UNIVERSIDADE FEDERAL DO AMAZONAS

INSTITUTO DE CINCIAS EXATAS E DA TERRA

DEPARTAMENTO DE QUMICA

ORIENTAES SOBRE VALIDAO DE MTODOS DE ENSAIOS

QUMICOS
DOQ-CGCRE-008

MANAUS
2011

GEORGE NOGUEIRA DE OLIVEIRA

IGOR DE SOUSA DOS SANTOS
JOSIMAR LIMA DA SILVA JUNIOR
RENAN BENTES
RODRIGO OLIVEIRA DE VASCONCELOS BECIL

Trabalho desenvolvido como critrio

de avaliao parcial da disciplina de
Boa Prticas de Laboratrio referente
ao 1 perodo do curso de
Bacharelado em Qumica.
Professora: Larissa S. M. Wiedemann.

MANAUS
2011

INTRODUO
Os laboratrios necessitam de mtodos, critrios e objetivos, para demonstrar
que os ensaios que executam apresentam resultados confiveis e adequados qualidade
almejada, alm de apresentar condies apropriadas execuo de mtodos
normalizados.

OBJETIVO
Abordar de maneira didtica a respeito das Orientaes sobre Validao de
Mtodos de Ensaios Qumicos e suas aplicaes em laboratrios, no intuito de
certificar os experimentos para que os mesmos tornem-se cada vez mais eficazes.

SIGLAS IMPORTANTES
Dicla: Diviso de Credenciamento de Laboratrios.
ISO: International Organization for Standardization. (Organizao Internacional Para
Padronizao);

DEFINIES

NBR ISO 9000: so definies gerais referentes qualidade.

ABNT ISO/IEC: estabelece definies relacionadas normalizao, certificao

e credenciamento de laboratrios. prefervel quando as definies dadas so
diferentes na NBR ISSO 9000.

MTODO NORMALIZADO
Quando desenvolvido por rgos reconhecidos. Por exemplo a ABNT, ASTM,
ANSI, APHA.

MTODO NO NORMALIZADO
Quando desenvolvido pelo prprio laboratrio, ou adaptado de mtodos
normalizados e validados (DOQ-DQUAL-006)

PLANEJAMENTO DA VALIDAO
Para planejamento da validao uma sequncia de trabalho deve ser feita, essa
etapa inclui entre outros fatores, definies de aplicao, objetivo e escopo de mtodo,

bem como parmetros de desempenho, critrios de aceitao, procedimentos

operacionais, experimentos de validao, etc.
Alm disso, os experimentos e os resultados devem ser documentados e
registrados.

DOCUMENTAO DE MTODOS VALIDADOS

Quando todas as etapas do processo de validao estiverem cumpridas,
necessrio documentar os procedimentos, pois eles auxiliam aplicao correta do
mtodo e diminui a variao acidental no mesmo.
O mtodo deve ser testado por um tcnico para que os analistas possam utiliz-lo.
Se o mtodo corresponder ao esperado, provvel que ele seja utilizado e apresente
resultados eficientes.
Os mtodos documentados devem estar sob rigoroso controle para que apenas
mtodos e procedimentos validados sejam utilizados. Deve-se ainda informar quando
foi autorizado para uso e se est completo.
A reviso dos documentos estabelecida de acordo com a periodicidade
estabelecida pelo sistema de qualidade. Alm disso, apenas pessoas autorizadas por
alterar o documento.

FORMATO DE PROCEDIMENTOS
Um procedimento de ensaio deve conter determinadas caractersticas: deve ser
coerente, claro, correto e completo, afim de que nenhum ponto tenha sido esquecido e
que qualquer informao possa ser rapidamente encontrada. E deve ainda, estar
amparado por algumas normas, como ABNT ISO/IEC, ISO 78/2 e NBR ISSO/IEC
17025.

CARACTERSTICAS DE DESEMPENHO DE MTODOS

Incluem: especificidade e seletividade, faixa de trabalho e faixa linear de
trabalho, linearidade, sensibilidade, limite de deteco, limite de quantificao, exatido
e tendncia (bias), preciso, robustez e incerteza de medio.

ESPECIFICIDADE E SELETIVIDADE
Especificidade e seletividade so partes de eventos de deteco. Um mtodo que
produz resultados para apenas uma amostra chamado de seletivo. Um mtodo que

produz respostas para vrias amostras, mas que pode distinguir a resposta de uma
amostra para as outras chamada de seletiva.
O objetivo desses testes fazer uma anlise mais precisa das amostras que se
medem. Fazer elas crucial para que no haja problemas em qualquer mtodo analtico.
H vrios fatores que podem ocasionar isso como, componentes que alteram a
sensibilidade do detector ou porque compostos afetam diretamente a amostra.

Testes de Especificidade
Esses testes precisam de pesquisas mais profundas na rea de aplicao para que
todos os componentes presentes sejam identificados. Todas os resduos devem ser
testados. s vezes esses testes devem ser feitos em condies extremas para se verificar
possveis produtos de degradao.

Teste de Seletividade
Em testes de seletividade parte-se da premissa que as matrizes dos analitos no
tero grande influncia. Vrios testes e suas estatsticas correspondentes podem ser
utilizados para o estudo da seletividade dependendo da disponibilidade do analito, da
matriz sem o analito e de amostras de referncia nas concentraes de interesse.

