Ministrio da Educao Secretaria de Educao Profissional e Tecnolgica Instituto Federal de Mato Grosso do Sul Campus Corumb

Apostila: Captulo 2 Introduo Citologia Disciplina: Biologia Curso: 111, 211, 121, 221 Data:

DOC ---IFMS COMET DATA ----

Professora: Me. Michele Soares de Lima Turno: Matutino/Vespertino

UNIDADE 2 CITOLOGIA Captulo 2 Introduo Citologia

Neste Captulo voc dever aprender a: Reconhecer a existncia de uma realizade invisvel aos olhos, o mundo miscroscpico, que pode ser investigado cientificamente e incorporado s nossas vises e explicaes do mundo; Identificar, na histria do descobrimento das clulas, a evoluo do pensamento cientfico como resultado do amplo debate de idias; Conhecer alguns fatos sobre a Teoria Celular, compreendo a importncia da teoria como unificadora dos conhecimentos de Biologia; Conhecer os princpios bsicos do funcionamento dos microscpios pticos e eletrnicos, comparando esses aparelhos quanto ao aumento, resoluo e possibilidade de fazer observaes vitais; Conhecer os fundamentos das principais tcnicas de preparao de materiais biolgicos para observao microscpica (tcnicas citolgicas): observao vital, fixao, colorao, incluso, corte, esmagamento; Conhecer as unidades de medida utilizadas em microscopia (micrometro, nanmetro e angstrom), comparando-as entre si e com o metro; Relacionar as principais diferenas estruturais entre clulas A inveno do microscpio possibilitou a descoberta e inaugurou um novo campo de investigao cientfica, a Citologia (do grego kytos = clula, e logos = estudo)1. O microscpio foi inventado em 1591 pelo holands Zacharias Janssen e seu filho, Hans Janssen, que trabalhavam como fabricantes de culos1. Eles uniram 2 lentes de vidro nas extremidades de um tubo e descobriram que poderiam ampliar as imagens, o que permitia observar objetos invisveis a olho nu, porm, no h registros de que os Janssen tenham utilizado sua inveno com finalidades cientficas1. O holands Antonie van Leeuwenhoek (1632-1723) foi o primeiro a utilizar microscpios para fins cientficos, construindo um microscpio simples de uma s lente, com o qual passar a investigar diversos tipos de materiais, como gua estagnada, sangue e esperma1. Posteriormente, o fsico ingls Robert Hooke (1635-1703) construiu um microscpio com duas lentes ajustadas a um tubo de metal, parecido com os de Janssen, que ficou conhecido como microscpio composto2. Em 08 de abril de 1963, Hooke apresentou sua inveno na reunio da Real Sociedade Inglesa utilizando um musgo para demonstrao1. Mas foi na segunda reunio, em 15 de abril, que Hokke demonstrou aos cientistas certas cavidades microscpicas em finas fatias de cortia, a qual ele denominou cella (pequeno compartimento), que mais tarde derivou em clula1. Vrios outros pesquisadores notaram em vrias amostras vivas (animais e vegetais) a existncia de clulas semelhantes s de cortia, com a diferena que o espao interno das clulas das amostras era preenchido por uma substncia gelatinosa1. O termo clula tambm foi empregado para esses espaos preenchidos1. Dois cientistas alemes, Mathias Schleiden e Theodor Schwann, baseados nessas observaes, lanaram a hiptese de que todos os seres vivos so formados por clulas, constituindo a base da Teoria Celular1. A hiptese da Teoria Celular prope que todos os seres vivos so constitudos por clulas, uma das generalizaes mais importantes da histria da Biologia2.

Os fisiologistas Claude Bernard (1813-1878) e o patologista Rudolph Virchow (1821-1902) reconheceram prontamente a validade da hiptese de Schleiden e Schwann1. Entusiasmado pelas recentes descobertas, Virchow passou a indagar a origem das clulas1. Alguns cientistas achavam que a clula surgia espontaneamente, mas Virchow era defensor de outra proposta e sintetizou seu pensamento na expresso latina: "Omnis cellula ex cellula", que significa " toda clula se origina de outra clula"1. A idia da origem da clula de outras preexistentes foi reforada depois que o bilogo alemo Walther Flemming (18431905) descreveu, em 1878, o processo de diviso de uma clula em duas, que ele denominou mitose1. Com isso, a Teoria Celular se ampliou, apoiando-se em trs premissas fundamentais: 1. Todos os seres vivos so formados por clulas e por estruturas que elas produzem; as clulas so, portanto, as unidades morfolgicas dos seres vivos1; 2. As atividades essenciais que caracterizam a vida ocorrem no interior das clulas; estas so, portanto, as unidades funcionais ou fisiolgicas dos seres vivos1; 3. Novas clulas se formam pela diviso de clulas preexistentes, por meio da diviso celular; a continuidade da vida depende, portanto, da reproduo celular1.

