulcers.jpg
3. http://www.japantimes.co.jp/images/photos2008/nn20081021a8a.jpg


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SAIBA MAIS!!!

No ambiente, geralmente, os microrganismos se
apresentam isolados.
A maioria das bactrias no forma agrupamentos tpicos.
Se na observao microscpica aparecerem cocos isolados
e um ou mais em arranjo de dois a dois, trata-se de diplococos.


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UNIDADE 4
CITOLOGIA BACTERIANA
1.ESTRUTURAS ESSENCIAIS
As bactrias, por serem procariotos, apresentam uma organizao celular simplificada,
sem organelas. A principal caracterstica ter o material gentico sem carioteca (Figura 7) e sem
histonas, enquanto os eucariotos apresentam tais elementos. simplesmente constituda por uma
parede celular, membrana citoplasmtica, citoplasma, material nuclear, ribossomos e as
estruturas no essenciais tais como cpsula/glicoclice, flagelo, fmbrias, plasmdeos, endsporo
e incluses. As estruturas essenciais so consideradas como sendo aquelas indispensveis
multiplicao microbiana, enquanto as estruturas no essenciais so encontradas apenas em
algumas bactrias e no interferem na multiplicao das mesmas. Uma exceo so os
micoplasmas, que so desprovidos de parede celular, fugindo a regra da essencialidade.

Figura 7- Clula de procarioto, indicando as estruturas que compe a clula.

Fonte: MIMS et al. (1995), modificado.
1.1 PAREDE CELULAR
A maioria das bactrias apresenta parede celular, exceto micoplasmas, que so
intracelulares. A parede celular varivel em sua composio qumica o que determina a
existncia de grupos de bactrias, denominadas de Gram positivas, Gram negativas (Figura 8) e
BAAR (bacilo lcool cido resistente), (Figura 9) entre as mais estudadas.
A parede celular um revestimento rgido que confere forma clula, maior resistncia s
adversidades da presso osmtica e constitui-se uma estrutura antignica (antgeno O), que
caracterizam e diferenciam tais bactrias.


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Figura 8- Parede celular de bactria: 1- Gram positiva, 2- Gram negativa

Fonte: MIMS et al. (1995), modificado.

Figura 9- Parede celular de micobactria (BAAR).

Fonte: ACTOR (2007), modificado.

As bactrias Gram positivas apresentam uma parede com vrias camadas de
peptideoglicano (murena), composta por subunidades alternadas de N-acetilglicosamina (NAG) e
N-acetilmurmico (NAM). Estas molculas so ligadas de forma cruzada por tetrapeptdeos
conferindo maior rigidez a parede. Encontra-se ainda na parede o cido teicico constitudo por
um carboidrato fosfato e um lcool (glicerol ou ribitol). A maioria dos cocos de importncia clnica
(Staphylococcus, Streptococcus, Micrococcus, Enterococcus) Gram positiva, exceto Neisseria,
Bordetella etc.

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A estrutura da parede clulas das bactrias Gram negativas mais complexa. Apresenta
uma camada mais estreita de peptideoglicano e a membrana externa. O peptideoglicano localiza-
se no espao periplasmtico, que compreende o espao entre a membrana externa e a
membrana celular. A membrana externa um lipopolissacardeo (LPS), sendo a poro lipdica
uma endotoxina comum a todas Gram negativas. A membrana externa tambm contm protenas
integrais lipoprotenas, protenas de ligao e porinas. A maioria dos bacilos de importncia clnica
(Escherichia, Samonella, Vibrio, Shigella, Pseudomonas etc) Gram negativa, exceto os gneros
Bacillus, Clostridium, Corynebacterium, Lactobacillus.
A parede celular das micobactrias (Mycobacterium tuberculosis, M. leprae) constituda
tambm de peptideoglicano, porm revestido por uma camada de cido miclico, o que torna esta
parede impermevel entrada de corantes bsicos, denominadas de BAAR, por ser resistente a
descolorao pelo lcool-cido, depois de coradas pela fucsina de Zehl-Neelsen. Esta bactria
no se cora pela tcnica de Gram. tambm uma bactria muito resistente ao ressecamento e
desidratao.
A parede celular das bactrias Gram positivas sensvel ao da lisozima encontrada na
lgrima e do muco. Sensvel tambm aos antibiticos -lactmicos, conforme ser explicado na
unidade correspondente.
1.2 MEMBRANA CITOPLASMTICA
A membrana plasmtica reveste o citoplasma, controlando o fluxo de entrada ou de sada
de todas as substncias na clula, atravs das protenas de transportes. tambm responsvel
pelo transporte de eltrons e a produo de energia. Apresenta constituio fosfolipdica,
formando uma bicamada fluida bipolar, com ausncia de esteris, exceto para os micoplasmas
(Figura 10). Na superfcie, a camada de fosfato hidroflica e internamente hidrofbica.
Na membrana existe ainda o mesossoma (Figura 7), que nada mais que uma
invaginao da membrana, com funo importante durante o processo de multiplicao
bacteriana, ao se ligar e separar os cromossomos durante a diviso celular.

Figura 10- Membrana citoplasmtica

Fonte: TORTORA, FUNKE, CASE (2003), modificado.
1.3 CITOPLASMA
O citoplasma constitudo por substncia aquosa, contendo protenas e enzimas.
Destaca-se o material nuclear, os ribossomos e as incluses que esto imersos no citoplasma.
1.4 MATERIAL NUCLEAR
O material nuclear encontra-se disperso no citoplasma, constitudo de uma fita dupla,
circular de DNA (Figura 7). Neste cromossomo esto contidas todas as informaes genticas

275
essenciais. No contm histonas e no envolvido por membrana nuclear, ao contrrio das
clulas eucariticas.
1.5 RIBOSSOMOS
Os ribossomos so protenas (RNA ribossmico ou rRNA) de aspecto granular,
constitudos por duas unidades, responsveis pela sntese protica. So encontrados centenas a
milhares deles dispersos no citoplasma, porm podem diminuir em quantidade, conforme a
atividade da bactria.
As bactrias formam ribossomos 70S (Unidade Svedberg = velocidade relativa de
sedimentao). No entanto, cada subunidade separada mede 50S e 30S (Figura 11).
PERGUNTAS???

1. Comparando a parede celular de uma bactria a uma
parede de uma casa, o que representaria os tijolos, as
armaes de arame e o reboco?

2. Qual a diferena entre os cidos teicico e lipoteicico?

3. Qual o mecanismo da colorao de Gram?

Figura 11- Ribossomos de procarioto.

Fonte: http://www.redeeduca.com.br/editor/assets/codon.jpg
2. ESTRUTURAS NO ESSENCIAIS
As estruturas no essenciais so aquelas que apenas algumas bactrias apresentam,
consideradas no vital a sua multiplicao. Estas estruturas conferem bactria funes
adicionais, importantes a sua sobrevivncia, interao com o hospedeiro e metabolismo.

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2.1 CPSULA OU GLICOCLICE
As bactrias secretam substncias denominadas de cpsula ou glicoclice que se
acumulam externamente a parede celular (Figura 12). So substncias mucoides, viscosas,
constitudas de polissacardeos, exceto no gnero Bacillus anthracis, que constitudo por cido
poli D-glutmico (polipeptdeo).
Para ser considerada cpsula, o material mais organizado e mais fortemente aderido
parede. J quando fracamente aderido e de natureza amorfa, denomina-se de glicoclice. Em
ambos, estas substncias tm como principal funo ser uma estrutura antifagocitria. Atuam
tambm como barreira contra a difuso de solutos, so substncias de reservas, aumenta a
aderncia e a formao de biofilme. A formao de biofime favorece tambm a agregao das
bactrias. A bactria Streptococcus mutans formadora de biofilme (glicoclice), propriedade
importante na formao da crie dentria.

Figura 12- Cpsula bacteriana.

2.2 FLAGELO
Algumas bactrias possuem flagelos, constitudos por protena denominada de flagelina,
os quais conferem motilidade. Esta estrutura constituda de um corpo basal (onde se insere at
a membrana plasmtica), um gancho (rgido e com movimentos giratrios) e o filamento longo em
forma de chicote (Figura 13).

Quanto distribuio de flagelos as bactrias so classificadas em: (Figura 14).
a) Monotrquio: um flagelo em uma das extremidades;
b) Anfitrquio: um flagelo em cada extremidade;
c) Lofotrquio: dois ou mais flagelos em um dos polos;
d) Peritrquio: flagelos em toda a superfcie.

Algumas espiroquetas (bactrias espiraladas, Ex. Treponema, Leptospira) possuem um
flagelo diferenciado, denominado de filamento axial. Este filamento em forma de espiral, em torno
da clula, revestido por uma bainha, possibilitando a bactria movimentar-se em forma de saca-
rolha (Figura 15). A bactria com flagelo desloca-se de forma aleatria ou em funo de
respostas a fototaxias ou a quimiotaxias.

277
Figura 13- Partes do flagelo e insero deste na parede celular

Fonte: TORTORA, FUNKE, CASE (2003)


278
Figura 14- Classificao quanto localizao dos flagelos

PERGUNTAS???

1. As bactrias apresentam quimiotaxia e fototaxia?

2. Quando as bactrias se deslocam como muitos giros
(ziguezagues), o que isso poderia significar?

3. D as funes das estruturas essenciais e das no essenciais?


279
Figura 15- Localizao do filamento axial nos espiroquetdeos

Fonte: TORTORA, FUNKE, CASE (2003), modificado.
2.3 FMBRIAS E PILI
As fmbrias so pequenos filamentos proticos (protena pilina) semelhantes pelos em
torno da parede celular (Figura 16). A funo das fmbrias de aderncia, favorecendo a
colonizao do hospedeiro. A quantidade e a distribuio de fmbrias so bastante variveis.
Algumas bactrias apresentam uma fmbria especial, denominada de pili (pili sexual), pelo
qual a bactria transfere cpias do plasmdeo para outras bactrias, durante a conjugao. mais
longo que as fmbrias comuns, sendo codificado por um plasmdeo F ou plasmdeo conjugativo.
Figura 16- Bactrias com fmbrias (1) e com a fmbria conjugativa denominada de pili sexual (2)

Fonte: 1. http://media.photobucket.com/image/pili%20sexual%20bacteria/roland98/27-06-Pili.jpg
2. http://io.uwinnipeg.ca/~simmons/16cm05/1116/27-x1-ProkaryoteConjugation.jpg
2.4 PLASMDEO
Algumas bactrias no apresentam plasmdeos, enquanto outras podem apresentar um ou
mais plasmdeos (Figura 7). So estruturas compostas por DNA de fita dupla, circular, com menos
informaes genticas extracromossmico. Os genes contidos no plasmdeo conferem
resistncia, produo de toxina, produo de enzima, fertilidade e outras propriedades. O

280
plasmdeo autoreplicativo, independente da multiplicao da bactria. A bactria pode receber
ou perder o plasmdeo sem danos clula.
2.5 ESPORO (ENDSPORO)
Algumas bactrias Gram positivas so capazes de formar endsporos, que so estruturas
de resistncia quando estas se encontram em condies adversas. formado um endsporo por
clula e quando ocorre lise da clula vegetativa, este liberado. Aps ser liberado da clula,
passa a ser denominado de esporo, muito resistente ao calor (a fervura), substncias qumicas e
radiao. Sobrevive no ambiente durante centenas de anos. Entre as bactrias mais
conhecidas, os gneros Bacillus e Clostridium so formadores de endsporos. Nas condies
adequadas, o esporo germina e d origem clula vegetativa, voltando ao seu metabolismo
normal.
A esporulao ocorre, em laboratrio, nas culturas velhas dessas bactrias. Inicialmente, o
DNA duplicado, ocorre separao da membrana e da parede, originando o endsporo. A
posio do endsporo na clula auxilia na identificao da bactria, pode ser terminal, subterminal
ou central. Em Clostridium, o endsporo mais espesso que a largura da bactria, deixando o
bacilo em forma de raquete.
Os esporos podem ser corados por tcnicas especiais como a do verde malaquita,
onde a suspenso de esporo aquecida por 5 minutos, cora-se de verde e a clula vegetativa em
vermelho, pela fucsina (Figura 17). A estrutura do esporo formada pelo contedo nuclear,
algumas protenas e o clcio que se liga ao cido dipicolnico produzido, importante para quando
este voltar ao metabolismo, formando o cerne. Depois, revestido pela membrana interna, dupla
camada de peptideoglicano (crtex) e uma capa externa de protena semelhante queratina
(Figura 18). A reativao do esporo ocorre pela ruptura da capa externa, atravs de ao
mecnica, calor ou outro fator estimulador, em presena de gua e nutrientes. O dipicolinato de
clcio degradado e a clula vegetativa se reconstitui, voltando ao metabolismo normal com a
entrada de gua e nutrientes.

Figura 17- Bactrias coradas pelo verde malaquita (endsporos) e a clulas vegetativas em
vermelho.

Fonte:
http://www.microbelibrary.org/microbelibrary/files/ccImages/Articleimages/Atlas_Endospore/Bacillus
%20species_Endospore%20stain_fig14.jpg

281

PERGUNTAS???

4. Por que o esporo bacteriano mais resistente ao estresse
ambiental?

5. Se uma suspenso das bactrias contendo Escherichia e
Clostridium for fervida, qual delas sobrevive?

Figura 18- Diferentes estgios na formao do esporo bacteriano

Fonte: MADIGAN, MARTINKO, PARKER (2004).
2.6 INCLUSES
As incluses compreendem os depsitos de reserva, destacando-se os grnulos
metacromticos (reserva de fosfato inorgnico), polissacardeos, lipdeos, enxofre, xido de ferro,
vacolos de gs etc (Figura 7).
PRTICA 2: COLORAO DE GRAM
1. Introduo

A tcnica de colorao de Gram foi descoberta pelo fsico dinamarqus Christian Gram,
em 1884. Esta colorao muito utilizada na bacteriologia permitindo a distino entre bactrias
Gram positivas (prpura) e Gram negativas (rosa), sendo aplicada a maioria dos coco e bacilos. A

282
diferena entre os dois tipos de clulas relaciona-se com a estrutura da parede celular das
bactrias. Como a parede celular das bactrias Gram positivas formada por uma camada
espessa de peptideoglicano, enquanto que a parede celular das Gram negativas formada por
uma camada fina de peptideoglicano mais a externa lipopolissacardica. Ao ser corada e depois
de aplicado um solvente (lcool) a Gram positiva permanece corada pelo corante cristal violeta,
enquanto a Gram negativa descorada e corada posteriormente com fucsina, permitindo a
diferenciao. O lcool dissolve o LPS da Gram negativa e o corante sai (Figura 19). J a Gram
positiva por no apresentar lipdeos, mas uma camada espessa de peptideoglicano ser
desidratada e reter o corante violeta de genciana.
Embora a maioria das bactrias possa ser corada por tal mtodo, algumas no o fazem
satisfatoriamente, exigindo tcnicas especiais de colorao, a exemplo das micobactrias,
nocardias, espiroquetas, micoplasma, riqutsias e clamdias.

Figura 19- Colorao de Gram: a. etapas da colorao; b. resultado observado na microscopia.


2. Material

Placa de Petri contendo a cultura bacteriana recente, lminas de microscopia para
preparao do esfregao, soluo salina ou gua estril, ala de platina, bico de Bunsen, bateria
de corantes para o Gram.


283
3. Procedimento:

a) Preparao do esfregao:
Observando as precaues de assepsia: desinfeco, antissepsia e flambagem;
Limpar uma lmina de microscopia (passar algodo embebido em lcool);
Quando se tratar de uma cultura em meio lquido: com uma ala de platina flambada,
mergulhar na cultura e coloc-la (pelcula do lquido) sobre a lmina espalhando-a para
formar um esfregao fino e uniforme. Quando a cultura for slida: colocar uma gota de
gua estril sobre a lmina com a ala de platina, tocar na colnia com a ala e suspend-
la na gota de gua estril, espalhando suficientemente para obter um esfregao fino;
Deixar a lmina secar a temperatura ambiente;
Fixar na chama do bico de Bunsen, cortando a chama por trs vezes.

b) Colorao:
Cobrir o esfregao bacteriano com cristal violeta, por um minuto e verter o corante na
cuba;
Cobrir o esfregao com soluo de lugol, por um minuto e retirar a seguir, lavando com um
filete de gua;
Descorar o esfregao usando uma soluo de lcool acetona, rapidamente (10-15
segundos);
Lavar com um filete de gua corrente, imediatamente;
Cobrir o esfregao com a fucsina, por 30 segundos e desprezar o corante;
Lavar com um filete de gua corrente;
Secar com papel absorvente.

c) Observao na microscopia:
Adicionar uma gotcula de leo de imerso sobre o esfregao (para concentrar os raios
luminosos e evitar a refrao);
Selecionar a objetiva de 100x do microscpio e focalizar;
Identificar o Gram, a morfologia da clula e o arranjo;
Desprezar a lmina utilizada em frasco com desinfetante e limpar o microscpio

T NA WEB!!!

