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A TEORIA CELULAR
As clulas foram descobertas em 1663 pelo ingls Robert Hooke. Ao examinar em um microscpio rudimentar, uma lmina de cortia, Hooke verificou que ela era constituda por cavidades polidricas, s quais chamou de clulas (do latim cella, pequena cavidade). Na realidade Hooke observou blocos heradecimais que eram as paredes de clulas vegetais mortas. A teoria celular foi formulada em 1839 por Schleiden e Schwann que concluiram que todo ser vivo formado por clulas. A palavra clula vem do latim: cellula (quarto pequeno). O nome descrito para a menor estrutura viva foi escolhido por Robert Hooke. Em um livro que publicou em 1665, em que comparou as clulas da cortia, com os pequenos quartos onde os monges viviam.

TIPOS DE MICROSCPIOS
Microscpio ptico (Luz) Microscpio de Fluorescncia Comum Microscpio de Fluorescncia Confocal Microscpio de Contraste de Fase e Interferncia de Nomarski Microscpio de Polarizao Microscpio Eletrnico de Transmisso Microscpio Eletrnico de Varredura Microscpia Crioeletrnica

MICROSCPIOS PTICOS SIMPLES E COMPOSTOS

Um microscpio ptico pode ser simples ou composto: o microscpio simples possui uma nica lente e s fornece uma imagem moderadamente aumentada do objeto que se est estudando; o microscpio composto consiste de uma srie de lentes e fornece um aumento muito maior. O Microscpio ptico um instrumento usado para ampliar, com uma srie de lentes, estruturas pequenas (vias e mortas) impossveis de visualizar a olho nu. constitudo por um componente mecnico e eltricos que suportam e permitem controlar um componente ptico que amplia as imagens.

1. Ocular 2. Objetivas e revlver 3. Platina 4. Charriot 5. Macromtrico 6. Micromtrico 7. Diafragma e condensador 8. Espelho 9. Brao 10. Base

MICROSCPIOS PTICOS COMPOSTOS

MICROSCPIOS PTICOS

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MICROSCPIOS ELETRNICO DE FLUORESCNCIA COMUM

Certas substancias gozam da propriedade de emitir luz quando excitadas por radiaes de certos comprimentos de ondas (normalmente ultravioleta),podendo combinar-se a certas substancias presentes nas clulas permitindo a localizao de determinadas estruturas. A aplicao destas substancias como corantes esto hoje, esto fortemente ligados com mtodos imunocitoquimicos, os quais permitem localizar e quantificar o caminho percorrido de molculas especficas dentro do tecido em questo. Exemplo quando injeta-se no tecido animal antgeno com colorao influorescente, este se ligar no rgo em questo ao seu anticorpo especfico, assim o local de ao de onde se encontra o anticorpo d para ser encontrado. A tcnica usa agentes qumicos que emitem luz visvel que pode ser verde, laranjada ou vermelho. Uma vantagem da microscopia de fluorescncia que podem ser aplicados a clulas vivas para se determinar a concentrao intracelular de ons de Ca+ e H+ podendo ser utilizado como forma de monitoria do pH de clulas vivas.

MICROSCPIOS ELETRNICO DE FLUORESCNCIA COMUM

MICROSCPIOS ELETRNICO DE FLUORESCNCIA CONFOCAL

A microscopia de imunofluorescncia tem suas limitaes, uma delas a superposio de imagens fluorescentes de molculas, tornando difcil determinar o real arranjo molecular tridimensional. O microscpio de fluorescncia confocal evita esse problema permitindo a visualizao da imagem muito mais precisa. Aqui as clulas so submetidas a compostos fluorescentes e as imagens so derivadas da luz excitatria de um feixe de laser que sero registradas por uma cmara de vdeo e armazenadas em um computador.

MICROSCPIOS ELETRNICO

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MICROSCPIO DE CONTRASTE DE FASE E INTERFERNCIA DE NOMARSKI

A microscopia de contraste de fase especialmente til no exame da estrutura e de movimento de organelas maiores como o ncleo e mitocondrias de tecidos vivos, transparentes e no-corados. Ela gera uma imagem com diferentes graus de obscuridade ou luminosidade. A microscopia de interferncia de Nomarski, ou diferencial evidencia apenas os contornos de grandes organelas como o ncleo e o vacolo. As duas tcnicas utiliza ndices de refrao e difrao para formar uma imagem. Obserque que a microscopia de interferncia de Nomarski ou diferencial gera uma imagem parecendo que o espcime est projetando uma sombra para um dos lados: a sombra basicamente representa uma diferena no ndice de refrao. Tanto a microscopia de contraste de fase como a microscopia de interferencia de Nomarski podem ser utilizadas na microscopia de lapso de tempo em que a mesma clula fotografada a intervalos regulares ao longo de perodos que duram vrias horas. Esse procedimento permite ao observador estudar o movimento celular, desde que a platina do microscpio possa controlar a temperatura do espcime e o ambiente.

