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UDESC PLANALTO NORTE

CENTRO DE TECNOLOGIA MOVELEIRA


LABORATRIO DE BOTNICA

APOSTILA DE AULAS PRTICAS


ANATOMIA VEGETAL

Prof. ARLINDO COSTA

SO BENTO DO SUL
2006
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Roteiro de aulas prticas Prof Arlindo Costa UDESC - 2006
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Caros alunos

Aqui esto algumas sugestes para que vocs possam ter um melhor
aproveitamento do curso prtico de Anatomia Vegetal
Leia cuidadosamente os procedimentos antes de iniciar as atividades prticas.
Estude a teoria e observe bem as figuras nas aulas tericas antes de ter as aulas
prticas. Se possvel, sempre tenha um livro com figuras dos assuntos a serem
estudados.
Anotar todos os detalhes pertinentes atividade prtica, desde a explicao do
professor at as observaes peculiares de cada corte.
Esclarecer com o professor todos os pontos duvidosos.
Utilize o material necessrio, evitando desperdcios e danos.
Deixar a bancada do laboratrio perfeitamente limpa.
Deixar os microscpios limpos, cobertos, desligados.
Devolver o material didtico a seu devido lugar.
Colocar lminas e lamnulas sujas em local apropriado Elas devero estar limpas
para serem utilizadas nas prximas aulas.
Deixar todos os vidros com reagentes e corantes devidamente tampados
Participe ativamente de todas os procedimentos prticos, para que ao final, voc
adquira habilidade prtica em anatomia vegetal.

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1-INTRODUO AO ESTUDO PRTICO DE ANATOMIA VEGETAL

O estudo interno das estruturas dos vegetais feito observando-se os cortes


finos de tecido vegetal em microscpio ptico. Portanto, lembre-se que so necessrios
cuidados redobrados com este equipamento para sua conservao.
Quanto ao material vegetal, normalmente utiliza-se o material vegetal coletado a
fresco, com a possibilidade de utilizao de material herborizado aps sua hidratao.
Para a conservao do material vegetal so utilizadas solues fixadoras, que
promovem a morte das clulas e sua preservao estrutural em estado prximo do
material fresco. As principais substncias fixadoras so formol, o lcool, iodo, bicromato
de potssio e os cidos: actico, pcrico crmico e smico. A escolha do uso de
solues depende dos objetivos do trabalho a ser realizado. Ateno para evitar o
contato das solues fixadoras com a pele, pois a maioria das substncias citadas
txica.
Para que a luz possa atravessar o tecido a ser estudado, os cortes feitos devem
ser suficientemente finos e transparentes. Utiliza-se regularmente o micrtomo para
obteno de cortes finos, mas para realizao dos cortes neste equipamento, o material
vegetal deve estar devidamente desidratado e includo em um suporte (mais comum:
parafina). Podemos tambm realizar cortes mo livre, com auxilio de uma lmina de
barbear e um suporte (isopor, pecolo de embaba, medula do caule de sabugueiro). O
corte deve ser imediatamente transferido para um recipiente contendo gua destilada.
Os cortes realizados devem ser mais finos o possvel, possibilitando a observao das
estruturas vegetais.

Tipos de corte

Para visualizarmos as estruturas anatmicas, devermos fazer e manipular os


cortes com cuidado, observando sempre o plano de corte pode ser:
a. Transversal: Perpendicular ao maior eixo do rgo.
b. Longitudinal: Paralelo ao maior eixo do rgo. Quando o rgo cilndrico, o corte
longitudinal pode ser tangencial, tangente ao raio cilindro, ou radial, passando pelo
dimetro ou raio.

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c. Paradrmico: Paralelo superfcie do rgo. Utilizado principalmente em estudos
dos tecidos de revestimento.

Longitudinal Longitudinal
radial tangencial

Transversal

Figura 1. Planos de corte em rgo cilndrico.

