sobre a Estrutura, Funes e Evoluo das Clulas Para sua multiplicao, os vrus, que no so constitudos por clulas, usam a maquinaria sinttica das clulas que parasitam para produzir macromolculas virticas. S existem dois tipos celulares bsicos: as clulas procariontes e as eucariontes. As clulas procariontes no possuem ncleo, com o genoma sendo separado do citoplasma por um envoltrio e, geralmente, no apresentam membranas dividindo o citoplasma em compartimentos. As bactrias do grupo das rickttsias e clamdias so clulas procariontes incompletas, que s se multiplicam dentro das clulas eucariontes. As clulas eucariontes so maiores, estruturalmente mais complexas, contm muito mais DNA, seus cromossomos so complexos, contm histonas e ficam separados do citoplasma pelo envoltrio nuclear. O citoplasma das clulas eucariontes dividido por membranas em compartimentos contendo molculas distintas e que executam funes especializadas em cada compartimento, aumentando muito a eficincia dessas clulas. As clulas eucariontes das plantas tm geralmente um grande vacolo citoplasmtico, apresentam plastos, tm parede de celulose, armazenam amido como reserva energtica e se comunicam por meio de plasmodesmos. Cloroplastos e mitocndrias provavelmente se originaram de bactrias simbiontes que se estabeleceram de modo definitivo no citoplasma. Os seres vivos podem ser agrupados em cinco grandes grupos ou reinos: moneras, protistas, plantas, fungos e animais. Estudos filogenticos moleculares, baseados principalmente no RNA ribossomal, separam os seres vivos em apenas trs grandes grupos ou domnios: Bactria, rquea e Eucria. Os dois primeiros domnios so constitudos por clulas procariontes; s o domnio Eucria apresenta clulas eucariontes. 2 Biologia Celular e Molecular Neste captulo ser apresentada uma viso panormica, resu- mida, da estrutura, funes e evoluo das clulas, que servir de base para o estudo da matria tratada com mais profundidade nos captulos seguintes. A clula a unidade que constitui os seres vivos, podendo ocorrer isoladamente, nos seres unicelulares, ou formar arranjos ordenados, os tecidos, que constituem o corpo dos seres plurice- lulares. Em geral, os tecidos apresentam quantidades variveis de material extracelular, produzido por suas clulas. Os vrus so parasitas intracelulares obrigatrios Devido a suas relaes com as clulas e a seus efeitos sobre es- tas, podendo causar doenas de gravidade varivel, os vrus sero estudados neste livro, embora de modo resumido (ver Cap. 16). Um vrus no capaz de se multiplicar, exceto quando parasita uma clula de cujas enzimas se utiliza para a sntese das macro- molculas que vo formar novos vrus. Eles no possuem todas as enzimas e nem as estruturas necessrias para a fabricao de outros vrus. So, portanto, parasitas intracelulares obrigatrios. Na verdade, os vrus so parasitas moleculares;pois induzem a maquinaria sinttica das clulas a 'sintetizar as molculas que vo formar novos vrus em vez de produzir molculas para a prpria clula. Os vrus que atacam as clulas animais no atacam as vegetais, e vice-versa. Distinguem-se, pois; os vrus animais e os vrus vegetais. H, porm, alguns vrus vegetais que, invadindo-as, multiplicam-se nas clulas de insetos disseminadores desses vrus de uma planta para outra. Os vrus das bactrias so chamados bacterifagos, ou simplesmente fagos. Cada vrus formado basicamente por duas partes: (L") uma poro central que leva a informao gentica, isto , um genoma constitudo de cido ribonuclico ou desoxirribonuclico, no qual esto contidas, em cdigo, todas as informaes necess- rias para a produo de outros vrus iguais; e (2.") uma poro perifrica, constituda de protenas, que protege o genoma, pos- sibilita ao vrus identificar as clulas que ele pode parasitar e, em certos vrus, facilita a penetrao nas clulas. Alguns vrus contm cido ribonuclico (RNA), enquanto outros contm cido desoxirribonuclico (DNA). Os dois tipos de cidos nuclicos jamais esto presentes no mesmo tipo de vrus. Certos vrus maiores e mais complexos apresentam um in- vlucro lipoprotico. A parte lipdica desse invlucro origina-se das membranas celulares. Mas as protenas (glicoprotenas) so de natureza viraI, isto , so codificadas pelo cido nuclico do vrus. Rickttsias e clamdias so clulas incompletas e, por essa razo, s proliferam no interior de uma clula completa As bactrias dos grupos das rickttsias e das clarndias so muito pequenas e constitudas por clulas procariontes incom- pletas, que no possuem a capacidade de autoduplicao inde- pendente da colaborao de outras clulas. Como os vrus, as rickttsias e clarndias so parasitas intracelulares obrigatrios, " . ~ { . ~ ~ 0 ! < ~ I pois s proliferam no interior das clulas completas. Todavia, as clulas incompletas diferem dos vrus em trs aspectos funda- mentais. Em primeiro lugar, os vrus contm apenas um tipo de cido nuclico, que pode ser o cido ribonuclico (RNA) ou o desoxirribonuclico (DNA), enquanto as clulas incompletas contm ao mesmo tempo DNA e RNA. Em segundo lugar, os vrus carregam, codificada no seu cido nuclico, a informao gentica para a formao de novos vrus, mas no possuem or- ganelas e, por isso, se utilizam da maquinaria das clulas para se multiplicar. As clulas incompletas, ao contrrio, tm parte da mquina de sntese para reproduzir-se, mas necessitam da suplementao fornecida pelas clulas parasitadas. Em terceiro lugar, as clulas incompletas tm uma membrana semiperme- vel, atravs da qual ocorrem trocas com o meio, o que no acontece com os vrus. O invlucro que alguns vrus possuem e que, em parte, constitudo de molculas celulares, perde-se quando esses vrus penetram nas clulas. Provavelmente, as clulas incompletas so clulas "degene- radas", isto , que, no correr dos anos, perderam parte do seu DNA, de suas enzimas e, portanto, sua autonomia, tornando-se dependentes das clulas que se conservaram completas. Existem apenas 2 tipos bsicos de clulas: as procariontes e as eucariontes A microscopia eletrnica demonstrou que existem fundamen- talmente duas classes de clulas: as procariontes (pro, primeiro, e cario, ncleo), cujos cromos somos no esto separados do citoplasma por membrana, e as eucariontes (eu, verdadeiro, e cario, ncleo), com um ncleo bem individualizado e delimi- tado pelo envoltrio nuclear. Como ser visto a seguir, embora a complexidade nuclear seja utilizada para dar nome s duas classes de clulas, h outras diferenas importantes entre pro- cariontes e eucariontes. As clulas procariontes so pobres em membranas As clulas procariontes caracterizam-se pela pobreza de membranas. Nelas, geralmente a nica membrana presente a membrana plasmtica. Ao contrrio das clulas eucarion- tes, as procariontes no possuem membranas separando os cromossomos do citoplasma. Os seres vivos que tm clulas procariontes so denominados procariotas; essas clulas cons- tituem as bactrias (as cianofceas, ou algas azuis, tambm so bactrias). A clula procarionte mais bem estudada a bactria Esche- richia coZi (Fig. 1.1), que, por sua simplicidade estrutural e rapidez de multiplicao, revelou-se excelente para estudos de biologia molecular. A E. coZi tem a forma de basto, com cerca de 2 fLm de comprimento e separada do meio externo por uma membrana plasmtica semelhante que envolve as clulas eucariontes. Por fora dessa membrana existe uma parede rgi- da, com 20 nm de espessura, constituda por um complexo de protenas e glicosaminoglicanas. A parede tem sobretudo funo de proteo mecnica. No citoplasma da E. coZi existem ribossomos ligados a mo- lculas de RNA mensageiro (mRNA), constituindo polirribos- Introduo: Uma Vista Panormica sobre a Estrutura, Funes e Evoluo das Clulas 3 Parede ! Polirribossomo Nucleide . ..... . : =-.......... ~ .. : . ... . .. . ::. ,,4" '\ :" . .,." ,', . ...... .. ::: ~ " :" .. : . ~ " , ." ".! ,.' . ,',' ......... . " . ' .. Fig, 1,1 Clula procarionte (bactria Escherichia colt). A clula envolvida por uma parede rgida presa membrana plasmtica. Na face interna da membrana, encontram-se enzimas relacionadas com a respirao e que esto representadas, no desenho, por pequenas raquetas. O citoplasma contm numerosos polirribossomos, mas no apresenta o sistema de membranas que existe nas clulas eucarion- teso O desenho mostra dois cromossomos, que so idnticos e se prendem membrana plasmtica. A regio ocupada pelo cromossomo chama-se nucleide. somos. Encontram-se, em geral, dois ou mais cromos somos idnticos, circulares, ocupando regies denominadas nucleides e muitas vezes presos a pontos diferentes da membrana plasm- tica. Cada cromos somo, constitudo de DNA no-associado a histonas, tem espessura de 2 nm e comprimento de 1,2 mm. As clulas procariontes no se dividem por mitose e seus filamentos de DNA no sofrem o processo de condensao que leva for- o mao de cromossomos visveis ao microscpio ptico, durante a diviso celular. O citoplasma das clulas procariontes em geral no apresenta outra membrana alm daquela que o separa do meio externo (membrana plasmtica). Em alguns casos podem existir invagina- es da membrana plasmtica que penetram no citoplasma, onde se enrolam, originando estruturas denominadas mesossomos. Alm disso, no citoplasma das clulas procariontes que realizam a fotossntese, existem algumas membranas, paralelas entre si, e associadas clorofila ou a outros pigmentos responsveis pela captao da energia luminosa. Outra diferena entre a clula procarionte e a eucarionte a falta de um citoesqueleto nas clulas procariontes. Nas eucarion- tes, o citoesqueleto responsvel pelos movimentos e pela forma das clulas, que, muitas vezes, complexa. A forma simples das clulas procariontes, em geral esfrica ou em bastonete, mantida pela parede extracelular, sintetizada no citoplasma e agregada superfcie externa da membrana celular. Essa pa- rede rgida e tem tambm papel importante na proteo das clulas bacterianas. Na natureza so encontradas populaes de bactrias nos mais diversos hbitats, e a parede essencial para proteger as clulas contra os fatores muitas vezes agressivos desses hbitats. Todavia, a diferena mais marcante entre as clulas proca- riontes e as eucariontes a pobreza de membranas nas proca- riontes. O citoplasma das clulas procariontes no se apresenta subdividido em compartimentos, ao contrrio do que ocorre nas clulas eucariontes, onde um extenso sistema de membrana cria, no citoplasma, microrregies (Fig. 1.2) que contm molculas diferentes e executam funes especializadas. As clulas eucariontes so compartimentalizadas Essas clulas apresentam duas partes morfologicamente bem distintas - o citoplasma e o ncleo - , entre as quais existe um trnsito constante de molculas diversas, nos dois sentidos. O citoplasma envolto pela membrana plasmtica, e o ncleo, pelo envoltrio nuclear. Uma caracterstica importante das clulas eucariontes sua riqueza em membranas (Fig. 1.2), formando comparti- mentos que separam os diversos processos metablicos graas ao direcionamento das molculas absorvidas ou produzidas nas prprias clulas. Alm disso, existem grandes diferenas enzimticas entre as membranas dos vrios compartimentos. A clula eucarionte como uma fbrica organizada em sees de montagem, pintura, embalagem etc. Alm de aumentar a eficincia, a separao das atividades permite que as clu- las eucariontes atinjam maior tamanho, sem prejuzo de suas funes . o citoplasma constitudo pela matriz, organelas e depsitos diversos O citoplasma das clulas eucariontes contm as organelas, como mitocndrias, retculo endoplasmtico, aparelho de Gol- gi, lisossomos e peroxissomos. O conceito de organela no bem definido, variando um pouco de um autor para outro. Al- guns consideram organelas apenas as estruturas envolvidas por membrana, como as mitocndrias e os lisos somos, por exemplo. Outros admitem como organelas todas as estruturas intracelula- res presentes em todas as clulas e que desempenham funes bem definidas, mesmo que no sejam delimitadas por membrana 4 Biologia Celular e Molecular Microvilo --------)1" Microtbulo ----+1---// Desmossomocom filamentos intermedirios Gotcula de lipdio ----4+.! Mitocndria -----14-- Lisossomo Filamento de actina ----+-.,..".;;::....c, Canalculo biliar ---*:;... Microvilo ---f'lII"---U, Ncleo Glicognio ---fl---lr!.."il Retculo endoplasmtico liso Juno comunicante Fig. 1.2 Representao tridimensional de clula eucarionte animal (clula do fgado). O ncleo separado do citoplasma pelo enve- lope nuclear, de dupla membrana, com poros. O citoplasma das clulas eucariontes possui um sistema de membranas muito desenvolvido e que, por razes didticas, s est parcialmente representado nesta figura. Observar, acima do ncleo, um dos dois centrolos da clula, de onde irradiam microtbulos. Atrs dos centrolos est o aparelho de Golgi. No centro do ncleo aparece o nuclolo. (Reproduzido, com permisso, de Carneiro,].: Bases Celulares para a Fisiopatologia. ln: Marcondes, M. et aI. Clnica Mdica, 3." ed. Guanabara Koogan, 1984.) (exemplos: centros somos, corpsculos basais dos clios). Alm das organelas, o citoplasma pode apresentar depsitos de substn- cias diversas, como grnulos de glicognio e gotculas lipdicas. Preenchendo o espao entre as organelas e os depsitos, tambm chamados incluses, encontra-se a matriz citoplasmtica ou citossol. O citossol contm gua, ons diversos, aminocidos, precursores dos cidos nuclicos, numerosas enzimas, incluin- do as que realizam a gliclise anaerbia (ver Cap. 4) e as que participam da degradao e sntese de hidratos de carbono, de cidos graxos, de aminocidos e de outras molculas importantes para as clulas. O citossol possui microfibrilas, constitudas de actina, e microtbulos, constitudos de tubulina, cujas unidades monomricas se podem despolimerizar e polimerizar novamente, de modo reversvel e dinmico, o que explica as modificaes de sol para gel e vice-versa observadas no citoplasma. Quando despolimerizadas (separadas umas das outras), as molculas das protenas actina e tubulina conferem maior fluidez ao ci- tossoI. Quando polimerizadas em microfibrilas e microtbulos, conferem a consistncia de gel regio citoplasmtica onde se encontram. Membrana plasmtica a parte mais externa do citoplasma, que separa a clula do meio extracelular, contribuindo para manter constante o meio intracelular, que diferente do meio extracelular. Tem cerca de 7 a 10 nm de espessura e aparece nas eletromicrografias como duas linhas escuras separadas por uma linha central clara. Essa estrutura trilarninar comum s outras membranas encontradas nas clulas, sendo por isso chamada unidade de membrana ou membrana unitria. As unidades de membrana so bicamadas lipdicas formadas principalmente por fosfolipdios e contendo uma quantidade va- rivel de molculas proticas, mais numerosas nas membranas com maior atividade funcional (as protenas so responsveis pela maioria das funes da membrana). O folheto externo da bicamada lipdica da membrana plasmtica apresenta muitas molculas de glicolipdios, com as pores glicdicas se proje- tando para o exterior da clula. s pores glicdicas dos gli- colipdios se juntam pores glicdicas das protenas da prpria Introduo: Uma Vista Panormica sobre a Estrutura, Funes e Evoluo das Clulas 5 membrana, mais glicoprotenas e proteoglicanas secretadas, que so adsorvidas pela superfcie celular para formar um conjunto denominado glicoclice. Assim, o glicoclice uma projeo da parte mais externa da membrana, com apenas algumas molculas adsorvidas, e no uma camada inteiramente extracelular, como se pensou inicialmente. Mitocndrias As mitocndrias so organelas esfricas