ENT 107 ENTOMOLOGIA GERAL AULAS PRTICAS

Profs. Brgida Sousa, Alcides Moino Junior e Lus C.P. Silveira COLETA, MONTAGEM E CONSERVAO DE INSETOS 1. OBJETIVO E IMPORTNCIA Esta aula visa fornecer informaes referentes coleta, montagem e conservao de insetos para a coleo didtica da disciplina SAN 115. O uso das normas corretas para estes procedimentos necessrio para identificao futura do inseto e reconhecimento das caractersticas morfolgicas vistas em aula. A coleo proporciona aprendizado do aluno atravs do reconhecimento do habitat, tipo de alimentao, funo das modificaes morfolgicas estudadas e importncia dos diversos grupos de insetos presentes na natureza. 2. CARACTERSTICAS DA COLEO Dever conter, no mnimo, exemplares de 12 ordens identificadas, montadas em alfinetes entomolgicos ou em frascos com lcool 70%, incluindo: - Mnimo de 30 insetos adultos, sendo: - No mnimo 2 e no mximo 4 Lepidoptera (borboletas e mariposas). - Insetos delicados, de tegumento mole (pulges, cochonilhas, tripes, cupins etc): mximo de 3 vidros. - Mnimo de 5 insetos jovens (espcies diferentes, em lcool). - Mnimo de 5 insetos de importncia mdica ou veterinria. TOTAL GERAL: Mnimo de 40 insetos. 3. COLETA DE INSETOS Locais - vegetao rasteira, arbustiva ou arbrea; sobre a superfcie da vegetao ou no seu interior; em flores, frutos e folhas; sobre ou sob o solo; em gros armazenados; no interior de residncias; em criao de animais domsticos; em material orgnico em decomposio; focos de iluminao pblica, na gua etc. Deve-se evitar a coleta de insetos em ambientes preservados, priorizando cultivos agrcolas ou florestais, residncias e cidades. De acordo Almeida et al. (1998) como os insetos so abundantes, a probabilidade de que coletas, mesmo extensas, tenham algum impacto no tamanho das populaes irrelevante. Portanto, os conservacionistas no precisam se preocupar com o rompimento do equilbrio ecolgico pelas coletas comuns. poca - Os insetos so mais abundantes durante a primavera e vero, mas existem espcies que so tpicas de regies ou pocas onde ocorrem baixas temperaturas. De modo geral, chuvas e baixas temperaturas reduzem a atividade de muitos insetos. Hora do dia - existem insetos de hbito noturno, diurno, vespertino e crepuscular. Os insetos noturnos podem ser atrados ou repelidos pela luz.

 Fase de desenvolvimento do inseto - Pode-se coletar insetos adultos, como deve ser a maioria dos insetos da coleo; insetos imaturos como larvas, lagartas e ninfas; ou ainda, criar os insetos jovens alimentando-os at a fase adulta, a fim de acompanhar o seu desenvolvimento. Formas de coleta - os insetos adultos lentos e as formas jovens podem ser coletados manualmente, com o auxlio de pinas; em geral, os insetos adultos e voadores devem ser coletados com auxlio de armadilhas ou outros instrumentos. Importante: - Os insetos devem estar em perfeitas condies, ou seja: com um par de antenas, trs pares de pernas, asas inteiras etc. - Todos os insetos coletados devem receber, no momento da coleta, uma etiqueta contendo local e data da coleta e nome do coletor. - Evitar coletar insetos diretamente com as mos, pois alguns insetos possuem substncias que causam alergia, queimadura ou coceira. 3.1. Instrumentos indispensveis para a coleta Pinas e pincis evitam que o coletor se machuque e que o inseto de corpo frgil se quebre. As pinas podem ser de ponta fina ou arredondada; as mais utilizadas so aquelas usadas por mdicos e dentistas.

Figura retirada de Almeida et al. (1998). Sugador entomolgico este instrumento serve para retirar pequenos insetos da rede entomolgica ou sug-los diretamente da vegetao. Tem a vantagem de poder selecionar os insetos que so de interesse antes da captura.