Assista vdeos sobre a colorao de Gram no yotube:

http://www.youtube.com/watch?v=30D1FUyTccU&feature=related
http://www.youtube.com/watch?v=c6d7zOIP6Vo&feature=related
http://www.youtube.com/watch?v=zLYIL4rjzEA&NR=1&feature=fvwp


284
UNIDADE 5
FISIOLOGIA MICROBIANA
1. NECESSIDADES NUTRICIONAIS
Os microrganismos esto agrupados conforme as suas necessidades nutricionais, de
modo que foram, a princpio, divididos em autotrficos (capazes de sintetizar nutrientes a partir de
elementos primrios) e heterotrficos (capazes de degradar compostos pr-formados para
assimilar os nutrientes). As necessidades nutricionais dizem respeito s fontes de energia, luz,
compostos inorgnicos e orgnicos, que so fornecidos aos microrganismos.
O cultivo de microrganismos importante em vrias reas da pesquisa, os quais podem
ser cultivados in vivo (pela utilizao de clulas vivas ou cobaios) e in vitro (pela utilizao de
meios de cultura inanimado). No cultivo so fornecidos fontes de carbono, fontes de nitrognio,
sais minerais, fatores de crescimento e gua. Alm dos fatores nutricionais, so necessrios a
temperatura, as condies de pH, potencial osmtico, aerao etc.
A assimilao dos nutrientes pelos microrganismos ocorre atravs de reaes enzimticas,
que so liberadas no substrato, promovendo a decomposio (catabolismo ou decomposio) ou
por vias metablicas de biossntese (anabolismo). Poucos so os microrganismos capazes de
realizar a nutrio pela ingesto ou fagocitose.
As principais vias metablicas so:
a) Glicoltica: processo anaerbio da oxidao da glicose (C
6
H
12
O
6
) at cido pirvico;
b) Fermentativa: processo de obteno de energia pelo qual a molcula orgnica que est
sendo metabolizada no completamente oxidada, ou seja, no extrai todo o seu
potencial energtico. Produtos: cidos actico e ltico, lcoois (etanol, metanol e butanol),
cetonas (acetona) e gases (dixido de carbono e hidrognio molecular);
c) Respirao aerbia: processo de oxidao do piruvato, resultante da gliclise, a dixido de
carbono e gua. Requer O
2
como aceptor final de eltrons e muito mais eficiente na
obteno de energia do que a via glicoltica ou a fermentativa;
d) Respirao anaerbia: os microrganismos so capazes de utilizar muitos outros aceptores
finais de eltrons, como o sulfato em bactrias do gnero Desulfovibrio. Para isto,
muitiplicam-se na ausncia de oxignio.
2. FATORES FSICOS IMPORTANTES AO CRESCIMENTO MICROBIANO
Os fatores fsicos necessrios ao crescimento microbiano incluem luz, temperatura,
aerao, pH etc. Os microrganismos so classificados em diferentes categorias conforme estes
fatores (Esquema 1):
2.1 QUANTO S FONTES DE ENERGIA E DE CARBONO
a) Fotolitotrficos ou fotoautotrficos: luz como fonte de energia e CO
2
como fontes de
carbono. Ex. bactrias fotossintetizantes (cianobactrias), bactrias sulfurosas prpuras
(Chromatium) e bactrias sulfurosas verdes (Chlorobium);
b) Fotorganotrficos: luz como fonte de energia e compostos orgnicos (lcool, carboidratos,
cidos orgnicos etc.) como fontes de carbono. Ex. bactrias verdes no sulfurosas
(Chloroflexus) e bactrias prpuras no sulfurosas (Rhodopseudomonas);

285
c) Quimiolitotrficos: campostos inorgnicos (gs sulfdrico (H
2
S), enxofre elementar (S),
amnia (NH
3
), gs hidrognio (H
2
), nitrato (NO
3
-
), nitrito (NO
2
-
) e ferro (Fe
2+
)) como fonte de
energia e como fonte de energia e CO
2
como fontes de carbono;
d) Quimiorganotrficos: campostos orgnicos como fontes de energia e de carbono. Ex. a
maioria das bactrias, fungos e protozorios.
2.2 QUANTO AO PH
a) Acidfilos: crescimento timo em pH abaixo de 7;
b) Mesfilos: crescimento timo em pH em torno de 7;
c) Alcalfilos: crescimento timo em pH acima de 7.
2.3 QUANTO AERAO
a) Aerbios: crescem apenas em presena de oxignio livre;
b) Anaerbios: crescem apenas na ausncia de oxignio livre;
c) Microaerbios: crescem sob baixa tenso de oxignio livre;
d) Anaerbios facultativos: so anaerbios, porm crescem em condies aerbias.

SAIBA MAIS!!!

Os fungos apresentam o pH timo em torno de 6, mas
toleram pH entre 2 a 9.

As bactrias apresentam melhor crescimento a pH 7, com
tolerncia entre 4 a 8.

As bactrias anerbias obrigatrias no produzem enzimas
peroxidase e superxido dismutase, que elimina os radicais
perxido e superxido do metabolismo oxigenativo.
Portanto, as que no formam esporos, morrem em
presena do oxignio.


286
Esquema 1: Classificao dos microrganismos em relao s fontes de energia e de carbono.

2.4 QUANTO TEMPERATURA
a) Psicrfilos: timo crescimento a 10
o
C, porm toleram temperaturas entre -10
o
C a 20
o
C.
Microrganismos tpicos de ambientes glaciais;
b) Psicrotrficos: timo crescimento a 20
o
C, porm toleram temperaturas entre 0
o
C a 30
o
C.
Microrganismos tpicos de ambientes refrigerados;
c) Mesfilos: timo crescimento a 35
o
o
C a 45
o
C.
Microrganismos tpicos do ambiente e da microbiota humana e de animais;
d) Termfilos: timo crescimento a 60
o
o
C a 70
o
C.
Microrganismos tpicos de compostagem ou processos trmicos;
e) Extremfilos: timo crescimento a 90
o
o
C a 110
o
C.
Microrganismos tpicos de ambientes quentes (vulces, regies termais, giser).
2.5 QUANTO PRESSO OSMTICA
a) Hipotnicos: devido a menor concentrao de sais no meio, a bactria absorve lquidos em
excesso, tornando a clula trgida;

287
b) Isotnicos: a concentrao de sais no meio est em equilbrio com o do citoplasma
bacteriano;
c) Hipertnicos: devido a maior concentrao de sais no meio, a bactria perde lquidos em
excesso, ocorrendo plasmlise da clula.
3. CURVA NORMAL DE CRESCIMENTO BACTERIANO
3.1 CRESCIMENTO MICROBIANO
As bactrias crescem ou se multiplicam de forma assexual por fisso binria ou
cissiparidade. Sendo assim, cada clula, em um determinado intervalo de tempo (tempo de
gerao) originar duas clulas semelhantes clula de origem. Ocorre alongamento da clula,
replicao do DNA, invaginao da membrana e da parede celular formando um septo separador.
Algumas bactrias filamentosas (actinomicetos) formam brotamento originando clulas
reprodutivas.
3.2. TEMPO DE GERAO
O tempo de gerao (TG) corresponde o tempo necessrio multiplicao bacteriana.
Esse tempo varia conforme a espcie em questo e a fase de crescimento ou diviso celular
(Figura 20). A Escherichia coli, uma bactria entrica, apresenta um TG de 20 minutos, enquanto
Rhizobium sp., bactria fixadora de nitrognio, tem TG de 3-5 horas e o Mycobacterium
tuberculosis, causador da tuberculose, tem TG superior a 18 horas. A fase de maior crescimento
quando a bactria est adaptada ao meio e dispe de nutrientes e fatores ambientais necessrios
ao crescimento. Em culturas velhas o crescimento praticamente nulo.

AREGAANDO AS MANGAS!!!

As bactrias Escherichia coli e Staphylococcus aureus
so muitos comuns nas mos (pele e fossas nasais) e trato
digestivo. Elas apresentam um tempo de gerao curto, em
mdia, 20 minutos. Informe, quantas clulas bacterianas so
formadas aps 8 horas de incubao (tempo que, as vezes,
deixamos um alimento proteico, cozido ou cru fora da
refrigerao, exposto contaminao por esses
microrganismos).


288
Figura 20- Clulas de bacilos em processo de diviso (1 e 2).

Fonte:
1.http://crv.educacao.mg.gov.br/sistema_crv/banco_objetos_crv/%7B9DBB39BF-442E-4C90-AB18-
C034F4FA9AEA%7D_0701_image002.gif
2.http://media.photobucket.com/image/divisao%20binaria/Oforhiahrage/Cpiadereplicaaobacterina.jpg

A partir do crescimento de cada clula, em sucessivas divises, originar colnias, com
milhes de clulas. As colnias de bactrias apresentam aspectos mucoides, com formas, cor e
tamanho variados (Figura 21).

Figura 21- Placa de Petri contendo colnias de bactrias.

3.3. CURVA NORMAL DE CRESCIMENTO BACTERIANO
A curva normal de crescimento microbiano representa o aumento da populao em um
determinado perodo de tempo. Isto pode ser evidenciado, inoculando-se bactrias em meio
lquido e realizando-se contagem do nmero de clulas periodicamente ao longo de um
determinado perodo. Com isto, observa-se que a cultura passa por quatro fases distintas (Figura
22):

289

Figura 22- Curva normal de crescimento bacteriano.


a) Fase lag: fase adaptativa ou de latncia, na qual a clula ativa intensamente seu metabolismo,
porm no se multiplica. Esta fase bastante varivel conforme a espcie. Algumas levam
horas e outras, dias;

b) Fase log: conhecida como fase logartmica, caracteriza-se pela fase de diviso constante das
clulas, duplicando a populao a cada gerao. Denomina-se tambm de fase de
crescimento exponencial, estabelecendo-se graficamente a representao de uma reta
ascendente. Ocorre tambm uma intensa atividade metablica e as clulas so sensveis, pois
esto em fase de formao dos componentes celulares. Caso seja renovado o meio de cultura
sistematicamente, esta populao de bactria permanece na fase log sem passar fase
seguinte;

c) Fase estacionria: fase em que o nmero de clulas novas sendo geradas diminui,
equivalendo-se ao nmero de clulas destrudas pelo prprio metabolismo e escassez
nutricional. Desta forma, a populao continua se multiplicando, mas no cresce, torna-se
estvel e com alta competitividade por espao e nutrientes. Nesta fase, as bactrias capazes
de formar esporos, iniciam este processo para se manterem viveis em fase mais crtica;

d) Fase de declnio: nesta fase, as clulas raramente se multiplicam. A populao decresce, pois
as clulas entram em colapso, devido escassez nutricional e formao de substncias
txicas. Algumas bactrias conseguem se manter vivel por longo tempo, mesmo nestas
condies, outras so severamente afetadas e no mais se recuperam.
PRTICA 3: COLORAO DE ZIEHL-NEELSEN
1. Introduo

Os Bacilos lcool cido Resistentes (BAAR) so bactrias do gnero
Mycobacterium, como, por exemplo, as espcies M. tuberculosis, M. leprae e M. bovis. A parede
destas micobactrias possui uma espessa camada de lipdeos complexos (cidos miclicos) que
evita a penetrao de diversos corantes. Por outro lado, quando o corante penetra na clula, ele

290
no pode ser removido com facilidade, mesmo com o uso de lcool cido, de onde surgiu a
denominao BAAR.
Os bacilos da tuberculose so vistos como bacilos finos, retos, ligeiramente encurvados
e geralmente isolados, corados em vermelho pela fucsina de Ziehl (Figura 23); j os bacilos da
hansenase, agrupam-se em feixes denominados globias. So bactrias de difcil crescimento,
pois se multiplicam lentamente, sendo que este no cresce in vitro.

Figura 23- Micobactrias coradas em vermelho pela colorao de Ziehl-Neelsen: 1 .Mycobacterium
leprae; 2. M. tuberculosis

Fonte: 1. http://www2.bc.cc.ca.us/bio16/22_Resppictures.htm
2.http://www.craigleithhill.co.uk/images/Mycobacterium_tuberculosis_Ziehl-Neelsen_stain_02.jpg

O resultado da baciloscopia do escarro dado em cruzes e depende da quantidade de
bacilos encontrados em 100 campos microscpicos observados. Assim obtm-se a mdia:
+ (menos de 1 bacilo por campo)
++ (1 a 10 bacilos por campo)
+++ (mais de 10 bacilos por campo)

2. Material
Lminas para preparao do esfregao, soluo salina, ala de platina, bico de Bunsen e
bateria de corantes para Ziehl-Neelsen.

3. Procedimento
Preparar um esfregao a partir de escarro ou da cultura (semelhante ao utilizado no
Gram);
Cobrir o esfregao com fucsina de Ziehl e aquec-la at emisso de vapores, mantendo o
aquecimento por 5 minutos (tendo o cuidado para no deixar o corante ferver, nem secar).
O bacilo da tuberculose e o da hansenase s se cora aps o aquecimento;
Descorar rapidamente com lcool-clordrico a 3% at que no se desprenda mais corante;
Corar com azul de metileno - 1 minuto;
Secar com papel de filtro;
Colocar leo de imerso e observar na microscopia, com objetiva de 100x


291
T NA WEB!!!

Assista o vdeo sobre a colorao de Ziehl-Neelsen
para micobactrias, disponvel no yotube:

http://www.youtube.com/watch?v=PouIoydSiPM


292
UNIDADE 6
GENTICA BACTERIANA
1. GENOMA BACTERIANO
As caractersticas observadas nos microrganismos so controladas ou influenciadas pela
hereditariedade. Sendo assim, caractersticas estruturais (morfologia), reaes bioqumicas
(metabolismo), motilidade, capacidade de sobreviver em vrias condies ambientais, capacidade
de interao com outros microrganismos etc., so repassadas entre as geraes.
O estudo sobre gentica importante, pois os microrganismos so seres com alta
capacidade de mutao ao alterar o material gentico. As doenas e a atividade microbiana
desenvolvida so dependentes do cdigo gentico.
As informaes genticas da bactria esto organizadas no genoma que o conjunto de
genes de um organismo, sendo um gene um segmento de cido desoxirribonuclico (DNA) que
codifica para a produo de uma protena.
DNA: composto por acar (pentose), radicais fosfatos e por sequncias de quatro bases
nitrogenadas, ligadas por pontes de H, formando uma dupla hlice. So polmeros formados por
unidades repetidas (nucleotdeos).
Nucleotdeo: uma base ligada a um acar e um ou mais fosfatos (Figura 24).
Figura 24- Material nuclear bacteriano: detalhe da dupla hlice de DNA

Fonte: http://schools-wikipedia.org/images/646/64609.png (modificado).


293
Tipos de bases:
a) Purinas: Adenina (A) e Guanina (G);
b) Pirimidinas: Citosina (C), Timina (T), Uracila (U)

O cromossomo bacteriano constitudo por uma nica molcula de DNA, fita dupla de
aproximadamente 1mm de comprimento, enovelado, circular e semiconservativa (Figura 25).
Todas as informaes essenciais clula esto contidas nessa molcula. Alm destas
informaes, algumas bactrias que contm plasmdio trazem outras informaes no essenciais,
com a mesma estrutura fsica do cromossomo, porm em menor quantidade de informaes. Os
tipos de plasmdio so: F (sexual ou fertilidade), R (resistncia), V (virulncia), M (metablico) etc.

Figura 25- DNA bacteriano extravasado aps a ruptura celular

Fonte: http://www.scb.org.br/inspiracao/naturezaviva/imagens/28-1-a-Escherichiacoli.jpg

Outra caracterstica importante a existncia de elementos transponveis, com capacidade
de movimentar-se de um local para outro no genoma, ou seja, ao longo da fita de plasmdio e
deste para o DNA. So denominados de transposons, os quais so variveis. Os tipos de
transposons conhecidos so estes:
a) Sequncia de insero (SI): tem somente um gene que codifica a transposase e locais de
reconhecimento que so sequncias curtas, invertidas de DNA;
Transposon (Tn): so maiores que as SI e carreiam outros genes, alguns conferindo
propriedades importantes ao microrganismo, como resistncia, antagonismo, sntese enzimtica
etc. (Figura 26).
As informaes do DNA so transmitidas para um mRNA, sendo no rRNA onde ocorre a
sntese protica e no tRNA se d o transporte das informaes, reconstituindo a nova fita de DNA.


294
Figura 26- Transposon Tn: transposio de genes ao longo do cromossomo.


SAIBA MAIS!!!

A replicao do DNA ocorre em duas fases, sempre no sentido
5 para 3 (Figura 24), que corresponde a ligao do carbono na
cadeia.

Consulte o captulo 8 do livro: TORTORA, G.J., FUNKE, B.R.,
CASE, C.L. Microbiologia, 6.ed. Porto Alegre: Artmed, 2003.
p.208-237.

