Instituto de Qumica de So Carlos IQSC

Universidade de So Paulo

Cadeia de transporte de
eltrons e fosforilao oxidativa
Disciplina: Bioqumica II

Turma: Cincias Fsicas e Biomoleculares

Docente: Profa. Dra. Fernanda Canduri

Contedo

A Mitocndria
Sistema de transporte mitocondrial

Transporte de eltrons
A sequncia do transporte de eltrons
Complexo I (NADH-Coenzima Q oxidorredutase)
Complexo II (Succinato-Coenzima Q oxidorredutase)
Complexo III (Coenzima Q-Citocromo C oxidorredutase)
Compelo IV (Citocromo C oxidase)

Fosforilao oxidativa
A teoria quimiosmtica
ATP sintase
Proporo P/O
2 semestre/2010

A mitocndria

A mitocndria o stio do metabolismo oxidativo de

eucariotos

Contm:
a piruvato desidrogenase,
as enzimas do ciclo do cido ctrico,
as enzimas que catalisam a oxidao dos cidos graxos,
as enzimas e protenas redox envolvidas no transporte
de eltrons e na fosforilao oxidativa

Por isso a mitocndria considerada a usina de fora da

clula.

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Eletromicrografia de uma mitocrndria animal

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Sistemas de transporte mitocondrial

Composta pela membrana mitocondrial externa (MME) e

membrana mitocondrial interna (MMI), formando um espao
intermembrana

O espao intermembrana equivalente ao citosol no que se refere

s suas concentraes em metablitos e ons

A membrana interna composta por cerca de 75% de protenas,

mais rica em protenas do que a membrana externa

livremente permevel a O2, CO2 e H2O e contm, alm das

protenas da cadeia respiratria, vrias protenas de transporte
que controlam a passagem de metablitos, como ATP, ADP, o
piruvato, o Ca2+ e o fosfato

A impermeabilidade controlada da MMI para a maioria dos ons e

dos metablitos permite a formao de um gradiente de ons
atravs dessa barreira e resulta na compartimentalizao das
funes metablicas entre o citosol e a mitocndria
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Os equivalentes citoslicos reduzidos so

transportados para dentro da mitocndria
O NADH produzido no citosol pela
gliclise deve ter acesso cadeia
transportadora de eltrons para a
oxidao aerbica
No h uma protena transportadora de
NADH na MMI
Somente os eltrons do NADH
citoslico so transportados para a
mitocndria por um dos vrios sistemas
de transporte
Circuito do malato-aspartato
Circuito do glicerol-fosfato
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Circuito do malato-aspartato

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Circuito do glicerol-fosfato
A glicerol-3-fosfato
desidrogenase catalisa
a oxidao do NADH
citoslico pela DHAP
para produzir NAD+, o
qual retorna gliclise

Os eltrons do glicerol3-fosfato so
transferidos para a
flavoprotenadesidrogenase da MMI,
formando FADH2, que
fornece eltrons
diretamente para CTE
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O translocador ADP-ATP

A maior parte do ATP gerado na matriz mitocondrial pela

fosforilao oxidativa utilizado no citosol

A MMI contm um translocador de ADP-ATP (ou adeninanucleotdeo translocase) que transporta o ATP para fora da
matriz em troca do ADP produzido no citosol pela hidrlise
do ADP sistema antiporte

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Transporte de eltrons

Os carreadores que transportam os eltrons a partir do NADH e

FADH2 at O2 esto associados a membrana mitocondrial interna

Alguns desses centros redox so mveis e outros so protenas

integrais de membrana

A seqncia de carreadores de eltrons reflete seus potenciais de

reduo relativos

O processo exergnico

A oxidao de NADH e FADH2 promovida pela cadeia de

transporte de eltrons

Os eltrons so carreados do Complexo I e do complexo II para o III

pela coenzima Q, e do complexo III para o IV pelo citocromo C
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Complexo I (NADH-Coenzima Q oxidorredutase)

O complexo I transfere eltrons a

partir do NADH para a CoQ

o maior complexo protico na

MMI, com 43 polipeptdeos

Ele contm uma molcula de

flavina mononucleotdeo (FMN) e
seis a sete grupos ferro-enxofre
que participam no transporte de
eltrons