ou, mais freqente- mente, alongadas (Fig. 1.2). Nas micrografias eletrnicas apa- recem constitudas por duas unidades de membrana, sendo a interna pregueada, originando dobras em forma de prateleiras ou de tbulos (Fig. 1.3). A principal funo das mitocndrias liberar energia gradu- almente das molculas de cidos graxos e glicose, provenientes dos alimentos, produzindo calor e molculas de ATP (adenosina- trifosfato). A energia armazenada no ATP usada pelas clulas para realizar suas diversas atividades, como movimentao, se- creo e diviso mittica. As mitocndrias participam tambm de outros processos do metabolismo celular (chama-se metabolismo ao conjunto de processos qumicos de degradao e sntese de molculas), muito variveis conforme o tipo de clula, e que sero estudados em outros captulos deste livro. Retculo endoplasmtico No citoplasma das clulas eucariontes existe uma rede de vesculas achatadas, vesculas esfricas e tbulos que se inter- comunicam formando um sistema contnuo, embora apaream separados nos cortes examinados no microscpio eletrnico. Esses elementos possuem uma parede formada por uma unidade de membrana que delimita cavidades, as cisternas do retculo endoplasmtico (Fig. 1.3). As cisternas constituem um sistema de tneis, de forma muito varivel, que percorre o citoplasma. Distinguem-se o retculo endoplasmtico rugoso, ou granular, e o liso (Fig. 1.2). A membrana do retculo endoplasmtico rugoso apresenta os ribossomos na sua superfcie voltada para o citosso!. Os ribos- somos so partculas densas aos eltrons e constitudas de cido ribonuclico (RNA ribossmico ou rRNA) e protenas. Os ribos- somos das clulas eucariontes tm um dimetro de 15 a 20 nm, sendo um pouco menores nas clulas procariontes (bactrias). Cada ribossomo formado por duas subunidades de tamanhos diferentes, que se associam somente quando se ligam aos fila- mentos de RNA mensageiro (mRNA). Como diversos ribossomos se associam a um nico filamento de RNA mensageiro (rnRNA), formam-se polirribossomos que ficam dispersos no citoplasma ou presos superfcie externa do Fig. 1.3 Eletromicrografia de parte do citoplasma de ua clula do tecido conjuntivo (plasmc!to). Os corpos mais escuros e alongados so mitocndrias. Essa clula, especializada na sntese de protenas, muito rica em retculo endoplasmtico rugoso ou granular (REG) . As cisternas esto dilatadas por protenas que sero secretadas no meio extracelular. As protenas aparecem como um precipitado fmo e claro no interior das cisternas do retculo endoplasmtico rugoso. Aumento: 60.o00x. 6 Biologia Celular e Molecular retculo endoplasmtico rugoso. Os polirribossomos tm papel fundamental na sntese de protenas. O retculo endoplasmtico liso apresenta-se principalmente como tbulos que se anastomosam (Fig. 1.2) e se continuam com o retculo rugoso. O retculo endoplasmtico liso muito desenvolvido em certos tipos de clulas, como, por exemplo, nas que secretam hormnios esterides, nas clulas hepticas e nas clulas da glndula adrenal. Endossomos Os endossomos formam um compartimento que recebe as molculas introduzidas no citoplasma das clulas pelas vesculas de pinocitose, que se originam da membrana plasmtica (ver Cap. 5). O compartimento endossomal constitudo de elementos sepa- rados. um sistema extenso, indo desde a periferia do citoplasma at as proximidades do ncleo celular. formado por vesculas e tbulos, cujo interior apresenta pR cido. Esse compartimento responsvel pela separao e endereamento do material que penetra no citoplasma pelas vesculas de pinocitose. Grande parte desse material encaminhada para os lisossomos, porm muitas molculas passam dos endossomos para o citossol e outras so devolvidas para a superfcie celular. Os endossomos podem ser considerados como uma parte da via lisossomal, porque muitas molculas que se dirigem para os lisossomos passam antes pelos endossomos. Aparelho de Golgi Essa organela tambm conhecida como zona ou complexo de Golgi, estando constituda por um nmero varivel de ves- culas circulares achatadas e por vesculas esfricas de diversos tamanhos, que parecem brotar das primeiras (Figs. 1.2 e 1.4). Em muitas clulas, o aparelho de Golgi localiza-se em posio constante, quase sempre ao lado do ncleo (Figs. 1.2 e 1.5); em outras clulas, ele se encontra disperso pelo citoplasma. Essa organela tem mltiplas funes, porm muito impor- tante na separao e endereamento das molculas sintetizadas nas clulas, encaminhando-as para as vesculas de secreo (que sero expulsas da clula), para os lisossomos, para vesculas que permanecem no citoplasma ou para a membrana celular (ver Cap. 10). Lisossomos Os lisossomos so organelas de forma e tamanho muito vari- veis, freqentemente medindo 0,5-3,0 fLm de dimetro (Figs. 1.2 e 1.5), cujo interior cido e contm diversas enzimas hidrolticas (enzimas que rompem molculas, adicionando os tomos das molculas de ~ a ) . As hidrolases dos lisossomos tm ativida- de mxima em pR cido. Essas enzimas so sintetizadas pelos polirribossomos que se prendem ao retculo endoplasmtico ru- Fig. 1.4 Eletromicrografia do aparelho de GoIgi isolado de clula do intestino. Essa organela constituda de vescUlas achatadas (VA) e vesculas esfricas (VE) que parecem brotar daquelas. Notar, tambm, alguns fragmentos do retculo endoplasmtico liso, um dos quais est assinalado (RE). Aumento: 25.000 X. - ~ - - - -- - - - ~ Introduo: Uma Vista Panormica sobre a Estrutura, Funes e Evoluo das Clulas 7 Fig. 1.5 Eletromicrografia de clula do tecido conjuntivo (macrfago). Em alguns pontos, a superfcie celular apresenta prolongamentos irregulares. Observar o ncleo (o nuclolo no aparece no corte),'o aparelho de Golgi, os lisos somos (L), o retculo endoplasmtico liso (REL) e o centriolo. Aumento: 15.000X. goso. Os lisossomos so depsitos de enzimas utilizadas pelas clulas para digerir molculas introduzidas por pinocitose, por fagocitose, ou, ento, organelas da prpria c ~ l u l a . A destruio e renovao de organelas um processo fisiolgico que permite clula manter seus componentes em bom estado funcional e em quantidade adequada s suas necessidades do momento. As organelas desgastadas pelo uso so eliminadas e substitudas por organelas novas. As que no so mais necessrias so sim- plesmente removidas. Peroxissomos Os peroxissomos so organelas caracterizadas pela presena de enzimas oxidativas que transferem tomos de hidrognio de diversos substratos para o oxignio, segundo a reao: Os peroxissomos contm a maior parte da catalase celular, enzima que converte perxido de hidrognio (H 2 0 2 ) em gua e oxignio: 2H 2 0 2 catalase. 2H 2 0 + O 2 A atividade da catalase importante porque o perxido de hidrognio (H 2 0 2 ) que se forma nos peroxissomos um oxi- dante enrgico e prejudicaria a clula se no fosse eliminado rapidamente. Os peroxissomos apresentam, ao microscpio eletrnico, uma matriz granulosa envolta por membrana, e seu tamanho em geral varia de 0,3 a 1 /-Lm. Muitos peroxissomos exibem um crista- lide, eltron-denso e constitudo de catalase. Os peroxissomos so identificados ao microscpio eletrnico por darem reao positiva para a enzima catalase. Essas organelas tm sido bem estudadas nas clulas do rim e do fgado de mamferos. Entre outras enzimas, contm cata- lase, enzimas da j3-oxidao dos cidos graxos, urato-oxidase e D-aminocido-oxidase. Participam da metabolizao do ci- do rico, resultante das bases pricas. A presena da enzima D-aminocido-oxidase est provavelmente relacionada com a metabolizao dos D-arninocidos da parede das bactrias que penetram no organismo, pois as protenas dos mamferos so constitudas exclusivamente por L-aminocidos. Os peroxisso- mos tm tambm um papel na desintoxicao. Por exemplo, cerca da metade do lcool etlico (etanol) consumido por uma pessoa destrudo por oxidao nos