Para que ocorra a sntese proteica dois processos so determinantes:
a) Transcrio: consiste na sntese de RNA, realizada por um complexo enzimtico, cuja
enzima chave a RNA polimerase, composta de vrias subunidades e que realiza a
polimerizao do RNA a partir de um molde de DNA.
Etapas:
Iniciao (promotora): AUG.
Alongamento: UUA, UUG, CUU, CUC, CAC, GAA, GCC... (protenas).
Trmino: UAA, UGA e UAG.
b) Traduo: processo que permite a informao gentica ser transformada em protena
nos ribossomos. A leitura em codon (aminocido). As combinaes de bases formam os codons.
Estes se associam aos anticodons dos tRNA de forma especfica, o que faz com que o
aminocido carregado pelo mesmo seja acrescentado cadeia polipeptdica na ordem correta
(Figura 27).


295
Figura 27- Etapas da traduo e da transcrio na replicao do DNA.

2. VARIABILIDADE GENTICA MUTAO
A variabilidade gentica diz respeito s alteraes ocorridas na sequncia de nucleotdeos
na molcula de DNA, sendo esta a principal fonte de mudana evolutiva. Produzem novos alelos
nos organismos, alguns espontaneamente, outros como resultado da exposio radiao e
substncias qumicas do ambiente.
A mutao considerada um fenmeno comum entre os microrganismos e tem carter
evolutivo, apesar de ser danoso para os mesmos.
Algumas bactrias tm maior capacidade de mutao. Os tipos de mutaes so:
Espontnea: falhas no mecanismo de replicao (1 para 10
5
a 10
8
), tambm
denominada de mutao por deslocamento da fase de leitura, onde um ou alguns
pares de nucleotdeos so suprimidos ou inseridos no DNA (Indel);
Induzida: ocorre pela exposio aos agentes mutagnicos (ioniza o DNA)
Radiao (raios ultravioleta, raios X, raios gama):
Anlogos de base (5 bromouracil, 2 aminopurina);
Corantes, antibiticos, metais pesados, drogas, calor etc.
Mutaes pontuais envolvem um ou poucos pares de bases, onde estas so substitudas.
So classificadas em (Figura 28):
Mutao de sentido trocado (missense): altera a protena formada;
Mutao sem sentido (nosense): quando a alterao resulta em um cdon de
parada;
Mutao silenciosa: tambm conhecida como mutao neutra, pois mesmo
alterando uma base, a protena no alterada.


296
Figura 28- Tipos de mutaes pontuais

3. PROCESSOS DE TRANSFERNCIA DE GENES
Os microrganismos so capazes de transferir material gentico entre si, numa populao,
sem que se caracterize um processo de multiplicao. Com a transferncia gnica, os
microrganismos so capazes de adquirir informaes genticas referentes resistncia a drogas,
s condies ambientais, sntese de enzimas, produo de toxinas etc.
A transferncia de genes pode ocorrer de trs formas conhecidas:
a) Transformao bacteriana: fragmentos de genes de uma bactria destruda, porm viveis, so
captados por outra bactria. Desta forma, a bactria receptora, em estado competente
(ocorrem alteraes fisiolgicas na parede celular e na permeabilidade da membrana para a
entrada do fragmento de DNA), passa a possuir um genoma recombinante. Ex. de bactrias
transformadas: Bacillus, Haemophilus, Neisseria, Streptococcus, Staphylococcus (Figura 29).

Figura 29- Transformao bacteriana

Fonte: http://scienceblogs.com.br/meiodecultura/tag/mutacao/

297

b) Conjugao bacteriana: o material gentico transferido de uma clula para outra atravs
de um pili conjugativo (pili sexual). Neste caso, as informaes transferidas so as
contidas no plasmdio existente na bactria doadora. Como o plasmdio auto replicativo,
uma cpia do mesmo transferido. As informaes contidas na cpia do plasmdio so
para sntese de pili sexual (fator F = fertilidade) e outras informaes no essenciais,
dependendo do plasmdeo transferido (Figura 30). Quando o fator F se integra ao
cromossomo transforma-se em uma clula de alta frequncia de recombinao (Hfr).
Somente a bactria Hfr pode transferir cpias ou partes do DNA. Ex. Escherichia coli.

c) Transduo: o material gentico transferido dentro de um vetor, um vrus conhecido
como bacterifago ou fago, capaz de infectar bactrias (Figura 31). Ao infectar a clula
bacteriana, o fago fixa-se a parede celular e injeta seu DNA na bactria. Uma vez
infectada, o fago pode entrar no ciclo ltico ou no ciclo lisognico (Figura 32):
Ciclo ltico: o material gentico viral se replica no citoplasma bacteriano, libera
enzimas lticas que fragmentam o DNA da bactria e ocorre a sntese protica de
revestimento dos novos fagos. Nesse processo, fragmentos do DNA da bactria
so envelopados juntamente com o DNA viral. Quando ocorre a lise da clula
bacteriana, os bacterifagos so liberados e ao infectar novas clulas bacterianas,
transmitiro o DNA da clula destruda.
Ciclo lisognico: conhecido tambm como fago temperado. Neste, o material
gentico viral se insere no DNA bacteriano e permanece latente durante vrias
geraes bacterianas. As populaes bacterianas formadas contm o genoma do
bacterifago. Porm, fatores no determinados levam o fago a entrar no ciclo ltico,
para poder haver a transferncia do material gentico para outra bactria. Sendo
assim, a bactria infectada promove a replicao viral, este destri por lise a
bactria e leva tambm o material gentico da bactria destruda, infectando uma
nova bactria. Ex. Corynebacterium diphtheriae: toxina diftrica, Streptococcus
pyogenes: toxina escarlatnica, Staphylococcus aureus: enterotoxinas, Escherichia
coli: citotoxinas.


298
Figura 30- Transformao bacteriana

Fonte: http://scienceblogs.com.br/meiodecultura/tag/transferencia-horizontal-de-genes/

PERGUNTAS???

1. O processo de conjugao uma das formas de multiplicao
bacteriana?

2. O que diferencia a mutao pontual da mutao por
deslocamento da fase de leitura?

3. Quais as propriedades de um plasmdeo?

4. Quando a bactria poder transferir tambm a cpia do DNA
via fimbria conjugativa?


299
Figura 31- Transferncia de material gentico por transduo

Fonte: http://scienceblogs.com.br/meiodecultura/tag/transferencia-horizontal-de-genes/

Figura 32- Tipos de transduo: 1. Ciclo ltico e 2. Ciclo lisognico.

Fonte: 1.http://static.howstuffworks.com/gif/virus-human-lytic.gif;
2. http://www.oralchelation.com/viewpoint/images/virus2.gif


300

Descubra como estes trs processos de transferncia
gnica foram descobertos, baseados em que experimentao.


301
UNIDADE 7
ANTIMICROBIANOS
1. HISTRICO E IMPORTNCIA
Os antimicrobianos so substncias produzidas por um organismo ou obtidas
sinteticamente, que destri ou inibe o crescimento dos microrganismos. A ao destas
substncias qumicas d-se de forma seletiva sobre as clulas invasoras patognicas.
Documentos antigos indicam que preparaes de plantas e animais, po, queijo mofados,
soja fermentada foram utilizados de forma emprica contra doenas infecciosas. Antes da era da
microscopia (1674) por A. V. Leeuwenhoek, havia pouca esperana de cura entre os enfermos. A
doena meningite causada por Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae ou Streptococcus
pneumoniea apresentava 100% de letalidade e diminuiu para aproximadamente 2 a 10% aps a
descoberta dos antibiticos.
Paul Ehrlich, em 1872, considerado o pai da quimioterapia, mdico alemo, estudou
composto contendo arsnico para tratamento da sfilis. Recebeu o Prmio Nobel (1908) pela
descoberta do SALVARSAN, um derivado arseniacal.
Alexandre Fleming, em1929, descobriu a penicilina, sendo o primeiro antibitico de
utilidade clnica. Descoberto em 1928, permaneceu como curiosidade at 1939 e, em 1941, foi
usado pela primeira vez em um policial de Oxford, com septicemia estafiloccica. Florey e Chain,
em 1944, utilizaram cultura submersa de Penicillium, obtendo um rendimento de mil vezes mais
na quantidade de penicilina produzida. Em 1959, passou-se a produzir as penicilinas semi-
sintticas.
2. DETERMINAO DA AO DOS QUIMIOTERPICOS
a) Concentrao inibitria mnima (MIC): concentrao que resulta em inibio de 99% dos
microrganismos (mnimo que deve atingir o stio de ao). Utilizam-se diluies seriadas
de uma droga em contato com uma suspenso padronizada de bactrias, a concentrao
inibitria mnima determinada a partir do tubo contendo a concentrao mais baixa do
agente capaz de inibir o crescimento da bactria.
b) Difuso ou mtodo de Kirby-Bauer: mtodo que avalia a sensibilidade dos microrganismos
a determinados antimicrobianos. Neste mtodo ocorre difuso no meio de cultura do
antimicrobiano contido em discos de papel, resultando na formao de halo de inibio.
um dos mtodos mais utilizados e fornece informaes importantes, embora no seja um
dos mtodos mais avanados.
3. FAMLIAS DE DROGAS USUAIS E SUA AO SOBRE AS BACTRIAS
Penicilinas, cefalosporinas (-lactmicos): ligam-se as PBPs e enzimas responsveis pela
sntese da parede celular;
Tetraciclinas: liga-se aos ribossomos 30S, impedindo o alongamento do polipeptdeo;
Macroldeos: liga-se aos ribossomos 50S, impedindo o alongamento do polipeptdeo;
Aminoglicosdeos: prprios para bactrias aerbias, liga-se ao ribossomo 30S interferindo
na sntese protica;

302
Fluoroquinolonas: inibe a replicao do DNA;
Outros: trimetoprim-sulfametoxazol, uma combinao sinrgica de quimioterpicos que
interfere no metabolismo intermedirio, impedindo a sntese do cido flico; vancomicina
inibe as ligaes cruzadas entre as camadas de peptideoglicano.
4. CLASSIFICAO DOS ANTIMICROBINOS
a) Com base na origem:
Naturais (penicilina G e V).
Semi-sintticos (aminopenicilinas).
Sintticos (Sulfamidas).

b) Com base na ao biolgica:
Bactericidas: ocasionam a morte da clula de forma direta. Ex. penicilinas, polimixinas,
quinolonas etc.
Bacteriostticos: interfere na multiplicao dos microrganismos de modo a permitir que as
defesas do hospedeiro se encarreguem de destru-los. Ex. sulfonamidas, tetraciclinas etc.

c) Quanto ao espectro de ao:
Espectro estreito: a droga atua sobre um menor nmero de espcies.
Espectro amplo: a droga atua sobre um maior nmero de espcies.
Alguns exemplos: oxacilina contra Gram-positivos; aminoglicosdeo contra Gram-
negativas; metronidazol contra anaerbios; ceftriaxona contra Gram positivos e negativos.
Quando se conhece a etiologia da doena devem-se prescrever sempre drogas de
menor espectro, usar a de maior potncia e, se no surtir efeito, trocar o mais rpido possvel para
uma de maior potncia.

d) Com base no mecanismo de ao:
Antibiticos -lactmicos: inibem a formao da parede celular, ligando-se as protenas de
ligao (pontes peptdicas) na formao do peptideoglicano;
Aumentam a permeabilidade da membrana, diminuindo, assim, a sua capacidade semi-
seletiva;
Inibio da sntese de protenas atuando sobre o ribossomo, o que resulta em formao de
protenas aberrantes e interrupo da sntese protica;
Inibio da sntese de cidos nuclicos: podem interferir no processo de transcrio ou
traduo.
Inibio da sntese de metablitos: o uso de sulfanilamida, um anlogo do cido
paraminobenzico (PABA), que o precursor na formao do cido flico, impede que a
enzima converta o PABA em cido flico.
5. CARACTERSTICAS DE UM ANTIMICROBIANO IDEAL
Ao bactericida;
Espectro o mais especfico possvel;
Menor MIC;
Maior nvel no local da infeco;

303
Melhor comodidade posolgica;
Compatvel com o estado clnico do paciente;
Menos txico (toxicidade seletiva);
Menor custo.
6. PRINCIPAIS MICRORGANISMOS PRODUTORES DE ANTIBITICOS
Os microrganismos produtores de antibiticos so facilmente isolados do ambiente. Muitos
so bactrias filamentosas, a exemplo de Streptomyces sp. produtores de amfotericina B,
cloranfenicol, clortetraciclina e tetraciclina, eritromicina, neomicina e estretpomicina. Entre os
fungos produtores destacam-se Cephalosporium spp. (cefalosporina) e Penicillium spp.
(penicilina).
7. RESISTNCIA AOS ANTIBITICOS
A resistncia aos antibiticos pode ser intrnseca ou adquirida, na qual trs mecanismos se
destacam:
a) Inativao ou destruio do antimicrobiano, a exemplo da produo de -lactamase por
bactrias que adquiriram resistncia a penicilina natural;
b) Evitar que o antimicrobiano entre na clula
c) Evitar que o antimicrobiano ligue-se ao stio alvo ou alterao do stio alvo, para que a
droga no desenvolva a ao;
d) Bomba de efluxo: a droga entra e rapidamente eliminada
e) Uso de uma via bioqumica alternativa.

As mutaes ocorridas exercem um papel importante, facilitando o microrganismo adquirir
resistncia, assim como as formas de transferncia de genes, os plasmdios transferidos e a
transposio de genes, a formao de biofilme.

SAIBA MAIS!!!

Como evitar o surgimento de resistncia?
Evitar o uso indiscriminado de antibiticos que tm pouco ou
nenhum valor teraputico;
Utilizar dosagens suficientemente altas de um antibitico
apropriado para dominar uma infeco rapidamente;
Utilizar o antibitico pelo tempo recomendado;
Utilizar uma combinao de antibiticos de eficincia
comprovada;
Mudar para um antibitico diferente to logo um organismo
mostre sinais de resistncia.

304
PRTICA 4: ANTIBIOGRAMA
1. Introduo

O antibiograma um teste utilizado para avaliar a sensibilidade de uma bactria
frente a diversos antimicrobianos. Este teste tem como finalidade orientar a terapia de modo que
ela seja segura e eficaz.
Para se realizar um antibiograma, necessrio a obteno de uma cultura pura. A maioria
dos microrganismos apresenta uma variao muito grande quanto sensibilidade, mostrando
muitas vezes resistncia mltipla a diversos antimicrobianos. No indicado o teste de
antibiograma quando o microrganismo isolado faz parte da microbiota normal ou quando o
microrganismo for considerado um contaminante. Tambm no se faz para aqueles que
apresentam menor capacidade de mutao.
Existem vrias tcnicas para realizar um antibiograma, onde a mais utilizada pela sua
praticidade o de difuso utilizando disco de papel (mtodo de Kirby-Bauer). Baseia-se na
inibio do crescimento de um microrganismo semeado na superfcie de um meio de cultura, onde
se colocou discos de papel de filtro, impregnado com um antimicrobiano de concentrao
padronizada. A leitura feita 18 a 24 horas aps a incubao, avaliando-se o dimetro do halo de
inibio ao redor do disco. Os halos de inibio so medidos em mm e a medio feita no fundo
da placa. Os resultados so comparados com os de uma tabela, onde esto relacionados os
tamanhos dos halos indicando sensibilidade ou resistncia s drogas. Existem vrios fatores que
podem interferir no resultado do antibiograma levando com frequncia a resultados falsos, entre
estes podem ser citados:
Preparao imprpria do meio de cultura: o meio indicado para realizao do antibiograma
o gar Mueller-Hinton. Para bactrias exigentes que no crescem satisfatoriamente
neste meio utiliza-se o meio agar-sangue. As placas devem ser colocadas sob refrigerao
(2-8C/12h), e antes do uso coloc-las em estufa a 37C para eliminar o excesso de
umidade.
Discos fora de validade ou impropriamente estocados: os discos de antibiticos devem ser
mantidos sob refrigerao (2-8C) e retirados um pouco antes do uso.
Inculo no padronizado: a suspenso bacteriana deve ser ajustada a aproximadamente
1,5x10
8
UFC/mL com o auxlio da escala de MacFarland (tubo 0,5).
Leitura prematura do teste antes de 16 18h.
Medio errada dos dimetros do halo de inibio.
Uso de cultura contaminada.

2. Material

Cultura pura do microrganismo, placa de Petri contendo o meio Mueller-Hinton, swab,
tubos com gua estril, discos para antibiograma, pina, becker com lcool 96
o
.

1. Procedimento

a) Fazer uma suspenso da bactria isolada com gua estril em tubo, obedecendo
concentrao comparativa com o tubo 0,5 da escala de MacFarland;

305
b) Umedecer o swab com a suspenso de microrganismo e semear espalhando na superfcie da
placa de gar Mueller-Hinton, em trs direes, para que toda a superfcie fique semeada;
c) Colocar os discos de antibiticos com a pina pressionando-os levemente para que fiquem
aderidos ao meio de cultivo;
d) Levar as placas preparadas para a refrigerao durante 30 minutos;
e) Incubar as placas na estufa 36
o
C durante 18 a 24h;
f) Fazer a leitura, medindo-se o dimetro do halo formado e comparar com os dados da tabela;
g) Interpretar os resultados.