Os grupos ferro-enxofre esto

presentes como grupos
prostticos de protenas ferroenxofre, e podem sofrer oxidao
e reduo de um eltron
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Transferncia de eltrons no Complexo I

O processo envolve a
reduo temporria de cada
grupo cuja passagem dos
eltrons para o prximo grupo
permite a reoxidao do
grupo anterior
O NADH participa apenas em
reaes que envolvem a
transferncia de 2 eltrons
A FMN e a CoQ podem
transferir um ou dois eltrons
por vez, proporcionando a
formao de um conduto de
eltrons entre o doador de
dois eltrons, o NADH e os
aceptores de um eltron, os
citocromos
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Translocao de prtons

A medida que os eltrons so transferidos entre os centros redox

do Complexo I, quatro prtons so translocados da matriz para o
espao intermembrana Bomba de Prtons
O mecanismo de bombeamento de prtons deve ser conduzido
pelas alteraes conformacionais induzidas pelas alteraes no
estado redox da protena

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Complexo II (Succinato-Coenzima Q oxidorredutase)

Contm a enzima do ciclo do cido ctrico, a succinatodesidrogenase e trs outras pequenas subunidades hidrofbicas
que transferem eltrons do succinato CoQ

Seus grupos redox incluem o FAD ligado covalentemente

succinato-desidrogenase para o qual os eltrons so inicialmente
transferidos, um grupo [4Fe-4S], dois grupos [2Fe-2S], e um
citocromo b560

O Complexo II permite que eltrons de potencial relativamente

alto entrem na cadeia transportadora por uma via independente
do Complexo I

Os Complexos I e II no operam em srie, mas ambos resultam

na transferncia de eltrons para a CoQ a partir de substratos
reduzidos NADH e succinato

A CoQ serve como um ponto de captao de eltrons

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Complexo II (Succinato-Coenzima Q oxidorredutase)

Trs
subunidades
hidrofbicas

succinatodesidrogenase
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Complexo III (Coenzima Q-Citocromo c oxidorredutase)

Conhecido tambm como citocromo bc1: possui dois citocromos

tipo b e um citocromo c1

Transfere eltrons da CoQ reduzida para o citocromo c1 a partir

de um centro [2Fe-2S], e para o citocromo b

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Transporte de eltrons no complexo III: o ciclo Q

A funo permitir que uma molcula de CoQH2 reduza duas molculas de
citocromo, por meio de uma bifurcao do fluxo de eltrons da CoQH2 para
os citocromos c1 e b, permitindo o bombeamento de prtons da matriz para
o espao intermembrana
A CoQH2 transfere um dos eltrons para a protena Fe-S liberando dois
prtons no espao intermembrana e produzindo CoQ-.
A protena Fe-S reduz o citocromo c1,
enquanto a CoQ- transfere os eltrons
restantes para o citocromo b, produzindo
uma CoQ oxidada.
A CoQ oxidada recebe o eltron
novamente do citocromo b, revertendo-se
forma CoQCiclo 1
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Transporte de eltrons no complexo III: o ciclo Q

No ciclo 2, outra CoQH2 reduzida, provinda do complexo I repete as etapas
anteriores: um eltron reduz a protena Fe-S e em seguida o citocromo c1, e
outro eltron reduz citocromo b
Esse segundo eltron reduz a CoQ- produzido no primeiro ciclo, produzindo
CoQH2
Os prtons consumidos originaram-se da matriz mitocondrial
Para cada 2 CoQH2 que entram no ciclo Q, uma CoQH2 regenerada

Ciclo 2

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O complexo III

Citocromo c

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Complexo IV (Citocromo c oxidase)

nico transportador de eltrons no qual o

ferro heme possui um ligante livre que
pode reagir com O2. A citocromo c
oxidase catalisa oxidaes de quatro
molculas de citocromo c (Cyt c)
reduzidas consecutivamente e a
concomitante reduo tetraeletrnica de
uma molcula de O2
4 cit c(Fe2+) + 4H+ + O2 4 cit c(Fe3+) +
2 H2O

O complexo IV possui 4 centros redox:

citocromo a, citocromo a3, um tomo de
cobre conhecido como CuB e um par de
tomos de cobre conhecido como centro
CuA, alm de um Mg2+ e um Zn2+