peroxissomos, principal- mente nos peroxissomos do fgado e dos rins. Os peroxissomos participam, como as mitocndrias, da j3-oxidao dos cidos graxos, assim chamada porque os cidos graxos so rompidos no carbono da posio dois ou beta. Os peroxissomos catalisam a degradao dos cidos graxos, produzindo acetil-CoA, que pode penetrar nas mitocndrias, onde vai participar da sntese de ATP por meio do ciclo do cido ctrico (ciclo de Krebs). As molculas de acetil-CoA podem ser utilizadas em outros compartimentos citoplasmticos para a sntese de molculas diversas. Calcula-se que 30% dos cidos graxos sejam oxidados em acetil-CoA nos peroxissomos. - - - -- - - -- -- - - - - 8 Biologia Celular e Molecular o contedo enzimtico dos peroxissomos varia muito de uma clula para a outra, notando-se ainda que, numa mesma clula, nem todos os peroxissomos tm a mesma composio enzim- tica. Essas enzimas so produzidas pelos polirribossomos do citossol, conforme as necessidades da clula e, muitas vezes, como uma adaptao para a destruio de molculas estranhas que penetram na clula, como lcool etlico e drogas diversas. Receptores da membrana dos peroxissomos captam protenas sintetizadas no citossol e que contm um sinal especfico Os peroxissomos crescem pela incorporao de protenas sin- tetizadas nos polirribossomos livres no citossol, e que contm uma seqncia especial de trs aminocidos prximos extremi- dade carboxila da molcula protica. Essa seqncia reconheci- da por receptores da membrana, e a protena transportada para o interior dos peroxissomos. Assim, os peroxissomos crescem e, aps atingirem certo tamanho, dividem-se por fisso (Fig. 1.6). O processo foi bem estudado tomando-se como modelo a catalase. A molcula de catalase constituda por quatro P91ipeptdeos idnticos, cada um deles ligado a um grupo heme. A catai ase liberada pelos polirribossomos no citossol sob a forma de poli- peptdeos, sem o grupo heme, denominados apocatalase. As mo- lculas de apocatalase, que contm o sinal para os peroxissomos, so reconhecidas pela membrana dos peroxissomos e penetram nessa organela, onde se unem para formar os tetrmeros, que, em seguida, recebem quatro grupos heme. As molculas receptoras, que ficam presas nas membranas dos peroxissomos, fazendo salincia na face citoplasmtica, tambm so sintetizadas nos polirribossomos livres e captadas - porm no introduzidas - no peroxissomo, permanecendo presas na superfcie da membrana dessa organela. peroxissomo ,.o"'",, ""',,,, I receptor que auxilia , , a penetrao das \' protenas com sinal l para o peroxissomo ... crescimento do ... /;' ..... .. .. @@ duplicao do peroxissomo Fig. 1.6 Os peroxissomos se multiplicam por um processo ainda pouco conhecido de diviso binria. O desenho mostra que as pro- tenas para essa organela so sintetizadas no citossol. Algumas ficam presas membrana do peroxissomo, porm determinadas protenas tm sinais peptdicos (seqncias de aminocidos) que marcam sua destinao para o interior dos peroxissomos. Essas molculas proticas atravessam a membrana e vo aumentar o tamanho da organela que, finalmente, se divide em duas. Doenas humanas por defeitos nos peroxissomos A sndrome crebro-hepatorrenal, ou sndrome de Zel1weger, um distrbio hereditrio raro, onde aparecem diversos defeitos neurolgicos, hepticos e renais, que levam morte muito cedo, geralmente na infncia. Foi observado que o fgado e os rins desses pacientes apresentam peroxissomos vazios, constitudos somente pelas membranas, sem as enzimas normalmente locali- zadas no interior dessas organelas. Essas enzimas aparecem livres no citossol, onde no podem funcionar normalmente. Portanto, as clulas desses pacientes no perderam a capacidade de sintetizar as enzimas tpicas dos peroxissomos, mas sim a possibilidade de transferir para os peroxissomos as enzimas produzidas. O estu- do gentico dos portadores da sndrome de Zel1weger detectou mutaes em cerca de 11 genes, todos codificadores de protenas que participam do processo de importao de enzimas pelos peroxissomos. Esses genes j foram isolados e foi demonstrado que as protenas que eles codificam so receptores para enzimas dos peroxissomos, ou ento de algum outro modo participam da maquinaria responsvel pela introduo das enzimas nos pe- roxissomos. O nmero de genes e protenas envolvido mostra a complexidade do de translocao de enzimas para dentro dessas organelas. Outras doenas hereditrias dos peroxissomos so devidas falta de apenas uma enzima, ao contrrio do que acontece na sndrome de Zel1weger. A adrenoleucodistrofia um exemplo de deficincia em apenas uma enzima dos peroxissomos. Trata-se de uma mutao no cromossomo X que, geralmente, se manifesta nos meninos antes da puberdade, quando aparecem sintomas de deficincia na secreo da glndula adrenal e disfunes neurol- gicas. Os defeitos resultam do acmulo nos tecidos de numerosas molculas de cidos graxos saturados de cadeia muito longa, porque os peroxissomos desses doentes no oxidam os cidos graxos saturados de cadeia muito longa. Por se tratar de defeito em um nico gene, que j foi isolado, possvel que se chegue a um tratamento por meio das tcnicas de DNA recombinante (engenharia gentica). Citoesqueleto Muitas clulas tm forma irregular, existindo algumas, como os neurnios ou clulas nervosas, com prolongamentos muito longos. Alm disso, o ncleo, organelas, vesculas de secreo e outros componentes celulares tm localizao definida, quase sempre constante, conforme o tipo celular. Essas observaes levaram os pesquisadores a admitirem a existncia de um cito- esqueleto que desempenharia apenas um papel mecnico, de suporte, mantendo a forma celular e a posio de seus compo- nentes. Estudos posteriores, alm de confirmarem a existncia do citoesqueleto, mostraram que seu papel funcional muito mais amplo. Ele estabelece, modifica e mantm a forma das clulas. responsvel tambm pelos movimentos celulares como contrao, formao de pseudpodos e deslocamentos intracelulares de organelas, cromos somos, vesculas e grnu- los diversos. Os principais elementos do citoesqueleto so os microtbulos, filamentos de actina e filamentos intermedi- rios. Os microtbulos e os microfilamentos de actina, com a cooperao das protenas motoras (ver Cap. 7), participam Introduo: Uma Vista Panormica sobre a Estrutura, Funes e Evoluo das Clulas 9 dos movimentos celulares e dos deslocamentos de partculas dentro das clulas. Depsitos citoplasmticos o citoplasma pode conter, conforme o tipo celular estudado e seu estado funcional, acmulos, geralmente temporrios, de substncias diversas, no envoltas por membrana. So freqentes os depsitos do polissacardeo glicognio, sob a forma de grnulos esfricos com 30 nm de dimetro, que podem existir isoladamente ou agrupados (Fig. 1.7). O glicognio, um polmero da glicose, uma reserva energti- ca para as clulas animais. Muitas clulas contm gotculas Iipdicas (Fig . . 