306
UNIDADE 8
CONTROLE DE MICRORGANISMOS
1. IMPORTNCIA DO CONTROLE DE MICRORGANISMOS
O controle de microrganismos deve ser realizado para evitar a proliferao das espcies
patognicas, o surgimento de doenas infecciosas, alm de evitar a deteriorao dos
equipamentos e dos alimentos. Devem-se adotar medidas que no favorea a sua proliferao de
forma indesejvel.
Os microrganismos apresentam graus de sensibilidade varivel, conforme o tipo e a forma.
So capazes de formar estruturas de resistncia que suportam condies adversas, as quais
outros seres, inclusive o homem, no suportaria.
O controle de microrganismos pode ser realizado por mtodos fsicos e qumicos.
Entretanto, na escolha de um dos mtodos, devem-se considerar alguns aspectos importantes: se
o mtodo selecionado eficiente, se no danifica ou interfere no material a ser esterilizado, a
praticidade do mtodo, o custo, os danos ambientais ou nos materiais etc.
Os mtodos fsicos so os mais usuais, eficientes e seguros no controle de
microrganismos. Porm, alguns materiais apresentam limitaes, de modo que no deve ser
controlado por qualquer mtodo.
Para se entender o controle de microrganismos, necessrio compreender alguns
termos relacionados, tais como:
a) Esterilizao: utilizao de um mtodo capaz de eliminar ou destruir todas as formas de
vida existente no material ou no ambiente. Autoclave, filtro, raio x, forno de Pasteur,
flambagem;
b) Desinfeco: utilizao de um desinfetante capaz de destruir as formas vegetativas
patognicas ou inconvenientes, em material inanimado, porm com limitaes para
destruir as formas de resistncia. Exemplo: lcool 70%, lcool iodado, cloro, clorofina,
gua fervente;
c) Antissepsia: utilizao de um antissptico capaz de destruir as formas vegetativas
patognicas ou contaminantes, em organismo vivo, porm com limitaes para destruir as
formas de resistncia. Exemplo: lcool 70%, lcool gel, lcool iodado, clorexidina 1%,
cepacol;
d) Degermao: utilizao de substncia capaz de solubilizar e eliminar as impurezas e
juntamente com elas os microrganismos tambm so eliminados. Ex. sabonete,
detergente;
e) Assepsia: utilizar um conjunto de medidas fsicas ou qumicas que possam evitar a
presena, a entrada ou a proliferao de microrganismos.
2. MTODOS UTILIZADOS NO CONTROLE DE MICRORGANISMOS
2.1. MTODOS FSICOS
2.1.1. Calor: o calor pode ser mido no qual ocorre desnaturao de protenas ou seco
promovendo a oxidao protica.


307
2.1.1.1. Calor mido:
a) Calor mido sem presso:
gua em ebulio: gua a temperatura acima de 60
o
C por 30 minutos destri as
formas vegetativas dos microrganismos, sem afetar as formas esporuladas.
Alguns vrus (um dos tipos de vrus da hepatite) sobrevive at 30 minutos de
fervura e alguns endsporos bacterianos resistem vrias horas.

Pasteurizao: processo utilizado para destruir os microrganismos patognicos
sem importar os demais. Geralmente utilizado na pasteurizao do leite,
alimentos, substratos. No leite, visa destruir as bactrias Mycobacterium bovis
(tuberculose bovina), Coxiella burnett (febre Q) e os coliformes. A pasteurizao
pode ser lenta 63
o
C durante 30 minutos; rpida 72
o
C durante 15 segundos.
Convencionou-se chamar a tcnica temperatura ultra-elevada (UHT) como
pasteurizao, realizada a 140
o
C por 1 a 3 segundos. No entanto, esta tcnica
elimina praticamente todos os microrganismos, e foge, portanto, ao conceito de
pasteurizao. Nos dois tipos de pasteurizao, aps o aquecimento o material
submetido ao resfriamento para manter a populao microbiana restante sem
se multiplicar e diminuir o metabolismo.
Tindalizao: consiste em ferver o material e manter a temperatura ambiente
durante 24 a 48 horas e ferver pela segunda vez. Por essa tcnica possvel
tambm ser eliminado os esporos de bactrias. Tcnica indicada para a
preservao de conservas.

b) Calor mido com presso: o vapor sob presso a forma mais segura de destruir todas as
formas de vida microbiana. A autoclave um equipamento indispensvel nos laboratrios
de Microbiologia. A esterilizao ocorre com a temperatura a 121
o
C (1atm) durante 20
minutos, dependendo da natureza do material, do volume e da concentrao de
microrganismos. Material com volume maior necessrio aumentar o tempo de
esterilizao. O calor mido se propaga mais rapidamente, sendo este um dos mtodos
mais rpidos de esterilizao para grandes volumes. necessrio que o ar seja
substitudo pelo vapor mido no interior da autoclave, garantindo a qualidade da
esterilizao. Alguns materiais no devem ser esterilizados em autoclave, como as
substncias sensveis ao calor e a umidade (vitaminas, p, papel), materiais cortantes e
substncias oleosas.

2.1.1.2. Calor seco:
a) Flambagem: ao direta da chama do bico de Bunsen sobre agulha ou ala de
platina at esta ficar incandescente, tornando-a esterilizada;

b) Incinerao: combusto de material contaminado, bastante utilizado para material
hospitalar como sacos, copos, bandagens, agulhas etc.

c) Forno de ar quente ou forno de Pasteur: equipamento no qual so acondicionados os
materiais (vidrarias, papeis etc. devidamente embalados) e aquecidos a 170
o
C por 2
horas, obtendo-se a esterilizao. Temperatura mais baixa requer maior tempo de
exposio: 160
o
C/3h, 120
o
C/16h. O calor seco necessita de temperatura mais alta e

308
por tempo mais prolongado que a esterilizao pela autoclave, pois a propagao do
calor no ar seco mais lenta.

2.1.2. Filtrao: passagem de lquido por um filtro com poros microscpicos (0,22m) com
capacidade de reter os microrganismos. Os mais usados so os filtros de membrana
(steres de celulose) permanentes ou descartveis. necessrio a utilizao de
compressor para criar um vcuo na suco do lquido atravs do filtro. O mecanismo
verificado neste mtodo a separao dos microrganismos do material a ser
esterilizado. Alguns micoplasmas (menores bactrias, sem paredes) e vrus no so
retidos no filtro. Entre os materiais a serem filtrados, destacam-se aqueles sensveis ao
calor (enzimas, vacinas, antibiticos) Existe, ainda, os filtros HEPA (high efficiency
particulate air), onde o ar filtrado, geralmente utilizado em salas de cirurgia e
enfermarias de pacientes com queimaduras.

2.1.3. Radiao: mecanismo de ao ocorre por danos no DNA. Este mtodo apresenta
limitaes, como tempo prolongado de exposio, alm disso, as radiaes no
ionizantes (raios ultravioleta) so incapazes de atravessar superfcies, indicados para
ambientes limpos e livres de equipamentos. J as radiaes ionizantes (raio X, raios
gama) so penetrantes e mais eficientes. So bastante aplicados no controle
microbiolgico de materiais de laboratrio (material descartvel, material cirrgico,
dentrio, seringas), medicamentos e alimentos. As radiaes ionizantes devem ser
utilizadas com equipamentos de segurana devido os efeitos causados nos operadores
despreparados. A luz ultravioleta tambm cancergena exposio prolongada.
2.2. MTODOS QUMICOS
Os mtodos qumicos so menos utilizados que os mtodos fsicos com fins de
esterilizao, pois a sua capacidade de esterilizao limitada, por serem txicos em altas
concentraes, pela menor eficincia e requer tempo prolongado de exposio. Os mtodos
qumicos so mais teis como desinfetantes e antisspticos. Segue indicaes sobre as principais
substncias qumicas utilizadas (Quadro 1).

Quadro 1- Indicao sobre os principais agentes qumicos utilizados no controle microbiano.
Agente Espectro
de ao
Uso Modo de
ao
Tempo de
exposio
Desvantagem
lcoois (70%) Gram +
Gram
BAAR
Antissptico
Desinfetante
Desnaturao
protica e
dissoluo
lipdica
10-15 min. Menos ativo
para esporos
Fenis Gram +
Gram
BAAR
Desinfetante Desnaturao
protica
Efeito
imediato
Corrosivo,
ftido
Compostos
quaternrios
de amnio
Gram +
BAAR
Antissptico
Desinfetante
Alterao de
membrana
10-30 min. No inativa
esporos

309
Cloro Gram +
Gram
BAAR
Tratamento
de gua
Inativao
enzimtica e
oxidante

Efeito
imediato
Odor irritante
No inativa
esporos
Iodo Gram +
Gram
BAAR
Antissptico
Desinfetante
Inativao
enzimtica
Efeito
imediato
Odor irritante
No inativa
esporos
Iodforo (iodo
com
detergente)
Gram +
Gram
BAAR
Antissptico
Desinfetante
Inativao
enzimtica
Efeito
imediato
Menor
natidade
contra
esporos
Aldedos
(gs)
Gram +
Gram
BAAR
Desinfetante Desnaturao
protica
Mdio Longa
exposio
Metais
pesados
Gram +
Gram
Antissptico

Inativao
enzimtica
Efeito
imediato
No elimina
esporos e
BAAR
T NA WEB!!!

Assista ao vdeo sobre o controle de microrganismos, no yotube:

http://youtu.be/Lfe5CYTzj7o
http://youtu.be/rYfbTV2puhE
PRTICA 5: CONTROLE DE MICRORGANISMOS
1. Efeito do calor mido sobre o crescimento bacteriano: ao da gua fervente
a) Semear com ala de platina 0,5mL da suspenso de E. coli em um dos quatro quadrantes de
uma placa de Petri com gar Mueller-Hinton. Colocar o tubo com a suspenso de E. coli em gua
fervente por 5, 10, 15 e 20 minutos. Aps cada intervalo de tempo, realizar a semeadura em um
dos quadrantes. Incubar as placas a 36
o
C/48h;
b) Fazer o mesmo procedimento com uma cultura de Bacillus spp.;
c) Interpretar os resultados.

2. Efeito do calor mido sobre o crescimento bacteriano
a) Ao de calor mido na forma de vapor sob presso: preparar uma suspenso de E. coli e
outra de Bacillus spp. em tubo de ensaio;
b) Semear em cada metade da placa com meio de cultivo (controle);
c) Colocar as suspenses na autoclave temperatura de 121C por 15 minutos;
d) Semear cada uma das suspenses no gar Mueller-Hinton;
e) Incubar as placas a 36
o
C por 48h;
f) Interpretar os resultados.

310

3. Efeito da ao de antisspticos sobre o crescimento bacteriano
a) Umedecer um swab estril em gua estril, esfregar na mo e semear em um dos quadrantes
da placa de Mueller-Hinton;
b) Umedecer um segundo swab em lcool iodado, passar na outra mo e aguardar um minuto
para semear no segundo quadrante;
c) Lavar as mos com sabo, umedecer outro swab em gua estril, passar na mo lavada e
semear no terceiro quadrante da placa;
d) Incubar as placas a 36
o
C por 48h;
e) Interpretar os resultados.

311
UNIDADE 9
MICROBIOTA NORMAL DO CORPO
1. MICROBIOTA NORMAL
A microbiota normal refere-se a populaes de microrganismos que habita a pele e
mucosas de pessoas e de animais saudveis. Esses microrganismos vivem como comensais,
trazendo benefcios ao corpo. O corpo humano adulto possui em torno de 100 trilhes de
microrganismos, sendo que antes do nascimento o feto estril.
2. COMPOSIO DA MICROBIOTA NORMAL
A microbiota normal composta por:
Residente: composta por microrganismos, sempre presentes no referido local, em maior
quantidade, ou que rapidamente se renova aps remoo. No removida com
o banho, por exemplo.
Transitria: microbiota temporria, adquirida conforme o grau de exposio e que depois
de removida no mais coloniza o stio. Esta microbiota facilmente removida
com a lavagem das mos com o uso de sabonetes (degermao).

Entre os microrganismos que compe a microbiota normal, existem trs grupos distintos:
Microrganismos estritamente patognicos: so aqueles que ao serem detectados esto
sempre associados patogenia. Ex. Micobacterium tuberculosis, vrus HIV;
Microrganismos potencialmente patognicos: so comuns de serem detectados, porm
nem sempre associados com a patogenia. So considerados comensais, que em
determinadas condies podem se tornar nocivo ao organismo humano. Ex.
Staphylococcus epidermidis;
Microrganismos oportunistas: aqueles que so adquiridos, mas s desenvolve alguma
patogenia se o organismo estiver debilitado. Ex. Candida albicans.

Na qualidade de comensal, os microrganismos desempenham funes importantes ao
organismo, pois participam da digesto alimentar, produzem vitaminas (vitamina K), secretam
substancias que impedem o crescimento de outros microrganismos, estabelecendo-se uma
relao antagnica, ou relaes sinrgicas, por exemplo, uma populao precursora modifica o
pH para uma populao sucessora. As interaes entre os microrganismos e entre hospedeiro e
microrganismos so constantes e tanto podem resultar em aspectos positivos quanto malficos ao
hospedeiro.
3. COMO SE ADQUIRE OS MICRORGANISMOS?
Os microrganismos so adquiridos a partir do nascimento, dos primeiros contatos com o
mundo externo. Isso se d pelo processo respiratrio, pela ingesto de alimentos e gua, por
contato direto, por vetores, desde o inicio at o final da vida (Figura 33).

312
4. COLONIZAO/DOENA
A exposio do hospedeiro aos microrganismos pode ocasionar uma colonizao
transitria, colonizar de forma permanente ou ocasionar doena. As doenas infecciosas so
ocasionadas pela presena direta do microrganismo no hospedeiro (infeco) ou simplesmente
pela ingesto de toxinas (intoxicao).

FIQUE LIGADO!!!

Colonizao: a multiplicao do microrganismo no hospedeiro,
mas no interfere com as funes normais do corpo.
Doena: doena infecciosa ocorre quando a interao entre
microrganismo e o hospedeiro leva a um processo patolgico.
Qualquer alterao na normalidade da clula se caracteriza
como doena.
Infeco: entrada de microrganismos exgenos ou a
multiplicao elevada dos que so residentes.
Intoxicao: ao de uma toxina, ingerida junto com os
alimentos ou produzida pelos microrganismos aps uma
infeco.

Figura 33- Formas de transmisso de microrganismos

Fonte: 1.http://2.bp.blogspot.com/_Rd7r9Y23g9A/Rx-UEyvZibI/AAAAAAAAABE/vSb4tBUY_n8/s400/c%C3%A3o.bmp;
2.http://3.bp.blogspot.com/_kv1uWWHayTQ/SVlleo4Va3I/AAAAAAAAZhA/lQAawwkL8_8/s400/espirro.jpg; 3.
http://oglobo.globo.com/fotos/2007/12/11/11_MVG_viv_carnes_3253.jpg; 4.http://3.bp.blogspot.com/_BY-iWkqQTyA/R3-
ikGx1hCI/AAAAAAAAATo/0SQOn34v5AY/s400/aperto+de+m%C3%A3o+2.bmp; 5.http://br.geocities.com/insecta_tv/Musca-domestica.JPG;
6.http://www.meionorte.com/imagens/COL63Paciente-internada-no-HUT-morre-pouco-depois-de-receber-alta.-Parentes-de-pacientes-fazem-denuncias.jpg;
7.http://3.bp.blogspot.com/_-IUr8M7oFb4/R-e0Rt-XpDI/AAAAAAAAA0o/vF2ScjBIXD8/s400/arranhao.jpg.
5. REAS DO CORPO HUMANO COLONIZADAS POR MICRORGANISMOS
Os microrganismos so comumente encontrados na conjuntiva, mucosa nasal, mucosa
oral, faringe, pele, intestino grosso, reto, uretra e rgos genitais. J o ouvido mdio e interno,
msculos, bexiga, glndulas, tero, fgado, bao, crebro, rins devem ser livres de
microrganismos.

313
As reas colonizadas por microrganismos so influenciadas por fatores de colonizao, de
modo que a populao seja estvel. Cada grupo de microrganismo tem seu stio receptor. Assim,
fora desse stio, pode no haver colonizao ou trazer danos ao hospedeiro. Por exemplo,
bactrias intestinais que colonizam a mucosa vaginal podem ocasionar uma infeco urinria.
O corpo apresenta mecanismos prprios para evitar o crescimento excessivo dos
microrganismos, por exemplo, alterao do pH, produo de enzimas lticas (lisozima na lgrima e
no muco), acidez estomacal, a pele, os plos, o jato de urina etc. (Figura 34).


Descubra o que so prebiticos e probiticos e a relao de
ambos com os microrganismos.

Figura 34- Locais colonizados pelos microrganismos e os fatores limitantes a uma colonizao
normal.


Estudos tm mostrado que as doenas infecciosas mais comuns so as causadas por
microrganismos da microbiota normal. Isso acontece devido: a transferncia de microrganismos
de um stio para outro (ex. mos contaminadas na boca), diminuio da microbiota competitiva
(exemplo: uso de antibiticos interfere na microbiota residente e outra populao pode se
sobressair), em indivduos imunocomprometidos (exemplo: qualquer microrganismo pode se
sobressair).