Durabilidade dos cortes

Quanto durao os cortes podem ser provisrios, ou permanentes. Nos


provisrios, o liquido de incluso utilizado a gua, glicerina ou corante. Nas
montagens permanentes utiliza-se o Blsamo do Canad ou resinas sintticas. Em
nossas aulas utilizaremos lminas com cortes provisrios confeccionados pelos alunos
durante o perodo da aula prtica, portanto os procedimentos descritos so os
adequados obteno desse tipo de material.

Clareamento dos cortes

A clula vegetal contm inmeras substncias que possuem cor, dentre elas os
pigmentos. Para facilitar a observao das estruturas, vrios mtodos de colorao

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podem ser empregados, entretanto para que sejam eficientes, necessrio que os
tecidos estejam livres de outras cores.
O clareamento dos cortes feio utilizando soluo de hipoclorito de sdio
comercial ou cloral hidratado. O transporte dos cortes para a soluo de hipoclorito
deve ser feito com o auxlio de estilete e no com pincel, para no danificar suas
cerdas. Transferir os cortes em seguida para outro recipiente com gua destilada e
enxaguar abundantemente. Com o objetivo de corrigir o pH para que no haja
interferncia na eficcia do corante, passar os cortes em soluo de cido actico
diludo, enxaguando em gua em seguida.

Colorao dos cortes

O uso de corantes necessrio para evidenciar as estruturas celulares,


resultando em maior facilidade para observao. Alguns reagentes so empregados
para a definio do tipo de substncia encontrada em alguns tipos de clulas.
O corante que ser mais utilizado em nossas aulas o safrablau. Trata-se de
uma soluo composta por dois tipos de corantes: o azul de astra, que cora paredes
celulsicas em azul, e a safranina, que cora paredes lignificadas, suberificadas e
cutinizadas em vermelho. Devido disponibilidade escassa de recursos para as aulas,
utilizaremos um substituto do azul de astra, o azul de alcio.

Roteiro para preparo das lminas

1. Coloque os cortes em vidro de relgio contendo a soluo de hipoclorito de sdio


at perderem completamente sua colorao;
2. Enxge os cortes em gua durante 1 minuto e repita este procedimento 2
vezes, trocando a gua de enxge;
3. Transfira os cortes para um vidro de relgio contendo cido actico diludo;
4. Enxge novamente durante 1 minuto;
5. Transfira os corte para um vidro de relgio contendo algumas gotas de safrablau
durante 20-30 segundos;
6. Enxge abundantemente em gua;
7. Transfira os cortes com o pincel para uma lmina contendo uma gota de glicerina
ou gua;
8. Cubra com lamnula, evitando a formao de bolhas.

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Desenhos

As prticas de Anatomia Vegetal so realizadas mediante a observao de


vrias estruturas vegetais em diversos grupos, portanto necessria a documentao
das observaes atravs da confeco de desenhos. Os esquemas feitos durante a
aula refletem se o aluno compreendeu a organizao das estruturas de maneira
consistente.
Os desenhos devem ser simples e levar em considerao a forma do objeto e as
propores dos componentes dos cortes. Outro aspecto importante a incluso de
legendas, para que se possa reconhecer as estruturas desenhadas.
Dois tipos de desenho podem ser empregados nas aulas prticas:
a. Desenho detalhado: Tem o objetivo de representar a estrutura da
maneira mais prxima ao material observado. Deve ser includo o maior
nmero possvel de detalhes.
b. Desenho esquemtico: Fornece uma idia global de forma
simplificada do material em estudo. Leva em considerao a forma e a
proporo dos diferentes componentes. Para este tipo de desenho, emprega-
se usualmente a conveno de Metcalfe & Chalk para a representao de
tecidos da seguinte maneira:

Parnquima

Colnquima
Esclernquima

Felema ou sber

Xilema

Floema

Epiderme

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O curso ser ministrado com introduo gradual da observao de estruturas e
da confeco de cortes, com o objetivo que o aluno desenvolva gradualmente
habilidade na tcnica de preparo de lminas e observao de tecidos vegetais.
Sempre anote qual material vegetal e o tipo de corte que esto sendo
observados. Anote outras informaes que forem importantes no estudo que estiver
sendo realizado. Os nomes cientficos devem ser anotados de acordo com o Cdigo
Internacional de Nomenclatura Botnica.