1.8) de constituio qumica e tamanho muito variveis. Depsitos de pigmentos tambm no so raros. Um exemplo a melanina, encontrada nos cromatforos e nas clulas da epiderme (camada mais superficial da pele). Outro exemplo a Iipofuscina, pigmento pardo que se acumula em algumas clulas de vida longa, como neurnios e clulas musculares cardacas, medida que elas envelhecem. Os depsitos contendo pigmento so, em parte, responsveis pela cor dos seres vivos, com implicaes nos processos de mi- metismo, na atrao para acasalamento e na proteo contra as radiaes ultravioleta da luz do Sol. Fig. 1.7 Micrografia eletrnica mostrando grnulos de glicognio, a maioria dos quais forma aglomerados (setas). Clula do fgado. Aumento: 62.000X. Fig. 1.8 Eletromicrografia mostrando depsitos temporrios de li- pdios no citoplasma de clula absortiva do intestino delgado. Essas clulas apresentam muitos prolongamentos em sua superfcie livre, os microvilos ou microvilosidades. Notar mitocndrias (M) e lisossomos (1). Depois de absorvidos pelas clulas, os lipdios se acu- mulam temporariamente nas cisternas do retculo endoplasmtico liso, estando envoltos por membranas do retculo endoplasmtico liso (setas). Aumento: 10.000 x . (Cortesia de H. I. Friedman.) o ncleo contm os cromossomos e separado do citoplasma por membrana dupla, o envoltrio nuclear Uma das principais caractersticas da clula eucarionte a pre- sena de um ncleo de fomia varivel, porm bem individualizado e separado do restante da clula por duas membranas. Todavia, essa membrana dupla, chamada envoltrio nuclear, possui poros que regulam o intenso trnsito de macromolculas do ncleo para o citoplasma e deste para o ncleo. Todas as molculas de RNA do citoplasma so sintetizadas no ncleo, e todas as molculas proticas do ncleo so sintetizadas no citoplasma. A membrana externa do envoltrio nuclear contm polirribossomos, fazendo parte do retculo endoplasmtico rugoso (Fig. 1.2). Cromatina A observao microscpica dos preparados fixados mostra que o ncleo celular contm grnulos de tamanho varivel e for- ma irregular, que se coram intensamente por corantes bsicos. O material que constitui esses grnulos foi chamado de cromatina, numa poca em que nada se conhecia sobre a sua constituio qumica. Hoje se sabe que a cromatina constituda por cido desoxirribonuclico (DNA) associado a protenas. As clulas 10 Biologia Celular e Molecular eucariontes contm uma quantidade muito maior de DNA, que apresenta grande complexidade, estando associado a diversas protenas como as histonas. As protenas tm importante papel nas funes e na organizao do DNA, tanto no ncleo interf- sico, isto , que no est em mitose, como na condensao dos cromossomos na diviso celular. Nuclolo Os nuclolos so corpsculos em geral esfricos, geralmente visveis nas clulas vivas, examinadas ao microscpio sem qual- quer colorao. Os nuclolos contm grande quantidade de cido ribonuclico (RNA) e de protenas bsicas, ao lado de pequena quantidade de DNA. Geralmente, os nuclolos so basfilos devido ao RNA, que se cora por corantes bsicos. Contudo, os que apresentam ele- vado teor de protenas bsicas, que tm afinidade pelos corantes cidos, so acidfilos (o significado da basofilia e da acidofilia ser explicado no Cap. 2). Caractersticas que distinguem as clulas eucariontes vegetais das animais As clulas dos vegetais superiores (plantas) so eucariontes e assemelham-se, em sua estrutura bsica, s clulas animais. As principais diferenas sero citadas a seguir, e, para maiores detalhes, deve ser consultado o Cap. 13. 1. Presena de paredes. Alm da membrana plasmtica, as clulas das plantas contm uma ou mais paredes rgidas que lhes conferem forma constante e protegem o citoplas- ma principalmente contra agresses mecnicas e a ao de parasitas. 2. Presena de plastdios. Uma das principais caractersticas das clulas das plantas a presena dos plastdios, tambm chamados plastos, que so organelas maiores do que as mitocndrias e, como elas delimitadas por duas unidades de membrana. Os plastdios que no contm pigmentos so chamados leucoplastos. Os que contm pigmentos so os cromoplastos, dos quais os mais freqentes so os cloroplastos, ricos em clorofila, principal pigmento fotos sinttico . 3. Vacolos citoplasmticos. As clulas das plantas contm, com freqncia, vacolos citoplasmticos muito maiores do que os que existem no citoplasma das clulas animais. Os vacolos das clulas vegetais podem ocupar a maior parte do volume celular, reduzindo-se o citoplasma funcio- nal a uma delgada faixa na periferia da clula. 4. Presena de amido. Ao contrrio das clulas eucariontes animais, que utilizam o polissacardeo glicognio como reserva energtica, nas clulas das plantas o polissacardeo de reserva o amido. 5. Presena de plasmodesmos. As clulas vegetais possuem tubos com 20-40 nm de dimetro ligando clulas vizinhas. Essas conexes so chamadas plasmodesmos e estabele- cem canais para o trnsito de molculas. As clulas animais no apresentam plasmodesmos; porm, muitas se comuni- cam por meio das junes comunicantes (ver Cap. 5), que so morfologicamente muito diferentes, mas apresentam semelhanas funcionais com os plasmodesmos. Origem e evoluo das clulas Admite-se que o processo evolutivo que originou as primei- ras clulas comeou na Terra a aproximadamente 4 bilhes de anos. Naquela poca, a atmosfera provavelmente continha vapor d' gua, amnia, metano, hidrognio, sulfeto de hidrognio e gs carbnico. O oxignio livre s apareceu muito depoi s, graas atividade fotossinttica das clulas autotrficas. H 4 bilhes de anos, a superfcie da Terra estaria coberta por grande quantidade de gua, disposta em grandes "oceanos" e "la- goas". Essa massa lquida, chamada de caldo primordial, era rica em molculas inorgnicas e continha em soluo os gases que constituam a atmosfera daquela poca. Sob a ao do calor e da radiao ultravioleta, vindos do Sol, e de descargas eltricas, oriundas das tempestades que eram muito freqentes, as molculas dissolvidas no caldo primordial combinaram-se quimicamente para constiturem os primeiros compostos contendo carbono. Substn- cias relativamente complexas como protenas e cidos nuclicos, que, nas condies terrestres atuais, s se formam pela ao das clulas ou por sntese nos laboratrios qumicos, teriam aparecido espontaneamente, ao acaso. Esse tipo de sntese, realizada sem a participao de seres vivos, denominada prebitica, e j foi demonstrado experimentalmente que ela possvel (Fig. 1.9). O acmulo gradual dos compostos de carbono foi favorecido por trs circunstncias: (1) a enorme extenso da Terra, com grande varie- dade de nichos, onde provavelmente ocorreu a formao de mol- culas que foram mantidas prximas umas das outras e, certamente, diferentes das existentes em outros locais; (2) o longo tempo, cerca de 2 bilhes de anos, perodo em que ocorreu a sntese prebitica no caldo primordial; e (3) a ausncia de oxignio na atmosfera, j mencionada, e importante porque assim as molculas neoformadas no foram logo destrudas por oxidao. Na atmosfera atual da Terra, a sntese do tipo prebitico impossvel. provvel que no caldo primordial tenham surgido polmeros de aminocidos e de nucleotdeos, formando-se assim as primeiras molculas de protenas e de cidos nuclicos. Todavia, somente cidos nuclicos so capazes de autoduplicao, e a demonstrao experimental recente de que, em laboratrio, molculas de RNA simples so capazes de evoluir para molculas mais complexas, sem auxlio de protenas enzimticas, faz supor que a evoluo comeou com molculas de RNA. Como ser visto adiante, no Cap. 3, o RNA pode ter atividade enzimtica, propriedade que j se pensou ser exclusiva das protenas. Aparecidas as primeiras molculas de RNA com capacidade de se multiplicarem e de evoluir, estava iniciado o caminho para as primeiras clulas. Po- rm, era necessrio que o sistema autocataltico ficasse isolado, para que as molculas no se dispersassem no lquido prebitico. Provavelmente ao acaso, formaram-se molculas de fosfolipdios que, espontaneamente, constituram as primeiras bicamadas fos- folipdicas, e estas podem ter envolto c o ~ u n t o s de molculas de cidos ribonuclicos, nucleotdeos, protenas e outras molculas. Estava, assim, constituda a primeira clula, com sua membrana fosfolipdica. Os fosfolipdios so molculas alongadas, com uma cabea hidroflica e duas cadeias hidrofbicas. Quando esto dis- solvidas em gua, as molculas de fosfolipdios se prendem por interao hidrofbica de suas cadeias e constituem bicamadas espontaneamente, sem necessidade de energia (ver Cap. 5). Os dados hoje disponveis permitem supor que, em seguida ao cido ribonuclico (RNA), deve ter surgido o cido desoxirri- bonuclico (DNA), formado pela polimerizao de