314
Cada microrganismo tem uma porta de entrada principal, como por exemplo:
a) Membranas mucosas do trato respiratrio (nariz e boca): contrai microrganismos
causadores de pneumonia, tuberculose, sarampo etc. Microrganismos mais comuns na
boca, orofaringe e nasofaringe: Peptostreptococcus, Veilonella, Actinomyces,
Fusobacterium, Streptococcus, Haemophilus, Neisseria;
b) Trato gastrintestinal: so transmitidos pelos alimentos contaminados, gua e dedos. Esses
microrganismos podem ser destrudos pelo HCl, enzimas do estomago, bile e enzimas do
intestino delgado. Ex: microrganismos causadores de hepatite, febre tifide, clera,
salmonelose etc. Microrganismos mais comuns no intestino: Lactobacillus, Streptococcus,
Clostridium, Bifidobacterium, Enterococcus e ainda as enterobactrias e os bacterides.
No intestino grosso pode ser encontrada mais de 10
11
bactrias/g de fezes com bactrias
anaerbias excedendo em mais de mil vezes as aerbias.
c) Pele: a pele ntegra uma barreira natural, na qual poucos microrganismos conseguem
coloniz-la. Mas leses e escoriaes mnimas so suficientes para haver colonizao, a
exemplo das doenas furnculo, impetigo, erisipela, ttano. Microrganismos comuns na
pele: Staphylococcus, Micrococcus, Corynebacterium, Propionibacterium,
Peptostreptococcus;
d) Via parenteral: ocorre colonizao aps puno, injeo, picadas, cortes, cirurgias,
ferimentos etc.
e) Microbiota do aparelho urinrio: Lactobacillus, Streptococcus, Staphylococcus (coagulase
negativa).
6. VANTAGENS E DESVANTAGENS DA MICROBIOTA NORMAL
As vantagens da microbiota normal consistem em impedir a colonizao de patgenos
causadores de provveis doenas, produo de vitaminas e estimular o sistema imune. A
desvantagem que esses microrganismos podem causar doenas em determinadas
circunstncias.

315
UNIDADE 10
FATORES DE VIRULNCIA DAS PRINCIPAIS BACTRIAS PATOGNICAS
No processo infeccioso, necessrio uma srie de eventos, desde o estabelecimento da
infeco ou multiplicao excessiva de bactrias endgenas at a expresso dos fatores de
virulncia. Os fatores de virulncia esto relacionados a componentes estruturais (parede,
cpsula, fmbrias, plasmdios, flagelo), as enzimas e as toxinas.
1. ENTRADA DO MICRORGANISMO
Ao infectar o hospedeiro, a bactria usa de mecanismos para se livrar das defesas do
corpo. A existncia de leses, queimaduras, fibrose cstica, idade do hospedeiro, local
infeccionado, quantidade de microrganismos etc., favorece o estabelecimento deste
microrganismo. Cada microrganismo se utiliza de uma forma para poder chegar at o hospedeiro,
conforme visto na unidade 9.
2. ADERNCIA E INVASO
Aps a entrada do microrganismo, necessrio que ocorra aderncia s clulas epiteliais
ou endoteliais, atravs das fmbrias (Figura 35), produtoras de adesinas. Essas molculas de
superfcie no patgeno se unem especificamente aos receptores de superfcie no hospedeiro
(glicoprotenas ou lipoprotenas), evitando a remoo do microrganismo. Outros componentes
celulares tambm exercem essa mesma funo, como o cido lipoteicico e outras protenas de
superfcie. As bactrias invasivas podem, inclusive, invadir clulas de defesa para iniciar a
infeco. Exemplos:
Escherichia coli enteropatognica (EPEC) possui pili tipo 1 (D-manose-clulas epiteliais), que
promove adeso s clulas epiteliais do intestino delgado e destruio das vilosidades. O pili
formador de feixes favorece a formao de microcolnias em um pedestal. A EPEC insere um
receptor de intimina (Tir) na membrana da clula epitelial que funciona como receptor para a
intimina de invaso.

Neisseria gonorrhoeae (causadora da gonorria) possui fimbrias tipo 4 (pilina), para aderncia
s clulas do epitlio colunar no ciliado, depois ocorre uma adeso mais ntima ao epitlio
mais profundo, com endocitose direcionada pelo patgeno. Somente aps essa aderncia,
que ocorre a multiplicao dos microrganismos.


A bactria Mycobacterium tuberculosis no produz toxinas
e enzimas como fatores de agresso ao hospedeiro. No entanto,
causadora da tuberculose. Descubra como essa doena
desenvolve-se no hospedeiro.


316
Figura 35- Bactrias que se utiliza das fmbrias como fator de virulncia: 1. Escherichia coli
enteropatognica (EPEC) e Neisseria gonorrhoeae.

Fonte: 1.http://nursextine.files.wordpress.com/2008/11/escherichia_coli.jpg;
2. TRABULSI et al. (2004).
3. MULTIPLICAO DOS MICRORGANISMOS NO TECIDO
Os microrganismos se multiplicam rapidamente aps ocorrer infeco, como uma forma
de vencer as clulas de defesa. Os que apresentam multiplicao lenta, a exemplo do
Mycobacterium tuberculosis e M. leprae, utilizam-se de outros mecanismos para persistir. Estes
apresentam uma parede celular rica em cido miclico, a qual minimiza os efeitos das clulas de
defesa (colonizao intracelular) e a entrada de substncias nocivas na clula.
A partir da multiplicao, o microrganismo poder ocasionar uma doena localizada ou
sistmica e produzir enzimas e toxinas como mecanismos de agresso ao hospedeiro.
4. CPSULA OU GLICOCLICE
Alguns microrganismos podem apresentar cpsula/glicoclice, que impede a fagocitose.
Quando uma bactria patognica perde a cpsula, seu poder de virulncia diminui, alm desta
bactria se tornar suscetvel lise.
Streptococcus pneumoniae (causador de pneumonia): forma cpsula.
Streptococcus mutans (associado crie): forma biofilme em decorrncia do glicoclice.
5.COMPONENTES DA PAREDE CELULAR
A parede celular dos microrganismos apresenta particularidades em relao aos
mecanismos de patogenicidade. Alguns componentes so antignicos, a exemplo do LPS (lipdeo
A) das bactrias Gram negativas e do Peptideoglicano das Gram positivas. Alm destas, as
micobactrias apresentam cido miclico.
Lipdeo A: endotoxina liberada pelas bactrias Gram negativas aps lise celular. So
relativamente estveis, fracamente antignica, moderadamente txicas. Produzem febre e
outros efeitos no hospedeiro.
cido teicico e lipoteicico: so ligantes as clulas epiteliais, em S. pyogenes.
Protena M: uma cadeia protica comum em Streptococcus pyogenes, (adesinas).
cido miclico: camada impermevel em Mycobacterium spp., que impede a entrada ou
sada de substncias.
Peptideoglicano: semelhante endotoxina, sendo mais fracamente ativo, estimula a
produo de pirognio, comum as Gram positivas.

317
6.PLASMDEO E BACTERIFAGOS
Muitas bactrias adquirem a capacidade de ser virulenta atravs do recebimento de um
plasmdeo, com informao gentica especfica ou ao serem infectadas por bacterifagos. Estes
transportam informao gentica que confere patogenicidade a uma bactria.
Plamdios: codificam para a sntese de toxinas, adesinas, cpsulas, fmbrias etc., sendo
adquiridos atravs da conjugao.
Bacterifagos: por converso lisognica, permitem a expresso de novas caractersticas,
como a toxina diftrica (Corynebacterium diphtheriae): toxina escarlatnica (Streptococcus
pyogenes), enterotoxinas (Staphylococcus aureus) citotoxinas (Escherichia coli).
7.ENZIMAS
Coagulase: enzima que converte o fibrinognio em fibrina. Com a formao de
cogulos a bactria estar protegida da fagocitose. Esta enzima importante para
diferenciar as espcies, onde o Staphylococcus aureus coagulase positiva e as
demais negativa.
Catalase: transforma o perxido de H em O
2
+ H
2
O. Todos os Staphylococcus so
catalase positiva e os Streptococcus so negativas. A bactria produtora de catalase
elimina os radicais perxido e superxido do metabolismo oxigenativo, melhorando a
condio do meio.
Hialuronidase: hidrolisa o cido hialurnico no tecido conjuntivo, promovendo a
disseminao dos Staphylococcus no tecido.
Fibrinolisina: enzima que dissolve cogulo de fibrina, quando ocorre naturalmente uma
coagulao, mecanismo este utilizado para a bactria se disseminar.
Lipases: hidrolisa lipdios.
Nucleases: hidrolisa DNA.
Penicilinase: hidrolisa o anel betalactmico da penicilina (-lactamases).
8.TOXINAS
As toxinas alteram as funes e causa morte celular. Estas substncias so produzidas
durante o metabolismo da bactria e liberadas no hospedeiro ou nos alimentos. Algumas delas
so termoestveis e outras termosensveis. So as substncias mais potentes produzidas por
microrganismos, com efeito letal mesmo em pequena quantidade, dependendo da toxina.

Toxina diftrica: produzida pelo Corynebacterium diphtheriae (causador da difteria)
(Figura 36) somente quando infectado por um fago lisognico transporta o gene tox. A
bactria pode causar infeces em diferentes rgos, sendo a forma farngea a mais
comum.
Aps infectar a orofaringe, h formao de um exsudato espesso, cinzento e
aderente (pseudomembrana), que recobre a garganta, forma fibrina, tecido necrtico,
leuccitos. Ocorre obstruo respiratria, arritmias cardacas, coma e morte.
A toxina diftrica do tipo AB, onde o fragmento B liga-se membrana celular e
a subunidade A se dissocia e inativa o fator de alongamento EF-2, necessrio para o
movimento das cadeias dos peptdeos. Provoca a inibio da sntese proteica.


318
Figura 36- Exsudato espesso e aderente (pseudomembrana), que recobre a garganta na difteria.

Fonte: http://nationalnursingreview.com/2010/12/what-is-diphtheria/

Neurotoxinas: altera os impulsos nervosos as funes e morte celular tanto na toxina
botulnica quanto na tetnica.
a) Toxina botulnica produzida pelo Clostridium botulinum. Une-se a membrana
neuronal nos terminais nervosos e entra por endocitose. A toxina botulnica
bloqueia a liberao de acetilcolina. Sem liberao o msculo no se contrai,
causando a paralisia flcida (Figuras 37).

b) Toxina tetnica produzida pelo Clostridium tetani. Conhecida tambm como
tetanospasmina (Figuras 38). O fragmento A bloqueia a liberao de
neurotransmissores (c. aminobutrico e glicina) nas sinapses inibitrias, causando
espasmos musculares (Figura 39), ou seja, uma vez ligada ao sistema nervoso
central, bloqueia a via de relaxamento muscular, gerando contrao muscular
incontrolvel.


319
Figura 37- Comparao entre o msculo normal e sob efeito da toxina botulnica

Figura 38- Comparao entre o msculo normal e sob efeito da toxina tetnica.

Fonte: MADIGAN, MARTINKO, PARKER ( 2004).


320
Figura 39- Homem com opisttomo (1) e trismo (2), causados pela toxina tetnica (paralisia
espstica).

Fontes: 1. http://medinfo.ufl.edu/year2/mmid/bms5300/images/a5.jpg
2. http://www.mdsaude.com/2009/09/tetano.html

Enterotoxinas: essa exotoxina liga-se a receptores e afeta as clulas gastrintestinais.
A enterotoxina colrica, produzida pelo Vibrio cholerae, composta por duas
subunidades: a subunidades B reconhece os receptores celulares GM1 por CT e a
subunidade A entra na clula e ativa o adenilato ciclase, que a enzima que forma o
AMPc, desencadeando reaes metablicas, promovendo a liberao de eletrlitos e
gua (diarria intensa).
A enterotoxina estafiloccica um superantgeno (estimula a proliferao de
clulas T e liberao de citocinas, estimula a liberao de mediadores inflamatrios
nos mastcitos). Esta toxina aumenta o peristaltismo intestinal e a perda de lquidos,
acompanhada de nuseas e vmitos.

PERGUNTAS???

1. Cite trs vias utilizadas por patgenos para infectar um
ndivduo?

2. D exemplos de microrganismos que possuem endotoxinas:

3. Em relao s neurotoxinas citadas, qual o mecanismo de ao
de cada uma delas?

4. Descreva como a Escherichia coli enteropatognica causa
diarreia:
PRTICA 6: IDENTIFICAO DE COCOS GRAM POSITIVOS (ESTAFILOCOCOS)
1. Introduo

Os estafilococos e estreptococos so bactrias de grande importncia para o homem
devido variedade de doenas por elas causadas. So bactrias de fcil diagnstico laboratorial.
A identificao preliminar refere-se morfologia e arranjo das clulas, pela colorao de Gram.
Porm, testes confirmativos, mais seguros devem ser realizados (Quadro 2). Ambos so cocos
Gram positivos, diferenciando-se apenas no agrupamento das suas clulas. Os estafilococos so

321
agrupados em "cacho de uva" e os estreptococos, em "cadeia". Os estafilococos so bactrias
no exigentes, crescem com facilidade nos meios de cultura simples, formando colnias amarelas
ou brancas. J os estreptococos so de difcil crescimento, crescem melhor no meio gar-sangue
sob microaerofilia, formando colnias pequenas, com hemlise total, parcial ou no hemoltica.
As trs espcies do gnero Staphylococcus de maior importncia mdica so:
Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis e Staphylococcus saprophyticus.

Quadro 2- Testes utilizados na identificao de cocos Gram positivos (estafilococos).
Staphylococcus Catalase Coagulase DNAse Meio manitol Novobiocina
S. aureus + + + + Sensvel
S. epidermidis + - - - Sensvel
S. saprophyticus + - - - Resistente

2. Material

Culturas de estafilococos e estreptococos, lmina escavada, ala de platina, bateria de
corante para o Gram, plasma, gua oxigenada, gua esterilizada em tubos, bico de Bunsen.

3. Teste da catalase

Bactrias pertencentes ao gnero Staphylococcus produzem a enzima catalase, enquanto
as pertencentes ao gnero Streptococcus no produzem, o que torna possvel diferenci-los.
a) Preparar uma suspenso do crescimento bacteriano em gua destilada, na superfcie de
uma lmina;
b) Colocar sobre a suspenso de bactrias 2-3 gotas de gua oxigenada a 3%;
c) Observar se houve formao de bolhas:
(+) Houve formao de bolhas: a bactria produziu a enzima catalase que desdobrou o H
2
O
2
em
H
2
O + O
2
(estafilococos).
(-) No houve formao de bolhas: a bactria no

produziu a enzima catalase
(estreptococos).

4. Teste da coagulase, DNAse e meio de Chapman

O teste da coagulase, DNAse e o uso do meio seletivo e indicador Chapman apresentam o
mesmo resultado, ou seja, em qualquer um destes testes separa-se Staphylococcus aureus das
demais espcies.

a) Teste da coagulase

A coagulase uma enzima, capaz de transformar o fibrinognio do plasma em fibrina. Este
teste utilizado na identificao do Staphylococcus aureus, considerando que 97% dessas
amostras so coagulase positivas.
a) Fazer uma suspenso da bactria com 2-3 gotas de gua destilada estril na superfcie
da lmina;
b) Preparar um esfregao espesso em lamina escavada a partir das culturas;

322
c) Adicionar 2-3 gotas de plasma e homogeneizar suavemente, movimentando a lmina;
d) Observar se houve formao de grumos:
(+) Formao de grumos, indica que bactria produziu a coagulase (S. aureus).
(-) No formao de grumos, indica que a bactria no produziu a enzima coagulase
(demais espcies do gnero Staphylococcus).

b) Teste da DNAse

No teste da DNAse ocorre uma despolimerizao (quebra do DNA em subunidades
compostas de nucleotdeos) do cido desoxirribonuclico contido no meio de cultura pela enzima
desoxirribonuclease. Este teste serve para diferenciar S. aureus (produz DNAse) das demais
espcies.
a) Semear a bactria na superfcie do agar DNAse, de modo que o inculo possa cobrir
uma rea de 1-1,5cm de dimetro;
b) Incubar a 36
o
C por 18-24h;
c) Cobrir o crescimento com uma soluo de cido clordrico 1N;
d) Observar a formao de uma rea clara em torno do crescimento indica a presena do
S. aureus, enquanto que nas demais espcies observam-se uma turvao uniforme em toda a
superfcie do meio:

c) Semeadura em meio de Chapman

O meio de Chapman (gar manitol) seletivo para estafilococos devido a concentrao
alta de NaCl (7,5%) e indicador para a espcie que fermenta o manitol presente no meio de
cultura. Ao utilizar o manitol o meio muda de cor, originalmente vermelho para amarelo, pela
presena do vermelho de fenol que um indicador de pH.
a) Semear a bactria em meio gar manitol
b) Incubar a 36
o
C por 24-48h;
c) Observar a cor do meio de cultura:
(+) Meio amarelo (indica degradao do manitol com formao de cidos): S. aureus
( - ) No muda a cor: Outros estafilococos

5. Teste da novobiocina

O teste da novobiocina utilizado na identificao da espcie S. saprophyticus que
resistente a novobiocina. As demais espcies de estafilococos so sensveis.
Procedimento:
a) Umedecer um "swab" com suspenso de estafilococos e espalhar em meio gar Mueller-
Hinton;
b) Colocar um disco de novobiocina sobre o meio com uma pina;
c) Incubar a placa de Petri a 37C durante 24 horas;
d) Observar se houve formao de halo de inibio do crescimento:
(S) houve inibio do crescimento da bactria.
(R) no houve inibio do crescimento da bactria.


