ASO LTEX DIRETO L/B

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1. FINALIDADE
Teste de aglutinao para determinao qualitativa e quantitativa da
Antiestreptolisina-O (ASO) no soro sem diluio.

2. INTRODUO
Uma das toxinas produzidas pelo estreptococo beta-hemoltico a Estreptolisina-O,
descrita por Todd em 1932, que possui ao antignica induzindo o organismo a
produzir a Antiestreptolisina-O (ASO). O teste em lmina usando partculas de ltex
uma alternativa ao uso das tcnicas de hemlise, fornecendo resultados em 3
minutos.

3. IMPORTNCIA CLNICA
Vrios processos infecciosos so associados aos estreptococos beta-hemolticos,
entre os quais amigdalite, erisipela, febre puerperal e outras, sendo que existem
seqelas de tais doenas que podem levar at incapacitao, como o caso da
febre reumtica. Assim, com os dados fornecidos pela pesquisa da ASO em conjunto
com o exame clnico e outros exames laboratoriais como hemograma e VHS, pode-
se diagnosticar corretamente uma infeco estreptoccica.

4. AMOSTRA
a- Preparo do paciente
Apesar do jejum prvio no ser necessrio, recomenda-se que o paciente seja
instrudo para manter o jejum prvio de 8-12h, para evitar uma possvel ocorrncia de
fenmenos interferentes tais como a lipemia.

b- Tipos de amostra
A amostra para a prova o soro (no usar plasma) recm-obtido, separado o mais
rapidamente possvel aps a coleta, isento de hemlise ou lipemia.

c- Armazenamento e estabilidade
Entre a coleta e a execuo da anlise, a amostra deve ser armazenada em
geladeira (2-8
o
C) , mantendo-se estvel por at 2 dias (ou 24h na temperatura
ambiente), desde que no haja contaminao microbiana. Para manter por perodos
maiores, recomenda-se congelar a amostra abaixo de -10
o
C.

d- Critrios para rejeio
As amostras que se apresentarem hemolisadas, lipmicas, ou com indcios de
contaminao microbiana devero ser rejeitadas.

e- Precaues e cuidados especiais
- Evitar repetidos congelamentos e descongelamentos da amostra;
- Todas as amostras devem ser manipuladas com extrema cautela, pois podem
veicular diversas doenas infecto-contagiosas (hepatite, SIDA etc.). Seu descarte
deve ser feito preferencialmente aps sua autoclavao devendo-se evitar sua
eliminao diretamente no meio ambiente. Igual cuidado se recomenda no descarte
de outros materiais como ponteiras plsticas, agulhas e seringas.

5. INFORMAES GERAIS SOBRE O PRODUTO

a- Princpio de tcnica
O soro em anlise colocado em contato com um reagente que contm partculas de
ltex revestidas com Estreptolisina-O. A ASO se presente na amostra, provoca a
aglutinao visvel a olho nu das partculas do ltex. A reao pode ser tanto
qualitativa como quantitativa (atravs da tcnica de diluio da amostra).

b- Reagentes

- Reagente do Ltex: contm partculas de poliestireno ltex a 0,1%, revestidas com
Estreptolisina-O de modo a dar sensibilidade de 200 UI/mL, suspensas em tampo
glicina pH 8,2, contendo ainda azida sdica a 0,1% como preservativo. Frascos de 2
ou 4 mL;

- Controle ASO Positivo: Soro humano contendo ASO acima de 200 UI/mL e azida
sdica a 0,1% como preservativo, pronto para uso. Frascos de 1 mL;

- Controle ASO Negativo: Soro humano normal contendo menos de 200 UI/mL de
ASO e azida sdica a 0,1% como preservativo, pronto para uso. Frascos de 1 mL.

- Tampo glicina concentrado 20 vezes: soluo salina-glicina tamponada (contm
cloreto de sdio a 0,9% e glicina 1%), que depois de diluda a 1:20 apresenta um pH
final 8,2 e contendo 0,1% de azida sdica como preservativo. Frasco de 10 mL.

OBS: Os controles positivo, negativo e tampo glicina acompanham apenas os
produtos de cdigo 551018 e 551020.

c- Armazenamento e estabilidade
Para fins de transporte o conjunto pode ser mantido em temperatura ambiente por at
3 dias. No laboratrio deve ser armazenado em geladeira (2-8C) aonde permanece
estvel at a data de validade impressa em rtulo desde que isento de contaminao
qumica ou microbiana. No congelar nenhum dos componentes do conjunto.

d- Precaues e cuidados especiais
- Os reagentes destinam-se exclusivamente ao uso diagnstico in vitro, no devendo
ser ingeridos ou entrar em contato com a pele e mucosas;
- Deve-se manipular os reagentes com cautela no sentido de se evitar sua
contaminao qumica ou biolgica;
- Os controles foram testados para a presena de anticorpos anti-HIV e HbsAg,
porm, recomenda-se sua manipulao com a maior cautela possvel;
- Os reagentes por conterem azida sdica em sua composio, no podem entrar em
contato com metais (como existente em alguns tipos de tubulao), pois h risco de
exploso (formao de azidas metlicas); quando de seu descarte, usar gua em
abundncia.


6. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSRIOS (porm no includos)
- Pipetas graduadas;
- Tubos de ensaio 12x75 mm;
- gua destilada ou deionizada com condutividade inferior a 0,5 S/cm;
- Fonte de luz branca incidente;
- Lmina de vidro com fundo preto com 6 delimitaes (551017).

7. PROCEDIMENTO TCNICO
7.1 Prova qualitativa (triagem)
a- Deixar que os reagentes e amostras adquiram a temperatura ambiente;
b- Adicionar uma gota (0,05 mL) da amostra e uma gota dos controles positivo e
negativo (0,04 mL) nas delimitaes da lmina de vidro;
c- Agitar vigorosamente o reagente Ltex (em vrtex ou batendo contra a palma da
mo 10-15 vezes), e adicionar uma gota (0,04 mL) deste a amostra e controles,
homogeneizando a seguir com os bastes prprios;
d- Agitar em agitador mecnico tipo Kline ou similar (cerca de 80 a 100rpm) por 2
minutos;
e- Resultados: observar a lmina sob uma fonte de luz branca incidente, a olho nu,
procurando uma aglutinao das partculas do ltex, caracterizando assim a amostra
como contendo ASO em concentrao superior a 200 UI/mL, do contrrio, no
ocorrendo aglutinao das partculas de ltex, considera-se a concentrao de ASO
na amostra como inferior a 200 UI/mL.

7.2 Prova quantitativa
a- Em um tubo de ensaio, misturar 0,5 mL de soro e 0,5 mL de tampo glicina diludo
(esta ser a diluio 1:2 que corresponder a 400 UI/mL de ASO);
b- Identificar 3 tubos de ensaio e proceder conforme abaixo:

Diluio
1/2
Tampo
Glicina
Diluio obtida UI/mL
0,1 mL 0,05 mL 1:3 600
0,10 mL 1:4 800
0,15 mL 1:5 1000

c- Testar as diluies (1:2 a 1:5) conforme o disposto na tcnica qualitativa,
substituindo as amostras pelas diluies;
d- Resultado: o ttulo considerado como a recproca da maior diluio que
apresentar reao positiva (aglutinao visvel a olho nu). Se por exemplo houve
aglutinao nos 2 primeiros tubos (1:2 e 1:3) o ttulo ser 1:3, e o soro conter 600
UI/mL de ASO.

ATENO: Os conta-gotas do reagente ltex e dos controles dispensam 0,04mL
(40L) por gota, mas o usurio pode a seu critrio, visando aumentar o rendimento
do material, utilizar gota de 0,020 mL (20L) dos controles e do reagente ltex para
realizar as reaes, medida atravs de pipetadores apropriados. Recomendamos
que para tal finalidade sejam usadas apenas ponteiras descartveis a fim de se evitar
a contaminao dos reagentes e controles.

7.3 - Precaues e cuidados especiais
- Homogeneizar corretamente o ltex antes de executar a prova;
- A rotao da lmina muito rpida pode ocasionar a ruptura das ligaes entre a
ASO da amostra e as partculas de ltex do reagente causando resultados falso
negativos;
- Para diluio de amostras usar apenas o tampo glicina;
- Manter a lmina de reao sempre limpa, seca e desengordurada antes do uso;
- O uso de reagentes com partculas ressecadas pode ocasionar resultados falso
positivos, para se evitar, guardar os frascos com os conta-gotas preenchidos;
- A intensidade da aglutinao com o soro no diludo no indicativo da
concentrao de ASO na amostra analisada ( necessria a execuo da tcnica
quantitativa para todas as amostras reativas).

8. RESULTADOS
Indicar resultados frente a concentrao de ASO na amostra:

- Negativo
Reportar como Amostra analisada com concentrao de Antiestreptolisina-O inferior
a 200 UI/mL ou

- Positivo
Reportar como Amostra analisada com concentrao de Antiestreptolisina-O de
(Indicar concentrao) UI/mL.
Observao: em soros normais, sempre existe ASO em concentrao inferior a
200UI/mL, e por esta razo no se deve expressar um resultado como negativo.
Valores inferiores a 200 UI/mL no so significativos para a infeco estreptoccica.