nucleotdeos sobre um molde (template) de RNA, e os dois tipos de cidos ... -------------------------------------------------- ~ -------------- -------- Introduo: Uma Vista Panormica sobre a Estrutura, Funes e Evoluo das Clulas 11 Fig. 1.9 Aparelho criado por Stanley L. Miller para demonstrar a sntese de molculas orgnicas, sem a participao de seres vivos (sntese prebitica), nas condies da atmosfera terrestre h cerca de 4 bilhes de anos. O aparelho continha vapor d'gua,proveniente do aquecimento do balo inferior. Pela torneira superior esquerda introduziam-se, na coluna, metano, amnia, hidrognio e gs carb- nico. Ao passar pelo balo superior direito, a mistura era submetida a centelhas eltricas. A mistura tornava-se lquida no condensador e era recolhida pela torneira inferior. Observou-se que esse lquido continha diversas molculas de compostos de carbono (orgnicas), inclusive aminocidos. nuclicos passaram a determinar os tipos de protenas a serem sintetizadas. Considerando a enorme variedade de protenas celulares, fonnadas por 20 monmeros diferentes (os 20 ami- nocidos), pouco provvel que todas as protenas se tenham fonnado por acaso. A sntese das protenas deve ter sido dirigida pelos cidos nuclicos, com eliminao das protenas inteis, pelo prprio processo evolutivo. razovel supor que a primeira clula que surgiu era estrutu- ralmente simples, certamente uma procarionte heterotrfica, e, tambm, que essa clula foi precedida por agregados de RNA, DNA e protenas, envoltos por bicamada de fosfolipdios. Esses agregados continuaram o processo evolutivo iniciado pelas mo- lculas de RNA, e deram origem s primeiras clulas, que devem ter sido procariontes estruturalmente simples. Como essas primeiras clulas procariontes eram heterotrficas e, portanto, incapazes de sintetizar compostos ricos em energia (alimentos), o processo evolutivo teria sido interrompido pelo esgotamento dos compostos de carbono fonnados pelo processo prebitico, nos nichos onde surgiram as clulas primordiais. Es- sas primeiras clulas, alm de procariontes e heterotrficas, eram tambm anaerbias, pois no existia oxignio na atmosfera. Teria sido difcil sustentar o processo evolutivo das clulas primitivas, se elas tivessem pennanecido dependentes, para sua nutrio, das molculas energticas fonnadas por sntese prebitica no caldo primordial. A manuteno da vida na Terra dependeu, ento, do aparecimen- to das primeiras clulas autotrficas, ou seja, capazes de sintetizar molculas complexas a partir de substncias muito simples e da energia solar. Admite-se que tenha surgido, em clulas procarion- tes, um sistema capaz de utilizar a energia do Sol e armazen-la em ligaes qumicas, sintetizando assim alimentos e liberando oxignio. Esse novo tipo celular seria provavelmente muito seme- lhante s "algas azuis" ou cianofceas, que so bactrias ainda hoje existentes. Iniciou-se, assim, a fotossntese, que ocorreu graas ao aparecimento, nas clulas, de certos pigmentos, como a clorofila (pigmento de cor verde), que capta as radiaes azul e vennelha da luz do Sol, utilizando sua energia para ativar processos sintticos. O oxignio liberado pela fotossntese realizada pelas bactrias autotrficas foi-se acumulando na atmosfera. Isso veio a produzir grandes alteraes na atmosfera, pois as molculas do gs oxignio (02) se difundiram para as alturas mais elevadas da atmosfera, onde se romperam sob ao da radiao ultravioleta, originando tomos de oxignio, muitos dos quais se recombinaram para formar oznio (03)' que tem grande capacidade de absorver o ultravioleta. Desse modo, fonnou-se, pouco a pouco, uma camada de oznio que protege a superfcie da Terra contra a radiao ultravioleta, mas que transparente aos comprimentos de onda visveis. O incio da fotossntese e as modificaes da atmosfera fo- ram de grande importncia para a evoluo das clulas e das fonnas de vida hoje existentes na Terra. Graas fotossntese, surgiu o oxignio na atmosfera, e isso permitiu o aparecimento de clulas aerbias, ao mesmo tempo que criou uma cobertura protetora de oznio nas camadas superiores da atmosfera. As bactrias anaerbias ficaram restritas a nichos especiais, onde no existe oxignio. Supe-se que o passo seguinte no processo evolutivo, depois das clulas procariontes autotrficas, foi o aparecimento das clulas eucariontes. Tudo indica que s clulas eucariontes, ca- racterizadas por seu elaborado sistema de membranas, se tenham originado a partir de procariontes, por invaginaes da membrana plasmtica, que foi puxada por protenas contrteis previamen- te aparecidas no citoplasma (ver adiante, neste captulo). Essa hiptese apoiada pela observao de que as membranas intra- celulares mantm, aproximadamente, a mesma assimetria que existe na membrana plasmtica. A face das membranas internas que est em contato com o citossol (matriz citoplasmtica) asse- melha-se sua equivalente na membrana plasmtica, e o mesmo acontece com a face voltada para o interior dos compartimentos intracelulares, que tem semelhana com a face externa da mem- brana plasmtica (Fig. 1.10). A interiorizao da membrana foi fundamental para a evoluo das clulas eucariontes, pois fonnou diversos compartimentos intracelulares, como o retculo endo- plasmtico, endossomos, lisossomos e aparelho de Golgi, que so microrregies, cada uma com sua composio enzimtica tpica e atividades funcionais especficas. Esta separao molecular e funcional aumenta muito a eficincia dos processos celulares. H evidncias sugestivas de que as organelas envolvidas nas transfonnaes energticas, cloroplastos e mitocndrias, se origi- naram de bactrias que foram fagocitadas, escaparam dos mecanis- 12 Biologia Celular e Molecular clula eucarionte ' I U ~ ~ " ~ retculo endoplasmtico .' __ ... :....- DNA polirribossomo ncleo mesossomo Fig. 1.10 Desenho mostrando como, provavelmente, apareceram os compartimentos intracelulares, por invaginaes da membrana plasmtica. Essa hiptese apoiada pela observao de que as membranas intracelulares tm constituio molecular muito semelhante da membrana plasmtica. mos de digesto intracelular e se estabeleceram como simbiontes (endossimbiontes) nas clulas eucariontes hospedeiras, criando um relacionamento mutuamente benfico e que se tomou irreversvel com o passar dos anos (Fig. 1.11), devido a mutaes ocorridas no endossimbionte (chama-se endossimbionte a um simbionte intra- celular). As principais evidncias a favor dessa hiptese so: mitocndrias e cloroplastos possuem um genoma de DNA circular, como o das bactrias; essas organelas tm duas membranas, sendo a membrana interna semelhante, em sua composio, s membranas bacterianas, enquanto a membrana externa, que seria a parede do vacolo fagocitrio, assemelha-se membrana das clulas eucariontes hospedeiras. Alm disso, simbiose entre bactrias e clulas eucariontes continua acontecendo, sendo inmeros os casos atualmente existentes. Ao longo da evoluo, tanto as mitocndrias como os clo- roplastos foram perdendo seu genoma para o ncleo da clula hospedeira, tomando-se dependentes do DNA dos cromos somos das clulas hospedeiras. A maior parte das protenas das mito- cndrias e dos cloroplastos codificada por RNA mensageiro proveniente do ncleo celular, sintetizadas nos polirribossomos da matriz citoplsmtica e, depois, transferidas para dentro das mitocndrias e cloroplastos. Como teriam surgido as clulas eucariontes? o aparecimento das clulas eucariontes, durante o lento processo evolutivo, um aspecto de difcil elucidao, princi- palmente porque no existem hoje clulas intermedirias entre procariontes e eucariontes, o que facilitaria a elucidao dessa modificao evolutiva. Parece claro que, embora as mitocndrias e os cloroplastos sejam derivados de clulas procariontes, difcil imaginar a for- mao de uma clula eucarionte pela