323
FIQUE LIGADO!!!

A identificao de uma bactria muito importante, tanto para o
controle das doenas, como para os estudos epidemiolgicos
das mesmas.
Nem sempre um nico teste bioqumico suficiente para se ter
certeza sobre determinada espcie microbiana.


324
UNIDADE 11
CARACTERSTICAS GERAIS DE FUNGOS
1. ASPECTOS GERAIS
Os fungos so microrganismos ubquos, eucariotos, aclorofilados, aerbios, heterotrficos,
unicelulares e multicelulares. Mais de 250 mil espcies de fungos j so conhecidas. Apesar das
dimenses macroscpicas de alguns fungos, a exemplo dos cogumelos, so considerados
microrganismos, pois formam um falso tecido gigante, mas a unidade celular microscpica.
A clula eucaritica apresenta parede celular constituda por quitina (quitosana)
(Zygomycota) quitina-glucana (Ascomycota e Basidiomycota filamentosos e Mitospricos),
glucana-manana (Ascomycota e Mitospricos leveduriformes), quitina-manana (leveduras
Basidiomicetos). Chytridiomycota: celulose. A membrana celular rica em ergosterol e tem o
glicognio como substncia de reserva.
Quanto ao modo de vida, a maioria saprbio sobre material em decomposio, outros
so parasitos de plantas e animais (aproximadamente 150 sp. so patognicas para humanos e
animais). A simbiose tambm verificada como coevoluo entre fungos e plantas (micorrizas) e
algas (lquenes).
Com o metabolismo aerbio crescem com facilidade sobre meios base de batata ou
carboidratos. As leveduras so aerbias facultativas e promovem a fermentao, sendo de larga
aplicao na indstria alimentcia.
Os fungos so imveis, exceto algumas estruturas reprodutivas (esporos do filo
Chytridiomycota) flageladas. Os esporos so estruturas reprodutivas geradas por meiose (sexual)
e mitose (assexual).
2. IMPORTNCIA DOS FUNGOS
Por serem decompositores, a maioria est envolvida no processo de reciclagem de
nutrientes, teis para os demais organismos, a partir de detritos orgnicos. um dos
microrganismos mais importantes no processo de compostagem.
Na alimentao so fontes de protena, vitaminas, aminocidos (cogumelos comestveis:
champignon, shiitake, shimeji, Morchella, Lactarius etc.). Utilizados na indstria como fermentos
na produo de po, vinho, lcool (Saccharomyces), shoio (Aspergillus), queijos (Penicillium).
O gnero Giberella produz o hormnio de crescimento cido giberlico, que promove a
proliferao de tecidos jovens nas plantas. Outra aplicao benfica so os antibiticos (penicilina,
cefalosporina etc.) produzidos por fungos e que so utilizados no tratamento de doenas.
Poucos fungos so capazes de causar doenas, conhecidas como micoses. Os fungos so
menos frequentes na microbiota humana e animal. Portanto, as doenas de natureza fngica so
menos comuns, o que no ocorre com as plantas. Alguns cogumelos tambm so txicos e outros
fungos tambm podem produzir micotoxinas em alimentos, causando intoxicao alimentar.
Algumas espcies de fungos so de grande utilizao no controle biolgico, conhecidos como
fungos entomopatognicos.
Devido a sua caracterstica heterotrfica, so frequentes os casos de deteriorao de
alimentos, equipamentos, roupas e outros materiais, especialmente contendo material orgnico e
umidade temperatura ambiente.

325
As espcies macroscpicas (cogumelos) albergam outras espcies, sendo um fator
importante na cadeia alimentar.
3. MORFOLOGIA
a) Fungo leveduriforme: unicelular, com clulas esfricas, blastsporos, pseudo-hifas e
clamidsporos (Figura 40).

b) Fungo filamentoso: multicelular, constitudo por estrutura vegetativa (hifas). O conjunto de
hifas forma o miclio. O miclio cresce de forma radial e horizontal, absorvendo nutrientes
a partir do contato e ao enzimtica sobre o substrato. As hifas tm crescimento
indefinido enquanto houver nutrientes disponveis. As hifas so cilndricas, incolores
(hialinas) ou levemente escuras (demcias). Os fungos filamentosos so divididos em
cenocticos - hifa no septada - e apocticos - hifa septada (Figura 41).

Figura 40- Leveduras: 1. Saccharomyces em fase de gemulao (brotamento) com blastsporos
(clulas filhas); 2. Candida sp. com pseudo-hifas; 3. Candida albicans: pseudo-hifas e
clamidsporos.

Fontes: 1.; http://florabrasilienses.blogspot.com.br/2009/05/o-reino-fungi.html; 2.
http://www.fiocruz.br/ccs/media/Candida_albicans2.gif; 3. Fonte: http://www.christinas-home-
remedies.com/image-files/candida-albicans-picture1.jpg

Figura 41- Fungos filamentosos: 1. hifas cenoctica e 2. Apoctica.

Fontes: 1. http://www.biologia.edu.ar/micologia/03_micologia.htm;
2. http://florabrasilienses.blogspot.com.br/2009/05/o-reino-fungi.html

Alguns fungos modificam o miclio e estes, modificados, desempenham funes
especficas, a exemplo dos rizides: em Rhizopus e Absidia, com a funo de se fixar no
substrato; grampo de conexo (Figura 42): em Basidiomycetos, permite a passagem de ncleos

326
para o septo seguinte; clamidsporo: clula de resistncia rica em glicognio; esclerdio:
enovelamento de hifas formando uma estrutura de resistncia de consistncia dura.

Figura 42- Grampo de conexo (material nuclear a e b compatveis).

Fonte: ALEXOPOULOS, MIMS, BLACKWELL (1996).

A morfologia da colnia algodonosa (cotonosa), seca, forma de p, coloridas para os
fungos filamentosos e mida ou leitosa para os fungos leveduriformes (Figura 43).

Figura 43- Colnias de fungos filamentosos (1) e de levedura (2).

Fonte: 1. J.S. NASCIMENTO (2009);
2. http://media-2.web.britannica.com/eb-media/11/123611-004-4B9499BB.jpg

FIQUE LIGADO!!!

Dimorfismo: capacidade que alguns fungos filamentosos,
presentes no ambiente, ao infectarem humanos ou animais
transforma-se em leveduras. Sendo esta uma condio
reversvel. O principal fator que interfere nessa mudana
morfolgica a temperatura.
Os fungos cenocticos tambm podem apresentar septos,
ocasionalmente, ao longo da hifa.
As leveduras tambm so capazes de formar pseudohifas,
assemelhando-se aos fungos filamentosos.
Os fungos no so vegetais, pertencem ao reino Fungi.

327
4.CLASSIFICAO DE FUNGOS
No organograma abaixo est resumido o estudo da sistemtica de fungos. Nos primrdios
da cincia, Linnaeus classificou os fungos como plantas. Posteriormente, foram criados reinos que
melhor representasse os fungos. Pela ltima classificao adotada, os fungos pertencem ao reino
Fungi e algumas subdivises passaram a pertencer a outros reinos, conforme mostra o esquema
2.

Esquema 2- Classificao de fungos, ao longo do tempo.

Fonte: ALEXOPOULOS, MIMS, BLACKWELL (1996), modificado.
4.1.REINO PROTISTA OU PROTOZOA
Estes so organismos gelatinosos, desprovidos de parede celular na fase plasmodial, fase
mvel e amorfa (mixameba), nutrem-se por fagocitose e produzem o esporo assexual que uma
mixoameba biflagelada, denominada de zoosporangisporo (Figura 44).
Os fungos do reino protista so muito fceis de serem encontrados no ambiente,
especialmente em bosques, com elevado teor de umidade, aps as chuvas. As estruturas
reprodutivas formam capilcios, muito variveis em tamanhos, de 0,5 a poucos centmetros. Este
grupo no pertence mais ao Reino Fungi.
4.2.REINO CHROMYSTA OU STRAMENOPILA
O reino Chromysta so organismos aquticos, marinhos ou de gua doce e terrestre. So
saprfitos, parasitos facultativos de peixes e crustceos (Figura 45) ou biotrficos de plantas.
Possui hifa cenoctica, na fase assexual produz os esporos mveis biflagelados
(zoosporangisporos) e a fase sexual produz o esporo osporo (Figura 46).
Outro grupo de fungos que deixou de pertencer ao Reino Fungi. No entanto, um grupo de
fungos que apresenta um grande interesse econmico, em funo das doenas ocasionadas em
plantas, tais como o mldio, a ferrugem branca, a podrido radicular etc.

HAECKEL STAINIER WHITTAKER HAWKSWORTH et al.
(1866) (1969) (1969) (1995) .
Plantae Plantae Plantae Plantae
Animalia Animalia Animalia Animalia
PROTISTA Protista Monera Monera
Inferior
PROTISTA FUNGI PROTOZOA
SUPERIOR

MyxoMYCETE MyxoMYCOTINA CHROMYSTA

MastigoMYCOTINA FUNGI
PhycoMYCETE ChytridioMYCOTINA ChytridioMYCOTA
ZygoMYCOTINA ZygoMYCOTA

AscoMYCETE AscoMYCOTINA AscoMYCOTA
BasidioMYCETE BasidioMYCOTINA BasidioMYCOTA

. DeuteroMYCETE DeuteroMYCOTINA MITOSPRICOS

328
Figura 44- Ciclo de vida de um Myxomycota.

Fonte: HERRERA, ULLOA (1998).

Figura 45- Peixe com infeco (1) por Saprolegnia parastica (2), em aqurio.

Fonte: http://botit.botany.wisc.edu/toms_fungi/saprolegnia.html

329
T NA WEB!!!

Leia mais sobre as doenas fngicas, em plantas, causadas pela
Classe Oomycete (Reino Chromysta):

http://www.grupocultivar.com.br/arquivos/hf29_disseminador.pdf

Figura 46- Ciclo de vida de um Chromysta (Saprolegnia parasitica).

Fonte: HERRERA, ULLOA (1998).

330
4.3. REINO FUNGI
4.3.1. Filo Chytridiomycota
Apresenta miclio filamentoso cenoctico; parede celular com quitina, glucana e celulose;
esporo assexual formado dentro de zoosporngios (uniflagelado); esporo sexual osporo (Figura
47). Fungo comum em ambientes aquticos ou solos midos, sendo alguns parasitos de algas,
hiperparasitos (fungos parasitos de outros fungos), e plantas (endobiticos). Ex. Chytridium,
Olpidium, Allomyces.
4.3.2. Filo Zygomycota
Fungos saprfitos (decompositores), endomicorrizas, causadores de deteriorao de
alimentos, fitopatgenos e parasitos de animais e humanos.
Apresenta o miclio cenoctico; esporo sexual zigsporo (esporo diplide) e assexual
esporangisporo (esporos haplides contidos em um esporngio) (Figura 48). Exemplos:
Rhizopus, Mucor, Absidia, Pilobolus, Cunninghamella, Enthomophthora, endomicorrizas.

FIQUE DE OLHO!!!

Voc sabia que...
O miclio fngico do Oomycota geralmente dicaritico?
O esporo sexual (zigsporo) diploide e no haploide, como
so os demais fungos?


331
Figura 47- Ciclo de vida de um Chytridiomycota.

Fonte: http://microbewiki.kenyon.edu/images/thumb/1/13/Carl34ChytridCycle3.jpg/300px-
Carl34ChytridCycle3.jpg

Figura 48- Ciclo de vida de um Zygomycota.

Fonte: http://www.biology.lsu.edu/heydrjay/1002/Chapter24/lifecycles/Zygomycota.jpg

332
4.3.3 Filo Ascomycota
Os ascomycota caracterizam-se por apresentar hifas septadas e formar ascsporos na
reproduo sexuada. Os ascsporos so nus ou dentro de ascostroma (corpo de frutificao)
contendo ascos (Figura 49). Os ascostromas mais conhecidos so: estroma, peritcio, cleistotcio
e apotcio. Na reproduo assexuada formam condios, conforme se observa no ciclo de vida
(Figura 50). J as leveduras includas entre os Ascomycota formam blastsporos ou gemulao.
Ex. Eurotium, Chaetomium, Peziza, Saccharomyces, Tuber, Claviceps, Artrodrerma.

T NA WEB!!!

Leia mais sobre a importncia e classificao de fungos:
http://goo.gl/ZVf4J http://goo.gl/MYs9W
http://goo.gl/PyhSM http://goo.gl/WHbZz

Figura 49- Tipos de ascosmas ou ascostromas.

Fonte: 1. http://www.uoguelph.ca/~gbarron/MISCELLANEOUS/uncinu2.jpg;
2.http://www.biology.iastate.edu/Courses/211L/Sordaria/perithecium%20releases%20asci.jpg;
3.http://io.uwinnipeg.ca/~simmons/images/cupfundr.gif


333
Figura 50- Ciclo de vida de um Ascomycota.
Fonte: http://www.biology.lsu.edu/heydrjay/1002/Chapter24/lifecycles/Ascomycota.jpg
4.3.4 Filo Basidiomycota
Os Basidiomycota apresentam hifas septadas, formam basidisporos na reproduo
sexuada e condios na reproduo assexual, conforme se observa no ciclo de vida (Figura 51). Os
basidisporos so formados sobre basdias (Figura 52), com ou sem formao de basidioma.
Neste filo, esto includas algumas leveduras. So fungos saprbios, decompositores,
ectomicorrzico, causam deteriorao de alimentos, so fitopatgenos e parasitos de animais e
humanos. Ex. cogumelos (comestveis, medicinais e venenosos), ferrugens (parasitos obrigatrios
de plantas), Cryptococcus, Trichosporum.
4.3.5 Classe-forma Mitosprico (Deuteromycota)
Os fungos mitospricos no se reproduzem de forma sexual, sendo os esporos apenas
assexuais, quando formados. Atribui-se esta caracterstica por terem perdido geneticamente a
capacidade reprodutiva ou por se desconhecer esta fase.
So fungos filamentosos, saprbios, parasitos facultativos de plantas, causador de
deteriorao de alimentos (produtor de micotoximas) e parasitos de animais e humanos. O miclio
septado. Entre estes, um grupo pequeno no formam esporos, reproduzem-se apenas por
fragmentao da estrutura reprodutiva (Ex. Rhizoctonia). Muitos deles, j se sabem qual a fase
teleomrfica, porm permanece no grupo mitosprico devido fase assexual, a exemplo de
Penicillium e Aspergillus, que so teleomrficos de Ascomycota.
Exemplos de fungos mitospricos: Aspergillus, Penicillium, Alternaria, Candida, Sporothrix,
Fusarium, Microsporum, Trichophyton, Histoplasma.

334

Figura 51- Ciclo de vida de Basidiomycota.
Fonte: http://www.biology.lsu.edu/heydrjay/1002/Chapter24/lifecycles/Basidiomycota.jpg

Figura 52- Formao dos basidisporos sobre o basdio.

Fonte: http://www.biology.lsu.edu/heydrjay/1002/Chapter24/lifecycles/Basidiomycota.jpg


335
UNIDADE 12
FUNGOS CAUSADORES DE MICOSES
1. INTRODUO
Os fungos patognicos para humanos e animais restringem-se a, aproximadamente, 150
espcies. Na microbiota humana e animal, algumas leveduras so comensais, destacando-se os
gneros Candida e Malassezia, nas mucosas e couro cabeludo, respectivamente. Os fungos
filamentosos participam apenas da microbiota transitria, devido elevada quantidade de esporos
anemfilos (transportados pelo ar) que se depositam na pele e mucosas ou so inalados.
As micoses so causadas por fungos saprfitos facultativos. So adquiridas de vrias
maneiras, tanto pelo contato direto com reas e indivduos infectados, pela inalao, por leses
na pele e tecido, como tambm pela condio patognica da microbiota endgena.
As micoses so classificadas conforme o tecido infectado ou o grupo de fungos:
2. MICOSES SUPERFICIAIS
Grupo de fungos que se desenvolve na pele e pelos. Destaca-se a micose pitirase
versicolor ou pano branco (Figura 53), causada pelo fungo Malassezia, sendo a mais prevalente.
Levedura produtora de lpases. Outras micoses superficiais adquiridas de solos e gua
contaminados so: piedra negra e piedra branca nos pelos e a tnea nigra na palma das mos e
sola dos ps.

