UNIVERSIDADE FEDERAL DO ABC

CENTRO DE CINCIAS NATURAIS E HUMANASCURSO DE PSGRADUAO EM CINCIA & TECNOLOGIA/QUMICA

RELATRIO DE AULA PRTICA

DETERMINAO DE Pb EM CABELO POR ESPECTROMETRIA DE ABSORO
ATMICA COM ATOMIZAO EM FORNO DE GRAFITE (GF AAS)
CT 3009 PREPARAO DE AMOSTRAS
PROF Dra. IVANISE GAUBEUR

ALUNA: LUCIANA SARMENTO FERNANDES 13024612

2012

INTRODUO
Atualmente, o chumbo um dos contaminantes mais comuns no meio ambiente, em

consequncia das inmeras atividades industriais que favorecem a sua grande disseminao.
Dessa forma, todos os seres humanos tm chumbo em seus organismos como resultado a
exposio fonte exgenas [1].
O chumbo entra no organismo humano principalmente por inalao ou ingesto, no
possuindo nenhuma funo fisiolgica conhecida at o momento. Os efeitos nocivos podem
afetar praticamente todos os rgos, apresentando variados sintomas com gravidade
dependendo do grau de exposio [1].
Considerando a capacidade de armazenamento e reteno de elementos trao na
estrutura capilar durante um perodo de tempo tanto a partir de fontes exgenas ou endgenas,
amostras de cabelo podem ser utilizadas como indicador de exposio ocupacional e ambiental
[2-4].
Um dos modelos propostos para explicar o mecanismo de incorporao dos elementos
trao no cabelo a difuso passiva do elemento atravs da corrente sangunea durante o
crescimento na base do folculo capilar. Ou ainda, podem ser incorporados atravs das
secrees das glndulas apcrinas e sebceas ou atravs da contaminao ambiental [2].
Tendo em vista que o cabelo humano tem um crescimento de aproximadamente 1 cm
ao ms, o cabelo de cada pessoa armazena informao cronolgica relativo a concentrao
presente no organismo durante a exposio a um elemento no perodo considerado. Dessa
forma, a anlise de cabelo uma importante ferramenta que permite obter informaes sobre
problemas de sade anteriores, mesmo que a causa j tenha cessado [3-4].
Quando comparado com outras amostras biolgicas para estudos de monitorao
exposio a um determinado elemento ou substncia, o cabelo apresenta vantagens como:
coleta simples, rpida e no invasiva, de fcil manuseio e armazenamento e pouca
susceptibilidade a contaminao, uma vez que um material slido. As limitaes associadas
a anlise so: diferenciao entre a contaminao exgena e a endgena e os vrios fatores
que contribuem para o resultado, como idade, gnero, cor do cabelo, hbitos alimentares, usos
de cosmticos e tratamentos capilares como tintura, permanentes, entre outros, e a origem
geogrfica do indivduo [2-4].
Das vrias tcnicas que podem ser utilizadas para a determinao de elementos trao
em cabelo, tcnicas que envolvem a espectrometria de absoro atmica encontram grande
utilidade para tal finalidade.
A espectrometria de absoro atmica considerada uma tcnica analtica bem
sucedida e uma das mais utilizadas na determinao de elementos em baixas concentraes.
uma tcnica que apresenta vantagens, quando comparada com tcnicas de emisso ptica
como menor custo do equipamento e operacional, facilidade de operao e menor nmero de
linhas espectrais, acarretando uma possibilidade bem menor de interferncia por sobreposio
de linhas. Em relao s desvantagens, apresenta faixa linear de trabalho relativamente