MICROSCPIO DE CONTRASTE DE FASE E INTERFERNCIA DE NOMARSKI

MICROSCPIO DE CONTRASTE DE FASE E INTERFERNCIA DE NOMARSKI

O microscpio de polarizao semelhante a microscpio de luz, acrescido de dois prismas ou dois discos polarides, que permitem estudar certos aspectos da organizao molecular dos constituintes celulares. Ao atravessar a clula o feixe de luz pode passar por estruturas cristalinas ou molculas alongadas e paralelas dividem o feixe polarizado denominando as estruturas de birrefringentes ou anisotrpicas. As estruturas celulares que no apresentam tal organizao no modificam o plano de polarizao da luz e so ditas isotrpicas O microscpio de polarizao serve para individualizar a estrutura que se quer analisar.

Microscopia de luz polarizada. Um fragmento de mesentrio do rato foi corado com o mtodo de picro-sirius, que cora fibras de colgeno. O mesentrio foi colocado sobre a lmina e observado por transparncia. Sob luz polarizada, as fibras de colgeno exibem intensa birrefringncia e aparecem brilhantes ou em amarelo. Aumento mdio. Imagem retirada do Livro: JUNQUEIRA & CARNEIRO, Histologia Bsica, 10 ed., Ed.Guanabara Koogan (Pg. 5 - Fig. 1.4)

MICROSCPIOS ELETRNICO DE TRANSMISSO

Enquanto o microscpio de luz utiliza ftons como a radiao visvel para observao do material celular, o microscpio eletrnico, por sua vez emprega feixes de eltrons. Estes aps atravessarem a clula chegam a uma tela fluorescentes onde formam uma imagem visvel sobre uma chapa fotografica que depois sero reveladas podendo ser ampliadas 2 a 4 vezes, sendo chamadas de micrografias. Os eltrons desviados por certas estruturas da clula no contribuiro para formar a imagem e aparecem escuras e so chamadas de eletron-densas. Os componentes celulares que desviam uma pequena percentagem de eltrons aparecero em diversas tonalidades de cinza. As tcnicas de colorao empregadas para observao nestes tipos de microscpio so metais pesados como o ouro, o smio, uranio e chumbo. Hoje limite de resoluo de um microscpio eletronico de transmisso 40.000 vezes melhor do que a resoluo do microscpio ptico e 2 milhes de vezes melhor que a resoluo do olho humano. No entanto no se possvel ainda aproveitar inteiramente a capacidade resolutiva dos melhores microscpios eletrnicos assim ele passa somente a ter 2.000 vezes melhor resoluo dos microscpios tico.
FONTE: http://www.ufmt.br

MICROSCPIOS ELETRNICO DE TRANSMISSO

MICROSCPIO ELETRNICO DE VARREDURA

uma tcnica que permite a visualizao das superfcies de espcimes no seccionados. A amostra fixada, dessecada e revestida com a camada fina de um metal pesado. A micrografia obtida tem um aspecto tridimensional. O poder de resoluo dos microcpios eletrnicos de varredura limitado pela espessura do revestimento metlico utilizado e muito menor que o poder de resoluo dos instrumentos de transmisso.

MICROSCPIO ELETRNICO DE VARREDURA

Permite o exame de espcimes biolgicos hidratados, no fixados e no corados diretamente no microscpio eletrnico de transmisso, fato que no ocorre em microscopia eletrnica convencional que em particular pela ausncia de gua faz com que macromolculas fiquem desnaturadas e no funcionantes. Para se preservar essa estrutura no entanto o material congelado em nitrognio lquido a uma temperatura de (196C) impedindo assim evaporao.

MICRTOMO
Micrtomo o aparelho que faz cortes microscpicos (variando geralmente de 1 10 micrmetros) em pequenas amostras de tecidos emblocadas em resinas especficas(parafina,...) para anlise em microscpio ptico.
FONTE: http://pt.wikipedia.org

NERVO NORMAL INCLUDO EM PARAFINA CORTE TRANSVERSAL DE 6 mm, HE.

RADIOISTOPOS OU RADIOAUTOGRAFIA
Um radioistopo ou istopo radioativo se caracteriza por apresentar um ncleo atmico instvel que emite energia quando se transforma num istopo mais estvel. A energia liberada na transformao pode ser detectada por um contador Geiger, com uma pelcula fotogrfica ou com uma cmera de ionizao. Os istopos radioativos tem aplicaes em medicina e, em outras reas, como na datao radiomtrica. Por exemplo, o istopo radioativo tlio pode identificar vasos sanguneos bloqueados em pacientes sem provocar algum tipo de dano. O carbono14 pode ser utilizado na datao de fsseis. Um radioistopo pode ser natural ou sinttico.
FONTE: http://pt.wikipedia.org e http://contanatura.weblog.com.pt

Imagem mostra a parte posterior de um embrio de Drosophila melanogaster 3 horas aps fertilizao. A vermelho as clulas que, futuramente e aps migrarem at s gnadas, formaro as clulas germinais. A azul um marcador das membranas das clulas. E a verde uma protena nuclear com nveis mais baixos perto das clulas marcadas a vermelho e mais altos medida que se afasta deste polo do embrio. Fotografia de Oliver Grimm.