Clulas incompletas constituem as Rickttsias e as Clamdias. Ao contrrio do vrus, possuem maquinrio de sntese, DNA e RNA e uma membrana seletiva. No entanto, no produzem todas as enzimas para a sua autoduplicao independente2. So tambm parasitos intracelulares obrigatrios. Clulas completas o Procariontes so clulas com poucas membranas, logo, pouco compartimentalizadas (poucas organelas)2. Assim, no possuem envoltrio nuclear e o seu DNA est disperso no citoplasma, em locais denominados nucleides2. As clulas procariticas formam as bactrias e as cianofceas (algas azuis ou cianobactrias) 2. o Eucariontes clulas intensamente compartimentalizadas (com muitas organelas) 2. Como conseqncia houve uma especializao funcional, possibilitando o surgimento de organismos complexos2. Constituem todos os representantes dos Reinos: Protista, Fungi, Plantae e Animalia2.

Por Tamanho A maioria das clulas microscpica (maioria das clulas animais e vegetais oscila entre 10 e 50 micrmetros), porm, h algumas clulas macroscpicas como a fibra do algodo e as clulas das algas Nitella sp. e Acetabularia sp. (com forma de guarda-chuva, podendo atingir cerca de 10 cm de altura), e as clulas nervosas humanas de quase um metro de comprimento, que saem da coluna vertebral e vo at os ps2. As menores clulas conhecidas so as dos micoplasmas (P.P.L.O.), bactrias geralmente com 0,2 a 2 m de tamanho, podendo ainda ter dimenso menor2.

O vrus e a Teoria Celular

Os estudos com vrus, a partir da dcada de 1950, demonstraram que eles no apresentavam clulas em sua constituio, isto , so acelulares1. Apesar disso, os cientistas no consideram que esse fato possa enfraquecer a Teoria Celular, pois todos os vrus so parasitas intracelulares obrigatrios: se no encontrarem clulas vivas onde possam se reproduzir, eles no realizam nenhuma atividade vital1. Isso confirma que as atividades essenciais vida ocorrem somente dentro de clulas vivas1.

Classificao dos Seres vivos em funo das clulas

Por tipo Clula a menor poro da matria viva dotada da capacidade de autoduplicao independente2. Vrus so acelulares2.

Fig. 2.1 Exemplar de Nitella translucens. Fonte: http://www.british-wild-flowers.co.uk/N-Flowers/Nitella %20translucens.htm

Forma As clulas podem possuir ou no forma fixa (as amebas e os leuccitos, por exemplo, modificam continuamente sua forma)2. A forma da clula, em pluricelulares, por exemplo, acompanha a sua funo2. No entanto, as duas formas mais comuns so as esfricas e as polidricas2. Fatores como a tenso superficial da membrana plasmtica, o nvel de viscosidade do citoplasma, o meio no qual as clulas esto inseridas, a presso imposta pelas clulas vizinhas e a prpria determinao gentica so determinantes da forma celular2.

Tipos de Microscpios
Atualmente so utilizados dois tipos de microscpios: microscpio ptico (M.O.) e microscpio eletrnico (M.E.). O microscpio ptico moderno (Fig.2.2), tambm chamado de microscpio fotnico, pois funciona com luz, possui trs conjuntos principais de lentes pticas1: Condensador: condensa a luz no objeto em observao; Objetivas: formam a imagem; Oculares: ficam prximas ao olho do observador, tem a funo de projetar a imagem ao rgo de viso. A luz, projetada atravs do objeto em observao, passa pelas lentes da objetiva e da ocular e chega ao olho do observador, onde percebida como uma imagem ampliada1. Multiplicando o aumento fornecido pela ocular pelo aumento da objetiva, podemos calcular o valor final da ampliao1. Por exemplo, se empregarmos uma ocular de 10 vezes e uma objetiva de 50 vezes, o valor final da ampliao ser de 500 vezes1. Microscpios modernos tem um

