FITOCROMO E FOTOMORFOGNESE

1. INTRODUO interessante assinalar que a luz capaz de afetar o desenvolvimento das plantas, independentemente do seu efeito sobre a fotossntese. Por exemplo, a germinao de sementes de feijo no escuro resulta, aps seis dias, em plntulas estioladas. Elas se caracterizam por apresentarem uma colorao amarelada, hipoctilos extremamente alongados, com manuteno do gancho apical, sem que ocorra abertura dos cotildones e das folhas primrias. Cinco minutos dirios de luz vermelha difusa so suficientes para reduzir o crescimento do hipoctilo, promover a abertura do gancho plumular, com o crescimento do epictilo e a expanso das folhas primrias. A luz atua como um sinal indutor de mudanas na forma das plntulas, que passam de um crescimento adaptado escurido (como sob o solo) ao crescimento sob iluminao (acima do nvel do solo). Como as plantas estioladas no apresentam clorofila, a fotossntese no pode ser responsabilizada pelas mudanas assinaladas. Embora o desestiolamento completo dependa da fotossntese, as rpidas mudanas iniciais so induzidas por respostas especiais luminosidade e fazem parte do fenmeno geral denominado fotomorfognese. No exemplo anterior, a luz vermelha (embora difusa) foi indutora de fenmenos diversos, incluindo a abertura do gancho plumular, a reduo do crescimento do hipoctilo, a expanso foliar e o incio do enverdecimento. Um outro exemplo refere-se ao efeito da luz vermelha sobre a germinao de sementes de alface. Sementes mantidas no escuro apresentam um baixssimo ndice de germinao, mas a irradiao com luz vermelha (650680 nm) pode promover a germinao para ndices prximos a 100%. Entretanto, sementes irradiadas com luz vermelha, seguida por luz vermelhadistante (710-740 nm), tm germinao semelhante das sementes mantidas no escuro. A alternncia de tratamentos (com luz vermelha ou vermelha-distante) mostrou que prevalece o efeito do ltimo pulso aplicado. Trata-se, portanto, de um fenmeno fotorreversvel. Atualmente sabe-se que este tipo de fenmeno fotorreversvel controlado por um pigmento especial denominado fitocromo, tambm presente numa ampla variedade de vegetais clorofilados, envolvendo outra grande variedade de respostas fisiolgicas.

2. FITOCROMO O fitocromo uma protena conjugada, na qual a poro protica um homodmero de 240 kDa (124 kDa cada unidade) ligado covalentemente a um cromforo. A poro responsvel pela sua cor (e pela absoro de luz) um tetrapirrol de cadeia aberta, que muda de conformao e arranjo, dependendo da qualidade da luz que sobre ele incide. O fitocromo existe sob duas formas interconvertveis: o fitocromo vermelho (que na verdade tem cor azul), simbolizado por FV, e o fitocromo vermelho-distante (FVD), de cor verde-azulada. O fitocromo vermelho (forma inativa), ao absorver luz vermelha (660 nm), convertido rapidamente forma de fitocromo vermelho-distante (forma ativa). O fitocromo vermelho-distante, ao absorver luz vermelho-distante (730 nm), reconvertido rapidamente forma de fitocromo vermelho. Esta reconverso tambm ocorre no escuro, porm mais lentamente. O fitocromo est presente na maioria dos rgos das plantas, sendo, normalmente, sintetizado na forma inativa.

Sntese
(inibida por luz) Luz vermelha (660nm)

Destruio FV
Luz vermelha-distante (730nm) Reverso no escuro (lenta)

FVD (forma ativa) Resposta Fisiolgica

A quantidade de FVD regulada pela intensidade de sua sntese e destruio, pela qualidade da luz incidente e pela reverso no escuro (portanto, pela durao do perodo escuro). A quantidade total de fitocromo presente num determinado tecido grandemente influenciada pela luz. Ao mesmo tempo em que a luz inibe a sntese de fitocromo, ela tambm promove a converso de Fv em Fve, o que acelera a sua degradao. Desta forma, plantas estioladas apresentam concentraes mais elevadas de fitocromo, com maiores teores nas regies meristemticas. Da soma do fitocromo vermelho e do fitocromo vermelho distante resulta o fitocromo total. Para uma determinada resposta fisiolgica importante a relao entre a quantidade de fitocromo vermelho distante e a de fitocromo total, numa relao denominada :