Figura retirada de Costa e Nardo (1998). 2

Pu ou rede entomolgica utilizada para capturar insetos em pleno vo. confeccionado de tecido fino transparente, o que facilita enxergar o inseto capturado.

Figura retirada de Almeida et al. (1998). Rede de varredura utilizada para capturar insetos que estejam em repouso ou se alimentando sobre a vegetao. muito parecido com o pu, mas confeccionado com tecido de algodo resistente para garantir sua durabilidade, j que ao entrar em contato com a vegetao pode agarrar-se nos galhos, espinhos e folhas. Vidros contendo lcool 70% para receber insetos imaturos (larvas e ninfas) ou insetos adultos de corpo mole (pulges, tripes, cupins etc). Estes insetos so jogados vivos diretamente no lcool 70%, onde permanecero para sua preservao. Se o lcool 96GL, usar 70 cm3 de lcool + 26 cm3 de gua. Frasco mortfero frasco de vidro contendo gs txico (ter, clorofrmio, acetato de etila...). Ideal para matar insetos adultos em geral: moscas, liblulas, besouros, percevejos, formigas, gafanhotos, grilos, abelha, vespas...

- Confeco: utilizado um vidro de boca larga e com tampa, contendo camada de algodo no fundo. O algodo coberto por papelo e este, por papel absorvente. Nas bordas do papelo so feitas aberturas para passagem do gs letal. A substncia mortfera deve ser reposta periodicamente e colocada de modo a escorrer pelas laterais do vidro sem molhar a superfcie do papelo. Pode conter tiras de papel para evitar danos aos insetos em contato com a parede do frasco. - Substncias mortferas: ter, clorofrmio, acetato de etila. - Observaes: No deixar o frasco sem a tampa porque o lquido evapora com facilidade. No acumular muitos insetos no vidro para estes no serem danificados uns pelos outros. Evitar o uso do frasco mortfero para matar insetos com asas frgeis como borboletas e mariposas. Nunca aspirar o contedo do frasco mortfero para tentar reconhecer a substncia ou sua quantidade. Pode ser perigoso para humanos. Algumas destas substncias so altamente inflamveis, devendo portanto ter o cuidado de no se aproximar do fogo. O tempo de permanncia dos insetos no frasco mortfero deve-se restringir ao mnimo necessrio para que ocorra a morte dos exemplares, pois alguns agentes qumicos podem alterar ou mesmo descolorir os insetos. Envelopes de papel como os lepidpteros no devem ser mortos no frasco mortfero, o ideal transport-los vivos em envelopes triangulares de papel at que possam ser mortos de maneira adequada. Sua confeco simples e o lepidptero deve ficar dentro do envelope com suas dobradas.

Figura retirada de Almeida et al. (1998). Caixas de papelo e vidros vazios Serviro para acondicionar temporariamente ou transportar insetos mortos ou vivos at um lugar adequado para mat-los. Devem ser de tamanhos diversos e estar sempre mo no caso do inseto surgir de surpresa, sem que a busca tenha sido planejada. Tambm devem fazer parte do material utilizado em expedies com objetivo de captura de insetos para a coleo, uma vez que deve-se evitar o acmulo de insetos em um s lugar para no estrag-los.

3. Armadilhas para a coleta de insetos Armadilha luminosa captura insetos noturnos que so atrados pela luz, batem nas aletas laterais e so presos em recipiente telado aps passar pelo funil.

Figura retirada de Almeida et al. (1998). Armadilha de solo captura insetos que caminham sobre o solo. Podem ou no conter isca atrativa. O recipiente de coleta enterrado at coincidir com a superfcie no solo. No seu interior, coloca-se gua + algumas gotas de detergente para quebrar a tenso superficial da gua + um conservante (formol, hidrato de cloral).

Figura retirada de Almeida et al. (1998) Funil de Berlese usado para coleta de pequenos insetos que vivem debaixo rvores e na primeira camada do solo. Consiste em um funil de cerca de 50 cm de altura que fica apoiado sobre um frasco contendo lcool 70%. Sobre a sua extremidade maior apoiada uma tela de malha fina onde se colocada o material recolhido no campo (material orgnico em decomposio, folhas, galhos e solo). Sobre estes fica uma lmpada acesa. Os insetos ali presentes so fototpicos negativos e, fugindo da luz, caem no recipiente coletor contendo lcool 70%.