poder de aumento entre 100 e 1.500 vezes1. Se um objeto mede 0,01 mm de dimetro (invisvel a olho nu) for ampliado em 1.000 vezes, sua imagem ampliada ter 10 mm (1 cm) e poder ser visualizada1. O poder de resoluo de um M.O. a capacidade de distinguir pontos muito prximos em uma imagem1. A olho nu conseguimos distinguir (isto , resolver) pontos que estejam, no mximo, a um dcimo de milmetro (0,1 mm ou 100 m1. Pontos mais prximos que essa distncialimite so vistos sem distino1. Podemos dizer, ento, que o limite de resoluo do olho humano da ordem de 0,1 mm ou 100 m1. Quanto menor o limite de resoluo de um instrumento ptico, maior o seu poder de resoluo1. Microscpios pticos de boa qualidade tem limite de resoluo da ordem de 0,25 m (0,00025 mm), o que permite distinguir pontos separados por at 0,25 m de distncia1. Microscpios eletrnicos, por sua vez, utilizam rotineiramente aumentos entre 5 mil e 100 mil vezes, ou ainda maiores1. Possuem alto poder de resoluo, com limites na ordem de 0,001 m (1 nanmetro ou 0,000001 mm), o que quer dizer que pontos distantes entre si at 0,001 m so vistos como pontos separados, permitindo observaes muito mais detalhadas que ao microscpio ptico1. O poder de resoluo do M.E. 250 vezes maior que o M.O. (0,25 m 0,001 m = 250), e 100 mil vezes maior que o do olho humano (100 m 0,001 m = 100.000)1.

Fig. 2.2 Exemplar de microscpio ptico e suas partes constituintes.Fonte:http://biocelunb.blogspot.com/2011/ 05/visualizacao-de-celulas-ao-microscopio.html

Fig.2.4 Microscpio eletrnico. Fonte: http://ccs.ufpel.edu.br/wp/2008/08/18/ufpel-recebemicroscopio-eletronico-de-varredura/

Fig. 2.3 Representao esquemtica do microscpio ptico e o trajeto que a luz percorre para formar a imagem que est sendo observada. Fonte: http://bioloukos-ifpi.blogspot.com/2010/09/omicroscopio.html

H dois tipos de M.E.: microscpio eletrnico de transmisso e microscpio eletrnico de varredura. O microscpio eletrnico de transmisso assim chamado porque um feixe de eltrons atravessa o material biolgico, produzindo a imagem1. Durante a passagens dos eltrons, algumas partes do material permitem a passagem, e outras no1. O feixe de eltrons deixa de ser homogneo e passa a representar uma imagem eletrnica das estruturas que atravessou1. Essa imagem ampliada e projetada em um monitor de vdeo ou em uma chapa fotogrfica, na qual registrada1. O microscpio eletrnico de varredura utilizado para detalhar a superfcie de objetos slidos1. Um feixe de eltrons extremamente condensado projetado sobre o material j fixado e coberto com nanopartculas de metal (ouro, platina, prata, tungstnio). Move-se o feixe de eltrons para frente e para trs, "varrendo" todo o objeto1. Durante a varredura, a superfcie do material emite eltrons que so captados por um sensor1. A interpretao computadorizada permite compor imagens tridimensionais, que so reproduzidas em um monitor e podem ser impressas na forma de fotomicrografias1.

Fig. 2.5 Representao esquemtica do microscpio eletrnico, indicando a trajetria do feixe de eltrons para gerao da imagem final. Fonte: http://bioloukosifpi.blogspot.com/2010/09/o-microscopio.html

Fig. 2.6 Imagem feita em Microscpio eletrnico de varredura do caro Acarus siro, uma espcie com pelos longos que se estendem pelo seu corpo e possui grandes patas dianteiras. Esta espcie uma praga comum em celeiros, lagares e cozinhas, sobretudo sobre gros e cereais. Fonte: http://gaioladecaraminholas.blogspot.com/2010/08/bich inhos-bizarros.html Tab. 5.1 Unidades de comprimento utilizadas em microscopia Unidade Terametro Gigametro Megametr o Quilometr o Metro Milmetro Abreviatu ra Tm Gm Mm Km m mm Relao com metro tera=1012 Exemplo