FAIXA DE TRABALHO E FAIXA LINEAR DE TRABALHO

A faixa linear de trabalho de um mtodo de ensaio o intervalo entre os nveis
inferior e superior de concentrao do analito no qual foi demonstrado ser possvel a
determinao com a preciso, exatido, e linearidade exigidas, sob as condies
especificadas para o ensaio. A faixa linear definida como a faixa de concentraes na
qual a sensibilidade pode ser considerada constante e normalmente expressa nas
mesmas unidades do resultado obtido pelo mtodo analtico

LINEARIDADE
a habilidade de um mtodo analtico em produzir resultados que sejam
diretamente proporcionais concentrao do analito em amostras , em uma dada faixa
de concentrao. A linearidade obtida por padronizao interna ou externa e
formulada como expresso matemtica usada para o clculo da concentrao do analito
a ser determinado na amostra real.

SENSIBILIDADE
Sensibilidade um parmetro que demonstra a variao da resposta em funo
da concentrao do analito. A sensibilidade depende da natureza do analito e da tcnica
de deteco utilizada.

LIMITE DE DETECO
Trata-se da menor concentrao que pode ser distinguida com um certo nvel de
confiana pelo mtodo. H dois tipos de limite de deteco:
Limite de deteco do equipamento (LDE), que produz um sinal de trs a cinco
vezes o sinal do equipamente e o limite de deteco do mtodo (LDM), definido como a
concentrao mnima de uma substncia medida e declarada com 95% ou 99% de
confiana de que a concentrao do analito seja maior que zero.

LIMITE DE QUANTIFICAO
a menor concentrao do analito que pode ser determinada com um nvel
aceitvel de preciso e veracidade. Na prtica, corresponde ao padro de calibrao de
menor concentrao.

EXATIDO E TENDNCIA
Exatido, trata-se da concordncia entre o resultado de um ensaio e o valor de
referncia aceito como convencionalmente verdadeiro. Tendncia, por sua vez,
proveniete de uma combinao de erros aleatrios e sistemticos. Ela deve ser corrigida
ou demonstrada ser desprezvel, para tanto, os processos utilizados na avaliao da
exatido de um mtodo consiste em:

Materiais de Referncia Certificados (MRC);

Comparaes Interlaboratoriais e

Ensaios de Recuperaes;
Um material de referncia certificado possui valores como concentrao, para

cada parmetro e uma incerteza associada. bastante utilizado na avaliao do

desempenho do laboratrio. Os valores obtidos pelo laboratrio, devem ser comparados
com os valores certificados do material de referncia, levando em considerao:

erro relativo;

teste de hipteses;

ndice z (z Score), e

erro normalizado.
A comparao de mtodos consiste na comparao dos resultados obtidos

utilizando um mtodo interno com os resultados conseguidos atravs de um mtodo de

referncia, objetivando a avaliao da exatido do mtodo interno relativamente ao de
referncia.

PRECISO
Preciso um termo geral para avaliar a disperso de resultados entre ensaios
independentes, repetidos de uma mesma amostra, amostras semelhantes ou padres, em
condies definidas. A preciso geralmente expressa como desvio padro ou padro
relativo.
Outro fator a considerar nos laboratrios a repetitividade, que o grau de
concordncia entre os resultados de medies sucessivas de um mesmo mensurado,
efetuadas sob as mesmas condies de medio.
O limite de repetitividade verificado a partir da anlise da diferena entre as
amostras, para um nvel de confiana de 95%. Tambm relevante a reprodutibilidade,
que o grau de concordncia entre os resultados das medies de um mesmo
mensurado, efetuadas sob condies variadas de medio, sendo considerado
importante quando um laboratrio busca a verificao do desempenho dos seus mtodos
em relao aos dados de validao obtidos atravs de comparao interlaboratorial.
Preciso intermediaria refere-se preciso avaliada sobre a mesma amostra,
amostras idnticas ou padres, utilizando o mesmo mtodo, no mesmo laboratrio ou
em laboratrios diferentes, mas definindo exatamente quais as condies a variar, tais
como:

diferentes analistas

diferentes equipamentos

diferentes tempos
A preciso intermediria reconhecida como a mais representativa da

variabilidade dos resultados em um laboratrio e, como tal, mais aconselhvel de usar.

A recuperao do analito pode ser estimada pela anlise de amostras adicionadas
com quantidades conhecidas do mesmo (Spike). As amostras podem ser adicionadas
com o analito em pelo menos trs diferentes concentraes.

ROBUSTEZ
A robustez de um mtodo de ensaio mede a sensibilidade que este apresenta em
face de pequenas variaes. Um mtodo diz-se robusto quando de apresentar insensvel
a pequenas variaes que possam ocorrer quando essa esta sendo executo.

CONCLUSO
A partir de modelos padres desenvolvidos por rgos respeitados, possvel
otimizar e dar confiabilidade aos experimentos realizados em laboratrio. A
padronizao de mtodos importante para muitos trabalhos na rea da Qumica, uma
vez que aumenta a exatido, quando em comparao com procedimentos semelhantes
realizados em laboratrios diferentes. Alm disso, h melhoria nas questes de
segurana, fator altamente importante em qualquer ambiente no qual experimentos
estejam sendo realizados. O estudo e elaborao do presente trabalho foram satisfatrios,
pois forneceram informaes relevantes e que serviro de base para futuros exerccios
laboratoriais.

REFERNCIA BIBLIOGRFICA

DOQ-CGCRE-008; Orientaes Sobre Validao de Mtodos e Ensaios

Qumicos. Reviso: 01 - Maro, 2003. Instituto Nacional de Metrologia e
Qualidade Industrial (INMETRO).