Produo de Biomassa

Introduo

Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Produo de Biomassa
Cn(H2O)n

Substrato

O2

Oxignio

NH3

Amnia

P, S, K, Na, Mg, Ca, Fe

Sais Minerais

So convertidos por multiplicao

celular em:
(CHNO)n
Biomassa

CO2
Dixido de
carbono

H2O
gua

+ H
Calor de reao

Produo de Biomassa
Introduo

Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Composio qumica de microrganismos

Composto

% em peso seco
Bactrias

Leveduras

Fungos

Protenas

50-60

35-45

25-40

Glicdios

6-15

30-45

40-55

Lipdios

5-10

5-10

5-10

Ac. Nuclicos

15-25

5-15

2-10

Cinzas

4-10

4-10

4-10

Produo de Biomassa
Introduo

Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Vantagens:
9 Tempo de gerao curto
Bactrias: 30 min a 2 h
Leveduras: 1 a 3 h
Algas: 2 a 6 h
Fungos filamentosos: 4 a 12 h
9 Elevado teor de vitaminas
9 Alto contedo protico
9 Variedade de fonte de carbono utilizada
9 Facilidade em realizar alteraes genticas
9 Instalaes
9 Independe de fatores climticos

Produo de Biomassa
Introduo

Aplicaes Processo Microrganismos

Protena para alimentao humana ou animal;

Indstria de alimentos (ex. fermento);
Remdios;

Quantificao celular

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Etapas do processo

Hoechst/Uhde SCP processo em metanol

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Etapas do processo:
9 Cultivo do microrganismo
Esterilizao
Aerao
Equipamento
Forma de Conduo
9 Recuperao da Biomassa
Centrifugao (Leveduras e Bactrias)
Filtros rotatrios (Fungos Filamentosos)
Secagem
Quebra da parede celular (para SCP)

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Caractersticas bsicas:
9 No ser patognico
9 Valor nutritivo (para SCP)
9 No formar compostos txicos
9 Baixo custo de produo
Velocidade de crescimento
Contedo protico
Suplementao de nutrientes
Meio de cultura
Separao e secagem

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Bactrias:
9 Alta velocidade de
crescimento
9 Extensa variedade de
fontes de carbono
9 Contedo protico alto

9 Recuperao da biomassa
9Contedo de cidos
nuclicos elevado
9 Possibilidade de produo
de endotoxinas (Gram -)

9 Perfil de aminocidos
bom; ricas em cistina e
metionina
Gneros: Bacillus, Hydrogenomas,
Methanomonas, Methylomonas,
Pseudomonas

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Bactrias:
9 Substratos: hidrocarbonetos, Metanol
9 Processos
Chia Yee Solvent Works (Taiwan, 1963)
Pseudomonas; Substrato: Hidrocarbonetos parafnicos; T =
36-38C; pH = 7,0; Em contnuo: clulas com 73,6% de
protena; Separao em centrifuga, secagem em tambor;
remoo de leo com solvente; moagem em moinho
Esso Research and Engineering Co. (1968)
Pseudomonas; Substrato: Hidrocarbonetos purificados
(retirada dos aromticos); T = 25-40C; Separao por
centrifugao, decantadores ou filtros; secagem em spraydrying;

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Fungos Filamentosos:
9 Alta contedo protico
9 Perfil de aminocidos bom;
baixo aas sulfidrilados
9 Os cogumelos constituem um
dos mais antigos alimentos
humanos
9 Gneros Fusarium e Rhizopus
em cultivos submersos foram
usados como alimento humano
durante a 2 guerra mundial
9 Mycoprotein: aprovado pelo
governo ingls para consumo
humano

9 Alto contedo de cidos

nuclicos
9 Alguns produzem
compostos txicos
9 Crescimento mais lento
que leveduras e bactrias
9 Matria-prima amilcea
(mais cara)

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Algas:
9 Algas tm sido usadas como alimento humano desde tempos
imemoriais
9 Baixo custo de produo
9 Alto contedo protico
9 Alta digestibilidade
9 Teor balanceado de aminocidos
9 Alto teor de vitaminas (tiamina, riboflavina, cobalamina) e
carotenides
Gneros: Chlorella, Scenedesmus e Spirulina