Figura 53- Pitirase versicolor (pano branco), em humanos, causada pela Malassezia furfur.

Fontes:1.http://www.globale-dermatologie.com/as-infeccoes-de-pele-por-fungos-e-leveduras-
micoseportugues.html; 2. http://www.telmeds.org/atlas/micologia/levaduras/malassezia-furfur/
3. MICOSES CUTNEAS OU DERMATOMICOSES
Grupo de fungos queratinoflicos, formado por trs gneros, que se desenvolvem na pele
(epidermofitases), pelos (tneas tonsurante, supurativa e favosa) e unhas (onicomicose
dermatoftica) (Figura 54). So fungos restritos devido produo da enzima queratinase,
produzidas por Microsporum, Trichophyton e Epidermophyton (Figura 55) So altamente
contagiosos entre indivduos e os dois primeiros gneros so zoonoses (transmissvel entre
animais e homem).

336
Os gneros so diferenciados pela formao de condios. Microsporum forma mais
macrocondeos, Trichophyton formam mais microcondos e Epidermophyton forma apenas
macrocondios e restringem-se apenas as micoses em humanos. As espcies so encontradas no
solo (geoflicos), em animais (zooflicos) e no homem (antropoflicos).

Figura 54- Dermatofitoses: 1. Epidermofitase; 2. Tnea; 3. Onicomicose

Fontes: 1. http://www.aafp.org/afp/2003/0101/p101.html
2. http://www.healthhype.com/tinea-capitis-scalp-ringworm-hair-fungal-infection-pictures.html
3. http://www.portalsaofrancisco.com.br/alfa/onicomicoses/

Figura 55- Dermatofitfitos (Gneros): 1. Microsporum; 2. Trichophyton; 3. Epidermophyton

Fontes: 1.http://www.vetsilvestre.com.br/artigos/index.php?&art=fungos%20de%20ferrets.htm;
2.http://microbiologiayepidemiologia.blogspot.com.br/2012/06/trichophyton-rubrum-
trichophyton.html;
3. http://botit.botany.wisc.edu/toms_fungi/feb98.html
4. MICOSES SUBCUTNEAS
As micoses subcutneas so causadas por diversas espcies de fungos existentes em
solos e vegetais contaminados, na condio de saprbios. O fungo penetra o hospedeiro atravs
de uma leso, arranho, perfurao etc.
As micoses mais comuns so: esporotricose (Figura 56), cromomicose (Figura 57),
mucormicose, zigomicose, doena de Jorge Lobo, entomophtoromicose, micetomas. Observe, na
Figura 56 (a) as leses nodulares linfticas. No exame direto (b), a partir do material coletado,
raramente observa-se estrutura fngica (corpo asteroide), mas na cultura, so facilmente
observados os condios em forma de rosetas (c).
Dimorfismo: alguns fungos filamentosos ao infectarem humanos modificam a morfologia e
tornam-se leveduras, em funo da diferena de temperatura entre o ambiente (forma infectante)

337
e o hospedeiro (forma parasitria) sendo uma mudana reversvel. Ocorre dimorfismo apenas em
algumas espcies subcutneas e sistmicas.

T NA WEB!!!

Leia mais sobre a importncia e classificao de fungos:

http://www.portalbrasil.net/downloads/micoses.pdf

Figura 56- Micose subsutnea: a. Esporotricose; b. Direto; c. Cultura (Sporothrix. schenckii);

Fontes: a.http://diggingri.wordpress.com/2010/02/08/weird-garden-diseases-part-i/
b.http://www.saber.ula.ve/tropical/contenido/capitulo6/capitulo42/figuras/42-0002-es.html
c. http://www.dac.uem.br/micologia/micoses_subcutaneas.php

Figura 57- Micose subsutnea: a. Cromoblastomicose; b. Corpos fumagides; c. Cultura (Fonsecaea
pedrosoi).

Fontes: a. http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S0375-07602005000300013&script=sci_arttext
b. http://anatpat.unicamp.br/lampele5.html c. http://www.mold.ph/fonsecaea.htm
5. MICOSES SISTMICAS
As micoses sistmicas so adquiridas atravs da inalao de estruturas fngicas em reas
contaminadas, a partir de reservatrios ambientais. As micoses sistmicas mais conhecidas so
causadas por fungos dimrficos. So elas: paracoccidioidomicose (Figura 58), coccidioidomicose,
histoplasmose, blastomicose e criptococose. So micoses fatais, diferentemente das anteriores,
se no devidamente tratadas.

338
O fungo aps ser inalado, desenvolve no pulmo (infeco respiratria pulmonar) e depois
se dissemina para outros rgos e mucosas. Ocorre destruio tecidual devido ao enzimtica.

Figura 58- Paracoccidiodomicose na cavidade oral (1); Direto: levedura (2); Cultura P. brasiliensis
(3).

Fontes: 1. http://www.ricardosgomez.com/paracoccidioidomicose
2. http://anatpat.unicamp.br/biinflparacoco1.html
3. http://www.dac.uem.br/micologia/micoses_sistemicas.php
6. MICOSES SISTMICAS OPORTUNISTAS
Micoses causadas por fungos sistmicos, porm a doena s evolui em decorrncia da
diminuio das defesas imunolgicas do hospedeiro, em decorrncia do uso de antibiticos e de
alguma outra patologia. Ex.: candidase (Figura 59), criptococose, aspergilose, zigomicose,
pneumocistose etc.

Figura 59- Tipos de candidases: 1. Vulvovaginite; 2. Balanopostite; 3. Assaduras; 4. Boqueira; 5.
Unhas candidosa; 6. Cultura (pseudo-hifas, blastocondios e clamidsporos).

Fontes: http://www.ginorte.com.br/textos/candidiase.htm
2 e 3. http://dermatlas.med.jhmi.edu/derm/indexDisplay.cfm?ImageID=-763630613
4. http://www.odontoblogia.com.br/estomatologia-2/queilite-angular-boqueira
5. http://saude.culturamix.com/higiene/infeccao-de-unha
6. http://www.microbeworld.org/index.php?option=com_jlibrary&view=article&id=1097

339
UNIDADE 13
FUNGOS FITOPATOGNICOS
As doenas de plantas so causadas por fungos, bactrias, vrus e outros patgenos.
Dentre eles os fungos so mais frequentes. Os fungos fitopatognicos geralmente so habitantes
comuns no solo ou podem ser transmitidos por vetores, vento ou chuva. So parasitos facultativos
e outros so obrigatrios (ferrugens, mldio).
A patogenicidade dos fungos sobre as plantas similar verificada nas micoses em
humanos, ou seja, pela ao de componentes estruturais, produo de enzimas e toxinas. As
plantas doentes mostram sintomas, como amarelecimento, manchas, necrose, podrido, murcha,
nanismo, superbrotamento, crestamento, mosaico, queda de inflorescncia, diminuio na
produtividade, morte da planta etc. (Figura 60).

Figura 60- Doenas de plantas: 1. Ferrugem em gramneas; 2. Carvo no milho; 3. Podrido no
morango; 4. Mancha castanha do amendoim; 5. Murcha em tomateiro.
1) 2) 3)
4) 5)
Fonte: 1.http://www.jardins.com.br/cuidar/images/ferrugem.jpg;
2.http://4.bp.blogspot.com/_SO_JYKtl9A8/Rttqxb_Z6ZI/AAAAAAAABJ8/uX3aJcT1f_4/s320/Ustilago_
maydis_de_2.jpg; 3.http://www.portalsaofrancisco.com.br/imagem.php
4.http://www.ufv.br/dfp/bac/frsol.jpg
5.http://www.ufrgs.br/agrofitossan/galeria/tipos_detalhes.asp?id_registro=486&id_nome=40

Qualquer parte da planta pode ser afetada, desde as razes aos frutos. As doenas
fngicas podem ser localizadas em rgos ou sistmica. Sintomas primrios: resultantes da ao
direta do patgeno sobre os tecidos do rgo afetado (Ex.: manchas foliares e podrides de
frutos). Sintomas secundrios ou reflexos: exibidos pela planta em rgos distantes do local de
ao do patgeno (Ex.: murchas vasculares e subdesenvolvimento da planta).
Os patgenos de plantas tanto podem causar danos durante o cultivo, como tambm ps-
colheita. As perdas variam, dependendo da doena e da severidade desta. Algumas causam
perdas de 100%.

340
O manejo agrcola, o sistema de cultivo, as condies ambientais e outros fatores podem
favorecer o surgimento de patgenos. Microrganismos comuns podem se tornar patgenos na
dependncia desses fatores. Algumas doenas podem ocorrer em vrias culturas, outras podem
ocorrer com maior especificidade. Os parasitos obrigatrios desenvolvem uma relao
parasito/hospedeiro de maior especificidade, algumas em nvel de raa.
Principais doenas causadas por fungos parasitos facultativos:
Podrido da raiz: causa damping off, (murcha);
Doenas vasculares: desenvolve-se no xilema, causa murcha por parasitos
facultativos;
Manchas foliares: interfere na fotossntese, destruio de tecidos, necrose, queima,
crestamento etc.

Principais doenas causadas por fungos parasitos obrigatrios:
Mildios: famlia Peronosporaceae, ocorre em folhas, flores e frutos, afetam a
fotossntese, crescimento, elevado grau de parasitismo (especificidade
patgeno/hospedeiro);
Odios: parasitos obrigatrios. Formao de massa esbranquiada (forma de p) que
recobre a rea afetada;
Ferrugens: Uredinales, obrigatrios. Pstulas ferrugneas, amareladas ou marrons.
Macrocclicas ou hetericas (cinco fases em mais de um hospedeiro), microcclica ou
auticas (nico hospedeiro);
Carves: camada em forma de p de colorao negra (esporos).
As perdas econmicas podem ser severas, dependendo de uma srie de fatores, tanto
relacionados ao patgeno, hospedeiro e o ambiente como da interao desses trs fatores.

341
UNIDADE 14
MICRORGANISMOS NO CICLO DO NITROGNIO
1. INTRODUO
O nitrognio (N) um dos macronutrientes exigido pelas plantas em maior quantidade. O
maior reservatrio de N a litosfera (97,82%), enquanto a biosfera contm 0,02% e a atmosfera
1,96%. Maior frao de N na terra est na forma orgnica, compondo os vegetais, animais e
resduos orgnicos.
As plantas necessitam do N na forma mineral (amnio e nitrato), sendo incapazes de
assimilar o nitrognio elementar da atmosfera (N
2
) e o N-orgnico. Como os microrganismos so
decompositores, transformam o N-orgnico em formas minerais (mineralizao) ou so capazes
de fixar biologicamente o N-atm em formas assimilveis. Existem outras fontes de N para as
plantas como o N dos adubos qumicos e uma pequena frao do N em decorrncia de raios na
atmosfera (Figura 61).
Os microrganismos so quem disponibilizam, atravs de sua atividade metablica, todo o
N necessrio s plantas numa floresta, numa pradaria, no ecossistema ou at mesmo as plantas
cultivadas, dependendo do manejo. Estes microrganismos so ubquos e participam da microbiota
do solo.
2. TRANSFORMAO DO N-ORGNICO EM N MINERAL
O N-orgnico existe em vrios estgios at chegar fase mineral, que pode ser
aproveitada pelas plantas. Portanto, o N-orgnico precisa ser transformado em mineral pelos
microrganismos decompositores e pelos responsveis pela mineralizao. Essa transformao
constante em um ecossistema. Sendo assim, sempre haver N mineral disponvel as plantas, em
quantidades suficientes e no em excessos, que possa trazer algum problema ao ambiente.
2.1 AMONIFICAO
Primeira etapa da mineralizao, onde o N orgnico transformado em amnio (NH
4
).
uma etapa lenta e vrios microrganismos quimiorganotrficos podem participar dessa etapa, em
condies aerbias e anaerbias.
Aps formado no solo o amnio pode ser absorvido pelas plantas, pode ser adsorvido
pelos minerais de argila, pode ser fixado pelas argilas tipo 2:1 (no disponvel as plantas), pode
ser assimilado pelos prprios microrganismos (imobilizao) e pode ser oxidado a nitrito por
outras bactrias.


342
Figura 61- Ciclo do nitrognio

Fonte: http://www.sobiologia.com.br/figuras/Ar/ciclodonitrogenio.gif
2.2 NITRIFICAO
Processo estritamente biolgico, que transforma o amnio em nitrato (NO
3
) por
microrganismos quimiolitotrficos e quimiorganotrficos. Ocorre em duas etapas:

a) Nitritao: transformao do amnio a nitrito (NO
2
) por bactrias do gnero Nitrosomonas.

NH
4
+ 1,5O
2
-
+2H
+
---------- H
2
O + 66 Kcal

b) Nitratao: transformao do nitrito a nitrato (NO
3
) por bactrias do gnero Nitrobacter.

NO
2
-
+ 1/2O
2
-
---------- NO
3
-
+ 18 Kcal

O nitrito txico aos organismos (carcinognico), no entanto a transformao dele em
nitrato ocorre rapidamente, desde que as condies de aerao sejam satisfatrias. O nitrato
formado pode ser absorvido pelas plantas, por ser pouco adsorvido aos minerais de argila e
hmus pode ser lixiviado para crregos, imobilizado por microrganismos (reabsorvidos) e perdido
por desnitrificao.
2.3 IMOBILIZAO
Processo de reduo no qual o N mineral assimilado pelos microrganismos e convertido
em produto celular. A imobilizao ocorre nas formas de amnio e nitrato. Esse nitrognio
imobilizado torna-se temporariamente indisponvel, at que a massa de microrganismo morra e se
degrade. A imobilizao aumenta conforme a relao C/N do material orgnico: relao C/N acima

343
de 30/1 ocorre imobilizao, sendo estes de transformao mais lenta. A temperatura tambm
outro fator que afeta a imobilizao, devido influncia no metabolismo microbiano.
2.4 DESNITRIFICAO
A desnitrificao um processo anaerbio, no qual o microrganismo passa a utilizar o
nitrato ou nitrito como aceptores de eltrons ao invs do oxignio. Isso faz com que o nitrato ou
nitrito seja reduzido a formas gasosas de N (N
2
e N
2
O), sendo perdido para a atmosfera.

2NO
3
-
--- 2NO
2
-
--- 2NO---N
2
O---N
2

As principais perdas de N so: desnitrificao do nitrato e nitrito e volatilizao da amnia.
O principal fator de perda por desnitrificao a deficincia de aerao no solo, na qual bactrias
quimiorganotrficas atuam (Pseudomonas spp., Achromobacter sp., Agrobacterium radiobacter,
Agrobacterium tumefaciens, Alcaligenes faecalis, Alcaligenes eutrofus, Bacillus azotoformans,
Bacillus licheniformis, Spirillum psychrophillum).
3. TRANSFORMAO BIOLGICA DO NITROGNIO
3.1 IMPORTNCIA AMBIENTAL E ECONMICA
Para um grupo de plantas, especialmente as leguminosas, o nitrognio suficiente para a
nutrio da planta pode suprido atravs da simbiose desta com bactrias fixadoras de N. Estas
bactrias so comuns no solo e a simbiose mutualstica estabelece-se naturalmente. Outras
plantas tambm so capazes de estabelecer relaes benficas com outras bactrias fixadoras de
N, a exemplo das gramneas ou ainda a existncia de bactrias de vida livre que tambm fixam N.
Entre as bactrias fixadoras de N destaca-se Rhizobium e Bradyrhizobium em simbiose
com leguminosas, uma bactria Gram negativa, pleomrfica, comum nos solos. As leguminosas
so a plantas, em segundo lugar de maior interesse econmico, na explorao agrcola. Cada
espcie de bactria especifica para cada planta.
Todas estas formas de fixao de N so importantes para o ecossistema, porque aps o N
fixado passa a constituir a matria e quando esta for decomposta pelos microrganismos, haver
liberao de N mineral para as plantas no fixadoras de N. Por isso que numa floresta todas as
plantas se mantm verdes e saudveis, mesmo as plantas que no formam simbiose com
bactrias fixadoras de N.
Para as plantas de interesse econmico o nitrognio necessrio s plantas pode ser
fornecido pelo sistema biolgico, inoculando-se as plantas com bactrias fixadoras de N
(linhagens selecionadas), utilizando-se a rotao de cultura (fixadoras e no fixadoras), cultivo
mnimo ou plantio direto para manter a cobertura orgnica sobre o solo, adubao orgnica etc. O
N fornecido na forma de adubos minerais apresenta aspectos a se pensar:
desnecessrio nos policultivos, pois pode ser fornecido pela rotao de cultura ou pela
fixao biolgica, no mnimo diminuindo sua aplicao.

Pode ocasionar intoxicao do ambiente (crregos, audes) devido as transformaes do
N em nitrato que facilmente lixiviado pela gua.