pequena, menor frequncia analtica quando se utiliza atomizao eletrotrmica e, principalmente, considerada uma tcnica analtica monoelementar, fato que reconhecido como a
maior desvantagem [5].
A tcnica de espectrometria de absoro atmica com atomizao em forno de grafite
(GF AAS) uma tcnica bem estabelecida para determinaes monoelementares. Como cada
analito requer programas de tempo/temperatura especficos, com ciclos de aquecimento que
podem levar alguns minutos, infere-se que a principal desvantagem da tcnica reside no tempo
total gasto quando se deseja determinar muitos elementos por amostra, alm do tempo gasto
para encontrar as condies timas para cada uma dessas determinaes [6].
Na realizao de medidas com essa tcnica imprescindvel estabelecer um programa
de aquecimento apropriado para controlar tempo e temperatura das etapas de secagem, de
pirlise e de atomizao. Este programa otimizado permite evaporar o solvente bem como
eliminar os constituintes da matriz, antes da atomizao do analito, a fim de se reduzirem
eventuais interferncias [6].
O emprego de modificadores qumicos uma prtica s vezes necessria nessa
tcnica. Eles tm como funo diminuir, ou at mesmo eliminar, interferncias provocadas pela
matriz ou concomitantes presentes na amostra, favorecendo um aumento da eficincia da
etapa de pirlise, sendo possvel empregar temperaturas maiores do que aquelas num
processo sem o modificador. Entretanto, a eliminao dos concomitantes no deve afetar a
atomizao do analito de interesse. O modificador qumico converte o analito em uma forma
menos voltil, permitindo maiores temperaturas de pirlise e/ou converte os concomitantes em
uma forma mais voltil, promovendo a separao analito-matriz [6].
A anlise direta de slidos que possvel utilizando o mtodo GF AAS oferece
vantagens, dispensando a etapa e preparo de amostra que seria necessrio para a converso
da amostra slida em solues aquosas, diminuindo a possibilidade de contaminao e perdas
do analito e tambm erros sistemticos que podem afetar a exatido e preciso dos resultados
analticos obtidos. A no utilizao de reagentes txicos ou corrosivos proporcionam uma
menor periculosidade do mtodo e tambm a minimizao de gerao de resduos, podendo o
mtodo ser considerado como limpo. Ainda so vantagens a maior detectabilidade do
mtodo, sendo que as amostras no precisam ser diludas e possvel analisar pequenas
quantidades de amostra. Algumas dificuldades so inerentes ao mtodo, como a calibrao do
equipamento, a homogeneidade e representatividade da amostra e a obteno do branco
analtico. [6]
O objetivo dessa aula prtica foi determinar chumbo total em amostras de cabelo, para
isso fazendo-se uso do mtodo de anlise direta de slidos por espectrometria de absoro
atmica com atomizao em forno de grafite.

PARTE EXPERIMENTAL
Equipamento

As amostras de cabelo foram analisadas utilizando-se um espectrmetro de absoro

atmica modelo ZEEnit 600 equipado com tubo atomizador de grafite aquecido
transversalmente, corretor de fundo para efeito Zeeman e acessrio para amostragem slida
automtica. Lmpada de ctodo oco de chumbo foi utilizada como fonte de radiao.
Argnio foi utilizado como gs de proteo e purga.
Os parmetros do instrumento para anlise foram os seguintes:
- comprimento de onda da lmpada: =283,3 nm
- corrente da lmpada: 4mA
- largura da fenda: 0,8 nm
Os parmetros do programa de aquecimento esto representados na tabela 1.

Tabela 1: Parmetros do programa de aquecimento.

Secagem
Pirlise
Atomizao
Limpeza

Programa de aquecimento
T
C/s
Hold time (s)
120
25
15
800 250
20
1800 1100
5
2500 1000
5

Ar (l/min)
0,3
0,3
0
0,3

Reagentes e solues

gua deionizada de alta pureza e cido ntrico foram utilizados no preparo das
solues-padro de chumbo, que foram preparadas por diluio em cido ntrico 1% (v/v)
adequada a partir de uma soluo estoque padro contendo 1000mg/L.
No foi utilizado modificador qumico para tratamento da amostra.

Amostras

Dois fios de cabelos de comprimento mdio foram recolhidos de duas pessoas

diferentes presentes na aula prtica.