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Algas:
9 Meio de cultivo (quimioautotrfico ou fotoautotrfico)
gua do mar
Lagos salinos
guas oriundas de sistemas de tratamento de
efluentes
Meio de cultivo sinttico (NaHCO3; K2HPO4; NaNO3;
NaCl; MgSO4.7H2O; FeSO4.7H2O; K2SO4; CaCl2.2H2O;
soluo de micronutrientes)
9 No precisa esterilizar e sem controle de temperatura

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Algas:
9 Processo de produo
Batelada simples em lagos abertos
Quantidade de iluminao profundidade 20 a 30 cm

Typical Commercial Microalgae Production Facility, Kona, Hawaii.

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Algas:
9 Recuperao
Centrifugao/Coagulao (baixa densidade celular)
Filtrao rotativa
Secagem (Baixa presso, spray drying, ao sol,
secagem em camadas de areia)

Produo de Biomassa
Algas:

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Leveduras
9 Alta velocidade de crescimento
9 pH 3.5 a 5.0: evita contaminao
9 Facilidade de recuperao por centrifugao
9 Perfil de aminocidos bom
9 Alto contedo vitamnico e complexo B
9 Rendimentos elevados

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Leveduras
9 Melao a principal matria-prima para a produo de
leveduras tais como S. cerevisiae e C. utilis
9 um subproduto da produo do acar de cana e
beterraba
9 O melao apresenta K, Mg, P, Zn, Fe, Cu, alm de
vitaminas (biotina, c. pantotenico, inositol, tiamina) e
aminocidos (asparagina, c. asprtico, alanina, cido
glutmico e glicina)

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Leveduras de panificao
9 So empregadas linhagens selecionadas de S.
cerevisiae em funo:
Caractersticas fisiolgicas estveis
Fermentao vigorosa do acar na massa
Crescimento rpido
Manuteno de boa qualidade sem
autlise
Alto rendimento no fermentador

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Leveduras de panificao
9 Processo em mltiplos estgio
9 Aerbio
9 Batelada alimentada

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Leveduras de panificao
9 Preparo do mosto:
Melao diludo ([acar]i = 0,5 a 1,5 %p/v)
Acidulado (pH 4,5 a 5,0)
Aquecido
Clarificado por filtrao ou sedimentao
Esterilizado (vapor sob presso)
Fortificado (sais de amnio, uria sais de fsforo ou c.
fosfrico, vitaminas) e retirada de SO3 (aerao em
temperatura alta)

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Leveduras de
panificao

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Leveduras de panificao
9 Levedura prensada
Adio de emulsificantes (leos vegetais) para dar
consistncia desejada e adio de lcoois (etlico, proplico,
isoproplico) ou amido de cereal para proteo contra
contaminaes
68-72% de umidade; 27-30% slidos; 50-56% protena, 89% N, 1-1,4% P
Refrigerao (0-4C)
9 Levedura seca ativa
8% de umidade
Clulas so secas em condies controladas de T e
umidade de modo que as enzimas no sejam deterioradas

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Levedura alimentar
9 S. cerevisiae e C. utilis so propagadas em diferentes
substratos e comercializadas como fonte de protenas e
vitaminas do complexo B para suplementao humana ou
raes animais
9 As leveduras resultantes dos processos exclusivamente
destinados a sua propagao so denominados leveduras 1as,
enquanto que as obtidas como subprodutos de outra indstria
so denominadas leveduras 2as (recuperadas de cervejarias e
destilarias)
9 Componentes da levedura forrageira
Protena > 45%
Ca 0,1 -0,5%
Gordura 2%
P 1,5%
Tiamina 6 a 100 mg/kg
Fibras 2%
Riboflavina 10 a 50 mg/kg
Cinzas 7-8%

Produo de Biomassa
Levedura Alimentar
9 Obteno de levedura
secundria

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Levedura Alimentar
9 Obteno de
leveduras secas
em uma destilaria