FVD =----------Ftotal A proporo elevada de aminocidos hidrofbicos no componente protico indica uma provvel associao deste pigmento com o sistema de membranas intracelulares, como as dos plastdeos, de mitocndrias e do ncleo. Ensaios imunocitoqumicos permitiram determinar que o fitocromo mais concentrado em tecidos jovens e indiferenciados e que a fotoativao do fitocromo resulta em grandes mudanas na sua localizao intracelular. Por exemplo, em clulas parenquimticas de coleptiles de aveia e de arroz, o FV tem localizao citoslica mais difusa, enquanto que o FVD tende a ser acumulado em regies mais discretas. provvel que o fitocromo regule a atividade das membranas s quais ele esteja ligado. Por exemplo, verifica-se a ocorrncia de uma modulao fotorreversvel do potencial eltrico atravs da membrana plasmtica de clulas epidrmicas de razes e de coleptiles de aveia. Mudanas no potencial eltrico das clulas implicam em mudanas no fluxo de ons atravs da plasmalema. De fato, em clulas de aveia, mudanas no fitocromo alteram rapidamente o fluxo de Ca2+, para dentro ou fora das clulas. Na alga Nitella, a luz vermelha induz uma despolarizao rpida da membrana plasmtica, acompanhada de um influxo de Ca2+. Outro exemplo refere-se s plantas "sensitivas" (como a Mimosa e a Albizzia), que apresentam movimentos rpidos dos fololos devidos a alteraes do grau de turgor das clulas de seus plvinos, localizados na base dos fololos. O fitocromo modula o movimento de entrada e sada de ons K+, controlando, assim, o entumescimento ou o murchamento das clulas. 3. RESPOSTAS FISIOLGICAS RELACIONADAS AO FITOCROMO Existe uma grande variedade de respostas morfo-fisiolgicas de plantas intactas intermediadas pelo fitocromo. Estas respostas dependem da espcie considerada, assim como da qualidade e da quantidade da radiao envolvida (em termos da densidade de fluxo fotnico e do tempo de radiao). Assim, podem ser identificados trs grupos de respostas: 1) respostas a baixas irradincias; 2) respostas a irradincias muito baixas; 3) respostas a irradincias elevadas.

As respostas a baixas irradincias resultam de estmulos partir de 1,0 mol.m2 e correspondem maior parte dos fenmenos fotorreversveis conhecidos. As respostas s irradincias muito baixas so aquelas que ocorrem mesmo sob irradincia de 0,1 nmol.m2 (que corresponde a um dcimo da quantidade de luz emitida por um vaga-lume, num nico flash), como o caso do controle do crescimento do mesoctilo e do coleptile de aveia. As respostas a irradincias elevadas so aquelas que requerem perodos prolongados de exposio (horas) a irradiaes superiores a 10 nmol.m2 e, em geral, no so fotorreversveis. Alguns exemplos deste tipo de resposta encontram-se listados na Tabela 2.
Tabela 1. Respostas fotorreversveis tpicas, mediadas por fitocromo. So respostas a baixas irradincias (a partir de 1,0 mol.m-2).

GRUPO Angiosperma

GNERO Lactuca
(alface)

ESTDIO semente plntula estiolada plntula adulto adulto plntula gametfito jovem

EFEITO DE FVD Promove a germinao Promove desestiolao Formao de primrdios foliares e desenvolvimento das folhas primrias Inibe alongamento dos interns inibe o florescimento aumenta taxa de acmulo de clorofila promove o crescimento promove replicao de plastdios

Avena
(aveia)

Sinapsis
(mostarda)

Pisum
(ervilha)

Xanthium
(cardo)

Gimnosperma Pteridfita Brifita Clorfita

Pinus

Onoclea

Polytrichum protonema

Mougeotia gametfito maduro promove orientao do cloroplasto em direo luz

Tabela 2. Algumas respostas fotomorfognicas induzidas por irradincias elevadas (> que 10 mmol.m-2, durante horas). No so fotorreversveis.