Srie de imagens de um embrio de Drosophila melanogaster a 4 horas aps a fertilizao. A vermelho as clulas germinais e a azul todas as clulas do embrio. Fotografia (artstica) de Oliver Grimm.

CENTRIFUGAO
uma tcnica que separa partculas em suspenso (clulas, organelas ou molculas) de acordo com as diferentes massas ou densidades. Ela acelera a sedimentao submetendo as partculas em suspenso fora centrfuga at 600.000 vezes a fora da gravidade g. usada para separar um tipo de material de outros e como tcnica analtica para medir propriedades fsicas (por ex. peso molecular, densidade, forma e constante de ligao e de equilbrio) de macromolculas. Existem dois tipos de centrifugao: Centrifugao diferencial Centrifugao em gradiente de densidade

FRACIONAMENTO CELULAR
um conjunto de procedimentos que levam separao das organelas celulares, para estudos especficos, como por ex. determinar uma protena de uma organela especfica. Primeiramente faz-se a homogeneizao do tecido em soluo isotnica de sacarose, que permite o rompimento da membrana plasmtica, mas evita o estrago das organelas, e o rompimento da membrana destas organelas ocorrem por choque osmtico, ultra-som ou passando a suspenso das organelas por pequenos orifcios, para estudo dos seus componentes.

CITOQUMICA
a rea da biologia celular e estrutural dedicada aos estudos dos mtodos de colorao dos tecidos e constituintes celulares, preparando-os no somente com os princpios qumicos das reaes de colorao, mas tambm com os procedimentos protocolares para obteno de materiais a serem avaliados aos microscpios. A coleta do material, a fixao e os fixadores usados, so procedimentos que antecedem e so fatores que influenciam no resultado final da reao. A reao citoqumica especfica para o composto celular, que podem ser:
Os cidos nuclicos - reao de Feulgen. Os polissacardeo e oligossacardeo PAS. Os lipdios Sudan IV, Sudan back e Azul de Toluidina. Os ons - reaes qumicas. Protenas fosfatases. Citoqumica ultra-estrutural - sais de metais pesados.

IMUNOCITOQUMICA
uma reao altamente especfica porque envolve interao entre as molculas do antgeno e do anticorpo. Geralmente utilizada para marcao de ncleo. Para serem localisados os anticorpos precisam de marcadores que determinam sua localizao que pode ser visto imediatamente (imunocitoqumica direta). Quando se usa um anticorpo secundrio para evitar a perda de anticorpos destinados localizao dos antigenos chama-se imunocitoqumica indireta. Os cidos nuclicos - reao de Feulgen.

Fotomicrografia de uma clula decidual de camundongo cultivada in vitro. A protena demina, que forma filamentos intermedirios que fazem parte do citoesqueleto, foi detectada com uma tcnica de imunofluorescncia (imunocitoqumica) indireta. Uma malha de filamentos intermedirios fluorescentes ocupa a maior parte do citoplasma. O ncleo (N) est corado de azul. Aumeto grande. Imagem retirada do Livro: JUNQUEIRA & CARNEIRO, Histologia Bsica, 10 ed., Ed.Guanabara Koogan (Pg. 19 - Fig. 1.25)

TIPOS DE CLULAS
Tempo de vida das clulas O tempo de vida de uma clula pode variar conforme a espcie. No ser humano, existem clulas que vivem apenas alguns dias, e outras que podem acompanhar o indivduo por toda a vida. Quanto a longevidade das clulas, estas podem ser classificadas em lbeis (curta durao), estveis (duram meses ou anos) ou permanentes (duram toda a vida). As clulas lbeis so pouco diferenciadas e possuem grande capacidade de duplicao, como por exemplo, as hemcias. O tempo de vida de uma hemcia de aproximadamente 90 dias. As clulas estveis se multiplicam durante o crescimento do organismo, um exemplo dessas clulas so as epiteliais. Diferente das clulas lbeis e estveis, as clulas permanentes possui grande capacidade de diferenciao e se multiplicam apenas na fase embrionria.

CLULAS LBEIS

GAMETAS MASCULINO E FEMININO

HEMCIAS

CLULAS ESTVEIS

TECIDO EPITELEIAL TECIDO EPITELIAL - NASAL

TECIDO ADIPOSO

CLULAS PERMANENTES

TECIDO MUSCULAR ESTRIADO CARDACO

NEURNIOS

OBRIGADO