A reduo do O2 a 2 H2O ocorre

no complexo binuclear citocromo
a3-CuB e envolve 4 transferncias
de e- consecutivas dos stios do
CuA e cit a

2 prtons so translocados
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O complexo IV

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Fosforilao oxidativa

A sntese endergnica do ATP a partir de ADP e Pi na mitocndria

catalisada por uma ATP-sintase (ou complexo V), dirigida pelo
processo de transporte de eltrons

A energia livre liberada pelo transporte de eltrons atravs dos

Complexos I IV deve ser conservada em uma forma que a ATP
sintase possa utiliz-la a energia de acoplamento

A teoria quimiosmtica:
A energia livre do transporte de eltrons conservada pelo
bombeamento de H+ da matriz mitocondrial para o espao
intermembrana, criando um gradiente eletroqumico de H+ atravs da
MMI. O potencial eletroqumico desse gradiente aproveitado para a
sntese de ATP

Processo anlogo ocorre em bactrias, cuja maquinaria

transportadora de eltrons est localizada na membrana plasmtica
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O transporte de eltrons gera um gradiente de

prtons

O transporte de eltrons provoca o transporte de prtons pelos Complexos

I, III, e IV atravs da MMI a partir da matriz, uma regio de baixa [H+] para o
espao intermembrana, uma regio de alta [H+]

Como o pH externo menor que o pH interno, a sada de prtons da

matriz, contra o gradiente de prtons, um processo endergnico

a energia livre seqestrada pelo gradiente eletroqumico resultante conduz

a sntese de ATP

A energia livre estimada para a sntese de uma molcula de ATP cerca

de +30 a +50 kJ/mol, muito grande para ser conduzida pela passagem de
um nico prton de volta matriz

A maior parte das determinaes experimentais indica que cerca de 3

prtons so necessrios por ATP sintetizado.
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A ATP sintase

Tambm conhecida como ATP sintase

bombeadora de prtons ou F1F0ATPase

Protena transmembrana de
multissubunidades com massa
molecular de 450kDa

Composta de duas unidades funcionais

F0 e F1

F0 um canal de prtons
transmembrana

F1 composta por vrias subunidades

(abgde) e dentre elas, a subunidade b
catalisa a reao de sntese de ATP
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A proporo P/O

Relaciona a quantidade de ATP sintetizada quantidade de

oxignio reduzido
O fluxo de 2 eltrons pelos complexos I, III e IV resulta na
translocao de 10 prtons para o espao intermembrana

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A proporo P/O
* O fluxo de retorno desses 10 prtons por meio da F1-F0 ATPase suficiente
para conduzir a sntese de ~3 ATPs

* O NADH do complexo I e o FADH2 no complexo II permitem um movimento

transmembrana de oito prtons, suficiente para sintetizar ~2 ATPs
* O trnsito de 2 eltrons atravs do Complexo IV contribui com 2 prtons, o
suficiente para formar ~1 ATP

* Na mitocndria respirando ativamente, a proporo P/O no corresponde a

um nmero inteiro
* Sendo assim, o nmero de ATPs sintetizados (examinado por Peter Hinkle)
por molcula de glicose oxidada ser 2,5 ATP/NADH x 10 NADH/glicose +
1,5 ATP/FADH2 x 2 FADH2/glicose + 2 ATP/glicose a partir do ciclo do cido
ctrico + 2 ATP/glicose a partir da gliclise = 32 ATP/glicose, e no 38
ATP/glicose, utilizando a proporo P/O de 3, 2 e 1.
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A cadeia transportadora de eltrons e a

fosforilao oxidativa

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A ATP sintase e os translocadores

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A regulao da fosforilao oxidativa

Quando a fosforilao oxidativa mnima, no estado de repouso, o

gradiente eletroqumico na MMI acumula-se e impede a continuao do
bombeamento de prtons, inibindo o transporte de eltrons, fazendo com
que o pH no espao intermembrana diminua

Quando a sntese do ATP aumenta, o gradiente eletroqumico dissipado,

permitindo o reincio do transporte de eltrons

Um agente desacoplador aumenta a permeabilidade dos H+ MMI, e

desacopla a fosforilao oxidativa da cadeia de transporte de eltrons,
diminuindo a sntese de ATP pela ATP sintase.

2 semestre/2010