- Sntese de antocianina, em vrias plntulas de dicotiledneas e em segmentos de casca de ma. - Inibio do alongamento de plntulas de mostarda, alface e petnia. - Induo do florescimento em Hyoscyamus. - Alongamento dos cotildones, em mostarda. - Produo de etileno, em sorgo. 4. PERCEPO DE SOMBREAMENTO As propores entre as luzes vermelha e vermelha-distante variam grandemente, em diferentes ambientes naturais (Tabela 3). A luz solar direta tem uma irradincia mdia de 1900 mol.m2.s-1 e cerca de 20% a mais de radiao vermelha que vermelha-distante (razo V/VD = 1,19). Sob a copa de uma rvore, em conseqncia da grande absoro de luz vermelha (pelas clorofilas), a irradincia pode cair para 17,7 mol.m2.s-1 e a razo V/VD cair para 0,13 (indicativa de um grande predomnio de luz vermelha-distante). Assim, a qualidade da luz incidente (razo V/VD) determina a proporo entre FV e FVD presentes em uma determinada planta. Plantas que recebem maior proporo de luz vermelha tero maior quantidade de fitocromo sob a forma FVD. Ao contrrio, com o aumento do sombreamento, a radiao recebida tem uma razo V/VD reduzida e plantas mantidas neste ambiente apresentam maior proporo de seus fitocromos sob a forma FV (razo FVD/Ftotal diminuda). Desta forma, a proporo entre as duas formas de fitocromos serve como indicadora do grau de sombreamento ao qual uma planta est submetida ou do tipo de ambiente em que se encontra. 5. ALTERAES NOS RITMOS CIRCADIANOS O fitocromo est relacionado, tambm, com a regulao de certos ritmos circadianos, assim chamados em funo de sua alternncia e regularidade ao longo de um perodo de 24 horas. Em geral, este tipo de ritmo persiste na ausncia de fatores controladores externos, sendo considerado como endgeno (relacionado com os chamados "relgios biolgicos"). Um bom exemplo o movimento de fechamento e abertura dos fololos, observado em certas leguminosas, cujos fololos se expandem pela manh e se fecham no incio da noite. Em alguns casos o ritmo pode ser alterado por estmulos mecnicos (como o toque), como ocorre na "dormideira" ou "sensitiva". Outra maneira de alterar o ritmo natural circadiano a aplicao de pulsos de luz. Folhas com fololos expandidos, irradiadas com feixe de luz vermelha (durante 2 minutos) e

transferidas para o escuro, respondem fechando os seus fololos. Se a irradiao for de luz vermelha-distante, os fololos permanecem abertos. Quando so utilizados feixes alternados, prevalece o efeito do ltimo feixe. Portanto, tratase de uma resposta tipicamente fotorreversvel, mediada pelo fitocromo, que, neste caso, age interferindo sobre a permeabilidade da plasmalema e o fluxo de ons K+. 6. FITOCROMO E GERMINAO DE SEMENTES A grande maioria das espcies de interesse econmico produz sementes cuja germinao no influenciada pela luz, sendo denominadas de sementes indiferentes. Entretanto, existem sementes que s germinam em presena de luz, sendo denominadas de fotoblsticas positivas ou fotodormentes. Este o caso das sementes de alface, alfavaca e Rumex. A exigncia de luz importante, no caso de sementes muito pequenas e que no podem armazenar grandes quantidades de reserva orgnica. Caso elas germinassem em camadas muito profundas do solo, elas no teriam reservas suficientes para garantir o crescimento at que fosse alcanada a superfcie do solo e as condies para a execuo da fotossntese. Ao contrrio, as sementes de maxixe, hera e Aloe s germinam no escuro, sendo denominadas de fotoblticas negativas. 7 CONTROLE DA FLORAO / FOTOPERIODISMO A transio do desenvolvimento vegetativo para o reprodutivo uma etapa crtica na vida das plantas. Em algumas plantas, como as anuais, a florao pode ocorrer poucas semanas aps a germinao. Entretanto, em plantas perenes, como as espcies florestais, o incio do florescimento normalmente s ocorre aps 20 anos (ou mais) de crescimento vegetativo. As plantas apresentam crescimento vegetativo vigoroso na fase juvenil, formando, continuamente, folhas, caules e razes. Nesta fase, seus meristemas no respondem s condies (internas ou externas) que estimulam o florescimento, sendo, portanto, incapazes de florescer. Ao atingir a maturidade, o florescimento pode ser induzido por condies externas apropriadas. A idade da planta um dos fatores internos que controlam o florescimento. Fatores externos, como o fotoperodo (comprimento do dia) e temperatura (baixa) so os principais sinais do meio ambiente que controlam o crescimento reprodutivo. Estes dois fatores permitem s plantas sincronizar a reproduo, de modo a favorecer o cruzamento, alm de permitir que o florescimento coincida com condies ambientais favorveis (especialmente, disponibilidade de gua e temperatura). Outros fatores do meio ambiente, como a intensidade da radiao ou o estresse hdrico, podem ser importantes modificadores das respostas ao comprimento do dia e baixa temperatura.