Distncia Terra-Sol 0,15 Tm giga=109 Dimetro da Terra 1,26 Gm mega=106 Distncia So Paulo Rio 0,4 Mm kilo=103 Altura do pico de Itatiaia 1,8 km Padro em platina iridiada, guardado na Frana mili=10-3 Tipos impressos nesta apostila 2 mm

Micrometr o Nanometr o Picometro

micro=10-6

nm pm

nano=10-9 pico=10-12

Glbulo vermelho do sangue 7 m Molcula de gua 0,3 nm Ncleo de um tomo 0,01 pm

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS (1) AMABIS, J. M.; MARTHO, G.R. Biologia. V.1. 2. ed. So Paulo: Moderna, 2004. (2) ESTADO DO PARAN. SECRETARIA DE ESTADO DA EDUCAO. Eureka: Biologia e Qumica. PrVestibular. Curitiba-PR: TV Paulo Freire, 2003.

9 (Unifor-CE) A teoria celular, proposta por Schleiden e Schwann, afirmava que: a) Toda clula provm de uma clula pr-existente. b) Todas as clulas vivas tem ncleo individualizado. c) H estreita relao entre a forma e funo nas clulas. d) Clulas embrionrias multiplicam-se por mitose. e) Vegetais e animais so constitudos por clulas. 10 (UnB-DF) Quando se usa o microscpio, importante saber de quanto o instrumento ampliou a imagem do objeto. Se, por exemplo, na ocular estiver marcado 5x e na objetiva 12x, a ampliao de: a) 17 dimetros (12x + 5x) b) 7 dimetros (12x 5x) c) 60 dimetros (12x X 5x) d) 2,4 dimetros (12x 5x) 11 (Vunesp) Os procariontes diferenciamse dos eucariontes porque os primeiros, entre outras caractersticas: a) No possuem material gentico. b) Possuem material gentico com os eucariontes, mas so anucleados. c) Possuem ncleo, mas o material gentico encontra-se disperso no citoplasma. d) Possuem material gentico disperso no ncleo, mas no em estruturas organizadas denominadas cromossomos. e) Possuem ncleo e material gentico organizado nos cromossomos. 12 Defina poder de resoluo e limite de resoluo de um microscpio. 13 Uma diferena entre o microscpio simples e o microscpio composto que o primeiro: a) Utiliza luz branca simples e, o segundo, feixes de eltrons. b) Utiliza feixes simples de eltrons e, o segundo, luz composta de sete cores. c) Possui apenas uma lente e, o segundo, duas lentes ou dois conjuntos de lentes. d) Possui duas lentes simples e, o segundo, apenas um conjunto de lentes.

EXERCCIOS

1 Quais so as premissas fundamentais da Teoria Celular? 2 Explique por que os vrus no contradizem a Teoria Celular. 3 Quais so as partes fundamentais de uma clula eucaritica? 4 Quanto ao modo de emprego do feixe eletrnico, em que diferem o microscpio eletrnico de transmisso e o de varredura? 5 Quais so as diferenas bsicas entre clulas eucariticas e procariticas? 6 De acordo com a Teoria Celular, apesar de serem diferentes no nvel macroscpico, todos os seres vivos so semelhantes em sua constituio fundamental, uma vez que: a) So capazes de se reproduzir sexualmente b) So constitudos por clulas c) Contm molculas orgnicas d) Se originam de gametas 7 Em uma fotomicrografia obtida com um microscpio eletrnico de transmisso, o ncleo de uma clula mede 5,5 cm de dimetro. Sabendo-se que a ampliao da imagem de 11.000 vezes, qual era o dimetro real desse ncleo? a) 5 cm b) 5 mm c) 5 m (ou 0,005 mm) d) 5 nm (ou 0,000005 mm) 8 Uma clula com dimetro de 10 m (ou 0,01 mm) foi fotografada ao microscpio ptico. Qual o dimetro dessa clula em uma fotomicrografia ampliada 1.000 vezes? a) 1 mm b) 1 cm c) 10 cm d) 100 cm