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Levedura Alimentar

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos Quantificao celular

Levedura Alimentar

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Mtodos Diretos
Determinao do nmero de
clulas
9 Contagem ao microscpio;
9 Contagem de colnias formadas;
9 Nmero mais provvel
9 Contagem eletrnica (Contador
Coulter, Citometria de fluxo)
Determinao da biomassa
microbiana
9 Peso Seco;

Quantificao celular

Mtodos Indiretos
Constituintes celulares
9 Concentrao total de N ou C;
9 ATP;
9 DNA, RNA;
9 Contedo protico;
Dosagem de elementos do
meio de cultura
9 Substrato;

9 Turbidimetria;

9 Consumo de O2;

9 Volume de Centrifugado;

9 Produo de CO2;

9 Viscosidade

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

9 Contagem ao microscpio;

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

9 Contagem ao microscpio;

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Mtodos Diretos
Determinao do nmero
de clulas
9 Contagens de colnias formadas;

Quantificao celular

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Mtodos Diretos

Determinao do nmero de clulas

9 Contagens de colnias
formadas;

Quantificao celular

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

9 Nmero mais provvel (NMP);

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

9 Contagem eletrnica.

Contador Automtico de
Clulas - Coulter

Citmetro de Fluxo

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

9 Contagem eletrnica Citometria de Fluxo.

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao do nmero de clulas

9 Contagem eletrnica Processamento Digital de imagens (PDI).

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Mtodos Diretos
9 Matria seca;

Quantificao celular

Determinao da biomassa microbiana

9 Turbidimetria ou espectrofotometria.

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular

Mtodos Diretos Determinao da biomassa microbiana

9 Volume de Centrifugado;

9 Viscosidade

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular

Mtodos Indiretos Constituintes celulares

9 Concentrao total de N ou C;
9 ATP;

Composio elementar
Composto

Bactrias

Leveduras

Fungos

46-52

46-52

45-55

10

10

10

20

20

20

10-14

6-8,5

4-7

0,2-1

0,01-0,03

0,1-0,5

2-3

0,8-2,6

0,4-4,5

Mg

0,1-0,5

0,1-0,5

0,1-0,3

K, Ca

0,1-0,5

0,1-0,5

0,1-0,5

Na, Fe

0,01-0,1

0,01-0,1

0,01-0,1

Outros

traos

traos

traos

9 DNA;
9 Contedo protico;

% em peso seco

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Mtodos Indiretos
Constituintes celulares
9 Concentrao total de N ou C;
9 ATP;
9 DNA, RNA;
9 Contedo protico;

Quantificao celular

Produo de Biomassa
Introduo -

Quantificao celular

Mtodos Indiretos Dosagem de elementos do meio de cultura

9 Substrato;
- Cn(H2O)n - YsoO2 - YsnNH3 Yss S1 + YsxX + YscCO2 + Ysp P1 + YswH2O = 0
1

X = CHaObNcSdPe; S. cerevisiae: CH1.6O0,40N0,22P0,02

9Consumo de O2;
9 Produo de CO2;
- Cn(H2O)n - YsoO2 - YsnNH3 Yss S1 + YsxX + YscCO2 + Ysp P1 + YswH2O = 0
1

Produo de Biomassa
Introduo -

Quantificao celular

Mtodos Indiretos Dosagem de elementos do meio de cultura

9Consumo de O2;
9 Produo de CO2;

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular

Fase lag

Fase intermediria

Rearranjo do sistema enzimtico (sntese

Aumento gradativo da concentrao celular

de enzimas);

X = cte = Xo

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Fase log ou exponencial

Quantificao celular

Fase de reduo de velocidade

Clulas plenamente adaptadas;

Diminuio da concentrao de substrato limitante;

Velocidades de crescimento elevadas;

Acmulo de produto(s) no meio

Consumo de substrato;

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Fase estacionria

Quantificao celular

Fase de declnio

Trmino do substrato limitante;

Reduo do crescimento celular;

Acmulo de produtos txicos;

Consumo de material intracelular (lise).

Concentrao celular constante em seu

valor mximo.

Produo de Biomassa
Introduo Aplicaes Processo Microrganismos

Quantificao celular