II- Roteiros

1- Cortes mo livre

Objetivo: Treinamento na obteno de cortes mo livre, preparaes histolgicas e


esquematizao das estruturas observadas no microscpio.

Material: Folha e pecolo de diferentes espcies vegetais.

Procedimento:

I. Faa cortes transversais, longitudinais e paradrmicos, utilizando o suporte, de


acordo com o esquema fornecido anteriormente.

Questes:

1. Quantos tipos de clula voc capaz de distinguir nesta folha?

2. Qual o melhor aumento para observar:


a. a estrutura interna geral do pecolo?
b. Detalhes dos diferentes tipos de clulas?

3. Observe os diferentes tipos de clulas. Em que podemos nos basear para


diferenci-los?

4. Faa os esquemas segundo as orientaes fornecidas previamente.


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2- Substncias ergsticas

Etapa A - Amido

Material vegetal: Tubrculo de Solanum tuberosum L.

Procedimento:
I. Faa cortes finos dos tubrculos;
II. Adicione uma gota de lugol e cubra com lamnula.
III. Observe ao microscpio e desenhe.

Material:
Aumento:

Etapa B - Oxalato de clcio


Material vegetal: Folhas de Nerium oleander e de Diefembachia sp.

Procedimento:
I. Faa cortes transversais nos diferentes materiais fornecidos.

II. Coloque os cortes em uma gota de gua em diferentes lminas e cubra com
lamnula.

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III. Observe ao microscpio, identifique e desenhe as diferentes substncias ergsticas.

Material: Material:
Aumento: Aumento:

Etapa C - Carbonato de clcio


Material vegetal: Folhas de Ficus retusa.
Procedimento:
I. Fazer cortes transversais finos das folhas;
II. Coloque em uma lmina com uma gota de gua e cubra com lamnula;
III. Observe ao microscpio o contedo das clulas perifricas mais volumosas que
as demais, esquematize;
IV. Observando ao microscpio, retire a gua com auxlio de papel de filtro e pingue
uma gota de cido clordrico junto a uma das bordas da lamnula, de maneira
que o cido entre em contato com o corte.

Material:
Aumento:
Questes:

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1. O que aconteceu quando o cido entrou em contato com o corte?

3 - Meristemas

Etapa A Meristemas apicais

Material:
Lminas permanentes de pice caulinar de Plecthranthus barbatus e de raiz de
aguap.

Procedimento:

I. Observe ao microscpio a lmina de raiz de aguap;


II. Identifique a coifa e o meristema apical da raiz;
III. Localize os meristemas primrios: Protoderme, procmbio e meristema
fundamental. Esquematize.
IV. Observe ao microscpio a lmina de pice de P. barbatus;
V. Observe o meristema apical dos caule, os meristemas primrios e os primrdios
foliares. Esquematize.

Material:
Aumento:

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Material:
Aumento:

Questes:
1. Caracterize as clulas da coifa e da regio meristemtica com relao forma das
clulas, relao ncleo citoplasma, ocorrncia de diviso celular.
2. Quais os tecidos originados pela protoderme, procmbio e meristema fundamental?
3. Qual a funo da coifa?
4. Compare o pice caulinar e o radicular. Cite as diferenas bsicas quanto posio
do meristema e a produo de estruturas.

Etapa B Meristemas laterais

Material vegetal: Caule primrio e secundrio de P. barbatus.

Procedimento:
I. Faa cortes transversais finos da regio prxima ao pice e de uma regio
mais basal;
II. Execute o procedimento para descolorao e colorao com safrablau;
III. Prepare a lmina e cubra com lamnula;
IV. Observe ao microscpio, identifique os meristemas laterais e desenhe.