Procedimento

Inicialmente, a plataforma foi pesada vazia para se obter o valor correspondente ao que
seria o branco analtico.

As curvas de calibrao foram obtidas com as medidas de absorbncia das solues-4

padro contendo respectivamente 1, 2, 4 e 10 10 g. Para isso, foram utilizados os volumes de

-4

10, 20 e 40 L da soluo-padro de Pb contendo 10 g/L(para os contedos de 1,2 e 4.10 g

Pb, respectivamente), e 10 L da soluo-padro de Pb contendo 100 g/L correspondente ao
-4

contedo de 10 10 g de Pb.
Aps o trmino da coleta das medidas de absorbncia para construo da curva de
calibrao, as amostras de cabelo foram seccionadas em pequenas partes e ento inseridas
na plataforma para a determinao do chumbo.
Nenhum tratamento prvio, como a digesto ou mesmo uma lavagem, foi realizado na
amostra.
Todas as medidas foram obtidas em duplicata.

RESULTADOS E DISCUSSO
Curva de Calibrao

Os dados referentes s medidas de absorbncia para a construo da curva de

calibrao esto representados na tabela 2:

Tabela 2: Dados referentes s medidas de absorbncia obtidas

Soluo padro
Branco (plat.vazia)
10 L sol. [10 g/L]
20 L sol. [10 g/L]
40 L sol. [10 g/L]
10 L sol. [100 g/L]

Massa de
Pb (10-4g) Absorbncia I Absorbncia II Mdia
0
1
2
4
10

-0,0006
0,0298
0,0568
0,1070
0,2864

-0,0003
0,0293
0,0581
0,1065
0,2923

-0,0005
0,0296
0,0574
0,1068
0,2894

Desvio
padro

RSD %

0,000361
0,000919
0,000354
0,004172

1,2
1,6
0,3
1,4

Pode ser observado que o desvio padro no seguiu uma tendncia de diminuio
quando diferentes volumes da soluo de concentrao 10 g/L foram utilizados (apenas para
o volume de 40L), o que de se esperar conforme se aumenta a concentrao do analito na
amostra. Quando a soluo de concentrao 100 g/L foi utilizada, sendo ela a amostra que
possua maior concentrao do analito, maior desvio padro foi observado. Tais fatos podem
indicar erros no preparo da soluo-padro ou na coleta dos volumes.
A curva de calibrao para Pb na soluo aquosa est representado na figura 1.

0,3500
0,3000

y = 0,0289x - 0,0016
R = 0,9988

Absorbncia

0,2500
0,2000
0,1500
0,1000
0,0500
0,0000
-0,0500

6
[Pb] 10-4g

10

12

Figura 1: Curva de calibrao referente as concentraes de chumbo e suas respectivas absorbncias.

Observando o valor do coeficiente de correlao (R) obtido, pode-se inferir que o

mtodo possui boa linearidade, sendo que esse parmetro confere a estimativa de qualidade
da curva obtida, pois quanto mais prximo de 1,0, menor a disperso do conjunto de pontos
experimentais e menor a incerteza dos coeficientes de regresso estimados [7].

Quantidade de Pb nas amostras de cabelo

A partir da equao da reta obtida com os pontos da curva de calibrao, pode-se

calcular a quantidade de Pb presente na amostra de cabelo considerando o resultado da
medida de absorbncia da amostra, que foram os seguintes:
- Amostra 1:
Massa = 0,292 mg

Absorbncia = 0,0240

- Amostra 2:
Massa = 0,159 mg

Absorbncia = 0,0063

Dessa forma, calculou-se que na amostra 1 a quantidade de Pb presente era de 0,8

-4

-1

-1

-4

-1

-1

10 g (2,74.10 mg kg ) e na amostra 2 a quantidade era de 0,2 10 g (1,26.10 mg kg ).