344
3.2 TIPOS DE SIMBIOSES COM BACTRIAS FIXADORAS DE N
Simbiose clssica com formao de ndulos: Rhizobium, Bradrhizobium x leguminosas
Simbiose estreita sem formao de ndulos entre bactrias em gramneas por
Azospirillum, Acetobacter, Herbaspirillum etc.
Simbiose entre bactrias x parte area da planta (caule: Sesbania e Neptunia; folha:
Ardisia, Pavetta)
Simbiose entre Frankia (actinomiceto, bactrias filamentosas) x plantas no
leguminosas (Alnus, Myrica)
Simbiose entre cianobactrias (Anabaena) x Azolla
Simbiose em lquenes (cianobactrias x fungos)
Fixao por microrganismos de vida livre ou no simbiticos.
3.3 PROCESSO DE ESTABELECIMENTO DA SIMBIOSE CLSSICA
Multiplicao das bactrias na rizosfera: As bactrias so encontradas na rizosfera
(camada de solo aderida raiz da planta). Os exsudatos radiculares liberados pela
planta estimulam a multiplicao destas bactrias e promove a quimiotaxia (Figura 62).
Infeco do pelo radicular: ocorre aderncia das bactrias aos pelos radiculares. As
lectinas esto envolvidas nesse processo. O pelo radicular torna-se curvo aps o
processo de infeco, sendo que apenas a bactria homloga consegue infectar a
planta susceptvel.
Formao do cordo infeccioso: A bactria penetra o pelo radicular por invaginao e
ao enzimtica, alojando-se em clulas do crtex.
Transformao do bacilo em bacteride (pleomorfismo): As bactrias se multiplicam e
mudam sua morfologia para bacterides, com formas diversas. As clulas
meristemticas se multiplicam de forma acelerada, induzidas pelos bacterides
envolvidos por um envelope membranoso, dando origem ao ndulo. Os ndulos so
facilmente visveis e destacveis da raiz e bastante variveis quanto forma, tamanho
e distribuio.
Transformao do N
2
: Os bacterides produzem um pigmento avermelhado,
denominado de leg-hemoglobina, responsvel pelo transporte de oxignio associado
para os bacterides. O oxignio livre afeta o funcionamento da nitrogenase, que o
complexo enzimtico responsvel pela fixao do N. Para os bacterides estarem
ativos os ndulos devem estar avermelhados no interior, pela presena da leg-
hemoglobina.
Em plantas arbreas os ndulos podem ser perenes, enquanto nas plantas anuais os
ndulos duram menos tempo. A simbiose induzida, utilizando-se bactrias selecionadas na
inoculao resulta em maior eficincia na fixao biolgica de N.


345
PERGUNTAS???

1. Cite os processos biolgicos do ciclo do N, com os respectivos
microrganismos envolvidos?
2. Qual o papel na leg-hemoglobina?
3. Quais so as formas de perdas de N de forma biolgica?
4. Quais os problemas ambientais decorrentes do uso excessivo
dos fertilizantes nitrogenados?

Figura 62- Etapas na formao do ndulo em plantas leguminosas colonizadas por bactrias
fixadoras de nitrognio 1. Rozosfera, 2. Quimiotaxia, formao do cordo infeccioso e
encurvamento do pelo, 3. Transformao em bacterides, 4. Formao dos ndulos

3.4 MECANISMO DE AO DA ENZIMA NITROGENASE
A reduo do N
2
atm pelo complexo enzimtico nitrogenase requer o consumo de energia
na forma de ATP pelo bacteride, resultando na seguinte reao:

N
2
+6H
+
+6e
-
--------- 2NH
3


346
A nitrogenase constituda por dois componentes proticos. O componente I
(MoFe protena ou dinitrogenase) depende da presena de molibdnio e ferro (Esquema 3). O
componente I liga-se e reduz o N
2
. O componente II (Fe protena ou nitrogenase redutase) uma
protena de menor peso, transfere os eltrons para a MoFe protena.
O N
2
reduzido a amnia a qual segue a rota metablica de cada microrganismos, sendo
assimilada sob a forma de glutamina pelas enzimas glutamina sintetase, glutamato sintetase,
glutamato desidrogenase. A capacidade de fixar nitrognio na bactria depende da existncia do
plasmdio contendo o gene nif. Os microrganismos de vida livre fixam o N necessrio ao consumo
prprio, enquanto aqueles em simbioses transferem o N
2
fixado para o hospedeiro.

Esquema 3: Mecanismo de ao da nitrogenase na reduo do N
2
pelas bactrias fixadoras de
nitrognio (os dois componentes enzimticos).

3.5 FATORES QUE INTERFEREM NA FBN
Os fatores que interferem na simbiose e na fixao biolgica de N so: temperatura,
umidade, aerao, pH, nutrientes (P, Ca, N, Fe, Mn, Mo) etc. Em solos ricos em N ou deficientes
nos demais nutrientes Ca, N, Fe, Mn, Mo a nodulao menor e ineficiente. As condies de
temperatura mesfila, aerbia, pH prximo neutralidade e umidade adequada planta tambm
so favorveis simbiose.

347
UNIDADE 15. CARACTERSTICAS GERAIS DE VRUS
1. ASPECTOS GERAIS
Os vrus so seres visveis apenas ao microscpio eletrnico, constitudos apenas por
duas classes de substncias qumicas: cido nuclico (DNA ou RNA) e protena. So seres
acelulares que precisam de clulas para se replicar, sendo todos os vrus parasitos intracelulares
obrigatrios.
O vrus infecta uma clula e direciona o metabolismo celular em seu benefcio, visando a
replicao. A infeco viral geralmente causa profundas alteraes no metabolismo celular,
podendo levar morte das clulas afetadas. Os vrus causam doenas em plantas e animais,
incluindo o homem. Fora da clula hospedeira, os vrus no manifestam nenhuma atividade vital e
se houver alguma clula compatvel sua disposio, um nico vrus capaz de originar, em
cerca de 20 minutos ou mais, centenas de novos vrus.
At o momento, poucas drogas se mostraram eficazes em destruir os vrus sem causar
efeitos colaterais. A melhor maneira de combater as doenas virais atravs de vacinas. Devido a
sua caracterstica de disseminao e replicativa, as doenas virais tomam propores alarmantes,
atingindo populaes considerveis. Algumas doenas virais so fatais, sendo as sndromes
infecciosas mais temidas pelos programas de vigilncia sanitria, a exemplo do vrus HIV, hepatite
B, Ebola etc.
2.MORFOLOGIA VIRAL
Os vrus apresentam dimenses variveis, medidas em nanmetro, visveis apenas na
microscopia eletrnica. Os menores vrus medem 20nm a exemplo do Picornavrus e os maiores
300nm (Poxvrus).
Devido constituio simtrica dos vrus, as formas apresentadas so helicoidais (basto)
a icosadricas (esferas). Exemplo de vrus helicoidal: vrus do mosaico do tabaco. Algumas
espcies complexas de viroses apresentam combinaes de ambas as formas, sendo
denominados de bacterifagos por infectarem bactrias (Figura 63).


348
Figura 63- Diferenas entre os vrus quanto morfologia.

Fonte: http://www.colegiosaofrancisco.com.br/alfa/virus/imagens/virus-1.jpg
3.COMPONENTES VIRAIS
O vrus constitudo por um genoma DNA ou RNA, revestida por um capsdeo de natureza
protica, denominando-se o conjunto de nucleocapsdeo. Alguns vrus podem apresentar um
envelope composto por lipdeo, protena e glicoprotenas, formando um conjunto denominado de
vrion (Figuras 64 e 65). Sendo assim, existem DNA vrus e RNA vrus (Quadro 3). Os vrus que
infectam plantas so quase todos de RNA.
O capsdeo O envelope protege o vrus contra o sistema imunolgio e auxilia na infeco,
pois os componentes do envelope so protenas de fixao s clulas do hospedeiro.
Os vrus so agrupados conforme a fita de material gentico em:
DNA vrus de fita simples e de fita dupla
RNA vrus de fita simples e de fita dupla (retrovrus)


349
Figura 64- Componentes da partcula viral

1. Acido nucleico: genoma viral.
2. Capsdeo: envoltrio proteico que envolve o material gentico viral.
3. Nucleocapsdeo: estrutura formada pelo capsdeo, associado ao cido nuclico que ele
engloba.
4. Capsmeros: monmeros proteicos, que agregados compe o capsdeo.
5. Envelope: membrana lipdica que envolve a partcula viral externamente.
6. Peplmeros: constitudos de glicoprotenas e lipdeos, que so encontradas ancoradas ao
envelope.
Fonte: 1. http://leandromatheusbioifes.wordpress.com/2011/02/15/cavalo-de-troia/ (adaptado)

Figura 65- Componentes da partcula viral (vrus HIV)

Fontes: 1. http://leandromatheusbioifes.wordpress.com/2011/02/15/cavalo-de-troia/

350

Quadro 3. Exemplos de famlias de DNA e RNA vrus.
DNA Doena
Poxviridae Vrus da varola
Papovaviridae Papiloma: doena sexualmente transmissvel
Hepadnoviridae Vrus da hepatite B
Adenoviridae Doenas respiratrias
Herpesviridae Vrus causador de herpes
RNA
Rhabdoviridae Vrus da raiva
Retroviridae Causador da AIDS, leucemia
Flaviviridae Causador da febre amarela, dengue
Paramixoviridae Vrus do sarampo, caxumba
4.REPLICAO VIRAL
Os vrus identificam clulas alvo e replicam-se nestas, com mecanismos diferentes, mas
de acordo com o tipo de virose, certos princpios so similares. Como a partcula viral incapaz
de realizar metabolismo, utiliza-se da clula do hospedeiro para sintetizar protenas.
4.1.RECONHECIMENTO E FIXAO A CLULA DO HOSPEDEIRO
Os vrus podem ser transmitidos de vrias formas, destacando-se pelo processo de
inalao (causadores de doenas respiratrias: Adenovrus, Rhinovrus, Coronavrus), ingesto
(causadores de doenas gastrintestinais: Picornavrus, Reovrus) e contato de mucosa ou de
soluo de continuidade (vrus sexualmente transmissveis: Herpesvrus, Retrovrus,
Hepadnovrus). Outros vrus so transmitidos atravs de vetores, como mosquitos, pulgas,
carrapatos, percevejos, moscas, pulges etc (denominadas de arboviroses por ser transmitida por
animais: Togavrus, Flavivrus, Rhabdovrus).
Ao reconhecer a clula alvo, as estruturas especficas do capsmero e as glicoprotenas
ligam-se aos receptores na clula, que so protenas ou carboidratos. A aderncia viral depende
da interao entre receptores especficos da superfcie da clula hospedeira e protenas de
aderncia (espculas) existentes no cpsideo ou envelope.
4.2.PENETRAO
Os vrus sem revestimento penetram na clula do hospedeiro por endocitose, enquanto os
com envoltrio tambm ocorrem por endocitose ou injeta apenas o material gentico no
citoplasma da clula.
4.3.DESNUDAMENTO
No caso da penetrao do vrus completo, ocorre o desenvelopamento, liberando o
material gentico do capsdeo e do envelope, se presente. No desnudamento ocorre remoo do
capsdeo para expor o genoma viral. A maioria dos DNA vrus liberado para o ncleo (exceto o
Poxvrus) e os de RNA permanece no citoplasma.
O desnudamento ocorre de vrias maneiras:

351
O capsdeo se funde com a membrana celular, liberando o genoma viral;
Desintegrao do capsdeo (Picornavrus);
O nucleocapsdeo do herpesvrus rompe a membrana nuclear e libera o genoma
diretamente no local de replicao;
O Reovrus e Poxvrus so apenas parcialmente desnudados antes da replicao.
4.4.SNTESE MACROMOLECULAR
A partir deste momento, o genoma viral domina as funes normais da clula. A
multiplicao viral ocorre em duas etapas: transcrio e replicao.
O ciclo infeccioso depende da replicao viral, que ocorre da seguinte maneira, conforme a
estrutura do genoma e o local de replicao:
DNA vrus de fita dupla e de fita simples: DNA>RNA>>Protena
RNA vrus de fita dupla e de fita simples: RNA>RNA>>Protena ou
RNA>DNA>>RNA>Protena (Retrovrus).
O DNA vrus requer sntese protica antes da replicao e o RNAm produzido em
seqncia. A replicao do DNA vrus simples (Ex. Parvovrus, Papovavrus) usa a DNA
polimerase DNA dependentes do hospedeiro. Vrus maiores (Ex. Adenovrus, Herpesvrus)
codificam suas prprias polimerases. A replicao do DNA viral semelhante a do DNA celular,
porm com maior possibilidade de mutao.
RNA vrus: ocorre a mudana para DNA e depois para RNA para finalmente ocorrer
formao da protena (transcriptase reversa). A sntese protica viral ocorre nos ribossomos da
clula infectada.
4.5. MONTAGEM
Aps ser sintetizado todos os componentes virais, ocorre a montagem do vrion. Os
capsdeos so preenchidos com o genoma viral. O envoltrio constitudo pela membrana
modificada com glicoprotenas virais.
4.6. LIBERAO
Os vrus envelopados so liberados das clulas por exocitose (brotamento) da membrana
plasmtica, sem, no entanto, necessariamente ocorrer lise celular. Na liberao dos capsdeos
ocorre lise da clula.
4.7.REINCIO DO CICLO DE REPLICAO
O vrus liberado da clula est apto a causar novas infeces. Alguns vrus (Herpesvrus,
Retrovrus e Paramixovrus) causam a transmisso vertical do genoma para as cluas-filhas.
5. AS DOENAS VIRAIS EM HUMANOS E ANIMAIS
Quando o vrus infecta uma clula pode ocorrer imediatamente a replicao viral ou a
clula infectada se mantm latente, para multiplicao posterior. Aps a replicao na clula do
hospedeiro, pode ou no ocorrer lise celular. As clulas infectadas, sem lise, podem ser alteradas
suas caractersticas, especialmente de crescimento.

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As doenas virais podem ser aguda, crnica e latente. Na infeco no aparente no
ocorre leso no tecido ou se ocorrer, rapidamente este ser reparado. As infeces virais
ocasionam uma srie de efeitos na clula: inibem a sntese protica celular, inibe a sntese de
DNA celular, causa rompimento da membrana e parede celular, causa alteraes fisiolgicas e
morfolgicas na clula. Por outro lado, o organismo apresenta defesas contra as infeces virais,
tanto naturais e no especficas quanto imunes. A resposta imune, por ser especfica, a mais
eficiente em interferir no avano de uma infeco viral.

FIQUE LIGADO!!!

Entre as doenas virais, destacam-se:
Crebro: encefalite, raiva, meningite;
Boca: estomatite, herpes;
Pele e mucosas: Varicela-zoster, sarampo, rubola;
Fgado: Hepatites, febre amarela;
Corao: miocardite, pericardite;
Olhos: conjuntivite;
Pulmo: gripe, faringite;
Intestino: diarria, vmitos;
Urogenital: verrugas, leses, herpes.
6. AS DOENAS VIRAIS EM PLANTAS
O primeiro vrus conhecido no mundo foi o causador do mosaico do tabaco. As plantas
infectadas por vrus apresentam diversos sintomas, desde os sintomas localizados aos sistmicos.
Entre os vrus que infectam plantas predominam o tipo RNA. As viroses so mais comuns entre as
plantas cultivadas, levando a perda econmica significativa.
Aps a planta ser infectada, os vrus so disseminados clula a clula (via plasmodesmas)
ou vascular (floema: descendente; xilema: ascendente). J a transmisso do vrus para as plantas
adjacentes pode ocorrer por:
Soluo de continuidade, entre as plantas que crescem muito prximas atravs do atrito
entre a parte area;
Atravs da propagao vegetativa, utilizando-se partes de uma planta infectada ou unindo-
se tecidos infectados com sadios (enxertia);
Atravs de sementes procedentes de plantas doentes, onde o vrus permanece no
tegumento ou no embrio;
Atravs da polinizao;
Atravs de caros, nematides e fungos como vetores;
Atravs de insetos, como os pulges, cigarrinhas, moscas, cochonilhas, percevejos,
besouros, trips, gafanhotos.

A transmisso de vrus por vetores a mais comum. Ocorre de trs formas:
Transmisso no persistente: no h perodo de incubao no vetor; perde aps curto
perodo de infeco, pois o vrus localiza-se na epiderme, parnquima e superfcie (Ex.
Mosaico da beterraba);

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Semi-persistente: o vrus multiplica-se no vetor, mas no h circulao, eliminando a carga
viral com a ecdise (Ex. vrus da tristeza do citros);
Persistente: h maior especificidade vrus-vetor, onde este se propaga e circula no vetor,
no se perde com a ecdise. O vrus circula na hemolinfa e permanece na prognie. (Ex.
Vrus da nervura amarela).

Os sintomas sistmicos so clorose, mosaico, nanismo, superbrotamento, palidez da
nervura, espessamento da folha, murcha, maturao precoce, esterilidade, menor rendimento,
m qualidade do produto. J os sintomas localizados so locais clorose, necrose (Figura 66).

Figura 66- Plantas com sintomas tpicos de viroses: 1. Tristeza do citros, 2. Gomose, 3. Nervura da
videira, 4. Mosaico do feijo, 5. Vira-cabea tomateiro, 6. Viroses em orqudeas.

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