Figura retirada de Almeida et al. (1998). Armadilha para insetos noturnos Uma lmpada acesa sobre um tecido ou parede branca atrai insetos noturnos que podero ser capturados com pina ou sugador entomolgico.

Figura retirada de Almeida et al. (1998).

Frasco caa-mosca so frascos de vidro ou plstico (podem ser confeccionados com garrafas do tipo PET), com pequenas aberturas laterais de forma afunilada e que contm substncia atrativa no seu interior. Para mosca-das-frutas utiliza-se caldo de frutas doces, melao, glicose etc., com concentraes que variam de 1 a 3%. Para mosca-domstica ou varejeira, utiliza-se carne, peixe ou frutas em decomposio. Bandejas coloridas - so bandejas fundas pintadas de cor atrativa para os insetos-alvo (amarelo atrativo para grande parte dos insetos). No seu interior coloca-se gua e algumas gotas de detergente (para quebrar a tenso superficial da gua). Os insetos que ali pousar morrero por afogamento.

4. Sacrifcio dos insetos Gases txicos servem para matar grande parte dos insetos capturados: besouros, vespas, abelhas, percevejos, formigas etc. ter e formoldedo so bastante utilizados. lcool 70% - utilizado para sacrificar insetos adultos de corpo mole e insetos jovens em geral (sobretudo ninfas), que so colocados vivos em frascos contendo lcool 70%. O lcool vendido no comrcio encontrado em duas concentraes: 70% e 96%. Para o segundo, pode-se preparar o lcool 70% com 70 ml de lcool 96% diludos em 26 ml de gua. gua quente serve para matar lagartas (fase jovem de borboletas e mariposas). Estas devem ser colocadas vivas em gua quente (antes do ponto de ebulio), com o fogo desligado e deixadas por aproximadamente dois minutos. Se estas forem sacrificadas no frasco mortfero ou lcool diretamente podem perder a colorao. Congelamento - Os insetos so colocados, dentro dos frascos de vidro ou plstico, no congelador ou freezer domstico, permanecendo ali de 24 horas at por vrios dias. O nico cuidado quanto umidade: se for baixa, os insetos muito secos dificultam a alfinetagem, se for elevada provoca condensao de gua e os insetos podem mofar aps a alfinetagem. Para evitar problemas aconselhado que se coloque papel absorvente entre os insetos e o fundo do recipiente, e no se estenda o perodo de armazenamento, montando-se em alfinetes assim que possvel. Casos Especiais: Lepidpteros as mariposas de corpo volumoso podem ser mortas com um aperto lateral no trax. As lagartas podem ser mortas com injeo de gotas de xilol opu formol (com seringas e agulhas hipodrmicas) no corpo.

5 . Montagem a) Depois que os insetos esto mortos o ideal que sejam montados o mais rpido possvel. b) Se os insetos j estiverem endurecidos, tornar-se-o quebradios e difceis de manipular. Assim, estes devem permanecer em cmara mida at que possam ser alfinetados e seus apndices posicionados de forma correta. Cmara mida consiste em um recipiente com abertura larga e tampa de boa vedao. No fundo deste recipiente coloca-se uma camada de areia fina mida e pequenos pedaos de naftalina, para que no haja proliferao de fungos. Sobre a areia, coloca-se papel de filtro onde sero arranjados os insetos para que amoleam. O tempo necessrio para hidratao do inseto depende do seu tamanho e da temperatura ambiente. Pode variar de poucas horas a dias. c) Os exemplares da coleo devero ser alfinetados somente com alfinete entomolgico, que so de ao e no enferrujam, so flexveis e com comprimento e espessura variados. O tamanho dos alfinetes varia de 000, 00, 0, 1 (os mais finos), at 7 (os maiores e mais grossos). d) Posio do alfinete: de modo geral, o alfinete inserido verticalmente entre o primeiro e segundo par de pernas, de modo que fique em um ngulo de 90 em relao ao eixo longitudinal do corpo do inseto. Cada grupo de insetos tem uma posio especfica. Todos os exemplares devem ser posicionados a uma mesma altura, no mximo 1,0 cm abaixo da cabea do alfinete. O uso de blocos de madeira com alturas determinadas auxiliam essa tarefa, bem como a altura das etiquetes que acompanham os exemplares. Como a perfurao do corpo do inseto pelo alfinete sempre causa algum dano ao exemplar, o ideal que a insero do alfinete se d ligeiramente deslocada para a direita, pois como estes tem simetria bilateral, as estruturas do lado esquerdo permanecero inteiras.