As respostas sazonais so possveis porque os organismos vegetais so capazes de "perceber" o perodo do ano em que se encontram, pela deteco do comprimento do dia. As respostas fisiolgicas s variaes do comprimento do dia so denominadas de Fotoperiodismo. A durao do perodo luminoso de um dia denominada fotoperodo, enquanto que o perodo escuro corresponde ao nictoperodo. No controle do florescimento, o mais importante a durao do perodo escuro. Na maioria das plantas, a florao est determinada somente pelo gentipo, no ocorrendo requerimento fotoperidico especfico. Essas plantas so chamadas plantas de dia neutro ou indiferentes, como por exemplo o tomate, o feijo, etc. As plantas fotoperiodicamente sensveis podem ser classificadas como plantas de dia longo (na verdade, plantas de noite curta) e plantas de dia curto (plantas de noite longa). PLANTAS DE DIA CURTO (PDC) As plantas de dia curto florescem quando a durao do perodo luminoso menor que um certo valor crtico (o fotoperodo crtico). Como, na verdade, elas so plantas de noite longa, elas florescem quando o perodo escuro maior que certo valor mnimo (nictoperodo crtico). Como exemplo, podemos citar o fumo, o caf, a soja, o cardo (Xanthium) e o crisntemo. O florescimento no ocorre durante os "dias curtos" (ou noites longas) e, sim, certo tempo aps terem sido submetidas a esta condio indutora. PLANTAS DE DIA LONGO (PDL) Nas plantas de dia longo, a induo floral ocorre quando a durao do perodo luminoso maior que o fotoperodo crtico, ou seja, o perodo escuro menor que certo valor mnimo (nictoperodo crtico). o que ocorre, por exemplo, com a alface, o espinafre, a couve e o repolho. Igualmente, neste caso, a resposta de florao posterior ao tratamento indutor. A resposta das plantas fotoperiodicamente sensveis pode ser quantitativa (ou facultativa) e qualitativa (ou obrigatria). Quando a resposta quantitativa, o nictoperodo crtico aumenta a intensidade da florao. Quando a resposta qualitativa, o nictoperodo crtico essencial para a induo do florescimento (requerimento absoluto).

Uma evidncia de que a durao do nictoperodo o fator determinante da resposta fotoperidica das plantas pode ser obtida pelos experimentos nos quais os perodos claros e escuros tm durao variada, ou o perodo escuro interrompido por fluxos de luz branca (Figura 40). Consideremos, por exemplo, uma planta de dia curto, cujo fotoperodo crtico seja de 10 horas. Ela floresce aps ter sido submetida a perodos luminosos inferiores a 10 horas (ou a perodos escuros superiores a 14 horas, j que ela , na verdade, uma planta de noite longa). Esta planta (de dia curto) floresce, quando submetida, por exemplo, a 8 horas de iluminao diria (portanto, 16 horas de perodo noturno). A interrupo das noites longas, com um feixe de luz branca mantm a planta na sua fase vegetativa. Se o feixe contiver apenas luz vermelha o efeito ser o mesmo da luz branca, mas, se o feixe for de luz vermelha-distante, a planta florescer normalmente, como se a noite no tivesse sido interrompida. Ou seja, um feixe de luz de 730 nm no efetivo em interromper a durao do perodo noturno. 7.1. ESTMULO FLORAL O estmulo floral (comprimento do dia/noite) percebido pelas folhas. Ocorre um evento fotoqumico primrio, controlado pelo fitocromo, que sofre interconverses, passando da forma inativa para a forma ativa (FVD). Por ao do fitocromo ativo, ocorre, nas folhas, a sntese de um sinal (provavelmente um hormnio floral, chamado florgeno) que transportado, via floema, para as gemas (stio de ao), onde ocorre a iniciao floral. A existncia de um sinal transportvel tem sido comprovada atravs de enxertias, embora a natureza qumica do florgeno no tenha sido elucidada, ainda. A sntese do sinal (florgeno) chamada induo floral, enquanto que a iniciao floral estimulada pelo sinal chamada evocao floral.