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Estrutura primria Estrutura secundria


Aumento: Aumento:

Questes:
1. Diferencie os meristemas apicais dos laterais.
2. O que acontecer com a organizao dos tecidos vasculares primrios em
decorrncia da atividade dos meristemas laterais?
3. A partir de suas observaes sobre o crescimento deste rgo, esquematize um
estgio mais avanado do crescimento secundrio.

4- Epiderme e suas formaes

Etapa A Tricomas

Material vegetal: rgos tricomatosos. Sugestes: folhas de Tillandsia sp (barba de


velho), caule de P. barbatus, folha de Melastomataceae.

Procedimento:
I. Faa cortes transversais finos e raspe a epiderme dos materiais fornecidos;
II. Execute o procedimento de descolorao e colorao dos cortes;
III. Prepare o material em lmina, cubra com lamnula, observe e desenhe.

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Material:
Aumento:

Questes:

1. Caracterize as clulas epidrmicas.


2. Quais as diferenas anatmicas e funcionais que existem entre tricomas tectores e
secretores?
3. Caracterize os tipos de tricomas tectores encontrados quanto forma e a nmero de
clulas.

Etapa B - Estmatos.

Material vegetal: Folhas de diferentes espcies (sugestes: uma espcie de Poaceae


goiabeira, Coffea arabica, fortuna e cravnea).

Procedimento:

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I. Faa cortes paradrmicos das faces adaxial e abaxial das espcies
selecionadas;
II. Execute o procedimento de descolorao e colorao;
III. Observe ao microscpio, identifique os tipos de estmatos e esquematize.

Material:
Aumento:

Questes:
1. Indique, para as diferentes espcies, em qual das faces foram encontrados os
estmatos.

5 - Parnquima

Material vegetal: Folhas de Kalanchoe, ou outra espcie suculenta, caule de P.


barbatus, folhas ou caules de uma espcie aqutica, tubrculo de Solanum tuberosus.

Procedimento:

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I. Faa cortes transversais finos dos tecidos a serem analisados;


II. Execute o procedimento de descolorao e de colorao;
III. Prepare os cortes sobre lmina com gua. Cubra com lamnula e observe;
IV. Alm dos cortes transversais, faa cortes longitudinais radiais finos dos caules.
Monte em lmina com gua e cubra com lamnula;
V. Observe as clulas de parnquima, a parede celular, os espaos intercelulares e
o contedo celular;
VI. Esquematize.

Material:
Aumento:

Questes:
1. Compare os diferentes tipos de parnquima observados.
2. Qual o tipo de parnquima que predomina nas folhas?
3. Caracterize o parnquima quanto sua localizao nos cortes.
4. Descreva a parede celular das clulas parenquimticas.

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6 - Colnquima

Material vegetal: Pecolos de Datura suaueolens (trombeteira), Ricinus communis L.


(mamona) e Sambucus australis Cham et Schelechtendal (sabugueiro).

Procedimento:

I. Faa cortes transversais finos dos trs tipos de tecidos fornecidos;


II. Descobrir os tecidos e corar com safrablau;
III. Prepare os cortes em lmina com gua e cubra com lamnula;
IV. Observe ao microscpio, esquematize e identifique os tipos colnquima
encontrados.

Material:
Aumento:

Material:
Aumento:

Material:
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Questes:

1. Qual o critrio utilizado para a classificao do colnquima?


2. Qual a localizao do tecido nos cortes observados?
3. Caracterize o espessamento da parede celular nos tipos de colnquima
encontrados.
4. Compare uma clula parenquimtica com uma colenquimtica com relao
formada clula e composio da parede celular.