Figura retirada de Almeida et al. (1998).

Posio do alfinete no corpo de insetos de algumas ordens: A. Orthoptera; B. Hemiptera-Homoptera; C. Hemiptera-Heteroptera; D. Coleoptera; E. Lepidoptera; F. Diptera.

Insero correta e incorreta do alfinete no corpo do inseto. (Figuras retirada de Almeida et al.,1998).

e) Posio dos apndices: deve facilitar a futura identificao. Pernas - o primeiro par deve ficar voltado para frente, o segundo e terceiro pares, voltados para trs. Esta posio conseguida atravs da utilizao de alfinetes comuns (de costura) cruzados sobre isopor, que so deixados por mais ou menos uma semana, at que o exemplar seja fixado na posio desejada. Em lepidpteros no preciso se preocupar com a posio das pernas. Antenas - Devem permanecer voltadas para frente. No caso de antenas muito longas, estas devem ficar voltadas para trs, contornando o corpo do inseto.

Figura retirada de Almeida et al. (1998). Asas - A grande maioria dos insetos pode permanecer com as asas fechadas, cobrindo o abdome. Entretanto, as borboletas, mariposas e liblulas devem ter as asas abertas facilitando a visualizao das nervuras, imprescindveis para sua identificao. Para Lepidoptera podem ser utilizados esticadores de madeira ou isopor. Neste caso, as asas anteriores devem formar um ngulo de 90 com o corpo do inseto e as posteriores, estarem bem prximas das primeiras, sem espao entre elas. Para conseguir a fixao nesta posio, utiliza-se tiras de papel ou plstico presas com alfinete de costura ao redor das asas. Esticadores (27) e passos (28A, B, C) utilizados para deixar as asas de lepidpteros na posio correta.

Figuras retiradas de Almeida et al. (1998).

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f) Insetos muito pequenos para serem alfinetados devem ser montados em tringulos de cartolina (dupla montagem). Os tringulos devem ser brancos e medir 2 mm na base por 6 mm comprimento (usar alicate apropriado para cort-lo do tamanho certo). O alfinete deve perfurar a base do tringulo e o inseto deve ser colado com esmalte de unha na extremidade. Preferencialmente, deve-se utilizar trs tringulos em um s alfinete, cada um contendo um exemplar da mesma espcie de inseto colado em posio diferente: ventral, dorsal e lateral. Se tiver apenas um exemplar da espcie, col-lo em posio lateral. Dupla montagem de insetos de pequeno porte com microalfinete (29) e com tringulo de cartolina (30). Figura retirada de Almeida et al. (1998). 6. Etiquetagem Todos os insetos de uma coleo, armazenados em via seca ou mida, devem conter etiquetas (tamanho varivel de 15 a 20 mm de altura por 5 a 10 mm de largura), de cor branca, escritas com tinta nanquim, a lpis ou impressas em impressora jato de tinta (para obter um modelo de etiqueta padro consulte aula prtica 01). Se o inseto for conservado em via lquida, a etiqueta deve ser escrita a lpis ou com tinta idelvel. Os insetos de um museu possuem duas etiquetas: uma de procedncia, outra de identificao. Na coleo didtica para o curso da UFLA, esta etiqueta dispensada, pois os insetos da coleo vo estar reunidos na caixa de acordo com a ordem a que pertencem, tendo acima do grupo uma s etiqueta com o nome da ordem. - A primeira etiqueta a ser colocada a de procedncia, que deve conter: Cidade, estado, pas. Ex.: Lavras, MG, Brasil Data, com ms em algarismo romano. Ex.: 20/XII/2001 Nome do coletor, seguido dessa palavra abreviada. Ex.: Carvalho, A.R. col. - A segunda etiqueta, a de identificao, deve conter a informao que se tem sobre o exemplar coletado, ou seja, nome da ordem, da famlia, gnero ou espcie. ETIQ. DE COLETA
Lavras, MG 25/IV/2007 Silveira, LCP col.