simples unio entre duas clulas procariontes tpicas. Uma delas deve ter sofrido modifica- es evolutivas que no foram conservadas nas clulas procarion- tes atuais. possvel que as clulas eucariontes tenham evoludo gradualmente, na seqncia exposta a seguir (Fig. 1.12). Uma clula procarionte heterotrfica e anaerbia, j com o sistema DNA--7RNA--7Protena funcionando, teria perdido a parede celular e, aos poucos, aumentado de tamanho e formado invaginaes na membrana plasmtica. Admite-se que, nessas reentrncias, acumularam-se enzimas digestivas que permitiram uma melhor digesto das partculas de alimentos. Ento, algumas invaginaes se desprenderam da membrana, formando vescu- las membranosas que deram origem ao sistema lisossmico, s vesculas precursoras do retculo endoplasmtico, e levaram para a parte profunda da clula o DNA que estava preso membrana plasmtica. Com o aparecimento de oxignio na atmosfera, de- vido s bactrias fotos sintticas, devem ter surgido os peroxis- Introduo: Uma Vista Panormica sobre a Estrutura, Funes e Evoluo das Clulas 13 Bactrias primiti vas anaerbias, com membrana e cpsula c:s .......... . . . >, \ ) Bactria aerbia (oxidao fosforilativa) Mitocndria com membrana dupla: a interna de origem bacteriana, e -----4:- a externa, de origem celular. A membrana bacteriana passou a formar dobras: as cristas mitocondriais Fig. 1.11 Desenho esquemtico mostrando a teoria da origem bacteriana das mitocndrias, por endossimbiose. Clulas eucariontes anaerbias, primitivas, teriam fagocitado bactrias aerbias. Estas, de algum modo, escaparam digesto intracelular e estabeleceram inter-relaes mutuamente teis com as clulas hospedeiras, que assim se tornaram aerbias. Ao mesmo tempo, as bactrias, entre outras vantagens, receberam proteo e alimentao em sua nova localizao no citoplasma da clula hospedeira. somos, defendendo as clulas contra a ao deletria de radicais livres contendo oxignio. Houve um aumento de DNA, paralelo crescente complexidade celular, e esse DNA, constitudo de longas fitas, foi concentrado em cromossomos, que foram segre- gados dentro do ncleo delimitado pelo envoltrio nuclear que se formou a partir do material membranoso vindo da superfcie celular. Houve tambm um desenvolvimento do citoesqueleto, com o aparecimento de microtbulos e aumento na quantidade de rnicrofilamentos. medida que a concentrao de oxignio foi lentamente aumentando na atmosfera, as clulas que incorporaram procariontes aerbios preorninaram por seleo natural, por duas razes: a respirao aerbia muito mais eficiente e, alm disso, gasta oxignio, diminuindo a formao intracelular de radicais livres (radicais de oxignio). Estes radicais oxidantes danificam muitas macromolculas, podendo prejudicar o funcionamento das clulas. A endossimbiose (simbiose intracelular) de proca- riontes aerbios deu origem s rnitocndrias, organelas com duas membranas, sendo a interna da bactria precursora e a externa da clula eucarionte que estava em formao. Provavelmente, os cloroplastos se originaram de maneira semelhante, tambm por endossimbiose, porm de bactrias fotossintticas. Ao longo da evoluo, houve transferncia da parte do genoma dos cloroplas- tos e rnitocndrias, para os ncleos celulares. Mas os cloroplastos transferiram menos DNA, em comparao com as rnitocndrias. possvel que a endossimbiose das mitocndrias tenha ocorrido antes da endossimbiose que originou os cloroplastos. Padres celulares e os grandes grupos de seres vivos o sistema mais antigo de classificao, criado por Lineu, divi- dia os seres vivos em apenas dois reinos - o animal e o vegetal. No primeiro estavam includos os hetertrofos, que se alimentam por ingesto, exceto os parasitas, que se nutrem por osmose. No reino vegetal estavam includos os organismos fotossintetizantes, englobando as plantas, bactrias, mixomicetos e fungos. Em virtude dos inconvenientes bvios da diviso dos seres vivos em dois reinos, foram criadas outras divises, mais elabora- 14 Biologia Celular e Molecular DNA parede mesossomo DNA retculo endoplasmtico rugoso (RER) (: ..... - <-.........
I
invaginaes da membrana com enzimas digestivas e alimentos (digesto extracelular) DNA aumentado j----1'- futuro envelope nuclear fagocitose de bactria microtbulos __ ..;",-_ retfculo endoplasmtico rugoso (RER) '-. .... _______ -+_ filamentos de actina l'I!ll-+- peroxissomo _"'----,!- lisossomo ....... ............. -> bactria sem parede bactria heterotrflca anaerbia pseudpodo com filamentos de actina peroxissomos ncleo cloroplasto -t--... (fotossntese) fagocitose de bactria fagocitose de bactria clula aerbla fotossinttica mitocndria microtbulo grnulo de secreo Fig. 1.12 Desenho, baseado principalmente nos trabalhos de C. De Duve, mostrando a maneira como, provavelmente, se constituram as primeiras clulas eucariontes, no longo processo evolutivo que precedeu o aparecimento dos seres pluricelulares. Para explicaes, ver no texto o subttulo Como teriam surgido as clulas eucariontes? col nia de al gas unicelulares /- Introduo: Uma Vista Panormica sobre a Estrutura, Funes e Evoluo das Clulas 15 ANIMALlA FUNGI MONERA cocos (j) , estreptococos diplococos < diplococos ~ ~ Dictyostelium discodeum colni a de cianobactrias as Fig. 1.13 Esquema dos cinco "reinos" a que pertencem os seres vivos. O "reino" Monera, nico cujas clulas so procariontes, constitu- do pelas bactrias (incluindo as cianofceas ou "algas azuis"). Nos demais "reinos", todas as clulas so eucariontes. O "reino" Protista composto de formas unicelulares ou unicelulares coloniais. O "reino" Fungi compreende os fungos. O "reino" Plantae inclui os vegetais superiores. No "reino" Animalia esto todos os animais. 16 Biologia Celular e Molecular das e mais condizentes com os novos conhecimentos. Um sistema ainda usado, porm, como o de Lineu, baseado principalmente na estrutura dos seres vivos e no modo de captao de nutrientes, admite cinco reinos (Fig. 1.13): Monera. Formado pelas bactrias, que so os nicos seres procariontes (as cianofceas, ou "algas azuis", tambm so bac- trias). Protista. Que compreende organismos eucariontes primaria- mente unicelulares de vida livre ou unicelulares coloniais (pro- tozorios e fitoflagelados). Fungi. Compreendendo todos os fungos. Plantae. Que inclui as algas clorofceas e os vegetais supe- riores. Animalia. Incluindo todos os animais, isto , os seres que durante o desenvolvimento embrionrio passam pelo estgio de gstrula. O conceito atual de protista no o mesmo proposto por Haeckel no passado. Hoje incluem-se entre os protistas os pro- tozorios e os organismos limtrofes, como os fitoflagelados, que sempre foram objeto de disputa, pois eram includos por uns entre os animais e, por outros, entre os vegetais, na antiga classificao em dois reinos. Na classificao de Lineu, os fungos eram considerados ve- getais (porque no tm mobilidade) sem clorofila, porm foram depois colocados em grupo separado, porque apresentam al- gumas caractersticas prprias, no compartilhadas nem pelos animais nem pelos vegetais: no possuem clorofila nem quaisquer outros pigmentos fotossintetizantes no formam tecidos verdadeiros no possuem parede de celulose (caracterstica dos ve- getais), mas sim fundamentalmente composta de quitina (caracterstica dos animais) no armazenam amido (reserva nutritiva dos vegetais) como reserva energtica, mas sim glicognio (reserva nu- tritiva dos animais). Mais recentemente, os avanos tecnolgicos da biologia mole- cular possibilitaram o estudo mais aprimorado das relaes evo- lutivas entre os organismos, ou filognese. De fato, a elucidao da evoluo molecular das clulas parece ser a melhor maneira de esclarecer as origens das clulas atualmente existentes e de des- vendar as caractersticas das clulas primordiais, que apareceram / h cerca de 3,5 bilhes de anos e que so as precursoras das clulas atuais. Esses estudos podem ser feitos atravs de diversos tipos de molculas, como a seqncia de aminocidos nas protenas e de nucleotdeos nos cidos nuclicos, ou a presena ou ausncia de enzimas importantes para o metabolismo dos organismos. Todavia, os pesquisadores observaram que a anlise da seqn- cia de nucleotdeos no RNA dos ribossomos, ou rRNA, uma boa maneira de estudar a filognese. Todas as clulas tm ribossomos e seu RNA muito constante em suas funes, servindo como um "relgio molecular" adequado para estimar as modificaes evolutivas que ocorreram durante os bilhes de anos, desde que surgiram as primeiras clulas na Terra. At mesmo modificaes muito pequenas na estrutura de um RNA ribossomal fazem com que ele deixe de ser funcional. Assim, sua seqncia de nucleotdeos foi bem conservada, ou seja, mantida constante, nas diversas linhas filogenticas, e a distncia evolutiva entre os organismos pode ser detectada pelas pequenas diferenas na seqncia de nucleotdeos no rRNA. Os ribossomos contm trs tipos de RNA, designados 5S, 16S e 23S, nas clulas procariontes. Nas clulas eucariontes, o rRNA 16S substitudo por um rRNA 18S. A letra S, de Sved- berg, indica o tamanho da molcula, que se relaciona com seu coeficiente de sedimentao numa ultracentrfuga (ver Cap. 3). Devido ao seu tamanho conveniente, o rRNA 16S (18S nas clulas eucariontes) o mais utilizado nos estudos filogenticos. O rRNA 5S tem apenas 125 nucleotdeos, o que limita muito as informaes que ele pode fornecer, enquanto o rRNA 23S, com 2.900 nucleotdeos, muito grande e o estudo de sua molcula mais difcil e laborioso. Pelo estudo da seqncia de nucleotdeos no rRNA 16S das clulas procariontes e 18S das eucariontes, foram construdas novas rvores evolutivas, que dividem os organismos em grupos dife- rentes dos que aparecem nas classificaes anteriores (Fig. 1.14). Essa comparao entre os organismos est baseada no conceito de que organismos que se diversificaram mais cedo tiveram mais tempo para acumular modificaes no seu RNA ribossomal do que os organismos que se separaram mais recentemente. Os pes- quisadores que realizaram esses estudos concluram que a clula procarionte ancestral universal se ramificou inicialmente em duas Fig. 1.14 Esquema mostrando a diviso dos seres vivos em trs grupos ou domnios, baseados na seqncia de nucleotdeos no R.: - que.o grupo Eucria se separou do grupo rquea posteriormente, sendo o grupo Bactria o mais antigo. Eucria Arquea sao matS aproX1lTIados, em termos moleculares, e o grupo Bactria o mais afastado. Introduo: Uma Vista Panormica sobre a Estrutura, Funes e Evoluo das Clulas 17 direes dando os grupos ou domnios rquea e Bactria (Fig. 1.14). Posterionnente e a partir do domnio rquea, surgiram as primeiras clulas eucariontes que constituram o domnio Eucria. O domnio rquea compreende os procariontes metangenos (que produzem o gs metano como produto de seu metabolismo) e os que vivem em condies extremas de alta ou baixa temperatura e salinidade, acidez ou alcalinidade elevadas. Por suas caractersticas moleculares, como a composio do rRNA, essas clulas procarion- tes mostram algumas semelhanas com os seres do domnio Eucria e muitas diferenas com o domnio Bactria. Alm de diferenas no rRNA, as clulas do domnio rquea tm paredes celulares sem proteoglicanas, compostos encontrados nas paredes das bactrias. O domnio Eucria engloba todos os seres constitudos por clulas eucariontes, e o domnio Bactria engloba as bactrias atua.1rllente mais conhecidas e denominadas tambm de eubactrias. I Resumo Os vrus so estruturas no celulares, mas s 'Se multiplicam no interior das clulas, cuja maquinaria utilizam para a produ- o de novos vrus. Por serem parasitas intracelulares freqen- tes, sero estudados neste livro. Os vrus so formados de uma parte central com a informao gentica codificada seja em DNA ou em RNA, mas nunca os dois cidos nuclicos esto presentes no mesmo vrus. Esse genoma protegido por uma estrutura que o envolve, constituda por unidades proticas denominadas capsmeros. Alguns vrus apresentam um invlucro lipoprotico, contendo lipdios da clula parasitada e glicoprotenas virais. Apesar da grande diversidade entre os seres vivos, todos cons- titudos por clulas, existem apenas dois tipos celulares bsicos: as clulas procariontes e as eucariontes. As clulas procariontes so menores e caracterizam-se pela falta de um sistema de membranas que divida a clula em compartimen- tos funcionais. Seu cromossomo consiste em filamentos duplos de DNA, de forma circular, localizados num espao citoplasmtico onde a matriz menos eltron-densa: o nucleide. Geralmente, cada bactria tem mais de uma cpia desse cromossomo simples e que alm do DNA contm apenas umas poucas protenas. Nessas clulas existe apenas a membrana plasmtica, que pode apresentar dobras dirigidas para dentro das clulas: os mesossomos. Nas clulas procariontesfotossintticas, como as bactrias cianofceas, existem algumas membranas citoplasmticas que, associadas clo- rofila, so responsveis pela fotossntese nessas clulas. As clulas procariontes no tm citoesqueleto e so de forma simples. Aforma dessas clulas geralmente mantida pela presena de uma parede extracelular rgida que serve tambm de proteo mecnica, funo importante, pois as bactrias esto presentes em nichos ecolgicos muito variveis e, algumas vezes, pouco favorveis. As clulas eucariontes apresentam-se divididas em compar- timentos funcionais graas presena de um sistema complexo de membranas que cria microrregies intracelulares especia- lizadas, onde certas funes podem ser executadas com mais eficincia. Alm desse papel de compartimentalizao, o sistema de membranas cria uma enorme superfcie qual se prendem, em seqncia predeterminada, molculas enzimticas e trans- portadoras. Assim, os substratos so processados pelos diversos componentes das cadeias enzimticas sem que haja necessidade de grandes deslocamentos, que diminuiriam acentuadamente a rapidez e o rendimento dos processos metablicos. Dentre os principais compartimentos das clulas eucarion- tes esto o ncleo, o envoltrio nuclear, o retculo endoplas- mtico (liso e rugoso), os endossomos, o aparelho de Golgi, os lisossomos, as mitocndrias e, nas clulas vegetais, os plastos ou plastdios, como os cloroplastos. Outra caracterstica das clulas eucariontes possuir citoesqueleto fibrilar, respons- vel pelos movimentos celulares e pela manuteno da forma - muitas vezes, altamente complexa - dessas clulas. O ci- to esqueleto constitudo de microtbulos (cerca de 24 nm de dimetro), filamentos intennedirios (cerca de 10 nm de dime- tro) e micro filamentos de actina (cerca de 6 nm de dimetro). Os microtbulos e os micro filamentos de actina, junto com as protenas motoras, participam dos movimentos da clula e dos deslocamentos intracelulares de organelas e vesculas contendo molculas diversas. Bibliografia Alberts, B. et aI.: Molecular Biology ofthe Cell, 3rd ed. Garland Press, 1994. Barghoom, E.S.: The oldest fossils. Sei. Am., 224(5):30, 1971. Brinkley, B.R.: Microtubule organizing centers. Ann. Rev. Cell Biol. , 1: 145, 1985. Cech, T.R.: RNA as an enzyme. Sei. Am., 255(5):64, 1986. De Duve, c. : A Guided Tour of the Living Cell, 2 vols . Freeman, 1985. De Duve, C. : Blueprintfor a CeZZ; The Nature and Origin ofLife. Neil Patterson Pub., 1991. De Duve, C. : The birth of complex ce1ls. Sei. Am., 274(4):38, 1996. Fahimi, H.D. and Sies, H. (eds.): Peroxisomes in Biology and Medieine. Springer-Verlag, 1987. Field, K.G. et aI. : Molecular phylogeny of the animal kingdom. Seience, 239:748, 1988. Fuchs, E. and Hanukoglu, l.: Umaveling the structure of the intermediate filaments. 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