7 - Esclernquima

Material vegetal: Fruto de Pyrus malus, semente de Phaseolus vulgaris, caule de P.


barbatus em desenvolvimento secundrio, folha de Nymphaea sp.
* A colorao ser feita com floroglucina acidificada (reagente especfico para lignina)

Procedimento

I. Raspe a polpa do fruto de Pyrus malus e coloque sobre uma lmina;


II. Faa cortes transversais da semente de leguminosa, procurando abranger a
casca da semente e coloque sobre uma lmina;
III. Faa cortes transversais e longitudinais do caule e coloque sobre uma lmina;
IV. Faa cortes transversais da folha de Nymphaea e coloque sobre uma lmina;
V. Em todos os cortes pingue uma gota de cido clordrico (Sol A) e outra de
floroglucina (Sol. B). Aguarde 1-2 minutos;
VI. Cubra com lamnula e observe ao microscpio;
VII. Esquematize os diferentes tipos de clulas esclerenquimticas.

Material:
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Material:
Aumento:

Questes:
1. Quais foram os tipos de clulas esclerenquimticas observadas?
2. Caracterize a parede celular das clulas esclerenquimticas.
3. Qual a localizao das clulas esclerenquimticas encontradas?
4. Diferencie as clulas colenquimticas das clulas esclerenquimticas.

8 - Xilema

Material vegetal:Macerado do caule de Pinus sp e de Impatiens sp.; caule de Impatiens;


Lmina semipermanente de Cupressus sp.

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Procedimento:

I. Faa cortes transversais e longitudinais do caule;


II. Execute o procedimento de descolorao e colorao com safrablau;
III. Prepare o corte em lmina e cubra com lamnula;
IV. Observe as clulas do xilema e esquematize.
V. Observe as lminas do material macerado e compare as clulas dos elementos
de conduo.

Material:
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Questes:

1. Quais foram os componentes do xilema observados?


2. Quais foram os padres de espessamento da parede celular encontrados nas
diferentes lminas?
3. Compare o xilema das gimnospermas com o de Impatiens.

8- Floema

Material vegetal: Caule de Sechium sp ou de Curcubita pepo, caule de Panicum


maximum.

Procedimento:

I. Faa cortes transversais e longitudinais dos caules;


II. Core os cortes com safrablau aps procedimento de descolorao;
III. Prepare os cortes em lminas com gua, cubra com lamnula e observe;
IV. Identifique os elementos do floema e esquematize.

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Questes:

1. Diferencie o xilema e o floema, anatomicamente.


2. Quais as disposies dos elementos do floema em relao aos elementos do xilema
nas lminas observadas?

9 - Razes

Material vegetal: Lminas semipermanentes de Phaseolus vulgaris e de raiz de


Orqudea.

Procedimento:

I. Observe ao microscpio as lminas permanentes;


II. Identifique os tecidos que ocorrem nos dois tipos de razes;
III. Esquematize.

Material:
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Questes:

Caracterize as razes observadas.


Quais as diferenas entre a epiderme das duas espcies?
Diferencie as razes de mono e dicotiledneas

9 - Caule

Material vegetal: Caule de Panicum maximum e de Dicotilednea

Procedimento:

I. Faa cortes transversais do matria fornecido;


II. Execute a descolorao e colorao dos cortes;
III. Prepare os cortes na lmina e cubra com lamnula;
IV. Observe os cortes ao microscpio, identifique os tecidos e esquematize.

Material:
Aumento:

Questo:
1. Diferencie os caules de monocotilednea e dicotilednea em estrutura primria.

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10- Folhas

Material vegetal: Lmina foliar e pecolo de Tibouchina sp, lmina de Eucalyptus s


Lmina foliar de Panicum maximum.

Procedimento:

I. Observe as lminas permanentes ao microscpio esquematize compare.


II. Faa cortes transversais do peciolo e das lminas das espcies citada monte em
lminas com gua, cubra com lamnula e observe.
III. Observe a disposio dos tecidos, dos feixes vasculares e das estruturas
presentes nos cortes.
IV. Esquematize.

Material:
Aumento:

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Questes:

1. Descreva o mesofilo das espcies observadas.


2. Diferencie as folhas de monocotiledneas das folhas de dicotiledneas.
3. Qual tecidos de sustentao ocorre na nervura central?
4. Em quais espcies ocorre anatomia foliar Kranz?

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