ETIQ. DE IDENTIFICAO
Ordem Famlia/nome comum planta

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Nos insetos alfinetados, as etiquetas devem ser colocadas de forma que fiquem paralelas ao corpo do inseto, a uma altura uniforme no alfinete. Para isso pode-se utilizar o bloco de madeira para padronizar as alturas. Devem ser orientadas de maneira que as informaes ali contidas possam ser lidas todas do mesmo lado. Nos insetos preservados em lcool, a(s) etiqueta(s) deve(m) ser colocada(s) dentro do vidro. Observao: as informaes contidas nas etiquetas devem ser precisas e reais. Segundo Almeida et al. (1998), na ausncia de informaes corretas do local de coleta ou em casos de erros na atribuio de informaes aos exemplares (por exemplo, troca de etiquetas), inmeras concluses taxonmicas, sistemticas, biogeogrficas e evolutivas equivocadas podem ser inferidas. 7. Preservao Via seca - caixas de madeira ou papelo, com fundo de isopor ou EVA, contendo naftalina ou paraformaldedo. A naftalina em bolas deve ficar presa a um alfinete para no rolar e destruir os insetos da caixa. Para isso necessrio esquentar a ponta mais larga do alfinete antes de introduzi-lo na bola de naftalina. Deve-se tomar cuidado com o excesso de umidade do ambiente, assim como o ataque de formigas e outros insetos. A luz pode mudar a colorao dos exemplares. Obs: Mariposas de abdome volumoso depois de mortas so fixadas com injeo de formol no abdome, pois a desidratao demorada, havendo decomposio dos tecidos internos, s vezes resultando na perda do exemplar. Insetos mofados limpar com cotonete embebido em soluo de xilol + ter Via lquida Os insetos adultos de corpo mole e os insetos jovens sero preservados em lcool 70%. Se a inteno que permaneam preservados por muito tempo (durante anos), os 12 vidros menores devero ser colocados dentro de vidros maiores contendo tambm lcool 70%, pois a evaporao um risco constante. Deste modo, a evaporao acontecer apenas nos vidros grandes, facilitando a reposio do lcool. Assim como o insetos preservados em via seca, os insetos preservados em lcool 70% correm o risco de perder a colorao se expostos a luz. Portanto devem ser guardados em caixas ou armrios. 8. Confeco da coleo - podem ser utilizadas caixas de camisa, devidamente embrulhadas com cor de sua preferncia. Voc tambm pode fazer sua caixa com papel carto; - o isopor do fundo da caixa pode ser recoberto com papel sulfite, de seda ou manteiga, para melhorar a aparncia; - no dia da entrega, retire o conservante que tiver utilizado (naftalina, formol, etc.); - organize as ordens de insetos dentro da caixa de maneira que fiquem bem distribudas (Figura 1), mas nunca como no segundo exemplo (Figura 2); - para colocar os frascos de vidro, aquea o fundo e afunde no isopor, que ficar moldado com o formato do frasco. Os frascos podem tambm ser entregues numa caixa parte, devidamente identificada.

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Figura 1. Exemplos de coleo nota 95

Figura 2. O que no fazer: esta coleo foi entregue conforme podemos ver, ou seja, sem tampa, e com os insetos nesta posio. Nota 20.

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Bibliografia Almeida, L.M.; Ribeiro-Costa, C.S; Marinoni, L. 1998. Manual de Coleta, Conservao, Montagem e Identificao de Insetos. Ribeiro Preto, Ed. Holos, 78p. Borror, D.J.; DeLong, D.M. 1969. Estudo dos Insetos. So Paulo, Ed. Edgard Blcher, 653. Costa, V.A.; Nardo, E.A.B. 1998. Curadoria de Colees de Himenpteros Parasitides Manual Tcnico. Jaguarina, Embrapa-CNPMA, 76p. Gallo, D. et al. 2002. Entomologia Agrcola. Piracicaba, Fealq, 920p.

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