Laborclin Produtos para Laboratrios Ltda
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Servio de Assessoria ao Cliente
SAC 0800-410027
sac@laborclin.com.br

LB 170163 REV 10 06/2014
Responsvel tcnico:
Elisa Hizuru Uemura CRF/PR - 4311

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9. CONTROLE DA QUALIDADE
- Materiais necessrios
Controles positivo e negativo includos no conjunto, ou amostras de
referncia certificadas.

- Periodicidade
Ao receber o conjunto e preferentemente a cada bateria de amostras, efetuar
testes usando os controles que acompanham o conjunto ou amostras de
referncia.

- Interpretao e avaliao
Uma vez que a funo do controle de qualidade garantir que o material
usado esteja fornecendo resultados compatveis com os esperados e dentro
de um padro de desempenho, espera-se que o controle positivo apresente
aglutinao e que o controle negativo no apresente aglutinao. Dispondo-
se de amostras de referncia com ttulo conhecido, pode-se avaliar a
sensibilidade do material, em periodicidade a ser estabelecida pelo prprio
laboratrio conforme seus procedimentos adotados.

10. CARACTERSTICAS DE DESEMPENHO
A sensibilidade diagnstica 98% e a especificidade diagnstica 97%.

11. GARANTIA DA QUALIDADE
A Laborclin obedece ao disposto na Lei 8.078/90 - Cdigo de Defesa do
Consumidor. Para que o produto apresente seu melhor desempenho,
necessrio:
- que o usurio conhea e siga rigorosamente o presente procedimento
tcnico;
- que os materiais estejam sendo armazenados em condies adequadas;
- que os equipamentos e demais acessrios necessrios estejam em boas
condies de uso, manuteno e limpeza.
Antes de ser liberado para venda, cada lote do produto submetido a testes
especficos, que so repetidos periodicamente at a data de vencimento
expressa em rtulo. Os certificados de anlise de cada lote podem ser
obtidos junto ao site www.laborclin.com.br. Em caso de dvidas ou outras
informaes, contatar o SAC - Servio de Assessoria ao Cliente atravs do
telefone 0800-410027 ou pelo e-mail sac@laborclin.com.br. Quaisquer
problemas que inviabilizem uma boa resposta do produto, que tenham
ocorrido comprovadamente por falha da Laborclin sero resolvidos sem nus
ao cliente, conforme o disposto em lei.

12. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
1.Bach, G.L.; Wiatr, R.A.; Anderson, T.O. & Cheatie, E. The latex ASO test:
A rapid screening procedure for detection of elevated Antiestreptolisin titers.
Am. J. Clin. Path., Vol. 52, n.1, p. 126-128, 1969.
2. Hodge, B.E. & Swit, H.F. Varying hemolytic and constant combining
capacity of streptolysins, J. Exp. Med., 58, p. 277-287, 1933.
3.Ingram, G.B.P.& Hughes, J.E.P. A modified rapid slide test for
antiestreptolysin-O. Am. J. Clin. Ath., V.25, p. 543-544, 1972.
4. Kelin, G.C.; Baker, C.N. & Moody, M.D. Comparision of antiestreptolysin-O
latex screening test with the antiestreptolysin-O hemolytic test, App. Mic., V.
19, . 60-61, 1970.
5. Kalbak, K. The antiestretolysin reaction. The State Serum Institute
Denmark, 1947.
6. Palieri, S. Validit del test al lattice nella degli anticorpi antiestreptolisinici e
proposta per lutilizzazione del test nella titoloazone. Quad Sclavo diagn. V5,
n2, p. 236-241, 1969.
7. Rantz, L.A. and Randal, E. A modification of the technic for determination
of the antiestreptolysin titer. Proc. Soc. Exper. Biol. and Med n59, p. 22-25,
1945.
8. Todd, E.W. Antigenic streptococal hemolysin, J. Med. N 55, p.267-280,
1932.
9. Todd, E.W. A comparative sorological study of streptolysins derived from
human and from animal infections, with notes on pneumococal hemolysin,
tetanolysin and Staphylococcus toxin. J. Path. And Bact., N 39, p. 299-320,
1934.
10. Robins, S. et al.: Patologia estrutural e funcional, 4a ed., G. Koogan,
1991.
11. Henry, J.B. et al.: Diagnsticos clnicos e conduta teraputica por
exames laboratoriais, 16a. ed., Ed. Manole, 1983.

13. REGISTRO NA ANVISA: 100.970.10.119

14. APRESENTAO
551018 ASO LATEX DIRETO-R=2mL-KIT 50T
551020 ASO LATEX DIRETO-R=4mL-KIT 100T
551021 ASO LATEX DIRETO-R=4mL-FR