Cabe ressaltar que essas quantidades determinadas se referem quantidade de
chumbo total presente na amostra seccionada de cabelo, considerando que nenhum
procedimento prvio de lavagem com o intuito de remover a presena de chumbo proveniente
de exposio exgena foi aplicado. Sendo assim, no possvel inferir as quantidades que se
referem especificamente ao Pb endgeno e nem ao exgeno. Tambm no possvel fazer
comparaes entre os teores encontrados nas diferentes amostras, que eram de pessoas
diferentes, sem antes considerar diversas variveis como o estudo preliminar das
caractersticas dos indivduos, hbitos alimentares e o ambiente ao qual o indivduo
comumente est exposto.

A escolha do segmento da amostra de cabelo a ser analisada tambm no recebeu

nenhuma considerao de modo especial, representando apenas a quantidade de Pb total.
Informaes adicionais poderiam ser obtidas se esse critrio fosse adotado, juntamente com a
lavagem da amostra para remoo do chumbo ligado exogenamente. A anlise de segmentos
permite a obteno de informao cronolgica de exposio ao elemento analisado,
fornecendo um registro histrico de elementos assimilados a partir do ambiente.

CONCLUSO
A partir dos resultados obtidos, possvel concluir que o mtodo de anlise direta de

slidos por espectrometria de absoro atmica com atomizao em forno de grafite (SS-GF
AAS) mostrou-se til para a determinao de chumbo em cabelo, principalmente devido a
caracterstica da GF AAS em permitir a anlise de amostras em quantidades inferiores a 1mg,
proporcionando a determinao de elementos-trao na amostra. O mtodo uma boa
alternativa em relao a outros mtodos empregados quando considerado vantagens como o
fato de dispensar etapas de pr-tratamento da amostra, como a digesto, minimizando dessa
forma a manipulao da amostra e consequente contaminao ou perda do analito.
A anlise do cabelo como indicador da exposio a elementos txicos mostra-se uma
ferramenta de grande utilidade ao propsito, considerando a capacidade do cabelo em
armazenar e reter elementos durante um perodo prolongado de tempo, permitindo a
recuperao de informao cronolgica de exposio. Cuidado deve ser tomado em relao a
determinaes de elementos quando a inteno for determinar se o elemento est presente
endogenamente ou exogenamente. Para isso, o procedimento de lavagem um passo
importante na diferenciao das duas condies.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
[1] MOREIRA, F. R.; MOREIRA, J. C. A cintica do chumbo no organismo humano e sua importncia para a
sade. Ver. Cincia & Sade coletiva, 9 (1): 167-181, 2004.
[2] LIMA, E.C.; SILVA, C. L. Cabelo como matriz analtica alternativa para a determinao de drogas de abuso.
Ver. NewsLab, 82: 156-169, 2007.
[3] NOMURA, C. S.; OLIVEIRA, P. V. Method for cadmium and lead longitudinal profiles determination in hair by
solid sampling graphite furnace atomic absorption spectrometry. Anal. Methods, 2: 49-53, 2010.
[4] FILHO, E. S.; SILVA, R. S.; SAKUMA, A. M.; SCORSAFAVA, M. A. Teores de chumbo e mercrio em cabelo
de crianas residentes em Cubato, na regio sudeste do Brasil. Ver. Sade Pbliva, 27 (2): 81-86, 1993.
[5] AMORIM, F. A. C.; LOBO, I. P.; SANTOS, V. L. C. S.; FERREIRA, S. L. C. Espectrometria de absoro
atmica: O caminho para determinaes multi elementares. Qum. Nova, 31 (7): 1784-1790, 2008.
[6] OLIVEIRA, P. V., SILVA, C. S., NOMURA, C. S. Anlise direta de slidos por espectrometria de absoro
atmica com atomizao em forno de grafite: uma reviso, 31, 11 104-108, 2008.
[7] INMETRO. Orientaes sobre validao de mtodos de ensaios qumicos, DOQ-CGCRE-008, 2007.